环状RNA hsa_circ_0085576调控微小RNA-498/B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1轴对口腔鳞状细胞癌细胞迁移和侵袭的影响 被引量：1

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作者 李立恒 王蕊 +5 位作者 王晓明 张智轶 张璇 安峰 王芹 张凡 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期60-67,共8页

目的探究环状RNA hsa_circ_0085576对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法使用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白印迹法检测OSCC细胞中hsa_circ_0085576、微小RNA-498(miR-498)以及B细胞特异性莫洛尼鼠... 目的探究环状RNA hsa_circ_0085576对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法使用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白印迹法检测OSCC细胞中hsa_circ_0085576、微小RNA-498(miR-498)以及B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1(BMI-1)的表达水平。使用CCK-8、划痕实验、Transwell实验以及qRT-PCR、蛋白印迹法分别检测SCC-15细胞增殖活力、迁移及侵袭能力以及相关基因和蛋白的相对表达量。结果OSCC细胞中hsa_circ_0085576与BMI-1表达上调,miR-498表达下调(P<0.05)。下调hsa_circ_0085576表达或过表达miR-498后SCC-15细胞的增殖活性、划痕愈合率、侵袭细胞数目以及细胞周期蛋白D1、波形蛋白表达水平下调,miR-498和E-钙黏蛋白表达水平上调(P<0.05);抑制miR-498表达可减弱下调hsa_circ_0085576表达对OSCC细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用;上调BMI-1表达可减弱过表达miR-498对OSCC细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用。结论下调hsa_circ_0085576表达可通过激活miR-498/BMI-1轴抑制OSCC细胞增殖、迁移及侵袭。 展开更多

关键词 环状rna hsa_circ_0085576 微小rna-498 B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1 口腔鳞状细胞癌

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红鳍东方鲀6种同工酶的组织特异性及基因位点分析 被引量：4

2

作者 杨翠华 王伟继 +2 位作者 李鹏飞 孔杰 王清印 《海洋水产研究》 CSCD 北大核心 2006年第3期47-51,共5页

采用水平淀粉凝胶和聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳法,对2龄野生红鳍东方鲀的肌肉、肝脏、肾脏、心脏、眼、鳃6种组织中的苹果酸酶(ME),乳酸脱氢酶(LDH),异柠檬酸脱氢酶(IDH),葡萄糖脱氢酶(GLCDH),磷酸葡萄糖变位酶(PGM)和酯酶(EST)共6种同工... 采用水平淀粉凝胶和聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳法,对2龄野生红鳍东方鲀的肌肉、肝脏、肾脏、心脏、眼、鳃6种组织中的苹果酸酶(ME),乳酸脱氢酶(LDH),异柠檬酸脱氢酶(IDH),葡萄糖脱氢酶(GLCDH),磷酸葡萄糖变位酶(PGM)和酯酶(EST)共6种同工酶进行了研究。结果表明,以上6种同工酶存在明显的组织特异性。LDH在除肝脏外的5种组织中活性很强,GLCDH只在肝脏中表达,鳃组织中的GLCDH和肌肉组织中的EST表达活性都很弱。6种同工酶共检测到12个基因位点,其中ME和PGM有两个基因位点编码,EST有5个基因位点编码。本试验还检测到Ldh-1、Est-1、Est-2、Est-3和Est-4共5个基因位点具有多态现象(P0·99),多态位点比例为41·67%,在12个基因位点共观察到17个等位基因表达,平均每个位点表达的等位基因数为1·417个。同时在红鳍东方鲀眼组织中发现,AB3型和B4型LDH间有一条酶带弱表达。 展开更多

关键词 红鳍东方纯 同工酶 组织特异性 基因位点

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一种基因编辑位点特异性PCR方法的开发和应用 被引量：1

3

作者 张洪文 赵圣博 +7 位作者 闫晓红 李俊 翟杉杉 肖芳 高鸿飞 李允静 吴刚 武玉花 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期77-89,共13页

为了对基因组编辑产品进行精准定性和定量检测,以水稻SP1基因的编辑植株为材料,在编辑位点上下游设计通用引物,在编辑位点处设计基因编辑位点特异性TaqMan探针,建立了编辑位点特异性PCR方法。利用该方法可准确鉴定特异基因组编辑产品,... 为了对基因组编辑产品进行精准定性和定量检测,以水稻SP1基因的编辑植株为材料,在编辑位点上下游设计通用引物,在编辑位点处设计基因编辑位点特异性TaqMan探针,建立了编辑位点特异性PCR方法。利用该方法可准确鉴定特异基因组编辑产品,检测灵敏度达到5~10拷贝,可在实时荧光PCR(qPCR)和微滴数字PCR(ddPCR)平台上对基因组编辑产品进行定量检测。由于数字PCR的微反应单元可消除野生型DNA对通用引物的竞争性消耗,与qPCR的定量结果相比,ddPCR定量结果具有更高的定量准确性。 展开更多

关键词 基因组编辑作物 基因编辑位点特异性PCR 身份鉴定 定量检测

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绵羊组织特异性长链非编码RNA的鉴定与功能分析 被引量：1

4

作者 赵琛 刘晓懿 王喜宏 《家畜生态学报》 北大核心 2023年第1期18-26,共9页

本研究通过对绵羊不同组织的转录组分析,获得了肌肉、皮肤、脂肪组织的特异性长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)集合,预测了其上下游10 kb/100 kb区域内的蛋白编码基因,并基于皮尔森系数建立了lncRNA-mRNA调控网络,同时通过Ani... 本研究通过对绵羊不同组织的转录组分析,获得了肌肉、皮肤、脂肪组织的特异性长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)集合,预测了其上下游10 kb/100 kb区域内的蛋白编码基因,并基于皮尔森系数建立了lncRNA-mRNA调控网络,同时通过AnimalQTLdb数据库对可能具有重要经济性状的lncRNA进行筛选。结果表明,共预测出36340条lncRNA,基于τ指数对其进行组织特异性筛选,鉴定到213条肌肉特异性lncRNA,467条皮肤组织特异性lncRNA,295条脂肪特异性lncRNA。这三种组织特异性lncRNA的上下游基因可能分别参与调控肌肉生长、表皮发育、脂肪合成等生物学过程。通过构建的lncRNA-mRNA互作网络发现了2个重要表达模块,分别与角质化和脂肪合成相关。QTL分析表明,有14个lncRNA可能作为绵羊肌肉与脂肪相关性状的候选lncRNA。研究结果为lncRNA在绵羊育种工作中的应用提供借鉴和参考。 展开更多

关键词 长链非编码rna 组织特异性 顺式作用 反式作用 数量性状位点

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基于大规模RNA-seq数据绘制猪RNA编辑图谱的研究

5

作者 龙佳佳 刘玮玮 +3 位作者 范新浩 黎旺长 杨小淦 唐中林 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期288-295,共8页

【目的】A-to-I RNA编辑是一种由ADAR酶家族介导的共转录/转录后修饰,系统绘制猪的RNA编辑图谱,为猪的分子育种提供候选靶标。【方法】收集16种猪组织的3461个RNA-seq数据,采用生物信息学方法检测猪RNA编辑位点。【结果】共检测到130989... 【目的】A-to-I RNA编辑是一种由ADAR酶家族介导的共转录/转录后修饰,系统绘制猪的RNA编辑图谱,为猪的分子育种提供候选靶标。【方法】收集16种猪组织的3461个RNA-seq数据,采用生物信息学方法检测猪RNA编辑位点。【结果】共检测到130989个RNA编辑位点,其中,A-to-I RNA编辑位点有124208个。A-to-I RNA编辑位点特征分析表明,98.2%的位点位于重复区域,且主要位于猪特异性的SINE反转录转座子区域的PRE-1/Pre0_SS元件内。只有12.3%的A-to-I RNA编辑位点具有编码意功能。最后,本研究分析了7种组织(脂肪、大脑、大肠、小肠、骨骼肌、肝和肺)的特异性A-to-I RNA编辑位点,脂肪组织特异性位点宿主基因的功能富集分析表明,这些基因在与细胞脂质代谢过程、脂质代谢过程、硫酯代谢过程等相关的信号通路中富集。在这些通路中,与脂肪沉积相关的基因有PDK1、ACSL1和PDE3B等。【结论】绘制了猪的RNA编辑位点图谱,为猪的分子育种提供了候选靶点。 展开更多

关键词 A-to-I rna编辑 脂肪沉积 猪 组织 组织特异性rna编辑位点

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Smad2特异性siRNA对大鼠抗肝纤维化的作用 被引量：3

6

作者 罗海峰 吴志勇 +3 位作者 陈炜 邱江锋 张志奇 孟方斌 《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第3期256-259,共4页

目的探讨大鼠体内Smad2特异性siRNA的抗肝纤维化作用。方法肝纤维化大鼠模型,尾静脉注射pEGFP-Cl-CR4质粒转染大鼠肝脏。8周后应用RT-PCR和Westernblot技术检测肝脏Smad2mRNA和蛋白的表达情况,同时检测肝脏组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量。... 目的探讨大鼠体内Smad2特异性siRNA的抗肝纤维化作用。方法肝纤维化大鼠模型,尾静脉注射pEGFP-Cl-CR4质粒转染大鼠肝脏。8周后应用RT-PCR和Westernblot技术检测肝脏Smad2mRNA和蛋白的表达情况,同时检测肝脏组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量。结果pEGFP-Cl-CR4克隆转染肝脏组织中,Smad2基因和蛋白表达受到明显的抑制;Hyp含量与各对照组比较显著下降(P<0.05)。结论在体内实验中,载体表达的特异性siRNA可以有效地抑制肝脏组织中Smad2的表达,阻断TGF-β对肝星状细胞的激活,使胶原分泌下调。 展开更多

关键词 SMAD2 大鼠 rna 特异性 抗肝纤维化 肝脏组织 转染 EGFP 克隆 质粒

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水稻低Cd累积相关基因RNA干扰载体及根特异性表达载体的构建 被引量：2

7

作者 陈煜娴 冯珊珊 +1 位作者 柴兴苹 柴团耀 《中国科学院大学学报（中英文）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期185-191,共7页

Cd极易被水稻等作物吸收并伴随食物链在人体内累积,严重威胁人类健康.基于水稻Cd累积机制的现有研究,克隆与水稻Cd累积相关的基因Os LCD和Os HMA3,并克隆一个维管组织特异性表达的启动子Os MTP11P,利用Gateway技术及传统酶切、连接方法... Cd极易被水稻等作物吸收并伴随食物链在人体内累积,严重威胁人类健康.基于水稻Cd累积机制的现有研究,克隆与水稻Cd累积相关的基因Os LCD和Os HMA3,并克隆一个维管组织特异性表达的启动子Os MTP11P,利用Gateway技术及传统酶切、连接方法,成功构建适用于水稻等单子叶植物农杆菌转化的RNA干扰载体pRI-M-LCD和根特异性表达载体p CB2022-H.期望通过这2个载体共转化水稻,使大量的Cd扣留在根细胞的液泡中,限制Cd向地上部分及籽粒中的转运,从而实现Cd在水稻籽粒中的低累积. 展开更多

关键词 水稻 rna干扰 组织特异性表达 低镉累积 多基因转化 载体构建

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赤点石斑鱼4种同工酶的组织分布及基因位点分析 被引量：29

8

作者 邓思平 刘楚吾 《浙江海洋学院学报（自然科学版）》 CAS 2004年第2期103-106,共4页

运用聚丙烯酰胺垂直梯度凝胶电泳法对赤点石斑鱼7组织(肌肉、肝脏、肾脏、心肌、脑、脾脏、性腺)的4种同工酶(EST、LDH、MDH、ME)进行了初步研究,并对4种酶的同工酶位点及酶谱表型进行了分析。结果表明:赤点石斑鱼的4种同工酶系统具有... 运用聚丙烯酰胺垂直梯度凝胶电泳法对赤点石斑鱼7组织(肌肉、肝脏、肾脏、心肌、脑、脾脏、性腺)的4种同工酶(EST、LDH、MDH、ME)进行了初步研究,并对4种酶的同工酶位点及酶谱表型进行了分析。结果表明:赤点石斑鱼的4种同工酶系统具有明显的组织特异性;EST由4个基因位点编码;LDH酶带多于典型的5条酶带;MDH具有线粒体型(m-MDH)和上清液型(s-MDH)两种类型;7种组织只检测到一种类型的ME。 展开更多

关键词 同工酶 赤点石斑鱼 电泳 组织特异性 基因位点编码

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逆转录聚合酶链反应检测Ⅲ型登革病毒的敏感性和特异性研究

9

作者 李刚 王飞 +2 位作者 郭日波 柯伟民 廖育煌 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 1993年第3期235-237,共3页

本文应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测Ⅲ型登革病毒基因。所设计引物在E基因组,引物2位于核苷酸序列的1139～1158位,引物1位于1453～1471位,反应产物为333bp,内含1个HindⅢ限制性内切酶位点,酶切后有128 bp和199 bp两个片段。... 本文应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测Ⅲ型登革病毒基因。所设计引物在E基因组,引物2位于核苷酸序列的1139～1158位,引物1位于1453～1471位,反应产物为333bp,内含1个HindⅢ限制性内切酶位点,酶切后有128 bp和199 bp两个片段。产物在含溴化乙锭的2％琼脂糖中电泳。采用RT-PCR法可测出少至5个半数组织细胞培养感染量(TCID_so)的病毒RNA。 展开更多

关键词 逆转录聚合酶链反应 登革病毒 特异性研究 E基因 组织细胞培养 引物 敏感性 限制性内切酶 酶切 rna

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DNMTl siRNA对人胰腺癌PaTu8988细胞周期的调控机制研究 被引量：2

10

作者 徐岷 高军 +6 位作者 高道键 张玉琦 杜奕奇 刘枫 龚燕芳 吴洪玉 李兆申 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期21-23,共3页

目的研究沉默DNA甲基转移酶1(DNMTl)基因对人胰腺癌PaTu8988细胞增殖和细胞周期的影响及可能机制。方法培养的人胰腺癌PaTu8988细胞分为空白对照组、阴性siRNA(15nmol/L)组、阴性siRNA(30nmol/L)组、DNMT1 siRNA(15nmol/L)组和DNMT1 siR... 目的研究沉默DNA甲基转移酶1(DNMTl)基因对人胰腺癌PaTu8988细胞增殖和细胞周期的影响及可能机制。方法培养的人胰腺癌PaTu8988细胞分为空白对照组、阴性siRNA(15nmol/L)组、阴性siRNA(30nmol/L)组、DNMT1 siRNA(15nmol/L)组和DNMT1 siRNA(30nmol/L)组。转染48h后,采用real-time PCR和Western blotting评价沉默效率和细胞周期调控基因p21的表达情况;WST-8法检测细胞增殖情况;流式细胞技术检测细胞周期变化。结果转染48h后,15nmol/L和30nmol/L浓度的DN-MT1 siRNA均明显抑制了DNMT1 mRNA和蛋白的表达;DNMT1 siRNA转染后人胰腺癌PaTu8988细胞增殖受抑制,各组细胞增殖抑制率依次为0%±12.0%、13.7%±8.2%、23.4%±7.3%、17.1%±5.8%和36.9%±14.2%,其中DNMT1 siRNA(30nmol/L)组的细胞增殖抑制率明显高于其他各组(P<0.01);DNMT1 siRNA(15nmol/L)组和DNMT1 siRNA(30nmol/L)组的G2/M期细胞百分率均显著低于其他各组,S期细胞百分率明显高于其他各组(P<0.05);DNMT1 siRNA(30nmol/L)组细胞周期调控基因p21 mRNA相对表达量明显高于其他各组(P<0.01)。结论DNMTl siRNA能特异性抑制胰腺癌细胞DNMTl的表达,并抑制细胞增殖、促使细胞出现S期阻滞,其机制可能与上调细胞周期调控基因p21的表达有关。 展开更多

关键词 位点特异性DNA甲基转移酶(胞嘧啶特异性) rna干扰 胰腺肿瘤 细胞周期

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siRNA干扰BMI-1基因对膀胱癌EJ细胞增殖的调控作用及其机制 被引量：6

11

作者 崔学江 朱定军 +3 位作者 韩金利 梁武 苏嘉锐 谢文练 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1519-1524,共6页

目的:对比观察膀胱癌EJ细胞及人膀胱移行上皮细胞中BMI-1基因及下游p16INK4a、p14ARF基因的mRNA及蛋白表达水平,探讨siRNA干扰BMI-1基因后对EJ细胞增殖的影响及其调控机制。方法:细胞免疫荧光观察BMI-1、p16INK4a和p14ARF蛋白在EJ细胞... 目的:对比观察膀胱癌EJ细胞及人膀胱移行上皮细胞中BMI-1基因及下游p16INK4a、p14ARF基因的mRNA及蛋白表达水平,探讨siRNA干扰BMI-1基因后对EJ细胞增殖的影响及其调控机制。方法:细胞免疫荧光观察BMI-1、p16INK4a和p14ARF蛋白在EJ细胞中表达情况及定位。Real-time RT-PCR检测EJ细胞及膀胱正常移行上皮细胞中3种基因的表达水平,Western blotting检测蛋白水平。构建干扰BMI-1基因siRNA,通过脂质体转染导入EJ细胞中,设立空白对照和阴性干扰对照组,检测BMI-1及下游p16、p14基因表达水平及蛋白表达水平的变化;以CCK-8检测细胞生长观察siRNA干扰BMI-1表达对EJ细胞增殖的抑制作用;用流式细胞术分析细胞凋亡的改变。结果:BMI-1mRNA及蛋白水平在EJ细胞表达高于膀胱移行上皮细胞,而p16INK4a和p14ARFmRNA及蛋白在EJ细胞表达水平稍低于膀胱移行上皮细胞。siRNA干扰BMI-1后可以上调EJ细胞中其下游p16和p14 mRNA及蛋白水平,使EJ细胞增殖能力下降,细胞凋亡增多。结论:siRNA干扰BMI-1基因表达对EJ细胞的体外生长具有明显的抑制作用,其作用机制与上调其下游p16INK4a、p14ARF基因的表达有关。 展开更多

关键词 B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1 p16INK4a/p14ARF rna干扰 EJ细胞

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谷子RNA干扰相关酶类基因家族的鉴定与分析 被引量：4

12

作者 张司雯 邓欣 +5 位作者 王龙 罗皓天 王禹茜 王月 李清竹 王红艳 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期1380-1392,共13页

Dicers酶类、Argonautes蛋白以及RNA依赖的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerases,RDRs)是RNA干扰(RNA interference,RNAi)机制中重要的核心蛋白,但在谷子(Setaria italica)中尚无系统报道。为了研究谷子中与RNA干扰相关酶类基因的特... Dicers酶类、Argonautes蛋白以及RNA依赖的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerases,RDRs)是RNA干扰(RNA interference,RNAi)机制中重要的核心蛋白,但在谷子(Setaria italica)中尚无系统报道。为了研究谷子中与RNA干扰相关酶类基因的特征,本研究对谷子的RNA干扰相关酶类基因家族进行了蛋白质理化性质、亚细胞定位预测、蛋白质保守基序、基因保守结构域、基因家族成员间系统发育关系以及组织特异性表达谱分析。研究共发现24个与谷子RNA干扰相关酶类基因,包括7个DCL(Dicers),13个AGO(Argonautes),4个RDRs。系统进化树分析表明,这些家族被分为3个进化支。同一家族基因成员具有共同的保守结构域。虽然大多数基因可同时在不同发育时期的叶、茎和穗中表达,但其在各时期的穗和茎中的表达量最高。本研究为详细探讨这些基因在谷子生殖和生长发育中的表观遗传修饰作用提供了理论依据。 展开更多

关键词 rna干扰 基因家族 生物信息学 系统进化树 保守结构域 组织特异性表达 谷子

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RNA甲基化修饰检测研究进展

13

作者 蒲勤丽 陈维贤 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期235-240,共6页

RNA修饰是转录后调控基因表达的重要因素,在表观遗传学领域具有重要的研究意义。目前,许多已知的RNA修饰检测方法依赖抗体的特异性。最常用的是基于RNA甲基化免疫沉淀结合测序法(methylated RNA immunoprecipitation sequencing,MeRIP-s... RNA修饰是转录后调控基因表达的重要因素,在表观遗传学领域具有重要的研究意义。目前,许多已知的RNA修饰检测方法依赖抗体的特异性。最常用的是基于RNA甲基化免疫沉淀结合测序法(methylated RNA immunoprecipitation sequencing,MeRIP-seq),但这种方法也容易产生假阳性和假阴性结果。因此,近年来出现了一系列免抗体的测序方法,以及探索成本低廉、简单易操作的免抗体RNA修饰生物传感检测新方法。此外,特定位点的RNA修饰检测是探明甲基化对疾病具体调控机制的关键,单碱基分辨检测方法构建是必要的前提。本综述总结近年来RNA甲基化修饰特异性检测以及特定位点RNA修饰定量检测的新方法。主要从基于免疫途径、甲基化特异性酶途径、杂交方法、化学处理、标记技术以及RNA修饰原位检测技术进行总结归纳,分析不同检测方法的优点和不足。同时讨论了通用性检测方法及第三代测序用于直接检测RNA甲基化修饰的研究前景。 展开更多

关键词 rna修饰 定量检测 位点特异性分析 高通量测序

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《中国肿瘤临床》文章推荐:环状RNA在头颈部肿瘤侵袭转移中的研究进展

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《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2020年第24期1247-1247,共1页

环状RNA(circRNA,circularRNA,环状核糖核酸)是非编码RNA中的一种,以反向剪接方式形成,具有种类多、丰度高、表达稳定、组织特异性强的特点。根据来源不同,环状RNA可分为来自编码基因即外显子序列、定位于细胞质的ecircRNA,仅含有内含... 环状RNA(circRNA,circularRNA,环状核糖核酸)是非编码RNA中的一种,以反向剪接方式形成,具有种类多、丰度高、表达稳定、组织特异性强的特点。根据来源不同,环状RNA可分为来自编码基因即外显子序列、定位于细胞质的ecircRNA,仅含有内含子序列、主要定位于细胞核的ciRNA和同时具有外显子和内含子序列、主要定位于细胞核的ElciRNA3种类型。随着高通量测序和生物信息技术的发展,已发现环状RNA具有多种生物学功能,如作为竞争的内源性RNA或miRNA海绵、进行蛋白质翻译、与蛋白质结合相互作用、调节母本基因的选择性剪接或转录,从而参与多种疾病的生物学过程. 展开更多

关键词 生物信息技术 蛋白质结合 核糖核酸 非编码rna 选择性剪接 肿瘤侵袭转移 组织特异性 头颈部

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牙颌面骨畸形机制研究的现状与发展

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作者 江凌勇 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期663-675,共13页

牙颌面骨畸形发病率高、病因复杂、症状严重、诊疗困难,缺乏早期干预策略,其主要原因在于相关机制研究较少、不够深入。这类疾病主要表现为骨性畸形、牙列不齐等骨与牙的形态结构、位置关系及口颌功能异常,其中颌面骨与牙-牙周复合体是... 牙颌面骨畸形发病率高、病因复杂、症状严重、诊疗困难,缺乏早期干预策略,其主要原因在于相关机制研究较少、不够深入。这类疾病主要表现为骨性畸形、牙列不齐等骨与牙的形态结构、位置关系及口颌功能异常,其中颌面骨与牙-牙周复合体是两大核心结构,分别决定了颜面美观与咬合功能。颌面骨畸形精准防治需从病因角度研究发育与致病机制,而牙列不齐等牙-牙周复合体畸形矫治则需从临床正畸应力角度研究稳态与应激改建机制,两方面机制研究均可为牙颌面骨畸形防治策略发展提供重要理论基础。既往相关研究常以突变基因与差异因子表达谱的描述为主。近年来,Cre-LoxP等条件性基因编辑技术的发展,使研究者得以在体内直观地评价单一细胞谱系中致病基因的功能,助力牙颌面骨畸形研究从表型层面向分子机制层面推进。该文梳理了国内外学者近年的研究以及笔者所在课题组的研究成果,提出牙颌面骨畸形机制研究“一体两翼”模式,即牙颌面骨畸形为“一体”,颌面骨发育与畸形致病机制为“一翼”,牙-牙周复合体稳态与应激改建机制为“另一翼”;该模式的提出旨在系统性研究疾病的发生发展,探索临床干预新思路。近年的相关研究运用前沿技术从“两翼”出发探究“一体”的机制:一方面,牙颌面骨的胚胎发育来源复杂,组成型条件性模式动物成为研究关键细胞中关键因子功能的重要新策略;另一方面,牙-牙周复合体的成体改建最为频繁,诱导型条件性模式动物为模型时程精准控制提供了技术支持。随着单细胞测序与谱系示踪技术的开发,组织特异性干细胞因其原位、特化的特征渐受青睐,越来越多的研究者开始关注其特征功能,这一发展趋势十分契合“一体两翼”的研究模式,有望加快牙颌面骨畸形的理论基础建设与应用转化。该文就牙颌面骨畸形机制“一体两翼”的研究模式进行述评。 展开更多

关键词 牙颌面骨畸形 牙颌面骨发育 骨稳态 基因编辑 组织特异性干细胞

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胰腺癌中hsa-miR-216与细胞增殖有关的靶基因 被引量：1

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作者 崔鹏 侯宝华 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第4期701-703,共3页

microRNAs是近期新发现的一类18-24个核苷酸、非蛋白质编码的小RNA家族。广泛存在于真核生物中，在物种间具有高度的保守性、时序性和组织特异性。在生命活动中对生长、发育、疾病等具有十分广泛和重要的作用。microRNAs在基因转录后水... microRNAs是近期新发现的一类18-24个核苷酸、非蛋白质编码的小RNA家族。广泛存在于真核生物中，在物种间具有高度的保守性、时序性和组织特异性。在生命活动中对生长、发育、疾病等具有十分广泛和重要的作用。microRNAs在基因转录后水平，通过与靶mRNA结合．对基因的表达起负性调节或基因沉默作用。最近研究显示， 展开更多

关键词 靶基因 细胞增殖 micrornas HSA 胰腺癌 组织特异性 小rna 真核生物

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敲减BMI-1表达诱导HeLa细胞G_1期阻滞 被引量：1

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作者 陈凤花 李一荣 +1 位作者 王琳 胡丽华 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期134-139,共6页

B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1(B-cell specific moloney leukemia virus insertionsite1,BMI-1)在多种恶性肿瘤中高表达.为探索BMI-1在宫颈癌发生发展过程中的生物学作用,将构建成功并已鉴定为有效序列的短发夹状RNA(short hai... B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1(B-cell specific moloney leukemia virus insertionsite1,BMI-1)在多种恶性肿瘤中高表达.为探索BMI-1在宫颈癌发生发展过程中的生物学作用,将构建成功并已鉴定为有效序列的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体BMI-1shRNA2和BMI-1shRNA4,转染人宫颈癌细胞系HeLa并筛选稳定转染细胞株,Western印迹检测BMI-1蛋白表达,实时荧光定量RT-PCR检测周期素依赖性激酶抑制剂p16INK4a(cyclin-dependentkinase inhibitor p16INK4a)、人类端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)、同源盒A9(homeoboxA9,HOXA9)、同源盒B4(homeoboxB4,HOXB4)和同源盒C13(homeoboxC13,HOXC13)基因mRNA的表达变化,PI染色流式细胞仪检测细胞周期变化.结果表明,在稳定转染BMI-1shRNA2、BMI-1shRNA4的HeLa细胞中,显著抑制BMI-1蛋白表达,上调p16INK4a、HOXA9和HOXC13三者mRNA表达,而hTERT和HOXB4两者mRNA的表达水平无明显改变,同时G1期细胞增加、S期细胞减少,提示敲减BMI-1表达诱导HeLa细胞G1期阻滞,BMI-1可能是宫颈癌基因治疗的靶分子. 展开更多

关键词 B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1(BMI-1) 短发夹状rna(shrna) 周期素依赖性激酶抑制剂p16INK4a 同源盒A9 同源盒C13

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DNA分析与扩增

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《生物技术通报》 CAS CSCD 1993年第3期25-28,共4页

关键词 DNA分析 寡核苷酸探针 杆状病毒 定序 rna 加尾 人线粒体 同聚物 位点特异性 粘性末端

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DNA分析与扩增

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《生物技术通报》 CAS CSCD 1992年第8期26-31,共6页

关键词 DNA分析 酵母人工染色体 位点特异性 限制性位点 rna 假阳性克隆 梭菌属 聚合酶链反应 转座子 定序

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核酶:向市场化迈进

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作者 王璋瑜 《生物技术通报》 CAS CSCD 1992年第6期24-24,共1页

Ribozyme(暂译核酶)的鼓吹者一直认为它具有巨大的商业潜力。但是,市场化的实例竟寥寥无几。不过,通往市场的开发工作眼下正在进行中,隐约可以看到核酶在特异性抗病毒方面的应用。开发核酶的一个关键性问题是要确定识别位点的最优长度... Ribozyme(暂译核酶)的鼓吹者一直认为它具有巨大的商业潜力。但是,市场化的实例竟寥寥无几。不过,通往市场的开发工作眼下正在进行中,隐约可以看到核酶在特异性抗病毒方面的应用。开发核酶的一个关键性问题是要确定识别位点的最优长度。与反义寡核苷酸的结合实验提示,要特异地与目标序列结合的话,至少需要11～15个核苷酸的长度。然而,科罗拉多大学的Daniel Herschlag另有所见:越长不见得就越好。以往一直想象在识别序列上添几个碱基一定能提高核酶对各种RNA片段的识别能力。现在,Herschlag氏却发现,超过11～15个碱基之后,碱基越多,识别能力反而越差。他发现。 展开更多

关键词 核酶 科罗拉多大学 识别序列 整合酶基因 识别位点 碱基对 rna 商业潜力 抗病毒 特异性

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