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温度波动通过调控磷酸化和亚硝基化对磷酸丙糖异构酶活性的影响
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作者 吴赛赛 王振宇 +5 位作者 摆玉蔷 侯成立 饶伟丽 李欣 张志胜 张德权 《食品科学》 北大核心 2025年第9期139-147,共9页
本研究通过外源添加蛋白激酶A和S-亚硝基谷胱甘肽,分析磷酸化和亚硝基化影响磷酸丙糖异构酶活性随时间变化的规律。通过构建不同温度条件下磷酸丙糖异构酶磷酸化和亚硝基化修饰高表达模型,探究磷酸化和亚硝基化在调节磷酸丙糖异构酶活... 本研究通过外源添加蛋白激酶A和S-亚硝基谷胱甘肽,分析磷酸化和亚硝基化影响磷酸丙糖异构酶活性随时间变化的规律。通过构建不同温度条件下磷酸丙糖异构酶磷酸化和亚硝基化修饰高表达模型,探究磷酸化和亚硝基化在调节磷酸丙糖异构酶活性中的作用。结果表明,4℃体外条件下,对照组样品在孵育6 h的磷酸丙糖异构酶活性、磷酸化水平和亚硝基化水平显著低于恒温+修饰组,磷酸化和亚硝基化共同作用提高了磷酸丙糖异构酶活性。与恒温+修饰组相比,幅度波动+修饰组磷酸化对酶活性的作用减弱,频率波动+修饰组亚硝基化对酶活性的作用增强。幅度波动+修饰组和频率波动+修饰组样品孵育6 h的β-折叠相对含量显著高于恒温+修饰组,无规卷曲相对含量显著低于恒温+修饰组。温度波动延缓磷酸丙糖异构酶结构的解聚。利用原子力显微镜观察发现,3个处理组孵育12 h的磷酸丙糖异构酶形态小于0 h,温度波动不改变磷酸丙糖异构酶的最终解聚形态。综上,在4℃体外孵育条件下,磷酸化水平和亚硝基化水平的提高延缓了磷酸丙糖异构酶的活性下降,温度幅度或频率波动影响磷酸化和亚硝基化对酶活性的调节作用,使其在孵育早期的活性提高,抑制其结构从有序向无序转变。 展开更多
关键词 磷酸异构酶 温度波动 活性 磷酸 亚硝基化
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重组日本血吸虫中国大陆株磷酸丙糖异构酶蛋白质表达、纯化及特性分析 被引量:14
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作者 余传信 朱荫昌 +3 位作者 殷旭仁 华万全 司进 管晓虹 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第4期31-33,共3页
磷酸丙糖异构酶(TPI)是已被公认的血吸虫病疫苗候选分子之一,本研究将日本血吸虫中国大陆株TPI分子基因DNA片段定向克隆到表达载体pGEX-4T-3(编码26kDa的GST蛋白)中,构建重组表达质粒,然后转化大肠杆... 磷酸丙糖异构酶(TPI)是已被公认的血吸虫病疫苗候选分子之一,本研究将日本血吸虫中国大陆株TPI分子基因DNA片段定向克隆到表达载体pGEX-4T-3(编码26kDa的GST蛋白)中,构建重组表达质粒,然后转化大肠杆菌BL21感受态细胞,阳性克隆用IPTG诱导,阳性菌株可表达分子量约55kDa的融合蛋白(GST-TPI),此融合蛋白可与GlutathioneSepharose4B结合成复合物,用凝血酶切割融合蛋白复合物,获得分子量约28kDa的重组表达TPI分子。重组TPI分子具有磷酸丙糖异构酶活性,并能被日本血吸虫重感染兔血清,血吸虫病人血清所识别。重组TPI免疫家兔产生抗体的效价最高可达1∶25600,该血清抗体能识别日本血吸虫中国大陆株成虫抗原中分子量约28kDa的蛋白条带。 展开更多
关键词 日本血吸虫 磷酸异构酶 TPI蛋白
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磷酸丙糖异构酶的折叠及稳定性研究 被引量:4
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作者 刘江红 石毅 周筠梅 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第5期465-472,共8页
从鸡胸肌中纯化出磷酸丙糖异构酶(triosephosphateisomerase,TIM),通过蛋白质内源荧光,圆二色性,紫外吸收二阶导数光谱等多种研究溶液构象的方法,对TIM被盐酸胍和热变性过程进行了详细的研究.结果表明,用不同测量方法得到TIM的变性过程... 从鸡胸肌中纯化出磷酸丙糖异构酶(triosephosphateisomerase,TIM),通过蛋白质内源荧光,圆二色性,紫外吸收二阶导数光谱等多种研究溶液构象的方法,对TIM被盐酸胍和热变性过程进行了详细的研究.结果表明,用不同测量方法得到TIM的变性过程均高度协同,没有观察到折叠中间态,应用单分子二态去折叠模型计算了TIM去折叠的热力学参数.通过圆二色光谱在222nm处的变化监测的TIM热变性过程也是高度协同的二态过程,天然态TIM的表观Tm为64.6℃.在低浓度盐酸胍存在下,TIM的热稳定性降低.讨论了二体蛋白质的可能去折叠机制,证明在使用的实验条件下磷酸丙糖异构酶去折叠过程中二级结构与三级结构的变化是同时发生的,其去折叠遵循观察不到二体解离的表观二态过程. 展开更多
关键词 磷酸异构酶 变性 构象变化 折叠中间态 二态模型
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蜜蜂丙糖磷酸异构酶基因及其编码蛋白的生物信息学分析及分子进化研究 被引量:2
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作者 徐剑 周君 +1 位作者 刘晓红 陆小平 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第2期270-275,共6页
运用生物信息学的方法对蜜蜂丙糖磷酸异构酶(AMTPI)基因及其编码蛋白序列进行了初步分析,得到了与基因和蛋白质组学研究相关的一些基本参数。结果表明,AMTPI基因序列由744个碱基组成,编码由247个氨基酸组成的蛋白质。AMTPI总的原子数目... 运用生物信息学的方法对蜜蜂丙糖磷酸异构酶(AMTPI)基因及其编码蛋白序列进行了初步分析,得到了与基因和蛋白质组学研究相关的一些基本参数。结果表明,AMTPI基因序列由744个碱基组成,编码由247个氨基酸组成的蛋白质。AMTPI总的原子数目为3818,分子式为C1 207H1920N328O359S4,分子量为26898.71,等电点pI=8.04,摩尔消光系数为34950,在哺乳动物体内的半衰期为30 h。疏水性分析结果表明AMTPI为亲水蛋白,不稳定参数为27.32,属较稳定蛋白,不含信号肽序列,跨膜结构不明显,亚细胞定位于细胞质。AMTPI具有多种二级结构形式,是典型的(α/β)8结构,在SWISS-MODEL服务器三维建模后,运用ViewerLite 5.0进行序列编辑,获得了AMTPI的三级结构模型。多重比对结果显示,多个物种丙糖磷酸异构酶(TPI)的整体相似度较高,有多个保守结构,可以作为分子进化研究的材料。用MEGA4.0软件按Minimum evolution方案进行分子系统演化分析,获得了TPI氨基酸序列的分子进化树。 展开更多
关键词 蜜蜂 磷酸异构酶 生物信息学分析 分子进化
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蜜蜂磷酸丙糖异构酶基因(AmTpi)全长cDNA的电子克隆及其验证 被引量:2
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作者 周君 徐剑 +1 位作者 相入丽 陆小平 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2009年第2期154-159,共6页
用电子克隆的方法获得蜜蜂(Apis mellifera)磷酸丙糖异构酶基因(triosephosphate isomerase,Tpi),对该基因序列进行克隆及生物信息学分析.结果表明,该基因全长1768 bp,具有完整的开放阅读框架(ORF),编码247个氨基酸的蛋白;其编码的氨基... 用电子克隆的方法获得蜜蜂(Apis mellifera)磷酸丙糖异构酶基因(triosephosphate isomerase,Tpi),对该基因序列进行克隆及生物信息学分析.结果表明,该基因全长1768 bp,具有完整的开放阅读框架(ORF),编码247个氨基酸的蛋白;其编码的氨基酸序列与果蝇(Drosophila melanogaster)、家蚕(Bombyxmori)、黄粉虫(Tenebrio molitor)、按蚊(Anopheles gambiae)、烟蚜夜蛾(Heliothis virescens)的磷酸丙糖异构酶的蛋白序列具有较高的保守性. 展开更多
关键词 电子克隆 EST数据库 磷酸异构酶 蜜蜂
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玉米磷酸丙糖异构酶基因的克隆及原核表达 被引量:1
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作者 马芳芳 苏彦冰 +2 位作者 张彬 李红英 韩渊怀 《山西农业大学学报(自然科学版)》 CAS 2016年第6期381-386,438,共7页
为克隆玉米(Zea mays L.)磷酸丙糖异构酶基因ZmTPI,并进行序列分析和原核表达研究,根据玉米TPI基因的cDNA全长序列设计特异引物,以玉米叶片总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增得到了约750bp的基因编码区cDNA片段,T/A克隆后进行了序列测定... 为克隆玉米(Zea mays L.)磷酸丙糖异构酶基因ZmTPI,并进行序列分析和原核表达研究,根据玉米TPI基因的cDNA全长序列设计特异引物,以玉米叶片总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增得到了约750bp的基因编码区cDNA片段,T/A克隆后进行了序列测定及序列分析,随后将克隆到的该基因片段构建到原核表达载体PGEX-4T-1上,得到的重组表达质粒GST-ZmTPI转化Bl21进行融合蛋白的诱导表达及纯化。结果显示,玉米ZmTPI(GenBank:EU959275)cDNA全长1 216bp,753bp开放阅读框编码250个氨基酸,推测分子量26.7205kDa,理论等电点为5.12;该蛋白具有高度保守的TIM结构域,与其它高等植物的同源蛋白有很高的相似性;进化树分析表明,玉米TPI与甘蔗亲缘关系最近,处于同一进化支;SDS-PAGE检测结果显示,成功诱导表达并且纯化了与预期大小一致的融合蛋白。玉米ZmTPI蛋白的基因克隆和原核表达及纯化的成功,为进一步研究目的蛋白的酶活性质及生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 玉米 磷酸异构酶 基因克隆 原核表达
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日本血吸虫磷酸丙糖异构酶编码基因的克隆与序列测定
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作者 汪学龙 沈继龙 +2 位作者 姚涌 江宝玲 蒋作君 《安徽医科大学学报》 CAS 2004年第1期5-8,共4页
目的 克隆和鉴定日本血吸虫磷酸丙糖异构酶 (SjT PI)编码基因 ,为寻找血吸虫病的候选疫苗联合应用打基础。方法 设计合成引物 ,抽提日本血吸虫成虫总RNA ,用RT PCR法从中扩增出SjTPI基因编码序列 ,将其克隆入pGEM T载体 ,用双酶切、... 目的 克隆和鉴定日本血吸虫磷酸丙糖异构酶 (SjT PI)编码基因 ,为寻找血吸虫病的候选疫苗联合应用打基础。方法 设计合成引物 ,抽提日本血吸虫成虫总RNA ,用RT PCR法从中扩增出SjTPI基因编码序列 ,将其克隆入pGEM T载体 ,用双酶切、以重组质粒为模板进行PCR扩增和测序进行鉴定。结果 RT PCR法从成虫总RNA中扩增出大小为 75 9bpSjTPI基因编码序列 ,重组质粒 pGEM SjT PI经双酶切、PCR扩增 ,均可获得一条与RT PCR产物一致的DNA片段 ,序列测定结果表明具有一个长度为 75 9bp的完整开放阅读框 ,与日本血吸虫 (菲律宾株 )和曼氏血吸虫磷酸丙糖异构酶核苷酸序列有高度同源性 (分别为 99%和88% )。结论 该实验成功地克隆了SjTPI编码基因 ,为进一步研究提供了条件。 展开更多
关键词 日本血吸虫 磷酸异构酶 基因编码 基因克隆 基因序列 序列测定
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地黄磷酸丙糖异构酶基因的克隆与空间表达 被引量:1
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作者 邵露营 周延清 +1 位作者 杨珂 郭萌萌 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第11期50-55,共6页
在已知地黄磷酸丙糖异构酶(RgTPI)基因少量片段的基础上,采用电子克隆技术克隆出RgTPI基因的完整开放阅读框(ORF),并进行生物信息学分析,采用实时荧光定量PCR (qRTPCR)法分析其空间表达模式,为进一步研究其在糖酵解过程中的作用及其他... 在已知地黄磷酸丙糖异构酶(RgTPI)基因少量片段的基础上,采用电子克隆技术克隆出RgTPI基因的完整开放阅读框(ORF),并进行生物信息学分析,采用实时荧光定量PCR (qRTPCR)法分析其空间表达模式,为进一步研究其在糖酵解过程中的作用及其他功能的开发应用奠定基础。结果表明,克隆得到的RgTPI基因完整ORF序列全长为765 bp,编码254个氨基酸,该序列与芝麻和猴面花等植物中的TPI基因有较高的同源性。经预测发现,RgTPI为稳定的亲水性蛋白,属于ICL-KPHMT超家族的成员。该蛋白中α螺旋占46.06%,无规卷曲占28.35%,延伸链占16.93%,β转角占8.66%,是一种转移酶,没有跨膜运输功能,不是分泌性蛋白,大多存在于线粒体中。qRT-PCR结果表明,RgTPI在地黄叶中的表达量明显高于根和茎。 展开更多
关键词 地黄 磷酸异构酶基因 RgTPI基因 生物信息学分析 空间表达
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一株滑液囊支原体的分离鉴定及其磷酸丙糖异构酶(Tpi)和丙酮酸激酶(PK)抗体制备
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作者 连丽燕 巩新民 +6 位作者 郭龙宗 李玉燕 蒋蔚 陈兆国 祁克宗 魏晓峰 韩先干 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第5期55-63,共9页
磷酸丙糖异构酶(Tpi)和丙酮酸激酶(PK)是滑液囊支原体(MS)进行糖酵解的关键酶,牛支原体和鸡毒支原体的Tpi(tpiA基因编码)和PK(pyk基因编码)位于细胞膜和细胞质上,参与对宿主细胞的粘附,而MS的tpiA和pyk分别编码Tpi和Pyk,目前尚未见相关... 磷酸丙糖异构酶(Tpi)和丙酮酸激酶(PK)是滑液囊支原体(MS)进行糖酵解的关键酶,牛支原体和鸡毒支原体的Tpi(tpiA基因编码)和PK(pyk基因编码)位于细胞膜和细胞质上,参与对宿主细胞的粘附,而MS的tpiA和pyk分别编码Tpi和Pyk,目前尚未见相关研究。本研究首先对临床分离的MS分离株的生长特性进行研究,然后使用Overlap PCR对tpiA和pyk进行点突变扩增,分别将其克隆至pET-28a载体并在BL21(DE3)中表达,用获得的TpiA和Pyk蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体。结果表明:分离的MS分离株(MS-SD2020)最高生长滴定为109,在生长60 h时达到最高滴定;对tpiA和pyk的序列进行分析表明,其在不同MS中高度保守,并成功表达大小分别为35.28和63.36 kDa的TpiA和Pyk重组蛋白,免疫后制备的兔多克隆抗体效价分别为32000和2048000,本研究为后续开展MS的TpiA和Pyk功能研究提供参考。 展开更多
关键词 滑液囊支原体 磷酸异构酶 酮酸激酶 抗体制备
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中华蜜蜂磷酸丙糖异构酶基因克隆及生物信息学分析 被引量:1
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作者 樊兆斌 张淑萍 +5 位作者 葛中东 周宛蓉 张凯 夏宇欣 姜莉莉 蒋培红 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第11期17-21,F0002,共6页
本试验克隆中华蜜蜂磷酸丙糖异构酶(Tpi)基因,并对其编码产物进行生物信息学分析预测。利用RT-PCR方法扩增中华蜜蜂幼虫Tpi基因(AcTpi),并对其核苷酸和推导氨基酸序列进行遗传演化分析,利用生物信息学软件对AcTpi编码的蛋白功能进行分... 本试验克隆中华蜜蜂磷酸丙糖异构酶(Tpi)基因,并对其编码产物进行生物信息学分析预测。利用RT-PCR方法扩增中华蜜蜂幼虫Tpi基因(AcTpi),并对其核苷酸和推导氨基酸序列进行遗传演化分析,利用生物信息学软件对AcTpi编码的蛋白功能进行分析和预测。预测分析结果表明,AcTpi具有完整的开放阅读框(ORF),CDS区为744 bp,编码247个氨基酸。理论分子量为26.88 kDa,理论等电点为7.76,不稳定系数为27.32,脂肪系数为93.52,平均亲水指数为-0.182。存在3个明显的疏水区,无信号肽,不存在跨膜区;其编码蛋白较稳定,为亲水性蛋白。二级结构预测显示,AcTpi编码的蛋白以无规则卷曲为主,存在多个α螺旋和β折叠区域。本试验成功克隆了中华蜜蜂幼虫Tpi基因,为深入研究AcTpi功能提供依据,为进一步阐明AcTpi在糖酵解过程中的作用及其功能的开发应用提供了科学依据。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 磷酸异构酶基因 基因扩增 生物信息学
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TPI缺乏症斑马鱼模型的构建及分析
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作者 孙飘 李颖 +1 位作者 刘帆 王璐 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期232-241,共10页
磷酸丙糖异构酶缺乏症(triosephosphate isomerase deficiency,TPI DF)是一种严重的多系统退行性疾病,通常表现为溶血性贫血、神经肌肉功能障碍和易感染,患者多于起病5年内死亡。目前尚不清楚TPI DF的具体发病机制,缺乏有效的临床治疗... 磷酸丙糖异构酶缺乏症(triosephosphate isomerase deficiency,TPI DF)是一种严重的多系统退行性疾病,通常表现为溶血性贫血、神经肌肉功能障碍和易感染,患者多于起病5年内死亡。目前尚不清楚TPI DF的具体发病机制,缺乏有效的临床治疗方法。本研究选取TPI DF患者中最常见的突变位点TPI1^(E105D),构建了表达人源性TPI1^(E105D)(hTPI1^(E105D))的转基因斑马鱼(Danio rerio)模型[Tg(Ubi:TPI1^(E105D)-eGFP)]。功能分析表明,过表达TPI1^(E105D)影响红系及髓系细胞发育、导致神经以及肌肉发育异常。综上所述,本研究构建了磷酸丙糖异构酶缺乏症的斑马鱼疾病模型,并能够复现TPI DF患者的大部分临床表型,该模型为后续研究TPI DF的发病机制及药物筛选提供了新的实验动物模型。 展开更多
关键词 磷酸丙糖异构酶缺乏症 TPI1^(E105D) 斑马鱼 疾病模型
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小麦TaTPI基因的克隆及其对非生物胁迫的响应
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作者 赵静雪 程琳 +7 位作者 苏秀荣 张盈盈 李静芳 张珂 王新国 孟晓丹 晁召飞 任江萍 《江苏农业科学》 北大核心 2025年第10期29-35,共7页
磷酸丙糖异构酶(TPI)是一种催化磷酸二羟基丙酮和3-磷酸甘油醛可逆转化的关键酶,在生物体抵御逆境胁迫中发挥着重要功能。以笔者所在课题组前期籽粒蛋白质组数据获得的部分高表达TPI蛋白序列为探针,通过小麦基因组数据库比对,结合RT-PC... 磷酸丙糖异构酶(TPI)是一种催化磷酸二羟基丙酮和3-磷酸甘油醛可逆转化的关键酶,在生物体抵御逆境胁迫中发挥着重要功能。以笔者所在课题组前期籽粒蛋白质组数据获得的部分高表达TPI蛋白序列为探针,通过小麦基因组数据库比对,结合RT-PCR技术,克隆了该基因的3个部分同源全长序列。采用生物信息学方法对这3个基因的保守结构域、序列特征进行了分析,并采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)技术分析了其组织特异性及其在逆境[高温、低温、高盐、干旱、脱落酸(ABA)]胁迫中的表达特征。结果表明,获得的3个同源基因序列长度分别为910、908、910 bp,均含有1个762 bp的开放阅读框,编码253个氨基酸,位于小麦第3染色体的短臂上,分别命名为TaTPI-3AS、TaTPI-3BS、TaTPI-3DS;保守域分析显示这3个基因均属于TIM家族,与二粒小麦、乌尔图小麦TPI基因的亲缘关系最近。qRT-PCR分析表明,3个同源基因主要在幼穗中表达;在高温、低温、高盐和ABA处理下,3个TaTPI基因均表现为在胁迫0.5 h表达水平低于对照;在PEG模拟干旱胁迫处理下,除了TaTPI-3DS在胁迫12、48、72 h表达量高于对照外,其余处理时间段均表现为下调。 展开更多
关键词 小麦 磷酸异构酶 基因克隆 表达特性 非生物胁迫
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草菇TPI基因的克隆、结构及其在同核、异核菌株中的表达量 被引量:7
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作者 刘朋虎 邓优锦 +1 位作者 江玉姬 谢宝贵 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2013年第1期63-67,共5页
分别从不能出菇的草菇单孢菌株PYd21(基因组测序菌株)和PYd15(重测序菌株)及由PYd21、PYd15配对杂交获得可正常出菇的异核菌株H15-21中克隆测序了磷酸丙糖异构酶(TPI)基因,并对TPI基因的结构及其在3个菌株中的表达量进行了分析.结果表明... 分别从不能出菇的草菇单孢菌株PYd21(基因组测序菌株)和PYd15(重测序菌株)及由PYd21、PYd15配对杂交获得可正常出菇的异核菌株H15-21中克隆测序了磷酸丙糖异构酶(TPI)基因,并对TPI基因的结构及其在3个菌株中的表达量进行了分析.结果表明:PYd21、PYd15中TPI基因的序列完全相同;转录组读段定位、双末端分析结果显示,TPI基因全长1015 bp,开放阅读框序列全长756 bp,编码251个氨基酸,有6个外显子、5个内含子;RNA加工过程中存在两种可变剪切类型和两个可变剪切位点;数字基因表达谱测序的结果表明,PYd21、PYd15和H15-21中TPI基因的表达量(TPM)分别为30.25、36.49、77.17,同时通过实时荧光定量PCR分析3个菌株中TPI基因的表达情况证实了该结果,表明草菇中TPI基因的表达表现出异核体表达的协同增效作用,预示着异核菌株中两种不同细胞核存在相互作用. 展开更多
关键词 草菇 磷酸异构酶 可变剪切 协同增效作用
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褐虾过敏原Cra c 8蛋白的结构分析和同源建模 被引量:5
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作者 陆宗超 王邦平 李振兴 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第9期177-181,共5页
为了进一步认识褐虾中的一种过敏原——磷酸丙糖异构酶过敏原(Cra c 8)的结构与功能关系,理解食物过敏原之间产生交叉反应的分子基础,采用生物信息学方法分析Cra c 8蛋白的理化性质和各级结构,探讨其与食物中该蛋白质在分子水平上的异... 为了进一步认识褐虾中的一种过敏原——磷酸丙糖异构酶过敏原(Cra c 8)的结构与功能关系,理解食物过敏原之间产生交叉反应的分子基础,采用生物信息学方法分析Cra c 8蛋白的理化性质和各级结构,探讨其与食物中该蛋白质在分子水平上的异同。结果表明:褐虾Cra c 8蛋白是由249个氨基酸组成的酸性蛋白质,与螯虾、对虾、三文鱼、小麦、蟑螂中的磷酸丙糖异构酶蛋白具有较高的同源性,亲疏水性区域相似;二级结构预测结果显示其以α-螺旋和不规则折叠为主,均没有β-折叠及β-转角区域;利用同源建模的方式成功的构建褐虾Cra c 8蛋白的空间结构。 展开更多
关键词 生物信息学 磷酸异构酶 过敏原 同源建模
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两个新的前列腺癌相关分泌蛋白的鉴定和表达
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作者 钱晓龙 施庆国 +5 位作者 庞博 武瑞琴 俞岚 李山虎 王洪涛 周建光 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期235-241,共7页
为了获得代表不同前列腺癌进展阶段的细胞系的胞外蛋白表达谱,验证其中差异表达蛋白是否为分泌蛋白,在细胞水平看其是否有作为前列腺癌血清标志物的潜质,文章利用双向电泳寻找胞外蛋白中差异表达的点,并质谱鉴定其是何种蛋白质。应用RT-... 为了获得代表不同前列腺癌进展阶段的细胞系的胞外蛋白表达谱,验证其中差异表达蛋白是否为分泌蛋白,在细胞水平看其是否有作为前列腺癌血清标志物的潜质,文章利用双向电泳寻找胞外蛋白中差异表达的点,并质谱鉴定其是何种蛋白质。应用RT-PCR方法分析候选分子在8种细胞系中的表达和对雄激素刺激的应答,构建了候选分子的真核表达载体,瞬时转染293T细胞,应用标签抗体Western blotting方法检测验证细胞培养基中候选分子的表达。结果表明:筛选出两个C4-2胞外高表达的分子--磷酸丙糖异构酶-1(Triosephosphate isomerase1,TPI1)和多配体聚糖结合蛋白(Syndecan binding protein,syntenin,ST1);转录水平发现它们与前列腺癌恶性程度相关,并且后者受雄激素的作用下调;二者均为分泌蛋白。磷酸丙糖异构酶-1和多配体聚糖结合蛋白均有作为指示前列腺癌发展阶段的血清标志物的潜质。 展开更多
关键词 前列腺癌 血清标志物 分泌蛋白 磷酸异构酶-1 多配体聚结合蛋白
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安徽省部分地区猪贾第虫PCR检测及阳性株的分子特性 被引量:3
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作者 方追 贾昌泽 +4 位作者 黄佳敏 任琦 刘欣超 顾有方 李文超 《动物医学进展》 北大核心 2020年第6期55-58,共4页
为了解安徽省规模化猪场贾第虫感染情况及分子特性,从安徽省多地共采集500份新鲜猪粪样,提取基因组DNA,首先采用基于蓝氏贾第虫SSUrRNA基因套式PCR对所有粪便进行检测,并对获得的阳性样本分别基于贾第虫TPI和GDH基因的PCR扩增,然后对获... 为了解安徽省规模化猪场贾第虫感染情况及分子特性,从安徽省多地共采集500份新鲜猪粪样,提取基因组DNA,首先采用基于蓝氏贾第虫SSUrRNA基因套式PCR对所有粪便进行检测,并对获得的阳性样本分别基于贾第虫TPI和GDH基因的PCR扩增,然后对获得的PCR产物进行测序和分析,确定贾第虫的聚集体。结果显示,500份猪粪便样品中,SSUrRNA基因套式PCR仅在利辛猪场检测出1例贾第虫阳性样本,猪贾第虫阳性率为0.20%。TPI和GDH基因的测序分析显示该贾第虫基因型为聚集体E。 展开更多
关键词 蓝氏贾第虫 小亚基核体rRNA基因 磷酸异构酶 谷氨酸脱氢酶
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计算机辅助设计酶
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《现代化工》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期67-67,共1页
美国和德国的科学家已成功地研制出一种生物催化剂NovoTim,它能进行一种通常是由磷酸丙糖异构酶完成的反应。他们用计算机预测从非活性蛋白质生成合成酶所需要的突变。
关键词 生物催化剂 磷酸异构酶 合成酶 二羟基磷酸 甘油醛-3-磷酸 计算机辅助设计酶
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遗传学
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《中国医学文摘(基础医学)》 CSCD 1992年第3期129-131,共3页
建立了红细胞磷酸丙糖异构酶(TPI)测定法。对24名成年男性和20名女性作酶活性测定,结果分别为1980±413EU/gHb及2130±543EU/gHb,两组无显著差异。故将男女合并值2048±471EU/gHb作为中国成人红细胞TPI活性正常值。测定19... 建立了红细胞磷酸丙糖异构酶(TPI)测定法。对24名成年男性和20名女性作酶活性测定,结果分别为1980±413EU/gHb及2130±543EU/gHb,两组无显著差异。故将男女合并值2048±471EU/gHb作为中国成人红细胞TPI活性正常值。测定19例正常脐血红细胞TPI活性为1840±658EU/gHb,与成年组相比仍无显著差异。 展开更多
关键词 TPI 遗传学 磷酸异构酶 红细胞
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芒果酶类的多态性
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作者 Chemda Degani 余天一 《世界热带农业信息》 1992年第1期29-33,共5页
本文描述了41个芒果栽培品种的(顺)乌头酸酶、异柠檬酸脱氢酶、亮氨酸氨肽酶、磷酸葡萄糖异构酶、磷酸葡萄糖变位酶以及丙糖磷酸异构酶的同工酶电泳图谱。同工酶谱带证明某些芒果栽培品种起源于异型杂交。以前报道的另一些栽培品种的来... 本文描述了41个芒果栽培品种的(顺)乌头酸酶、异柠檬酸脱氢酶、亮氨酸氨肽酶、磷酸葡萄糖异构酶、磷酸葡萄糖变位酶以及丙糖磷酸异构酶的同工酶电泳图谱。同工酶谱带证明某些芒果栽培品种起源于异型杂交。以前报道的另一些栽培品种的来源与它们的同工酶谱带不相符。 展开更多
关键词 同工酶谱带 磷酸异构酶 栽培品种 异型杂交 亮氨酸氨肽酶 电泳图谱 同工酶分析 淀粉凝胶电泳 多态性 栽培种
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