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凋亡细胞线粒体膜电势与物理参数变化的可视化研究 被引量:2
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作者 梁佩燕 曾耀英 +1 位作者 王通 楼湘莹 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期105-109,120,共6页
目的:通过放线菌酮(CHX)诱导HL-60细胞凋亡模型,探讨线粒体膜电势与细胞物理参数的变化。方法:建立CHX诱导HL-60细胞凋亡模型。于6和18 h时点,利用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测凋亡和晚期凋亡细胞及坏死细胞比率;利用JC-1染色... 目的:通过放线菌酮(CHX)诱导HL-60细胞凋亡模型,探讨线粒体膜电势与细胞物理参数的变化。方法:建立CHX诱导HL-60细胞凋亡模型。于6和18 h时点,利用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测凋亡和晚期凋亡细胞及坏死细胞比率;利用JC-1染色流式细胞术,通过对对照组和CHX组FL1/FL2散点图上具有不同荧光强度的细胞群划分为R2,R3,R4 3个细胞群,并分别对这些细胞群在FSC/SSC二维散点图上进行反向设门,分析细胞凋亡过程中线粒体膜电势变化与细胞物理参数间的关系。通过透射电镜观察凋亡细胞形态结构改变。结果:CHX可引起HL-60细胞凋亡;与对照组相比,CHX组R2和R3细胞群物理参数为FSC和SSC均显著增高,但线粒体膜电势无显著性差异,P>0.05;R4细胞群则为FSC降低,SSC增高,P<0.05,且线粒体膜电势降低。CHX可诱导HL-60细胞体积变小,皱缩,并出现凋亡特征,如核固缩形成新月体和质膜"出芽"现象。结论:流式细胞仪FSC/SSC图可视为细胞指纹图谱。本模型中线粒体膜电势降低的细胞变小,且颗粒程度增加,可能与细胞凋亡过程中的结构改变有关。 展开更多
关键词 线粒体膜电势 细胞物理参数 放线菌酮 HL-60细胞
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阿片类药物长期作用对μ-中国仓鼠卵细胞基因表达的影响及与PC12细胞线粒体膜电势之间的关系 被引量:1
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作者 陆久怡 叶菜英 +3 位作者 杨惠芬 武文君 刘丽云 张德昌 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期215-219,共5页
目的 从基因水平入手,筛选 DAMGO长期作用后μ-中国仓鼠卵细胞 (μ- CHO)差异表达的基因,初步研究阿片类药物与 PC12细胞线粒体膜电势之间的关系。方法 选用μ受体特异性激动剂 DAMGO长期( 72 h)作用于μ- CHO细胞,模拟耐受成瘾。... 目的 从基因水平入手,筛选 DAMGO长期作用后μ-中国仓鼠卵细胞 (μ- CHO)差异表达的基因,初步研究阿片类药物与 PC12细胞线粒体膜电势之间的关系。方法 选用μ受体特异性激动剂 DAMGO长期( 72 h)作用于μ- CHO细胞,模拟耐受成瘾。利用差异显示 PCR、克隆、 Northern印迹分析等找出表达水平有改变的基因,测序,并与 NIH Blast数据库中序列比对。利用激光共聚焦显微成像、线粒体膜电势测定等方法,观察吗啡短期与长期作用 PC12细胞线粒体膜电势的变化。结果其中一条基因在用 DAMGO长期刺激μ- CHO细胞后基因水平出现上调,并与大鼠线粒体膜上 H+ /磷酸基同向转运蛋白编码基因同源性很高。线粒体膜电势测定发现,用 10- 6~ 10- 4 mol/L吗啡短时间( 2 h)作用 PC12细胞后,细胞内线粒体膜电势部分丧失或完全丧失;长时间( 12~ 60 h)作用后,膜电势出现从部分丧失、完全丧失到逐步恢复的现象,上述现象均能被阿片受体拮抗剂纳洛酮阻断。结论 初步提示阿片类药物长期作用含有阿片受体的细胞后,可导致细胞线粒体功能改变,推测阿片类药物可能影响细胞线粒体电子转移、 ATP合成过程,此过程可能与阿片类药物长期激活阿片受体导致的成瘾、耐受有关。 展开更多
关键词 阿片类药物 耐受 差示PCR 线粒体膜电势 PC12细胞
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原子力显微镜检测α-突触核蛋白转基因鼠线粒体微观结构的变化 被引量:2
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作者 高歌 汪志鹏 +2 位作者 段春礼 鲁玲玲 杨慧 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第6期806-811,共6页
目的使用原子力显微镜检测α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)转基因小鼠模型中,皮质线粒体表面微观结构的变化。方法提取野生型和转基因小鼠皮质细胞线粒体,使用共聚焦显微镜检测其膜电势变化,使用原子力显微镜的敲击模式检测线粒体... 目的使用原子力显微镜检测α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)转基因小鼠模型中,皮质线粒体表面微观结构的变化。方法提取野生型和转基因小鼠皮质细胞线粒体,使用共聚焦显微镜检测其膜电势变化,使用原子力显微镜的敲击模式检测线粒体膜表面的微观结构。结果 JC-1染色法检测线粒体膜电势结果显示,转基因小鼠线粒体膜电势与野生组相比降低20.4%,差异有统计学意义(P<0.01);原子力显微镜观察结果显示,转基因小鼠线粒体长度与野生组相比增加,表面光滑度减低,线粒体膜孔增多(P<0.05)。结论α-Syn的转基因小鼠线粒体膜电势减低,线粒体膜完整性受到破坏。在原子力显微镜敲击模式下检测离体线粒体,能反映出转基因小鼠线粒体膜表面微观结构的变化。 展开更多
关键词 原子力显微镜 线粒体 Α-突触核蛋白 线粒体膜电势
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甘草查尔酮B体外细胞毒作用研究 被引量:6
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作者 冉芳 杨帆 +3 位作者 杨新惠 王振华 张波 郑秋生 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2013年第3期355-358,共4页
为考察甘草查尔酮B(Licochalcone B)对不同肿瘤细胞增殖的抑制作用,初步探讨其作用机制,本研究采用MTT染色法检测甘草查尔酮B对5种肿瘤细胞人乳腺癌细胞(MCF-7)、人膀胱移行细胞癌细胞(T24)、人宫颈癌细胞(HeLa)、高转移性小鼠黑色素瘤... 为考察甘草查尔酮B(Licochalcone B)对不同肿瘤细胞增殖的抑制作用,初步探讨其作用机制,本研究采用MTT染色法检测甘草查尔酮B对5种肿瘤细胞人乳腺癌细胞(MCF-7)、人膀胱移行细胞癌细胞(T24)、人宫颈癌细胞(HeLa)、高转移性小鼠黑色素瘤细胞(B16F10)、小鼠黑色素瘤细胞(B16F0)的增殖抑制作用;台盼蓝拒染法测定甘草查尔酮B对B16F0细胞的致死率;相差显微镜观察细胞形态;JC-1染色测定线粒体膜电势(△Ψm)。结果表明:甘草查尔酮B(5、7.5、10、12.5、15μg/mL)可浓度依赖性地抑制5种不同肿瘤细胞的增殖,在最高浓度时,抑制率分别为67.52%、67.24%、65.41%、62.81%、68.13%;随甘草查尔酮B处理浓度的增加,B16F0细胞死亡率升高,细胞皱缩,脱落细胞增多;甘草查尔酮B可明显降低B16F0细胞的线粒体膜电势,且呈现浓度依赖性。以上结果显示:甘草查尔酮B对多种肿瘤细胞体外增殖均有明显的抑制作用,这可能与其所致的线粒体损害有关。 展开更多
关键词 甘草查尔酮B B16F0细胞 增殖抑制 线粒体膜电势
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A549/DDP细胞的抗凋亡特性与其pH_i和[Ca^(2+)]_i变化相关 被引量:4
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作者 黄振华 黄有国 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第5期722-727,共6页
以临床用药剂量 (30 μmol/L)的顺铂处理敏感的人肺腺癌细胞A5 49和抗顺铂的A5 49/DDP细胞 ,在相同条件下培养 .对培养不同时间的两株细胞DNA琼脂糖凝胶电泳分析的结果表明 ,前者在培养 12h后即呈现DNA梯子 ,而后者在培养 48h后却未见... 以临床用药剂量 (30 μmol/L)的顺铂处理敏感的人肺腺癌细胞A5 49和抗顺铂的A5 49/DDP细胞 ,在相同条件下培养 .对培养不同时间的两株细胞DNA琼脂糖凝胶电泳分析的结果表明 ,前者在培养 12h后即呈现DNA梯子 ,而后者在培养 48h后却未见凋亡特征 .用流式细胞计检测其凋亡峰也获得相似的结果 .当测定与凋亡相关的生物化学和生物物理变化时发现对顺铂敏感的A5 49细胞的线粒体膜电势显著降低 ,胞内更加酸化且胞内钙离子浓度升高 ;而抗顺铂药物的A5 49/DDP细胞的线粒体膜电势和pH值却维持在相对较高的水平 ,而其胞内钙离子浓度随培养时间的延长下降 .这些结果表明 ,抗顺铂的人肺腺癌A5 49/DDP细胞的抗凋亡特性与其胞内的相对碱化和较高的线粒体膜电势 ,以及胞内钙离子浓度的降低相关 .这些特性可能参与了A5 展开更多
关键词 肺腺癌A549细胞 细胞凋亡 PH [CA^2+]I 线粒体膜电势 耐药性 抗凋亡 顺铂
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