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重组含糖识别结构域的人源半乳糖凝集素-3在糖蛋白/糖肽富集中的应用
被引量：
3
1
作者
赵洋
张勇
+3 位作者
王明超
孟波
应万涛
钱小红
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第12期1197-1205,共9页
植物凝集素是广泛使用的糖蛋白富集和识别材料,动物凝集素则较少被尝试用于糖蛋白富集。基于人源半乳糖凝集素-3的糖识别结构域(CRD),设计了两种重组凝集素:Gal3C(一个CRD)和Tetra-Gal3C(四重串联CRD)。通过将两种凝集素固定于链霉亲和...
植物凝集素是广泛使用的糖蛋白富集和识别材料,动物凝集素则较少被尝试用于糖蛋白富集。基于人源半乳糖凝集素-3的糖识别结构域(CRD),设计了两种重组凝集素:Gal3C(一个CRD)和Tetra-Gal3C(四重串联CRD)。通过将两种凝集素固定于链霉亲和素琼脂糖小球上,构造了富集糖蛋白的重组凝集素亲和柱。使用凝胶电泳、免疫印迹以及生物质谱技术对重组凝集素的生物特征及其糖蛋白富集能力进行了表征与评价,发现两种类型的重组凝集素对糖蛋白/糖肽都有良好的富集效果,并具有较高的特异性和灵敏度。相对于Gal3C而言,TetraGal3C由于具有四重串联的CRD结构域,表现出更高的糖蛋白/糖肽富集能力。该凝集素亲和柱成功用于人肝癌细胞系HepG2的糖蛋白富集,表明重组凝集素具有从复杂生物样本中选择性识别和富集糖蛋白/糖肽的能力。
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关键词
液相色谱-质谱
半乳
糖
凝集素-3
糖
识别
结构域
糖
蛋白富集
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职称材料
半乳糖凝集素糖结合的新模式：一个糖结合域的双重配体结合(英文)
被引量：
1
2
作者
卞乘凤
张英
+1 位作者
李德峰
王大成
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2011年第9期810-815,共6页
半乳糖凝集素家族通过糖识别结构域(CRD)可以专一性识别和结合含β-半乳糖的多糖配体来发挥其生物学功能.到目前发现的CRD对β-半乳糖的识别模式是非常保守的,在结构已知的半乳糖凝集素结构中,一个CRD只能结合一个多糖配体分子.最近,通...
半乳糖凝集素家族通过糖识别结构域(CRD)可以专一性识别和结合含β-半乳糖的多糖配体来发挥其生物学功能.到目前发现的CRD对β-半乳糖的识别模式是非常保守的,在结构已知的半乳糖凝集素结构中,一个CRD只能结合一个多糖配体分子.最近,通过对人源半乳糖凝聚素-3 CRD与对硝基TF二糖(TFN)复合物的晶体结构解析首次发现,一个CRD可以同时结合2个TFN分子.与这2个TFN分子有双向结合的残基突变体E165A结构分析显示,一个残基的突变引起的结构上的微小变化会使结合位点2丧失结合糖底物的能力,而位点1的配体结合却不受影响.这表明,结合位点1对糖底物保守的识别和结合是基本的、主要的,而结合位点2对于糖有条件的结合,是额外的、次要的.序列比对和立体化学分析显示,参与新位点2结合的关键残基在其他半乳糖凝集素分子中都是保守的,而它们参与糖配体结合并不常见,表明它们作用的发挥是有条件的.可能在复杂寡聚结构的情况下,如有多重分支结构,双重结合位点将有利于对这类配体分子的辨识和结合,已有一系列研究报道,具有分支结构的寡糖与半乳糖分子的亲和势明显高于单价糖配体,与上述分析相一致.对这类双重位点糖结合的可能生物学意义进行了讨论.
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关键词
半乳
糖
凝集素家族
糖
识别
结构域
(
crd
)
β-半乳
糖
对硝基TF二
糖
(TFN)
双重结合模式
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职称材料
题名
重组含糖识别结构域的人源半乳糖凝集素-3在糖蛋白/糖肽富集中的应用
被引量：
3
1
作者
赵洋
张勇
王明超
孟波
应万涛
钱小红
机构
北京工业大学生命科学与生物工程学院
军事科学院军事医学研究院生命组学研究所
出处
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第12期1197-1205,共9页
基金
国家重点研发计划(2017YFF0205400,2016YFA0501300)
国家自然科学基金重点项目(81530021)
军事医学创新工程专项(16CXZ027).
文摘
植物凝集素是广泛使用的糖蛋白富集和识别材料,动物凝集素则较少被尝试用于糖蛋白富集。基于人源半乳糖凝集素-3的糖识别结构域(CRD),设计了两种重组凝集素:Gal3C(一个CRD)和Tetra-Gal3C(四重串联CRD)。通过将两种凝集素固定于链霉亲和素琼脂糖小球上,构造了富集糖蛋白的重组凝集素亲和柱。使用凝胶电泳、免疫印迹以及生物质谱技术对重组凝集素的生物特征及其糖蛋白富集能力进行了表征与评价,发现两种类型的重组凝集素对糖蛋白/糖肽都有良好的富集效果,并具有较高的特异性和灵敏度。相对于Gal3C而言,TetraGal3C由于具有四重串联的CRD结构域,表现出更高的糖蛋白/糖肽富集能力。该凝集素亲和柱成功用于人肝癌细胞系HepG2的糖蛋白富集,表明重组凝集素具有从复杂生物样本中选择性识别和富集糖蛋白/糖肽的能力。
关键词
液相色谱-质谱
半乳
糖
凝集素-3
糖
识别
结构域
糖
蛋白富集
Keywords
liquid chromatography-mass spectrometry(LC-MS)
galectin-3(Gal-3)
carbohydrate recognition domain(
crd
)
glycoprotein enrichment
分类号
O658 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
半乳糖凝集素糖结合的新模式：一个糖结合域的双重配体结合(英文)
被引量：
1
2
作者
卞乘凤
张英
李德峰
王大成
机构
中国科学院生物物理研究所
中国科学院研究生院
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2011年第9期810-815,共6页
基金
supported by grants from National Basic Research Program of China(30800170)
The Special Project on Drug Discovery from The Ministry of Public Health of China(2009ZX09103-676)~~
文摘
半乳糖凝集素家族通过糖识别结构域(CRD)可以专一性识别和结合含β-半乳糖的多糖配体来发挥其生物学功能.到目前发现的CRD对β-半乳糖的识别模式是非常保守的,在结构已知的半乳糖凝集素结构中,一个CRD只能结合一个多糖配体分子.最近,通过对人源半乳糖凝聚素-3 CRD与对硝基TF二糖(TFN)复合物的晶体结构解析首次发现,一个CRD可以同时结合2个TFN分子.与这2个TFN分子有双向结合的残基突变体E165A结构分析显示,一个残基的突变引起的结构上的微小变化会使结合位点2丧失结合糖底物的能力,而位点1的配体结合却不受影响.这表明,结合位点1对糖底物保守的识别和结合是基本的、主要的,而结合位点2对于糖有条件的结合,是额外的、次要的.序列比对和立体化学分析显示,参与新位点2结合的关键残基在其他半乳糖凝集素分子中都是保守的,而它们参与糖配体结合并不常见,表明它们作用的发挥是有条件的.可能在复杂寡聚结构的情况下,如有多重分支结构,双重结合位点将有利于对这类配体分子的辨识和结合,已有一系列研究报道,具有分支结构的寡糖与半乳糖分子的亲和势明显高于单价糖配体,与上述分析相一致.对这类双重位点糖结合的可能生物学意义进行了讨论.
关键词
半乳
糖
凝集素家族
糖
识别
结构域
(
crd
)
β-半乳
糖
对硝基TF二
糖
(TFN)
双重结合模式
Keywords
galectins, β-galactosides, carbohydrate recognition domain （
crd
）, glycan TFN, doublet binding pattern
分类号
Q5 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组含糖识别结构域的人源半乳糖凝集素-3在糖蛋白/糖肽富集中的应用
赵洋
张勇
王明超
孟波
应万涛
钱小红
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2018
3
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职称材料
2
半乳糖凝集素糖结合的新模式：一个糖结合域的双重配体结合(英文)
卞乘凤
张英
李德峰
王大成
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2011
1
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