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桔小实蝇V-ATPaseG亚基基因的克隆及组织表达特异性分析 被引量:6
1
作者 胡黎明 申建梅 +1 位作者 宾淑英 林进添 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1452-1458,共7页
空泡型ATP酶(vacuolar-type H+-ATPase,V-ATPase)作为质子泵几乎在所有的真核生物细胞中发挥重要作用。本研究利用RT-PCR和RACE技术获得了桔小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)V-ATPase G亚基序列全长,命名为BdorATPG。测序结果表明,Bdo... 空泡型ATP酶(vacuolar-type H+-ATPase,V-ATPase)作为质子泵几乎在所有的真核生物细胞中发挥重要作用。本研究利用RT-PCR和RACE技术获得了桔小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)V-ATPase G亚基序列全长,命名为BdorATPG。测序结果表明,BdorATPG阅读框全长354bp,编码117个氨基酸。氨基酸序列比对表明,BdorATPG的N端序列与其他物种的ATPG亚基对应区域具有较高的序列一致性。BdorATPG与拟暗果蝇Drosophila pseudoobscura ATPG亚基的氨基酸序列一致性最高,为88.9%。三维结构模建结果表明,BdorATPG N端(第1~59位氨基酸)序列为α-螺旋结构,亲水性和疏水性氨基酸在螺旋两侧呈对称分布。BdorATPG在不同组织中的荧光定量PCR分析表明,BdorATPG在各组织中都有表达,其中在触角中的表达量最高;在雄虫生殖节中的表达量是雌虫中的6.04倍。结果提示BdorATPG可能在雄虫生殖生理过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 桔小实蝇 V-ATPASE G亚基 基因克隆 荧光定量 组织异性表达
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内蒙古白绒山羊4E-BP1基因cDNA克隆及组织表达特异性分析 被引量:1
2
作者 傅海霞 杨娇馥 +2 位作者 梁燕 陈宇浩 王志钢 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期90-94,共5页
旨在克隆内蒙古白绒山羊4E-BP1(真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1)基因并进行生物信息学及表达模式分析。根据已报道物种4E-BP1基因cDNA序列,用primer premier5软件设计引物,通过RT-PCR从绒山羊胎儿成纤维细胞总RNA中扩增出4E-BP1基因... 旨在克隆内蒙古白绒山羊4E-BP1(真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1)基因并进行生物信息学及表达模式分析。根据已报道物种4E-BP1基因cDNA序列,用primer premier5软件设计引物,通过RT-PCR从绒山羊胎儿成纤维细胞总RNA中扩增出4E-BP1基因编码区cDNA序列,对目的片段进行测序及表达模式分析。克隆到的内蒙古白绒山羊4E-BP1基因cDNA全长357 bp,包含了完整的的ORF,编码118个氨基酸残基。核酸序列与牛、马、人、大鼠及小鼠的同源性分别为98%、90%、90%、88%和87%。4E-BP1基因在绒山羊脑、心脏、睾丸及胰腺组织中均有表达。 展开更多
关键词 内蒙古白绒山羊 4E-BP1 组织异性表达
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内蒙古白绒山羊IGF-IR基因cDNA克隆及组织表达特异性分析
3
作者 宝梅英 赵荷雅 +5 位作者 杨娇馥 鲍文蕾 李彬 杨军 侯鑫 王志钢 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期103-107,共5页
旨在克隆内蒙古白绒山羊IGF-IR基因并分析其基本表达模式。采用RT-PCR克隆基因,将得到的IGF-IR基因cDNA片段的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列进行生物信息学分析。半定量RT-PCR进行组织特异性表达检测。获得了内蒙古白绒山羊IGF-IR基因... 旨在克隆内蒙古白绒山羊IGF-IR基因并分析其基本表达模式。采用RT-PCR克隆基因,将得到的IGF-IR基因cDNA片段的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列进行生物信息学分析。半定量RT-PCR进行组织特异性表达检测。获得了内蒙古白绒山羊IGF-IR基因3'端编码区2 118 bp的cDNA序列(JN200823),编码705个氨基酸残基。核苷酸序列与牛的IGF-IR(XM606794.3)基因同源性为98%,相应的氨基酸序列同源性为99%。SMART分析表明,推导出的编码蛋白具有跨膜域,酪氨酸激酶催化域。半定量RT-PCR检测表明,IGF-IR基因在绒山羊脑、胰腺、肝、肾组织中均有表达。 展开更多
关键词 内蒙古白绒山羊 IGF-IR 组织异性表达
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狗枣猕猴桃AkbHLH92基因生物信息学及表达特性分析
4
作者 赵鹤 王迎新 +3 位作者 邹霈怡 刘美艳 黄啟燕 李然红 《江苏农业科学》 北大核心 2025年第15期70-77,共8页
为了揭示狗枣猕猴桃的抗寒机制,基于前期低温处理的狗枣猕猴桃转录组数据,分析bHLH家族基因对低温的响应情况,其中bHLH家族成员AkbHLH92上调显著。利用酶切酶连的方法克隆AkbHLH92并构建亚细胞定位重组载体pBI121-AkbHLH92-GFP,利用生... 为了揭示狗枣猕猴桃的抗寒机制,基于前期低温处理的狗枣猕猴桃转录组数据,分析bHLH家族基因对低温的响应情况,其中bHLH家族成员AkbHLH92上调显著。利用酶切酶连的方法克隆AkbHLH92并构建亚细胞定位重组载体pBI121-AkbHLH92-GFP,利用生物信息学方法分析蛋白质理化性质、跨膜结构域、生物系统发育等,通过相对荧光定量PCR(RT-qPCR)技术分析AkbHLH92的表达模式。结果表明,AkbHLH92基因全长693 bp,编码蛋白为亲水性蛋白;AkbHLH92二级结构主要由α螺旋和不规则卷曲构成;系统发育分析结果表明,狗枣猕猴桃与毛花猕猴桃的亲缘关系较近;AkbHLH92编码的蛋白质定位于细胞核和细胞质;AkbHLH92基因在植物茎和叶中表达量较高,在根中表达量较低,在花和果实中均无表达;AkbHLH92对不同非生物胁迫响应不同,在4℃低温胁迫的48 h内,AkbHLH92的相对表达量呈逐步上升的趋势,处理48 h时达到最高,为对照的5.1倍;盐胁迫下,AkbHLH92的相对表达量显著下调,处理24 h时,相对表达量最低,为对照的0.007 9倍;水淹胁迫下,AkbHLH92的相对表达量呈先升再降的趋势,在处理12 h时达到峰值,为对照的2.914倍。狗枣猕猴桃AkbHLH92基因积极响应非生物胁迫,可能在其抗逆过程中具有重要作用。 展开更多
关键词 狗枣猕猴桃 AkbHLH92 基因克隆 亚细胞定位 组织表达特异性 非生物胁迫
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百合LoSAUR10基因的表达特征及功能分析
5
作者 田栩瑞 霍信屹 +3 位作者 郭云涵 向林 产祝龙 王艳平 《生物技术通报》 北大核心 2025年第1期221-229,共9页
【目的】对百合LoSAUR10基因进行克隆和组织表达特异性分析,在拟南芥中对其功能进行探究,为百合鳞茎发育机理提供参考依据。【方法】利用外源处理比较生长素对百合鳞片扦插籽球发生的影响,在此基础上以‘西伯利亚’百合cDNA为模板克隆Lo... 【目的】对百合LoSAUR10基因进行克隆和组织表达特异性分析,在拟南芥中对其功能进行探究,为百合鳞茎发育机理提供参考依据。【方法】利用外源处理比较生长素对百合鳞片扦插籽球发生的影响,在此基础上以‘西伯利亚’百合cDNA为模板克隆LoSAUR10,并对其进行生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR和过表达转基因拟南芥植株对LoSAUR10基因的表达特征及其在叶片发育中的功能进行分析。【结果】生长素IAA处理能显著促进百合鳞片扦插过程中的籽球发生和膨大,0.05 g/L的生长素处理后百合籽球发生率较对照组增加了69.04%。在扦插产生的籽球发生早期,LoSAUR10基因的表达受外源生长素诱导,在籽球进入膨大阶段时,LoSAUR10基因的表达逐渐下降。测序结果表明,LoSAUR10基因编码区长297 bp,无内含子,编码98个氨基酸,含有Auxin-inducible结构域。进化树分析结果表明LoSAUR10蛋白序列与郁金香中TgSAUR10及模式植物拟南芥中AtSAUR9和AtSAUR10具有较高的序列相似性。荧光定量PCR结果表明,LoSAUR10基因在转录水平受生长素诱导,且在多个组织中均有表达,但在百合鳞片中表达量较高。与野生型植株相比,过表达LoSAUR10的转基因拟南芥植株表现出莲座叶增大,叶片数量增加,叶片表皮细胞面积增大,且抽薹时间提前的表型。【结论】百合LoSAUR10基因参与调控植物的叶片发育和开花过程,研究结果为揭示百合籽球发生机理奠定了基础。 展开更多
关键词 百合 LoSAUR10 籽球 组织表达特异性 转基因拟南芥
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毛竹苯丙氨酸解氨酶基因的克隆及组织特异性表达分析 被引量:15
6
作者 高志民 彭镇华 +2 位作者 李雪平 牟少华 马艳军 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2009年第3期449-453,共5页
As a critical enzyme in secondary metabolism of plant,Phenylanlanine ammonialyase(PAL) has significant meaning to its development and strong tolerance ability against hard.A full-length cDNA of PAL gene was isolated f... As a critical enzyme in secondary metabolism of plant,Phenylanlanine ammonialyase(PAL) has significant meaning to its development and strong tolerance ability against hard.A full-length cDNA of PAL gene was isolated from Phyllostachys edulis through RT-PCR and RACE methods,and named as PePAL1(GenBank accession number:FJ195650).PePAL1 is 2 436 bp,which contains an open reading frame encoding 701 amino acids.The results of amino acid sequence analysis showed that PePAL1 had high identities with other gramineous PAL in Oryza sativa,Zea mays,Saccharum officinarum,Bambusa ventricosa,Bambusa oldhamii and Triticum aestivum,especially with PAL from O.sativa up to 93.0%.Phylogenetic analysis showed that PePAL1 and LLB1 were on different branch sites.Tissue specific expression showed that PePAL1 expressed in leaf,sheath,stem and root,much higher in stem. 展开更多
关键词 毛竹 苯丙氨酸解氨酶 克隆 组织异性表达
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小麦AGPase4个亚基的克隆及其组织特异性表达 被引量:6
7
作者 康国章 刘超 +2 位作者 沈丙权 肖向丽 郭天财 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期60-64,共5页
采用RT-PCR方法从小麦品种豫教2号发育籽粒中克隆出小麦淀粉合成关键酶—AGPase的胞质型小亚基(cytosolic small subunit,SSUⅠ)、质体型小亚基(plastidial small subunit,SSUⅡ)、胞质型大亚基(cy-tosolic large subunit,LSUⅠ)和质体... 采用RT-PCR方法从小麦品种豫教2号发育籽粒中克隆出小麦淀粉合成关键酶—AGPase的胞质型小亚基(cytosolic small subunit,SSUⅠ)、质体型小亚基(plastidial small subunit,SSUⅡ)、胞质型大亚基(cy-tosolic large subunit,LSUⅠ)和质体型大亚基(plastidial large subunit,LSUⅡ)的cDNA序列。所克隆的基因cDNA序列长度分别为1 4651、6311、941和535 bp。序列比对结果显示SSUⅠ、LSUⅠ和LSUⅡ与已往报道的大麦、小麦、玉米、水稻等相关基因的同源性较高,而SSUⅡ的cDNA序列为首次克隆,与大麦SSUⅡ相比,5'端缺失编码转移肽的一段序列,表明其可能对质体AGPase活性产生一定影响。通过半定量PCR法发现SSUⅠ与LSUⅠ在籽粒中表达量较高,而SSUⅡ和LSUⅡ在叶片中丰富表达。 展开更多
关键词 小麦 AGPase亚基 克隆 组织异性表达
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鸡长链非编码RNA发掘及组织特异性表达分析 被引量:5
8
作者 李辉 张继扬 杜志强 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期40-47,共8页
长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lnc RNA)是一类长度大于200个核苷酸、缺少蛋白编码功能的RNA。lnc RNA可从多层面调控基因表达,影响表型性状。鸡作为重要经济动物和模式生物,lnc RNA研究相对滞后。为加快鸡lnc RNA研究进展,利用公... 长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lnc RNA)是一类长度大于200个核苷酸、缺少蛋白编码功能的RNA。lnc RNA可从多层面调控基因表达,影响表型性状。鸡作为重要经济动物和模式生物,lnc RNA研究相对滞后。为加快鸡lnc RNA研究进展,利用公共数据库(如NCBI-SRA等)中鸡高通量转录组测序(RNA-seq)数据,通过生物信息学方法发掘8 040条鸡lnc RNA,发现大量组织特异性表达lnc RNA,为鸡lnc RNA功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 RNA-SEQ lncRNA 组织异性表达
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烟夜蛾气味受体OR18基因克隆及组织特异性表达 被引量:4
9
作者 张元臣 范荫荫 +5 位作者 安世恒 李为争 乔奇 郭线茹 罗梅浩 原国辉 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期49-54,共6页
应用RT-PCR和实时荧光定量PCR技术,从烟夜蛾雄虫触角中克隆气味受体目的基因,分析鉴定了其在烟夜蛾不同组织的特异性表达情况.序列分析结果表明,目的基因为新的烟夜蛾气味受体基因,命名为HassOR18(GenBank登录号:HM750915).该基因阅读... 应用RT-PCR和实时荧光定量PCR技术,从烟夜蛾雄虫触角中克隆气味受体目的基因,分析鉴定了其在烟夜蛾不同组织的特异性表达情况.序列分析结果表明,目的基因为新的烟夜蛾气味受体基因,命名为HassOR18(GenBank登录号:HM750915).该基因阅读框架全长1 197 bp,编码398个氨基酸,推测编码蛋白质的相对分子质量为46.6 kD,等电点为5.82.氨基酸序列比对表明,烟夜蛾气味受体HassOR18与其他夜蛾科昆虫OR18的氨基酸序列一致性均达80%以上.实时荧光定量PCR结果显示,HassOR18仅在雌雄虫触角中和雌虫喙内表达,而且在雄虫触角内的表达量远高于在雌虫触角和喙内的表达量,推测该基因可能参与性信息素的识别. 展开更多
关键词 烟夜蛾 气味受体 基因克隆 序列分析 组织异性表达
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桔小实蝇CYP4D46的克隆及其组织特异性表达研究 被引量:3
10
作者 黄勇 申光茂 +3 位作者 刘丽 熊赛 蒋红波 王进军 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2010年第2期180-187,共8页
从桔小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)成虫体内提取总RNA,利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术获得了一个新的细胞色素P450基因cDNA序列全长。该基因经细胞色素P450基因命名委员会命名为CYP4D46(GenBank登录号:GU292422),其cDNA全长为17... 从桔小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)成虫体内提取总RNA,利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术获得了一个新的细胞色素P450基因cDNA序列全长。该基因经细胞色素P450基因命名委员会命名为CYP4D46(GenBank登录号:GU292422),其cDNA全长为1717bp,包含1530bp的完整开放阅读框(ORF),编码510个氨基酸,理论分子量约为58.40kD,等电点为8.82。系统发育分析表明该基因与昆虫第4家族P450基因具有较高的同源性。实时定量PCR分析发现,CYP4D46基因在脂肪体中的相对表达量较高,分别是马氏管和中肠内的756倍和60倍,说明CYP4D46可能与脂肪体的重要生理功能相关。 展开更多
关键词 桔小实蝇 P450 基因克隆 组织异性表达
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棉花甲基化酶基因COMT和CCoAOMT的组织特异性表达分析 被引量:11
11
作者 吕萌 倪志勇 +3 位作者 王娟 李波 罗淑萍 范玲 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期713-719,共7页
本研究利用半定量RT-PCR分析方法探索了陆地棉(Gossypium hirsutum L.)木质素合成途径中甲基化酶基因家族COMT和CCoAOMT在不同组织和不同发育时期纤维中的表达情况。结果表明COMT1,COMT2,COMT3和CCoAOMT1,CCoAOMT2在棉花的7个组织器官(... 本研究利用半定量RT-PCR分析方法探索了陆地棉(Gossypium hirsutum L.)木质素合成途径中甲基化酶基因家族COMT和CCoAOMT在不同组织和不同发育时期纤维中的表达情况。结果表明COMT1,COMT2,COMT3和CCoAOMT1,CCoAOMT2在棉花的7个组织器官(根、茎、叶、子叶、花瓣、雄蕊、胚珠)中都有表达,其中COMT1和CCoAOMT1在各组织中的表达趋势类似,COMT2,COMT3和CCoAOMT2表达趋势各异。在5~25d的棉纤维发育过程中,COMT1和COMT3表达稳定,COMT2表达量逐渐增加。而CCoAOMT基因家族的2个基因的表达量变化相对明显,CCoAOMT1在25d出现表达高峰,CCoAOMT2则在10d和15d呈现高表达量。本研究表明甲基化酶基因家族COMT和CCoAOMT在棉花的根,茎等维管组织中具有相对一致的高表达量,而在其他组织和发育纤维中则呈现出明显的组织特异性和纤维发育时期特异性。 展开更多
关键词 陆地棉 咖啡酸-O-甲基转移酶(COMT) 咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(CCoAOMT) 反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) 组织异性表达
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LIR1基因在水稻中的组织特异性表达 被引量:1
12
作者 岳彩黎 王贵学 +2 位作者 黄俊丽 胡锋 秦峰 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期146-150,共5页
水稻LIR1是LIR(light-induced rice)蛋白家族的一员,受光与生物钟的调节,在植物光反应及生物节律性调控方面有重要作用。为了研究水稻LIR1的生理功能,利用半定量RT-PCR技术对水稻‘珍汕97B’LIR1基因做了根、叶鞘、叶片及穗的组织特异... 水稻LIR1是LIR(light-induced rice)蛋白家族的一员,受光与生物钟的调节,在植物光反应及生物节律性调控方面有重要作用。为了研究水稻LIR1的生理功能,利用半定量RT-PCR技术对水稻‘珍汕97B’LIR1基因做了根、叶鞘、叶片及穗的组织特异性表达分析,同时构建了启动子的GUS基因融合表达载体LIR1∷GUS转化烟草,利用GUS组织化学染色检测GUS基因在烟草组织器官中的表达情况。研究结果表明:LIR1基因在水稻叶片中的表达量较高,而在叶鞘、穗与根中表达量较低;GUS染色主要集中在叶片组织及茎中,而在植株的根部不显色。 展开更多
关键词 LIR1基因 组织异性表达 启动子 GUS
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gus基因导入烟草获得转基因植株及其组织特异性表达 被引量:2
13
作者 邓晓梅 周根余 《上海农业学报》 CSCD 1996年第4期85-87,共3页
gus基因导入烟草获得转基因植株及其组织特异性表达邓晓梅;周根余(上海市农业科学院农业生物技术研究中心上海201106;上海师范大学生物系,上海200234)关键词烟草,共培养转化;gus基因;组织特异性表达烟草是我... gus基因导入烟草获得转基因植株及其组织特异性表达邓晓梅;周根余(上海市农业科学院农业生物技术研究中心上海201106;上海师范大学生物系,上海200234)关键词烟草,共培养转化;gus基因;组织特异性表达烟草是我国重要的经济作物之一,烟草花叶病毒... 展开更多
关键词 烟草 转化 基因 组织异性表达
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沙柳PNY基因克隆、生物信息学及组织特异性表达
14
作者 杨海峰 王文娟 +3 位作者 刘乐 卜松雪 张雅喃 何丽君 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期7-12,共6页
为了促进沙柳(Salix psammophila)分子定向育种,研究了其分枝及材性发育相关遗传机制。克隆获得了沙柳PNY基因。研究发现:沙柳PNY基因编码区全长1 446 bp,编码481个氨基酸残基。PNY蛋白由55.09%无规卷曲、29.73%α-螺旋及15.18%延伸链... 为了促进沙柳(Salix psammophila)分子定向育种,研究了其分枝及材性发育相关遗传机制。克隆获得了沙柳PNY基因。研究发现:沙柳PNY基因编码区全长1 446 bp,编码481个氨基酸残基。PNY蛋白由55.09%无规卷曲、29.73%α-螺旋及15.18%延伸链构成。保守结构域分析表明,该蛋白分子存在PNY蛋白典型的SKY、BELL、Homeodomain结构域。系统进化分析表明,沙柳与杞柳(Salix purpurea)、毛果杨(Populus trichocarpa)的PNY基因亲缘关系最近。qRT-PCR组织特异性表达分析发现,PNY基因在沙柳腋芽部位表达量最高,茎、叶、顶芽、根中表达量依次降低。 展开更多
关键词 沙柳 PNY基因 生物信息学 组织异性表达
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秀丽隐杆线虫全身性与组织特异性表达重组载体的构建
15
作者 周前进 姜小磊 +1 位作者 张红丽 杜爱芳 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期16-26,共11页
利用PCR技术从秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)基因组DNA中扩增获得Act-1基因的核心启动子序列、T07F10基因的核心启动子序列与3UTR的Poly(A)信号序列以及从表达载体pEGFP-N1上扩增获得SV40早期mRNA的Poly(A)信号序列与EGFP基因.... 利用PCR技术从秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)基因组DNA中扩增获得Act-1基因的核心启动子序列、T07F10基因的核心启动子序列与3UTR的Poly(A)信号序列以及从表达载体pEGFP-N1上扩增获得SV40早期mRNA的Poly(A)信号序列与EGFP基因.以克隆载体pBluescript SK+为基本骨架,分别构建由Act-1基因的核心启动子序列、T07F10基因的核心启动子序列调控的、EGFP作为报告基因的秀丽隐杆线虫全身性表达重组载体和组织特异性表达重组载体,为研究不同类型载体在秀丽隐杆线虫体内的表达模式提供基础. 展开更多
关键词 秀丽隐杆线虫 核心启动子 EGFP基因 Poly(A)信号 全身性表达 组织异性表达
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果蝇spen蛋白的抗体制备、组织特异性表达及功能分析
16
作者 金丽华 齐卓 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1239-1244,共6页
Spen家族蛋白参与多种生物学过程,包括神经元细胞的命运、神经元突起延伸的调节、细胞周期调控等,并且是联系Notch信号途径和生长因子受体途径的关键分子。最近的研究表明spen基因在果蝇的眼睛、翅膀和腿组织中参与Wnt信号转导。但该基... Spen家族蛋白参与多种生物学过程,包括神经元细胞的命运、神经元突起延伸的调节、细胞周期调控等,并且是联系Notch信号途径和生长因子受体途径的关键分子。最近的研究表明spen基因在果蝇的眼睛、翅膀和腿组织中参与Wnt信号转导。但该基因在果蝇中的功能还有很多不明确之处。文章采用基因克隆、原核表达及亲和层析等方法制备并纯化了黑腹果蝇spen的C端6×His-spen融合蛋白,以纯化的融合蛋白免疫大鼠获得了抗spen的多克隆抗体。利用制备的抗体进行免疫染色结果显示spen蛋白定位于细胞核内,并且在大脑、脂肪体、血细胞、肠和唾液腺等组织中表达量较高。分析野生型和突变体果蝇血细胞的噬菌作用,发现spen蛋白低表达的突变体吞噬外来异物明显低于野生型,结果表明spen蛋白能够调节血细胞的吞噬功能。 展开更多
关键词 果蝇 spen蛋白 多克隆抗体 组织异性表达 噬菌作用
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小麦TaSPL17基因的克隆、组织特异性表达及原核表达分析 被引量:3
17
作者 张铁怀 徐开杰 +2 位作者 刘曙东 奚亚军 孙风丽 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期37-43,共7页
具有SBP结构域的SPL(SQUAMOSA promoter-binding protein-like)蛋白是一类植物特有的转录因子,在植物的生长发育过程中发挥重要的调控作用。为了进一步研究小麦基因TaSPL17的功能,本研究通过同源克隆的方法,从普通小麦品种‘小偃22’中... 具有SBP结构域的SPL(SQUAMOSA promoter-binding protein-like)蛋白是一类植物特有的转录因子,在植物的生长发育过程中发挥重要的调控作用。为了进一步研究小麦基因TaSPL17的功能,本研究通过同源克隆的方法,从普通小麦品种‘小偃22’中克隆得到TaSPL17基因全长CDS序列。生物信息学分析表明,该基因开放阅读框长度1 158bp,编码385个氨基酸,理论分子质量40.25ku,理论等电点为9.12。半定量RT-PCR结果显示,TaSPL17在小麦根、茎基部、叶片、幼穗中均有表达,在幼穗和茎基部中表达量最高,根次之,在叶片中表达量最少,表明TaSPL17基因可能与小麦的分蘖和穗部的发育有关。将基因TaSPL17与载体pGEX6P-1连接构建原核重组表达载体pGEX6P-1-TaSPL17,然后将其转入大肠杆菌DH5α并对诱导表达的时间、IPTG浓度、温度进行优化,SDS-PAGE分析表明,融合GST标签的TaSPL17在温度37℃,IPTG浓度为0.4mmol/L,诱导3h后表达量最大,有助于进一步纯化TaSPL17蛋白质。 展开更多
关键词 小麦(Triticum aestivum) TaSPL17 基因克隆 组织异性表达 原核表达
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人A33基因5′调控区的组织特异性表达元件 被引量:3
18
作者 山松 朱云艳 +2 位作者 翟鹏 毛泽斌 童坦君 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期440-444,共5页
在对人A33基因 5′调控区初步研究的基础上 ,进一步采用体外足迹法、电泳迁移率变更分析(EMSA)和定点突变等实验对A33启动子的 - 10 4~ + 2 5bp区域进行了重点研究 .在A33启动子的- 10 4~ + 2 5bp区域内存在两个转录正调控元件 ,它们... 在对人A33基因 5′调控区初步研究的基础上 ,进一步采用体外足迹法、电泳迁移率变更分析(EMSA)和定点突变等实验对A33启动子的 - 10 4~ + 2 5bp区域进行了重点研究 .在A33启动子的- 10 4~ + 2 5bp区域内存在两个转录正调控元件 ,它们分别位于转录起始位点上游 - 86~ - 6 8区(A)和 - 40~ - 19区 (B) .通过对转录因子数据库的查找 ,发现A区与转录因子GKLF (gut enrichedKr櫣ppel likefactor)的结合位点吻合 ,而B区则没有找到与之相应的转录因子 .EMSA实验表明 ,A区与核蛋白的结合存在组织特异性 ,而B区的结合则无组织特异性 .推测A区所包含的顺式调控元件很可能是决定A33基因组织特异性表达的关键元件 .根据B区所处的位置和富含AT来分析 ,它极有可能是和通用转录因子及RNA聚合酶结合的区域 .A和B两个区域的点突变都可使A33启动子的活性丧失 85 展开更多
关键词 人A33基因 5′调控区 组织异性表达元件 启动子区 顺式调控元件
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大果水晶梨褐色果皮突变体木质素合成相关基因的组织特异性表达分析 被引量:2
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作者 刘炳旭 于凤鸣 +4 位作者 张立彬 武军凯 宋立琴 肖啸 杜晓东 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2016年第5期28-34,共7页
为研究木质素合成相关基因(PAL1、PAL2、CAD、POD、4CL)在大果水晶梨褐色果皮突变体中的表达特性,并为研究梨褐色果皮形成机制奠定基础。按照RNA试剂盒法提取果皮、花、叶片、果肉、枝条韧皮部中总RNA;利用DNAMAN和Primer 5.0软件设计... 为研究木质素合成相关基因(PAL1、PAL2、CAD、POD、4CL)在大果水晶梨褐色果皮突变体中的表达特性,并为研究梨褐色果皮形成机制奠定基础。按照RNA试剂盒法提取果皮、花、叶片、果肉、枝条韧皮部中总RNA;利用DNAMAN和Primer 5.0软件设计特异引物;使用实时荧光定量PCR技术研究基因的表达。结果表明,PAL1、PAL2、CAD、POD、4CL的最高相对表达量均出现在果皮中;果皮和果肉中POD的相对表达量极显著高于其他基因,花、叶片和枝条韧皮部中CAD的相对表达量极显著高于其他基因。综上所述,大果水晶梨褐色果皮突变体木质素合成相关的5个酶基因在果皮、果肉、叶片、花和枝条韧皮部中的表达具有明显的组织特异性,这些基因可能与大果水晶梨褐色果皮的形成关系密切。 展开更多
关键词 大果水晶梨褐色果皮突变体 木质素合成关键酶 基因 反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) 组织异性表达
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动物生长激素受体基因组织特异性表达及其调控 被引量:5
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作者 姜树林 徐金先 胥清富 《饲料研究》 CAS 2006年第4期21-23,共3页
关键词 生长激素受体 动物生长 发育调控 组织异性表达 受体基因 生长发育机制 营养水平 MRNA水平 GHR 动物血液
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