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神经型一氧化氮合酶(nNOS)与SUMO连接酶PIAS3相互作用结构基础鉴定 被引量:6
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作者 胡露露 杜彩萍 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1055-1063,共9页
神经型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)在中枢神经系统广泛分布。本课题组前期研究报道,神经活性增强促进神经型一氧化氮合酶SUMO化,继而上调其活性,激活下游ERK1/2信号通路,参与调控兴奋性突触传递。SUMO连接酶PIAS... 神经型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)在中枢神经系统广泛分布。本课题组前期研究报道,神经活性增强促进神经型一氧化氮合酶SUMO化,继而上调其活性,激活下游ERK1/2信号通路,参与调控兴奋性突触传递。SUMO连接酶PIAS3可通过其N-末端AAs 43~86与nNOS结合,参与介导神经型一氧化氮合酶SUMO化。本文进一步筛选和鉴定nNOS中与PIAS3结合的氨基酸序列,深入研究nNOS与PIAS3相互作用的结构基础。采用分子克隆技术,分别构建nNOS缺失结构域突变体(AAs 1~1396、1~756和1~720)的真核表达载体,然后分别与Myc-PIAS3质粒共转染于COS7细胞。结果显示,AAs 1~720与PIAS3共转染组nNOS-PIAS3的结合水平显著低于其他组;Myc-nNOS(AAs 721~756)化学合成小肽与纯化的His-PIAS3在体外也可相互结合。结果表明,nNOS的AAs 721~756(CaM结合结构域,CaMB)可与PIAS3直接结合。GST pull-down进一步证明,nNOS的CaMB与PIAS3 AAs 43~86可直接结合。构建CaMB-pcDNA3.1真核表达载体,共表达nNOS、Myc-PIAS3和CaMB,CaMB共表达组nNOS-PIAS3结合明显降低。结果提示,CaMB通过竞争结合PIAS3从而干预nNOS与PIAS3的结合。将化学合成的穿膜肽Tat融合的CaMB(Tat-CaMB,5μmol/L)与皮质神经元预孵育1 h,用荷包牡丹碱(bicuculline,50μmol/L)诱导化学性长时程增强(long-term potentiation,LTP)。结果显示,Tat-CaMB可显著逆转bicuculline诱导的ERK1/2磷酸化(活化)水平的升高,与荷包牡丹碱处理组相比,下降了29%(P<0.05)。结果表明,Tat-CaMB可通过干预nNOS-PIAS3结合,进而抑制神经型一氧化氮合酶SUMO化及其下游ERK1/2信号通路的活化。通过上述研究,证明nNOS可通过CaM结合结构域(AAs 721~756)与PIAS3结合,并提供了一种鉴定和验证蛋白质间相互作用结构基础的有效方法。 展开更多
关键词 神经一氧化 SUMO连接 PIAS3 CaM结结构域
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大鼠脑发育过程中神经型一氧化氮合酶的表达变化 被引量:2
2
作者 胡明 刘勇 +2 位作者 肖新莉 祁存芳 田玉梅 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期261-264,共4页
目的用免疫组化方法探讨神经型一氧化氮合酶在大鼠脑发育过程中的表达变化。方法分别随机选取E12、E15、E18、P0、P5及P10期的SD大鼠,应用免疫组化方法,检测大脑皮层、纹状体及海马nNOS阳性细胞的密度。结果E12、E15及E18期大鼠脑组织未... 目的用免疫组化方法探讨神经型一氧化氮合酶在大鼠脑发育过程中的表达变化。方法分别随机选取E12、E15、E18、P0、P5及P10期的SD大鼠,应用免疫组化方法,检测大脑皮层、纹状体及海马nNOS阳性细胞的密度。结果E12、E15及E18期大鼠脑组织未见nNOS阳性细胞;大脑皮层及纹状体区P0、P5及P10期均可见nNOS阳性细胞。nNOS阳性细胞密度,在P0、P5及P10期逐渐降低,两两比较,有显著性差异(P<0.05)。P0期海马偶见nNOS阳性细胞,P5期和P10期均可见较多nNOS阳性细胞,但nNOS阳性细胞密度P5和P10期之间无统计学差异(P>0.05)。结论胚胎期大鼠脑内nNOS染色呈阴性反应;生后大脑皮层及纹状体nNOS阳性细胞密度逐渐减小,海马nNOS阳性细胞密度则有所增加。 展开更多
关键词 神经一氧化(nnos) 免疫组化 脑发育 大鼠
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在大鼠骨骼肌急性损伤修复过程中按摩对神经型一氧化氮合成酶、肝细胞生长因子mRNA表达的影响 被引量:8
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作者 杨辉 唐成林 +6 位作者 常青 黄思琴 唐念珍 谢辉 陈晓琳 田源 张毅 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期224-230,共7页
目的:研究按摩对大鼠骨骼肌急性损伤修复过程中肌卫星细胞激活关键因子神经型一氧化氮合成酶(n NOS)、肝细胞生长因子(HGF)m RNA表达的影响,探讨按摩对于骨骼肌急性损伤修复的作用。方法:将44只SPF级成年雄性SD大鼠按随机抽样法分为3组... 目的:研究按摩对大鼠骨骼肌急性损伤修复过程中肌卫星细胞激活关键因子神经型一氧化氮合成酶(n NOS)、肝细胞生长因子(HGF)m RNA表达的影响,探讨按摩对于骨骼肌急性损伤修复的作用。方法:将44只SPF级成年雄性SD大鼠按随机抽样法分为3组,正常对照组(A组,n=4),自然恢复组(C组,n=24),按摩组(M组,n=16)。A组不做任何处理,C、M组用改良打击器制备大鼠腓肠肌急性损伤模型。C组不给予按摩,M组于造模后第3天介入按摩治疗。C、M组于造模后第7天、第14天、第21天及第28天取实验动物腓肠肌样本,HE染色观察组织病理改变,实时荧光PCR检测肌卫星细胞中n NOS、HGF m RNA表达量。结果:按摩干预治疗后,M、C组与A组比较,各时间点n NOS、HGF m RNA表达量均高于A组,且具有显著差异(P<0.01);M组与C组比较,在7天、第14天、第21天及第28天n NOS、HGF m RNA表达量M组均高于C组(P<0.01)。M组与C组比较,损伤区域成肌细胞更多,肌丝稠密,肌卫星细胞增殖明显,血供更丰富,坏死组织恢复更快。结论:按摩可有效提高肌卫星细胞中n NOS、HGF m RNA表达水平,激活更多的肌卫星细胞,促进受损骨骼肌的修复再生。 展开更多
关键词 按摩 肌卫星细胞 神经一氧化 肝细胞生长因子
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自愿转轮运动对抑郁模型大鼠行为学、脑组织神经Y肽及中央杏仁核一氧化氮合酶表达的影响 被引量:19
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作者 崔建梅 苏晓云 +1 位作者 王昕 贺继平 《体育科学》 CSSCI 北大核心 2014年第5期15-22,共8页
目的:观察4周自愿转轮运动对慢性应激致抑郁大鼠抑郁样行为及空间学习记忆能力,脑组织神经Y肽(neuropeptide Y,NPY)及血浆皮质醇(Cort)含量和中央杏仁核(central amygdala,CeA)nNOS表达的影响。方法:45只SD大鼠随机分为对照组、应激模... 目的:观察4周自愿转轮运动对慢性应激致抑郁大鼠抑郁样行为及空间学习记忆能力,脑组织神经Y肽(neuropeptide Y,NPY)及血浆皮质醇(Cort)含量和中央杏仁核(central amygdala,CeA)nNOS表达的影响。方法:45只SD大鼠随机分为对照组、应激模型组及应激运动组,应激模型组及应激运动组大鼠建立慢性不可预见性应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)抑郁模型,同时,应激运动组大鼠进行4周自愿转轮运动。运动及应激结束后通过糖水偏爱实验、强迫游泳实验及八臂迷宫实验等方法测试大鼠行为学指标变化,放射免疫法测试大鼠脑组织NPY及血浆Cort含量,免疫组织化学法检测CeA区nNOS神经元的表达。结果:与对照组相比,慢性应激致抑郁大鼠糖水摄入量及糖水偏爱百分比均显著减少,强迫游泳实验中大鼠不动时间延长,八臂迷宫实验中应激大鼠完成八臂迷宫时间显著延长,工作记忆错误次数、参考记忆错误次数及总记忆错误次数均显著增加;应激大鼠肾上腺指数及血浆Cort水平显著升高,脑组织NPY水平下降、中央杏仁核nNOS表达显著增强;而长期自愿转轮运动可以显著改善抑郁模型大鼠的抑郁样行为及学习记忆能力,脑组织NPY水平升高、肾上腺指数及血浆Cort水平下降,CeA区nNOS表达减弱。结论:自愿转轮运动可以改善抑郁模型大鼠的抑郁样行为、增强大鼠学习记忆能力,机理可能与长期自愿转轮运动增加抑郁大鼠脑组织NPY水平、降低血浆Cort水平及减弱CeA区nNOS的表达有关。 展开更多
关键词 自愿转轮运动 抑郁大鼠 学习记忆 抑郁行为 神经Y肽 血浆皮质醇 一氧化 动物实验
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神经型一氧化氮合酶在大菱鲆脑组织中的分布及定位 被引量:1
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作者 韩卓然 石洪玥 +2 位作者 孙敬锋 王一泽 邢克智 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期296-300,共5页
【目的】探明神经型一氧化氮合酶(n NOS)在大菱鲆(Scophthalmus maximus)脑组织中的分布情况,为揭示大菱鲆脑组织中一氧化氮(NO)的生理功能提供形态学资料。【方法】分别采用NADPH-d组织化学染色法和免疫组织化学法对大菱鲆脑组织中的n ... 【目的】探明神经型一氧化氮合酶(n NOS)在大菱鲆(Scophthalmus maximus)脑组织中的分布情况,为揭示大菱鲆脑组织中一氧化氮(NO)的生理功能提供形态学资料。【方法】分别采用NADPH-d组织化学染色法和免疫组织化学法对大菱鲆脑组织中的n NOS进行定位研究。【结果】NADPH-d组织化学染色结果显示,大菱鲆大脑皮质中有蓝色的神经元和神经纤维存在。神经元呈梭形、锥形等形状,神经纤维呈串珠状且无序交织;小脑中NOS阳性神经元在分子层分布稀疏,在颗粒层分布密集,浦肯野细胞胞核淡染。经免疫组织化学法染色后,可观察到大脑皮质中n NOS免疫组化反应阳性物质呈深棕色;小脑皮质的分子层、颗粒层及浦肯野细胞层均有n NOS阳性神经元分布,浦肯野细胞呈免疫组织化学阳性反应。【结论】大菱鲆脑组织中的NOS类型主要限于n NOS,且n NOS在神经活动中发挥重要作用,也进一步证实NO在不同物种中具有一些共同的作用,但不同物种或相同物种不同组织中NO分布及含量存在差异。 展开更多
关键词 大菱鲆 神经一氧化(nnos) 一氧化(NO) 脑组织 分布 免疫组织化学定位
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葛根素对大鼠局灶性缺血脑组织内海马神经元型一氧化氮合酶表达的影响 被引量:5
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作者 张茹 成红学 +2 位作者 吴海琴 王虎清 郭荷娜 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期669-672,共4页
目的观察葛根素对大鼠局灶性脑缺血海马神经元神经型一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响。方法局灶性脑缺血模型由线栓法阻塞大鼠大脑中动脉制成,葛根素腹腔注射干预治疗,采用氯化三苯基四氮唑染色方法测定脑梗死体积,免疫组织化学方法测定... 目的观察葛根素对大鼠局灶性脑缺血海马神经元神经型一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响。方法局灶性脑缺血模型由线栓法阻塞大鼠大脑中动脉制成,葛根素腹腔注射干预治疗,采用氯化三苯基四氮唑染色方法测定脑梗死体积,免疫组织化学方法测定大鼠脑缺血后不同时间点前后海马区nNOS阳性神经元表达的变化。结果 2 h和12 h干预组脑梗死体积明显小于对照组(P<0.05),24 h干预组与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。缺血2 h组海马nNOS阳性细胞开始增加,12 h组最高,24 h组较前有所下降;干预组大鼠海马nNOS阳性细胞数与对照组比较降低明显,有统计学差异(P<0.01)。结论 nNOS参与早期脑缺血损伤,葛根素通过抑制nNOS表达对大鼠脑神经元损伤起保护作用。 展开更多
关键词 大鼠 葛根素 脑缺血损伤 神经一氧化 海马
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神经型一氧化氮合酶羧基末端结合配体CAPON的研究进展 被引量:3
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作者 李欣 赵振寰 +2 位作者 王晨静 孙术红 孙伟伟 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期545-548,共4页
内皮衍生小分子气体一氧化氮(nitric oxide,NO)因阐明了NO在心血管系统中是具有重要调节作用。随后的研究揭示了NO参与多种病理生理过程,包括血管舒张、神经传递、巨噬细胞街道的细胞毒性、胃肠道平滑肌舒张及支气管扩张。在生物体内... 内皮衍生小分子气体一氧化氮(nitric oxide,NO)因阐明了NO在心血管系统中是具有重要调节作用。随后的研究揭示了NO参与多种病理生理过程,包括血管舒张、神经传递、巨噬细胞街道的细胞毒性、胃肠道平滑肌舒张及支气管扩张。在生物体内,NO的生成过程需要关键酶一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)的参与,将L-精氨酸(L-arginine,L-Arg)和分子氧作为底物, 展开更多
关键词 一氧化 神经一氧化 神经一氧化羧基末端结配体
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神经元型一氧化氮合酶在心脏功能调节中的作用 被引量:3
8
作者 张一帅 杨晶 +2 位作者 彭军 李元建 胡长平 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期281-284,共4页
神经元型一氧化氮合酶(nNOS)不仅在神经细胞中表达,也存在于心肌细胞。生理状况下,nNOS源性的一氧化氮(NO)通过自分泌以负反馈的调节方式维持细胞内Ca2+浓度稳态,防止细胞内Ca2+浓度超载,对于维持正常的心功能具有重要意义。病理状况下,... 神经元型一氧化氮合酶(nNOS)不仅在神经细胞中表达,也存在于心肌细胞。生理状况下,nNOS源性的一氧化氮(NO)通过自分泌以负反馈的调节方式维持细胞内Ca2+浓度稳态,防止细胞内Ca2+浓度超载,对于维持正常的心功能具有重要意义。病理状况下,nNOS的活性发生明显变化,nNOS源性的NO可能参与了心脏疾病的发生和发展。 展开更多
关键词 一氧化 一氧化 神经源性一氧化 心功能
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糖尿病大鼠神经病理疼痛增强脊髓神经型一氧化氮合酶的表达 被引量:2
9
作者 赵伟成 廖美娟 +4 位作者 张文璇 王汉兵 刘洪珍 杨承祥 张斌 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1158-1161,共4页
目的观察糖尿病大鼠神经病理性疼痛形成时脊髓神经型一氧化氮合酶(nNOS)表达的变化。方法 60只SD大鼠,随机分为糖尿病神经病理性疼痛大鼠组(DM组)和空白对照组(C组),n=30。DM组大鼠采用腹腔注射链尿佐菌素(STZ,60 mg/kg)诱导糖... 目的观察糖尿病大鼠神经病理性疼痛形成时脊髓神经型一氧化氮合酶(nNOS)表达的变化。方法 60只SD大鼠,随机分为糖尿病神经病理性疼痛大鼠组(DM组)和空白对照组(C组),n=30。DM组大鼠采用腹腔注射链尿佐菌素(STZ,60 mg/kg)诱导糖尿病神经病理性疼痛,C组则注射等剂量的溶剂。于注射STZ前、注射STZ后2、7、14、21、28 d(T1~6)取尾静脉血测定血糖;于T1、T3~6时用von Frey丝测定50%缩足反应阈值(PWT)并测量大鼠体质量;分别于T1、T3~6时处死各组6只大鼠,采用免疫印迹的方法检测大鼠脊髓nNOS的表达。结果与C组相比,DM组大鼠注射STZ后血糖显著增高(P〈0.01),体质量逐渐下降(P〈0.05);DM组大鼠于T4~6时PWT明显低于C组(P〈0.05);DM组大鼠脊髓的nNOS的表达于T4~6时明显较C组增强(P〈0.05);DM组大鼠脊髓nNOS的表达与其PWT呈明显的负相关(P〈0.01)。结论糖尿病神经病理性疼痛大鼠脊髓nNOS表达增强,可能参与其疼痛的形成。 展开更多
关键词 糖尿病 神经 脊髓 神经一氧化
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神经元型一氧化氮合酶在快速衰老小鼠海马中的增龄性改变 被引量:2
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作者 张立红 任天华 +2 位作者 方马荣 姚大卫 王铭维 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期258-262,F0002,共6页
【目的】通过观察快速衰老小鼠(SAM)在衰老过程中海马中nNOS的分布和表达变化,探讨NO/nNOS在中枢神经系统衰老中的作用。【方法】采用雄性快速衰老亚系8小鼠(SAMP8)及抗快速衰老亚系1小鼠(SAMR1)为研究对象,其中SAMP8为实验组,SAMR1为... 【目的】通过观察快速衰老小鼠(SAM)在衰老过程中海马中nNOS的分布和表达变化,探讨NO/nNOS在中枢神经系统衰老中的作用。【方法】采用雄性快速衰老亚系8小鼠(SAMP8)及抗快速衰老亚系1小鼠(SAMR1)为研究对象,其中SAMP8为实验组,SAMR1为对照组,每组动物再分为青年组(2月龄)和老年组(10月龄)两组,每个年龄组随机分配6只动物。用免疫组织化学法标记SAM海马中nNOS神经元,观察海马CA1,CA2和CA3区nNOS神经元的形态和分布,并计数nNOS神经元的数量;用RT-PCR法检测海马中nNOSmRNA表达水平(用平均灰度值表示)。【结果】老龄SAMP8海马中阳性神经元的形态与其它组比较无明显差别,但CA1和CA2区阳性神经元密度明显减低,CA3区阳性神经元密度无明显改变。SAMP8老年组与青年组相比,海马CA1和CA2区nNOS阳性细胞的数量显著减少(73±14vs144±38,P<0.01;71±30vs126±39,P<0.05),CA3区阳性神经元数量无显著差别;SAMP8与SAMR1比较,青年组海马nNOS阳性细胞的数量无显著差别,老年组海马CA1和CA2区阳性细胞的数量显著减少(73±14vs139±24,P<0.01;71±30vs120±37,P<0.05)。SAMP8老年组海马nNOSmRNA水平明显低于青年组(0.43±0.17vs0.92±0.15,P<0.01),且低于相应月龄SAMR1(0.43±0.17vs0.86±0.13,P<0.01)。【结论】海马中nNOS催化产生不足量NO可能加速SAMP8衰老,致使学习记忆能力下降,为通过调节NO产量来延缓衰老及衰老相关学习记忆能力下降提供了理论依据。 展开更多
关键词 神经一氧化 一氧化 衰老 快速衰老小鼠 海马
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大鼠纹状体神经元型一氧化氮合酶神经元的分布和超微结构特征 被引量:2
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作者 郭国庆 山爱景 +6 位作者 沈伟哉 邱小忠 余磊 秦建强 欧阳钧 廖华 钟世镇 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期1-4,共4页
目的观察大鼠纹状体神经元型一氧化氮合酶(nNOS)免疫阳性神经元的分布以及阳性神经元的超微结构特征。方法取健康成年SD大鼠,ABC法显示nNOS免疫阳性神经元,包埋前染色方法对阳性细胞进行免疫电镜观察。结果光镜下,nNOS免疫阳性细胞呈棕... 目的观察大鼠纹状体神经元型一氧化氮合酶(nNOS)免疫阳性神经元的分布以及阳性神经元的超微结构特征。方法取健康成年SD大鼠,ABC法显示nNOS免疫阳性神经元,包埋前染色方法对阳性细胞进行免疫电镜观察。结果光镜下,nNOS免疫阳性细胞呈棕褐色,胞体及突起清晰,纹状体外侧区阳性细胞较多,内侧区较少。各区内阳性细胞以中、小型细胞为主,且大多数为中型细胞,小型细胞次之,大型细胞最少。透射电镜观察nNOS阳性神经元核大,胞浆少,呈中间神经元的特征;阳性颗粒呈黑色斑块样,在胞体内,可见小的阳性物质分布于胞核周围或者细胞膜内侧均无膜样结构包裹,大的团块样阳性物质主要存在于胞浆,有清晰的单层膜样结构包裹,亦可见部分无膜样结构包裹的大的阳性物质;在树突和轴突集中的部位亦可见免疫阳性物质,但并不在突起终末的囊泡内;脑组织内微血管壁旁的免疫阳性终末较多见,其突起毗邻血管外膜。结论大鼠纹状体nNOS免疫阳性神经元以中、小型细胞为主,符合中间神经元的特征,nNOS阳性物质分布于胞质和突起,大块物质多有膜性结构包裹,小块和部分大块阳性物质以及位于轴树突内的无膜性结构包裹,这可能与其功能状态有关。 展开更多
关键词 神经一氧化 纹状体 免疫细胞化学 超微结构 大鼠
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急性等容性血液稀释联合控制性降压对大鼠神经元形态学及神经元型一氧化氮合酶表达的影响 被引量:3
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作者 葛亚丽 冯善武 +5 位作者 宋娟 邵芹 杨建军 金毅 周志强 段满林 《医学研究生学报》 CAS 2007年第3期253-256,I0003,共5页
目的:观察四种不同程度急性等容性血液稀释(ANH)联合控制性降压对大鼠脑海马CA1区神经元形态学及神经元型一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响。方法:40只雄性SD大鼠随机分为对照组(假手术组)和4种不同程度血液急性稀释联合控制性降... 目的:观察四种不同程度急性等容性血液稀释(ANH)联合控制性降压对大鼠脑海马CA1区神经元形态学及神经元型一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响。方法:40只雄性SD大鼠随机分为对照组(假手术组)和4种不同程度血液急性稀释联合控制性降压的四个实验组,即血细胞比容(Hct)30%、25%、20%和15%组,应用硝普钠控制平均动脉压在50-60mmHg,持续1 h。术中通过股动、静脉持续监测平均动脉压(MAP)、心率(HR)、中心静脉压(CVP),并于血液稀释前即刻(T0)、降压前即刻(T1)、降压后30min(T2)和停降压后30min(T3)分析和记录HR、CVP,及动脉血气分析。血液稀释后3 h处死大鼠,应用光镜和电镜观察脑海马CA1区神经元形态学改变,用免疫组化法测定海马CA1区nNOS的表达。结果:①实验组动物HR在T1、T3与T0相比,无明显差异(P〉0.05);T2与T0相比有所上升(P〈0.05)。实验全程CVP无明显改变。②光镜下示Hct 20%和15%组大鼠海马CA1区神经元形态结构改变明显;电镜下示海马CA1区神经元线粒体超微结构评分明显高于其余三组。③Hct 25%、20%和15%组大鼠海马CA1区神经元nNOS表达较假手术组及Hct 30%组逐渐显著上调。结论:维持控制性降压,使平均动脉压维持在50-60mmHg 1 h,脑组织通过适度上调nNOS,能较好地耐受Hct≥25%的ANH;而联合Hct≤20%的ANH时,nNOS过度激活,神经元发生明显的缺血、缺氧性形态学损伤。 展开更多
关键词 急性等容性血液稀释 控制性降压 神经一氧化 神经 形态学
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2/100Hz电针抑制吗啡戒断大鼠中枢神经元型一氧化氮合酶的表达 被引量:2
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作者 崔彩莲 马勤耘 +3 位作者 吴鎏桢 李雪 魏娜 韩济生 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期321-325,共5页
目的 :观察 2 / 10 0Hz电针 (electroacupuncture,EA)对吗啡戒断大鼠中枢相关区域神经元型一氧化氮合酶(neuronalnitricoxidesynthase,nNOS)表达的影响。 方法 :给大鼠腹腔注射 (i.p .)递增量吗啡 10d ,造成大鼠对吗啡的依赖。在最后一... 目的 :观察 2 / 10 0Hz电针 (electroacupuncture,EA)对吗啡戒断大鼠中枢相关区域神经元型一氧化氮合酶(neuronalnitricoxidesynthase,nNOS)表达的影响。 方法 :给大鼠腹腔注射 (i.p .)递增量吗啡 10d ,造成大鼠对吗啡的依赖。在最后一次注射吗啡后 12和 2 4h分别给予 2 / 10 0HzEA 30min。电针结束后 30min ,取大鼠脊髓和脑 ,采用免疫组织化学方法和计算机图象分析技术 ,对脊髓腰膨大 (L4 L5)、蓝斑 (locuscoeruleus ,LC)、中脑导水管周围灰质 (periaqueductalgray ,PAG)nNOS的原位表达进行观察及半定量分析。 结果 :吗啡戒断大鼠脊髓L4 L5第X板层、LC及PAG腹外侧区的nNOS阳性神经元数量显著增多 ,L4 L5第I IV板层、LC及PAG的nNOS的免疫染色光密度 (D)明显增强 ;给予 2 / 10 0HzEA后 ,吗啡戒断大鼠上述部位的nNOS阳性神经元的数量明显减少 ,nNOS的D值显著降低。结论 :2 / 10 0HzEA能抑制吗啡戒断大鼠中枢相关区域nNOS的表达 。 展开更多
关键词 电针 大鼠 中枢神经 一氧化 吗啡依赖 戒断综
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神经病理性疼痛大鼠脊髓背角一氧化氮合酶各亚型的表达及活性变化 被引量:2
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作者 金小高 罗爱林 +3 位作者 王萍 张广雄 王金韬 李亚文 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期151-153,共3页
目的比较神经病理性疼痛大鼠模型脊髓背角中神经型(nNOS)、诱导型(iNOS)和内皮型(eNOS)三种一氧化氮合酶(NOS)的表达及活性变化。方法雌性SD大鼠20只,150~200g,随机均分为坐骨神经保留性损伤(SNI)组和对照组。SNI组大鼠于... 目的比较神经病理性疼痛大鼠模型脊髓背角中神经型(nNOS)、诱导型(iNOS)和内皮型(eNOS)三种一氧化氮合酶(NOS)的表达及活性变化。方法雌性SD大鼠20只,150~200g,随机均分为坐骨神经保留性损伤(SNI)组和对照组。SNI组大鼠于左后肢制备SNI模型,对照组大鼠暴露坐骨神经后立即缝合手术切口。术后观测疼痛的变化,于术后第14天断头处死大鼠,截取L4-6段脊髓,分离左右侧脊髓,于-80℃储存。SNI组和对照组各取5只大鼠脊髓,RT—PCR技术扩增nNOS、eNOS和iNOS片段,以β—actin作为内参照,比较SNI组与对照组NOS表达的相对差异。取两组另外5只大鼠脊髓冰上迅速匀浆,均取40μg的蛋白,分别检测组成型NOS(cNOS,即nNOS和eNOS)和iNOS的活性。结果SNI组手术侧nNOS、iNOS的mRNA表达均高于SNI组非手术侧和对照组手术侧(P<0.05),而eNOS的表达在SNI组手术侧、非手术侧和对照组手术侧之间差异并无统计学意义。NOS亚型催化活性检测显示SNI组手术侧iNOs和cNOS的活性均高于SNI组非手术侧和对照组手术侧(P<0.05)。结论神经病理性疼痛大鼠模型脊髓背角中iNOS的表达及其合成NO的活性均增加,可能促进了疼痛的发生,nNOS在疼痛中可能具有较强的调节能力。 展开更多
关键词 神经病理性疼痛 脊髓 神经一氧化
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视神经夹伤合并晶状体损伤大鼠视网膜中神经元型一氧化氮合酶的表达 被引量:2
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作者 秦柏 管怀进 +1 位作者 张俊芳 沈爱国 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2013年第12期1128-1131,共4页
目的观察视神经夹伤合并晶状体损伤大鼠视网膜中神经元型一氧化氮合酶(nNOS)的表达。方法建立视神经夹伤合并晶状体损伤大鼠模型,Western blot检测正常组及损伤后不同时间点nNOS在术侧和对侧视网膜中的表达情况,免疫组织化学和免疫荧光... 目的观察视神经夹伤合并晶状体损伤大鼠视网膜中神经元型一氧化氮合酶(nNOS)的表达。方法建立视神经夹伤合并晶状体损伤大鼠模型,Western blot检测正常组及损伤后不同时间点nNOS在术侧和对侧视网膜中的表达情况,免疫组织化学和免疫荧光染色观察nNOS在视网膜中的表达和定位。结果 Western blot结果显示,nNOS蛋白在正常视网膜中明显表达;在术侧视网膜中,从损伤后1 d开始nNOS蛋白的表达下降,术后3 d表达最低,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05);5 d开始上升,7 d达高峰,但未达到正常表达水平,7 d时的表达水平与5 d比较差异有统计学意义(P<0.05),14 d时表达又下降。对侧视网膜中,nNOS的变化趋势与术侧基本一致,但各时间点变化幅度较小。免疫组织化学和免疫荧光染色结果显示nNOS主要表达在节细胞层,在外丛状层有微弱表达,与NeuN标记的神经元共定位。结论 nNOS在视神经夹伤合并晶状体损伤大鼠视网膜组织中表达明显改变,晶状体损伤能促进视神经夹伤大鼠术侧和对侧视网膜中神经元的存活,提示晶状体损伤能同时保护同侧和对侧视网膜神经元。 展开更多
关键词 神经夹伤 晶状体损伤 神经一氧化 神经 大鼠
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原发性脑干损伤后延髓网状结构神经元型一氧化氮合酶、诱导型一氧化氮合酶和钙结合蛋白的表达变化 被引量:2
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作者 王飞跃 王慧君 +2 位作者 乔东访 谭晓辉 李艳红 《实用医学杂志》 CAS 2008年第9期1500-1503,共4页
目的:研究原发性脑干损伤后延髓网状结构神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和钙结合蛋白(CR)的表达变化,探讨脑干损伤短时间内的分子机制及形态学改变。方法:采用撞击法造成实验大鼠脑干损伤死亡,并分为正常对照组... 目的:研究原发性脑干损伤后延髓网状结构神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和钙结合蛋白(CR)的表达变化,探讨脑干损伤短时间内的分子机制及形态学改变。方法:采用撞击法造成实验大鼠脑干损伤死亡,并分为正常对照组、1h内死亡组、伤后存活组。采用比色法检测3组延髓的一氧化氮合酶(NOS)、iNOS和结构型一氧化氮合酶(cNOS)的变化,并采用免疫组织化学SP法检测nNOS和CR的改变。结果:与正常对照组相比,1h内死亡组脑干的NOS和cNOS均升高,iNOS无显著性变化;伤后存活组NOS和iNOS升高,cNOS无显著性变化。与正常对照组比较,1h内死亡组延髓内nNOS阳性细胞数显著增多,伤后存活组则无显著性变化。与正常对照组比较,1h内死亡组和伤后存活组CR阳性细胞数明显减少,3组间两两比较差异均有显著性。结论:原发性脑干损伤导致延髓nNOS和iNOS呈现不同的变化规律,且在一定时间范围内CR表达下调。 展开更多
关键词 脑损伤 脑干 延髓网状结构 神经氧化 诱导一氧化 钙结蛋白
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神经元性一氧化氮合酶活性在app/ps1双转基因AD模型小鼠皮质和海马的分布 被引量:4
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作者 雷德亮 罗学港 +1 位作者 Peter R. Mouton Donald K. Ingram 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期377-382,共6页
本实验用 4~ 5月龄和 15~ 16月龄的 app/ ps1dtg小鼠各 5只 ,同龄野生型小鼠每个年龄组各 5只 ,用β-NADPH组织化学染色显示神经元一氧化氮合酶活性 ,刚果红组织学染色显示神经炎性斑 ,无偏性体视学计量皮质和海马神经炎斑的总体积 ,... 本实验用 4~ 5月龄和 15~ 16月龄的 app/ ps1dtg小鼠各 5只 ,同龄野生型小鼠每个年龄组各 5只 ,用β-NADPH组织化学染色显示神经元一氧化氮合酶活性 ,刚果红组织学染色显示神经炎性斑 ,无偏性体视学计量皮质和海马神经炎斑的总体积 ,研究神经元一氧化氮合酶活性在 app/ ps1双转基因 (app/ ps1dtg) AD模型小鼠大脑皮质和海马的异常分布 ,探讨其在该模型小鼠及 AD患者脑内病理改变中的作用。结果显示 ,n NOS阳性神经元在各组小鼠皮质和海马内的分布没有区别 ,4~ 5月龄 app/ps1dtg小鼠皮质和海马可见神经炎斑 (NP)和营养不良性 NOS阳性神经突 (DTN) ;15~ 16月龄 app/ ps1dtg小鼠皮质和海马内NP的体积分别是 4~ 5月龄 app/ ps1dtg小鼠皮质 NP的 5倍 (P<0 .0 0 5 )和 8倍 (P<0 .0 0 1) ;15~ 16月龄 app/ ps1dtg小鼠皮质内 DTN的体积明显增大 (P<0 .0 1) ;且伴有 NOS阳性神经元形态的改变及海马 CA1 区 NOS阳性神经元数量的减少 (P<0 .0 5 ) ,DTN的形成与 NP呈正相关关系 (r=0 .85 ,P<0 .0 5 )。本实验结果表明 ,app/ ps1dtg小鼠能够模拟 AD患者脑内 NOS阳性神经元的病理改变 ,DTN的形成可能与 Aβ的毒性作用有关 ,DTN产生的 NO可能参与 app/ ps1dtg小鼠和 AD的神经病理过程。 展开更多
关键词 Alzheimer病 神经炎斑 一氧化 皮质 海马 转基因小鼠
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胰岛素对PC12细胞神经型一氧化氮合酶表达及活性的影响 被引量:1
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作者 袁中瑞 鲁丹丹 +3 位作者 董晓敏 古力努尔 程晟 卢景雰 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第6期960-964,共5页
为探讨胰岛素对神经细胞中神经型一氧化氮合酶 (nNOS)的表达及活性的影响 ,应用流式细胞术、原位杂交、电子自旋共振等技术方法研究胰岛素对PC12细胞中神经型一氧化氮合酶的影响 .胰岛素作用PC12细胞9h后 ,神经型一氧化氮合酶的免疫荧... 为探讨胰岛素对神经细胞中神经型一氧化氮合酶 (nNOS)的表达及活性的影响 ,应用流式细胞术、原位杂交、电子自旋共振等技术方法研究胰岛素对PC12细胞中神经型一氧化氮合酶的影响 .胰岛素作用PC12细胞9h后 ,神经型一氧化氮合酶的免疫荧光强度显著升高 ,且呈浓度依赖关系 ,其最大效应为对照的 (155± 13 ) %(P <0 0 1,n =3 ,t test) .加入胰岛素 (16mU /L ,6h)也能够显著上调nNOSmRNA的表达 ,为对照的 (182± 13 ) % (P <0 0 1,n =3 ,t test) .另外加入胰岛素 (16mU /L)作用 9h后 ,神经型一氧化氮合酶的活性也显著升高 ,为对照的 (167± 15) % (P <0 0 1,n =4,t test) .由上述结果可知 。 展开更多
关键词 胰岛素 神经一氧化 流式细胞术 原位杂交 电子自旋共振 PC12细胞 中枢神经系统
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大鼠端脑神经元型一氧化氮合酶免疫阳性神经元的分布 被引量:1
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作者 沈伟哉 余菁 +1 位作者 郭国庆 邢旭光 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 2002年第2期15-18,共4页
目的 :观察大鼠端脑神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)免疫阳性神经元的分布。方法 :ABC免疫细胞化学法显示大鼠端脑nNOS阳性神经元。结果 :nNOS阳性神经元呈棕褐色 ,胞体的形态多样化 ,呈梭形、三角形、圆形等多种形状 ,突起有一个或多个 ;... 目的 :观察大鼠端脑神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)免疫阳性神经元的分布。方法 :ABC免疫细胞化学法显示大鼠端脑nNOS阳性神经元。结果 :nNOS阳性神经元呈棕褐色 ,胞体的形态多样化 ,呈梭形、三角形、圆形等多种形状 ,突起有一个或多个 ;阳性纤维呈棕色串珠状 ,个别脑区阳性纤维相互交织成网。端脑nNOS免疫阳性神经元主要分布于嗅结节 (包括海马回 )、梨状区 (包括梨状皮质和梨状核 )、斜角带、隔区、杏仁复合体、海马结构、尾壳核和苍白球 ,以及大脑皮质等各个部位 ,其中以大脑皮质、梨状区和斜角带、尾壳核等部位最为丰富。结论 :大鼠端脑内分布有丰富的nNOS阳性神经元 ,它们可能通过调节神经递质的分泌 ,参与脑的高级整合功能。 展开更多
关键词 一氧化 神经元经一氧化 端脑 大鼠
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大鼠颈神经根受压后一氧化氮合酶Ⅰ型在脊髓及背根神经节中的变化 被引量:1
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作者 杨惠光 周枫 +4 位作者 张云庆 方有生 陈德松 彭裕文 王劼 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1384-1386,1402,I0002,共5页
目的:通过观察大鼠颈神经受压后一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元及神经末梢在背根神经节(DRG)及脊髓中的分布变化,探讨颈神经受压后致颈肩痛发生的可能机制。方法:选用12只Wistar大鼠,随机分为2组:实验组,选用直径1mm硅胶管,纵形切开,于接... 目的:通过观察大鼠颈神经受压后一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元及神经末梢在背根神经节(DRG)及脊髓中的分布变化,探讨颈神经受压后致颈肩痛发生的可能机制。方法:选用12只Wistar大鼠,随机分为2组:实验组,选用直径1mm硅胶管,纵形切开,于接近背根神经节远端套入颈6脊神经根,以丝线在硅胶管外结扎;对照组,不作任何处理。4周后取双侧颈4~7背根神经节及相应节段脊髓,用免疫组化ABC法观察一氧化氮(NO)阳性神经元的形态特点,并应用图像分析,分析NOS1阳性神经元及神经末梢在颈部背根神经节及颈髓中的分布,比较两组NOS1阳性细胞数的平均面积和及平均光密度。结果:大鼠颈神经受压4周后,实验组背根神经节中NOS1阳性神经元明显增多,脊髓背角NOS1阳性神经元及神经末梢明显增多,细胞以中、小神经元为主,实验组阳性细胞数、阳性神经末梢的平均面积和及平均光密度始终多于对照组。结论:NO参与外周及中枢水平的痛觉调制,可能与大鼠颈神经受压致颈肩痛的产生有关。 展开更多
关键词 一氧化1 颈肩痛 神经 大鼠
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