神经前体细胞表达下调蛋白9在胰腺癌组织中的表达及临床意义 被引量：7

1

作者 吴铁龙 薛丽莉 +3 位作者 戴圆圆 盛颖玥 王文远 薛育政 《临床肝胆病杂志》 CAS 2017年第1期130-132,共3页

目的检测神经前体细胞表达下调蛋白(NEDD)9在胰腺癌和癌旁组织的表达情况,分析其与胰腺癌进展、预后的关系。方法收集2005年8月-2010年12月于无锡市第三人民医院治疗的98例胰腺癌患者的癌和癌旁组织样本,应用免疫组化技术检测患者胰腺... 目的检测神经前体细胞表达下调蛋白(NEDD)9在胰腺癌和癌旁组织的表达情况,分析其与胰腺癌进展、预后的关系。方法收集2005年8月-2010年12月于无锡市第三人民医院治疗的98例胰腺癌患者的癌和癌旁组织样本,应用免疫组化技术检测患者胰腺癌和癌旁组织中NEDD9的表达,并对NEDD9表达与胰腺癌临床病理特征的关系进行分析。计数资料组间比较采用χ2检验。结果胰腺癌组织中NEDD9的高表达率明显高于癌旁组织(57.1%vs 41.8%,χ2=4.592,P=0.032)。胰腺癌组织NEDD9的表达与患者TNM分期、分化程度及有无淋巴结转移相关(χ2值分别为45.02、20.41、36.21,P值均<0.001);与性别、年龄、肿瘤部位、有无肝转移无相关性(P值均>0.05)。结论 NEDD9可能在胰腺癌的发展和侵袭转移中起着一定的作用,有可能作为评估胰腺癌预后的分子指标和治疗靶点。 展开更多

关键词 胰腺肿瘤 神经前体细胞表达下调蛋白 9 病理状态 体征和症状

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神经前体细胞表达发育性下调蛋白4在消化系统肿瘤发生中的作用 被引量：2

2

作者 代俊泽 金燕 金海峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期410-417,共8页

神经前体细胞表达发育性下调蛋白4(neural precursor cell expressed,developmentally down-regulated protein 4,NEDD4-1,部分文章也称NEDD4)是近年来才备受关注的肿瘤相关基因,属于E3 HECT(homologous to E6 associated protein C ter... 神经前体细胞表达发育性下调蛋白4(neural precursor cell expressed,developmentally down-regulated protein 4,NEDD4-1,部分文章也称NEDD4)是近年来才备受关注的肿瘤相关基因,属于E3 HECT(homologous to E6 associated protein C terminus,E6蛋白c端同源基因)泛素连接酶NEDD4样家族成员。泛素连接酶,能够参与多种蛋白质的泛素化、溶酶体及蛋白酶体的降解、胞核-胞质转位等,间接影响不同恶性肿瘤的多种信号通路。随着大量NEDD4-1与肿瘤相关实验的不断深入,目前已发现其可通过调控细胞周期、癌细胞侵袭转移、拮抗耐药性等许多途径影响肿瘤的生物学行为。在消化系统肿瘤中,NEDD4-1主要通过PTEN/PI3K/AKT、TGF-β、Hippo、LDLRAD4等多条通路促进肝细胞癌的增殖、侵袭和迁移能力;在胰腺癌中发现,NEDD4-1在PI3K/AKT信号通路中发挥癌基因作用,但在与Myc-SIRT2所形成的信号环路中,却发挥抑癌基因的作用;在胃癌和结直肠癌中,NEDD4-1所参与的信号通路与其他消化系统肿瘤均不相同,NEDD4-1能独立于PTEN/PI3K/AKT通路而发挥促进胃癌恶化、转移(EGFR信号通路)和抑制结直肠癌肿瘤生长(WNT信号通路)的作用。NEDD4-1已经成为人们治愈肿瘤的热门研究方向。本文通过系统总结NEDD4-1在不同消化系统肿瘤中的功能、信号通路和潜在抑制剂等,进行探讨NEDD4-1与不同信号通路的关系,旨为临床在癌症治疗领域提供重要的参考数据。 展开更多

关键词 神经前体细胞表达发育性下调蛋白4 泛素化 E3泛素连接酶 消化系统 恶性肿瘤

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Olig2对胚胎干细胞向神经前体细胞分化过程中Nestin蛋白表达的影响 被引量：3

3

作者 罗梦娇 王贝 +6 位作者 郭瑞 曲学彬 王会平 张强 董富兴 任传路 姚瑞芹 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期91-94,共4页

目的:探讨碱性螺旋-环-螺旋家族的少突胶质细胞转录因子2(Olig2)对小鼠胚胎干细胞(mESCs)向神经前体细胞(NPCs)分化过程中巢蛋白(Nestin)表达的影响。方法:将mESCs分为正常组、空载体组和Olig2转染组,用含有RA、Purmorphamine、bF GF和P... 目的:探讨碱性螺旋-环-螺旋家族的少突胶质细胞转录因子2(Olig2)对小鼠胚胎干细胞(mESCs)向神经前体细胞(NPCs)分化过程中巢蛋白(Nestin)表达的影响。方法:将mESCs分为正常组、空载体组和Olig2转染组,用含有RA、Purmorphamine、bF GF和PDGF-AA的培养基将其诱导分化为NPCs;分别在诱导分化的第11 d和14 d,用免疫细胞化学荧光染色和蛋白免疫印迹法检测其神经前体细胞特异性标记物巢蛋白(Nestin)的表达情况。结果:经Olig2-GV218慢病毒转染后的mE SCs,Olig2蛋白的表达较正常组和空载体组明显增强;诱导分化后11 d,三组细胞Nestin蛋白表达无明显区别;14 d时,正常组和空载体组仍能检测到较高的Nestin蛋白表达,而Olig2转染组Nestin蛋白的表达明显减弱。结论:mESCs向NPCs分化过程,过表达Olig2可降低Nestin蛋白的表达。 展开更多

关键词 小鼠胚胎干细胞 神经前体细胞 过表达 少突胶质细胞转录因子2 巢蛋白

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新疆哈萨克族人神经前体细胞表达发育调控样蛋白4基因rs3865418多态性与中心性肥胖的相关性 被引量：1

4

作者 王红梅 洪静 +3 位作者 罗文利 常建航 姚晓光 李南方 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期533-537,共5页

目的研究哈萨克族人神经前体细胞表达发育调控样蛋白4(NEDD4L)基因rs3865418多态性与中心性肥胖的相关性。方法以哈萨克族自然人群横断面流行病学调查为基础进行病例-对照研究。采用TaqMan PCR技术对rs3865418多态性在哈萨克族自然人群... 目的研究哈萨克族人神经前体细胞表达发育调控样蛋白4(NEDD4L)基因rs3865418多态性与中心性肥胖的相关性。方法以哈萨克族自然人群横断面流行病学调查为基础进行病例-对照研究。采用TaqMan PCR技术对rs3865418多态性在哈萨克族自然人群中(共856例,其中男性364例、女性492例;肥胖组478例、对照组378例)进行分型,分析其与哈萨克族人肥胖的相关性。结果共有851例研究对象基因型分型成功,在总体、男性、女性哈萨克族自然人群中,rs3865418多态性的基因型、等位基因在肥胖组及对照组分布差异无统计学意义(P>0.05);男性腰围平均水平有C/C携带者>C/T携带者>T/T携带者的趋势,而女性腰围平均水平有C/C携带者<C/T携带者<T/T携带者的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 NEDD4L的rs3865418多态性与新疆哈萨克族中心性肥胖不相关,该变异可能不是哈萨克族人中心性肥胖的易感因素。 展开更多

关键词 神经前体细胞表达发育调控样蛋白4基因 中心性肥胖 哈萨克族 rs3865418

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神经前体细胞表达下调因子8类泛素修饰抑制因子MLN4924对单核巨噬细胞白血病细胞增殖和凋亡的影响 被引量：1

5

作者 裴钰君 朱宁 +1 位作者 郭银汉 王庆阳 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期424-429,共6页

目的观察神经前体细胞表达下调因子8（NEDD8）类泛素修饰抑制因子MLN4924对单核巨噬细胞白血病细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法 MLN4924 0.25~4.0μmol·L-1与U937细胞、THP-1细胞、Mo7e细胞和RAW264.7细胞作用24 h,采用MTT... 目的观察神经前体细胞表达下调因子8（NEDD8）类泛素修饰抑制因子MLN4924对单核巨噬细胞白血病细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法 MLN4924 0.25~4.0μmol·L-1与U937细胞、THP-1细胞、Mo7e细胞和RAW264.7细胞作用24 h,采用MTT法检测细胞存活。MLN4924 0.25~8.0μmol·L-1与RAW264.7细胞作用24 h,用Western蛋白质印迹法检测NEDD8类泛素化修饰的主要底物cullin蛋白表达水平。MLN4924 0.5μmol·L-1作用于RAW264.7细胞24 h,用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率。结果 MLN4924 0.25~4.0μmol·L-1作用24 h对RAW264.7细胞、U937细胞、THP-1细胞和Mo7e细胞增殖具有抑制作用,IC50分别为0.52,3.11,2.89和0.76μmol·L-1;对正常小鼠骨髓巨噬细胞增殖无明显影响。MLN4924 0.25~8.0μmol·L-1作用24 h,NEDD8类泛素化修饰的cullin蛋白表达减少（P〈0.01）,表明RAW264.7细胞NEDD8修饰逐渐减少。MLN4924 0.5,1.0和2.0μmol·L-1作用于RAW264.7细胞24 h,G0/G1期细胞百分率由正常对照组的（61.3±1.3）%分别升高到（64.5±1.5）%（P〈0.05）,（69.5±2.3）%（P〈0.01）和（72.8±1.7）%（P〈0.01）,细胞凋亡率由正常对照组的（1.5±0.3）%分别升高到（2.3±0.5）%,（4.3±0.9）%（P〈0.05）和（7.5±0.8）%（P〈0.01）。结论 MLN4924能够明显抑制单核巨噬细胞白血病细胞增殖,并诱导其细胞周期阻滞和细胞凋亡。 展开更多

关键词 MLN4924 神经前体细胞表达下调因子8 单核细胞 白血病 细胞增殖 细胞凋亡

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星形胶质细胞通过Cx47调控外泌体介导的CHI3L1分泌并促进少突胶质前体细胞增殖

6

作者 张笑妍 程楠楠 彭彦 《中南大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第4期573-585,共13页

目的:神经退行性变性疾病与髓鞘缺失紧密相关,而少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)的增殖和分化是髓鞘修复的关键,但其调控机制尚未完全明确。本研究旨在探讨星形胶质细胞(astrocytes,ASTs)通过间隙连接蛋白47(co... 目的:神经退行性变性疾病与髓鞘缺失紧密相关,而少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)的增殖和分化是髓鞘修复的关键,但其调控机制尚未完全明确。本研究旨在探讨星形胶质细胞(astrocytes,ASTs)通过间隙连接蛋白47(connexin 47,Cx47)调控外泌体介导的几丁质酶3样蛋白1(chitinase-3-like protein 1,CHI3L1)分泌及其对OPCs增殖的影响机制。方法:采用清洁的出生后第1天斯普拉格-道利(postnatal day 1 Sprague-Dawley,P1SD)乳鼠原代细胞,建立OPCs与ASTs上清液共培养组(A组)、ASTs与OPCs直接接触培养组(C组)及OPCs单独培养组(O组)。采用光学显微镜、5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(5-ethynyl-2'-deoxyuridine,EdU)掺入及流式细胞术评估细胞状态和增殖能力。采用转录组测序(RNA sequencing,RNA-Seq)和生物信息学分析(bioinformatics analysis,BA)筛选3组中OPCs的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)。采用蛋白质印迹(Western blotting,WB)和流式细胞术分析各培养组蛋白质表达和细胞周期。采用差速离心法分离、提纯外泌体,通过纳米颗粒追踪分析(nanoparticle tracking analysis,NTA)、透射电子显微镜分析观察OPCs分泌的外泌体数量和质量,采用WB验证外泌体中CHI3L1的表达水平。采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术敲除Cx47,评估敲除后OPCs增殖能力和外泌体分泌情况。构建包裹CHI3L1的小单层脂质体(single unilamellar vesicles,SUVs)作为人工外泌体模型,采用NTA和电子显微镜鉴定其结构和尺寸。在敲除Cx47后,补充人工外泌体并采用流式细胞术和EdU试验检测OPCs增殖情况。结果:在直接接触共培养条件下,相较于O组和A组,C组OPCs增殖最为显著(P<0.05)。RNA-Seq和WB分析结果显示,ASTs通过Cx47显著促进OPCs的增殖,并增强富含CHI3L1的外泌体的分泌。在采用siRNA技术抑制Cx47表达后,OPCs增殖活性以及外泌体释放量均显著降低(P<0.05);再次补充分离提纯的外泌体和外源性CHI3L1后,采用siRNA技术敲除Cx47对OPCs细胞增殖的抑制作用被削弱。结论:本研究揭示了ASTs通过Cx47调控OPCs增殖的新途径,ASTs在直接接触OPCs时通过Cx47增强富含CHI3L1的外泌体分泌,将细胞间接触信号转化为分泌信号,从而促进OPCs增殖。CHI3L1作为外泌体中的关键分子,在神经系统中的功能和髓鞘修复中的作用机制值得深入研究。 展开更多

关键词 少突胶质前体细胞 星形胶质细胞 间隙连接蛋白47 外泌体 几丁质酶3样蛋白1 5-乙炔基-2'-脱氧尿苷 转录组测序 差异表达基因 细胞增殖

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纤维连接蛋白在小鼠胚胎干细胞诱导为神经前体细胞中的作用 被引量：5

7

作者 徐海伟 吴旋 +3 位作者 黎海蒂 范晓棠 曹娟 唐军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期197-200,共4页

目的　观察采用ITSF和N2 无血清培养基诱导小鼠胚胎干细胞为神经前体细胞的作用及纤维连接蛋白对神经诱导的影响。方法　小鼠胚胎干细胞的培养和无血清诱导为神经前体细胞 ,NBT BCIP染色 ,Nestin免疫组化染色。结果　细菌培养皿法或悬... 目的　观察采用ITSF和N2 无血清培养基诱导小鼠胚胎干细胞为神经前体细胞的作用及纤维连接蛋白对神经诱导的影响。方法　小鼠胚胎干细胞的培养和无血清诱导为神经前体细胞 ,NBT BCIP染色 ,Nestin免疫组化染色。结果　细菌培养皿法或悬滴法培养胚体、ITSF或N2 无血清培养基均能将小鼠胚胎干细胞诱导为神经前体细胞。纤维连接蛋白预处理培养皿表面 ,对胚体的贴壁情况影响不大 ,但能使无血清培养后存活的细胞增多。结论　小鼠胚胎干细胞在ITSF和N2 培养基均能分化为神经前体细胞 ,在N2 展开更多

关键词 胚胎干细胞 神经前体细胞 细胞分化 纤维连接蛋白 小鼠

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腺病毒载体介导的LacZ基因在神经前体细胞的转染和表达 被引量：5

8

作者 郭灵 谢瑶 +1 位作者 汪华侨 姚志彬 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期135-138,共4页

为了观察含报告基因 L ac Z的重组 5型腺病毒载体 ( Ad5CMVLac Z)在神经前体细胞转染和表达的量效关系并探讨用该载体构建基因修饰细胞的可能性 ,本研究用不同滴度 ( 1× 10 3～ 1× 10 1 0 PFU/ml)的 Ad5CMVLac Z转染体外培养... 为了观察含报告基因 L ac Z的重组 5型腺病毒载体 ( Ad5CMVLac Z)在神经前体细胞转染和表达的量效关系并探讨用该载体构建基因修饰细胞的可能性 ,本研究用不同滴度 ( 1× 10 3～ 1× 10 1 0 PFU/ml)的 Ad5CMVLac Z转染体外培养的 SD胎鼠(胎龄 12 d)海马神经前体细胞 ,用β-半乳糖苷酶 (β-gal)免疫组化反应检测转染效率。结果显示 :当病毒滴度为 1× 10 7时 ,转染率约为 5 0 % ,当滴度增加到 1× 10 1 0时 ,转染率达 10 0 %。Ad5CMVL ac Z在神经前体细胞的转染率具有滴度依赖性的量效关系。表明高滴度的 Ad5CMVLac Z成功地转染了大部分神经前体细胞 ,Lac Z基因也得到充分表达。提示神经前体细胞是该载体转染的适宜靶细胞 ,并有可能通过该载体转导目的基因 。 展开更多

关键词 腺病毒载体 LACZ基因 神经前体细胞 转染 表达 大鼠

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大脑皮质机械性损伤诱导Nestin表达和神经前体细胞增殖 被引量：21

9

作者 阮奕文 王传恩 +1 位作者 童健尔 姚志彬 《中山医科大学学报》 CSCD 1999年第3期171-173,共3页

目的：探讨皮质损伤后 Ｎｅｓｔｉｎ 的表达和神经前体细胞的增殖情况。方法：在立体定位仪上横切成年大鼠的大脑皮质和胼胝体，于术后１４ ｄ 和３０ ｄ 分别杀死动物。用 Ｎｅｓｔｉｎ 、 Ｇ Ｆ Ａ Ｐ免疫组化和 Ｎｉｓｓｌ 染色方法... 目的：探讨皮质损伤后 Ｎｅｓｔｉｎ 的表达和神经前体细胞的增殖情况。方法：在立体定位仪上横切成年大鼠的大脑皮质和胼胝体，于术后１４ ｄ 和３０ ｄ 分别杀死动物。用 Ｎｅｓｔｉｎ 、 Ｇ Ｆ Ａ Ｐ免疫组化和 Ｎｉｓｓｌ 染色方法，观察损伤后神经前体细胞和反应性星形胶质细胞的反应模式。结果：损伤后，伤口周围的皮质、扣带和胼胝体出现大量的 Ｎｅｓｔｉｎ 阳性细胞，伤侧侧脑室室管膜下区（ Ｓ Ｖ Ｚ） 的神经前体细胞也分裂增殖。 Ｎｅｓｔｉｎ 在皮质的表达呈现一个以切口为中心的梯度反应模式并持续到术后３０ ｄ 。在分布上，神经前体细胞与反应性星形胶质细胞有部分重叠。结论：机械性大脑皮质损伤可诱导切口周围和侧脑室 Ｓ Ｖ Ｚ神经前体细胞增殖，后者可能对脑损伤后的修复起重要作用。 展开更多

关键词 NESTIN 大脑皮质损伤 神经前体细胞 巢蛋白

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神经前体细胞的分离培养及绿色荧光蛋白基因的转染 被引量：7

10

作者 庄菁 曾园山 +1 位作者 罗超权 李海标 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第5期342-344,I003,共4页

【目的】为替换中枢神经损伤后死亡的神经元提供方便追踪观察的神经前体细胞。【方法】应用含碱性成纤维生长因子 (bFGF)的无血清培养技术 ,从新生大鼠海马组织分离培养神经前体细胞 ,并借助免疫组织化学技术检测这些细胞巢蛋白 (nestin... 【目的】为替换中枢神经损伤后死亡的神经元提供方便追踪观察的神经前体细胞。【方法】应用含碱性成纤维生长因子 (bFGF)的无血清培养技术 ,从新生大鼠海马组织分离培养神经前体细胞 ,并借助免疫组织化学技术检测这些细胞巢蛋白 (nestin)的表达以及细胞分化后神经丝蛋白 (NF)和胶质原纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达。采用磷酸钙法将绿色荧光蛋白(GFP)基因转染目的细胞内。【结果】从海马组织分离的细胞具有分裂能力 ,能表达nestin。分化后一些细胞能表达NF ,而另一些细胞则表达GFAP。GFP基因修饰的细胞能发出荧光。【结论】从海马组织分离的细胞能表达nestin ,属于神经前体细胞 ,它们具有明显的增殖能力。有些神经前体细胞已经分化为神经元和神经胶质细胞。GFP基因已成功转染到神经前体细胞内 ,并表达了GFP。 展开更多

关键词 神经前体细胞 细胞培养 绿色荧光蛋白 基因转染 巢蛋白 大鼠

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诱导胶质纤维酸性蛋白阳性神经前体细胞系向神经元分化

11

作者 白云 林昌盛 +5 位作者 扈启宽 李肖霞 陆爱丽 王淑玲 李凌松 沈丽 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期266-270,共5页

目的 :探讨来源于人胚胎脑室下区 (SVZ)的胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)阳性神经前体细胞系向神经元分化的潜能。方法 :分别采用定量RT PCR、Western印迹分析及免疫荧光染色检测被全反式视黄酸诱导前后GFAP阳性神经前体细胞系中神经干细胞和... 目的 :探讨来源于人胚胎脑室下区 (SVZ)的胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)阳性神经前体细胞系向神经元分化的潜能。方法 :分别采用定量RT PCR、Western印迹分析及免疫荧光染色检测被全反式视黄酸诱导前后GFAP阳性神经前体细胞系中神经干细胞和神经元特异性标志物表达量的变化情况。采用免疫荧光染色检测GFAP阳性神经前体细胞系移植到动物体内后神经元特异性标志物表达情况。结果 :在体外诱导后 ,GFAP阳性神经前体细胞系中神经元特异性标志物在mRNA和蛋白水平的表达量上升 ,而神经干细胞标志物表达量下降。移植动物体内 ,GFAP阳性神经前体细胞系可分化产生神经元。结论 :GFAP阳性神经前体细胞系在体内外可以向神经元诱导分化。 展开更多

关键词 神经前体细胞 神经元 细胞分化 胶质纤维酸性蛋白

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人类羊膜细胞表达神经干细胞特异性蛋白研究 被引量：8

12

作者 蔡哲 潘琳 +5 位作者 舒峻 张岚 郭艳茹 耿同超 牟亮 左萍萍 《中国康复理论与实践》 CSCD 2005年第12期965-967,i0001,共4页

目的利用神经干细胞特异性标志蛋白鉴定人类羊膜组织中多分化潜能神经前体细胞的存在。方法利用免疫组织化学法检测人类羊膜组织和培养人类羊膜细胞中巢蛋白(nestin)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、musashi-1、波形蛋白(vi mentin)和PSA-N... 目的利用神经干细胞特异性标志蛋白鉴定人类羊膜组织中多分化潜能神经前体细胞的存在。方法利用免疫组织化学法检测人类羊膜组织和培养人类羊膜细胞中巢蛋白(nestin)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、musashi-1、波形蛋白(vi mentin)和PSA-NCAM等神经干细胞特异性标志蛋白的表达。结果人羊膜组织中存在nestin/GFAP双阳性细胞,此外,还表达musashi-1、vi mentin和PSA-NCAM等神经干细胞特异性标志蛋白;培养羊膜细胞中存在vi mentin和PSA-NCAM阳性细胞,以及nestin/GFAP双阳性细胞。结论羊膜组织和培养羊膜细胞中有神经干细胞特异性标记蛋白的表达。 展开更多

关键词 人类羊膜细胞 神经前体细胞 巢蛋白 MUSASHI-1

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胶质瘤microRNA表达谱类似于神经前体细胞

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作者 王皓帆 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1603-1603,共1页

关键词 胶质瘤 神经前体细胞 脑组织 表达谱

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Aβ_(25-35)抑制成年小鼠海马齿状回区神经前体细胞增殖 被引量：2

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作者 李学坤 左萍萍 +1 位作者 孔令娜 张卿 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期808-811,共4页

目的　观察Aβ2 5-3 5对成年小鼠海马神经前体细胞增殖的影响。方法　 2 0只成年BALB/c小鼠随机分为对照组和模型组 ,对照组注射等量无菌生理盐水 ,模型组侧脑室注射 3μlAβ2 5-3 5(1g·L-1)。动物分别在Aβ2 5-3 5注射后d 5、10、... 目的　观察Aβ2 5-3 5对成年小鼠海马神经前体细胞增殖的影响。方法　 2 0只成年BALB/c小鼠随机分为对照组和模型组 ,对照组注射等量无菌生理盐水 ,模型组侧脑室注射 3μlAβ2 5-3 5(1g·L-1)。动物分别在Aβ2 5-3 5注射后d 5、10、2 0、30灌流处死。动物每次处死前均腹腔注射 3次BrdU(5 0mg·kg-1,间隔 8h)。鼠脑切取冰冻切片 ,进行神经元特异性核蛋白 (NeuN)免疫荧光和BrdU免疫组织化学染色 ,以观察神经元数目及其前体细胞增殖情况。结果　对照组小鼠海马神经细胞形态清晰完整 ,排列规则 ,而侧脑室注射Aβ2 5-3 5后的小鼠海马NeuN阳性细胞数明显减少 ,且同部位的BrdU阳性细胞数目亦明显减少 (P <0 .0 1)。结论　Aβ2 5-3 5在中枢神经系统不仅表现为对成熟神经元的毒性作用 ,而且还明显抑制神经前体细胞的增殖 ,从而影响神经的发生过程。 展开更多

关键词 β淀粉样蛋白25~35片段 海马齿状回 神经前体细胞 细胞增殖 小鼠

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bHLH因子对大脑神经前体细胞的增殖分化与命运决定的调节

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作者 付志猛 芦国珍 赵湘辉 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期321-327,共7页

神经前体细胞(neural progenitor cells,NPCs)是具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞,它的增殖和分化受到多种内源或者外源因子,以及邻近或远程细胞信号通路的调控。多项研究表明,碱性螺旋——环——螺旋(basic helix-loop-helix,b H... 神经前体细胞(neural progenitor cells,NPCs)是具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞,它的增殖和分化受到多种内源或者外源因子,以及邻近或远程细胞信号通路的调控。多项研究表明,碱性螺旋——环——螺旋(basic helix-loop-helix,b HLH)家族转录因子之间相互联系,相互竞争,广泛参与调控端脑的发育过程,在NPCs向神经元和神经胶质细胞分化过程中起着重要的调控作用。而b HLH家族分子的不同的表达状态,即持续表达或波动表达,又与NPCs增殖或者分化的最终结局有着重要的关系。本文主要对在端脑发育中有重要代表性作用的b HLH转录因子,以及它们之间的表达调控关系的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 bHLH因子 神经前体细胞 持续表达 波动表达

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大鼠Shh-N融合蛋白的表达、纯化及功能研究

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作者 孙朝晖 赖燕来 +3 位作者 曾文文 郭雅南 左焕琮 谢佐平 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第6期969-973,共5页

为了获得重组SonichedgehogN端蛋白 (Shh N)并研究其功能 ,应用PCR技术扩增Shh NcDNA ,然后克隆至原核表达质粒中 ,转化E .coli后获得表达菌株 ,经 1mmol/LIPTG诱导高效表达出带有His tag的融合蛋白 ,其中大部分为可溶性蛋白 ,少量为包... 为了获得重组SonichedgehogN端蛋白 (Shh N)并研究其功能 ,应用PCR技术扩增Shh NcDNA ,然后克隆至原核表达质粒中 ,转化E .coli后获得表达菌株 ,经 1mmol/LIPTG诱导高效表达出带有His tag的融合蛋白 ,其中大部分为可溶性蛋白 ,少量为包涵体 .用His tag特异性结合树脂纯化可溶性融合蛋白 ,经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一区带 ,凝胶自动扫描分析表明 ,Shh N的纯度达 85%以上 .纯化后的Shh N在成纤维生长因子 8(FGF8)的协同作用下 ,能诱导神经前体细胞 (NPC)向酪氨酸羟化酶阳性神经元 (TH+ )发育 .在此基础上可以诱导不同类型的人类干细胞定向分化为多巴胺 (DA)神经元 ,从而为临床治疗帕金森病 (PD) 展开更多

关键词 重组融合蛋白 蛋白质纯化 神经前体细胞 TH免疫阳性神经元

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敲减NEDD1表达抑制肺腺癌细胞增殖与迁移

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作者 郭君琪 杨赟 +4 位作者 张滢泉 李春桥 王浛睿 孔丽君 胡金霞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1798-1803,共6页

目的:探讨神经前体细胞表达发育下调蛋白1(NEDD1)在肺癌发生和发展中的作用。方法:采用免疫组化实验检测NEDD1在肺癌组织中的表达情况,结合数据库资料分析NEDD1在肺癌组织与癌旁正常组织中的表达有无差异,并分析NEDD1的表达水平与肺癌... 目的:探讨神经前体细胞表达发育下调蛋白1(NEDD1)在肺癌发生和发展中的作用。方法:采用免疫组化实验检测NEDD1在肺癌组织中的表达情况,结合数据库资料分析NEDD1在肺癌组织与癌旁正常组织中的表达有无差异,并分析NEDD1的表达水平与肺癌预后的相关性;敲减NEDD1在A549细胞的表达后用平板集落形成实验检测集落形成能力的变化,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布的情况,Transwell小室实验检测对细胞的迁移能力的影响,Western blot检测细胞周期相关蛋白的表达,并分析NEDD1与周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)表达的相关性。结果:与正常肺组织相比,肺癌组织中NEDD1表达水平升高,Kaplan-Meier曲线预后分析显示NEDD1高表达者预后差,NEDD1低表达者预后较好;光镜下观察可见敲减NEDD1表达的A549细胞增殖速度明显减慢,平板集落形成能力降低(P<0.05);与对照组相比,敲减NEDD1表达促进A549细胞凋亡,抑制细胞的迁移;与对照组相比,敲减NEDD1表达后G 1期细胞的比例增加,细胞阻滞于G 1/S期,Western blot检测周期相关蛋白水平可见p-Rb和cyclinD1蛋白表达水平降低,p-Chk1、p-Chk2和p-p53蛋白表达水平升高(P<0.05);数据库分析结果示NEDD1与CDK2的表达呈正相关。结论:NEDD1具有抑制肺癌细胞凋亡、加速细胞周期进程从而促进细胞增殖的能力,且其在肺腺癌组织中的高表达与患者预后不良相关,因此可以作为肺腺癌诊断和预后新的标志分子。 展开更多

关键词 肺癌 细胞凋亡 细胞增殖 细胞周期 神经前体细胞表达发育下调蛋白1

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被移植入小鼠脑中的干细胞源性人神经元具有阿尔茨海默病特征

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作者 范冲竹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1236-1236,共1页

人多能干细胞（pluripotent stem cells,PSCs）为研究人类疾病如阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）的物种特异性提供了独特的工具。然而,神经元的体外培养剥夺了它们原本生长的自然环境。于是Espuny-Camacho等将人PSCs源性皮层... 人多能干细胞（pluripotent stem cells,PSCs）为研究人类疾病如阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）的物种特异性提供了独特的工具。然而,神经元的体外培养剥夺了它们原本生长的自然环境。于是Espuny-Camacho等将人PSCs源性皮层神经元前体细胞移植入AD模型小鼠的脑中,结果发现,人类神经元能够分化并融合到宿主脑中. 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 人多能干细胞 PLURIPOTENT 前体细胞 接形 鼠脑 体外培养 神经纤维缠结 蛋白磷酸化 人类疾病

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人类胚胎干细胞体外分化形成包含多种细胞的类胚体 被引量：3

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作者 彭红梅 陈贵安 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期605-608,共4页

目的：研究人类胚胎干细胞的体外多向分化能力。方法：胚胎干细胞在无饲养细胞、无碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、悬浮条件下培养形成类胚体。采用 RT-PCR 方法检测不同培养时间类胚体中某些功能细胞的特征分子标志。结果：在无饲养细... 目的：研究人类胚胎干细胞的体外多向分化能力。方法：胚胎干细胞在无饲养细胞、无碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、悬浮条件下培养形成类胚体。采用 RT-PCR 方法检测不同培养时间类胚体中某些功能细胞的特征分子标志。结果：在无饲养细胞、无 bFGF、悬浮条件下培养，胚胎干细胞自动聚集形成细胞团，逐渐长大并分化为囊实性类胚体。RT-PCR 显示，类胚体表达多种细胞前体及功能细胞的分子标志，如神经前体细胞、胰岛前体细胞以及成熟神经细胞、表达胰岛素的β细胞、表达胰高血糖素的α细胞和肝细胞等等。不同细胞标志在类胚体中出现的时间段有差异，先出现分化程度低的前体细胞分子标志，然后出现成熟细胞的分子标志。结论：人类胚胎干细胞体外可自然分化为表达多种细胞标志的类胚体，是进行深入体外诱导分化研究的基础。 展开更多

关键词 分子标志 表达 功能细胞 人类胚胎干细胞 体外分化 神经前体细胞 β细胞 多向分化 FGF RT-PCR

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大鼠癫痫敏感性增强过程中c-jun与GFAP基因表达的关系 被引量：1

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作者 高溪 史向党 +2 位作者 殷盛明 于德钦 张万琴 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期66-70,共5页

本文利用免疫细胞化学技术研究了海人酸(KA)致大鼠癫痫敏感性长期增强过程中,原癌基因c-jun的表达规律及其与星形胶质细胞增生、星形胶质细胞的标志物-神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)基因表达的关系。一次性给予惊厥剂量(10mg/kg,i.p.)... 本文利用免疫细胞化学技术研究了海人酸(KA)致大鼠癫痫敏感性长期增强过程中,原癌基因c-jun的表达规律及其与星形胶质细胞增生、星形胶质细胞的标志物-神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)基因表达的关系。一次性给予惊厥剂量(10mg/kg,i.p.)的KA后,海马CA1区出现c-jun的一过性高表达,之后呈持续表达状态直至给予KA后6个月。c-jun的表达明显地早于给予KA 2 d后方开始出现的海马内CA1区锥体细胞层神经元的死亡和C-JUN免疫反应阳性的星形胶质细胞的增生。星形胶质细胞GFAP基因的表达与其细胞内的c-jun表达的时间和部位一致。结果提示,c-jun在癫痫敏感性长期增强过程中持续表达,并可能参与介导神经元死亡和维持星形胶质细胞增生以及调控其细胞内GFAP基因的表达。 展开更多

关键词 大鼠 癫痫 敏感性 C-JUN GFAP 基因 表达 海马CA1区锥体细胞 海人酸 神经胶质原纤维酸性蛋白

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