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油茶根际土壤拮抗菌分离鉴定及其对油茶炭疽病的防效
1
作者 桑梦科 刘君昂 周国英 《江苏农业科学》 北大核心 2024年第10期145-153,共9页
油茶炭疽病是由多种真菌引起的主要危害油茶叶片和果实的病害,其发生严重时会影响油茶的产量。为从土壤中寻找对油茶炭疽病具有生防潜力的拮抗菌,通过稀释涂布平板法分离出可人工培养的微生物与指示菌平板对峙试验,经过初筛和复筛确定... 油茶炭疽病是由多种真菌引起的主要危害油茶叶片和果实的病害,其发生严重时会影响油茶的产量。为从土壤中寻找对油茶炭疽病具有生防潜力的拮抗菌,通过稀释涂布平板法分离出可人工培养的微生物与指示菌平板对峙试验,经过初筛和复筛确定目标菌株。对目标菌株进行形态特征观察、生理生化鉴定及功能验证。利用盖玻片斜插法于显微镜下观察目标菌株对指示菌菌丝的影响,并进行抑菌谱试验。利用离体刺伤接种试验,验证目标菌株对油茶炭疽病发生的防治效果和治疗效果。通过16S rDNA基因扩增技术、gyrA基因扩增技术,对目标菌株进行分子鉴定。结果表明:从土壤中分离出可培养不同菌落形态的菌株34株,结合初筛、复筛,将菌株YFB-10-3-2确定为目标菌株。菌株YFB-10-3-2具有产生解淀粉酶、解纤维素酶、蛋白酶的能力和固氮功能,能使指示菌菌丝膨大、弯曲。进一步试验发现,目标菌株对10种病原菌的抑制率为46%~72%,表明该菌株具有抑菌广谱性。室内试验发现,该菌株对油茶炭疽病有68.11%的预防效果和28.60%的治疗效果,结合形态特征和生理生化试验,通过双基因分子鉴定,将菌株YFB-10-3-2鉴定为贝莱斯芽孢杆菌。综上,菌株YFB-10-3-2具有开发成为油茶炭疽病生防菌剂的巨大潜力。 展开更多
关键词 油茶 拮抗细菌 分离 鉴定 离体防效 生物防治
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解淀粉芽胞杆菌XJ5挥发性物质抑菌活性及对苹果褐腐病防效测定 被引量：15
2
作者 郭洁心 张育铭 +2 位作者 朱洪磊 任璐 张宝俊 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2020年第4期575-580,共6页
解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliquefaciens XJ5挥发性物质对苹果褐腐病菌Monilinia fructigena等多种病原真菌具有良好的拮抗活性。通过固相微萃取-气相色谱质谱联用仪(Solid-phase microextraction-Gas chromatography mass spectrome... 解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliquefaciens XJ5挥发性物质对苹果褐腐病菌Monilinia fructigena等多种病原真菌具有良好的拮抗活性。通过固相微萃取-气相色谱质谱联用仪(Solid-phase microextraction-Gas chromatography mass spectrometry,SPME-GC-MS)对菌株XJ5产生的挥发性物质进行检测,利用平板对扣法测定挥发性化合物的抑菌活性,并离体接种评价菌株XJ5挥发性物质对苹果褐腐病的防效。结果表明,XJ5菌株挥发性物质对9种植物病原真菌的抑菌率在47.9%~84.8%,其中对苹果褐腐病菌的抑菌率最高为84.8%。SPME-GC-MS检测及抑菌活性测定表明,菌株XJ5分泌的主要挥发性物质为十二醛(Dodecanal),具有抑菌活性的挥发性物质主要为2-壬醇(2-Nonanol)、2-乙基己醇(2-Ethyl-1-hexanol)和2-十一醇(2-Undecanol)。其中2-壬醇抑制苹果褐腐病菌的EC50为3.43μg/mL,且XJ5菌液离体熏蒸与2-壬醇离体熏蒸均可有效抑制苹果褐腐病菌丝生长及病斑扩展,其对苹果褐腐病的离体防效分别在14.4%~71.2%和66.4%~97.6%,与对照差异显著。 展开更多
关键词 解淀粉芽胞杆菌 挥发性物质 SPME-GC-MS 抑菌活性 离体防效
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解磷拮抗真菌分离鉴定及其对猕猴桃软腐病的生防评价 被引量：8
3
作者 卯婷婷 莫维弟 +2 位作者 赵玳琳 王廿 陶刚 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1748-1755,共8页
【目的】筛选可应用于猕猴桃果实软腐病的高效生防菌株,为猕猴桃软腐病生防制剂研发提供菌种资源。【方法】采集有猕猴桃软腐病发生的猕猴桃种植园健康植株根际土壤,利用解磷选择性培养基分离土壤中解磷真菌,采用平板对峙法、菌落直径... 【目的】筛选可应用于猕猴桃果实软腐病的高效生防菌株,为猕猴桃软腐病生防制剂研发提供菌种资源。【方法】采集有猕猴桃软腐病发生的猕猴桃种植园健康植株根际土壤,利用解磷选择性培养基分离土壤中解磷真菌,采用平板对峙法、菌落直径法、继代培养及发酵液抑菌试验等从中筛选对猕猴桃软腐病菌具有拮抗作用的菌株,通过形态学结合分子生物学方法对拮抗菌株进行鉴定。【结果】从猕猴桃根际土壤中分离得到35株解磷真菌菌株,通过对峙培养从中筛选出5株对猕猴桃软腐病菌具有拮抗作用且抑菌率超过50.00%的菌株,其中MHT0308菌株的抑菌效果最佳,对猕猴桃软腐病菌的抑菌率达87.71%,复筛抑菌圈也明显,抑菌直径达33.50 mm;MHT0308菌株的含菌发酵液和无菌发酵液均对靶标菌生长有抑制作用,抑菌率分别达88.13%和80.87%;猕猴桃果实经MHT0308菌株发酵液处理后对猕猴桃软腐病的离体防效达87.00%;根据MHT0308菌株形态学特征结合其分子生物学鉴定结果,确定MHT0308菌株为哈茨木霉菌(Trichoderma harzianum)。【结论】MHT0308菌株对猕猴桃软腐病具有较好的防治效果,可作为一种重要的生防菌资源用于猕猴桃软腐病防治研究。 展开更多
关键词 猕猴桃软腐病 解磷菌 抑菌作用 离体防效 木霉菌
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木霉菌可湿性粉剂药效的提高技术 被引量：1
4
作者 田连生 陈菲 《江苏农业科学》 北大核心 2017年第10期97-99,共3页
为提高木霉菌可湿性粉剂防效和药效速度,对影响木霉分生孢子萌发的不同因子进行研究。结果表明,蛋白胨、酵母粉和乳糖、蔗糖等对木霉孢子萌发均有显著的促进作用,温度25~30℃、pH值4~6和饱和湿度环境是孢子萌发的适宜条件。木霉孢子在... 为提高木霉菌可湿性粉剂防效和药效速度,对影响木霉分生孢子萌发的不同因子进行研究。结果表明,蛋白胨、酵母粉和乳糖、蔗糖等对木霉孢子萌发均有显著的促进作用,温度25~30℃、pH值4~6和饱和湿度环境是孢子萌发的适宜条件。木霉孢子在水中萌发率很低,光照对孢子萌发无显著影响;孢子萌发率和萌发速率是影响木霉可湿性粉剂生防效果和药效速度的主要原因。室内离体防效试验结果也证明,添加0.4%蛋白胨和乳糖,调节pH值至5,3 d时对黄瓜灰霉病防效可达85.6%,而未作处理的药液7 d防效才达84.2%。本研究结果也对该产品的生产和田间应用提出了改进建议。 展开更多
关键词 木霉菌 分生孢子 萌发条件 萌发率 可湿性粉剂 影响因子 生防效果 室内离体防效
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苹果树腐烂病拮抗细菌鉴定及其抑菌作用效果测定 被引量：34
5
作者 王卫雄 徐秉良 +2 位作者 薛应钰 陈臻 梁旭东 《中国生态农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1214-1221,共8页
为了开发一种高效低毒的苹果树腐烂病生防制剂,通过对峙培养法、形态学及分子生物学的方法进行了苹果树腐烂病菌拮抗菌的分离筛选及鉴定,采用离体枝条法测定了拮抗菌对苹果树腐烂病的防效,并采用显微观察和液体培养法分别研究了拮抗菌... 为了开发一种高效低毒的苹果树腐烂病生防制剂,通过对峙培养法、形态学及分子生物学的方法进行了苹果树腐烂病菌拮抗菌的分离筛选及鉴定,采用离体枝条法测定了拮抗菌对苹果树腐烂病的防效,并采用显微观察和液体培养法分别研究了拮抗菌对苹果树腐烂病菌的抑菌机理和无菌滤液对苹果树腐烂病菌生长的影响。分离筛选结果表明,从甘肃省各苹果产区果园土壤和苹果树枝条上分离得到23株细菌,2株对苹果树腐烂病菌具有较好拮抗作用,分别为LZ-1201和TS-1203,其对苹果树腐烂病菌菌丝生长抑制率分别为79.00%和85.00%。鉴定结果表明,菌株LZ-1201和TS-1203分别为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。离体枝条防效测定表明,拮抗菌无菌滤液对苹果树腐烂病的防效随着稀释倍数增大而降低,原液防效最高,分别为74.43%和77.07%。抑菌作用机理结果表明,两株拮抗菌均可导致苹果树腐烂病菌丝膨大畸形、原生质浓缩、释放及溶解。拮抗菌无菌滤液对腐烂病菌生长的影响测定结果表明,无菌滤液对腐烂病菌分生孢子萌发和菌丝生长量均有显著抑制作用(P<0.05),其无菌滤液稀释40倍时对腐烂病菌分生孢子萌发和菌丝生长量的抑制率均高于60%,表明该拮抗菌具有很好的生防潜力。 展开更多
关键词 苹果树 腐烂病 拮抗细菌 离体枝条防效 孢子 菌丝 抑菌作用
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解淀粉芽孢杆菌PB-1对灰葡萄孢的抑菌机理 被引量：2
6
作者 杨蕊 石红利 +1 位作者 郎剑锋 陆宁海 《江苏农业科学》 北大核心 2024年第16期149-155,共7页
为筛选灰葡萄孢(Botrytis cinerea)高效生防菌株,对解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)菌株PB-1从抑菌谱、发酵液的抑菌作用、抗生素合成基因PCR检测、挥发性物质(VOC)的抑菌作用、离体叶片防效几个方面进行研究。研究结果表明... 为筛选灰葡萄孢(Botrytis cinerea)高效生防菌株,对解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)菌株PB-1从抑菌谱、发酵液的抑菌作用、抗生素合成基因PCR检测、挥发性物质(VOC)的抑菌作用、离体叶片防效几个方面进行研究。研究结果表明,PB-1的抑菌谱较广,对8种供试植物病原菌菌丝生长均有抑制作用,其中对灰葡萄孢(B.cinerea)、新月弯孢霉(Curvularia lunata)、大斑凸脐蠕孢(Exserohilum turcicum)、禾谷镰孢(Fusarium graminearum)4种病原真菌具有较强的抑制作用,抑菌率分别为63.5%、70.7%、63.4%、56.0%。PB-1发酵液不仅对灰葡萄孢菌丝生长具较强抑制作用(20%浓度发酵液抑菌率达96.6%,受抑制菌丝肿胀扭曲、原生质外渗、分枝异常),而且对分生孢子萌发也具有强烈抑制作用。抗生素合成基因PCR检测发现,PB-1扩增出srfAB、ituA基因片段,这说明PB-1能够产生表面活性素(surfactin)、伊枯草菌素(iturins)脂肽类抗生素。PB-1挥发性物质对灰葡萄孢菌丝生长也具有明显抑制作用。此外,小白菜品种上海青离体叶片防病效果检测发现,PB-1能明显抑制灰葡萄孢的侵染。本研究结果表明,PB-1有作为植物灰霉病生物防治菌剂的潜力。 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌 灰葡萄孢 抑菌机制 抑菌率 菌丝生长 孢子萌发 离体叶片防效
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肿节风炭疽病菌拮抗放线菌的筛选与鉴定 被引量：3
7
作者 宋利沙 蒋妮 +2 位作者 张占江 蓝祖栽 白隆华 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2021年第7期1458-1464,共7页
【目的】筛选拮抗肿节风炭疽病病原菌的放线菌,为肿节风炭疽病的生物防治打下基础。【方法】采用稀释涂布法从肿节风根系土壤分离获得放线菌,利用平板对峙法筛选拮抗活性较高的菌株,并采用离体叶片刺伤接种法测定筛选获得拮抗菌株对肿... 【目的】筛选拮抗肿节风炭疽病病原菌的放线菌,为肿节风炭疽病的生物防治打下基础。【方法】采用稀释涂布法从肿节风根系土壤分离获得放线菌,利用平板对峙法筛选拮抗活性较高的菌株,并采用离体叶片刺伤接种法测定筛选获得拮抗菌株对肿节风炭疽病的防效,通过形态学特征和16S rDNA序列测定及建立系统发育进化树,分析确定其分类地位。【结果】平板对峙和抗菌谱测定结果表明,分离自肿节风根系土壤的JT-2F菌株对肿节风炭疽病菌具有最强的拮抗作用,可使炭疽病菌菌丝膨大、畸变和扭曲,抑制率达86.75%,且对供试14种病原真菌具有较强的拮抗作用,平均抑制率达81.50%。通过形态学特性和16S rDNA鉴定,JT-2F菌株为津岛链霉菌(Streptomyces tsukiyonensis)。离体防效试验结果显示,JT-2F菌株发酵原液对离体叶片上肿节风炭疽病的防效达87.32%。【结论】JT-2F菌株用作肿节风炭疽病菌的生物防治材料具有较大的开发和应用潜力。 展开更多
关键词 肿节风 炭疽病 拮抗放线菌 筛选 鉴定 离体防效
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牡丹炭疽病菌拮抗内生细菌的分离鉴定及促生作用 被引量：5
8
作者 石杨 吕长平 +2 位作者 帅佳琪 毛咪 江莉娜 《江苏农业科学》 北大核心 2022年第16期114-120,共7页
为获得牡丹炭疽病菌的优良拮抗菌,采用五点对峙法将64株来自牡丹根和茎部的内生细菌进行抑菌能力测定,筛选出最具拮抗作用的菌株,并对所选菌株进行分类鉴定,测试选定菌株的室内离体防效、促生作用和拮抗作用。结果表明,筛选出4株对牡丹... 为获得牡丹炭疽病菌的优良拮抗菌,采用五点对峙法将64株来自牡丹根和茎部的内生细菌进行抑菌能力测定,筛选出最具拮抗作用的菌株,并对所选菌株进行分类鉴定,测试选定菌株的室内离体防效、促生作用和拮抗作用。结果表明,筛选出4株对牡丹炭疽病菌最具抑制作用的菌株,其中拮抗率最高的是菌株FJ1.3,抑菌率为51.39%,室内离体防效为47.06%。经鉴定,菌株FJ1.3为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。拮抗菌株FJ1.3不具有溶磷和产β-1,3-葡聚糖酶能力,而具有产蛋白酶、固氮、产纤维素酶和分泌IAA能力,菌株FJ1.3分泌的IAA达到16.94 mg/L,可作为牡丹炭疽病的生防菌株资源。优良的牡丹内生菌具有促进植物生长的特性和抑制牡丹炭疽病菌的能力,为防治牡丹炭疽病和研发生物防治菌剂提供了基础。 展开更多
关键词 牡丹炭疽病菌 内生菌 分离鉴定 室内离体防效 促生作用 拮抗作用
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