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瘦素受体基因敲除SD大鼠的表型及病理观察 被引量:5
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作者 蒋丹丹 曹兰凤 +4 位作者 许朝霞 李硕 董晓辉 姚芳 张连珊 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期331-338,共8页
目的观察CRISPR/Cas9技术建立的肥胖、代谢综合征和糖尿病前期特征的瘦素受体基因敲除大鼠模型的多种参数,为代谢性疾病的分子机制研究和新药研发提供更为理想的动物模型。方法1)定期测定Lepr^-/-大鼠的体重、摄食量、随机血糖和空腹血... 目的观察CRISPR/Cas9技术建立的肥胖、代谢综合征和糖尿病前期特征的瘦素受体基因敲除大鼠模型的多种参数,为代谢性疾病的分子机制研究和新药研发提供更为理想的动物模型。方法1)定期测定Lepr^-/-大鼠的体重、摄食量、随机血糖和空腹血糖;葡萄糖耐量试验和胰岛素耐量试验;血清血脂参数;2)观察14周和18周Lepr^-/-大鼠主要脏器的病理学改变;3)观察脏器脂质沉积情况。结果Lepr^-/-大鼠表现明显肥胖、高摄食量、葡萄糖耐量受损、胰岛素抵抗和血脂异常;14周和18周出现胰岛增生和心脏肌细胞肥大、脂肪肝、肥胖相关性肾病;肝细胞、肾小管上皮细胞和骨骼肌纤维内脂质沉积。结论Lepr^-/-大鼠是代谢性疾病的病因研究和新药研发的理想动物模型。 展开更多
关键词 瘦素受体基因敲除大鼠 肥胖 代谢综合征 脂质沉积
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STZ糖尿病大鼠心肌短型瘦素受体基因的转录表达及心脏纤维化观察 被引量:7
2
作者 周丽诺 沈稚舟 +5 位作者 吴烯 张琳 杨叶虹 方京冲 俞茂华 朱禧星 《复旦学报(医学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第6期458-461,共4页
目的 研究瘦素受体在STZ糖尿病大鼠心肌中转录表达及心脏的纤维化情况。方法 用STZ制备糖尿病大鼠模型 ,在病程 12周时测定大鼠血压和心功能后处死 ,取心肌组织和分离、培养心脏成纤维细胞 ,用RT PCR检测长、短型瘦素受体mRNA转录表达... 目的 研究瘦素受体在STZ糖尿病大鼠心肌中转录表达及心脏的纤维化情况。方法 用STZ制备糖尿病大鼠模型 ,在病程 12周时测定大鼠血压和心功能后处死 ,取心肌组织和分离、培养心脏成纤维细胞 ,用RT PCR检测长、短型瘦素受体mRNA转录表达 ,PCR产物测序 ,电镜观察心肌的超微结构。血清瘦素、胰岛素放射免疫测定。结果 STZ糖尿病大鼠和对照鼠心肌均可转录表达短型瘦素受体mRNA ,两组之间无显著差别 ,但糖尿病心肌成纤维细胞短型瘦素受体mRNA表达较高 ,伴心功能减退和显著的心脏纤维化病理改变。结论 糖尿病大鼠心脏成纤维细胞短型瘦素受体表达增加与心脏纤维化并存。 展开更多
关键词 STZ糖尿病 大鼠 心肌短型 受体 基因转录 心脏纤维化
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针刺对2型糖尿病大鼠弓状核瘦素受体基因的影响 被引量:9
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作者 袁爱红 刘志诚 +1 位作者 魏群利 蔡辉 《中国康复理论与实践》 CSCD 2009年第3期211-213,共3页
目的探讨瘦素与弓状核瘦素受体(OB-R)基因表达和2型糖尿病(T2DM)的关系以及针刺对T2DM机体瘦素水平和弓状核OB-R基因表达的影响。方法给食源性肥胖大鼠腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)造成T2DM模型,随机分为针刺组、优降糖组和模型组。处... 目的探讨瘦素与弓状核瘦素受体(OB-R)基因表达和2型糖尿病(T2DM)的关系以及针刺对T2DM机体瘦素水平和弓状核OB-R基因表达的影响。方法给食源性肥胖大鼠腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)造成T2DM模型,随机分为针刺组、优降糖组和模型组。处理4周后,用快速血糖仪检测空腹血糖(FBS),用放免法检测空腹胰岛素(FINS),用ELISA法检测空腹瘦素(FLP),用原位杂交检测弓状核OB-RmRNA表达,测量治疗前后大鼠的身长、体重,计算Lee's指数,并且与正常组比较。结果模型组FBS、FINS高于正常组(P<0.05);治疗后,针刺组FBS、FINS明显下降(P<0.01),接近正常组水平;优降糖组FBS明显下降(P<0.01),FINS有所下降(P<0.05)。模型组FLP低于正常组(P<0.05)和优降糖组(P<0.01);优降糖组FLP高于正常组和针刺组(P<0.05)。模型组体重和Lee'S指数下降明显,针刺组、优降糖组体重和Lee's指数有所下降,接近正常组水平。模型组弓状核OB-R基因表达与正常组、针刺组、优降糖组无显著差异(均P>0.05),优降糖组弓状核OB-R基因表达明显低于正常组(P<0.05),针刺组弓状核OB-R基因表达和正常组无显著性差异(P>0.05)。结论T2DM大鼠模型明显消瘦后出现血清瘦素水平下降,优降糖组存在明显的瘦素抵抗,针刺可以在一定程度上改善弓状核OB-R基因表达。 展开更多
关键词 2型糖尿病 受体 弓状核 基因 针刺 大鼠
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运动对糖尿病大鼠瘦素受体基因水平与功能的影响 被引量:24
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作者 丛琳 陈吉棣 《体育科学》 CSSCI 北大核心 2001年第4期54-57,共4页
目的 :中小强度运动对糖尿病大鼠瘦素受体的蛋白和 RNA水平的影响 ,探讨运动改善糖尿病大鼠代谢紊乱的可能机理。方法 :40只 SD大鼠分为 4组 :糖尿病非运动组 ,糖尿病运动组 ,正常非运动组和正常运动组。运动组进行12周的中小强度跑步... 目的 :中小强度运动对糖尿病大鼠瘦素受体的蛋白和 RNA水平的影响 ,探讨运动改善糖尿病大鼠代谢紊乱的可能机理。方法 :40只 SD大鼠分为 4组 :糖尿病非运动组 ,糖尿病运动组 ,正常非运动组和正常运动组。运动组进行12周的中小强度跑步训练。 Western印迹法检测大鼠肝脏 ,骨骼肌和胰腺组织瘦素受体的含量。 RT- PCR检测肝脏 ,骨骼肌和胰腺组织的瘦素受体 RNA水平。结果 :(1)糖尿病大鼠血糖较正常对照大鼠显著升高 (P<0 .0 5 ) ,血清胰岛素和瘦素 (L eptin)水平明显下降 (P<0 .0 5 )。(2 )糖尿病运动组大鼠经 12周跑步训练后 ,血糖浓度显著下降 (P<0 .0 5 ) ,血胰岛素浓度显著升高 (P<0 .0 5 ) ,血浆瘦素 (L eptin)水平相应显著上升 (P<0 .0 5 ) ;(3)糖尿病大鼠肝脏 ,骨骼肌和胰腺组织瘦素受体的蛋白含量和 RNA水平有不同程度的显著下降 (P<0 .0 5 ) ,12周运动后各组织的瘦素受体的蛋白含量和 m RNA水平显著增加 (P<0 .0 5 )。结论 :运动通过对瘦素受体基因水平和蛋白功能的影响介导胰岛素分泌和代谢作用的改善 。 展开更多
关键词 大鼠 受体基因 运动医学 糖尿病 受体蛋白 血糖浓度 能量代谢失衡
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游离脂肪酸对大鼠肝细胞瘦素受体基因、蛋白表达及酪氨酸磷酸化的影响 被引量:9
5
作者 郭启煜 高妍 +1 位作者 丛琳 邵宁生 《医学研究生学报》 CAS 2003年第9期659-662,共4页
目的 :探讨游离脂肪酸 (FFA)是否会对大鼠肝细胞瘦素 (leptin)受体的基因、蛋白表达及酪氨酸磷酸化产生一定的影响。 方法 :分离、培养新生Sprague Dawley大鼠肝细胞 ,分别与软脂酸 (0 .2 5mmol/L)或油酸 (0 .12 5mmol/L)孵育 12、2 4... 目的 :探讨游离脂肪酸 (FFA)是否会对大鼠肝细胞瘦素 (leptin)受体的基因、蛋白表达及酪氨酸磷酸化产生一定的影响。 方法 :分离、培养新生Sprague Dawley大鼠肝细胞 ,分别与软脂酸 (0 .2 5mmol/L)或油酸 (0 .12 5mmol/L)孵育 12、2 4和 36h ,提取蛋白后用Western印迹法检测瘦素受体的蛋白水平。用RT PCR检测肝细胞内瘦素受体RNA含量的变化。应用免疫沉淀法检测瘦素受体的酪氨酸磷酸化程度。 结果 :软脂酸和油酸孵育后大鼠肝细胞瘦素受体的蛋白表达水平在孵育 12和 2 4h后无显著变化 ,在孵育 36h后显著下调 (P <0 .0 5 ) ;瘦素受体的RNA水平在孵育 12h后无显著变化 ,孵育 2 4和 36h后显著下调 (P <0 .0 5 ) ;瘦素受体的酪氨酸磷酸化程度在孵育 12h后无显著变化 ,孵育 2 4和 36h后显著下调 (P <0 .0 5 )。 结论 :FFA可对大鼠肝细胞瘦素受体的基因、蛋白表达水平及磷酸化程度产生一定的抑制作用 ,这可能是FFA导致胰岛素抵抗的机制之一。 展开更多
关键词 脂肪酸 受体 肝细胞 大鼠
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瘦素基因敲除肥胖大鼠的血糖及病理长期观察 被引量:2
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作者 张丽 关菲菲 +3 位作者 张旭 陈炜 孙彩显 张连峰 《中国比较医学杂志》 CAS 2014年第3期45-49,I0007,共6页
目的:对Leptin基因敲除SD大鼠血糖变化及病理表型进行长期分析,为使用该大鼠作为糖尿病和脂代谢模型积累数据。方法 western blot检测Leptin+/+大鼠和Leptin-/-大鼠肝脏中Leptin的表达。利用称量方法测定Leptin基因敲除的SD大鼠(Le... 目的:对Leptin基因敲除SD大鼠血糖变化及病理表型进行长期分析,为使用该大鼠作为糖尿病和脂代谢模型积累数据。方法 western blot检测Leptin+/+大鼠和Leptin-/-大鼠肝脏中Leptin的表达。利用称量方法测定Leptin基因敲除的SD大鼠(Leptin-/-)1,3,6,8月龄的体重变化,利用稳豪血糖仪采尾血测定1,3,6,8月龄Leptin-/-大鼠空腹血糖值。 HE染色和免疫组织化学观察Leptin-/-大鼠胰腺及肝脏的病理学变化。结果 Leptin-/-大鼠肝脏中表达变短的功能异常的Leptin蛋白。 Leptin-/-大鼠从1月龄开始出现显著的体重增加,8月龄时雌性体重为884 g,雄性体重可以达到1200 g,是野生SD大鼠的2倍。自1月龄起, Leptin-/-雌鼠的空腹血糖值显著高于野生大鼠,在1月龄到6月龄之间差别明显(40%~26%),到8月龄和野生大鼠恢复到近正常水平。8月龄Leptin-/-大鼠肝脏肝小叶中出现大量脂肪空泡,胰腺内较多脂肪细胞浸润、胰岛数量明显增多,体积增大,胰岛素阳性β细胞增多。结论 Leptin-/-大鼠表型表现为肥胖,脂肪肝,胰岛增生和早期高血糖。 展开更多
关键词 基因敲除 空腹血糖 肥胖 大鼠
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运动对饮食性肥胖大鼠脂肪细胞瘦素受体基因表达的影响 被引量:5
7
作者 李琳燕 衣雪洁 《山东体育学院学报》 北大核心 2008年第4期64-67,共4页
目的:肥胖常伴有高瘦素、低瘦素受体(OB-R)水平。探讨耐力训练对脂肪细胞OB-R基因表达的影响,为肥胖相关课题研究提供实验依据。方法:32只实验用刚断乳雄性SD大鼠随机分组:正常对照组(NC)8只喂以标准饲料,高脂组(HD)喂以高脂饲料。10周... 目的:肥胖常伴有高瘦素、低瘦素受体(OB-R)水平。探讨耐力训练对脂肪细胞OB-R基因表达的影响,为肥胖相关课题研究提供实验依据。方法:32只实验用刚断乳雄性SD大鼠随机分组:正常对照组(NC)8只喂以标准饲料,高脂组(HD)喂以高脂饲料。10周后,高脂组随机分为3组:肥胖对照组(OC)、肥胖不限制饮食+运动组(OE)、肥胖限制饮食+运动组(OEd),各8只,然后对OE和OEd组进行8周的游泳训练。RT-PCR法检测脂肪细胞和肝脏组织的瘦素受体RNA水平,放免法检测血清胰岛素。结果:1)肥胖对照组大鼠胰岛素与正常对照组相比升高极其显著,P<0.001;不限制饮食运动组大鼠胰岛素水平仍显著高于正常对照组,P<0.01,但有下降趋势。2)经8周游泳训练后,限制饮食运动组大鼠胰岛素水平显著低于肥胖对照组,P<0.01。3)肥胖对照组大鼠脂肪细胞瘦素受体的RNA水平明显下降,基因表达扫描亮度明显变暗。8周游泳训练后,脂肪细胞瘦素受体RNA相对含量明显增加,扫描亮度明显增强。结论:耐力训练上调脂肪细胞OB-R基因表达,与Leptin结合量提高,直接作用于脂肪组织,促进脂肪分解代谢;明显缓解肥胖高胰岛素血症,结合饮食控制效果更好。 展开更多
关键词 运动 饮食性肥胖 受体基因表达 胰岛
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利用TALENs技术制备瘦素基因敲除的大鼠 被引量:2
8
作者 关菲菲 张旭 +3 位作者 陈炜 董伟 高凯 张连峰 《中国比较医学杂志》 CAS 2013年第8期38-43,F0003,共7页
目的瘦素(leptin)是一种调节机体摄食和能量代谢的细胞因子,也参与神经细胞发育、免疫、糖脂代谢等,由于大鼠在代谢和神经研究等方面的优点,研制leptin基因敲除大鼠(leptin-/-),为这几方面的深入研究提供模型。方法利用类转录激活因子... 目的瘦素(leptin)是一种调节机体摄食和能量代谢的细胞因子,也参与神经细胞发育、免疫、糖脂代谢等,由于大鼠在代谢和神经研究等方面的优点,研制leptin基因敲除大鼠(leptin-/-),为这几方面的深入研究提供模型。方法利用类转录激活因子效应因子核酸酶(transcription activator-like effector nucleases,TALENs)技术,制备leptin-/-大鼠。利用称量方法测定不同时间点的体重变化,利用磁共振成像观测大鼠脂肪积累及分布,利用病理学方法观察胰腺的病理变化,并进行血生化、腹腔糖耐受实验及葡萄糖刺激下的血清胰岛素含量测定。结果获得一个在leptin基因编码区418~425位有8个碱基缺失的首建鼠,由于产生了TGA终止密码子,使该蛋白C末端缺失了28个氨基酸。Leptin-/-大鼠从5周龄开始出现显著的体重增加,到4月龄时体重比野生SD大鼠(leptin+/+)增加了52%。2月龄MRI结果显示leptin-/-大鼠与leptin+/+大鼠相比,在腹腔和皮下均有更多的脂肪积累,同时病理观察也发现leptin-/-大鼠胰腺中胰岛细胞显著增生。4月龄时,leptin-/-大鼠的血清中甘油三酯和胆固醇含量分别是leptin+/+大鼠的8.4倍和1.8倍,同时出现了明显的糖耐受受损和高胰岛素血症。结论利用TALENs技术成功建立了瘦素基因敲除大鼠,并表现出明显的肥胖、高胰岛素血、高脂血和糖代谢异常。结果表明:该敲除大鼠可作为代谢、神经、免疫等研究的潜在模型。 展开更多
关键词 TALENs技术 基因敲除大 肥胖 脂质代谢 糖代谢
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葡萄糖依赖性促胰岛素多肽受体基因敲除小鼠不同部位骨密度的动态改变 被引量:2
9
作者 谢锭 程桦 Carlos M.Isales 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期361-365,共5页
【目的】观察葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)受体基因敲除小鼠(GIPR-/-小鼠)不同部位骨密度的动态改变。【方法】用双能X线吸收仪(DEXA)测定不同月龄(1月龄、3月龄和5月龄)的雌性GIPR-/-小鼠和野生型对照C57BL/6小鼠不同部位(全身、股... 【目的】观察葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)受体基因敲除小鼠(GIPR-/-小鼠)不同部位骨密度的动态改变。【方法】用双能X线吸收仪(DEXA)测定不同月龄(1月龄、3月龄和5月龄)的雌性GIPR-/-小鼠和野生型对照C57BL/6小鼠不同部位(全身、股骨和腰椎)的骨密度(BMD)、骨矿含量(BMC)和骨骼面积。【结果】1月龄、3月龄和5月龄GIPR-/-小鼠的全身BMD、BMC和骨骼面积以及1月龄和3月龄GIPR-/-小鼠的股骨BMD均低于对照小鼠相应值,而1月龄GIPR-/-小鼠的腰椎BMD则高于对照小鼠相应值(P均<0.05)。5月龄与3月龄相比,GIPR-/-小鼠上述部位的BMD、BMC和骨骼面积无显著变化,而在对照小鼠仍有明显增加(P均<0.05)。【结论】与对照小鼠相比,GIPR-/-小鼠的BMD、BMC和骨骼面积均有明显改变,并与部位和月龄相关,提示GIP对小鼠骨转换有一定的作用。进一步提示在营养物的获得和骨代谢之间,除甲状旁腺激素-维生素D轴外,还存在着“肠-骨轴”,即肠道与营养代谢相关激素对骨代谢也有一定的调节作用。 展开更多
关键词 基因敲除 葡萄糖依赖性 不同部位 动态改变 骨密度 胰岛 受体 多肽 C57BL/6小 双能X线吸收仪 甲状旁腺激 BMD BMC 不同月龄 骨矿含量 维生D 调节作用 相关激 营养代谢 骨代谢 对照 面积 骨骼 野生型 骨转换
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激动β_3肾上腺素受体对载脂蛋白E基因敲除小鼠肺脏血管紧张素受体表达的影响
10
作者 蒋志丽 李艳芳 +1 位作者 宋俊迎 郭彦青 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2014年第8期846-849,共4页
目的探讨激动β3肾上腺素受体(β3-AR)对载脂蛋白E基因敲除(apoE-/-)老年高脂小鼠肺脏血管紧张素受体(ATR)表达的影响。方法野生型C57BL/6J小鼠10只作为对照组,apoE-/-老年高脂小鼠40只随机分为高脂模型组、β3-AR激动剂小剂量组(小剂量... 目的探讨激动β3肾上腺素受体(β3-AR)对载脂蛋白E基因敲除(apoE-/-)老年高脂小鼠肺脏血管紧张素受体(ATR)表达的影响。方法野生型C57BL/6J小鼠10只作为对照组,apoE-/-老年高脂小鼠40只随机分为高脂模型组、β3-AR激动剂小剂量组(小剂量组)、β3-AR激动剂大剂量组(大剂量组)和β3-AR拮抗剂组(拮抗剂组),每组10只。给予高脂饮食饲养至36周龄后分别给予药物干预12周。采用全自动生化分析仪检测TC和VLDL/LDL-C水平,实时定量PCR或Western blot测定肺组织β3-AR、AT1R和AT2R的mRNA及蛋白表达水平。结果与高脂模型组比较,小剂量组、大剂量组TC和VLDL/LDL-C水平明显降低[(18.27±1.30)mmol/L,(17.06±1.50)mmol/L vs(22.20±1.29)mmol/L和(14.31±0.31)mmol/L,(12.78±0.55)mmol/L vs(19.41±0.40)mmol/L,P<0.01]。与对照组比较,高脂模型组和拮抗剂组AT1R mRNA和AT1R蛋白水平明显升高,AT2R mRNA、β3-AR蛋白水平明显降低(P<0.05)。与高脂模型组比较,小剂量组和大剂量组AT1R表达下调,AT2R和β3-AR表达上调(P<0.05,P<0.01)。结论β3-AR激动剂在改善apoE-/-老年高脂小鼠血脂代谢紊乱的同时,影响了肺组织β3-AR和ATR各亚型表达,这种受体间交互作用可能与维持高脂血症条件下肺脏的正常功能有关。 展开更多
关键词 受体 肾上腺能Β3 载脂蛋白E类 基因敲除 受体 血管紧张
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瘦素(Leptin)受体基因敲除小鼠繁育及子代小鼠基因型鉴定
11
作者 季爱兵 严亮 +3 位作者 彭文书 刘聪 龚婉莹 王桥美 《甘肃农业科技》 2015年第1期9-11,共3页
将瘦素(Leptin,LP)受体基因杂合型小鼠按4种方式进行配对,从子鼠鼠尾中提取基因组DNA,用PCR方法扩增LP受体基因片段,琼脂糖凝胶电泳后观察。结果表明,LP+/+、LP+/-、LP-/-各表型小鼠互交繁殖结果基本符合孟德尔遗传规律,且雌、雄性LP-/... 将瘦素(Leptin,LP)受体基因杂合型小鼠按4种方式进行配对,从子鼠鼠尾中提取基因组DNA,用PCR方法扩增LP受体基因片段,琼脂糖凝胶电泳后观察。结果表明,LP+/+、LP+/-、LP-/-各表型小鼠互交繁殖结果基本符合孟德尔遗传规律,且雌、雄性LP-/-小鼠(即DB/DB小鼠)无繁殖能力。雌、雄性LP+/-小鼠交配能高效地繁殖LP-/-小鼠;PCR方法能够精确地鉴定LP-/-小鼠。 展开更多
关键词 (Leptin LP) DB/DB小 基因
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血管紧张素Ⅱ2型受体基因敲除小鼠的构建、繁育和基因型鉴定 被引量:1
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作者 蒋吉 胡姗姗 魏伟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第8期1236-1240,共5页
目的利用CRISPR/Cas9技术构建血管紧张素Ⅱ2型受体(AngiotensinⅡtype 2 receptors,Agtr2)基因敲除(Agtr2^(-/-))小鼠,分析Agtr2^(-/-)小鼠的繁育和基因型。方法与江苏集萃药康公司联合设计执行CRISPR/Cas9技术,获得Agtr2^(-/-)F0代小鼠... 目的利用CRISPR/Cas9技术构建血管紧张素Ⅱ2型受体(AngiotensinⅡtype 2 receptors,Agtr2)基因敲除(Agtr2^(-/-))小鼠,分析Agtr2^(-/-)小鼠的繁育和基因型。方法与江苏集萃药康公司联合设计执行CRISPR/Cas9技术,获得Agtr2^(-/-)F0代小鼠,通过聚合酶链式反应(PCR)对鼠尾基因型进行鉴定。F1代Agtr2^(-/-)小鼠由F0代Agtr2^(-/-)小鼠性成熟后与同窝野生型小鼠交配而得。PCR鉴定结果的可靠性则通过Western blot从蛋白水平上加以验证。结果利用CRISPR/Cas9技术成功构建了Agtr2^(-/-)小鼠并对所获小鼠进行繁育和基因型鉴定,得到了Agtr2+/+、Agtr2+/-、Agtr2^(-/-)3种基因型稳定的Agtr2基因小鼠。Western blot检测结果证实Agtr2^(-/-)小鼠心脏、脾脏、胸腺、肝脏及肾脏组织中几乎不表达Agtr2蛋白。结论成功构建了Agtr2^(-/-)小鼠模型,并通过可靠的鉴定方法和合适的繁育手段得到纯合Agtr2^(-/-)小鼠。 展开更多
关键词 血管紧张Ⅱ2型受体 CRISPR/Cas9 基因敲除 聚合酶链式反应 琼脂糖凝胶电泳 基因型鉴定
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激动β_3肾上腺素受体对载脂蛋白E基因敲除小鼠胰腺血管紧张素受体表达的影响
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作者 宋俊迎 李艳芳 +1 位作者 蒋志丽 郭彦青 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2014年第10期1069-1072,共4页
目的探讨激动β3肾上腺素受体(β3-AR)对载脂蛋白E基因敲除(apoE-/-)小鼠血糖、胰岛素和胰腺血管紧张素Ⅱ受体(ATR)表达水平的影响。方法选用10周龄C57BL/6J小鼠10只为对照组(A组),另选10周龄apoE-/-小鼠50只,高脂饮食至36周龄时随机分... 目的探讨激动β3肾上腺素受体(β3-AR)对载脂蛋白E基因敲除(apoE-/-)小鼠血糖、胰岛素和胰腺血管紧张素Ⅱ受体(ATR)表达水平的影响。方法选用10周龄C57BL/6J小鼠10只为对照组(A组),另选10周龄apoE-/-小鼠50只,高脂饮食至36周龄时随机分为高脂模型组(B组)、阿托伐他汀阳性药物对照组(C组)、β3-AR激动剂小剂量组(D组)、β3-AR激动剂大剂量组(E组)和β3-AR拮抗剂组(F组),干预12周。48周时检测小鼠血糖和胰岛素水平;采用实时定量PCR和Western blot检测各组小鼠AT1R和AT2R表达水平。结果与A组比较,B组血糖、胰岛素明显升高,AT1R明显上调,AT2R明显下调(P<0.01);与B组比较,D组、E组血糖、胰岛素明显降低,AT1R明显下调,AT2R明显上调(P<0.01)。结论长期应用β3-AR激动剂通过下调apoE-/-老年高脂小鼠胰腺AT1R表达和上调AT2R表达,β3-AR与AT1R和AT2R存在交互作用,且与改善糖代谢紊乱有关。 展开更多
关键词 载脂蛋白E类 基因敲除 血糖 胰岛 受体 血管紧张 肾上腺能Β激动剂
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瘦素受体敲除引起大鼠脑组织小胶质细胞活化 被引量:2
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作者 丁登峰 高翔 +4 位作者 张旭 刘旭 孙彩显 张丽 张连峰 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第5期7-14,共8页
目的本文利用瘦素受体(LEPR)敲除大鼠,分析瘦素受体基因敲除后大鼠脑中小胶质细胞形态与功能的改变,探究瘦素受体在小胶质细胞中的功能作用。方法采用RT-PCR,蛋白印迹法,免疫组化法和免疫荧光法,观察大鼠瘦素受体敲除后体内外小胶质细... 目的本文利用瘦素受体(LEPR)敲除大鼠,分析瘦素受体基因敲除后大鼠脑中小胶质细胞形态与功能的改变,探究瘦素受体在小胶质细胞中的功能作用。方法采用RT-PCR,蛋白印迹法,免疫组化法和免疫荧光法,观察大鼠瘦素受体敲除后体内外小胶质细胞活化状态。结果瘦素受体在小胶质细胞表达,基因敲除可以完全剔除小胶质细胞中LEPR蛋白;LEPR敲除增强大鼠LPS对刺激的炎症反应,存活率降低了75%;LEPR敲除大鼠脑中的活化的小胶质细胞比例明显增加;LEPR敲除的原代小胶质细胞不仅分泌更多炎性因子也增强了吞噬能力;Western blot发现PI3K/AKT在瘦素受体敲除大鼠脑组织蛋白中磷酸化明显增强。结论瘦素受体敲除后,大鼠小胶质细胞向促炎促吞噬的方向发展,揭示了LEPR/Leptin可能通过小胶质细胞调节神经炎症。 展开更多
关键词 受体 小胶质细胞 炎性因子 吞噬 神经炎症 基因敲除 大鼠
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骨保护素(Opg)基因敲除小鼠发生高转换型骨质疏松和动脉钙化(英文) 被引量:26
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作者 许勇 杨桦 +7 位作者 乔建瓯 李西华 严兰珍 王龙 徐国江 费俭 傅继粱 王铸钢 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第3期260-266,共7页
骨质疏松以及动脉钙化均是危害极大的临床常见病变,骨保护素(OPG)可能是联系两者的分子之一.构建替换型载体pXpPNT-OPG,利用同源重组,将编码前3个蛋白质结构域的小鼠Opg基因组第二外显子序列剔除掉.通过胚胎干细胞(ES)基因打靶获得了正... 骨质疏松以及动脉钙化均是危害极大的临床常见病变,骨保护素(OPG)可能是联系两者的分子之一.构建替换型载体pXpPNT-OPG,利用同源重组,将编码前3个蛋白质结构域的小鼠Opg基因组第二外显子序列剔除掉.通过胚胎干细胞(ES)基因打靶获得了正确重组的ES细胞克隆,ES细胞显微注射后获得嵌合体小鼠,交配传代获得杂合子和纯合子小鼠.RT-PCR和蛋白质印迹实验结果显示,纯合子小鼠没有Opg基因的表达.纯合子小鼠骨量丢失明显,骨生物力学指标明显下降,发生严重的骨质疏松,此外,还有50%以上的纯合子小鼠在早期出现动脉中层钙化.小鼠破骨功能亢进,与此同时,成熟成骨细胞数量增加,矿化功能强于野生型.Opg基因缺失小鼠骨中钙和磷大量流失,而血清中水平没有变化,这提示钙磷代谢异常不是OPG缺失导致动脉钙化的原因.对建立的Opg基因敲除小鼠模型进一步深入的研究,将有助于说明动脉钙化和骨质疏松症相互联系的分子机制,为防治骨质疏松症和动脉钙化的并发提供理论基础支持. 展开更多
关键词 骨保护(Opg)基因敲除 骨质疏松 动脉钙化 骨转换 钙磷代谢
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2型糖尿病发病不同阶段的运动干预对大鼠骨代谢及骨髓瘦素和瘦素受体蛋白表达的影响 被引量:7
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作者 高海宁 王艳杰 +3 位作者 赵丹玉 崔勇 柳春 常波 《沈阳体育学院学报》 CSSCI 北大核心 2015年第1期73-77,共5页
目的:探讨在2型糖尿病的发生、发展的不同阶段施加运动干预,对大鼠骨代谢指标及骨髓瘦素和瘦素受体蛋白表达的影响,为运动预防和治疗2型糖尿病骨代谢异常提供理论依据。方法:刚断乳雄性SD大鼠随机分为5组,正常对照组(NCG),糖尿病对照组(... 目的:探讨在2型糖尿病的发生、发展的不同阶段施加运动干预,对大鼠骨代谢指标及骨髓瘦素和瘦素受体蛋白表达的影响,为运动预防和治疗2型糖尿病骨代谢异常提供理论依据。方法:刚断乳雄性SD大鼠随机分为5组,正常对照组(NCG),糖尿病对照组(DCG),治疗运动组(ZLG),预防运动组(YFG),防治运动组(FZG),每组各11只大鼠。除NCG组使用普通饲料喂养外,其余各组全程使用高脂高糖饲料喂养。YFG组和FZG组在2型糖尿病造模前进行为期6周的游泳训练;造模后对ZLG组、FZG组进行为期6周的游泳训练。各组于运动结束后24 h内,禁食12 h后取样,检测糖、骨代谢相关指标,同时检测各组骨髓瘦素和瘦素受体蛋白表达。结果:1)体重变化方面,ZLG组、YFG组和FZG组与DCG组比,体重均有下降的趋势,其中ZLG组和FZG组有统计学意义(P<0.05)。2)糖代谢方面,与DCG组相比,ZLG组胰岛素显著性下降(P<0.05),FZG组血糖、糖化血清蛋白和胰岛素值均有显著性下降(P<0.01,P<0.05,P<0.01)。3)骨代谢方面,与DCG组相比,FZG组抗酒石酸酸性磷酸酶值显著下降(P<0.01);FZG组骨钙素值显著升高(P<0.01)。4)骨髓瘦素、瘦素受体蛋白表达方面,与DCG组相比,ZLG组、YFG组及FZG组骨髓瘦素含量有下降趋势,其中只有FZG组变化有统计学意义(P<0.01);ZLG组、YFG组及FZG组骨髓瘦素受体含量有升高趋势,其中只有FZG组变化有统计学意义(P<0.01)。结论:在糖尿病发病不同阶段施加运动干预,可以不同程度改善2型糖尿病大鼠糖代谢紊乱,促进大鼠骨代谢调整,缓解瘦素抵抗。在糖尿病发病全程施加运动干预效果最佳。 展开更多
关键词 糖尿病 大鼠 运动 骨代谢 受体
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瘦素受体基因多态性与中国人群高血压相关性的meta分析 被引量:8
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作者 金楠 李革 +3 位作者 李会 张帆 陈玲 冷冰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期265-269,共5页
目的:评价中国人群瘦素受体(LEPR)基因多态性与高血压的相关性。方法以“Hypertension”“、Blood Pressure, high”、“Leptin Receptor”“、OB Receptor”“、LEPR Protein”“、CD295 Antigens”“、LEPR”“、高血压”“、瘦素... 目的:评价中国人群瘦素受体(LEPR)基因多态性与高血压的相关性。方法以“Hypertension”“、Blood Pressure, high”、“Leptin Receptor”“、OB Receptor”“、LEPR Protein”“、CD295 Antigens”“、LEPR”“、高血压”“、瘦素受体”“、OB受体”“、CD295抗原”为检索词,全面检索中国人高血压与LEPR基因多态性相关性的文献,用RevMan 5.0和Stata 11.0进行Meta分析。结果共纳入13篇病例对照研究,包含3210例病例和1881例对照,meta分析显示,LEPR基因Gln223Arg位点多态性在等位基因和显性遗传模型下与高血压相关(等位基因模型:OR=1.78,95%CI=1.48~2.15,P&lt;0.0001;显性遗传模型:OR=2.18,95%CI=1.75~2.72,P&lt;0.00001),Lys109Arg位点多态性与高血压无统计学相关性(等位基因模型:OR=1.13,95%CI=0.84~1.51,P=0.42;隐性遗传模型OR=0.88,95%CI=0.33~2.32,P=0.79;显性遗传模型OR=1.20,95%CI=0.85~1.71,P=0.29;加性遗传模型OR=0.90,95%CI=0.34~2.42,P=0.84)。结论中国人LEPR基因Lys109Arg位点多态性与高血压无显著相关性,在等位基因和显性遗传模型下,Gln223Arg位点多态性与高血压相关,A等位基因是中国人高血压发生的危险基因。 展开更多
关键词 高血压 受体 基因多态性 META分析
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南蛇藤素对ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样硬化斑块内CD40配体表达、巨噬细胞和平滑肌细胞数量的影响 被引量:15
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作者 程军 李金平 +1 位作者 田卓 胡厚源 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期601-603,共3页
目的:探讨南蛇藤素对高脂饲养ApoE基因敲除小鼠(ApoE-/-)主动脉粥样硬化斑块内CD40配体表达、巨噬细胞和平滑肌细胞数量的影响。方法:8周龄雄性ApoE-/-小鼠12只,随机分为南蛇藤素组或二甲基亚砜(DMSO)溶剂对照组,每组各6只。均给以高脂... 目的:探讨南蛇藤素对高脂饲养ApoE基因敲除小鼠(ApoE-/-)主动脉粥样硬化斑块内CD40配体表达、巨噬细胞和平滑肌细胞数量的影响。方法:8周龄雄性ApoE-/-小鼠12只,随机分为南蛇藤素组或二甲基亚砜(DMSO)溶剂对照组,每组各6只。均给以高脂饲养8周,在高脂饲养的后4周,分别给予南蛇藤素2mg·kg-1.d-1或相当剂量的DMSO腹腔注射(ip)4周。麻醉处死小鼠后,取小鼠主动脉,以石蜡包埋,行主动脉根部连续切片.。免疫组化法检测主动脉粥样硬化斑块内CD40配体、CD68和平滑肌α-actin表达水平,以Image Pro Plus 6.0软件进行图像分析。结果:与对照组相比,南蛇藤素组主动脉粥样硬化斑块内CD40配体表达显著减少(P<0.05);巨噬细胞的阳性率显著降低(P<0.05);而两组间动脉粥样硬化斑块内平滑肌细胞的阳性率没有显著差异(P>0.05)。结论:南蛇藤素可能通过减少ApoE-/-小鼠粥样斑块内CD40配体的表达和巨噬细胞的聚集,抑制动脉粥样硬化斑块中炎症反应,而发挥稳定动脉粥样硬化斑块的作用。 展开更多
关键词 动脉硬化 南蛇藤 APOE基因敲除 CD40配体 巨噬细胞 平滑肌细胞
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大豆异黄酮对大鼠肠道上皮内淋巴细胞、杯状细胞及瘦素长型受体的影响 被引量:9
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作者 唐秀莹 陈正礼 +1 位作者 罗启慧 张小龙 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期343-350,共8页
大豆异黄酮具有广泛的生理作用,其对免疫系统的影响近年来成为一个焦点。为了研究大豆异黄酮对肠黏膜屏障结构的重要组成部分(上皮内淋巴细胞、杯状细胞)及免疫调节因子瘦素受体(长型)的影响,本实验采用高脂饲料喂饲大鼠,建立肥胖模型;... 大豆异黄酮具有广泛的生理作用,其对免疫系统的影响近年来成为一个焦点。为了研究大豆异黄酮对肠黏膜屏障结构的重要组成部分(上皮内淋巴细胞、杯状细胞)及免疫调节因子瘦素受体(长型)的影响,本实验采用高脂饲料喂饲大鼠,建立肥胖模型;然后将筛选出的肥胖大鼠分别灌胃剂量为对照(I:0mg/kg)、低(Ⅱ:50mg/kg)、中(Ⅲ:150mg/kg)、高剂量(Ⅳ:450mg/kg)的大豆异黄酮,并设置基础对照组(Ⅴ:溶媒为0.5%羧甲基纤维素钠),连续4周用HE、PAS染色观察小肠上皮内淋巴细胞、杯状细胞数量和分布变化;用免疫组织化学SABC法测定瘦素受体(长型)水平。结果表明:大鼠上皮内淋巴细胞以小型淋巴细胞为主,主要分布于上皮的基底膜附近;大鼠杯状细胞分布在肠黏膜上皮层;瘦素受体(长型)阳性细胞分布于黏膜层。应用大豆异黄酮高剂量组较对照组大鼠的肠黏膜上皮内淋巴细胞数量和杯状细胞的数量明显增加,且有向肠内层移动趋势,同时肠黏膜瘦素受体(长型)水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。表明大豆异黄酮在一定程度上可促进大鼠小肠黏膜屏障结构趋于完整并提高其免疫功能。 展开更多
关键词 大豆异黄酮 大鼠 上皮内淋巴细胞 杯状细胞 受体(长型)
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上海地区汉人瘦素受体基因G1n223Arg变异的研究 被引量:10
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作者 张蓉 郑以漫 +3 位作者 项坤三 贾伟平 陆俊茜 唐峻岭 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1999年第5期435-437,共3页
目的探讨瘦素受体基因Gln223Arg变异与肥胖的关系。方法359例无亲缘关系的上海地区汉人及66例白种人运用PCR-RFLP方法(MspI限制性内切酶)检测瘦素受体基因Gin223Arg变异的基因型。结果中国人中GG、GA及AA基因型频率分别为0.789,0.200... 目的探讨瘦素受体基因Gln223Arg变异与肥胖的关系。方法359例无亲缘关系的上海地区汉人及66例白种人运用PCR-RFLP方法(MspI限制性内切酶)检测瘦素受体基因Gin223Arg变异的基因型。结果中国人中GG、GA及AA基因型频率分别为0.789,0.200及0.011;G及A等位基因频率分别为0.889及0.111,与本研究组中白种人的基因型及等位基因频率分布有显著差异(P=2.98×10-16,3.46×10-18)。在中国人正常体重组与超重组间该基因变异的基因型及等位基因频率分布无显著差异(P=0.369,0.344)。结论瘦素受体基因Gln223Arg变异,在中国人肥胖的发病中可能无重要作用。 展开更多
关键词 受体 肥胖 基因变异
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