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不明原因男性不育人群中睾丸特异性乳酸脱氢酶基因突变的发现及其意义 被引量:5
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作者 李博 张朵 +5 位作者 曾健 富显果 柯龙凤 颜水堤 严爱贞 兰风华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第4期445-450,共6页
为了研究睾丸特异性乳酸脱氢酶,即乳酸脱氢酶C4(LDH-C4)基因突变在男性不育发病中的作用,利用LDH-C4特异性底物对100名不明原因男性不育症患者的精子LDH-C4进行活性显色,用变性高效液相色谱(DHPLC)技术对LDH-C4活性低下的患者进行LDHC基... 为了研究睾丸特异性乳酸脱氢酶,即乳酸脱氢酶C4(LDH-C4)基因突变在男性不育发病中的作用,利用LDH-C4特异性底物对100名不明原因男性不育症患者的精子LDH-C4进行活性显色,用变性高效液相色谱(DHPLC)技术对LDH-C4活性低下的患者进行LDHC基因PCR产物的突变筛查,对DHPLC峰形异常的PCR产物进行序列测定.筛选到一组精子LDH-C4活性明显下降的患者,其中1名患者的LDHC基因PCR产物在DHPLC中呈异常洗脱峰.对这一PCR产物进行序列测定,发现患者LDHC基因第5外显子的115位碱基发生了T→A的杂合改变(GenBank登录号GU479375),该突变使LDHC基因的178位密码子由原来的TTG(编码亮氨酸)变为TAG(终止密码子),形成截短的C亚基.T克隆-测序进一步证实了该无义突变的杂合状态.这是在人类LDHC基因上发现的第一个突变,提示LDHC基因突变可能是男性不育发病的原因之一. 展开更多
关键词 不育症 睾丸特异性乳酸脱氢酶 乳酸C4 DHPLC 基因突变
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脑脊液中乳酸脱氢酶、肌酸激酶、神经元特异性烯醇化酶水平在化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎中鉴别价值 被引量:7
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作者 王亚丽 崇丽宁 +2 位作者 王婷婷 马国梅 韩敬哲 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期265-270,共6页
目的观察化脓性脑膜炎(PM)、结核性脑膜炎(TBM)患者脑脊液中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平的差异,并分析三项指标在PM、TBM鉴别中的价值。方法将2019年12月至2021年12月就诊于衡水市人民医院神经内科... 目的观察化脓性脑膜炎(PM)、结核性脑膜炎(TBM)患者脑脊液中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平的差异,并分析三项指标在PM、TBM鉴别中的价值。方法将2019年12月至2021年12月就诊于衡水市人民医院神经内科的35例PM患者纳入PM组,45例TBM患者作为TBM组。采集患者治疗前的脑脊液样本,测定并对比两组脑脊液中LDH、CK、NSE水平及糖、蛋白、氯化物含量,经Pearson分析脑脊液中指标间相关性。线性回归分析影响TBM发生的因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估脑脊液中LDH、CK、NSE及联合对PM与TBM的鉴别价值。结果年龄、性别、临床特征(发热、病理征、呕吐、肢体抽搐等)发生率、脑脊液中糖与蛋白含量两组差异无统计学意义(P>0.05);TBM组脑脊液中LDH、NSE水平高于PM组,CK水平、氯化物含量低于PM组(P<0.05);Pearson相关性显示,脑脊液中LDH与CK、氯化物呈负相关(r<0,P<0.05),与NSE呈正相关(r>0,P<0.05);CK与NSE呈负相关(r<0,P<0.05),与氯化物呈正相关(r>0,P<0.05);NSE与氯化物呈负相关(r<0,P<0.05);线性回归分析显示,脑脊液中LDH、CK、NSE、氯化物均与TBM的发生相关(P<0.05);ROC曲线结果发现,脑脊液中LDH、CK、NSE及三者联合鉴别PM、TBM的AUC为0.849(95%CI:0.768~0.930)、0.858(95%CI:0.779~0.937)、0.851(95%CI:0.771~0.931)、0.954(95%CI:0.911~0.996)。结论PM、TBM患者临床特征相似,但脑脊液中LDH、CK、NSE水平存在差异,三项指标联合检测可提高PM与TBM的鉴别诊断。 展开更多
关键词 化脓性脑膜炎 结核性脑膜炎 脑脊液 乳酸 肌酸激 神经元异性烯醇化
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RNA-DNA杂交法研究乳酸脱氢酶-C基因在睾丸中特异性表达 被引量:1
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作者 周孝瑚 李昌本 赵寿元 《上海医科大学学报》 CSCD 1990年第3期161-165,共5页
用同位32~P标记乳酸脱氢酶-C(LDH-C)cDNA作为探针,与小鼠胸腺、脑、胰、心肌、骨骼肌、睾丸、肾、肺、肝的RNA以及人胰、皋丸、肝、骨骼肌、心肌及脑的RNA分别作点溃杂交(dot blot hybridization)及Northern印迹杂交,证实LDH-C基因只在... 用同位32~P标记乳酸脱氢酶-C(LDH-C)cDNA作为探针,与小鼠胸腺、脑、胰、心肌、骨骼肌、睾丸、肾、肺、肝的RNA以及人胰、皋丸、肝、骨骼肌、心肌及脑的RNA分别作点溃杂交(dot blot hybridization)及Northern印迹杂交,证实LDH-C基因只在睾丸中特异性表达。 展开更多
关键词 乳酸 基因表达 睾丸 杂交法
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乳酸脱氢酶和神经元特异性烯醇化酶水平与广泛期小细胞肺癌预后的关系 被引量:8
4
作者 于溪 张彬彬 +4 位作者 杨碧洁 张哲 马铭霞 邹佳运 赵明芳 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期425-428,共4页
目的通过分析广泛期小细胞肺癌(SCLC)患者治疗前乳酸脱氢酶(LDH)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)与无进展生存(PFS)和总生存(OS)的关系,探讨其是否为影响广泛期SCLC患者的疗效预测和预后的因素。方法本研究回顾性地分析了2008年3月至2014年... 目的通过分析广泛期小细胞肺癌(SCLC)患者治疗前乳酸脱氢酶(LDH)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)与无进展生存(PFS)和总生存(OS)的关系,探讨其是否为影响广泛期SCLC患者的疗效预测和预后的因素。方法本研究回顾性地分析了2008年3月至2014年9月于中国医科大学附属第一医院肿瘤内科住院治疗的广泛期SCLC患者83例。用Kaplan-Meier方法和Cox比例风险模型分析患者治疗前LDH和NSE与PFS和OS的关系,P<0.05为差异有统计学意义。结果治疗前LDH水平与患者PFS(P=0.001)及OS(P=0.036)均显著相关,治疗前NSE水平与患者PFS(P=0.007)及OS(P=0.013)也显著相关。结论LDH和NSE是影响广泛期SCLC患者疗效的预测因素和影响生存的预后因素。 展开更多
关键词 广泛期 小细胞肺癌 乳酸 神经元异性烯醇化 预后
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口虾蛄乳酸脱氢酶同工酶组织特异性的研究 被引量:4
5
作者 母昌考 王春琳 +1 位作者 李英文 崔雪 《西南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期255-257,共3页
以口虾结为材料进行研究,用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,对其肌肉、心脏、腹鳃、肝胰腺及眼球5种组织器官进行乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的研究分析。结果表明:不同组织中乳酸脱氢酶(LDH)的同工酶谱带存在差异,具有明显的组织特异性。肌肉、腹鳃... 以口虾结为材料进行研究,用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,对其肌肉、心脏、腹鳃、肝胰腺及眼球5种组织器官进行乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的研究分析。结果表明:不同组织中乳酸脱氢酶(LDH)的同工酶谱带存在差异,具有明显的组织特异性。肌肉、腹鳃、肝胰腺和心脏中有2条酶带,眼球中只有1条酶带,心脏中的谱带表达最浓,而腹鳃中的酶带表达最弱。 展开更多
关键词 口虾蛄 乳酸(LDH) 同工 电泳 组织异性
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人精子特异性乳酸脱氢酶DNA疫苗的构建及免疫效果的初步研究 被引量:1
6
作者 辛娜 张朵 +3 位作者 陈平 涂向东 吴玉水 兰风华 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1204-1206,共3页
目的:构建人精子特异性乳酸脱氢酶DNA疫苗,并免疫雌雄两性BALB/c小鼠,以观察特异性抗体的产生。方法:采用分子克隆的方法构建pVAX1-hLDHC DNA疫苗。双酶切及正反向测序对该DNA疫苗进行鉴定。肌肉注射方法免疫雌雄两性BALB/c小鼠,ELISA和... 目的:构建人精子特异性乳酸脱氢酶DNA疫苗,并免疫雌雄两性BALB/c小鼠,以观察特异性抗体的产生。方法:采用分子克隆的方法构建pVAX1-hLDHC DNA疫苗。双酶切及正反向测序对该DNA疫苗进行鉴定。肌肉注射方法免疫雌雄两性BALB/c小鼠,ELISA和Western blot方法检测小鼠血清中的特异性抗体,常规病理学方法检测雄性实验小鼠的睾丸组织。结果:双酶切及正反向测序结果表明:插入片段的序列以及插入的位置和方向均正确。肌肉注射免疫BALB/c小鼠后可诱导明显的体液免疫反应,且在雄性实验小鼠中未观察到睾丸炎的发生。结论:成功构建了具有一定免疫效果的hLDHC DNA疫苗,为今后进行更深入的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 精子异性乳酸 DNA疫苗 基因免疫
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截短的人精子特异性乳酸脱氢酶L178X突变体丧失催化活性 被引量:1
7
作者 颜水堤 张朵 +3 位作者 曾健 富显果 柯龙凤 兰风华 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期678-682,共5页
精子特异性乳酸脱氢酶(乳酸脱氢酶C4,LDH-C4)是精子能量代谢的关键酶类之一.为了研究前期发现的1个LDH-C4基因突变(L178X)对LDH-C4功能的影响,在已构建的LDH-C4原核表达载体pET-28a(+)-hLDHC的基础上,利用PCR定点诱变技术,制备了L178X... 精子特异性乳酸脱氢酶(乳酸脱氢酶C4,LDH-C4)是精子能量代谢的关键酶类之一.为了研究前期发现的1个LDH-C4基因突变(L178X)对LDH-C4功能的影响,在已构建的LDH-C4原核表达载体pET-28a(+)-hLDHC的基础上,利用PCR定点诱变技术,制备了L178X突变体的原核表达载体pET-28a(+)-hLDHC/L178X,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS,诱导其表达.对该载体进行限制性酶切表明,插入的LDHC基因cDNA约1000bp;序列分析表明,该插入片段读框正确,带L178X突变.SDS-PAGE及免疫印迹显示,携带该载体的菌体可表达分子量约25kD的蛋白质,后者可被兔抗LDH-C4血清特异识别.乳酸脱氢酶(LDH)活性测定及活性染色表明,所表达的产物没有LDH活性.本研究成功进行了LDH-C4的1个突变体的原核表达,为研究LDHC基因突变对LDH-C4功能以及男性生育的影响奠定了基础. 展开更多
关键词 精子异性乳酸 LDH-C4 基因突变 LDHC基因 原核表达
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黄牛睾丸特异乳酸脱氢酶-C基因选择性剪接体的克隆与序列分析 被引量:1
8
作者 洪键 郑玉才 贺庆华 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期51-53,共3页
采用RT-PCR方法从黄牛睾丸组织中克隆睾丸特异乳酸脱氢酶-C(LDH-C)基因的cDNA序列,结果发现2种Ldhc剪接体,根据Ldhc基因在进化上的保守性,参照普通牛Ldhc基因结构分析了黄牛Ldhc基因的选择性剪接体的结构,结果显示,剪接体存在外显子缺失... 采用RT-PCR方法从黄牛睾丸组织中克隆睾丸特异乳酸脱氢酶-C(LDH-C)基因的cDNA序列,结果发现2种Ldhc剪接体,根据Ldhc基因在进化上的保守性,参照普通牛Ldhc基因结构分析了黄牛Ldhc基因的选择性剪接体的结构,结果显示,剪接体存在外显子缺失:其中剪接体1缺失第7个外显子,剪接体2缺失第4和第7两个外显子。因为LDH-C4酶的NAD+结合结构域由Ldhc的外显子2-4编码,酶的活性中心由外显子4编码。所以剪接体1包含完整酶的NAD+结合结构域和酶的活性中心,剪接体2失去了大部分NAD+结合结构域和酶的活性中心。对黄牛睾丸组织和精子LDH同工酶的电泳分析未检测到潜在的Ldhc剪接体的表达,推测睾丸组织Ldhc选择性剪接的功能是调控该基因在睾丸中表达的方式之一。 展开更多
关键词 黄牛 乳酸-C 睾丸
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人精子特异性乳酸脱氢酶结构和功能的计算生物学分析
9
作者 汤莹 颜水堤 +3 位作者 郑德柱 张朵 林宇翔 兰风华 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1088-1096,共9页
精子特异性乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH),又称乳酸脱氢酶C4(lactate dehydrogenase C4,LDH-C4),特异性地存在于哺乳动物发育成熟的睾丸组织中,与精子的生成、代谢、获能等有密切关系.根据GenBank数据库中人LDH-C4氨基酸序列(P... 精子特异性乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH),又称乳酸脱氢酶C4(lactate dehydrogenase C4,LDH-C4),特异性地存在于哺乳动物发育成熟的睾丸组织中,与精子的生成、代谢、获能等有密切关系.根据GenBank数据库中人LDH-C4氨基酸序列(P07864),利用PROSITE数据库预测人LDH-C4的功能基序;利用Clustalw2、TreeView1.6.6进行LDH-C4进化树的构建;利用I-TASSER软件预测人LDH-C4的二、三、四级结构以及功能位点.结果表明:在190!196位有1个LDH活性位点,该位点为脊椎动物各亚型乳酸脱氢酶共有的催化位点,为进化中的1个保守序列;从进化树来看,LDHC和LDHB的亲缘关系比较近;人LDH-C4与小鼠LDH-C4的二级、三级结构具有很高的相似性;LDH-C4属乳酸脱氢酶-苹果酸脱氢酶(LDH-MDH)超家族中的LDH-1(cd05293)家族的成员,属于NAD依赖性酶,拥有LDH-1家族具备的基本结构特点.以上结果为研究LDH-C4基因突变对其功能的影响打下基础. 展开更多
关键词 乳酸C4 精子异性乳酸 计算生物学
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睾丸特异乳酸脱氢酶-C的研究和应用进展
10
作者 洪键 郑玉才 石云 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2009年第6期17-19,共3页
睾丸特异乳酸脱氢酶-C在酶学性质、免疫特性等方面不同于其他类型的LDH同工酶(LDH1~LDH5),并且在动物生殖中可能发挥重要作用,因此有关其研究在生物化学、基因进化、免疫节育、突变监测等领域长期以来一直引起研究人员的广泛关注,并且... 睾丸特异乳酸脱氢酶-C在酶学性质、免疫特性等方面不同于其他类型的LDH同工酶(LDH1~LDH5),并且在动物生殖中可能发挥重要作用,因此有关其研究在生物化学、基因进化、免疫节育、突变监测等领域长期以来一直引起研究人员的广泛关注,并且近年来不断有新的发现和进展。 展开更多
关键词 睾丸 乳酸-C 基因
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CO_(2)还原用甲酸脱氢酶分子改造的研究进展
11
作者 陆峰 黄玉红 +1 位作者 林燕娜 马富强 《生物技术通报》 北大核心 2025年第3期14-24,共11页
随着全球对可持续能源转型和温室气体减排的迫切需求,CO_(2)的高效绿色转化成为能源、环境科学以及化学工程等多个领域的研究热点。特别是在应对气候变化的背景下,CO_(2)的捕集和利用被视为实现碳中和的重要途径之一。甲酸脱氢酶(FDH)... 随着全球对可持续能源转型和温室气体减排的迫切需求,CO_(2)的高效绿色转化成为能源、环境科学以及化学工程等多个领域的研究热点。特别是在应对气候变化的背景下,CO_(2)的捕集和利用被视为实现碳中和的重要途径之一。甲酸脱氢酶(FDH)作为将CO_(2)还原为甲酸盐的重要生物催化剂,在绿色化学和生物能源转化中展现出巨大的应用潜力,然而其催化活性、热稳定性和辅酶特异性等方面仍存在一定局限性。近年来,随着蛋白质工程技术和分子生物学的不断发展,研究者们提出了多种改造FDH性能的策略,使得FDH的应用前景得到极大提升。例如通过定向突变、结构优化等酶工程手段提高酶的底物亲和力,增强酶的刚性和构象稳定性以及改变辅酶结合位点,拓宽其在绿色转化过程中的应用前景。本文将对近年来FDH催化CO_(2)还原的研究进展进行全面总结,着重分析FDH在催化效率、热稳定性、辅酶特异性等方面的改进措施,探讨分子改造过程中所采取的具体策略,并总结这些策略的规律,以期为未来FDH的分子改造提供新的思路和方法,推动其在CO_(2)还原反应中的应用发展。此外,随着人工智能、机器学习和基因编辑等技术的发展,未来FDH的分子改造将更加高效和精确,这些新兴技术有望在较短的时间内筛选出具有优异性能的FDH突变体,为其在解决全球气候变化和能源危机方面提供可行的绿色解决方案。 展开更多
关键词 CO_(2)还原 甲酸 分子改造 催化效率 热稳定性 辅因子异性 甲酸盐 NAD+/NADH
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多重突变特异性扩增系统检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶两种常见的基因点突变 被引量:2
12
作者 郑敏 罗建明 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期139-141,共3页
目的建立多重突变特异性扩增系统(ARMS)检测我国葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因最常见的两种基因点突变,即G1388A和G1376T。方法对128例经限制性内切酶分析或DNA直接测序证实为G6PD基因G1388A或G1376T突变的样本,应用多重ARMS法,进行G6P... 目的建立多重突变特异性扩增系统(ARMS)检测我国葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因最常见的两种基因点突变,即G1388A和G1376T。方法对128例经限制性内切酶分析或DNA直接测序证实为G6PD基因G1388A或G1376T突变的样本,应用多重ARMS法,进行G6PD两种基因点突变分析。结果多重ARMS法一次即可同时检出G1388A和G1376T两种突变,未发现假阳性和假阴性。结论应用单管多重PCR法能快速检测出G6PD基因G1388A和G1376T突变,操作简便,结果准确,可应用于临床上G6PD两种基因点突变检测。 展开更多
关键词 葡萄糖-6-磷酸 基因突变 突变异性扩增系统
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点篮子鱼形态特征及6种组织乳酸脱氢酶的电泳分析
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作者 张涛 周剑光 +1 位作者 甘金华 何力 《中国渔业质量与标准》 2022年第5期25-31,共7页
为了解点篮子鱼(Siganus guttatus)的形态特征和生化遗传特性,为其种质鉴定和制定种质标准提供理论依据。采用传统形态学方法测定样品的可量性状和可数性状,通过聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳对30尾点篮子鱼的6种组织(心脏、眼睛晶状体、肌... 为了解点篮子鱼(Siganus guttatus)的形态特征和生化遗传特性,为其种质鉴定和制定种质标准提供理论依据。采用传统形态学方法测定样品的可量性状和可数性状,通过聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳对30尾点篮子鱼的6种组织(心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏、肾脏和脾脏)的乳酸脱氢酶(LDH)进行分析。结果表明:1)点篮子鱼的主要形态特征为体呈椭圆形,侧扁,背高,体背缘和腹缘浅弧形,头较小,口下位;鳍式为背鳍D.Ⅻ~XIV-9~11,胸鳍P.ⅱ-14~15,腹鳍V.Ⅰ-3-Ⅰ,臀鳍A.Ⅶ~Ⅷ-8~10;左侧第一鳃弓外侧鳃耙数为23~26。身体两侧上半部褐色,分布着许多橙黄色斑块,下半部灰褐色,背鳍、胸鳍和腹鳍浅黄色,臀鳍和尾鳍浅灰褐色。2)点篮子鱼的心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏、肾脏和脾脏中的LDH酶带条数分别为:4、7、2~3、1~3、3~4和1~3条。点篮子鱼的乳酸脱氢酶具有组织特异性,眼睛晶状体LDH可作为鉴定点篮子鱼种质的特征生化遗传参数。 展开更多
关键词 点篮子鱼 形态 乳酸 组织异性 征生化遗传参数
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急性镉中毒小鼠睾丸乳酸脱氢酶同工酶-X活性的改变及锌的保护作用 被引量:5
14
作者 文建国 李玉绿 卢迪生 《湖南医科大学学报》 CSCD 1996年第4期295-295,297,300,共3页
用组织化学方法研究急性镉中毒小鼠睾丸LDH-X活性改变,染镉1h组曲细精管LDH-X活性无明显下降;染镉3h组LDH-x活性降低(P<0.05),6及12h组活性更低,与正常组比差异有显著性(P<0.01)。染镉前以... 用组织化学方法研究急性镉中毒小鼠睾丸LDH-X活性改变,染镉1h组曲细精管LDH-X活性无明显下降;染镉3h组LDH-x活性降低(P<0.05),6及12h组活性更低,与正常组比差异有显著性(P<0.01)。染镉前以锌保护,染镉1h和3h组LDH-X活性与正常组无明显差异;而6h及12h组酶活性下降(分别P<0.05,P<0.01),但其LDH-X活性仍显著高于相应时间的镉中毒组(分别P<0.05,P<0,01),提示急性镉中毒可导致睾丸曲细精管LDH-X活性降低,锌对其活性有一定程度的保护作用。 展开更多
关键词 镉中毒 睾丸 乳酸 LDH-X 保护作用
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黄牛睾丸、附睾和精液乳酸脱氢酶—X(LDH—X)测定研究
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作者 张学舜 何学谦 +4 位作者 肖开进 张瑞琼 黄怀昭 周乃祥 佘陆君 《中国牛业科学》 1990年第1期41-45,共5页
本研究从12头黄牛睾丸组织、3头附睾组织和3头精液匀浆液,用聚丙烯酰胺凝胶电泳区分LDH同工酶及LDH-X酶谱和扫描测定其百分含量。LDF-X带是用65℃20分钟热处理样品、黄牛、马、绵羊血清以及牦牛、猪、狗睾丸组织和精液同步电泳确定黄牛L... 本研究从12头黄牛睾丸组织、3头附睾组织和3头精液匀浆液,用聚丙烯酰胺凝胶电泳区分LDH同工酶及LDH-X酶谱和扫描测定其百分含量。LDF-X带是用65℃20分钟热处理样品、黄牛、马、绵羊血清以及牦牛、猪、狗睾丸组织和精液同步电泳确定黄牛LDH-X带在LDH_4和LDH_5之间,并紧靠LDH_5。 展开更多
关键词 精液检查 LDH 睾丸组织 乳酸 绵羊血 精子细胞 附睾组织 同工 匀浆液
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尖裸鲤5种组织乳酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶的电泳分析 被引量:6
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作者 张涛 陈建武 何力 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2018年第A01期89-93,共5页
为了了解尖裸鲤的生化遗传特性,丰富尖裸鲤种质资源研究的内容,通过配制不连续浓度聚丙烯酰胺凝胶,采用聚丙烯胺凝胶垂直板电泳对尖裸鲤5种组织(心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和肾脏)中的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)进行了电泳... 为了了解尖裸鲤的生化遗传特性,丰富尖裸鲤种质资源研究的内容,通过配制不连续浓度聚丙烯酰胺凝胶,采用聚丙烯胺凝胶垂直板电泳对尖裸鲤5种组织(心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和肾脏)中的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)进行了电泳。结果表明:所测样本鱼心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和肾脏中的LDH酶带数分别为:12~16条,17~18条,6~13条,6~10条和12~17条; MDH酶带数分别为3条,4条,3~5条,2条和4~7条。LDH在尖裸鲤厌氧器官(骨骼肌和肝脏)中表达的酶带数总体少于非厌氧器官(心脏和肾脏)。尖裸鲤的MDH分为上清液型(s-MDH)和线粒体型(mMDH)。尖裸鲤的LDH和MDH同工酶系统具有组织特异性,尖裸鲤相对较多的LDH酶带数可能与其独特的栖息环境和A亚基与B亚基的变异共同作用有关。本研究可从生化遗传角度为尖裸鲤的资源保护和利用提供一定理论依据。 展开更多
关键词 尖裸鲤 乳酸 苹果酸 组织异性
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兔抗人睾丸乳酸脱氢酶同工酶-X抗血清的制备纯化及免疫性质探讨
17
作者 谭委民 丘志昌 +1 位作者 朱雯 苗秉 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1994年第3期300-303,共4页
以纯化的人睾丸乳酸脱氢酶同工酶-X(简称人LDH-X)为抗原免疫家免,制备了兔抗人睾丸乳酸脱氢酶同工酶-X抗血清(简称人LDH-X抗体)。用辛酸法纯化该抗体。以双扩及免疫电泳鉴定,均呈现单一沉淀线。经免疫交叉反应试验证明人LDH-X与人LDH_(1... 以纯化的人睾丸乳酸脱氢酶同工酶-X(简称人LDH-X)为抗原免疫家免,制备了兔抗人睾丸乳酸脱氢酶同工酶-X抗血清(简称人LDH-X抗体)。用辛酸法纯化该抗体。以双扩及免疫电泳鉴定,均呈现单一沉淀线。经免疫交叉反应试验证明人LDH-X与人LDH_(1-5)同工酶有不同的免疫决定簇;纯化的人LDH-K抗体只与人睾丸匀浆、人精液呈现单一沉淀线,而与鼠睾丸LDH-X、兔及牛睾丸匀浆均无交叉反应。从而显示纯化的人LDH-X抗体具有较强的种属特异性。 展开更多
关键词 睾丸 乳酸 同工 免疫
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大鼠睾丸乳酸脱氢酶同工酶-C_4的分离纯化研究
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作者 谭委民 朱雯 +1 位作者 丘志昌 苗秉 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1994年第2期156-159,共4页
采用加热、硫酸铵分段盐析和DEAE-SephadexA-50柱层析,从大鼠睾丸中分离纯化了LDH-C4。比活性提高784倍,活性回收率为12.3%,纯化的LDH-C4经聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)鉴定均为一条酶带,... 采用加热、硫酸铵分段盐析和DEAE-SephadexA-50柱层析,从大鼠睾丸中分离纯化了LDH-C4。比活性提高784倍,活性回收率为12.3%,纯化的LDH-C4经聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)鉴定均为一条酶带,位于LDH3和LDH4之间。 展开更多
关键词 睾丸 LDH-C4 纯化 大鼠 乳酸
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月鳢不同组织中乳酸脱氢酶和酯酶同工酶的比较 被引量:10
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作者 李广丽 朱春华 《湛江海洋大学学报》 CAS 1999年第1期1-3,共3页
采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对月鳢十种组织中乳酸脱氢酶(LDH)和酯酶(EST)同工酶进行了比较研究,结果表明:月鳢组织内LDH和EST具有明显的组织特异性,EST由2个座位编码,LDH则由Ldh-a、Ldh-... 采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对月鳢十种组织中乳酸脱氢酶(LDH)和酯酶(EST)同工酶进行了比较研究,结果表明:月鳢组织内LDH和EST具有明显的组织特异性,EST由2个座位编码,LDH则由Ldh-a、Ldh-b两个基因编码。 展开更多
关键词 月鳢 同工 组织异性 乳酸
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八氢番茄红素脱氢酶(Pds)基因果实特异表达载体的构建 被引量:2
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作者 刘顺枝 孙莉丽 +1 位作者 杨礼香 王小兰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第13期196-199,共4页
八氢番茄红素脱氢酶(Pds)是番茄红素合成的关键酶,本研究通过PCR法获取pds基因和E8启动子序列,将目的基因和E8启动子序列构建到植物表达载体pMD1中,构建了含果实特异表达启动子的pds基因的植物表达载体。并采用PCR、限制性内切酶酶切和... 八氢番茄红素脱氢酶(Pds)是番茄红素合成的关键酶,本研究通过PCR法获取pds基因和E8启动子序列,将目的基因和E8启动子序列构建到植物表达载体pMD1中,构建了含果实特异表达启动子的pds基因的植物表达载体。并采用PCR、限制性内切酶酶切和序列测定分析法,对重组质粒进行鉴定。结果表明:番茄果实特异性表达pds的重组质粒构建成功;通过农杆菌直接转化技术将其成功转入转化农杆菌LBA4404、EHA105中,为下一步pds在番茄果实中特异表达奠定了基础。 展开更多
关键词 番茄红素 果实异性启动子 载体构建
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