硒蛋白PP1(SEPP1)过表达抑制786-O和769-P人肾癌细胞增殖并引起G2/M期阻滞 被引量：5

1

作者 刘侃 赵超飞 +5 位作者 陈建文 巫胜攀 姚远新 武翀 罗国雄 张旭 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期764-769,共6页

目的构建硒蛋白PP1(SEPP1)基因的慢病毒质粒并研究SEPP1对人肾透明细胞癌细胞增殖的影响。方法以HEK293T细胞的c DNA为模板,通过PCR法获得人SEPP1全长序列片段,并与慢病毒表达载体p LV-EGFP(2A)Puro质粒相连接,获得重组p LV-EGFP(2A)Pur... 目的构建硒蛋白PP1(SEPP1)基因的慢病毒质粒并研究SEPP1对人肾透明细胞癌细胞增殖的影响。方法以HEK293T细胞的c DNA为模板,通过PCR法获得人SEPP1全长序列片段,并与慢病毒表达载体p LV-EGFP(2A)Puro质粒相连接,获得重组p LV-EGFP(2A)Puro-SEPP1载体并进行基因测序验证。将重组慢病毒载体与包装质粒共同转染HEK293T细胞,进行病毒包装。用病毒上清感染786-O和769-P细胞,采用Western blot法检测SEPP1蛋白表达。按照重组慢病毒感染细胞、空载体感染细胞、未感染细胞进行分组,通过MTS法检测细胞增殖活性、细胞平板克隆形成实验检测克隆形成能力、流式细胞术检测细胞周期。结果酶切后凝胶电泳得到与SEPP1的DNA大小相一致的片段与空载体片段,基因测序的结果与SEPP1序列完全一致。经p LV-EGFP(2A)Puro-SEPP1感染的786-O、769-P细胞在感染48 h后,荧光显微镜下可见EGFP明显表达,实验组与空载体组、空白对照组相比较,SEPP1蛋白表达水平均明显提高。p LV-EGFP(2A)Puro-SEPP1感染组的细胞增殖能力降低,SEPP1过表达细胞集落形成能力明显降低,SEPP1过表达引起肾癌细胞G2/M期阻滞。结论在786-O和769-P细胞过表达SEPP1显著降低细胞增殖能力,并在786-O细胞中引起G2/M期阻滞。 展开更多

关键词 硒蛋白pp1(sepp1) 重组慢病毒载体 肾透明细胞癌 肿瘤增殖

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转化生长因子-β1与硒蛋白P在慢性应激性抑郁发生中的作用及关系 被引量：7

2

作者 李菲 陈慧彬 +1 位作者 吴帅 安书成 《陕西师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期57-64,共8页

为了研究慢性应激性抑郁发生中海马转化生长因子β1(transforming growth factor beta–1,TGF-β1)和硒蛋白P的作用及其关系,实验通过建立慢性不可预见性温和应激(Chronic Unpredictable Mild Stress,CUMS)动物抑郁模型,同时海马内微量... 为了研究慢性应激性抑郁发生中海马转化生长因子β1(transforming growth factor beta–1,TGF-β1)和硒蛋白P的作用及其关系,实验通过建立慢性不可预见性温和应激(Chronic Unpredictable Mild Stress,CUMS)动物抑郁模型,同时海马内微量注射TGF-β1以及TGF-β1型受体激酶抑制剂LY-364947,然后测量大鼠体重变化率,并通过糖水消耗以及旷场实验、悬尾实验检测大鼠行为变化,运用Elisa、Western blot分别检测大鼠海马组织内TGF-β1和硒蛋白P的含量变化.结果显示,与正常对照组相比,CUMS组大鼠表现出明显的抑郁样行为,海马组织内TGF-β1含量升高,硒蛋白P表达下降;正常大鼠海马内注射TGF-β1并不导致抑郁样行为,相反,CUMS同时海马内注射TGF-β1能逆转应激导致的抑郁样行为;正常和CUMS大鼠海马注射TGF-β1均能明显抑制硒蛋白P的表达;而应激的同时注射TGF-β1型受体激酶抑制剂LY-364947同样具有抗抑郁效应,此时硒蛋白P表达较CUMS组明显升高.以上结果表明:海马TGF-β1和硒蛋白P参与了应激性抑郁的发生;硒蛋白P对海马可能具有保护作用,TGF-β1通过TGF-β1型受体抑制硒蛋白P表达可能是导致抑郁发生的途径之一,而TGF-β1抗抑郁作用可能是经过TGF-β1型受体以外的其他途径实现. 展开更多

关键词 应激 抑郁 转化生长因子-Β1 硒蛋白P

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水稻亚硒酸盐转运子OsNIP2;1及其家族成员的蛋白结构分析 被引量：3

3

作者 张标金 陈庆隆 +5 位作者 戴廷灿 周瑶敏 史华新 罗林广 魏益华 张祥喜 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期914-919,共6页

OsNIP2; 1是水稻亚硒酸盐转运子,是类NOD26内在蛋白家族的成员。本研究从Gen Bank数据库检索获得水稻、玉米和拟南芥的NIP家族成员氨基酸序列信息,利用生物信息学方法对OsNIP2; 1及其家族成员的蛋白理化性质、蛋白结构进行分析,对3种植... OsNIP2; 1是水稻亚硒酸盐转运子,是类NOD26内在蛋白家族的成员。本研究从Gen Bank数据库检索获得水稻、玉米和拟南芥的NIP家族成员氨基酸序列信息,利用生物信息学方法对OsNIP2; 1及其家族成员的蛋白理化性质、蛋白结构进行分析,对3种植物NIP家族成员的同源和进化关系进行评估。研究结果表明,OsNIP2; 1是定位于细胞质膜中的疏水性跨膜蛋白,包含6个跨膜结构域,其二级结构由38. 26%的α螺旋、21.48%的延伸带、10.40%的β转角和29.87%的随机卷曲等构成; OsNIP家族的其他成员都与OsNIP2; 1具有类似的蛋白理化性质和结构; 3种植物NIP家族成员的同源性很高,其氨基酸序列比对和进化树都显示出进化过程的高度保守性。 展开更多

关键词 水稻 亚硒酸盐 OsNIP2 1 蛋白结构

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宫颈癌组织中硒结合蛋白1表达与肿瘤微环境中抗氧化酶活性有关 被引量：8

4

作者 王凤杰 王科坤 +2 位作者 陈显兵 刘锦红 刘昕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期711-714,共4页

目的:探讨宫颈癌患者血清和组织中谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPx)活性和宫颈组织中硒结合蛋白1(Selenium Binding Protein 1,SBP1,SELENBP1)表达之间的相互关系,为SELENBP1在宫颈癌发生发展中的作用机制提供理论基础... 目的:探讨宫颈癌患者血清和组织中谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPx)活性和宫颈组织中硒结合蛋白1(Selenium Binding Protein 1,SBP1,SELENBP1)表达之间的相互关系,为SELENBP1在宫颈癌发生发展中的作用机制提供理论基础。方法:收集临床住院病人血清样本检测GPx活性,收集相应宫颈组织样本检测GPx活性及采用Western blot方法检测组织内SELENBP1蛋白表达水平,用Spearman等级相关来分析其相关性。结果:宫颈癌病人血清中GPx活性明显降低;与正常宫颈、CINⅢ级组织和相应癌旁组织相比,癌组织中GPx活性增强,SELENBP1蛋白表达也降低。结论:宫颈癌组织中SELENBP1表达水平与肿瘤组织微环境中GPx活性呈负相关,而与病人血清中GPx活性无关,提示SELENBP1可能是通过肿瘤微环境中GPx来发挥抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 宫颈癌 硒结合蛋白1 谷胱甘肽过氧化物酶

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亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞HBZY-1单核细胞趋化蛋白-1mRNA表达的影响 被引量：2

5

作者 魏倩萍 邓华聪 +1 位作者 赵劼 Harvest F.Gu 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第14期1446-1449,共4页

目的观察亚硒酸钠对HBZY-1细胞表达单核细胞趋化蛋白-1(monocytechemoattractantprotein-1,MCP-1)的影响,从而研究硒在防治糖尿病肾病(diabeticnephropathy,DN)中的作用机制。方法分别以高葡萄糖、高胰岛素、过氧化氢和糖基化终末产物(a... 目的观察亚硒酸钠对HBZY-1细胞表达单核细胞趋化蛋白-1(monocytechemoattractantprotein-1,MCP-1)的影响,从而研究硒在防治糖尿病肾病(diabeticnephropathy,DN)中的作用机制。方法分别以高葡萄糖、高胰岛素、过氧化氢和糖基化终末产物(advancedglycosylationendproducts,AGE)刺激HBZY-1细胞;先加入100nmol/L亚硒酸钠预处理后,再分别给予以上4种刺激因素孵育HBZY-1细胞,分别检测HBZY-1细胞MCP-1mRNA的表达并比较。结果4种刺激因素均可作为独立因素,导致HBZY-1细胞MCP-1mRNA表达量增加;亚硒酸钠能抑制上述4种因素所致的MCP-1mRNA的表达。结论亚硒酸钠通过抑制MCP-1mRNA在HBZY-1细胞中的表达,从而有效防治糖尿病肾病的发生发展,表明硒在糖尿病肾病的防治过程中发挥积极作用。 展开更多

关键词 亚硒酸钠 单核细胞趋化蛋白-1 大鼠肾小球系膜细胞HBZY—1 糖尿病肾病

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硒结合蛋白1的生物功能及其与疾病的关系 被引量：6

6

作者 贾义 代杰 +1 位作者 张亮亮 夏欢 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2019年第2期128-137,共10页

硒结合蛋白1 (SELENBP1)是1989年发现的定位于细胞质和细胞核的一种结合硒原子的含硒蛋白质.以往的研究表明,SELENBP1在高尔基体中蛋白质的转运、泛素化/去泛素化介导的蛋白质降解、硫代谢、调节缺氧诱导因子的稳定性等方面发挥着重要作... 硒结合蛋白1 (SELENBP1)是1989年发现的定位于细胞质和细胞核的一种结合硒原子的含硒蛋白质.以往的研究表明,SELENBP1在高尔基体中蛋白质的转运、泛素化/去泛素化介导的蛋白质降解、硫代谢、调节缺氧诱导因子的稳定性等方面发挥着重要作用.也与口臭、癌症、精神分裂症和肾损伤等疾病的发生发展密切相关.本文对SELENBP1的生物功能及其与疾病关系的最新研究进展进行了综述和展望. 展开更多

关键词 生物无机化学 硒结合蛋白1 蛋白质转运和降解 硫代谢 口臭 癌症

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4-苯基-1,3-硒唑衍生物的合成及其对蛋白酪氨酸磷酸酯酶-1B抑制活性 被引量：2

7

作者 张成路 王华玉 +4 位作者 李奕嶙 王一鸣 宫荣庆 孙越冬 宋府璐 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期749-757,共9页

蛋白酪氨酸磷酸酯酶-1B(PTP1B)是抗糖尿病治疗的重要靶点,因此创制活性优良的PTP1B抑制剂具有重要意义。本文设计并合成了11个含1,3-硒唑和1,2,4-三唑活性组块新型结构目标分子(ZLXZ1-ZLXZ11),并利用傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)、核磁... 蛋白酪氨酸磷酸酯酶-1B(PTP1B)是抗糖尿病治疗的重要靶点,因此创制活性优良的PTP1B抑制剂具有重要意义。本文设计并合成了11个含1,3-硒唑和1,2,4-三唑活性组块新型结构目标分子(ZLXZ1-ZLXZ11),并利用傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)、核磁共振波谱仪(NMR)和高分辨质谱(HRMS)等对其进行了结构表征。首先选择ZLXZ1和ZLXZ11在MOE 2015.10程序上,与PTP1B进行分子对接模拟,结果表明,在ZLXZ1分子中硒唑环上的硒原子与PTP1B中副催化位点Tyr46、Ala217、Lys120和Asp 48分别形成了π-H作用和氢键作用。在ZLXZ11分子中硒唑上的硒原子与PTP1B中Asp181、Arg221和Asp48形成了氢键作用。在分子对接模拟的基础上,测试了11个目标分子的抑制活性,结果表明,所有目标分子的抑制率均在87.02%以上,其中3个目标分子PTP1B抑制活性高于阳性参照物齐墩果酸,抑制活性优良,有望成为潜在的PTP1B抑制剂。 展开更多

关键词 1 3-硒唑 1 2 4-三唑席夫碱 分子对接模拟 蛋白酪氨酸磷酸酯酶-1B抑制剂

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拟南芥VSP1硒代蛋白衍生物的制备和晶体生长 被引量：2

8

作者 杜清 陈玉红 张敏 《生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第6期23-25,共3页

拟南芥VSP1蛋白是一种具有酸性磷酸酶活性的植物防御蛋白。为利用硒原子的反常散射获取VSP1蛋白晶体X射线衍射的相位信息,以质粒pET-22b为表达载体,大肠杆菌B834(DE3)为宿主菌,在含有硒代甲硫氨酸的M9培养基中诱导表达VSP1硒代蛋白衍生... 拟南芥VSP1蛋白是一种具有酸性磷酸酶活性的植物防御蛋白。为利用硒原子的反常散射获取VSP1蛋白晶体X射线衍射的相位信息,以质粒pET-22b为表达载体,大肠杆菌B834(DE3)为宿主菌,在含有硒代甲硫氨酸的M9培养基中诱导表达VSP1硒代蛋白衍生物。通过Ni-NTA亲和层析纯化的目的蛋白经SDS-PAGE检验,纯度在95%以上。通过优化VSP1母体蛋白晶体的生长条件,获得了可衍射的硒代蛋白晶体。 展开更多

关键词 VSP1硒代蛋白衍生物 表达 纯化 晶体生长

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黄瓜PP2-A1蛋白的生物信息学分析 被引量：5

9

作者 庞宁宁 樊怀福 +2 位作者 王哲 柴里昂 杜长霞 《江苏农业科学》 2019年第2期46-49,共4页

韧皮部蛋白2(PP2)是植物特异性的韧皮部蛋白,通过参与植物调控其细胞内基因表达水平和产物活性来应对自然界中的各种胁迫,对于维持植物株体形态、体内物质运转和保护愈合植物伤口有重要意义。以前期克隆得到的黄瓜(Cucumis sativus) PP2... 韧皮部蛋白2(PP2)是植物特异性的韧皮部蛋白,通过参与植物调控其细胞内基因表达水平和产物活性来应对自然界中的各种胁迫,对于维持植物株体形态、体内物质运转和保护愈合植物伤口有重要意义。以前期克隆得到的黄瓜(Cucumis sativus) PP2-A1蛋白序列为对象,利用生物信息学方法,对黄瓜PP2-A1蛋白序列进行生物学功能分析。结果表明,黄瓜PP2-A1蛋白具有亲水性,比较不稳定,半衰期短,无信号肽段,没有跨膜结构,是定位在胞质的非分泌蛋白;结合对其二级结构和三级结构的预测分析,得出PP2-A1是以无规则卷曲和延伸链为主的片层结构;构建PP2的系统发育树,发现其与香瓜亲缘关系最近,同时预测其结构功能域,发现其具有1个典型的PP2结构功能域。 展开更多

关键词 黄瓜 pp2-A1蛋白 分子生物信息学 亲水性 系统发育树

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降低蛋白磷酸酶2A催化亚基(PP2Ac)去甲基化促进巨噬细胞M1型分化 被引量：2

10

作者 莫来铭 孟玲 +4 位作者 蓝利 常升搏小吉 陆彩玲 李习艺 唐深 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期595-599,共5页

目的研究蛋白磷酸酶2A催化亚基C(PP2Ac)去甲基化在巨噬细胞M1型分化中的作用。方法 THP-1细胞经佛波酯(PMA)诱导分化为M0型巨噬细胞,再用脂多糖(LPS)、γ干扰素(IFN-γ)刺激48 h分化为M1型巨噬细胞;处理组和溶剂对照组在M1型巨噬细胞模... 目的研究蛋白磷酸酶2A催化亚基C(PP2Ac)去甲基化在巨噬细胞M1型分化中的作用。方法 THP-1细胞经佛波酯(PMA)诱导分化为M0型巨噬细胞,再用脂多糖(LPS)、γ干扰素(IFN-γ)刺激48 h分化为M1型巨噬细胞;处理组和溶剂对照组在M1型巨噬细胞模型上,分别加入0. 5μmol/L ABL127和二甲基亚砜(DMSO)培养48 h。倒置显微镜观察细胞形态学变化,实时荧光定量PCR检测M1型巨噬细胞分化标志物环加氧酶2(COX-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和C-X-C趋化因子配体10(CXCL10)的mRNA水平,中性红法检测巨噬细胞吞噬功能,Western blot法检测PP2Ac去甲基化水平。结果 M0型巨噬细胞分化为M1型巨噬细胞,细胞伸出伪足逐渐呈梭形,分化标志物COX-2、TNF-α、IL-6和CXCL10的mRNA水平明显升高,吞噬功能增强,PP2Ac去甲基化表达下降;处理组加入0. 5μmol/L ABL127,与溶剂对照组相比,PP2Ac去甲基化水平明显降低,梭形细胞增多,分化标志物COX-2、TNF-α、IL-6和CXCL10明显增高,吞噬功能增强。结论降低PP2Ac去甲基化能促进M1型巨噬细胞分化,并增强巨噬细胞促炎性细胞因子表达和吞噬功能。 展开更多

关键词 蛋白磷酸酶2A催化亚基(pp2Ac) 去甲基化 M1型巨噬细胞 促炎性细胞因子 极化

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澳洲坚果蛋白磷酸酶基因MiSTPP1和MiSTPP4克隆与生物信息学分析 被引量：1

11

作者 李季东 杨祥燕 +7 位作者 蔡元保 李穆 曾黎明 黄思婕 巫辅民 林玉虹 郑文武 黄锦媛 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期176-181,共6页

【目的】通过澳洲坚果蛋白磷酸酶基因MiSTPP1和MiSTPP4克隆与生物信息学分析,以期为阐明澳洲坚果蛋白磷酸酶基因的功能及作用机制提供参考依据。【方法】基于澳洲坚果转录组数据和RT-PCR方法克隆澳洲坚果蛋白磷酸酶基因,利用生物信息学... 【目的】通过澳洲坚果蛋白磷酸酶基因MiSTPP1和MiSTPP4克隆与生物信息学分析,以期为阐明澳洲坚果蛋白磷酸酶基因的功能及作用机制提供参考依据。【方法】基于澳洲坚果转录组数据和RT-PCR方法克隆澳洲坚果蛋白磷酸酶基因,利用生物信息学分析基因编码蛋白质的同源性、系统进化、理化性质、磷酸化位点、亚细胞定位、跨膜域和信号肽。【结果】获得2个新的澳洲坚果蛋白磷酸酶基因MiSTPP1和MiSTPP4,GenBank登录号分别为MT374548和MT374551。氨基酸同源性分析表明,MiSTPP1和MiSTPP4与其他植物来源的PP1蛋白具有极高的序列相似度,都包含典型结构域MPP_PP1_PPKL。进化树分析表明,MiSTPP1和MiSTPP4与PP1家族蛋白的亲缘关系最近。蛋白基本理化性质分析表明,MiSTPP1是一个不稳定的亲水性蛋白,而MiSTPP4蛋白是一个稳定的亲水性蛋白。磷酸化位点分析表明,MiSTPP1和MiSTPP4都以丝氨酸和苏氨酸磷酸化为主。亚细胞定位、跨膜域和信号肽预测表明,MiSTPP1和MiSTPP4极可能定位于细胞质,且都为非分泌蛋白和非跨膜蛋白。MiSTPP1和MiSTPP4的二级结构和三维结构主要含有α螺旋和无规则卷曲。【结论】MiSTPP1和MiSTPP4属于蛋白磷酸酶PP1家族基因,推测在响应逆境胁迫、信号转导等生理生化过程中发挥作用。 展开更多

关键词 澳洲坚果 蛋白磷酸酶pp1 基因克隆 生物信息学分析

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硒结合蛋白1作为肿瘤标志物的研究进展

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作者 张晨静 潘驰 +1 位作者 潘文胜 陈光兰 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期114-117,共4页

硒结合蛋白1(SBP1)共价结合于硒参与多种细胞内硒的转运。然而硒是一种重要的微量元素,与肿瘤的发生有密切联系,是一种新型抗肿瘤物质。近年来随着对SBP1研究的深入,发现其不但可作为预后指导个性化治疗策略的一种新型生物标志物,而且... 硒结合蛋白1(SBP1)共价结合于硒参与多种细胞内硒的转运。然而硒是一种重要的微量元素,与肿瘤的发生有密切联系,是一种新型抗肿瘤物质。近年来随着对SBP1研究的深入,发现其不但可作为预后指导个性化治疗策略的一种新型生物标志物,而且有望成为肿瘤治疗的新靶点并提高肿瘤细胞的化疗敏感性,作为一种新型抗肿瘤治疗策略应用于临床。该文旨在探讨SBP1的抗肿瘤机制及其作为潜在肿瘤标志物的研究进展,以期指导临床肿瘤个性化治疗,提高患者的预后效果。 展开更多

关键词 硒结合蛋白1 个性化指标 抗肿瘤 预测

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硒对糖尿病患者的内皮细胞表达P38信号通路和MCP-1的影响 被引量：8

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作者 李艳波 李为民 韩君勇 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期615-618,共4页

目的:探讨P38MAPK和MCP-1的关系及其在糖尿病动脉粥样硬化中的作用以及硒的作用机制。方法:分别以高葡萄糖、糖基化终末产物(AGE)、胰岛素或过氧化氢体外孵育人脐静脉内皮细胞(HUVEC),并以Westernblot法或RT-PCR法检测P38MAPK和MCP-1在H... 目的:探讨P38MAPK和MCP-1的关系及其在糖尿病动脉粥样硬化中的作用以及硒的作用机制。方法:分别以高葡萄糖、糖基化终末产物(AGE)、胰岛素或过氧化氢体外孵育人脐静脉内皮细胞(HUVEC),并以Westernblot法或RT-PCR法检测P38MAPK和MCP-1在HUVEC的表达。检测并比较有无P38MAPK特异抑制剂SB203580或硒预处理,以上4种因素对P38MAPK和MCP-1在HUVEC表达的影响。结果:高葡萄糖、AGE、胰岛素或过氧化氢均可独立激活P38MAPK,并增加MCP-1在HUVEC的表达。SB203580显著抑制MCP-1的表达。硒抑制P38MAPK的活化并减少MCP-1的表达。结论:P38MAPK是MCP-1的上游信号分子,表明P38MAPK可能是糖尿病动脉粥样硬化发生的始动信号之一。硒可能通过抑制P38MAPK磷酸化而抑制MCP-1表达,有预防动脉粥样硬化作用。 展开更多

关键词 P38信号通路 单核细胞趋化蛋白-1 糖尿病 动脉粥样硬化 硒

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PP1γ2对树鼩精子成熟和运动性的调控作用研究 被引量：1

14

作者 朱方方 李雪 +3 位作者 杨明华 吴文静 匡海鸥 李亚辉 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第5期1421-1428,共8页

为了阐明树鼩精子中是否存在丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶1γ2(PP1γ2)及其在附睾精子中的存在形式,进而探究PP1γ2对精子成熟和运动性的调控作用,本试验以树鼩为研究对象,采用Western blotting分析了不同条件下树鼩附睾头和附睾尾精子中PP1... 为了阐明树鼩精子中是否存在丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶1γ2(PP1γ2)及其在附睾精子中的存在形式,进而探究PP1γ2对精子成熟和运动性的调控作用,本试验以树鼩为研究对象,采用Western blotting分析了不同条件下树鼩附睾头和附睾尾精子中PP1γ2的存在形式和磷酸化程度,探讨了双丁酰环腺苷酸(db-cAMP)、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)或Ca^(2+)对树鼩精子中PP1γ2磷酸化表达水平的影响,并进一步研究了磷酸酶抑制剂冈田酸(okadaic acid,OA)和花萼海绵诱癌素A(calyculin A,CA)对树鼩精子中PP1γ2磷酸化程度的影响及其对树鼩附睾头和附睾尾精子运动度的影响。结果显示,在树鼩附睾头和附睾尾精子中均存在PP1γ2,且在等量的附睾头和附睾尾精子蛋白中,PP1γ2在附睾尾精子的磷酸化程度远高于附睾头精子;db-cAMP、IBMX或Ca^(2+)不改变PP1γ2的磷酸化水平;磷酸酶抑制剂OA和CA能明显提高附睾头和附睾尾中PP1γ2磷酸化的程度,且能显著提高精子(尤其是附睾头精子)的运动度(P<0.05),OA和CA的最佳作用浓度分别为1μmol/L和10 nmol/L,最佳作用时间分别为15、20 min。本研究结果表明,蛋白磷酸酶PP1γ2对树鼩精子成熟及运动性具有重要的调控作用,其主要通过磷酸化和去磷酸化的变化发挥作用。 展开更多

关键词 树鼩 丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶1γ2(pp1γ2) 精子成熟 运动性 附睾

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在缺乏肠道菌群的APP/PP1转基因小鼠中Aβ淀粉样病变减少 被引量：1

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作者 李伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期999-999,共1页

在西方世界中阿尔茨海默病是老年痴呆最常见的病因,然而对于这种可怕的神经退行性病变目前并没有行之有效的治疗方法。尽管临床和实验证据暗示肠道菌群与许多脑部疾病有关,但是它对阿尔茨海默病有何影响尚不清楚。为此Harach等对来自A... 在西方世界中阿尔茨海默病是老年痴呆最常见的病因,然而对于这种可怕的神经退行性病变目前并没有行之有效的治疗方法。尽管临床和实验证据暗示肠道菌群与许多脑部疾病有关,但是它对阿尔茨海默病有何影响尚不清楚。为此Harach等对来自Aβ前体蛋白（Aβprecursor protein,APP）转基因小鼠模型粪便样品中的细菌16S rRNA进行了测序, 展开更多

关键词 转基因小鼠 阿尔茨海默病 肠道菌群 App/pp1 神经退行性病变 淀粉样 前体蛋白 粪便样品 脑部疾病 amyloid

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不同硒浓度日粮对小鼠肝脏和睾丸组织中部分硒蛋白mRNA水平的影响 被引量：6

16

作者 郑良焰 张琴 +6 位作者 刘碧涛 郭凯 余文兰 刘正伟 陈叶 郭翠丽 唐兆新 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第3期38-42,共5页

选取80只7周龄雄性BALB/c小鼠,随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,每组20只,使Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组基础日粮中硒含量达到0.045、0.1、0.4和0.8mg/kg。结果表明:①Ⅰ组能显著降低小鼠肝脏中硒的沉积量(P<0.05);②Ⅰ组谷胱甘肽过氧化物酶1(glutath... 选取80只7周龄雄性BALB/c小鼠,随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,每组20只,使Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组基础日粮中硒含量达到0.045、0.1、0.4和0.8mg/kg。结果表明:①Ⅰ组能显著降低小鼠肝脏中硒的沉积量(P<0.05);②Ⅰ组谷胱甘肽过氧化物酶1(glutathione peroxidase 1,GPx1)的mRNA相对表达量明显低于Ⅱ、Ⅲ组(P<0.05),且Ⅱ、Ⅲ组在肝脏中差异显著(P<0.05),在睾丸中差异不显著(P>0.05);③Ⅰ、Ⅲ组肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPx4)的mRNA相对表达量差异不显著(P>0.05),但均显著低于Ⅱ组(P<0.05),而各试验组间在睾丸中差异均不显著(P>0.05);④随着日粮中硒添加量的增加,肝脏和睾丸中硫氧还蛋白还原酶2(thioredoxin reductase 2,TrxR2)的mRNA相对表达量显著提高(P<0.05)。因此,在肝脏和睾丸组织中,饲喂低硒饲料能显著降低硒的沉积量和GPx1、GPx4、TrxR2的mRNA相对表达量(P<0.05);而饲喂高硒饲料能显著降低GPx1的mRNA相对表达量(P<0.05),同时显著增加TrxR2的mRNA相对表达量(P<0.05)。提示,硒对GPx1、GPx4和TrxR2mRNA相对表达量的调节存在组织差异性。 展开更多

关键词 硒 谷胱甘肽过氧化物酶1 谷胱甘肽过氧化物酶4 硫氧还蛋白还原酶2 mRNA 肝脏 睾丸

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硒蛋白功能与特应性皮炎的关系研究进展

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作者 莫俊銮 周继昌 杨慧 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期187-189,共3页

特应性皮炎(AD)是一种慢性复发性炎症反应。AD的发病过程伴有氧化应激水平升高,Th1/Th2失衡,调节性T细胞(Tregs)和胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)表达异常等特征。硒是人体必需的微量营养素。膳食硒在人体通过硒蛋白发挥生物效应。硒蛋... 特应性皮炎(AD)是一种慢性复发性炎症反应。AD的发病过程伴有氧化应激水平升高,Th1/Th2失衡,调节性T细胞(Tregs)和胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)表达异常等特征。硒是人体必需的微量营养素。膳食硒在人体通过硒蛋白发挥生物效应。硒蛋白可能通过抗氧化防御、氧化还原信号调控和免疫反应调节等生物学功能在AD中发挥作用。 展开更多

关键词 硒 硒蛋白 特应性皮炎 氧化应激 TH1 TH2

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SBP1基因在涎腺肿瘤中的表达及相关性分析 被引量：2

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作者 李伟 王银龙 +4 位作者 朱友明 陆婧雅 朱丽 许旭东 汪聪 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第10期1449-1453,共5页

目的研究硒结合蛋白1(SBP1)在涎腺肿瘤中的表达情况,明确其与涎腺肿瘤发生、发展、侵袭及转移的关系。方法收集15组涎腺肿瘤及其瘤旁组织,提取组织内RNA,采用实时荧光定量RT-PCR法检测组织中SBP1的表达。设计及合成SBP1的shRNA序列,慢... 目的研究硒结合蛋白1(SBP1)在涎腺肿瘤中的表达情况,明确其与涎腺肿瘤发生、发展、侵袭及转移的关系。方法收集15组涎腺肿瘤及其瘤旁组织,提取组织内RNA,采用实时荧光定量RT-PCR法检测组织中SBP1的表达。设计及合成SBP1的shRNA序列,慢病毒转染scc-3细胞,应用MTT、细胞划痕实验检测细胞增殖与迁移。结果 SBP1在涎腺肿瘤中的表达明显低于正常涎腺组织(P<0.05);划痕试验和MTT检测显示SBP1对肿瘤细胞的增殖与迁移起抑制作用。结论 SBP1在涎腺肿瘤组织中低表达,具有抑制肿瘤细胞的增殖和迁移能力。可作为涎腺肿瘤的早期诊断和预后判断的早期指标。 展开更多

关键词 涎腺肿瘤 硒结合蛋白1 增殖 迁移

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硒化低聚氨基多糖对免疫抑制小鼠免疫器官及肠紧密连接蛋白表达的影响 被引量：6

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作者 汤震 顾丽霞 +4 位作者 相兴伟 闻正顺 曲有乐 郑斌 宋厚辉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第21期171-176,共6页

本实验旨在研究硒化低聚氨基多糖(low-molecular-mass seleno-aminopolysaccharide,LSA)对免疫抑制小鼠组织形态、回肠闭合小环蛋白-1(zonula occludens-1,ZO-1)及闭锁蛋白(Occludin)表达的影响。通过腹腔注射环磷酰胺构建免疫抑制模型... 本实验旨在研究硒化低聚氨基多糖(low-molecular-mass seleno-aminopolysaccharide,LSA)对免疫抑制小鼠组织形态、回肠闭合小环蛋白-1(zonula occludens-1,ZO-1)及闭锁蛋白(Occludin)表达的影响。通过腹腔注射环磷酰胺构建免疫抑制模型,测定脏器指数,采用苏木精-伊红染色观察脾脏与空肠组织病理形态,利用反转录实时荧光定量聚合酶链式反应分析ZO-1、Occludin mRNA的表达水平。结果表明:LSA处理显著缓解了环磷酰胺对小鼠免疫器官的抑制作用(P<0.05);与环磷酰胺模型组比较,0.6、0.9 mg/(kg mb·d) LSA组小鼠脾脏结构较清晰,红髓和白髓界限较明显,白髓面积增大,空肠绒毛形态与环磷酰胺模型组相比较为整齐;0.6 mg/(kg mb·d)LSA组的ZO-1、Occludin m RNA表达量显著升高(P<0.05)。综上,LSA具有一定的免疫调节功能及肠道保护作用。 展开更多

关键词 硒化低聚氨基多糖 免疫抑制 闭合小环蛋白-1 闭锁蛋白

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低聚壳聚糖硒抗玉米赤霉烯酮对IPEC-J2细胞紧密连接蛋白表达的影响 被引量：1

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作者 傅春妮 李元辉 +2 位作者 李鹏程 李留安 秦顺义 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第11期4311-4318,共8页

试验旨在探究低聚壳聚糖硒抗玉米赤霉烯酮(zearalenon,ZEN)对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)紧密连接蛋白表达的影响。试验分为对照组(C)、ZEN(30μg/mL ZEN)、ZEN+0.5 Se(30μg/mL ZEN+0.5μmol/L低聚壳聚糖硒,以Se计)、ZEN+1.5 Se和ZEN+3 S... 试验旨在探究低聚壳聚糖硒抗玉米赤霉烯酮(zearalenon,ZEN)对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)紧密连接蛋白表达的影响。试验分为对照组(C)、ZEN(30μg/mL ZEN)、ZEN+0.5 Se(30μg/mL ZEN+0.5μmol/L低聚壳聚糖硒,以Se计)、ZEN+1.5 Se和ZEN+3 Se组。待细胞长至60%~70%汇合时,ZEN+0.5 Se、ZEN+1.5 Se和ZEN+3 Se组培养液更换为含对应Se浓度的培养液,C和ZEN组更换为正常培养液,12 h后向含ZEN组加入30μg/mL ZEN,继续培养24 h。收集各组细胞培养液,检测碱性磷酸酶(AKP)活性;Western blotting法检测闭锁连接蛋白(zonula occludens-1,ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)的表达,免疫荧光法检测ZO-1和Occludin蛋白的表达和定位情况。AKP活性检测结果表明,与对照组相比,ZEN、ZEN+0.5 Se、ZEN+1.5 Se组AKP活性均显著升高(P<0.05),ZEN+3 Se组AKP活性差异不显著(P>0.05);与ZEN组相比,ZEN+1.5 Se和ZEN+3 Se组AKP活性均显著降低(P<0.05)。Western blotting检测结果表明,与对照组比,ZEN组ZO-1和Occludin蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);与ZEN组比,ZEN+0.5 Se、ZEN+1.5 Se和ZEN+3 Se组ZO-1表达水平均差异不显著(P>0.05),但随着Se浓度的增加,ZO-1表达水平逐渐升高,ZEN+0.5 Se、ZEN+1.5 Se、ZEN+3 Se组Occludin表达水平均显著升高(P<0.05)。免疫荧光结果表明,低聚壳聚糖硒可缓解ZEN引起的ZO-1和Occludin蛋白荧光信号减弱现象,并恢复ZO-1和Occludin蛋白的定位分布。由此说明,低聚壳聚糖硒可降低ZEN引起的IPEC-J2细胞AKP活性升高,上调ZEN引起的ZO-1、Occludin蛋白表达水平下降,并调节其定位分布。 展开更多

关键词 玉米赤霉烯酮 低聚壳聚糖硒 猪小肠上皮细胞(IPEC-J2) 闭锁连接蛋白(ZO-1)

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