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人组织型纤溶蛋白酶原激活剂基因的克隆与鉴定 被引量:1
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作者 李振林 安靓 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第1期22-24,共3页
目的获得编码人组织型纤溶蛋白酶原激活剂(humantissueplasminogenactivator,ht-PA)的基因。方法从Bowesmelanoma细胞株中提取总RNA,然后通过,RT-TouchdownPCR(RT-TDPCR)法扩增目的片段。所得目的片段酶切后与载体pSP72连接,酶切鉴定并... 目的获得编码人组织型纤溶蛋白酶原激活剂(humantissueplasminogenactivator,ht-PA)的基因。方法从Bowesmelanoma细胞株中提取总RNA,然后通过,RT-TouchdownPCR(RT-TDPCR)法扩增目的片段。所得目的片段酶切后与载体pSP72连接,酶切鉴定并测序。结果酶切图谱与预期的一致,测序结果与Genebank上公布的一致。结论ht-PA克隆成功,为对该基因进一步研究和人工修饰奠定了基础。 展开更多
关键词 组织型纤溶蛋白酶原激活剂 RT-PCR 克隆
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冠状动脉内注射重组人TNK组织型纤溶酶原激活剂及腺苷注射液对急性ST段抬高型心肌梗死的疗效分析 被引量:2
2
作者 李柳 郑庆厚 +3 位作者 战吟戈 王乐 陈勤聪 王硕 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期794-800,共7页
目的评价急诊直接经皮冠脉介入(PPCI)治疗中经指引导管冠状动脉内注射重组人TNK组织型纤溶酶原激活剂及腺苷注射液对急性ST段抬高型心肌梗死(ASTEMI)的疗效。方法选择行急诊PPCI的ASTEMI患者,按照随机数字表法分为对照组和治疗组。对照... 目的评价急诊直接经皮冠脉介入(PPCI)治疗中经指引导管冠状动脉内注射重组人TNK组织型纤溶酶原激活剂及腺苷注射液对急性ST段抬高型心肌梗死(ASTEMI)的疗效。方法选择行急诊PPCI的ASTEMI患者,按照随机数字表法分为对照组和治疗组。对照组给予PPCI术常规治疗,若PPCI后梗死相关动脉(IRA)达到TIMI血流3级,则终止手术;若TIMI血流≤2级,则应用指引导管于冠脉内注射硝普钠、硝酸甘油、替罗非班改善冠状动脉微循环功能障碍(CMD),直到IRA达到TIMI血流3级。治疗组是在PPCI术常规治疗基础上,术中开通IRA后应用指引导管于冠状动脉内注射重组人TNK组织型纤溶酶原激活剂8 mg及腺苷注射液200μg,若IRA达到TIMI血流3级,则终止手术;若TIMI血流≤2级,则再次注射腺苷注射液改善CMD,直到IRA达到TIMI血流3级。观察指标,①心肌损伤指标:术前及术后12、24、36、48 h的血浆肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、N端B型脑钠肽(NT-pro BNP)水平;②心肌灌注指标:术后校正的TIMI帧数(CTFC)、术后90 min IRA导联ST段回落值(STR);③心肌缺血的程度:术后3 d行静息D-SPECT+腺苷负荷D-SPECT检查,观察心肌17节段分布下心肌灌注总积分、心肌缺血总节段数情况;④术后30 d的药物不良反应:皮下瘀斑、牙龈出血、消化道出血、泌尿系出血、血红蛋白下降、脑出血;⑤术后30 d的主要不良心血管事件(MACE):心脏死亡、心肌梗死、心力衰竭、靶血管再次血运重建情况。结果①心肌损伤指标:术前的cTnI、CK-MB、NT-pro BNP水平两组患者差异均无统计学意义(均P>0.05),心肌损伤指标治疗组均在术后12 h显著低于对照组(均P<0.05),之后均趋势下降,术后48 h两组差异均无统计学意义(均P>0.05)。②心肌灌注指标:治疗组术后CTFC均显著优于对照组(P<0.05)。应用秩和检验,治疗组术后90 min STR显著优于对照组(Z=2.437,P=0.014)。③心肌缺血的程度:两组患者在术后3 d行静息D-SPECT+腺苷负荷D-SPECT检查,在心肌17节段分布下心肌灌注总积分、心肌缺血总节段数情况,治疗组在负荷缺血节段数、静息灌注总评分、负荷灌注总评分均显著优于对照组(均P<0.05)。④术后30 d的药物不良反应:两组患者在皮下瘀斑、牙龈出血、消化道出血、泌尿系出血、血红蛋白下降、脑出血发生率均无统计学差异(P>0.05)。⑤术后30 d的MACE情况:两组患者在心脏死亡、心肌梗死、心力衰竭、靶血管再次血运重建情况以及总MACE发生率均无统计学差异(P>0.05)。结论急诊PPCI中经指引导管冠状动脉内注射重组人TNK组织型纤溶酶原激活剂及腺苷注射液对ASTEMI患者安全、有效,可改善心肌损伤、心肌灌注和心肌缺血。 展开更多
关键词 重组人TNK组织激活剂 腺苷注射液 直接经皮冠状动脉介入治疗 冠状动脉微循环功能障碍(CMD)
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老年心肌梗死患者术中冠状动脉内注射重组人TNK组织型纤溶酶原激活剂对微循环的影响
3
作者 王辉 杨宁 +2 位作者 刘迎午 张荣春 李玉明 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2024年第8期857-861,共5页
目的探讨血栓抽吸联合冠状动脉内注射重组人TNK组织型纤溶酶原激活剂对老年ST段抬高型心肌梗死患者急诊经皮冠状动脉介入治疗术中冠状动脉微循环及心功能的影响。方法回顾性选取2021年1月至2023年10月于天津市第三中心医院就诊的并行急... 目的探讨血栓抽吸联合冠状动脉内注射重组人TNK组织型纤溶酶原激活剂对老年ST段抬高型心肌梗死患者急诊经皮冠状动脉介入治疗术中冠状动脉微循环及心功能的影响。方法回顾性选取2021年1月至2023年10月于天津市第三中心医院就诊的并行急诊经皮冠状动脉介入治疗的老年ST段抬高型心肌梗死患者90例,根据经皮冠状动脉介入治疗术中介入策略不同分为单纯血栓抽吸组(抽吸组)46例和血栓抽吸联合冠状动脉内注射重组人TNK组织型纤溶酶原激活剂组(联合组)44例。比较2组一般临床资料,术后90 min ST段回落指数≥70%比例,术后即刻心肌梗死溶栓试验(thrombolysis in myocardial infarction,TIMI)血流分级,术后TIMI心肌灌注分级,校正的TIMI血流帧数,心脏超声指标以及住院期间主要不良心血管事件及出血事件。结果联合组术后ST段回落≥70%、术后即刻TIMI血流分级3级、术后TIMI心肌灌注分级3级比例显著高于抽吸组,校正的TIMI血流帧数显著低于抽吸组(P<0.05);抽吸组术后1周的左心室射血分数显著低于联合组[(52.5±6.2)%vs(58.3±6.4)%,P<0.05],联合组术后1周左心室舒张末期内径显著低于抽吸组[(44.1±3.9)mm vs(51.9±2.5)mm,P<0.05];联合组住院期间主要不良心血管事件发生率显著低于抽吸组(20.5%vs 37.0%,P<0.05)。结论在应用抽吸导管的基础上配合冠状动脉内注射重组人TNK组织型纤溶酶原激活剂可有效降低老年ST段抬高型心肌梗死患者冠状动脉内血栓负荷,改善心肌微循环灌注,降低住院期间主要不良心血管事件发生率且不增加出血风险。 展开更多
关键词 心肌梗死 注射 动脉内 激活剂 重组人TNK组织激活剂
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玻璃体切割术联合视网膜下注射组织型纤溶酶原激活剂对黄斑下出血的疗效观察 被引量:3
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作者 薛晓阳 刘勃实 李筱荣 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期448-452,共5页
目的观察玻璃体切割术(PPV)联合视网膜下注射组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)治疗黄斑下出血(SMH)的疗效。方法采用系列病例观察研究方法,纳入2022年2—11月于天津医科大学眼科医院确诊的SMH患者12例12眼,其中息肉样脉络膜血管病变(PCV)11... 目的观察玻璃体切割术(PPV)联合视网膜下注射组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)治疗黄斑下出血(SMH)的疗效。方法采用系列病例观察研究方法,纳入2022年2—11月于天津医科大学眼科医院确诊的SMH患者12例12眼,其中息肉样脉络膜血管病变(PCV)11例11眼,视网膜大动脉瘤1例1眼;男5例,女7例;年龄为56~78岁,平均(65.67±8.09)岁;人工晶状体眼2眼,合并白内障10眼;高血压9例,糖尿病2例。SMH持续时间为2~25 d,平均(14.67±8.03)d。患眼均行PPV联合视网膜下注射t-PA。术前和术后1、3、6个月,患眼均行最佳矫正视力(BCVA)、眼压、裂隙灯显微镜、间接检眼镜、光学相干断层扫描(OCT)以及超广角眼底成像检查。采用OCT测量中央视网膜厚度(CRT)。观察患者手术后眼部情况以及不良反应发生情况。结果患眼术前及术后1、3、6个月平均BCVA(LogMAR)分别为1.58±0.63、1.12±0.49、1.07±0.44和0.59±0.19,不同时间点患眼BCVA总体比较,差异有统计学意义(F=14.435,P<0.001),其中术后6个月患眼BCVA较术前明显提高,差异有统计学意义(P<0.001)。患眼术前及术后1、3、6个月平均CRT分别为(606.25±204.67)、(379.83±92.05)、(313.75±60.87)和(267.75±73.07)μm,不同时间点患眼CRT总体比较,差异有统计学意义(F=27.720,P<0.001),其中术后1、3、6个月患眼CRT较术前均明显变薄,差异均有统计学意义(均P<0.001)。1眼于术后3个月出现脉络膜上腔出血;随访期间6眼因PCV复发行玻璃体腔注射抗血管内皮生长因子(VEGF)药物,共注射给药16次。术后1、3、6个月内平均抗VEGF注射次数分别为(0.3±0.5)、(1.3±1.4)和(2.7±2.0)次。结论在SMH的治疗中,PPV联合视网膜下注射t-PA可提高患眼BCVA,降低CRT,减轻血凝块对视网膜的损伤,促进患眼术后早期视力恢复,是一种安全、有效的手术方式。 展开更多
关键词 息肉样脉络膜血管病变 组织激活剂 玻璃体切割 黄斑下出血 视网膜下注射 疗效
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肾母细胞瘤组织中组织蛋白酶D、尿激酶型纤溶酶原激活剂及其受体的表达
5
作者 王家祥 李守淼 +1 位作者 李琦 范应中 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2004年第2期217-219,共3页
目的:探讨肾母细胞瘤组织中Cath D、uPA、uPAR的表达。方法:用免疫组化SABC法检测30例肾母细胞瘤及15例非肿瘤肾组织中Cath D、uPA、uPAR的表达。结果:肾母细胞瘤组织中Cath D、uPA、uPAR的阳性表达率分别为50%,53.3%和56.7%。而在... 目的:探讨肾母细胞瘤组织中Cath D、uPA、uPAR的表达。方法:用免疫组化SABC法检测30例肾母细胞瘤及15例非肿瘤肾组织中Cath D、uPA、uPAR的表达。结果:肾母细胞瘤组织中Cath D、uPA、uPAR的阳性表达率分别为50%,53.3%和56.7%。而在非肿瘤肾组织中不表达,差异有统计学意义(P<0.05),3者的阳性表达率与组织学类型密切相关,FH型均低于UH型(P<0.05)..结论:Cath D、uPA、uPAR在肿瘤的浸润和转移中起重要作用,可作为预后的指标。 展开更多
关键词 蛋白酶D 尿激酶激活剂 尿激酶激活剂受体 肾母细胞瘤 免疫组化 组织学类 预后
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视网膜下组织型纤溶酶原激活剂注射治疗息肉状脉络膜血管病变并发黄斑区视网膜下出血的效果
6
作者 郑国丽 王楠 +3 位作者 雷文博 徐瑶 夏晓波 熊思齐 《中南大学学报(医学版)》 CSCD 北大核心 2024年第9期1431-1439,共9页
目的:息肉状脉络膜血管病变(polypoidal choroidal vasculopathy,PCV)是全球中老年人视力丧失的主要原因,在亚洲人中较为常见。当其由于动脉瘤样扩张的血管或管径增宽的小静脉/小动脉破裂时,将导致黄斑区视网膜下出血(submacular hemorr... 目的:息肉状脉络膜血管病变(polypoidal choroidal vasculopathy,PCV)是全球中老年人视力丧失的主要原因,在亚洲人中较为常见。当其由于动脉瘤样扩张的血管或管径增宽的小静脉/小动脉破裂时,将导致黄斑区视网膜下出血(submacular hemorrhage,SMH),并随着时间的延长造成视力不可逆的损伤。本研究探讨经平坦部玻璃体切除(pars-plana vitrectomy,PPV)联合术中视网膜下注射组织型纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activator,t-PA)及术后玻璃体腔注射抗血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)治疗对PCV并发SMH的手术效果及并发症。方法:选取2020年9月至2021年12月中南大学湘雅医院眼科中心收治的PCV合并SMH的13例(13只眼)患者。纳入的患者术中均接受PPV联合视网膜下注射t-PA,术后进行玻璃体腔抗VEGF注射治疗,分析患者术前、术后1周、术后1个月及术后6个月时的最佳矫正视力(best corrected visual acuity,BCVA)、眼压、视网膜下出血吸收、原发病灶进展,手术并发症及术后疗效相关因素。结果:13例患者均完成术后6个月的随访,随访截止时全部患者的视网膜下积血均完全清除;术后1个月及术后6个月的BCVA较术前及术后1周均明显提升(均P<0.05);年龄大于60岁及小于60岁,病灶位于中心凹下及中心凹外的患者最终视力恢复差异有统计学意义(分别为P=0.045和P=0.006);病程、出血范围、术前合并或不合并玻璃体积血(vitreoushemorrhage,VH)与术后6个月视力的恢复无明显相关性(均P>0.05);10例椭圆体带完整,5例视网膜色素上皮层完整,微结构完整与不完整之间术前、术后视力差异无统计学意义(均P>0.05)。最终复查时存在视网膜神经上皮层水肿的有2例,视网膜色素上皮层脱离的1例。术后并发症包括1例黄斑裂孔,1例视网膜色素上皮层撕裂,结论:PPV联合视网膜下t-PA注射,术后玻璃体腔抗VEGF注射能有效清除继发于PCV的SMH,手术并发症较少,在6个月的随访中,患者的视功能可得到显著提高。 展开更多
关键词 息肉状脉络膜血管病变 黄斑区视网膜下出血 组织激活剂 玻璃体切除术 抗血管内皮生长因子
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依达拉奉对脑缺血大鼠重组组织型纤溶酶原激活剂溶栓后金属蛋白酶9表达的影响 被引量:1
7
作者 胡英 李小刚 《中国卒中杂志》 2009年第6期475-479,共5页
目的观察依达拉奉对脑缺血大鼠重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)溶栓后基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达的影响,探讨依达拉奉对溶栓后脑组织的保护作用。方法采用大鼠自体血栓栓塞大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,112只入选的SD大鼠分为假... 目的观察依达拉奉对脑缺血大鼠重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)溶栓后基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达的影响,探讨依达拉奉对溶栓后脑组织的保护作用。方法采用大鼠自体血栓栓塞大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,112只入选的SD大鼠分为假手术组(A组)、模型对照组(B组)、rt-PA溶栓组(C组)及依达拉奉联合rt-PA组(D组),每组大鼠28只。应用红四氮唑染色观察各组大鼠脑梗死的体积百分比,同时进行神经功能缺损程度评分(SSS),免疫组织化学方法检测各组大鼠脑MMP-9的表达及相应病理学检查。结果与模型对照组比较,rt-PA溶栓组比较,脑梗死体积百分比及SSS评分降低,MMP-9表达明显降低(P〈0.05~0.01)。与rt-PA溶栓组比较,依达拉奉联合rt-PA组脑梗死体积百分比及SSS评分降低,MMP-9表达明显降低(P〈0.05~0.01)。结论依达拉奉可有效的抑制rt-PA溶栓后的大鼠脑梗死范围增大,抑制MMP-9的过度表达,从而减轻对血脑屏障的破坏,进而可能延长溶栓治疗的时间窗,进一步阻止脑梗死体积扩大和改善神经功能。 展开更多
关键词 脑缺血 组织激活 基质金属蛋白酶9 依达拉奉
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重组组织型纤溶酶原激活剂超早期静脉溶栓治疗急性脑梗死的疗效研究 被引量:49
8
作者 肖凯文 唐玉兰 张先龙 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第23期2595-2597,共3页
目的评价重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)静脉溶栓治疗急性脑梗死的疗效及安全性。方法将符合入选标准的64例患者随机分为观察组和对照组,观察组采用rt-PA0.9 mg/kg(最大剂量90 mg)治疗,先静脉注射10%(1 min),其余剂量连续静脉滴注,60 ... 目的评价重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)静脉溶栓治疗急性脑梗死的疗效及安全性。方法将符合入选标准的64例患者随机分为观察组和对照组,观察组采用rt-PA0.9 mg/kg(最大剂量90 mg)治疗,先静脉注射10%(1 min),其余剂量连续静脉滴注,60 min滴完;对照组采用拜阿司匹林300 mg;分别于溶栓前及溶栓后90 d,采用中国脑卒中临床神经功能缺损评分量表(CSS)及Barthel指数(BI)对患者进行评定,对比两组的疗效。结果治疗前观察组的CSS评分和BI与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),而治疗后两组的CSS评分、BI间差异均有统计学意义(P<0.01);观察组基本痊愈13例,显著有效11例,有效6例,无变化2例;对照组基本痊愈8例,显著有效9例,有效11例,无变化4例,两组疗效间差异有统计学意义(u=2.34,P<0.05)。结论发病6h内采用rt-PA静脉溶栓治疗急性脑梗死的疗效优于对照组。rt-PA6 h内静脉溶栓治疗急性脑梗死是安全有效的。 展开更多
关键词 重组组织激活剂 静脉 急性脑梗死
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重组组织型纤溶酶原激活剂的纯化和鉴定 被引量:5
9
作者 吴本传 陈昭烈 +1 位作者 刘红 叶建新 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第1期71-75,共5页
介绍一种简便高效的两步纯化重组组织型纤溶酶原激活剂 (rt PA)的方法 ,产rt PA的CHO工程细胞SGG培养上清 ,经微孔玻璃珠 (MPG)吸附和赖氨酸 Sepharose 4B柱亲和吸附色谱纯化 ,纯化倍数平均达到 380倍 ,比活性为 390 0 0 0U/mg蛋白 ,rt... 介绍一种简便高效的两步纯化重组组织型纤溶酶原激活剂 (rt PA)的方法 ,产rt PA的CHO工程细胞SGG培养上清 ,经微孔玻璃珠 (MPG)吸附和赖氨酸 Sepharose 4B柱亲和吸附色谱纯化 ,纯化倍数平均达到 380倍 ,比活性为 390 0 0 0U/mg蛋白 ,rt PA活性回收率达到 1 4 0 % ,经SDS PAGE还原电泳分析主要为t PA蛋白 ,其中高分子t PA占 80 %左右 .用纤维蛋白自显影法检测均有溶纤活性 ,蛋白质印迹证实具有t 展开更多
关键词 组织 激活剂 重组 纯化 鉴定
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高龄急性脑梗死患者重组组织型纤溶酶原激活剂静脉溶栓的疗效及安全性分析 被引量:28
10
作者 杨建道 胡丽燕 +2 位作者 宋彦彦 沈凌达 王少石 《中国卒中杂志》 2014年第11期905-910,共6页
目的探讨高龄脑梗死患者接受标准剂量重组组织型纤溶酶原激活剂(recombinant tissue plasminogen activator,rt-PA)静脉溶栓治疗的疗效和安全性。方法对我院2011年1月~2013年12月连续收治入院的254例急性脑梗死患者的临床资料进行回... 目的探讨高龄脑梗死患者接受标准剂量重组组织型纤溶酶原激活剂(recombinant tissue plasminogen activator,rt-PA)静脉溶栓治疗的疗效和安全性。方法对我院2011年1月~2013年12月连续收治入院的254例急性脑梗死患者的临床资料进行回顾性分析,分为老龄溶栓组118例(60〈年龄≤80岁,rt-PA静脉溶栓治疗);高龄溶栓组62例(年龄〉80岁,rt-PA静脉溶栓治疗);高龄非溶栓组74例(年龄〉80岁,非rt-PA静脉溶栓治疗)。比较3组入院前的一般情况,溶栓治疗前美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)评分,溶栓后出血转化率及治疗7 d内致死性出血率,治疗后90 d改良Rankin量表(modifed Rankin Scale,m RS)评分和90 d的病死率。结果老龄溶栓组、高龄溶栓组和高龄非溶栓组治疗前NIHSS评分(13.0±5.3、15.1±6.6、14.1±6.6;P=0.523)无显著差异,3组的急性期事件出血转化率分别为16.9%、20.9%和21.6%,P=0.675;3组7 d内致死性出血的发生率分别为3.3%,9.6%,7.4%,P=0.20。90 d内的病死率分别为11.0%,22.6%,16.2%,P=0.12。老龄溶栓组和高龄溶栓组治疗后90 d的m RS评分0-2比值分别为56.8%和38.7%,两组比值比(odds ratio,OR)为2.08;95%可信区间(confidence interval,CI)为1.11~3.86,P=0.021;两组治疗后90 d m RS评分中位数比较:2 vs 3,P=0.025。高龄溶栓组和高龄非溶栓组90 d的m RS评分0~2比值分别为38.7%和21.6%,OR 1.81,95%CI 0.80~4.06,P=0.098;90 d m RS评分中位数比较:3vs 5,P=0.008。结论与未溶栓的高龄患者相比,急性缺血性卒中老龄和高龄患者接受rt-PA治疗不增加急性期出血转化率和病死率。老龄组比高龄组rt-PA治疗获益大,高龄溶栓组比非溶栓组获益大。高龄组rt-PA治疗可以改善患者90 d生活自理能力且不增加病死率。 展开更多
关键词 急性脑梗死 高龄 重组组织激活剂 静脉 出血转化
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组织型纤溶酶原激活剂在人胚胎表皮角质形成细胞分化中的作用 被引量:6
11
作者 宋川 杨恬 杨进 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期623-626,共4页
目的探讨组织型纤溶酶原激活剂(tPA)参与人表皮角质形成细胞(KC)分化调控的作用。方法采用免疫细胞化学(ICC)及原位杂交(ISH)技术定性、定量检测早、中、晚期人胚胎表皮KC中tPA蛋白及mRNA的表达。结果(1)tPA在人胚胎期表皮KC中表达量明... 目的探讨组织型纤溶酶原激活剂(tPA)参与人表皮角质形成细胞(KC)分化调控的作用。方法采用免疫细胞化学(ICC)及原位杂交(ISH)技术定性、定量检测早、中、晚期人胚胎表皮KC中tPA蛋白及mRNA的表达。结果(1)tPA在人胚胎期表皮KC中表达量明显高于出生后期,胚胎期的表达高峰在胚胎中期,胚胎晚期其蛋白水平开始降低,而tPAmRNA表达则维持在相对较高水平。(2)tPA在人胚胎期主要存在于分化程度高的表皮浅层KC内。(3)tPA聚集于KC胞膜下方。结论tPA参与表皮KC分化的调控。 展开更多
关键词 组织激活剂 角质形成细胞 细胞分化 人胚胎
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人组织型纤溶酶原激活剂乳腺定位表达载体的构建及其表达 被引量:3
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作者 王凯 赖良学 +5 位作者 付殿国 乔贵林 安靓 扈荣良 杨庆章 殷震 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1999年第10期52-56,共5页
将编码人组织型纤溶酶原激活剂(tPA) 的1766bp 基因片段插入大鼠β-乳酪蛋白 (β-Casein) 启动子的下游及pSVL质粒的PolyA上游。构建了pβ-Casein-PA1、pβ-Casein-PA2 两个乳... 将编码人组织型纤溶酶原激活剂(tPA) 的1766bp 基因片段插入大鼠β-乳酪蛋白 (β-Casein) 启动子的下游及pSVL质粒的PolyA上游。构建了pβ-Casein-PA1、pβ-Casein-PA2 两个乳腺定位表达载体。将其分别与脂质体混合制备转染液后, 直接注入妊娠29 天的青紫蓝母兔乳腺中。结果表明:两种载体均能在乳腺中表达,且具有溶纤活性,表达量在200—500ng/m l之间。这不仅证明了所构建载体可用于转基因乳腺生物反应器的建立, 而且提示, 展开更多
关键词 组织 激活剂 载体 乳腺定位表达
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重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体对家兔纤溶和凝血系统活性的影响 被引量:2
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作者 董六一 范丽 +5 位作者 江勤 方明 岑德意 陈飞虎 智强 陈志武 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2004年第7期778-780,共3页
目的 :观察重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体 (reteplase ,Ret)对家兔纤溶和凝血系统活性的影响。方法 :采用常规方法测定家兔血液纤溶和凝血系统相关参数指标。结果 :Ret(3.75、7.5 0、15 .0MIU·kg-1)可明显降低纤溶酶原含量 ... 目的 :观察重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体 (reteplase ,Ret)对家兔纤溶和凝血系统活性的影响。方法 :采用常规方法测定家兔血液纤溶和凝血系统相关参数指标。结果 :Ret(3.75、7.5 0、15 .0MIU·kg-1)可明显降低纤溶酶原含量 ,使血浆纤维蛋白降解产物转呈阳性反应 ,缩短优球蛋白溶解时间 ,同时延长血浆凝血酶时间 ,凝血酶原时间及活化部分凝血活酶时间。结论 展开更多
关键词 重组人组织激活剂缺失变体 组织激活剂 系统 凝血系统 家兔
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重组组织型纤溶酶原激活剂治疗心源性脑栓塞的疗效与安全性分析 被引量:11
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作者 唐澍 闫立荣 +2 位作者 孙玉衡 陈捷 胡洪涛 《中国卒中杂志》 2013年第5期360-367,共8页
目的 探讨重组组织型纤溶酶原激活剂(recombinant tissue plasminogen activator,rt-PA)治疗心源性脑栓塞的有效性与安全性。方法 采用回顾性分析方法,非连续性选取北京积水潭医院2007年1月~2011年12月间发病4.5~12h内的(前循环梗... 目的 探讨重组组织型纤溶酶原激活剂(recombinant tissue plasminogen activator,rt-PA)治疗心源性脑栓塞的有效性与安全性。方法 采用回顾性分析方法,非连续性选取北京积水潭医院2007年1月~2011年12月间发病4.5~12h内的(前循环梗死发病4.5h内,后循环12h内)心源性脑栓塞患者45例,其中接受rt-PA溶栓治疗的22例患者为溶栓组,接受常规二级预防的23例作为对照组。收集患者牛津郡社区卒中项目(Oxfordshire Community Stroke Project,OCSP)分型、危险因素、既往史、用药史和神经功能缺损情况。比较两组患者基线(治疗前)、24h、90d神经系统功能缺损情况、预后良好的比例及两组间梗死后出血转化(hemorrhagic transformation,HT)的发生率以及90d患者死亡率。结果两组患者基线美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)评分及OCSP分型差异均无显著性。发病24h后,溶栓组NIHSS改善分值[4.5(-1.5,8)]较对照组[0(0,3)]差异具有显著性(P=0.04)。溶栓组早期改善百分比(54.55%)高于对照组(34.78%),但差异无显著性。发病90d,溶栓组NIHSS改善分值[9(7,11)]较对照组[3.5(2,4.75)]差异具有显著性(P<0.01)。溶栓组预后良好百分比(22.7%~36.4%)较对照组(17.4%~26.1%)升高,但差异无显著性。溶栓组和对照组HT患者均为4例,其中症状性出血转化(symptomatic intracranial hemorrhage,sICH)每组各3例,溶栓组4例HT患者均无糖尿病病史,对照组4例患者均有糖尿病病史,6例sICH患者收缩压均大于140mmHg。发病90d,两组患者死亡例数均为3例,6例死亡患者入院时NIHSS分值普遍偏高,且梗死类型以完全前循环梗死(total anterior circulation infarct,TACI)为主。结论 rt-PA用于治疗心源性脑栓塞能够改善发病24h、90d的神经功能缺损程度,使用rt-PA相对安全。 展开更多
关键词 重组组织激活剂 脑梗死 心源性脑栓塞 静脉
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注射用重组人组织型纤溶酶原激活剂在高龄脑梗死患者溶栓中的临床价值 被引量:11
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作者 于路 张剑平 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期830-833,836,共5页
目的探讨高龄急性脑梗死患者溶栓治疗的安全性及有效性,并对比不同剂量注射用重组人组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)的临床疗效。方法 116例患者,年龄76~85岁,均伴有瘫痪,分为3组:A组32例,给予注射用rt-PA 0.9 mg/kg;B组48例,给予rt-PA 0.... 目的探讨高龄急性脑梗死患者溶栓治疗的安全性及有效性,并对比不同剂量注射用重组人组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)的临床疗效。方法 116例患者,年龄76~85岁,均伴有瘫痪,分为3组:A组32例,给予注射用rt-PA 0.9 mg/kg;B组48例,给予rt-PA 0.6 mg/kg;C组36例给予阿司匹林、血栓通治疗。分别比较3组患者治疗前与治疗后24 h、7 d、90 d的美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分,治疗前与治疗后90 d改良Rankin量表(mRS)评分,并进行疗效评定。结果 3组患者治疗前与治疗后(24 h、7 d、90 d)NIHSS评分比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后90 d mRS评分:A组14例(43.75%)、B组23例(47.92%)、C组8例(22.22%)均恢复独立生活能力(mRS评分≤2分)。3组的颅内出血率分别为37.50%、14.58%、8.33%;症状性颅内出血率为18.75%、6.25%、0;差异均有统计学意义(P<0.05)。3组患者90 d病死率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 rt-PA在高龄脑梗死患者溶栓中,尤其是小剂量溶栓时与对照组相比更为有效,且较为安全。 展开更多
关键词 老年 血栓解疗法 组织激活剂 卒中
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里氏木霉(Trichoderma reesei)306产组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)液体发酵条件的优化 被引量:2
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作者 冮洁 杜连祥 +3 位作者 路福平 邹亚杰 贾丹丹 姚蕾 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期29-33,共5页
采用正交设计和响应面分析等实验方法对基因工程菌株里氏木霉 (Trichodermareesei)30 6产组织型纤溶酶原激活剂 (t PA)的液体发酵条件进行了优化。确定了适宜的培养基配方和最佳发酵工艺条件。在优化发酵条件下 ,摇瓶液体发酵液中的t P... 采用正交设计和响应面分析等实验方法对基因工程菌株里氏木霉 (Trichodermareesei)30 6产组织型纤溶酶原激活剂 (t PA)的液体发酵条件进行了优化。确定了适宜的培养基配方和最佳发酵工艺条件。在优化发酵条件下 ,摇瓶液体发酵液中的t PA酶活力达 3386 91IU/mL ,比初始发酵条件下酶活力提高上千倍。 展开更多
关键词 里氏木霉 组织激活剂 液体发酵 培养基配方 工艺优化
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用静息细胞培养法研究影响组织型纤溶酶原激活剂生物合成的因素 被引量:3
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作者 冮洁 杜连祥 +1 位作者 路福平 刘晓红 《华东理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第2期245-248,262,共5页
建立了基因工程菌株里氏木霉(Trichodermareesei)306生物合成组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)的静息细胞培养系统。确定静息细胞培养基的成分为:葡萄糖1.0g/L,尿素1.0g/L,K2HPO41.0g/L;静息细胞培养的条件为:选择发酵30h的菌体,10%的接种量,... 建立了基因工程菌株里氏木霉(Trichodermareesei)306生物合成组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)的静息细胞培养系统。确定静息细胞培养基的成分为:葡萄糖1.0g/L,尿素1.0g/L,K2HPO41.0g/L;静息细胞培养的条件为:选择发酵30h的菌体,10%的接种量,pH5.4,150r/min,28°C静息培养12h。并在该静息细胞培养系统中,研究了糖类、有机酸、氨基酸和金属离子等因素对里氏木霉306生物合成组织型纤溶酶原激活剂的影响。 展开更多
关键词 里氏木霉 组织激活剂 静息细胞培养系统
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重组组织型纤溶酶原激活剂联合依达拉奉治疗急性脑梗死疗效观察 被引量:4
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作者 吴景芬 常有军 +2 位作者 吴文斌 杨友松 陈祥慧 《中国康复理论与实践》 CSCD 2009年第2期158-159,共2页
目的观察重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)及rt-PA联合依达拉奉治疗急性脑梗死的临床疗效及安全性。方法60例符合溶栓条件的急性脑梗死患者分为rt-PA治疗组(予rt-PA治疗)和联合治疗组(予rt-PA联合依达拉奉治疗),各30例,采用欧洲脑卒中... 目的观察重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)及rt-PA联合依达拉奉治疗急性脑梗死的临床疗效及安全性。方法60例符合溶栓条件的急性脑梗死患者分为rt-PA治疗组(予rt-PA治疗)和联合治疗组(予rt-PA联合依达拉奉治疗),各30例,采用欧洲脑卒中临床神经缺损评分标准(ESS)和Barthel指数(BI)评定疗效。结果联合治疗组治疗后21d和90d的ESS积分高于rt-PA治疗组(P<0.05),90d时的疗效优于rt-PA治疗组(P<0.05)。两组患者的不良反应无显著性差异。结论rt-PA联合依达拉奉治疗急性脑梗死更安全有效,能改善患者的预后。 展开更多
关键词 重组组织激活剂(rt—PA) 依达拉奉 急性脑梗死
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重组人组织型纤溶酶原激活剂(rht-PA)及其突变体的纯化 被引量:3
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作者 朱恒奇 徐秀英 黄培堂 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期82-86,共5页
稳定高效表达重组人组织型纤溶酶原激活剂 (rht PA)的CHO细胞株和表达组合突变体的细胞株进行了 3L转瓶培养 .将培养上清分别进行了Lys Sepharose 4B亲和层析和Zn2 + Sepharose 4B层析两步纯化 ,rht PA纯度提高了 5 34倍 ,比活达 2 5&... 稳定高效表达重组人组织型纤溶酶原激活剂 (rht PA)的CHO细胞株和表达组合突变体的细胞株进行了 3L转瓶培养 .将培养上清分别进行了Lys Sepharose 4B亲和层析和Zn2 + Sepharose 4B层析两步纯化 ,rht PA纯度提高了 5 34倍 ,比活达 2 5× 10 5IU mg ,产率为 73% ;突变体纯度提高了1119倍 ,比活达 5 9× 10 5IU mg ,产率为 6 9% .纯化产物SDS PAGE分析显示 ,rht PA和突变体基本都呈单一条带 ,扫描分析均达到 98%以上纯度 .rht PA和突变体在纯化系统中的行为作对照分析发现 ,突变体的构建思想在Lys Sepharose 4B亲和层析过程中有充分体现 .这两步层析组合是很好的纯化t PA及其突变体的方法 ,尤其是Lys Sepharose 展开更多
关键词 组织激活剂 突变体 纯化
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组织型纤溶酶原激活剂cDNA克隆及其乳腺特异性表达载体的构建 被引量:2
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作者 丁一 刘书漫 +2 位作者 王萍 朱晓燕 张钦宪 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2004年第3期391-393,共3页
目的 :克隆组织型纤溶酶原激活剂 (tissue typeplasminogenactivator,tPA)基因及构建其乳腺特异性表达载体。方法 :以PCR技术克隆 2 .1kbtPAcDNA片段 ;应用体外连接技术 ,连接乳腺特异性表达载体pWA和 2 .1kbtPAcDNA片段 ;转化连接产物 ... 目的 :克隆组织型纤溶酶原激活剂 (tissue typeplasminogenactivator,tPA)基因及构建其乳腺特异性表达载体。方法 :以PCR技术克隆 2 .1kbtPAcDNA片段 ;应用体外连接技术 ,连接乳腺特异性表达载体pWA和 2 .1kbtPAcDNA片段 ;转化连接产物 ,以内切酶酶切、琼脂糖电泳及插入片段序列分析鉴定阳性克隆。结果 :琼脂糖电泳显示 ,2 .1kbtPAcDNA片段克隆成功 ;内切酶酶切片段与预期片段长度一致 ;插入片段序列与文献报道一致。结论 展开更多
关键词 组织激活剂 乳腺生物反应器 表达载体
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