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免疫介导的脊髓运动神经元损伤过程中细胞周期素依赖蛋白激酶5的表达及意义 被引量:1
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作者 刘亚玲 郭艳苏 +3 位作者 许蕾 任爱兵 霍会永 李春岩 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期203-206,共4页
目的:研究免疫介导的神经元损伤过程中细胞周期素依赖蛋白激酶5(CDK5)表达的特征,探讨其损伤机制。方法:建立免疫介导的脊髓前角运动神经元损伤的模型,利用免疫组化方法观察脊髓前角运动神经元CDK5及p35/ p25的表达特征。结果:对照组豚... 目的:研究免疫介导的神经元损伤过程中细胞周期素依赖蛋白激酶5(CDK5)表达的特征,探讨其损伤机制。方法:建立免疫介导的脊髓前角运动神经元损伤的模型,利用免疫组化方法观察脊髓前角运动神经元CDK5及p35/ p25的表达特征。结果:对照组豚鼠脊髓运动神经元CDK5及p35/p25主要在细胞核及细胞膜下表达,胞质着色淡;注射牛脊髓前角匀浆而无肢体瘫痪的豚鼠,脊髓运动神经元CDK5及p35/p25表达在数量上增加,强度上增强;有明显肢体瘫痪的豚鼠CDK5及p35/p25免疫反应阳性神经元数量明显减少,部分胞质内无着色。结论:CDK5及p35/ p25在神经元胞质内的易位表达,在免疫介导的神经元损伤过程中具有重要的作用。 展开更多
关键词 实验性自身免疫性灰质病 细胞周期素依赖蛋白激酶5 p35/p25
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抑制细胞周期蛋白依赖性激酶8表达对小鼠胰岛β细胞增殖及胰岛素分泌功能的影响观察 被引量:1
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作者 张艳 王晨菲 +1 位作者 王思瑶 罗荔 《山东医药》 CAS 2020年第18期35-39,共5页
目的观察抑制细胞周期蛋白依赖性激酶8(CDK8)表达对MIN6胰岛β细胞胰岛素分泌功能及细胞增殖的影响,并探讨其可能作用机制。方法将培养好的MIN6细胞分为3组,观察组转染siRNA-CDK8慢病毒液(可抑制细胞CDK8表达),空白组不给予任何干预,对... 目的观察抑制细胞周期蛋白依赖性激酶8(CDK8)表达对MIN6胰岛β细胞胰岛素分泌功能及细胞增殖的影响,并探讨其可能作用机制。方法将培养好的MIN6细胞分为3组,观察组转染siRNA-CDK8慢病毒液(可抑制细胞CDK8表达),空白组不给予任何干预,对照组转染siRNA-NC慢病毒液(阴性对照),培养48 h。CCK-8检测各组细胞增殖活性(OD值),流式细胞术观察各组细胞周期分布,ELISA法检测各组细胞上清液胰岛素,荧光定量PCR法检测各组细胞CDK8、胰岛素合成相关转录因子(PDX1、INS2和MAFA)、胰岛素转运相关因子GLUT2 mRNA,Western blotting检测各组细胞CDK8、细胞周期蛋白(Cyclin)、过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPARγ)、增殖细胞核抗原(PCNA)。结果与对照组及空白组比较,观察组细胞OD值降低,G0/G1、S期细胞比例增加,细胞上清液胰岛素水平降低,CDK8、PDX1、INS、MAFA、GLUT2 mRNA相对表达量降低(P均<0.05)。与对照组及空白组比较,观察组CDK8、Cyclin D1、PCNA、PPARγ蛋白相对表达量降低(P均<0.01)。结论抑制CDK8表达的MIN6细胞,细胞增殖活性显著下降,胰岛素分泌减少,其机制可能与抑制Cyclin D1、PCNA及PPARγ蛋白表达相关。 展开更多
关键词 细胞周期依赖蛋白激酶8 胰腺Β细胞 胰岛 糖尿病 胰岛合成相关转录因子 胰岛转运相关因子 细胞周期蛋白 过氧化物酶体增殖剂激活受体γ 增殖细胞核抗原
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TFP5对高糖诱发的细胞周期素依赖性激酶过度激活及胰岛β细胞凋亡的影响
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作者 张霞 付海霞 郑亚莉 《中华老年多器官疾病杂志》 2014年第2期127-130,共4页
目的:探讨TFP5对高糖诱发的细胞周期素依赖性激酶5(Cdk5)活性的抑制作用及其对胰岛β细胞的保护作用。方法体外培养小鼠胰岛细胞株Min6。将TFP5转染Min6细胞,分别用免疫印迹和免疫荧光观察其表达。实验分3组:低糖(5mmol/L)组,... 目的:探讨TFP5对高糖诱发的细胞周期素依赖性激酶5(Cdk5)活性的抑制作用及其对胰岛β细胞的保护作用。方法体外培养小鼠胰岛细胞株Min6。将TFP5转染Min6细胞,分别用免疫印迹和免疫荧光观察其表达。实验分3组:低糖(5mmol/L)组,高糖(25mmol/L)+空病毒载体(EV)组和高糖(25mmol/L)+TFP5组,分别用同位素标记法测定3组细胞内Cdk5激酶活性;用酶联免疫吸附法测定3组细胞胰岛素分泌水平;用免疫印迹法测定胰岛β细胞凋亡。结果(1)表明TFP5来源和它的分子序列;(2)TFP5在Min6细胞内表达良好;(3)在高糖+TFP5组Cdk5的活性明显低于高糖+EV组( P<0.01),而且在高糖+TFP5组胰岛素分泌明显高于高糖+EV组(P<0.01);(4)在高糖组Min6细胞的Bax表达增加,Bcl-2表达减少,Bax/Bcl-2比值升高,细胞凋亡增加(P<0.01,vs 低糖组),而加入TFP5后,Bax表达减少,Bcl-2表达增加,Bax/Bcl-2的比值减低(P<0.01,vs 高糖组),细胞的凋亡减少。结论 TFP5可抑制高糖诱发的Cdk5激酶的过度活性、减少高糖刺激下胰岛细胞凋亡,从而恢复胰岛素分泌,具有潜在的以Cdk5为靶点治疗2型糖尿病的前景。 展开更多
关键词 TFP5 细胞周期依赖激酶5 葡萄糖 胰岛 细胞凋亡
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CRNDE介导miR-33a-5p/CDK6轴影响细胞周期调控人体肝癌细胞增殖的实验研究
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作者 梅小平 姚明 +3 位作者 周清河 许浏 周鸿鲲 李彦 《浙江临床医学》 2023年第8期1117-1120,共4页
目的探讨CRNDE介导miR-33a-5p/CDK6轴影响细胞周期,调控人体肝癌细胞增殖的作用机制。方法运用细胞转染技术构建稳定干扰CRNDE/低表达CRNDE的人体肝癌细胞模型shRNA-CRNDE-HuH-7;RT-qPCR及Western blotting技术检测HL-7702人体肝细胞株... 目的探讨CRNDE介导miR-33a-5p/CDK6轴影响细胞周期,调控人体肝癌细胞增殖的作用机制。方法运用细胞转染技术构建稳定干扰CRNDE/低表达CRNDE的人体肝癌细胞模型shRNA-CRNDE-HuH-7;RT-qPCR及Western blotting技术检测HL-7702人体肝细胞株、HuH-7人体肝癌细胞株及shRNA-CRNDE-HuH-7细胞株中CRNDE、miR-33a-5p及CDK6的表达情况,评估其相关性及miR-33a-5p/CDK6轴随CRNDE表达量变化的相关程度;对上述三组细胞株进行细胞增殖实验(CCK8)、细胞凋亡检测、细胞侵袭测试及细胞周期检测,评估在不同CRNDE表达情况下三组细胞株的增殖、凋亡、侵袭能力及细胞周期的变化。结果RT-qPCR及Western blotting技术检测shRNA-CRNDE-HuH-7细胞株中CRNDE表达低于HuH-7人体肝癌细胞株(P<0.05);当控制位点为CDK6时,三组细胞株中CRNDE表达量与其呈正相关(r=0.856,P<0.05);当控制位点为miR-33a-5p时,三组细胞株中miR-33a-5p表达量与CDK6及CRNDE均呈负相关(r=-0.883,P<0.05;r=-0.937,P<0.05);在三组细胞株中,随CRNDE表达下调,细胞增殖、侵袭能力及细胞周期均受到抑制(P<0.05),shRNA-CRNDE-HuH-7细胞株中肿瘤细胞凋亡高于HuH-7细胞株(P<0.05)。结论CRNDE与miR-33a-5p存在靶向关系,CRNDE以靶向调节作用抑制miR-33a-5p的表达,进而介导CDK6的升高,通过miR-33a-5p/CDK6轴促进肝细胞肝癌的增殖,其可能成为肝细胞肝癌的新肿瘤标志物和分子生物治疗靶点。 展开更多
关键词 CRNDE miR-33a-5p 细胞肝癌 细胞周期蛋白依赖蛋白激酶6
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转染ELF5基因的人卵巢癌干细胞增殖、周期、凋亡及成瘤能力变化 被引量:2
5
作者 谢肖磊 闫洪超 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第3期32-35,共4页
目的观察转染ELF5基因的人卵巢癌干细胞增殖、周期、凋亡及成瘤能力变化。方法将人卵巢癌干细胞(具有CD133+、CD117+特征的人卵巢癌细胞株HO8910)分为重组质粒组、空质粒组和空白对照组,重组质粒组转染真核细胞表达载体pc DNA3.1-ELF5+E... 目的观察转染ELF5基因的人卵巢癌干细胞增殖、周期、凋亡及成瘤能力变化。方法将人卵巢癌干细胞(具有CD133+、CD117+特征的人卵巢癌细胞株HO8910)分为重组质粒组、空质粒组和空白对照组,重组质粒组转染真核细胞表达载体pc DNA3.1-ELF5+EGFP,空质粒组转染空载质粒pc DNA3.1-EGFP,空白对照组不做转染;分别于培养24、48、72、96 h后采用CCK-8法观察细胞增殖能力,于培养48 h后采用流式细胞仪观察细胞周期分布情况、测算细胞凋亡率,于培养48 h后采用Western blotting法检测各组细胞中的p21、Caspase-3蛋白。将重组质粒组、空质粒组和空白对照组细胞分别接种于雌性裸鼠右腋窝皮下制作卵巢癌移植瘤,每组接种5只;待移植瘤形成后取肿瘤组织,测量肿瘤最大直径及质量,测算细胞凋亡率,检测细胞中的p21、Caspase-3蛋白。结果重组质粒组培养24、48、72、96 h后细胞增殖能力较空质粒组和空白对照组明显下降(P均<0.05)。重组质粒组中阻滞于G0/G1期的细胞比例、细胞凋亡率及细胞中p21、Caspase-3蛋白相对表达量均高于空质粒组和空白对照组(P均<0.05)。重组质粒组移植瘤最大直径和肿瘤质量小于空质粒组、空白对照组(P均<0.05)。重组质粒组移植瘤组织中细胞凋亡率及p21、Caspase-3蛋白相对表达量高于空质粒组和空白对照组(P均<0.05)。结论转染ELF5基因的人卵巢癌干细胞增殖受抑制、细胞周期阻滞、细胞凋亡增多、成瘤能力减弱,机制可能与p21、Caspase-3蛋白表达上调有关。 展开更多
关键词 卵巢癌 肿瘤干细胞 细胞周期 细胞凋亡 ELF5基因 细胞周期依赖蛋白激酶抑制因子1A 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3
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多囊卵巢综合征不孕患者血清CMKLR1 P15INK4b与炎症氧化应激胰岛素抵抗的关系
6
作者 王晗 孙晓娜 王丽元 《安徽医学》 2024年第9期1124-1128,共5页
目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者血清趋化因子样受体1(CMKLR1)、细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子(P15INK4b)水平与炎症、氧化应激、胰岛素抵抗的相关性。方法选取2022年1~12月在平煤神马医疗集团总医院门诊就诊的92例PCOS不孕... 目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者血清趋化因子样受体1(CMKLR1)、细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子(P15INK4b)水平与炎症、氧化应激、胰岛素抵抗的相关性。方法选取2022年1~12月在平煤神马医疗集团总医院门诊就诊的92例PCOS不孕患者为研究组,选取同期92例在本院进行健康体检者为对照组。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清CMKLR1、P15INK4b水平;测定并比较两组对象糖代谢指标[空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)和服糖2 h血糖(2 h PG)]、炎症指标[单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-18(IL-18)]、氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)]的差异;采用Pearson法分析PCOS不孕患者血清CMKLR1、P15INK4b表达水平与炎症指标、氧化应激指标以及胰岛素抵抗的相关性。结果研究组FPG、WHR、2 h PG、BMI、FINS、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平均高于对照组(P<0.05);研究组CMKLR1、P15INK4b均高于对照组(P<0.05);研究组血清MCP-1、IL-18、IL-6、TNF-α、MDA水平均高于对照组,血清GSH-Px、SOD水平均低于对照组(P<0.05);PCOS不孕患者血清CMKLR1、P15INK4b与BMI、WHR、FPG、2 h PG、FINS、HOMA-IR、MCP-1、IL-18、IL-6、TNF-α、MDA呈正相关(P<0.05),血清CMKLR1、P15INK4b与SOD、GSH-Px呈负相关性(P<0.05)。结论PCOS不孕患者血清CMKLR1、P15INK4b表达水平显著升高,且与炎症、氧化应激反应、胰岛素抵抗、糖代谢异常有着紧密联系,可能参与PCOS不孕的发生、发展进程。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 趋化因子样受体1 细胞周期依赖蛋白激酶抑制因子 炎症 氧化应激 胰岛抵抗
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条件性恐惧大鼠边缘下区Cdk5激酶活性、caspase-3表达以及突触结构的变化 被引量:3
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作者 李培培 张丽丽 +1 位作者 韦美 李敏 《心理学报》 CSSCI CSCD 北大核心 2011年第5期544-552,共9页
探讨条件性恐惧大鼠内侧前额叶皮层边缘下区(IL区)Cdk5激酶活性、凋亡因子caspase-3表达和突触结构的变化。采用声音结合足底电击的方法对大鼠建立条件性恐惧模型后,在不同时间点测定IL区Cdk5激活剂P35和P25的蛋白表达水平、Cdk5激酶活... 探讨条件性恐惧大鼠内侧前额叶皮层边缘下区(IL区)Cdk5激酶活性、凋亡因子caspase-3表达和突触结构的变化。采用声音结合足底电击的方法对大鼠建立条件性恐惧模型后,在不同时间点测定IL区Cdk5激活剂P35和P25的蛋白表达水平、Cdk5激酶活性、caspase-3的阳性细胞数,并观察突触结构的变化。结果发现,大鼠在条件性恐惧建立后第2、4和8天,IL区的P25蛋白表达和Cdk5激酶活性均明显高于正常;caspase-3的免疫反应阳性细胞数在3个时间点也均多于正常;透射电镜下观察到:在恐惧建立后的第8天,IL区突触的突触后致密物质(PSD)厚度变薄,在恐惧建立后第22天突触数密度减少、PSD厚度仍小于正常。推测条件性恐惧的建立,使大鼠IL区的P25水平和Cdk5活性高于正常,引起IL区的突触结构发生改变,导致大鼠的恐惧反应持续存在。 展开更多
关键词 条件性恐惧 边缘下区 细胞周期依赖蛋白激酶5 突触结构
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细胞分裂素与细胞的分裂增殖 被引量:3
8
作者 吴晓霞 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第36期11755-11756,共2页
细胞分裂素对细胞的分裂增殖起着重要的调节作用,在细胞周期中的G1/S期,细胞分裂素促进D型细胞周期蛋白CycD的表达;在G2/M期,其作用与CDK的磷酸化有关。植物通过体内细胞分裂素的代谢影响细胞分裂素水平,调节植物生长发育调控基因,影响... 细胞分裂素对细胞的分裂增殖起着重要的调节作用,在细胞周期中的G1/S期,细胞分裂素促进D型细胞周期蛋白CycD的表达;在G2/M期,其作用与CDK的磷酸化有关。植物通过体内细胞分裂素的代谢影响细胞分裂素水平,调节植物生长发育调控基因,影响植物的根尖、茎尖等器官的生长发育。 展开更多
关键词 细胞分裂 细胞周期蛋白 细胞周期蛋白依赖蛋白激酶 细胞分裂氧化酶
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CDK5、p35/p25在血管性认知损害患者血液中的表达 被引量:1
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作者 翁改志 刘强 +2 位作者 赵昭 吴道澄 倪宁 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期702-705,共4页
目的探讨细胞周期素依赖性蛋白激酶5(CDK5)、p35及p25在血管性认知损害(VCI)患者血液中的表达及可能作用。方法收集VCI病例91例,其中非痴呆性血管性认知损害(VCIND)49例,血管性痴呆(VAD)42例;同时收集脑卒中认知功能正常(NC)及健康人(N)... 目的探讨细胞周期素依赖性蛋白激酶5(CDK5)、p35及p25在血管性认知损害(VCI)患者血液中的表达及可能作用。方法收集VCI病例91例,其中非痴呆性血管性认知损害(VCIND)49例,血管性痴呆(VAD)42例;同时收集脑卒中认知功能正常(NC)及健康人(N)各30例;应用RT-qPCR检测血液中CDK5mRNA的相对表达,Western blot法检测各组血液中CDK5、p35及p25的蛋白表达。结果各组CDK5mRNA相对表达及CDK5、p35、p25蛋白表达从高到低分别为VAD组>VCIND组>NC组>N组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 CDK5、p35及p25可能参与了VCI的发生,血管性认知功能损害程度与其表达水平呈正相关关系。 展开更多
关键词 血管性认知损害 细胞周期依赖蛋白激酶5(CDK5) p25 P35
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成釉细胞瘤组织CyclinD1、CDK4的表达及意义 被引量:1
10
作者 张秋红 赵培荣 刘进忠 《山东医药》 CAS 北大核心 2005年第24期60-61,共2页
关键词 成釉细胞 CYCLIND1 CDK4 瘤组织 依赖蛋白激酶 免疫组化SP法 细胞周期蛋白 口腔黏膜组织 细胞周期
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Cdk5抑制剂Roscovitine对神经病理性疼痛大鼠痛行为学的影响及机制
11
作者 钟妤 陈佳林 +1 位作者 谢玉波 陈静 《山东医药》 CAS 2018年第48期41-44,共4页
目的观察Cdk5抑制剂Roscovitine对神经病理性疼痛大鼠痛行为学的影响,并探讨其机制。方法选择SD大鼠64只,随机分为正常对照组(N组)8只、假手术组(S组)8只、坐骨神经结扎(CCI)组(I组)8只、CCI+溶剂组(D组)8只,剩余32只作为CCI+给药组(R组... 目的观察Cdk5抑制剂Roscovitine对神经病理性疼痛大鼠痛行为学的影响,并探讨其机制。方法选择SD大鼠64只,随机分为正常对照组(N组)8只、假手术组(S组)8只、坐骨神经结扎(CCI)组(I组)8只、CCI+溶剂组(D组)8只,剩余32只作为CCI+给药组(R组)。I组、D组和R组行鞘内置管7天后,采用CCI法建立神经病理性疼痛模型,N组不做任何处理,S组暴露坐骨神经但不予结扎。术后第7天,D组鞘内注射5%二甲基亚砜20μL,R组鞘内注射Cdk5抑制剂Roscovitine 100μg,N组、S组和I组不注射药物。分别于术前(T_0)、术后3天(T_1)、术后5天(T_2)、术后7天(T_3)以及给药后0.5(T_4)、2(T_5)、6(T_6)、12 h(T_7),检测各组机械性缩足阈值(PWMT)、热缩足潜伏期(PWTL)。腹腔注射麻醉后,取各组脊髓腰膨大处(L_4~L_6)组织,采用Western blotting法检测脊髓星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达。结果与N组、S组比较,I组、D组和R组术后各时间点PWMT、PWTL均明显降低(P均<0.05);与I组相比,R组给药后T_5~T_7时PWMT、PWTL均明显升高(P均<0.05)。与S组比较,I组、D组和R组T_4~T_7时脊髓星形胶质细胞GFAP表达均明显上调(P均<0.05);与D组比较,R组给药后T_5~T_7时脊髓星形胶质细胞GFAP表达均明显下调(P均<0.05)。结论Cdk5抑制剂Roscovitine可减轻大鼠神经病理性疼痛,其机制可能与抑制脊髓星形胶质细胞GFAP表达有关。 展开更多
关键词 神经病理性疼痛 星形胶质细胞 细胞周期依赖蛋白激酶5 大鼠
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免疫介导脊髓前、后角损伤的对比
12
作者 刘亚玲 郭艳苏 +3 位作者 白杰 陈霞 谷伟 李春岩 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期664-667,共4页
目的:探讨实验性自身免疫性灰质病作为肌萎缩侧索硬化(ALS)研究模型的可行性。方法:通过免疫组织化学方法,观察实验性自身免疫性脊髓灰质病过程中脊髓前、后角神经元损伤的特征。结果:神经丝轻链(NF-L)、细胞周期素依赖蛋白激酶... 目的:探讨实验性自身免疫性灰质病作为肌萎缩侧索硬化(ALS)研究模型的可行性。方法:通过免疫组织化学方法,观察实验性自身免疫性脊髓灰质病过程中脊髓前、后角神经元损伤的特征。结果:神经丝轻链(NF-L)、细胞周期素依赖蛋白激酶5(CDKS)及其激活因子P35/P25抗体阳性的脊髓前角运动神经元数量与对照组相比均明显减少,而脊髓后角阳性的神经元数量与对照组相比差异无统计学意义。结论:在实验性自身免疫性灰质病发病过程中,存在脊髓前角运动神经元相对易感性,实验性自身免疫性灰质病模型在某种程度上可以作为ALS研究模型。 展开更多
关键词 实验性自身免疫性灰质病 肌萎缩侧索硬化 神经丝轻链 细胞周期素依赖蛋白激酶5 激活因子P35/P25 免疫组织化学
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