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盐酸克伦特罗多克隆抗体和量子点的偶联
1
作者 金艳丹 栗慧 +1 位作者 张岩蔚 魏东 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2018年第1期43-46,共4页
为在制备盐酸克伦特罗和水溶性羧基量子点偶联物,给荧光快速检测技术的研究提供良好的依据。实验采用EDC/NHS两种偶联剂将二者共价偶联到一起,并经紫外扫描法、荧光扫描、斑点法、荧光免疫分析法对二者偶联效果进行了鉴定,结果表明,量... 为在制备盐酸克伦特罗和水溶性羧基量子点偶联物,给荧光快速检测技术的研究提供良好的依据。实验采用EDC/NHS两种偶联剂将二者共价偶联到一起,并经紫外扫描法、荧光扫描、斑点法、荧光免疫分析法对二者偶联效果进行了鉴定,结果表明,量子点和抗体偶联成功,偶联后吸收峰变宽、吸光度变大、荧光强度增加、抗体效价稍低,但不影响试验结果,可为盐酸克伦特罗药物的多残留试纸条及试剂盒的开发提供良好的参考依据。 展开更多
关键词 量子点 盐酸克伦特罗多克隆抗体 偶联物
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盐酸可乐定单克隆抗体的制备及免疫层析试纸的研制
2
作者 王耀 景钰冰 +5 位作者 曹金博 孙亚宁 邢云瑞 陈秀金 李兆周 胡骁飞 《西北农业学报》 北大核心 2025年第6期1136-1144,共9页
盐酸可乐定(Clonidine hydrochloride,CLO)是一种新型的瘦肉精类药物替代品,在饲料和动物饮水中禁止添加。开发CLO的快速检测方法对于兽药残留监控,保障动物源性食品安全具有重要意义。制备免疫学特性优良的CLO鼠源单克隆抗体,并基于竞... 盐酸可乐定(Clonidine hydrochloride,CLO)是一种新型的瘦肉精类药物替代品,在饲料和动物饮水中禁止添加。开发CLO的快速检测方法对于兽药残留监控,保障动物源性食品安全具有重要意义。制备免疫学特性优良的CLO鼠源单克隆抗体,并基于竞争模式研制快速检测CLO残留的免疫层析试纸(Immunochromatographic strip,ICS)。ICS视觉检测消线值为2.5 ng/mL,且通过读条仪可进行定量检测,检测限为0.202 ng/mL。猪尿样品的加标回收试验结果显示,ICS的批内回收率为82.79%~92.96%,变异系数(Coefficient of variation,CV)最高为7.17%,批间回收率为82.36%~89.09%,CV最高为7.04%,具有良好的灵敏度和准确度,为CLO残留的高效监控提供一种实用的快速检测工具。 展开更多
关键词 盐酸可乐定 单克隆抗体 免疫层析试纸 快速检测
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盐酸克伦特罗单克隆抗体的制备及其特性 被引量：7
3
作者 王选年 杨艳艳 +9 位作者 李青梅 邢广旭 李学伍 肖治军 邓瑞广 柴书军 杨继飞 赵东 康晓迪 张改平 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2002年第6期30-33,共4页
以戊二醛法将盐酸克伦特罗 (Clenbuterol,CL)连接到牛血清白蛋白 (BSA)上制备抗原(BSA -CL) ,并以BSA -CL免疫Balb/c小鼠 ,应用杂交瘤技术将免疫鼠脾细胞与NS0细胞融合 ,建立分泌CL单克隆抗体的杂交瘤细胞株。通过对杂交瘤细胞培养上清... 以戊二醛法将盐酸克伦特罗 (Clenbuterol,CL)连接到牛血清白蛋白 (BSA)上制备抗原(BSA -CL) ,并以BSA -CL免疫Balb/c小鼠 ,应用杂交瘤技术将免疫鼠脾细胞与NS0细胞融合 ,建立分泌CL单克隆抗体的杂交瘤细胞株。通过对杂交瘤细胞培养上清的检测、鉴定 ,筛选出 1 7株高亲和力的杂交瘤细胞株 ,其中C - 4C9、C - 2D6、C - 4G1和C - 2H6的培养上清ELISA效价为 1∶5 1 2 ,1∶640 ,1∶81 0和 1∶2 5 6;腹水ELISA效价为 5× 1 0 - 6,1 .7× 1 0 - 5,2×1 0 - 6和 3.3× 1 0 - 5。 4株单抗与 β -肾上腺素激动剂沙丁胺醇的交叉反应性为 0 .79% ,与肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素及畜禽常用抗生素无交叉反应性。 展开更多
关键词 制备 β-肾上腺素激动剂 盐酸克伦特罗 单克隆抗体 交叉反应 瘦肉精 快速检测度剂盒
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抗盐酸克伦特罗单克隆抗体的制备与鉴定 被引量：1
4
作者 左伟勇 洪伟鸣 +2 位作者 吴双 王安平 朱善元 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第1期43-45,共3页
利用重氮法将盐酸克伦特罗(CL)分别与载体蛋白钥孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)偶联,以CL-KLH为免疫原免疫BALB/c小鼠,以CL-BSA为检测原,采用杂交瘤技术获得1株针对CL的单克隆抗体细胞株(5D7)。抗体的亚类为IgG1,通过竞争阻断试验... 利用重氮法将盐酸克伦特罗(CL)分别与载体蛋白钥孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)偶联,以CL-KLH为免疫原免疫BALB/c小鼠,以CL-BSA为检测原,采用杂交瘤技术获得1株针对CL的单克隆抗体细胞株(5D7)。抗体的亚类为IgG1,通过竞争阻断试验证明其具有良好的特异性和敏感性,利用Protein-G Sepharose亲和层析系统纯化单克隆抗体5D7,单克隆抗体5D7对CL的IC50约为4.6 ng/mL。 展开更多
关键词 盐酸克伦特罗 单克隆抗体 制备与鉴定 间接竞争ELISA
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盐酸克伦特罗单克隆抗体的制备和鉴定 被引量：1
5
作者 张玲玲 战翔 +7 位作者 彭喆 时建立 吴晓燕 徐胜男 郑书轩 徐绍建 黄保华 李俊 《中国动物检疫》 CAS 2017年第2期91-95,105,共6页
为进一步建立克伦特罗(CL)残留检测方法,给制备CL残留检测试剂盒打下基础,进行了CL单克隆抗体(McAb)的制备研究。以重氮反应,将CL与牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,分别制备免疫原和检测原,并通过杂交瘤技术,获得了5株能稳... 为进一步建立克伦特罗(CL)残留检测方法,给制备CL残留检测试剂盒打下基础,进行了CL单克隆抗体(McAb)的制备研究。以重氮反应,将CL与牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,分别制备免疫原和检测原,并通过杂交瘤技术,获得了5株能稳定分泌特异结合CL小分子的单克隆抗体杂交瘤细胞株(1E9A9、2A9C1、3F2E9、6G2E9、6E10D9)。这5株细胞株经过体外传代培养和冻存复苏后均能稳定分泌抗体。用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)测定的这5株细胞上清液抗体效价分别为1:1.28×10~5、1:5.12×10~5、1:1.28×10~5、1:5.12×10~5、1:2.56×10~5;选用3F2E9、6E10D9细胞株,制备CL单克隆抗体腹水并纯化,其纯化后的腹水抗体效价分别为1:1.28×10~5、1:2.56×10~5,BCA(2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠)方法检测的浓度分别为1.60 mg/mL、1.54 mg/mL;最终通过斑点ELISA(Dot-ELISA)方法测定CL抗原与这2株抗体有较强的结合力。在上述方法的制备及验证下,成功获得了特异性较高的CL单克隆抗体,为进一步研制CL残留检测试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 盐酸克伦特罗 单克隆抗体 残留检测
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盐酸克伦特罗单克隆抗体的制备及检测方法的初步建立 被引量：4
6
作者 邵炜慧 贾红 +2 位作者 刘文博 吴艳涛 刘秀梵 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期450-453,共4页
选择一种新型载体阳离子化牛血清白蛋白(cBSA)与半抗原盐酸克伦特罗(CL)进行偶联,鉴定后作为免疫原免疫Balb/c小鼠,同时以卵清白蛋白(OVA)与CL偶联制备筛选抗原。应用杂交瘤细胞融合技术筛选后获得了1株稳定分泌抗CL单克隆抗体的杂交瘤... 选择一种新型载体阳离子化牛血清白蛋白(cBSA)与半抗原盐酸克伦特罗(CL)进行偶联,鉴定后作为免疫原免疫Balb/c小鼠,同时以卵清白蛋白(OVA)与CL偶联制备筛选抗原。应用杂交瘤细胞融合技术筛选后获得了1株稳定分泌抗CL单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为2H5。抗体的亚类为IgM,腹水及细胞上清间接ELISA效价分别为1:20480和1:320,通过竞争阻断实验证明其具有良好的特异性及敏感性,将半抗原经酶标后应用竞争ELISA方法初步建立了CL的检测方法,检测限可达1ng/mL,为进一步制备CL残留检测试剂盒打下了基础。 展开更多
关键词 盐酸克伦特罗 阳离子化牛血清白蛋白 单克隆抗体
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盐酸克伦特罗人工抗原的制备与鉴定 被引量：2
7
作者 周景明 段倩倩 +5 位作者 祁艳华 栗宁 郑伟 王新洲 陈菲 王爱萍 《郑州大学学报（理学版）》 CAS 北大核心 2014年第2期99-103,共5页
利用重氮化法合成了盐酸克伦特罗的人工抗原,采用SDS-PAGE凝胶电泳法以及紫外扫描法验证了人工抗原偶联成功,并且运用紫外分光光度法计算了人工抗原的偶联比,偶联物CL-BSA和CL-OVA的偶联比分别为27.4∶1.0和12.0∶1.0.用合成的人工抗原C... 利用重氮化法合成了盐酸克伦特罗的人工抗原,采用SDS-PAGE凝胶电泳法以及紫外扫描法验证了人工抗原偶联成功,并且运用紫外分光光度法计算了人工抗原的偶联比,偶联物CL-BSA和CL-OVA的偶联比分别为27.4∶1.0和12.0∶1.0.用合成的人工抗原CL-BSA免疫Balb/c小鼠获得了良好的效果. 展开更多
关键词 盐酸克伦特罗 人工抗原 偶联比 多克隆抗体
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盐酸克仑特罗单克隆抗体的研制 被引量：2
8
作者 肖国平 陈飞 +2 位作者 邵景东 姚永华 戴先礼 《动物科学与动物医学》 2003年第7期41-42,共2页
本研究通过将盐酸克仑特罗分别与自制血清白蛋白、牛血清白蛋白和卵清蛋白相偶联后,制成免疫原和包被抗原,利用单克隆抗体制备技术,制备了能够分泌抗盐酸克仑特罗的单克隆抗体细胞株。而以自制血清白蛋白效价最好,且该株细胞分泌的抗体... 本研究通过将盐酸克仑特罗分别与自制血清白蛋白、牛血清白蛋白和卵清蛋白相偶联后,制成免疫原和包被抗原,利用单克隆抗体制备技术,制备了能够分泌抗盐酸克仑特罗的单克隆抗体细胞株。而以自制血清白蛋白效价最好,且该株细胞分泌的抗体特异性强,与其它克仑特罗类药物无交叉反应。 展开更多
关键词 盐酸克仑特罗 单克隆抗体 动物添加剂 药物残留 杂交瘤技术 检测试剂盒
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胶体金免疫层析卡优化及其与ELISA法检测克伦特罗残留的比较
9
作者 刘颖沙 刘昭彤 +3 位作者 邢维维 鲁瑶 岳彩洋 杨洋 《热带农业科学》 2023年第1期62-67,共6页
盐酸克伦特罗俗称“瘦肉精”,国家明令禁止使用,市面上最常见的瘦肉精快速检测方法即为快速检测试纸条,因其特异性和灵敏度较低,容易造成结果的不准确。本文优化克伦特罗单抗的制备方法,单克隆抗体的免疫球蛋白亚类为IgG1,分子量为148.5... 盐酸克伦特罗俗称“瘦肉精”,国家明令禁止使用,市面上最常见的瘦肉精快速检测方法即为快速检测试纸条,因其特异性和灵敏度较低,容易造成结果的不准确。本文优化克伦特罗单抗的制备方法,单克隆抗体的免疫球蛋白亚类为IgG1,分子量为148.5 kDa,染色体数目为83~91条,亲和常数为2.51×10^(8)M^(-1),得到最佳的标记条件pH=8、最佳抗体标记量为10μL/mL的120%(12μL/mL)抗体标记量、最佳离心力为8000 r/min,对样品垫、吸水纸、NC膜进行探索与优化,本研究研制的克伦特罗检测卡检出限为3 ng/mL,与莱克多巴胺、沙丁胺醇和妥布特罗无交叉反应,特异性好,与酶联免疫吸附法测定值符合率良好。 展开更多
关键词 盐酸克伦特罗 检测 单克隆抗体 准确度 特异性 酶联免疫吸附法
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盐酸克仑特罗单抗检测试剂盒的研制 被引量：2
10
作者 肖国平 陈飞 +2 位作者 邵景东 姚永华 戴先礼 《动物科学与动物医学》 2003年第11期33-34,共2页
在筛选盐酸克仑特罗单克隆抗体的基础上,首次研制出利用单克隆抗体对动物组织中残留的盐酸克仑特罗进行检测的试剂盒,本研究通过对几种包被抗原种类和包被浓度进行筛选,并对单抗和二抗最佳工作效价进行严格的筛选和研究。本试剂盒的最... 在筛选盐酸克仑特罗单克隆抗体的基础上,首次研制出利用单克隆抗体对动物组织中残留的盐酸克仑特罗进行检测的试剂盒,本研究通过对几种包被抗原种类和包被浓度进行筛选,并对单抗和二抗最佳工作效价进行严格的筛选和研究。本试剂盒的最低检测限为0.1ng/ml,检测范围在0.1～10ng/ml,通过对24份阳性样品检测并与德国r-biopharm公司和英国的RANDOX公司同类试剂盒作对比试验,阳性符合率95.8%。 展开更多
关键词 盐酸克仑特罗 单克隆抗体 ELISA 试剂盒 饲料添加剂 研制
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