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神经生长抑制因子研究进展 被引量:7
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作者 季清洲 任宏伟 +1 位作者 李令媛 茹炳根 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第5期488-492,共5页
神经生长抑制因子 (neuronalgrowthinhibitoryfactor,GIF)又名金属硫蛋白 Ⅲ (metallothionein Ⅲ ,MT Ⅲ ) ,特异分布于中枢神经系统 (CNS) ,是神经系统中第一个被鉴定的具有神经元生长抑制功能的蛋白 .GIF一级序列、高级结构、金属结... 神经生长抑制因子 (neuronalgrowthinhibitoryfactor,GIF)又名金属硫蛋白 Ⅲ (metallothionein Ⅲ ,MT Ⅲ ) ,特异分布于中枢神经系统 (CNS) ,是神经系统中第一个被鉴定的具有神经元生长抑制功能的蛋白 .GIF一级序列、高级结构、金属结合特性类似于其他MTs,基因结构也与其他MTs高度同源 ,但表达调控途径相异 .GIF可能以其 β结构域的CPCP区 ,与脑组织提取物中的相关因子结合 ,进而表现其生物学功能 . 展开更多
关键词 神经生长抑制因子 金属硫蛋白 结构 功能 AD
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G蛋白Rab3a协同神经生长抑制因子(GIF)抑制神经元的生长
2
作者 陈巧林 康巧华 +2 位作者 任宏伟 王宗元 茹炳根 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期534-539,共6页
为了研究G蛋白Rab3a与神经生长抑制因子 (growthinhibitoryfactor,GIF ,原称金属硫蛋白 3,MT 3)相互作用对神经元细胞生长的影响 ,以嗜铬细胞瘤株 (pheochromocytoma)PC1 2充当神经元模型 .将hMT 3(humanMT 3)和Rab3a基因分别克隆至真... 为了研究G蛋白Rab3a与神经生长抑制因子 (growthinhibitoryfactor,GIF ,原称金属硫蛋白 3,MT 3)相互作用对神经元细胞生长的影响 ,以嗜铬细胞瘤株 (pheochromocytoma)PC1 2充当神经元模型 .将hMT 3(humanMT 3)和Rab3a基因分别克隆至真核表达载体pFlag CMV 2和pSV HA中 ,质粒共同转染PC1 2细胞 ,观察转染后细胞的生长状态 .以共转染pFlag CMV 2 hMT 1和pSV HA Rab3a的细胞组作为对照 ,验证hMT 3与Rab3a相互作用对PC1 2影响的特异性 .结果发现 ,共转染pFlag CMV 2 hMT 3和pSV HA Rab3a的PC1 2细胞生长明显受到抑制 ,细胞生长抑制率与GIF在脑提取物存在F的神经元生长抑制作用接近 ,但转染两基因中的任何单个基因以及共转染pFlag CMV 2 hMT 1和pSV HA Rab3a对PC1 2细胞生长无影响 .进一步构建重组表达质粒pGEX 4T 1 Rab3a和pGEX 4T 1 hMT 3,转化大肠杆菌BL2 1 ,经谷胱甘肽 Sepharose 4B亲和层析、凝血酶酶切和SephacrylS 1 0 0纯化 ,得到纯度 95 %以上的Rab3a和hMT 3蛋白 .体外细胞生物学活性检测表明 ,表达的Rab3a蛋白与重组hMT 3蛋白共培养PC1 2 ,对细胞的生长产生了明显的特异性协同抑制作用 。 展开更多
关键词 RAB3A 神经生长抑制因子 神经 转染 抑制
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猪脑类神经肽抑制因子的分离纯化和抗小鼠癫痫作用 被引量:2
3
作者 杨卫国 陈昉 +1 位作者 张太平 张鹤云 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2007年第6期969-972,共4页
本实验室以猪脑为原料,利用超滤,凝胶过滤层析和反相高效液相色谱等分离纯化方法,分离出一种小分子类神经肽抑制因子(Neuropeptide-like inhibitor,NPI),并进行生物活性和理化性质的初步研究。以MTT比色法检测NPI对噬铬细胞瘤(pheochrom... 本实验室以猪脑为原料,利用超滤,凝胶过滤层析和反相高效液相色谱等分离纯化方法,分离出一种小分子类神经肽抑制因子(Neuropeptide-like inhibitor,NPI),并进行生物活性和理化性质的初步研究。以MTT比色法检测NPI对噬铬细胞瘤(pheochromocytoma)PC12细胞生长的影响;建立戊四氮致小鼠急性癫痫模型,检测NPI体内活性;通过液相色谱法鉴定NPI相对分子量和氨基酸组成。结果表明NPI对PC12细胞生长具有抑制作用,并呈量效关系。动物模型实验显示小鼠初次惊厥时间明显延长(P<0.01),惊厥程度及死亡率明显下降(P<0.05),表明NPI具有体内抗惊厥活性。 展开更多
关键词 神经生长抑制因子 癫痫 MTT比色法 动物模型 高效液相色谱
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法舒地尔通过抑制NogoA/NgR信号通路减轻H_(2)O_(2)诱导的SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞凋亡并增强突触可塑性 被引量:1
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作者 郭敏芳 张慧宇 +7 位作者 于婧文 章培军 王玉银 魏文悦 宋丽娟 柴智 尉杰忠 马存根 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期625-631,共7页
目的探讨法舒地尔(Fasudil)对H(2)O_(2)诱导的SY5Y人神经母细胞瘤细胞凋亡和突触可塑性的影响及其机制。方法细胞分为PBS对照组、250μmol/L H(2)O_(2)处理组和250μmol/L H(2)O_(2)联合15μg/mL Fasudil处理组。噻唑蓝(MTT)法检测细胞... 目的探讨法舒地尔(Fasudil)对H(2)O_(2)诱导的SY5Y人神经母细胞瘤细胞凋亡和突触可塑性的影响及其机制。方法细胞分为PBS对照组、250μmol/L H(2)O_(2)处理组和250μmol/L H(2)O_(2)联合15μg/mL Fasudil处理组。噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡,免疫荧光细胞化学染色检测神经突生长抑制因子A(NogoA)、NogoA受体(NgR)和突触小泡蛋白(Syn)的表达,Western blot法检测NogoA、NgR、p75神经营养因子受体(p75NTR)和含富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白结构域的Nogo相互作用蛋白1(LINGO-1)、Syn和突触后致密区蛋白95(PSD-95)的表达。结果与PBS组比较,H(2)O_(2)组细胞活性降低,细胞凋亡率升高,Fasudil处理可显著提高细胞活性,降低细胞凋亡率。与H(2)O_(2)模型组比较,Fasudil处理能使Syn和PSD-95的表达增加。与PBS组比较,H(2)O_(2)组NogoA及其受体复合物NgR/p75NTR/LINGO-1的表达明显增加,而Fasudil处理可以抑制NogoA及其受体复合物NgR/p75NTR/LINGO-1的表达。结论Fasudil可能通过抑制NogoA/NgR信号通路的激活,从而减轻H(2)O_(2)诱导的SH-SY5Y细胞凋亡以及增强突触的可塑性。 展开更多
关键词 法舒地尔(Fasudil) 神经生长抑制因子A(NogoA) Nogo受体(NgR) 细胞凋亡 突触可塑性
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雷公藤甲素通过抑制NogoA/RhoA/ROCK信号通路减轻氧糖剥夺/复糖复氧所致的SH-SY5Y细胞损伤
5
作者 张慧宇 白振军 +5 位作者 李亮 张金锋 解佳伟 邓亮 孟燕 郭敏芳 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第1期9-15,共7页
目的基于Nogo-A/RhoA/ROCK信号通路探讨雷公藤甲素减轻氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)诱导的SH-SY5Y细胞损伤的机制。方法CCK8法检测不同浓度雷公藤甲素对正常SH-SY5Y细胞活性的影响以筛选最佳的药物作用浓度;然后将SH-SY5Y细胞分为4组:正常... 目的基于Nogo-A/RhoA/ROCK信号通路探讨雷公藤甲素减轻氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)诱导的SH-SY5Y细胞损伤的机制。方法CCK8法检测不同浓度雷公藤甲素对正常SH-SY5Y细胞活性的影响以筛选最佳的药物作用浓度;然后将SH-SY5Y细胞分为4组:正常对照组、模型组、雷公藤甲素(1 nmol/L)干预组、Rho激酶抑制剂法舒地尔(15μg/mL)干预组。CCK8法检测SH-SY5Y细胞活性;JC-1试剂盒评估线粒体膜电位;免疫荧光染色检测NogoA、ROCK2和GAP43的表达;Western blot法检测GAP43、PSD95、NogoA、NgR、RhoA和ROCK2的表达。结果CCK8结果显示,雷公藤甲素的最适作用浓度为1 nmol/L。与正常对照组比较,模型组细胞活性降低(P<0.001);线粒体膜电位下调(P<0.001);GAP43和PSD95表达降低(P<0.001);同时NogoA、NgR、RhoA和ROCK2表达增加(P<0.001);雷公藤甲素干预和法舒地尔干预均可以改善OGD/R诱导的细胞损伤,使细胞活性增加(P<0.001),线粒体膜电位上升(P<0.001);上调GAP43和PSD95表达(P<0.05);同时下调NogoA、NgR、RhoA和ROCK2的表达(P<0.001)。结论雷公藤甲素可以通过抑制NogoA/RhoA/ROCK信号通路减轻OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞损伤。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 氧糖剥夺/复糖复氧 神经生长抑制因子A RHO激酶 突触可塑性
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Nogo-A在脊髓损伤大鼠脊髓组织中的动态表达 被引量:7
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作者 杨俊锋 张亚峰 +3 位作者 马勇 尹恒 尤武林 王建伟 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期867-871,共5页
目的:观察大鼠脊髓损伤后神经生长抑制因子Nogo-A在脊髓组织中的动态表达变化,探讨Nogo-A蛋白在神经再生过程中的意义和作用。方法:选用108只SD大鼠随机分成正常组、假手术组和模型组,每组36只,A组不做任何处理,B组咬除T_9-T_(11)棘突... 目的:观察大鼠脊髓损伤后神经生长抑制因子Nogo-A在脊髓组织中的动态表达变化,探讨Nogo-A蛋白在神经再生过程中的意义和作用。方法:选用108只SD大鼠随机分成正常组、假手术组和模型组,每组36只,A组不做任何处理,B组咬除T_9-T_(11)棘突及椎板,避免损伤脊髓;C组按照改良Allen法造模。分别于干预后24h、第3天、第7天、第14天处死大鼠,每组9只,以免疫组化及Western Blot检测各组大鼠脊髓组织中Nogo-A蛋白的表达变化,以荧光定量PCR检测Nogo-A mRNA表达变化。结果:正常组、假手术组各时间点Nogo-A蛋白和mRNA无显著变化(P>0.05)。模型组在损伤后24h Nogo-A蛋白和mRNA表达较低,3d后下降至最低,7d后迅速上升达到高峰,至14d逐渐下降,但仍高于假手术组;与假手术组比较,模型组在损伤后7d、14d,Nogo-A蛋白和mRNA表达均明显增高,差异均有显著性意义(P<0.05)。结论:大鼠脊髓损伤后,Nogo-A蛋白在早期一过性下降后可持续保持高水平表达,可能是造成脊髓损伤后中枢神经系统神经再生困难的重要原因之一。 展开更多
关键词 脊髓损伤 神经再生 大鼠 神经生长抑制因子
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大鼠脑梗塞后功能恢复过程中Nogo-AmRNA及其蛋白质的表达 被引量:3
7
作者 吴功雄 王玉苹 +5 位作者 张海伟 张春香 姚志彬 徐杰 罗晓青 马斯奇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期972-976,共5页
目的:研究神经生长抑制因子Nogo-A mRNA在大鼠缺血性脑梗塞脑内不同时点表达的变化与功能恢复的关系,探讨Nogo-A基因在缺血性脑梗塞中神经再生的作用。方法:建立缺血性脑梗塞(MCAO)模型,采用原位杂交法结合Western免疫印迹技术、功能评... 目的:研究神经生长抑制因子Nogo-A mRNA在大鼠缺血性脑梗塞脑内不同时点表达的变化与功能恢复的关系,探讨Nogo-A基因在缺血性脑梗塞中神经再生的作用。方法:建立缺血性脑梗塞(MCAO)模型,采用原位杂交法结合Western免疫印迹技术、功能评分,检测80只在不同时期缺血性脑梗塞大鼠脑内Nogo-A的表达量及其与功能恢复的关系。结果:原位杂交法显示:Nogo-A mRNA在脑梗塞后3 d下降,7 d后上升,2周达到高峰,第34、周保持第2周水平;Western免疫印迹显示:Nogo-A含量在脑梗塞后3 d下降,7 d后上升,3周达到高峰,第4周保持第3周水平。功能评分显示:在梗塞过程功能评分随时间推迟而升高,3周达到高峰,第4周保持第3周水平。结论:Nogo-A的转录及蛋白表达与大脑中动脉梗塞后脑卒中的功能恢复可能关系密切。 展开更多
关键词 中枢神经系统 脑梗塞 NOGO-A 基因表达 神经生长抑制因子
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高原环境下兔眼球钝挫伤后视网膜NGF和Nogo表达的调控 被引量:1
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作者 林丽霞 燕振国 +1 位作者 岳红云 段文娟 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2010年第2期187-188,共2页
关键词 眼球钝挫伤 后视网膜 高原环境 NOGO NGF 神经生长抑制因子 神经生长因子 protein
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酵母双杂交系统检测金属硫蛋白(MT)间的相互作用
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作者 康巧华 陈巧林 +2 位作者 刘峰 任宏伟 茹炳根 《北京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期197-203,共7页
金属硫蛋白 3(MT 3) ,又称神经生长抑制因子 ,为金属硫蛋白家族中惟一具有生物活性的成员。为了验证其在细胞内是否形成二聚或多聚体 ,构建酵母双杂交系统用于检测。结果表明 :MT 3与MT 3之间在酵母细胞内能发生相互作用 ,进一步用酵母... 金属硫蛋白 3(MT 3) ,又称神经生长抑制因子 ,为金属硫蛋白家族中惟一具有生物活性的成员。为了验证其在细胞内是否形成二聚或多聚体 ,构建酵母双杂交系统用于检测。结果表明 :MT 3与MT 3之间在酵母细胞内能发生相互作用 ,进一步用酵母双杂交实验还表明MT 3与MT 1间也存在弱相互作用。由此提示 ,在机体细胞中 ,MT 3可以以同源或异源二聚体的形式存在。 展开更多
关键词 金属硫蛋白-3 酵母双杂交系统 相互作用 二聚体 神经生长抑制因子 检测 分子生物学方法
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术后认知功能障碍老年小鼠海马内NogoA-NgR1通路的变化 被引量:5
10
作者 唐小慧 宗曼曼 +2 位作者 唐会 贾敏 杨建军 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期478-482,共5页
目的观察术后认知功能障碍老年小鼠海马内神经生长抑制因子NogoA及其受体NgR1表达的变化,并探讨其可能机制。方法采用异氟醚麻醉+腹腔探查术建立POCD模型。老年雄性C57BL/6小鼠40只,随机分为四组:O_2+Saline组(OS组)、O_2+NEP1-40组(ON... 目的观察术后认知功能障碍老年小鼠海马内神经生长抑制因子NogoA及其受体NgR1表达的变化,并探讨其可能机制。方法采用异氟醚麻醉+腹腔探查术建立POCD模型。老年雄性C57BL/6小鼠40只,随机分为四组:O_2+Saline组(OS组)、O_2+NEP1-40组(ON组)、异氟醚麻醉+腹腔探查术+Saline组(SS组)及异氟醚麻醉+腹腔探查术+NEP1-40组(SN组),每组10只。麻醉前7d行右侧脑室置管;麻醉前2h至行为学测试前2h每天侧脑室注射NEP1-40(20μg/2μl)或等容的无菌生理盐水,连续注射8d。术后第5天行旷场实验,第6、7天分别行场景性和条件性恐惧实验训练和测试。行为学测试后2h,取小鼠海马组织,采用Western blot法检测NogoA、NgR1、RhoA、ROCK2和GAP43含量变化;Golgi染色检测海马CA1区神经元树突棘数量改变。结果与OS和ON组比较,SS组在场景性恐惧实验测试中僵直反应百分比明显降低,海马内NogoA、NgR1、RhoA和ROCK2含量明显升高,GAP43含量和总的、新生的和成熟的树突棘数量明显减少(P<0.05);与SS组比较,SN组在场景性恐惧实验测试中僵直反应百分比明显升高,海马内RhoA和ROCK2含量明显降低,GAP43含量和总的、新生的和成熟的树突棘数量明显增多(P<0.05)。结论麻醉手术致老年小鼠认知功能损害与其海马内NogoA-NgR1通路过度激活有关。 展开更多
关键词 术后认知功能障碍 老年小鼠 海马 神经生长抑制因子A Nogo受体1
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Nogo(N-18)在大鼠脑干及小脑分布的免疫组织化学研究 被引量:2
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作者 鄂玲玲 周长满 冯士生 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期49-52,共4页
采用免疫组织化学方法(SP法),研究了Nogo(N-18)在大鼠脑干及小脑的分布并探讨其存在的意义。结果表明,Nogo(N-18)在正常大鼠脑干以及小脑的神经核团有广泛的表达,阳性物质很强地表达于神经元的胞核内,神经元胞体、突起内表达较弱。结论:... 采用免疫组织化学方法(SP法),研究了Nogo(N-18)在大鼠脑干及小脑的分布并探讨其存在的意义。结果表明,Nogo(N-18)在正常大鼠脑干以及小脑的神经核团有广泛的表达,阳性物质很强地表达于神经元的胞核内,神经元胞体、突起内表达较弱。结论:Nogo(N-18)在脑干及小脑的神经核团广泛表达提示其作为一种髓鞘源性神经突生长抑制因子在中枢神经系统中的存在,可能在正常的神经活动中起重要作用。 展开更多
关键词 NOGO 大鼠 脑干 小脑 免疫组织化学 髓鞘源性神经生长抑制因子 中枢神经系统
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TROY:新发现的NgR1受体复合物中的重要分子
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作者 南国新 廖维宏 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期348-348,共1页
关键词 分子 受体 神经生长抑制因子 复合物 中枢神经系统 生长抑制作用 跨膜蛋白 膜表面蛋白 外环境
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