目的:探讨和厚朴酚通过调节自噬对帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元及AMP活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)通路的影响。方法:构建帕金森病模型小鼠,分为模型...目的:探讨和厚朴酚通过调节自噬对帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元及AMP活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)通路的影响。方法:构建帕金森病模型小鼠,分为模型组、和厚朴酚低、高剂量组和自噬抑制组,4组小鼠分别灌胃生理盐水、20 mg/kg和厚朴酚、60 mg/kg和厚朴酚及60 mg/kg和厚朴酚,自噬抑制组同时灌胃20 mg/kg氯喹,另设未造模小鼠为对照组,每组16只,灌胃14 d。转棒实验及爬杆实验测试小鼠的行为学功能,TUNEL染色检测黑质神经元凋亡率,免疫组化染色检测黑质中beclin-1阳性细胞数,Western blot实验检测黑质中p-AMPK/AMPK、SIRT1、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)-II/LC3-I、beclin-1、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 related X protein,Bax)、胱天蛋白酶3(caspase-3)蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组小鼠的跌落潜伏期显著缩短,爬杆时间显著延长(P<0.05),黑质神经元凋亡率及Bax和caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05),黑质中beclin-1阳性细胞数及p-AMPK/AMPK、SIRT1、LC3-II/LC3-I和beclin-1蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组相比,和厚朴酚低、高剂量组小鼠上述指标呈相反趋势,且呈现剂量依赖性(P<0.05)。自噬抑制组处理后逆转了和厚朴酚的作用(P<0.05)。结论:和厚朴酚能激活自噬,活化AMPK/SIRT1通路,提高帕金森病模型小鼠黑质多巴胺能神经元的自噬水平,减少细胞凋亡,改善其行为学功能。展开更多
目的探讨miR-181a对七氟烷诱导海马神经元凋亡的影响及其机制。方法验证miR-181a与沉默信息调节因子1(silent information regulator1,sirt1)的关系,检测七氟烷对海马神经元中miR-181a表达及细胞凋亡的影响;将海马神经元转染后用3%七氟...目的探讨miR-181a对七氟烷诱导海马神经元凋亡的影响及其机制。方法验证miR-181a与沉默信息调节因子1(silent information regulator1,sirt1)的关系,检测七氟烷对海马神经元中miR-181a表达及细胞凋亡的影响;将海马神经元转染后用3%七氟烷处理4 h,分为空白组、miR-NC组、miR-181a组、anti-miR-NC组、anti-miR-181a组、(anti-miR-NC+si-NC)组、(anti-miR-181a+si-NC)组、(anti-miR-181a+si-sirt1)组,检测各组细胞中sirt1、核因子κB(NF-κB)、sirt1蛋白、miR-181a表达及细胞凋亡情况;体内实验检测七氟烷处理或同时抑制miR-181a和sirt1表达后海马组织中神经元凋亡变化。结果miR-181a靶向调控sirt1表达;七氟烷使海马神经元中miR-181a表达及细胞凋亡率升高(P<0.05);上调miR-181a抑制sirt1蛋白表达,促进NF-κB蛋白表达,而抑制miR-181a呈相反趋势(P<0.05);体内与体外实验均证实沉默sirt1可减弱下调miR-181a对七氟烷诱导的海马神经元凋亡的抑制作用。结论沉默miR-181a通过激活七氟烷诱导的海马神经元中sirt1/NF-κB通路,抑制海马神经元凋亡。展开更多
文摘目的:探讨和厚朴酚通过调节自噬对帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元及AMP活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)通路的影响。方法:构建帕金森病模型小鼠,分为模型组、和厚朴酚低、高剂量组和自噬抑制组,4组小鼠分别灌胃生理盐水、20 mg/kg和厚朴酚、60 mg/kg和厚朴酚及60 mg/kg和厚朴酚,自噬抑制组同时灌胃20 mg/kg氯喹,另设未造模小鼠为对照组,每组16只,灌胃14 d。转棒实验及爬杆实验测试小鼠的行为学功能,TUNEL染色检测黑质神经元凋亡率,免疫组化染色检测黑质中beclin-1阳性细胞数,Western blot实验检测黑质中p-AMPK/AMPK、SIRT1、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)-II/LC3-I、beclin-1、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 related X protein,Bax)、胱天蛋白酶3(caspase-3)蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组小鼠的跌落潜伏期显著缩短,爬杆时间显著延长(P<0.05),黑质神经元凋亡率及Bax和caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05),黑质中beclin-1阳性细胞数及p-AMPK/AMPK、SIRT1、LC3-II/LC3-I和beclin-1蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组相比,和厚朴酚低、高剂量组小鼠上述指标呈相反趋势,且呈现剂量依赖性(P<0.05)。自噬抑制组处理后逆转了和厚朴酚的作用(P<0.05)。结论:和厚朴酚能激活自噬,活化AMPK/SIRT1通路,提高帕金森病模型小鼠黑质多巴胺能神经元的自噬水平,减少细胞凋亡,改善其行为学功能。
文摘目的探讨miR-181a对七氟烷诱导海马神经元凋亡的影响及其机制。方法验证miR-181a与沉默信息调节因子1(silent information regulator1,sirt1)的关系,检测七氟烷对海马神经元中miR-181a表达及细胞凋亡的影响;将海马神经元转染后用3%七氟烷处理4 h,分为空白组、miR-NC组、miR-181a组、anti-miR-NC组、anti-miR-181a组、(anti-miR-NC+si-NC)组、(anti-miR-181a+si-NC)组、(anti-miR-181a+si-sirt1)组,检测各组细胞中sirt1、核因子κB(NF-κB)、sirt1蛋白、miR-181a表达及细胞凋亡情况;体内实验检测七氟烷处理或同时抑制miR-181a和sirt1表达后海马组织中神经元凋亡变化。结果miR-181a靶向调控sirt1表达;七氟烷使海马神经元中miR-181a表达及细胞凋亡率升高(P<0.05);上调miR-181a抑制sirt1蛋白表达,促进NF-κB蛋白表达,而抑制miR-181a呈相反趋势(P<0.05);体内与体外实验均证实沉默sirt1可减弱下调miR-181a对七氟烷诱导的海马神经元凋亡的抑制作用。结论沉默miR-181a通过激活七氟烷诱导的海马神经元中sirt1/NF-κB通路,抑制海马神经元凋亡。
