细胞分裂周期蛋白20通过激活PI3K/Akt/mTOR通路驱动非小细胞肺癌吉非替尼耐药

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作者 李之坚 张冰 刘宁 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第8期1159-1168,共10页

吉非替尼是第一代表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI),通过靶向突变型EGFR,在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)治疗中表现出显著疗效。然而,耐... 吉非替尼是第一代表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI),通过靶向突变型EGFR,在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)治疗中表现出显著疗效。然而,耐药性的出现限制了其长期临床获益。细胞分裂周期蛋白20(cell division cycle 20,CDC20)是调控细胞周期的关键蛋白质,在多种肿瘤的发生发展中发挥重要作用,但其在NSCLC耐药性获得中的调控机制尚未见报道。本研究旨在揭示CDC20驱动非小细胞肺癌吉非替尼耐药的分子机制。通过吉非替尼诱导构建耐药细胞株HCC827/GR(IC_(50)0.05±0.01μmol/L vs 36.24±6.21μmol/L)和PC9/GR(IC_(50)0.02±0.01μmol/L vs 25.36±5.57μmol/L)。通过生物信息学技术分析证实,CDC 20的转录水平在肺癌样本中呈现表达水平显著上调现象,其异常表达特征与患者总生存期缩短存在明显关联。Western印迹检测证实,耐药细胞HCC827/GR和PC9/GR中CDC20蛋白水平明显高于亲本细胞(HCC827和PC9)。为深入探究CDC20在非小细胞肺癌吉非替尼耐药中的作用机制,我们首先通过CRISPR/Cas9技术敲除CDC 20,发现该干预可显著恢复耐药细胞对吉非替尼的敏感性(IC_(50)37.08±6.15μmol/L vs 10.49±1.83μmol/L,7.23±1.55μmol/L),并同时促进细胞凋亡和诱导G 2/M期阻滞。与之相反,过表达CDC20不仅降低敏感细胞的药物敏感性,还能显著抑制吉非替尼诱导的细胞周期阻滞和凋亡。进一步机制研究表明,CDC 20敲除可抑制PI3K/Akt/mTOR通路活化,同时显著上调促凋亡蛋白质截断胱天蛋白酶3和Bax的表达,下调抗凋亡蛋白质Bcl-2的表达。这些结果证实,CDC20通过PI3K/Akt/mTOR信号通路调控非小细胞肺癌吉非替尼耐药,为克服靶向治疗耐药提供了新靶点。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 吉非替尼耐药 细胞分裂周期蛋白20 PI3K/Akt/mTOR信号通路

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沉默CDC20基因通过抑制Wnt/β-连环蛋白信号通路对子宫内膜癌细胞增殖和细胞周期的影响 被引量：2

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作者 刘春静 杨钰杰 +2 位作者 赵薇 刘丽晶 王娜 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1305-1312,共8页

目的:探讨细胞分裂周期蛋白20 (CDC20)对子宫内膜癌(EC)细胞增殖和细胞周期的影响,并阐明其作用机制。方法:实时荧光定量PCR (RT-qPCR)和Western blotting法检测人子宫内膜基质T-HESC细胞和人EC细胞(KLE、RL95-2、ZJB-ENC1和ECC-1细胞)... 目的:探讨细胞分裂周期蛋白20 (CDC20)对子宫内膜癌(EC)细胞增殖和细胞周期的影响,并阐明其作用机制。方法:实时荧光定量PCR (RT-qPCR)和Western blotting法检测人子宫内膜基质T-HESC细胞和人EC细胞(KLE、RL95-2、ZJB-ENC1和ECC-1细胞)中CDC20 mRNA及蛋白表达水平,选择RL95-2细胞用于后续实验。将CDC20 shRNA干扰慢病毒转染至RL95-2细胞中,分为对照组、sh-NC组(感染阴性对照慢病毒)、sh-CDC20组(感染CDC20 shRNA干扰慢病毒)、sh-NC+SM04690组(感染阴性对照慢病毒后,加入64 nmol·L^(-1) Wnt/β-连环蛋白信号通路抑制剂SM04690干预48h)和sh-CDC20+SM04690组(感染CDC20shRNA干扰慢病毒后,加入64 nmol·L^(-1) SM04690干预48 h)。RT-qPCR法和Western blotting法检测不同细胞中CDC20 mRNA和蛋白表达水平,CCK-8法检测各组细胞增殖活性,BrdU法检测各组细胞中BrdU阳性细胞百分率,流式细胞术检测各组G2/M期细胞百分率,Western blotting法检测各组细胞中β-连环蛋白、c-Myc和细胞周期素D1蛋白表达水平。结果:与T-HESC细胞比较,KLE、RL95-2、ZJB-ENC1和ECC-1细胞中CDC20 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),其中RL95-2细胞中CDC20 mRNA和蛋白表达水平最高。与sh-NC组比较,sh-CDC20组和sh-NC+SM04690组细胞增殖活性和BrdU阳性细胞百分率明显降低(P<0.05),G2/M期细胞百分率明显升高(P<0.05),细胞中β-连环蛋白、c-Myc和细胞周期素D1蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与sh-CDC20组比较,sh-CDC20+SM04690组细胞增殖活性和BrdU阳性细胞百分率明显降低(P<0.05),G2/M期细胞百分率明显升高(P<0.05),细胞中β-连环蛋白、c-Myc和细胞周期素D1蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:EC细胞中CDC20呈高表达,沉默CDC20可能通过调控Wnt/β-连环蛋白信号转导诱导RL95-2细胞G2/M期阻滞,抑制细胞增殖。 展开更多

关键词 子宫内膜癌 细胞分裂周期蛋白20 细胞周期 细胞增殖 Wnt/β-连环蛋白信号通路

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阿霉素诱导肝细胞黏附分子基因下调肾癌细胞细胞分裂周期基因2的表达

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作者 徐新 罗春丽 +4 位作者 吴小候 贾蓓 刘琪 陶佳 王秋菊 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期749-752,共4页

目的:研究阿霉素联合hepaCAM基因对肾癌细胞786-0生物学的影响。方法:阿霉素处理后,用腺病毒向肾癌786-0导入肝细胞黏附分子(Hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM),以噻唑蓝(Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)测抑制率,流式细胞... 目的:研究阿霉素联合hepaCAM基因对肾癌细胞786-0生物学的影响。方法:阿霉素处理后,用腺病毒向肾癌786-0导入肝细胞黏附分子(Hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM),以噻唑蓝(Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)测抑制率,流式细胞术(Flow cytometer,FCM)测细胞周期,实时荧光定量聚合酶链反应(Real time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)、Western blot检测hepaCAM和细胞分裂周期基因2(Cell division cycle 2,cdc2)的mRNA及蛋白水平。结果:MTT显示:与对照组相比,实验组抑制率显著升高(P<0.01)。FCM证实:实验组出现明显G2/M期阻滞。RT-qPCR及Western blot检测到实验组cdc2 mRNA及蛋白水平显著下调(P<0.01)。结论:阿霉素处理后,导入hepaCAM基因,可引起细胞抑制率显著升高及G2/M期阻滞,这可能与阿霉素诱导hepaCAM下调cdc2的表达有关。 展开更多

关键词 肾癌 肝细胞黏附分子 阿霉素 细胞周期 细胞分裂周期基因2

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半滑舌鳎细胞分裂周期蛋白42基因克隆与结构预测

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作者 刘厚孚 谭静 +3 位作者 胡秀彩 管振国 吕爱军 孙敬锋 《天津农学院学报》 CAS 2022年第3期36-42,共7页

细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)是Rho超家族酶中的一个亚类,具有调节细胞骨架和肌动蛋白作用,并参与免疫与炎症反应。设计半滑舌鳎Cdc42基因(即CsCdc42)特异性引物,采用RT-PCR方法、生物信息学方法等进行CsCdc42基因克隆及结构预测。结果获... 细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)是Rho超家族酶中的一个亚类,具有调节细胞骨架和肌动蛋白作用,并参与免疫与炎症反应。设计半滑舌鳎Cdc42基因(即CsCdc42)特异性引物,采用RT-PCR方法、生物信息学方法等进行CsCdc42基因克隆及结构预测。结果获得CsCdc42基因片段长度为847 bp,推测编码191个氨基酸,含有7个抗原表位(27-28、61-63、90-92、120-122、131-133、164-166和181-183 aa)、1个RHO结构域(6-179 aa),其中含有1个ATP/GTP结合位点和1个酰基化位点;蛋白结构预测主要为α螺旋(30.9%)、β折叠(24.6%)和无规则卷曲(44.5%)。序列比对结果表明,CsCdc42与斑马鱼、青鳉、虹鳟、大菱鲆和虾等氨基酸序列同源性分别为99.43%、97.91%、95.81%、94.76%和91.10%;构建系统发育树显示CsCdc42与斑马鱼、人和海水鱼类Cdc42亲缘关系最近,自然聚为一支。以上结果为研究半滑舌鳎细胞分裂周期蛋白相关基因功能提供科学参考。 展开更多

关键词 半滑舌鳎 细胞分裂周期蛋白42 基因克隆 结构预测

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家蚕微孢子虫细胞分裂周期蛋白N端编码序列在酿酒酵母中的启动子活性分析 被引量：1

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作者 邓远洪 李能章 +3 位作者 林立鹏 潘国庆 李田 周泽扬 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期688-694,共7页

微孢子虫(microsporidia)长期专性细胞内寄生,其基因组表现出显著的减缩性。利用家蚕微孢子虫(Nosema bomby-cis)基因组数据库探究在其显著减缩的基因组中是否有编码序列发挥调控序列的作用,结果发现在DNA转录调控中发挥重要作用的细胞... 微孢子虫(microsporidia)长期专性细胞内寄生,其基因组表现出显著的减缩性。利用家蚕微孢子虫(Nosema bomby-cis)基因组数据库探究在其显著减缩的基因组中是否有编码序列发挥调控序列的作用,结果发现在DNA转录调控中发挥重要作用的细胞分裂周期蛋白(cell division cycle protein)的N端编码序列具有典型的真核生物启动子序列特征。设计引物扩增该基因N端590 bp包含启动子基序的序列(C启动子序列),将该启动子序列克隆到载体启动子(MET25-P)被终止序列(CYC1-T)替代的pUG35载体上,构建由该启动子序列启动下游绿色荧光蛋白(GFP)表达的克隆载体ΔpUG35-CYC1-T-C-yEGFP-CYC1-T,并将其电击转化酿酒酵母CEN.PK2菌株,经筛选及诱导培养后,在荧光显微镜下观察到酵母中有GFP表达,证实了家蚕微孢子虫细胞分裂周期蛋白的N端编码序列包含具有启动子活性的序列,表明家蚕微孢子虫基因组减缩后,部分编码序列可能扮演了调控序列的角色。研究结果也为微孢子虫启动子的活性验证提供了一个简便的途径。 展开更多

关键词 家蚕微孢子虫 细胞分裂周期蛋白基因 启动子 绿色荧光蛋白

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植物细胞周期相关基因的研究进展 被引量：3

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作者 潘刚 周永明 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期191-196,共6页

细胞分裂是植物生长和发育的基础 ,植物器官的形态和位置均取决于细胞分裂和扩展。本文就目前已克隆的细胞蛋白周期基因、依赖周期蛋白激酶基因及其它相关的细胞周期基因 ;周期蛋白基因及依赖周期蛋白激酶基因的结构特征以及其功能作一... 细胞分裂是植物生长和发育的基础 ,植物器官的形态和位置均取决于细胞分裂和扩展。本文就目前已克隆的细胞蛋白周期基因、依赖周期蛋白激酶基因及其它相关的细胞周期基因 ;周期蛋白基因及依赖周期蛋白激酶基因的结构特征以及其功能作一综述。 展开更多

关键词 植物细胞 细胞周期 基因 细胞分裂 结构 功能

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CDC20基因的表达对前列腺癌患者临床病理特征及预后的影响 被引量：2

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作者 石峰 孙文功 +2 位作者 刘增振 王晓辉 孟庆泽 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1092-1097,共6页

目的分析细胞分裂周期基因20(CDC20)在前列腺癌(PC)组织中的表达及其对前列腺癌患者临床病理特征和预后的影响。方法收集2016年1月-2018年12月在联勤保障部队第988医院进行手术治疗的134例PC患者的PC组织,以及134例良性前列腺增生患者... 目的分析细胞分裂周期基因20(CDC20)在前列腺癌(PC)组织中的表达及其对前列腺癌患者临床病理特征和预后的影响。方法收集2016年1月-2018年12月在联勤保障部队第988医院进行手术治疗的134例PC患者的PC组织,以及134例良性前列腺增生患者的良性前列腺增生组织。采用qRT-PCR、Western blotting和免疫组化检测CDC20在PC组织及良性前列腺增生组织中的表达情况。根据免疫组化评分将PC患者分为CDC20高表达组(n=69)与CDC20低表达组(n=65),比较两组患者的临床病理特征、3年总生存率和疾病无进展生存率。采用Cox回归分析影响患者术后生存的危险因素。结果qRT-PCR和Western blotting检测结果显示,PC组织中CDC20 mRNA和蛋白相对表达水平高于良性前列腺增生组织,差异有统计学意义(mRNA:1.96±0.34 vs.0.37±0.12,P=0.003;蛋白:1.02±0.08 vs.0.15±0.06,P<0.001)。免疫组化检测结果显示,PC组织中CDC20阳性表达率和高表达率高于良性前列腺增生组织[CDC20阳性表达率:80.6%(108/134)vs.8.9%(12/134),P<0.001;CDC20高表达率:51.5%(69/134)vs.0.0%(0/134),P<0.001]。CDC20高表达组术后3年总生存率、疾病无进展生存率低于CDC20低表达组[3年总生存率:69.6%(48/69)vs.87.7%(57/65),P=0.012;3年疾病无进展生存率:62.3%(43/69)vs.80.0%(52/65),P=0.020],差异有统计学意义。Gleason评分>7分、cT分期>cT_(2c)期、T分期>T2期和CDC20免疫组化评分≥8分是影响PC患者术后生存的独立危险因素(P<0.05)。结论CDC20在PC组织中表达增加,可能参与了肿瘤的进展。CDC20免疫组化评分≥8分提示患者预后不良,有望成为判断PC预后的肿瘤标志物。 展开更多

关键词 前列腺癌 细胞分裂周期基因20 预后 临床病理特征

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CDC20通过泛素蛋白酶体途径降解p65调控人脂肪间充质干细胞成骨向分化 被引量：1

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作者 杜杨格 程雅雯 +2 位作者 郭倩 张萍 周永胜 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期565-571,共7页

目的:探究细胞分裂周期蛋白20(cell division cycle 20,CDC20)对人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived stem cells,hASCs)成骨分化的调控作用及其机制。方法:将hASCs分别进行成骨向诱导0、7、14 d后,通过实时荧光定量PCR和Western ... 目的:探究细胞分裂周期蛋白20(cell division cycle 20,CDC20)对人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived stem cells,hASCs)成骨分化的调控作用及其机制。方法:将hASCs分别进行成骨向诱导0、7、14 d后,通过实时荧光定量PCR和Western blot检测CDC20表达量的变化。对稳定敲低CDC20的hASCs进行成骨向诱导后,分别通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色定量实验,Western blot检测成骨相关标志物的表达。将稳定敲低CDC20的hASCs与β-磷酸三钙(β-tricalcium phosphate,β-TCP)材料混合植入裸鼠皮下,8周后取材,HE、MASSON染色检测骨胶原的形成。对过表达CDC20的hASCs进行成骨向诱导后,通过ALP染色定量实验检测hASCs成骨向分化。利用免疫共沉淀和Western blot探索CDC20和p65的关系。构建CDC20和p65双敲细胞系,检测p65在CDC20调控骨再生中的作用。结果:在hASCs成骨向分化过程中,CDC20的表达显著升高(P<0.05)。稳定敲低CDC20的hASCs在成骨诱导后ALP活性为(7.31±0.25)、(11.01±0.49)U/gprot,低于对照组(16.00±0.35)U/gprot,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示敲低CDC20组RUNX2的蛋白水平降低。稳定敲低CDC20的hASCs与β-TCP材料混合物植入裸鼠皮下8周后其形成的骨胶原较对照组减少。过表达CDC20的hASCs在成骨诱导后ALP活性为(20.74±0.53)U/gprot,高于对照组(12.58±0.42)U/gprot,差异有统计学意义(P<0.05)。CDC20可结合p65;敲低CDC20后,p65的表达量升高;过表达CDC20后,p65的表达量降低,且在加入蛋白酶体抑制剂MG132后回升。CDC20和p65双敲细胞系成骨诱导后,ALP染色及定量结果表明CDC20对hASCs成骨向分化的调控依赖于p65。结论:CDC20通过泛素蛋白酶体途径降解p65促进人脂肪间充质干细胞成骨向分化,为骨再生提供全新的潜在治疗靶点。 展开更多

关键词 人脂肪间充质干细胞 细胞分裂周期蛋白20 成骨向分化 P65

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CDC20在子宫内膜癌中的表达及其对RL95-2细胞增殖和凋亡的影响

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作者 赵靓 王娜 +3 位作者 刘春静 杨钰杰 赵薇 刘丽晶 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期777-783,共7页

目的:评估细胞分裂周期蛋白20(CDC20)在子宫内膜癌(EC)中的表达,探讨其对EC细胞RL95-2周期和凋亡的影响及可能的机制。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库获取EC的mRNA表达矩阵以及患者的临床信息,通过R语言分析CDC20 mRNA的差异表达情... 目的:评估细胞分裂周期蛋白20(CDC20)在子宫内膜癌(EC)中的表达,探讨其对EC细胞RL95-2周期和凋亡的影响及可能的机制。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库获取EC的mRNA表达矩阵以及患者的临床信息,通过R语言分析CDC20 mRNA的差异表达情况及其与肿瘤分期的相关性,qPCR及WB法检测CDC20在RL95-2细胞中的表达;向RL95-2细胞转染sh-CDC20以敲减CDC20的表达,采用CCK-8法和流式细胞术检测敲减CDC20对RL95-2细胞增殖活力、细胞周期分布和凋亡的影响,WB法分析对Mcl-1/p-Chk1信号活性的影响;建立RL95-2细胞裸鼠移植瘤模型,评估敲减CDC20对肿瘤生长的抑制作用及对移植瘤组织中Mcl-1/p-Chk1信号轴和细胞凋亡的影响。结果:CDC20在EC组织及RL95-2细胞中呈高表达(均P<0.01),且CDC20的高表达与EC的分期有关联。敲减CDC20可显著降低RL95-2细胞增殖活力(P<0.01),阻滞细胞周期于G1期(P<0.01),促进细胞凋亡(P<0.01),抑制细胞中Mcl-1和p-Chk1的表达(P<0.05或P<0.01)。敲减CDC20可显著抑制RL95-2细胞裸鼠移植瘤的生长(P<0.01),降低移植瘤组织内Mcl-1和p-Chk1的表达(P<0.01),促进移植瘤细胞凋亡(P<0.01)。结论:CDC20在EC组织中呈高表达且与肿瘤分期有关联,敲减CDC20能够抑制RL95-2细胞及其裸鼠移植瘤的生长而促进凋亡,这可能与Mcl-1/p-Chk1信号轴有关。 展开更多

关键词 细胞分裂周期蛋白20 子宫内膜癌 RL95-2细胞 细胞周期 凋亡 生物信息学分析

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人CDC2基因的克隆和原核表达及鉴定 被引量：1

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作者 徐波 郑永晨 费邵阳 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期834-836,共3页

目的:从人肝癌组织中克隆出人细胞分裂周期基因2(CDC2),并在大肠杆菌中表达CDC2蛋白。方法:从人肝癌组织中提取RNA,采用RT-PCR法扩增CDC2cDNA,用DNA凝胶回收试剂盒纯化并回收RT-PCR产物,将RT-PCR产物插入pET28a(+)载体NdeⅠ和XhoⅠ两酶... 目的:从人肝癌组织中克隆出人细胞分裂周期基因2(CDC2),并在大肠杆菌中表达CDC2蛋白。方法:从人肝癌组织中提取RNA,采用RT-PCR法扩增CDC2cDNA,用DNA凝胶回收试剂盒纯化并回收RT-PCR产物,将RT-PCR产物插入pET28a(+)载体NdeⅠ和XhoⅠ两酶切位点之间,转化大肠杆菌BL21(DE3);IPTG诱导表达人CDC2蛋白。结果:RT-PCR扩增出约894bp的DNA片段,与GenBank中的CDC2基因序列完全一致。经限制性内切图谱和测序鉴定,成功构建了pET28a(+)/CDC2原核表达载体。SDS-PAGE分析结果显示人CDC2蛋白在大肠杆菌中得已表达。结论:从人肝癌组织中成功地扩增出CDC2基因,并在大肠杆菌中表达。 展开更多

关键词 人细胞分裂周期基因2 基因克隆 原核表达

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CDCA8和INCENP mRNA在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义 被引量：7

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作者 张路遥 黄辉星 +1 位作者 曹立环 余龙 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期158-167,共10页

目的:探讨CDCA8和INCENP mRNA在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及其临床意义。方法:使用Illumina Nextbio芯片数据库分析原发性HCC组织和相应癌旁组织中CDCA8和INCENP mRNA表达情况,在癌症基因组图谱(The Cancer G... 目的:探讨CDCA8和INCENP mRNA在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及其临床意义。方法:使用Illumina Nextbio芯片数据库分析原发性HCC组织和相应癌旁组织中CDCA8和INCENP mRNA表达情况,在癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)肝癌数据库中使用RNA-Seq mRNA表达数据进行验证,并结合TCGA临床数据分析CDCA8和INCENP mRNA表达水平与HCC患者临床病理特征及预后的关系,使用基因集富集软件分析目的基因高表达的相关通路。结果:CDCA8和INCENP mRNA在HCC组织中表达水平显著上调(P<0.01)。CDCA8 mRNA表达水平与HCC的组织学分级、瘤体大小、肿瘤复发、美国东部肿瘤协作组织(ECOG)评级、血清AFP水平、肿瘤基因拷贝数变异显著相关(P<0.05);INCENP mRNA表达水平与HCC的组织学分级、肿瘤复发、ECOG评级、血清AFP水平、肿瘤基因突变总数和肿瘤基因拷贝数变异显著相关(P<0.05)。CDCA8高表达组患者的OS及TFS显著低于CDCA8低表达组患者(P<0.01);INCENP高表达组患者的OS显著低于INCENP低表达组患者(P<0.05),而TFS无显著差异(P>0.05)。多因素分析显示,CDCA8 mRNA水平是预测HCC患者不良预后的独立因素(P<0.01)。基因集富集分析表明,CDCA8和INCENP可能在细胞周期之外的其他生物学信号通路中发挥一定作用。结论:CDCA8和INCENP mRNA在HCC组织中呈现显著高表达。CDCA8可能成为HCC预后的独立风险因素和新的治疗靶点。 展开更多

关键词 肝细胞癌 肿瘤基因组图谱 细胞分裂周期相关蛋白8 内着丝粒结合蛋白 预后

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抑癌基因p16的研究进展 被引量：3

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作者 曹原 刘志学 《上海大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2003年第1期55-60,共6页

p16是近年来确定的多肿瘤抑制基因,它对细胞周期的负调控作用尤为重要,其突变或缺失会导致对细胞分裂调控的丧失和紊乱,导致细胞的异常增殖,最终形成肿瘤.该基因在各种肿瘤中的作用,目前正越来越引起人们的重视.

关键词 P16基因 抑癌基因 细胞周期调控 肿瘤治疗 基因治疗 分子机制 细胞分裂调控

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四君子汤含药血清通过抑制RhoA/Rac1/Cdc42通路影响卵巢癌细胞的上皮间质转化 被引量：5

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作者 李凡 张学林 +2 位作者 冯静茹 郝洁 周蕾 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第8期29-37,共9页

目的探索四君子汤含药血清对卵巢癌细胞增殖迁移、侵袭及上皮间质化的影响,并初步研究其作用机理。方法体外培养人卵巢癌细胞(SKOV3)和人卵巢上皮细胞,随机分为空白对照组、舒尼替尼组、四君子汤Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组。噻唑蓝法检测各组SKOV... 目的探索四君子汤含药血清对卵巢癌细胞增殖迁移、侵袭及上皮间质化的影响,并初步研究其作用机理。方法体外培养人卵巢癌细胞(SKOV3)和人卵巢上皮细胞,随机分为空白对照组、舒尼替尼组、四君子汤Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组。噻唑蓝法检测各组SKOV3细胞和人卵巢上皮细胞增殖变化情况;划痕实验和侵袭(transwell)实验检测各组SKOV3细胞迁移和侵袭能力;蛋白免疫印迹分析法检测各组SKOV3细胞上皮型钙粘蛋白(Ecadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、Ras同源基因家族成员A(RhoA)、Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)和细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)蛋白表达情况;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组SKOV3细胞RhoA、Rac1和Cdc42 mRNA表达变化。结果各组人卵巢上皮细胞存活率差异无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组相比,舒尼替尼组SKOV3细胞存活率、划痕愈合率、侵袭数量、N-cadherin、Vimentin蛋白、RhoA、Rac1、Cdc42 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05)。四君子汤Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组SKOV3细胞存活率、划痕愈合率、侵袭数量、N-cadherin、Vimentin蛋白、RhoA、Rac1、Cdc42 mRNA和蛋白表达依次降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达依次升高(P<0.05),呈剂量依赖性。四君子汤Ⅲ组上述指标和舒尼替尼组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论四君子汤含药血清能够抑制人卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质化,可能与RhoA/Rac1/Cdc42信号通路激活受阻相关。 展开更多

关键词 四君子汤含药血清 人卵巢癌细胞 Ras同源基因家族成员A Ras相关的C3肉毒素底物1 细胞分裂周期蛋白42 上皮间质化

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沉默CDC25A基因后肝癌裸鼠移植瘤组织中差异表达基因的筛选

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作者 陈思 唐艳萍 +4 位作者 李科志 杨春 黄小青 陈秀娟 曹骥 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期123-128,共6页

目的:探讨应用基因芯片技术筛选出可能受细胞分裂周期因子25A(cell division cycle 25A,CDC25A)调控的基因,阐明并验证CDC25A对肝癌相关基因的表达具有调控作用。方法:本课题组前期通过siRNA干扰技术沉默人肝癌HepG2细胞中CDC25A的表达... 目的:探讨应用基因芯片技术筛选出可能受细胞分裂周期因子25A(cell division cycle 25A,CDC25A)调控的基因,阐明并验证CDC25A对肝癌相关基因的表达具有调控作用。方法:本课题组前期通过siRNA干扰技术沉默人肝癌HepG2细胞中CDC25A的表达并成功构建了肝癌裸鼠移植瘤模型。基于上述研究成果,在本研究中应用Affymetrix基因表达谱芯片技术进一步筛选沉默CDC25A后肝癌移植瘤组织中的差异表达基因,并进行GO及KEGG分析,应用qPCR对部分差异表达基因进行验证。结果:通过芯片技术筛选出沉默CDC25A基因的肝癌移植组织中的差异表达基因188个,其中上调基因78个、下调基因110个。这些差异表达基因主要涉及细胞增殖、细胞凋亡、蛋白复合物结合、细胞外间隙等方面,参与黏着斑、细胞外基质(extracellular matrix,ECM)受体相互作用等通路的改变。q PCR对部分差异表达基因验证的结果显示,HIPK2 mRNA表达上调,微纤丝关联蛋白5(microfibrillar-associated protein 5,MFAP5)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1,CCND1)mRNA表达下调,与芯片检测结果一致。结论:应用人基因表达谱芯片技术成功筛选出沉默CDC25A后肝癌裸鼠移植瘤组织中的差异表达基因,为探究CDC25A影响肝癌细胞生长提供了支持线索。 展开更多

关键词 肝癌 细胞分裂周期因子25A 人基因表达谱芯片 移植瘤 GO分析 KEGG分析

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CDC20在肺腺癌组织中的表达及对肺腺癌细胞增殖和侵袭的影响研究

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作者 周雪芹 栾艳超 +2 位作者 赵莉 戎超超 杨娜 《中国癌症杂志》 CAS 2024年第5期460-472,共13页

背景与目的:肺腺癌具有早期发现难、肿瘤进展快及晚期手术切除率低等特点。尽管单药免疫治疗和免疫治疗联合化疗的相关研究在改善预后、克服耐药方面已初显成效,但是大部分肺腺癌患者从中获益仍有限。因此,迫切需要寻找具有相对较高灵... 背景与目的:肺腺癌具有早期发现难、肿瘤进展快及晚期手术切除率低等特点。尽管单药免疫治疗和免疫治疗联合化疗的相关研究在改善预后、克服耐药方面已初显成效,但是大部分肺腺癌患者从中获益仍有限。因此,迫切需要寻找具有相对较高灵敏度和特异度的新型生物标志物,以改善肺腺癌患者的预后。细胞分裂周期蛋白20(cell division cycle protein 20,CDC20)参与多种肿瘤的发生、发展,但在肺腺癌中的生物学作用及机制尚未明确。本研究旨在探究CDC20在肺腺癌中的表达情况及其对肺腺癌患者预后的预测价值,并分析CDC20对肺腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)检测CDC20在肺腺癌中的表达情况并结合生物信息学和临床病理学参数分析其与预后不良的相关性。采用Kaplan-Meier生存曲线描述CDC20对肺腺癌患者术后生存率的影响,采用COX多因素回归分析影响肺腺癌患者术后生存率的独立预后因素。通过受试者工作特征曲线分析CDC20表达在肺腺癌患者中的诊断价值。采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测人正常肺上皮细胞系BEAS-2B、人肺腺癌细胞系A549和H1299中CDC20的表达水平。细胞实验中,通过敲低肺腺癌细胞中的CDC20,分为si-NC(对照组)、si-CDC20#1(敲低组1)和si-CDC20#2(敲低组2)3个组。采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)、克隆形成、transwell和划痕实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。通过基因本体论(Gene Ontology,GO)功能和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析CDC20在肺腺癌中的生物学作用。通过基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)CDC20在肺腺癌中可能的调控通路。本研究经河北省胸科医院伦理委员会批准(编号:2022051)。结果:生物信息学及IHC结果均显示,CDC20在肺腺癌组织中显著高表达(P<0.05)。生物信息学与临床参数分析结果均显示,CDC20高表达与患者预后不良相关。Kaplan-Meier生存分析和COX回归分析均显示,CDC20表达情况与患者术后生存率呈显著负相关(P<0.05)。敲低CDC20能抑制肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。GO功能、KEGG通路和GSEA结果均显示,CDC20与细胞周期相关。结论:CDC20在肺腺癌中高表达,CDC20高表达是肺腺癌患者不良预后的独立危险因素。CDC20能促进肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多

关键词 细胞分裂周期蛋白20 肺腺癌 细胞增殖 细胞周期 细胞运动

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CDC6在成人急性白血病中的表达与临床意义 被引量：1

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作者 钟立业 刘天浩 +3 位作者 林旭滨 杜欣 林伟 陈运贤 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第14期811-813,共3页

目的:探讨细胞分裂周期蛋白6(CellDivisionCycle6,CDC6)在急性白血病中的异常表达及其临床意义。方法:以CDC6mRNA为分子标志物,应用巢式PCR技术,分别检测未缓解及完全缓解的急性白血病患者和非肿瘤患者外周血待测基因的表达。结果:标志... 目的:探讨细胞分裂周期蛋白6(CellDivisionCycle6,CDC6)在急性白血病中的异常表达及其临床意义。方法:以CDC6mRNA为分子标志物,应用巢式PCR技术,分别检测未缓解及完全缓解的急性白血病患者和非肿瘤患者外周血待测基因的表达。结果:标志基因CDC6阳性表达率分别为,对照组27.66%,急性白血病完全缓解组56.25%,急性白血病未缓解组100%;CDC6在对照组的阳性表达率显著低于其它各组(P<0.05);在急性白血病未缓解组的表达率显著高于急性白血病完全缓解组(P<0.05)。结论:CDC6的异常高表达与急性白血病细胞增殖有关,可作为成人急性白血病病情监测的分子生物学指标。 展开更多

关键词 急性白血病 细胞分裂周期蛋白6 基因 聚合酶链反应

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赖氨酸甲基转移酶PR-SET7及其生物学功能 被引量：3

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作者 梁新全 杜贻鹏 +1 位作者 王东来 杨洋 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期241-254,共14页

PR-SET7,也称SET8、KMT5a,是现今发现唯一能够特异性单甲基化H4K20的赖氨酸甲基转移酶(Lysinemethyltransferase,KMT)。在细胞周期不同时相PR-SET7的含量处于波动之中,主要受泛素连接酶调节。PR-SET7与细胞增殖密切相关,其催化的组蛋白H... PR-SET7,也称SET8、KMT5a,是现今发现唯一能够特异性单甲基化H4K20的赖氨酸甲基转移酶(Lysinemethyltransferase,KMT)。在细胞周期不同时相PR-SET7的含量处于波动之中,主要受泛素连接酶调节。PR-SET7与细胞增殖密切相关,其催化的组蛋白H4K20单甲基化修饰在DNA复制、染色体固缩及细胞周期检验点激活中发挥重要调控作用。PR-SET7缺失将导致DNA损伤,细胞周期阻滞,甚至发生细胞凋亡。而且,PR-SET7可以调节ER、Wnt、p53等多种基因的转录,进而影响相应基因的表达。PR-SET7为个体发育所必需,并参与了基因组印记的形成。另外,PR-SET7还能促进肿瘤的发生和转移,有望成为肿瘤治疗的新靶点。文章主要从PR-SET7的结构、对组蛋白修饰的调节、在细胞周期、基因转录过程中的调控,以及其在个体发育和肿瘤发生中的作用等方面综述了PR-SET7的研究进展。 展开更多

关键词 PR-SET7 H4K20 单甲基化作用 细胞周期 基因转录

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真核DNA复制起始点的结构与功能研究进展 被引量：1

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作者 张迪 霍克克 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第12期98-102,共5页

DNA复制是细胞分裂的中心环节之一 ,在细胞周期中受到严谨的调控。染色体DNA的复制是由许多复制起点处形成的起始复制叉开始的。复制原点的结构和功能是控制染色体复制的关键因素。在DNA复制起始与RNA转录启动这两种不同的基因表达关键... DNA复制是细胞分裂的中心环节之一 ,在细胞周期中受到严谨的调控。染色体DNA的复制是由许多复制起点处形成的起始复制叉开始的。复制原点的结构和功能是控制染色体复制的关键因素。在DNA复制起始与RNA转录启动这两种不同的基因表达关键过程之间存在着共有顺式作用序列和共用反式作用因子。对DNA复制的研究是分子生物学的一项基本内容 ,具有重要的理论意义。本文主要对涉及DNA复制起始的顺式元件的结构和功能及其与RNA转录的关系进行了评述和总结。 展开更多

关键词 真核DNA复制 细胞分裂 细胞周期 染色体 RNA 基因表达 分子生物学

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Rb2/p130与肺癌

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作者 王利民 段明科 陈国生 《中国肺癌杂志》 CAS 2002年第3期235-237,共3页

关键词 Rb2基因 p130基因 肺癌 Rb2/p130基因 细胞分裂周期 病理学

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