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甘蔗ScMOC1基因启动子的克隆与瞬时表达分析被引量：10: 1; 作者李旭娟林秀琴 +7 位作者字秋艳李纯佳徐超华吴转娣朱建荣刘洪博方志存刘新龙《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期709-717,共9页; MOC1属于植物特有的GRAS家族蛋白基因,是调控植物腋芽形成发育的关键基因。启动子对基因转录效率起直接调控作用,其功能分析可以精确定位基因的表达部位、发育阶段和调控机制,克隆甘蔗腋芽形成发育关键基因ScMOC1的启动子序列,研究其功... 展开更多; 关键词甘蔗 ScMOC1启动子克隆瞬时表达分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

农杆菌浸润瞬时表达分析番木瓜miR162a的研究(英文): 2; 作者彭军杨腊英 +3 位作者王国芬郭立佳汪军黄俊生《热带作物学报》 CSCD 2011年第10期1833-1837,共5页; 农杆菌浸润瞬时表达方法不仅在蛋白互作、鉴定基因沉默抑制子及基因功能研究方面得到广泛应用,目前还应用在小RNA的研究中。在对植物microRNA的研究中,农杆菌浸润方法通过将将转基因导入农杆菌浸润本生烟瞬时表达,可以快速、稳定地对植... 展开更多; 关键词番木瓜瞬时表达分析农杆菌浸润 MICRORNA; 在线阅读下载PDF 职称材料

烟草WRKY-R1基因的克隆及瞬时表达分析被引量：2: 3; 作者胡曼宋丹丹 +1 位作者杨金淼刘卫群《山东农业科学》 2014年第9期12-16,20,共6页; 以烟草根尖组织cDNA为模板,RT-PCR结合电子克隆得到NtWRKY-R1基因的完整ORF,序列分析显示,NtWRKY-R1具有WRKY转录因子家族典型的WRKYGQK保守结构域及C2H2的锌指结构,属于WRKY转录因子家族第Ⅱ类。采用生物信息学方法对NtWRKY-R1蛋白的... 展开更多; 关键词烟草 NtWRKY-R1 基因克隆生物信息学分析瞬时表达分析信号途径; 在线阅读下载PDF 职称材料

拟南芥AtNHX2启动子的克隆及表达模式分析(英文) 被引量：1: 4; 作者李金耀徐莉 +2 位作者马纪周洁张富春《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1114-1118,共5页; AtNHX2基因是拟南芥NHX基因家族的一员 ,编码了一种液泡膜中的Na+ /H+ 反向运输体并对拟南芥的耐盐能力起着重要的作用 .采用PCR扩增的方法克隆了拟南芥AtNHX2基因启始密码子上游约 2 8kb的DNA片段 ,并将其克隆到植物表达载体pCAMBIA13... 展开更多; 关键词 AtNHX2启动子瞬时表达表达模式分析盐胁迫; 在线阅读下载PDF 职称材料

甘蔗过氧化物酶基因ScPOD02的克隆与功能鉴定被引量：17: 5; 作者苏亚春王竹青 +5 位作者李竹刘峰许莉萍阙友雄戴明剑陈允浩《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期510-521,共12页; 过氧化物酶(POD)广泛存在于植物各种器官及其不同发育阶段,在植物生长发育及应对逆境胁迫中起重要作用。本研究基于前期转录组数据,从黑穗病菌侵染2 d的甘蔗抗黑穗病品种崖城05-179中分离到ScPOD02基因的cDNA(GenBank登录号为KU593507)... 展开更多; 关键词甘蔗 ScPOD02 基因克隆生物和非生物胁迫基因表达量原核表达分析瞬时表达分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甘蔗ScMOC1基因启动子的克隆与瞬时表达分析被引量：10: 1; 作者李旭娟林秀琴字秋艳李纯佳徐超华吴转娣朱建荣刘洪博方志存刘新龙; 机构云南省农业科学院甘蔗研究所/云南省甘蔗遗传改良重点实验室屏边苗族自治县农业和科学技术局; 出处《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期709-717,共9页; 基金国家自然科学基金青年项目(31601362) 云南省应用基础研究计划青年项目(2015FD063) 云南省中青年学术技术带头人后备人才(2014HB038)~~; 文摘 MOC1属于植物特有的GRAS家族蛋白基因,是调控植物腋芽形成发育的关键基因。启动子对基因转录效率起直接调控作用,其功能分析可以精确定位基因的表达部位、发育阶段和调控机制,克隆甘蔗腋芽形成发育关键基因ScMOC1的启动子序列,研究其功能对该基因表达调控机制具有重要意义。本研究以我国主栽甘蔗品种新台糖22号(ROC22)的基因组DNA为模板,通过基因组步移和巢式PCR技术克隆到ScMOC1起始密码子ATG上游1874 bp的启动子序列。PlantCARE在线分析预测表明,该序列包含多个真核生物启动子必需的核心元件TATA-box、CAAT-box以及与光响应、激素响应和分生组织表达等相关的顺式作用元件,推测ScMOC1启动子可通过激素诱导调控ScMOC1表达,且该启动子可能通过分生组织表达顺式调控元件CAT-box参与ScMOC1对甘蔗分蘖的调控。将获得的启动子序列替换pBI121质粒中的CaMV35S启动子驱动下游GUS基因表达进行活性分析,结果表明:本研究克隆的启动子片段能驱动GUS基因在甘蔗嫩叶中瞬时表达。5′缺失分析表明该启动子的基础启动子序列在起始密码子ATG上游350～500 bp之间。该结果为后续ScMOC1的调控机制研究奠定了良好的基础。; 关键词甘蔗 ScMOC1启动子克隆瞬时表达分析; Keywords Sugarcane ScMOC1 promoter cloning transient expression analysis; 分类号 S566.1 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名农杆菌浸润瞬时表达分析番木瓜miR162a的研究(英文): 2; 作者彭军杨腊英王国芬郭立佳汪军黄俊生; 机构中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点开放实验室海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室中国农业大学; 出处《热带作物学报》 CSCD 2011年第10期1833-1837,共5页; 基金国家科技支撑计划(2008BD02) 农业部行业科技项目(200903049) 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所中央级公益性科研院所基本科研业务费(2009hzs1J007); 文摘农杆菌浸润瞬时表达方法不仅在蛋白互作、鉴定基因沉默抑制子及基因功能研究方面得到广泛应用,目前还应用在小RNA的研究中。在对植物microRNA的研究中,农杆菌浸润方法通过将将转基因导入农杆菌浸润本生烟瞬时表达,可以快速、稳定地对植物microRNA进行检测和鉴定,样品在几天内就可分析完成,比获得稳定遗传的转基因有优势。笔者借鉴国外拟南芥microRNA瞬时表达分析的方法,克隆了番木瓜的miR62a前体序列连接到双元表达载体pSuper1300上构建成35S::cpa-miR162a质粒,导入农杆菌GV3101后浸润本生烟,浸润后48 h提取本生烟叶片总RNA后通过miRNA northern blot检测到miR162a,而本生烟和番木瓜自身则无法检测到低丰度的miR162a。本文介绍的农杆菌浸润瞬时表达方法能够在体外加工产生成熟的miRNA,该技术有助于对microRNA的结构-功能的相关性及靶标验证进一步研究。; 关键词番木瓜瞬时表达分析农杆菌浸润 MICRORNA; Keywords Papaya transient assay Agroinfiltration microRNAs; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名烟草WRKY-R1基因的克隆及瞬时表达分析被引量：2: 3; 作者胡曼宋丹丹杨金淼刘卫群; 机构河南农业大学生命科学学院; 出处《山东农业科学》 2014年第9期12-16,20,共6页; 基金国家自然科学基金项目(30971704); 文摘以烟草根尖组织cDNA为模板,RT-PCR结合电子克隆得到NtWRKY-R1基因的完整ORF,序列分析显示,NtWRKY-R1具有WRKY转录因子家族典型的WRKYGQK保守结构域及C2H2的锌指结构,属于WRKY转录因子家族第Ⅱ类。采用生物信息学方法对NtWRKY-R1蛋白的理化性质、进化关系和磷酸化位点进行预测和分析,结果表明,NtWRKY-R1与茄科植物保守结构域的同源性及系统进化关系最近;磷酸化位点分析显示该蛋白可能通过磷酸化作用修饰,进而对其相应的代谢活动进行调节。通过构建真核表达载体、建立瞬时表达分析体系,结果显示,NtWRKY-R1基因的过表达导致JA信号途径标记基因PDF1.2及烟碱合成关键酶基因PMT1表达量降低,推测NtWRKY-R1基因影响JA信号途径,进而调控烟碱合成。; 关键词烟草 NtWRKY-R1 基因克隆生物信息学分析瞬时表达分析信号途径; Keywords Nicotiana tabacum L. NtWRKY - R1 Gene cloning Bioinformatics analysis Transientexpression analysis Signaling pathway; 分类号 S572.035.3 [农业科学—烟草工业]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名拟南芥AtNHX2启动子的克隆及表达模式分析(英文) 被引量：1: 4; 作者李金耀徐莉马纪周洁张富春; 机构新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室浙江大学生命科学院; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1114-1118,共5页; 基金国家科技攻关西部科技行动项目资助 ( 2 0 0 1BA90 1A3 2 )~~; 文摘 AtNHX2基因是拟南芥NHX基因家族的一员 ,编码了一种液泡膜中的Na+ /H+ 反向运输体并对拟南芥的耐盐能力起着重要的作用 .采用PCR扩增的方法克隆了拟南芥AtNHX2基因启始密码子上游约 2 8kb的DNA片段 ,并将其克隆到植物表达载体pCAMBIA130 1 1中 ,通过基因枪轰击洋葱表皮瞬时表达的方法 ,初步检测启动子的活性 .将重组质粒pCAMBIA130 1 1/AtNHX2promoter转化拟南芥并筛选纯合子 .AtNHX2promoter GUS分析显示AtNHX2在所有的组织中均有表达 ,包括根尖 .在保卫细胞中检测到了强烈的GUS表达 ,这一结果表明 ,AtNHX2对特殊细胞的pH调控和K+ 自身稳定方面起着重要的作用 .AtNHX2启动子的活性可被NaCl抑制 ,并且抑制的强度和NaCl的浓度成正相关 .30 0mmol/LKCl处理可增强启动子的活性 ,说明NaCl和KCl是在转录水平上调控AtNHX2的表达 .在老叶中GUS活性比在新叶中GUS活性强 ,这说明了AtNHX2优先将有毒的离子积累在老叶中 ,从而有利于植物的正常发育 .在根毛细胞中也观测到了强烈的GUS活性 ,这就暗示了AtNHX2在扩大的液泡中储存Na+ .; 关键词 AtNHX2启动子瞬时表达表达模式分析盐胁迫; Keywords AtNHX2 promoter transient expression expression analysis salt stress; 分类号 Q943.2 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甘蔗过氧化物酶基因ScPOD02的克隆与功能鉴定被引量：17: 5; 作者苏亚春王竹青李竹刘峰许莉萍阙友雄戴明剑陈允浩; 机构福建农林大学/农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室/国家甘蔗产业技术研发中心; 出处《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期510-521,共12页; 基金福建省杰出青年科学基金项目(2015J06006) 福建农林大学杰出青年基金项目(xjq201630) 国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-20)资助~~; 文摘过氧化物酶(POD)广泛存在于植物各种器官及其不同发育阶段,在植物生长发育及应对逆境胁迫中起重要作用。本研究基于前期转录组数据,从黑穗病菌侵染2 d的甘蔗抗黑穗病品种崖城05-179中分离到ScPOD02基因的cDNA(GenBank登录号为KU593507)及基因组DNA(GenBank登录号为KU593508)序列。其cDNA全长为1434 bp,ORF区为1047 bp,编码348个氨基酸,而基因组DNA全长为1558 bp,含2个外显子和1个内含子。系统发育树显示,ScPOD02与水稻Os Prx11(GenBank登录号为gi|55700889)属于同一个进化分支,推测ScPOD02属于酸性胞外分泌/细胞壁类型的I.1型过氧化物酶家族。将该基因克隆到原核表达载体p ET 32a上,转化大肠杆菌BL21,经异丙基-β-d-硫代半乳糖苷诱导成功获得了大小约60 k D的融合蛋白,且该重组菌在聚乙二醇胁迫下的长势较对照快,表明其耐受干旱胁迫的能力更强。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)分析表明,除ROC22和YZ03-103外,ScPOD02基因在甘蔗抗病品种(YZ03-258、YZ01-1413、YT96-86和LC05-136)中受黑穗病菌诱导上调表达,但在中感(GT02-467和FN39)和感病(FN40)品种中的基因表达量基本维持不变或略有降低;此外,ScPOD02积极应答水杨酸、脱落酸、聚乙二醇及氯化钠的胁迫。通过农杆菌介导法在本氏烟叶片上瞬时表达ScPOD02,结果显示出较深的DAB染色,且过表达后本氏烟中的目标基因(ScPOD02)及过敏性反应(HR)标记基因(Nt HSR201和Nt HSR203)和乙烯合成依赖基因(Nt EFE26和Nt Accdeaminase)均上调表达。以上研究结果显示,ScPOD02具有参与甘蔗免疫应答及抗旱和抗盐害的潜在功能。; 关键词甘蔗 ScPOD02 基因克隆生物和非生物胁迫基因表达量原核表达分析瞬时表达分析; Keywords Sugarcane ScPOD02 Gene cloning Biotic and abiotic stresses Gene expression level Prokaryotic expression analysis Transient expression analysis; 分类号 S566.1 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	甘蔗ScMOC1基因启动子的克隆与瞬时表达分析	李旭娟林秀琴字秋艳李纯佳徐超华吴转娣朱建荣刘洪博方志存刘新龙	《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心	2019	10	在线阅读下载PDF 职称材料
2	农杆菌浸润瞬时表达分析番木瓜miR162a的研究(英文)	彭军杨腊英王国芬郭立佳汪军黄俊生	《热带作物学报》 CSCD	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	烟草WRKY-R1基因的克隆及瞬时表达分析	胡曼宋丹丹杨金淼刘卫群	《山东农业科学》	2014	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	拟南芥AtNHX2启动子的克隆及表达模式分析(英文)	李金耀徐莉马纪周洁张富春	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2004	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	甘蔗过氧化物酶基因ScPOD02的克隆与功能鉴定	苏亚春王竹青李竹刘峰许莉萍阙友雄戴明剑陈允浩	《作物学报》 CAS CSCD 北大核心	2017	17	在线阅读下载PDF 职称材料