针对恶性胶质瘤是颅内最常见的恶性肿瘤,患者的平均生存时间较短,传统治疗方法难以实现根治,而新兴的溶瘤病毒疗法存在扩散能力有限,治疗效果不理想等问题,通过基因工程技术对人5型腺病毒(Ad5)衣壳蛋白进行修饰,构建一种纤维蛋白头节区(...针对恶性胶质瘤是颅内最常见的恶性肿瘤,患者的平均生存时间较短,传统治疗方法难以实现根治,而新兴的溶瘤病毒疗法存在扩散能力有限,治疗效果不理想等问题,通过基因工程技术对人5型腺病毒(Ad5)衣壳蛋白进行修饰,构建一种纤维蛋白头节区(knob)嵌合替换型溶瘤腺病毒,以提升其对胶质瘤细胞的感染和靶向能力.利用来自B亚群Ad37的knob替换Ad5的knob,证实其可利用唾液酸为受体,从而增强对胶质瘤等CAR(coxsackievirus and adenovirus receptor)低表达肿瘤细胞的感染和杀伤能力,并在体外模型中提升对血脑屏障的穿透效率,为恶性胶质瘤的治疗提供新的解决方案.展开更多
旨在研究犬腺病毒-2型(canine adenovirus type 2,CAV-2)作为溶瘤病毒的潜力并进一步探索精子黏附因子(SPAM1)协同CAV-2重塑肿瘤微环境在肿瘤免疫治疗中的应用价值。本研究以P15A-CAV-2反向遗传操作平台为基础,使用RED/ET同源重组系统...旨在研究犬腺病毒-2型(canine adenovirus type 2,CAV-2)作为溶瘤病毒的潜力并进一步探索精子黏附因子(SPAM1)协同CAV-2重塑肿瘤微环境在肿瘤免疫治疗中的应用价值。本研究以P15A-CAV-2反向遗传操作平台为基础,使用RED/ET同源重组系统构建携带SPAM1外源基因的中间载体,使用中间载体将CAV-2骨架载体E3区域缺失并替换SPAM1外源基因表达盒。再利用合成引物敲除kmccdB反向筛选表达盒构建P15A-CAV-2-mCMV-SPAM1-SV40 polyA感染性克隆质粒并在MDCK-E1A细胞系中拯救重组溶瘤病毒,对重组病毒体外溶瘤效应进行验证。根据测序与酶切验证结果证明,本研究成功构建并拯救出稳定表达外源基因SPAM1的重组溶瘤病毒1株;IFA试验证明,重组毒株能够高水平稳定表达外源基因且外源蛋白具有可弥散分布于细胞间的特点。缺失E3区域表达外源基因SPAM1的重组溶瘤病毒通过光镜观察和CCK8检测发现具有对犬癌细胞系A72强烈的杀伤效应。综上,本研究成功构建1株具有良好溶瘤效应的重组CAV-2,为后续应用于宠物肿瘤治疗奠定了基础。展开更多
2024年2月9日,浙江大学药学院/良渚实验室平渊教授团队在《自然·生物技术》(Nature Biotechnology)在线刊登了题为“An oncolytic virus-T cell chimera for cancer immunotherapy”(DOI:10.1038/s41587-023-02118-7)的研究论文,...2024年2月9日,浙江大学药学院/良渚实验室平渊教授团队在《自然·生物技术》(Nature Biotechnology)在线刊登了题为“An oncolytic virus-T cell chimera for cancer immunotherapy”(DOI:10.1038/s41587-023-02118-7)的研究论文,报道了一种名为ONCOTECH(溶瘤病毒-T细胞嵌合体)的递送技术,用以同时增强溶瘤病毒的靶向输送和改善肿瘤微环境。研究人员首先构建了一种能够编码CRISPR-Cas9基因编辑器的溶瘤腺病毒,并使用含有特定抗原表达的生物膜对该溶瘤腺病毒进行包被,最后通过T细胞受体与生物膜上的抗原结合,将膜包被的基因编辑溶瘤腺病毒(命名为eOA)装载至T淋巴细胞表面。该研究发现,T淋巴细胞能够增强eOA的实体瘤靶向输送,并通过携带的基因编辑器能够靶向破坏肿瘤内的免疫抑制细胞中的PD-L1基因,从而逆转肿瘤微环境的免疫抑制作用,改善肿瘤微环境,同时增强溶瘤病毒的肿瘤溶解作用和过继T细胞对肿瘤细胞的杀伤。研究结果表明,ONCOTECH能够有效地抑制多种类型肿瘤生长,并能够诱导长期抗肿瘤免疫记忆,防止肿瘤复发。展开更多
文摘针对恶性胶质瘤是颅内最常见的恶性肿瘤,患者的平均生存时间较短,传统治疗方法难以实现根治,而新兴的溶瘤病毒疗法存在扩散能力有限,治疗效果不理想等问题,通过基因工程技术对人5型腺病毒(Ad5)衣壳蛋白进行修饰,构建一种纤维蛋白头节区(knob)嵌合替换型溶瘤腺病毒,以提升其对胶质瘤细胞的感染和靶向能力.利用来自B亚群Ad37的knob替换Ad5的knob,证实其可利用唾液酸为受体,从而增强对胶质瘤等CAR(coxsackievirus and adenovirus receptor)低表达肿瘤细胞的感染和杀伤能力,并在体外模型中提升对血脑屏障的穿透效率,为恶性胶质瘤的治疗提供新的解决方案.
文摘旨在研究犬腺病毒-2型(canine adenovirus type 2,CAV-2)作为溶瘤病毒的潜力并进一步探索精子黏附因子(SPAM1)协同CAV-2重塑肿瘤微环境在肿瘤免疫治疗中的应用价值。本研究以P15A-CAV-2反向遗传操作平台为基础,使用RED/ET同源重组系统构建携带SPAM1外源基因的中间载体,使用中间载体将CAV-2骨架载体E3区域缺失并替换SPAM1外源基因表达盒。再利用合成引物敲除kmccdB反向筛选表达盒构建P15A-CAV-2-mCMV-SPAM1-SV40 polyA感染性克隆质粒并在MDCK-E1A细胞系中拯救重组溶瘤病毒,对重组病毒体外溶瘤效应进行验证。根据测序与酶切验证结果证明,本研究成功构建并拯救出稳定表达外源基因SPAM1的重组溶瘤病毒1株;IFA试验证明,重组毒株能够高水平稳定表达外源基因且外源蛋白具有可弥散分布于细胞间的特点。缺失E3区域表达外源基因SPAM1的重组溶瘤病毒通过光镜观察和CCK8检测发现具有对犬癌细胞系A72强烈的杀伤效应。综上,本研究成功构建1株具有良好溶瘤效应的重组CAV-2,为后续应用于宠物肿瘤治疗奠定了基础。
文摘2024年2月9日,浙江大学药学院/良渚实验室平渊教授团队在《自然·生物技术》(Nature Biotechnology)在线刊登了题为“An oncolytic virus-T cell chimera for cancer immunotherapy”(DOI:10.1038/s41587-023-02118-7)的研究论文,报道了一种名为ONCOTECH(溶瘤病毒-T细胞嵌合体)的递送技术,用以同时增强溶瘤病毒的靶向输送和改善肿瘤微环境。研究人员首先构建了一种能够编码CRISPR-Cas9基因编辑器的溶瘤腺病毒,并使用含有特定抗原表达的生物膜对该溶瘤腺病毒进行包被,最后通过T细胞受体与生物膜上的抗原结合,将膜包被的基因编辑溶瘤腺病毒(命名为eOA)装载至T淋巴细胞表面。该研究发现,T淋巴细胞能够增强eOA的实体瘤靶向输送,并通过携带的基因编辑器能够靶向破坏肿瘤内的免疫抑制细胞中的PD-L1基因,从而逆转肿瘤微环境的免疫抑制作用,改善肿瘤微环境,同时增强溶瘤病毒的肿瘤溶解作用和过继T细胞对肿瘤细胞的杀伤。研究结果表明,ONCOTECH能够有效地抑制多种类型肿瘤生长,并能够诱导长期抗肿瘤免疫记忆,防止肿瘤复发。
