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两优培九剑叶衰老过程光合膜功能及蛋白质复合物的变化 被引量:9
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作者 叶露幻 沈唯军 +3 位作者 郑宝刚 宋涛 陈国祥 吕川根 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期2030-2038,共9页
为探讨高产杂交稻两优培九在衰老过程中,剑叶光合膜蛋白质复合物的含量变化规律及其与光能吸收、转化、传递的关系,以大田栽培自然衰老剑叶为材料,利用活体叶绿素荧光动力学技术,并结合类囊体膜蛋白质复合物蓝绿温和胶电泳分析。结果表... 为探讨高产杂交稻两优培九在衰老过程中,剑叶光合膜蛋白质复合物的含量变化规律及其与光能吸收、转化、传递的关系,以大田栽培自然衰老剑叶为材料,利用活体叶绿素荧光动力学技术,并结合类囊体膜蛋白质复合物蓝绿温和胶电泳分析。结果表明,两优培九剑叶叶绿素含量、光合性能、类囊体膜蛋白稳定性等都在抽穗期达到顶峰,随后开始衰退,在扬花期、灌浆期尚保持较高水平,而进入籽粒成熟阶段衰退明显;随着衰老进程,光合膜蛋白质复合物有序非同步降解,稳定性为LHCII>PSIIcore>PSIcore>ATPase&Cyt b6/f>LHCI;PSI和PSII蛋白和相应电子传递活性的稳定性及下降幅度差异较大;衰老过程叶绿素a/b的不断下降与相对于反应中心更稳定的捕光天线有关,剑叶生长后期LHCII维持高水平保持了叶片对光能的吸收,并可能在调节光系统间能量分布和协助过剩能量耗散中起重要作用。 展开更多
关键词 两优培九 衰老 叶绿素荧光动力学 光系统 类囊体膜蛋白质复合物 蓝绿温和胶电泳
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细胞质膜及其蛋白质复合物分离与定性方法研究
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作者 胡凡 许志洋 +2 位作者 夏峥嵘 王富强 王玲 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期407-411,共5页
目的:探讨细胞质膜及其蛋白质复合物分离与定性的方法。方法:结合差速离心法、密度梯度离心法、双水相法分离得到细胞质膜,并利用透射电镜和Western blot等实验手段验证分离所得细胞质膜的纯度。结果:本文采用了蓝绿温和凝胶电泳法对细... 目的:探讨细胞质膜及其蛋白质复合物分离与定性的方法。方法:结合差速离心法、密度梯度离心法、双水相法分离得到细胞质膜,并利用透射电镜和Western blot等实验手段验证分离所得细胞质膜的纯度。结果:本文采用了蓝绿温和凝胶电泳法对细胞质膜上的蛋白质复合物进行一维分离,得到23种蛋白质复合物;接着对23种蛋白质复合物进行第二相垂直电泳分离,分离出135种蛋白质;最后鉴定78种是质膜相关蛋白,其余57种来源内膜系统。结论:多种提纯方法的联用可以有效提高蛋白分离率与分离纯度,高纯度的质膜对质膜蛋白质组的研究具有重要意义。 展开更多
关键词 细胞质 BN-PAGE 蛋白质复合物
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水稻叶色突变体812HS蛋白质复合物和叶绿素合成特性的研究 被引量:5
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作者 蒋苑 刘莉 +3 位作者 吕春芳 陈国祥 高志萍 吕川根 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第10期127-127,128,129,130,131,共5页
以水稻叶色突变体812HS与野生型812S为材料,利用蓝绿温和胶电泳技术和生理方法对叶尖端类囊体膜蛋白质复合物含量以及叶绿素合成前体物质进行了比较。结果表明,和野生型812S相比,水稻叶色突变体812HS在分蘖盛期叶绿素含量开始明显减少,... 以水稻叶色突变体812HS与野生型812S为材料,利用蓝绿温和胶电泳技术和生理方法对叶尖端类囊体膜蛋白质复合物含量以及叶绿素合成前体物质进行了比较。结果表明,和野生型812S相比,水稻叶色突变体812HS在分蘖盛期叶绿素含量开始明显减少,叶绿素a/叶绿素b比值增加,突变体的类囊体膜蛋白质复合物如光系统Ⅱ捕光色素蛋白(LHCⅡ)含量、光系统Ⅰ核心复合体(PSⅠcore)含量和F1-ATP合酶复合体和细胞色素b6/f复合体(F1-ATPase&Cy tb6/f)含量显著减少。突变体812HS叶片叶绿素合成代谢中间产物5-氨基酮戊酸(ALA)、胆色素原(PBG)、尿卟啉原Ⅲ(UrogenⅢ)含量均显著高于野生型812S,而原卟啉Ⅸ(ProtoⅨ)、镁原卟啉Ⅸ(Mg-ProtoⅨ)、原脱植基叶绿素(Pchlide)、Chla、Chlb含量却显著低于野生型812S。即水稻叶色突变体812HS的叶绿素含量明显减少,一方面是由于囊体膜蛋白质复合物的减少影响了其对光的吸收和传递;另一方面通过测定叶绿素合成的前体物质初步认为是由于叶绿素合成过程中UrogenⅢ到ProtoⅨ合成过程受阻所致。 展开更多
关键词 水稻叶色突变体812HS 类囊体膜蛋白质复合物 叶绿素前体合成物质 水稻
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膜蛋白质复合物提取方法研究进展
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作者 褚宏伟 郑诗颖 +4 位作者 赵群 赵宝锋 梁振 张丽华 张玉奎 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1387-1394,共8页
膜蛋白质通过与其他蛋白质相互作用形成膜蛋白质复合物(Membrane protein complexes,MPCs)形式来行使重要的生物学功能,譬如参与细胞-细胞交流、信号传导与分子识别等。MPCs的功能异常会导致多种疾病的发生和临床治疗耐药等问题。研究完... 膜蛋白质通过与其他蛋白质相互作用形成膜蛋白质复合物(Membrane protein complexes,MPCs)形式来行使重要的生物学功能,譬如参与细胞-细胞交流、信号传导与分子识别等。MPCs的功能异常会导致多种疾病的发生和临床治疗耐药等问题。研究完整MPCs的组装对于绘制全景式蛋白质-蛋白质相互作用网络,进而揭示膜蛋白质机器的功能具有重要意义。然而,由于MPCs的过表达和纯化仍面临巨大挑战,如何从细胞中实现MPCs的高效提取尤为重要。因此,亟需发展既可确保MPCs提取效率,并能保持其结构稳定性的提取方法。该文对现有MPCs提取方法及其应用进展进行了综述,并对其发展前景加以展望,以期为MPCs的功能解析提供技术支撑。 展开更多
关键词 蛋白质复合物 蛋白质-蛋白质相互作用 高效提取 结构稳定
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一种分析叶绿体类囊体膜色素蛋白复合物的蓝绿温和胶电泳系统 被引量:17
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作者 李贝贝 郭进魁 +2 位作者 周云 张珠珠 张立新 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第4期639-643,共5页
采用蓝绿温和胶电泳系统可以非常有效地分离叶绿体蛋白质复合物 ,包括PSⅠ ,PSⅡ ,ATP合酶 ,细胞色素b6f复合物 ,捕光色素复合物和 1,5 二磷酸核酮糖羧化酶 .还结合SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳将叶绿体多亚基复合物的 5 0多种蛋白质分开 ,... 采用蓝绿温和胶电泳系统可以非常有效地分离叶绿体蛋白质复合物 ,包括PSⅠ ,PSⅡ ,ATP合酶 ,细胞色素b6f复合物 ,捕光色素复合物和 1,5 二磷酸核酮糖羧化酶 .还结合SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳将叶绿体多亚基复合物的 5 0多种蛋白质分开 ,利用免疫印迹对蛋白质复合物进行了初步鉴定 ,同时还应用蓝色温和胶电泳分析基质。 展开更多
关键词 叶绿体 类囊体色素蛋白复合物 蓝绿温和胶电泳 聚丙烯酰胺凝胶电泳 免疫印迹
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低叶绿素b水稻突变体类囊体膜的比较蛋白质组学 被引量:16
6
作者 陈熙 崔香菊 +1 位作者 YING-XIN ZHAO 张炜 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第7期653-659,共7页
采用蓝绿温和胶凝胶电泳(blue-nativepolyacrylamidegel-electrophoresis,BN-PAGE),以及改进的第二向SDS-PAGE分离了水稻低叶绿素b突变体ZH249-Y和野生型ZH249-W类囊体膜蛋白复合物,系统比较了突变体和野生型各复合物亚基的表达差异.结... 采用蓝绿温和胶凝胶电泳(blue-nativepolyacrylamidegel-electrophoresis,BN-PAGE),以及改进的第二向SDS-PAGE分离了水稻低叶绿素b突变体ZH249-Y和野生型ZH249-W类囊体膜蛋白复合物,系统比较了突变体和野生型各复合物亚基的表达差异.结果显示,第一向BN-PAGE分离了PSⅠ-LHCⅠ、LHCⅠ缺失的PSⅠ、ATP合成酶、细胞色素b6f、CP43缺失的PSⅡ及LHCⅡ六种复合物.上述各复合物经第二相SDS-Urea-PAGE分离后,利用胶内酶解,高效液相层析分离肽段,电喷雾串联质谱鉴定了复合物的亚基.结合免疫印迹研究,证明和野生型相比,突变体光系统Ⅱ捕光天线复合体的表达量适度下降,但光系统Ⅰ捕光天线破坏严重,同时光系统Ⅱ核心蛋白和ATP合成酶的表达量上升.研究结果对揭示低叶绿素b水稻突变体较高光化学效率和光稳定性的分子基础提供了线索,同时也表明,改进的BN/SDS-PAGE双向电泳不仅可以有效地分离膜蛋白复合物及亚基,也可以进行不同生理条件下,或野生型和突变体之间膜蛋白质组的比较研究. 展开更多
关键词 蓝绿温和胶凝胶电泳 低叶绿素b突变体 水稻(Oryza SATIVA L.) 类囊体 比较蛋白质组学
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水稻剑叶类囊体膜蛋白复合物的蓝绿温和胶电泳分析 被引量:1
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作者 叶露幻 郑宝刚 +2 位作者 沈唯军 陈国祥 吕川根 《江苏农业科学》 北大核心 2013年第9期42-45,共4页
以水稻两优培九剑叶为材料,通过蓝绿温和胶电泳对其类囊体膜蛋白复合物进行分析。亚细胞组分是植物蛋白质组学研究的重点,而高度疏水且结构复杂的膜蛋白复合物在传统二维电泳中难以得到很好分离,故采用纯化完整叶绿体,温和去污剂增溶膜... 以水稻两优培九剑叶为材料,通过蓝绿温和胶电泳对其类囊体膜蛋白复合物进行分析。亚细胞组分是植物蛋白质组学研究的重点,而高度疏水且结构复杂的膜蛋白复合物在传统二维电泳中难以得到很好分离,故采用纯化完整叶绿体,温和去污剂增溶膜蛋白,非变性梯度凝胶电泳的方法,直观地分离并展示了两优培九水稻剑叶类囊体9条蛋白质复合物条带,并显示出丰度与组成的差异。以蓝绿温和胶为一向,含尿素的变性电泳为二向的二维电泳将两优培九水稻剑叶类囊体膜蛋白复合物分离为亚基,得到51个蛋白质点,为对水稻光合机构响应逆境等变化的蛋白组学研究提供方法。 展开更多
关键词 水稻剑叶 类囊体 蛋白质复合物 蓝绿温和胶电泳
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T-DNA插入对拟南芥突变体色素和内囊体膜色素蛋白复合物的影响 被引量:3
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作者 张峰 王玉萍 +1 位作者 黄惠英 王蒂 《草业学报》 CSCD 2008年第5期145-150,共6页
采用正向遗传学方法,从T-DNA标签技术构建的拟南芥突变体种子库中筛选到1株高叶绿素荧光表型的突变体(Hcf-1)。对该突变体及其子代群体进行Basta抗性及PCR分子检测,证实该突变体是由T-DNA插入引起的。突变性状与T-DNA共分离。对突变体(H... 采用正向遗传学方法,从T-DNA标签技术构建的拟南芥突变体种子库中筛选到1株高叶绿素荧光表型的突变体(Hcf-1)。对该突变体及其子代群体进行Basta抗性及PCR分子检测,证实该突变体是由T-DNA插入引起的。突变性状与T-DNA共分离。对突变体(Hcf-1)和野生型(WT)叶片中色素含量、叶绿体内囊体膜色素蛋白复合物及蛋白亚基变化的分析结果表明,与野生型相比,突变体叶中的Chla和Chlb含量显著降低。光系统II部分解聚,其主要蛋白亚基CP43,CP47,D1,D2蛋白以及外周捕光色素天线蛋白LCHII含量均下降。光系统I基本未受到影响。据此判断由于T-DNA的插入,导致一个控制PSII发育的基因发生突变,叶绿体的发育和PSII的组装均受到较大的影响。 展开更多
关键词 拟南芥 T-DNA插入 类囊体色素蛋白复合物 Hcf-1突变体
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快速检测植物类囊体膜蛋白体内磷酸化的方法 被引量:7
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作者 李炯 杜林方 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第5期740-743,共4页
借助特异的磷酸蛋白探针 ,建立了快速检测植物类囊体膜蛋白体内磷酸化的方法 ,可以检测到光照处理的豌豆叶圆片类囊体膜中 8条磷酸化蛋白带存在 ,它们的分子质量分别为 6 5、 45、 36、 33、 30、 2 9、 2 0和10ku .进一步使用光系统Ⅱ... 借助特异的磷酸蛋白探针 ,建立了快速检测植物类囊体膜蛋白体内磷酸化的方法 ,可以检测到光照处理的豌豆叶圆片类囊体膜中 8条磷酸化蛋白带存在 ,它们的分子质量分别为 6 5、 45、 36、 33、 30、 2 9、 2 0和10ku .进一步使用光系统Ⅱ反应中心蛋白和捕光色素复合物Ⅱ (LHCⅡ )的特异抗体 ,确定了上述磷酸化蛋白的归属 ,分别是磷酸化D1和 (或 )D2的聚合体 (6 5ku)、CP43(4 5ku)、D2 (36ku)、D1(33ku) ,LHCB1(30ku) ,LHCB2 (2 9ku)和 psbHgene产物 (10ku) ,2 0ku小肽尚不清楚其来源 . 展开更多
关键词 蛋白质磷酸化 PSⅡ核心蛋白 捕光色素复合物 检测方法 植物类囊体蛋白
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大叶藻(Zostera marina L.)PSⅠ和PSⅡ复合物的分离鉴定 被引量:9
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作者 汪文俊 王广策 +1 位作者 黄勃 曾呈奎 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期446-452,共7页
采用蔗糖密度梯度离心法分离纯化大叶藻类囊体膜 ,经 1 0 %SDS增溶后 ,用蔗糖密度梯度超速离心分离其色素蛋白质复合物。经稳态光谱分析、DCIP光还原活性测定及P680 、P70 0 差示光谱检测结果表明 ,2 0 %蔗糖层的CP3和 40 %蔗糖层 (上 )... 采用蔗糖密度梯度离心法分离纯化大叶藻类囊体膜 ,经 1 0 %SDS增溶后 ,用蔗糖密度梯度超速离心分离其色素蛋白质复合物。经稳态光谱分析、DCIP光还原活性测定及P680 、P70 0 差示光谱检测结果表明 ,2 0 %蔗糖层的CP3和 40 %蔗糖层 (上 )的CP4为PSⅡ复合物 ,具有光化学活性 ;40 %蔗糖层 (下 )的CP5为PSⅠ复合物 ,其P70 0 特征吸收峰位于 695nm处。CP3和CP4的DCIP光还原活性 :CP3为 34.2 7微电子当量 /(mgchl·h) ,CP4为 7.2 9微电子当量 /(mgchl·h)。 展开更多
关键词 大叶藻 类囊体 光合作用 PSⅠ复合物 PS 复合物
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二次电泳法分离管藻目绿藻PSI亚复合物研究
11
作者 陈敏 李爱芬 周百成 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期38-42,共5页
通过PAGE分离管藻目绿藻刺松藻和假根羽藻的PSI复合物CPIa1 和CPI,二次电泳分析得到了多种亚复合物组分 ,其中包括PSI捕光复合物LHCI和不含LHCI的核心复合物CCI等。该方法研究为进一步研究管藻目PSI复合物的结构打下了基础。
关键词 二次电泳法分离 管藻目绿藻 PSI亚复合物 叶绿体 类囊体
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喜温作物的低温损伤及其抗冷性的研究进展 被引量:22
12
作者 刘鹏 刘庆忠 +1 位作者 王勇 李新华 《山东农业科学》 2004年第2期74-79,共6页
关键词 喜温作物 低温损伤 抗冷性 自由基伤害学说 脂过氧化 脂相变理论 类囊体 低温光抑制 脱落酸 蛋白质
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豌豆光系统Ⅰ中脂类物质的分离及反相高效液相色谱分析
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作者 姚洪军 石玉杰 +1 位作者 徐秉玖 高荣孚 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期95-98,共4页
为进一步探讨脂类物质在类囊体膜及其蛋白复合物中的分布及作用,该研究提取了经DOC--PAGE分离的豌豆光系统Ⅰ中的脂类物质,采用RP--HPLC--UV梯度洗脱分析方法,以乙腈与水为流动相组成,在25 min内进行了较好的分离.所得的色谱图基线平稳... 为进一步探讨脂类物质在类囊体膜及其蛋白复合物中的分布及作用,该研究提取了经DOC--PAGE分离的豌豆光系统Ⅰ中的脂类物质,采用RP--HPLC--UV梯度洗脱分析方法,以乙腈与水为流动相组成,在25 min内进行了较好的分离.所得的色谱图基线平稳、分离度高.RP--HPLC--UV分析图上有6个主要色谱峰,通过所对应的紫外吸收光谱图,确认它们均属于脂类化合物. 展开更多
关键词 类囊体 蛋白复合物 反相高效液相色谱
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补体系统与急性缺血性脑血管病的关系研究进展 被引量:3
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作者 司味鑫 王平 +1 位作者 王祎 张鸿 《中国脑血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期664-668,共5页
急性缺血性卒中是临床上常见的脑血管疾病,其病因及发病机制复杂。补体系统是人类体液固有免疫系统的重要组成部分,在抵抗微生物入侵及维持机体内环境稳态中发挥重要作用。近年来,补体系统在急性缺血性脑血管病中的作用逐渐被重视。激... 急性缺血性卒中是临床上常见的脑血管疾病,其病因及发病机制复杂。补体系统是人类体液固有免疫系统的重要组成部分,在抵抗微生物入侵及维持机体内环境稳态中发挥重要作用。近年来,补体系统在急性缺血性脑血管病中的作用逐渐被重视。激活补体系统的有效途径有3条:经典途径、凝集素途径和旁路途径[1],另外还可能存在外源性补体激活途径[2]。 展开更多
关键词 脑缺血 补体系统蛋白质 补体攻击复合物 综述
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中科院大连化物所等揭示脂类在光合作用系统Ⅰ四聚体组装过程中的重要作用
15
《蔬菜》 2019年第11期79-79,共1页
2019年10月,中国科学院大连化学物理研究所分子模拟与设计研究组研究员李国辉与北京大学教授高宁、赵进东合作,通过分子动力学模拟的手段,揭示了脂类在光合作用系统I四聚体组装过程中的重要作用。光合作用是自然界中将太阳能转化为化学... 2019年10月,中国科学院大连化学物理研究所分子模拟与设计研究组研究员李国辉与北京大学教授高宁、赵进东合作,通过分子动力学模拟的手段,揭示了脂类在光合作用系统I四聚体组装过程中的重要作用。光合作用是自然界中将太阳能转化为化学能的主要途径。绿色植物和藻类的类囊体膜上存在两种大型蛋白复合物(光合作用系统I(PSI)和光合作用系统II(PSII))以实现光诱导电子传递、ATP生物合成等光合作用步骤。不同种属的PSI和PSII高度保守,在类囊体膜上以不同的寡聚状态行使生物学功能,以往的研究主要围绕PSI的三聚形式展开。 展开更多
关键词 李国辉 四聚体 脂类 蛋白复合物 光合作用 类囊体 组装过程 分子模拟
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