基于RPA-CRISPR/Cas12a的番茄花叶病毒可视化检测方法的建立 被引量：1

1

作者 董铮 赵振兴 +3 位作者 范奇璇 王思元 周涛 张永江 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期235-241,共7页

番茄花叶病毒(tomato mosaic virus,ToMV)属于植物杆状病毒科Virgaviridae烟草花叶病毒属Tobamovirus成员,主要危害番茄和辣椒,多数茄科植物易感染,严重影响果实的品质和产量。本研究根据ToMV编码的外壳蛋白的基因保守序列,设计重组酶... 番茄花叶病毒(tomato mosaic virus,ToMV)属于植物杆状病毒科Virgaviridae烟草花叶病毒属Tobamovirus成员,主要危害番茄和辣椒,多数茄科植物易感染,严重影响果实的品质和产量。本研究根据ToMV编码的外壳蛋白的基因保守序列,设计重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA)特异性引物和簇状规则间隔短链重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)及相关蛋白12a(CRISPR-associated 12a,Cas12a)的crRNA并挑选报告基因。通过优化反应体系建立了ToMV的快速可视化检测方法,当荧光报告基因FQ终浓度为400 nmol/L、Cas12a/crRNA比例为1∶5、终浓度为200 nmol·L^(-1)/1000 nmol·L^(-1)时检测信号最强,只需RPA和CRISPR/Cas12a分别反应15 min,即可在便携式蓝光照射设备下直接观察到阳性信号。该方法可特异性检测ToMV,对携带ToMV样品的RNA检测灵敏度可以达到172 ag/μL,是普通RT-PCR检测灵敏度的10000倍,可用于ToMV快速灵敏的可视化检测。 展开更多

关键词 番茄花叶病毒 RPA CRISPR/Cas12a 可视化检测

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番茄花叶病毒种传机制研究及干热处理效果评价

2

作者 邱发慧 宋丽敏 +4 位作者 刘蕾庆 林国祚 李彦辉 王忠全 夏世龙 《中国果菜》 2024年第5期68-72,共5页

番茄花叶病毒(tomato mosaic virus,ToMV)是世界性分布的病毒,寄主范围广泛,番茄是其主要寄主,严重影响番茄生产。本研究以带毒的番茄种子为材料,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测病毒在番茄种子内的定位,采用干热方法处理种子后检... 番茄花叶病毒(tomato mosaic virus,ToMV)是世界性分布的病毒,寄主范围广泛,番茄是其主要寄主,严重影响番茄生产。本研究以带毒的番茄种子为材料,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测病毒在番茄种子内的定位,采用干热方法处理种子后检测番茄种子的萌发率及ToMV的钝化率,旨在筛选出一个既可以有效钝化病毒,又不影响番茄种子萌发的处理条件,从源头上控制该病害的发生和流行。结果发现,ToMV定位于番茄种子的种皮,胚乳及胚中没有检测到该病毒的存在。对番茄种子进行干热处理,与未处理的番茄种子相比,75℃处理48 h和70℃处理96 h均会显著影响番茄种子的萌发,80℃处理24 h和65℃处理120 h对番茄种子的发芽率均没有显著影响。4个温度的恒温处理均可以有效降低种子携带ToMV的数量,但通过荧光定量PCR仍均能检测到ToMV。80℃处理24 h对ToMV的清除效果最好,且不影响番茄种子的发芽率。 展开更多

关键词 番茄花叶病毒 种传 干热处理 发芽率

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新疆加工番茄上番茄花叶病毒的分子鉴定 被引量：15

3

作者 姜玉霞 向本春 +2 位作者 安仙丽 黄家风 汪铖华 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2008年第3期484-489,共6页

从表现花叶、畸形的加工番茄病株上获得分离物xj124，用1对ToMVCP基因引物进行RT-PCR，扩增得到了689bp的特异性核苷酸片段。将PCR产物插入到克隆载体pMD18-T中再转化到大肠杆菌TOP10。经限制酶酶切鉴定，重组克隆中含有与PCR产物大小... 从表现花叶、畸形的加工番茄病株上获得分离物xj124，用1对ToMVCP基因引物进行RT-PCR，扩增得到了689bp的特异性核苷酸片段。将PCR产物插入到克隆载体pMD18-T中再转化到大肠杆菌TOP10。经限制酶酶切鉴定，重组克隆中含有与PCR产物大小相同的689bp的插入片段。cDNA全序列分析表明，所扩增出的689bpToMVCP基因，含1个480bp开放阅读框架（ORV），编码160氨基酸组成的蛋白，所克隆的基因包含完整的ToMVCP基因。所测得的xj124分离物与国内外已报道的部分ToMV CP基因序列比较。核苷酸同源性高达84．4％-99．8％，氨基酸同源性高达98．7％-100％。因此将该分离物鉴定为番茄病毒病花叶病毒。 展开更多

关键词 番茄花叶病毒 分子鉴定 克隆外壳蛋白基因 序列分析

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进境番茄种子中番茄花叶病毒的检测与鉴定 被引量：6

4

作者 廖富荣 郭木金 +5 位作者 林石明 陈红运 陈青 黄蓬英 吴媛 谢惠明 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期124-128,134,共6页

利用双抗夹心-酶联免疫吸附试验（DAF〉EI。ISA）和反转录-聚合酶链式反应（Rrr_PCR）方法对来自韩国的番茄种子进行种传病毒检测。结果表明，在该批番茄种子中检测到番茄花叶病毒（ToMV）和烟草花叶病毒（TMV）。PCR产物测序结果表明，... 利用双抗夹心-酶联免疫吸附试验（DAF〉EI。ISA）和反转录-聚合酶链式反应（Rrr_PCR）方法对来自韩国的番茄种子进行种传病毒检测。结果表明，在该批番茄种子中检测到番茄花叶病毒（ToMV）和烟草花叶病毒（TMV）。PCR产物测序结果表明，ToMV特异引物（ToA／ToB）与TMV特异引物（TA／TB）扩增的片段均为ToMV的外壳蛋白（CP）基因及3’非编码区（3’-UTR），该片段与其他ToMV分离物的核苷酸序列相似性为98．2％～99．9％。本研究利用重新设计合成TMV和ToMV特异引物对该批种子进行RT-PCR检测，仅ToMV特异性引物（ToMfl／ToMrl）扩增到670bp的预期片段，TMV特异引物（TMfl／TMrl）则未出现特异性扩增，表明重新设计的引物可准确区分ToMV和TMV。以上结果证实该批番茄种子仅携带ToMV。 展开更多

关键词 番茄种子 双抗夹心-酶联免疫吸附试验 反转录-聚合酶链式反应 番茄花叶病毒 烟草花叶病毒 种子传播

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李宝聚博士诊病手记(九十九) 番茄花叶病毒对番茄茎部和果实危害严重 被引量：6

5

作者 曹金强 柴阿丽 +2 位作者 谢学文 石延霞 李宝聚 《中国蔬菜》 北大核心 2016年第10期84-86,共3页

番茄在我国乃至世界上都是种植范围最广的蔬菜之一,具有良好的营养价值和经济效益。然而番茄上的病害也有很多,对番茄的生产造成很大的危害。番茄花叶病毒（Tomato mosaic virus,To MV）寄主范围较广,不仅能侵染茄科、十字花科等蔬菜作... 番茄在我国乃至世界上都是种植范围最广的蔬菜之一,具有良好的营养价值和经济效益。然而番茄上的病害也有很多,对番茄的生产造成很大的危害。番茄花叶病毒（Tomato mosaic virus,To MV）寄主范围较广,不仅能侵染茄科、十字花科等蔬菜作物,还能侵染花卉和苗木等,对寄主尤其是番茄的危害十分严重。近年来,随着地域交流的加强、番茄品种的多样化以及天气的变化,番茄花叶病毒病的症状也呈现多样化,且危害不减。 展开更多

关键词 番茄花叶病毒 蔬菜作物 寄主范围 营养价值 九十九 MOSAIC 番茄病毒病 番茄生产 田间栽培管理 寄主植物

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抗番茄花叶病毒RNAi载体的构建及烟草遗传转化 被引量：4

6

作者 赵峰玉 郑银英 +3 位作者 张瑜 乔亚红 崔百明 向本春 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2011年第2期163-168,共6页

为了获得抗番茄花叶病毒的转基因烟草,试验采用RT-PCR技术扩增新疆加工番茄花叶病毒基因组,然后与已知株系序列比对获得相应的保守序列。根据保守区选择干扰序列并设计引物进行PCR扩增,构建了pBi35STo5,pBi35SToBK,pBi35ToMV3 3个RNAi... 为了获得抗番茄花叶病毒的转基因烟草,试验采用RT-PCR技术扩增新疆加工番茄花叶病毒基因组,然后与已知株系序列比对获得相应的保守序列。根据保守区选择干扰序列并设计引物进行PCR扩增,构建了pBi35STo5,pBi35SToBK,pBi35ToMV3 3个RNAi表达载体;利用农杆菌介导法分别将表达载体侵染普通烟,转化植株经分子鉴定,结果显示已成功获得了转基因阳性植株,为进一步的攻毒试验奠定了基础。 展开更多

关键词 加工番茄 RNAI 番茄花叶病毒

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基于小RNA技术的天津地区番茄花叶病毒分子检测与基因组部分序列分析 被引量：2

7

作者 金凤媚 薛俊 +1 位作者 孙海波 郝志愚 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2021年第5期176-183,共8页

为了明确引起天津地区番茄果实褐化的病因,采用小RNA深度测序技术和RT-PCR技术对采自天津的番茄病样进行鉴定分析。结果表明,引起天津地区番茄果实变褐的病原为番茄花叶病毒。进一步对该病毒进行了全基因组测序,并对该病毒的外壳蛋白(CP... 为了明确引起天津地区番茄果实褐化的病因,采用小RNA深度测序技术和RT-PCR技术对采自天津的番茄病样进行鉴定分析。结果表明,引起天津地区番茄果实变褐的病原为番茄花叶病毒。进一步对该病毒进行了全基因组测序,并对该病毒的外壳蛋白(CP)、运动蛋白(MP)和126蛋白进行了序列分析。进化树分析结果表明,天津分离物的3个蛋白基因均与美国分离物USA_99-1)的进化关系最近。相似性分析结果表明,CP基因与其他分离物的平均相似性为95.53%。MP基因与其他基因分离物的平均相似性为95.21%。126蛋白基因与其他分离物的平均相似性为92.72%。对这3个基因编码的蛋白进行分析,结果表明,不同分离物之间的平均相似性均在99.0%及以上。初步表明,在天津发生的番茄花叶病毒可能是由于贸易活动由国外传入天津市。 展开更多

关键词 番茄 番茄花叶病毒 小RNA深度测序 分子检测 基因序列分析

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杀病毒制剂对番茄花叶病毒病的防治效果 被引量：5

8

作者 张琦 尹元栓 +1 位作者 张治家 李健英 《山西农业科学》 2006年第3期66-68,共3页

为了了解当前防治番茄花叶病毒病新选用的和适合无公害蔬菜基地使用的主要杀菌剂的实际防效,在太原市无公害蔬菜生产基地进行了田间药效试验。试验按随机排列,在番茄花叶病毒病始发期首次喷药,末次施药后7和14d分别调查发病情况。结果表... 为了了解当前防治番茄花叶病毒病新选用的和适合无公害蔬菜基地使用的主要杀菌剂的实际防效,在太原市无公害蔬菜生产基地进行了田间药效试验。试验按随机排列,在番茄花叶病毒病始发期首次喷药,末次施药后7和14d分别调查发病情况。结果表明,3.85%三氮唑核苷、铜、锌wp,20%病毒A可湿性粉剂,20%盐酸吗啉呱锌可溶性粉剂对番茄病毒病防效较好;其次是20%盐酸吗啉呱铜可溶性粉剂、2%复方宁南霉素水剂,药效持久而且安全性好,末次施药后14d防效均在60%以上,适合在无公害蔬菜生产基地推广使用。 展开更多

关键词 番茄花叶病毒病 杀菌剂 防治效果

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大黄提取物对番茄花叶病毒(ToMV)病防治机理的初步研究 被引量：5

9

作者 郭兴启 朱汉城 +2 位作者 李向东 严敦余 竺晓平 《山东农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 1998年第3期323-329,共7页

本研究表明：大黄提取物对ＴｏＭＶ粒体具有钝化作用，但在电镜下没有观察到在形态、长度方面与对照的差异；大黄提取物使接种心叶烟叶片上枯斑直径比对照减小了２１．９％；接种前喷施大黄提取物的植株过氧化物酶（ＰＯ）活性比对照高... 本研究表明：大黄提取物对ＴｏＭＶ粒体具有钝化作用，但在电镜下没有观察到在形态、长度方面与对照的差异；大黄提取物使接种心叶烟叶片上枯斑直径比对照减小了２１．９％；接种前喷施大黄提取物的植株过氧化物酶（ＰＯ）活性比对照高，接种后，处理株的ＰＯ活性第１２天达到高峰，而对照的最高峰比处理提前６ｄ；接种ＴｏＭＶ前处理的番茄与对照相比，新增１条ＰＯ同工酶酶带，接种后，虽然处理与对照都增加２条高迁移率（Ｒｆ＝０．８２６，０．８６７）同工酶酶带，但处理株出现的晚；经大黄提取物处理的番茄植株与清水处理的植株相比，ＰＲ蛋白总带数相同，但处理的各带强度高于对照。 展开更多

关键词 大黄 番茄花叶病毒 作用机理 防治

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两种半夏蛋白及凝集素抑制褐飞虱与番茄花叶病毒初报 被引量：11

10

作者 梁永恒 刘小川 傅强 《湖南农业科学》 2007年第2期93-95,共3页

从半夏与掌叶半夏块茎中用硫酸铵盐析法分离总蛋白后，用亲和层析法纯化凝集素。所得凝集素单体分子量均为12kD，总蛋白主要含有分子量为12kD左右的成分及24kD、46kD的成分，很可能为凝集素的单体及其二聚体和四聚体。凝集素均具有凝集... 从半夏与掌叶半夏块茎中用硫酸铵盐析法分离总蛋白后，用亲和层析法纯化凝集素。所得凝集素单体分子量均为12kD，总蛋白主要含有分子量为12kD左右的成分及24kD、46kD的成分，很可能为凝集素的单体及其二聚体和四聚体。凝集素均具有凝集兔血红细胞的活性。总蛋白在1mg／ml时对褐飞虱有显著的致死效应，达80％。总蛋白在1mg／ml或凝集素在0．2mg／ml时对一定浓度的番茄花叶病毒的侵染有显著的抑制作用，达50％-76％。总蛋白的抑制作用应为所含的凝集素成分所致。 展开更多

关键词 半夏 掌叶半夏 蛋白 凝集素 褐飞虱 番茄花叶病毒

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番茄花叶病毒中国分离物的生物学特性及其基因结构分析(英文)

11

作者 薛朝阳 周雪平 +1 位作者 青玲 李德葆 《浙江农业大学学报》 CSCD 北大核心 1998年第6期602-602,622,共2页

Ｔｏｍａｔｏｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ（ＴｏＭＶ）ｉｓａｓｐｅｃｉｅｓｏｆＴｏｂａｍｏｖｉｒｕｓ．Ｉｔｗａｓｆｉｒｓｔｒｅｐｏｒｔｅｄｉｎ１９０９ｉｎＡｍｅｒｉｃａ．ＴｏＭＶｐａｒｔｉｃｌｅｓａｒｅｓｔｒａｉｇｈｔｔｕｂ... Ｔｏｍａｔｏｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ（ＴｏＭＶ）ｉｓａｓｐｅｃｉｅｓｏｆＴｏｂａｍｏｖｉｒｕｓ．Ｉｔｗａｓｆｉｒｓｔｒｅｐｏｒｔｅｄｉｎ１９０９ｉｎＡｍｅｒｉｃａ．ＴｏＭＶｐａｒｔｉｃｌｅｓａｒｅｓｔｒａｉｇｈｔｔｕｂｕｌｅｓ，ａｂｏｕｔ１８ｎｍｉｎｄ... 展开更多

关键词 番茄花叶病毒 中国分离物 生物学特性 基因结构

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番茄花叶病毒移动蛋白基因转化烟草及在转基因烟草中的表达 被引量：7

12

作者 黄晓璪 陈青 +1 位作者 薛朝阳 周雪平 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期5-8,共4页

从提纯病毒抽提基因组RNA ,并通过RT PCR扩增番茄花叶病毒 (ToMV)移动蛋白 (MP)基因。经克隆测序后插入植物表达载体PBI12 1的 35S启动子下游 ,通过PCR及酶切筛选分别获取正、反向插入的克隆 ,通过三亲交配导入农杆菌 ,叶盘转化法转化... 从提纯病毒抽提基因组RNA ,并通过RT PCR扩增番茄花叶病毒 (ToMV)移动蛋白 (MP)基因。经克隆测序后插入植物表达载体PBI12 1的 35S启动子下游 ,通过PCR及酶切筛选分别获取正、反向插入的克隆 ,通过三亲交配导入农杆菌 ,叶盘转化法转化普通烟草。卡那霉素筛选获得一系列抗性小苗 ,对其进行PCR检测 ,Southern、Northern点杂交 ,Western blot检测 ,获得能正义、反义表达ToMVMP基因的转基因植株。 展开更多

关键词 番茄花叶病毒 移动蛋白 转基因 烟草 基因表达 寄主植物 互作机制

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试说北京番茄病毒病40年的变迁——以番茄花叶病毒和黄瓜花叶病毒为主的时期

13

作者 李明远 《蔬菜》 2021年第5期81-83,F0004,F0003,共5页

据调查,20世纪80年代在蔬菜病害中以真菌病害最多,占到大约70%,而病毒病在所有蔬菜病害中占比约15%,虽然相对较少,但给蔬菜造成的危害往往不亚于真菌病害,有人将其比作"植物的癌症"。番茄的病毒病就是这类病害的一种。番茄病... 据调查,20世纪80年代在蔬菜病害中以真菌病害最多,占到大约70%,而病毒病在所有蔬菜病害中占比约15%,虽然相对较少,但给蔬菜造成的危害往往不亚于真菌病害,有人将其比作"植物的癌症"。番茄的病毒病就是这类病害的一种。番茄病毒病不仅种类较多,而且造成的损失严重,弄清它的来龙去脉对防治这些病害十分重要。实际上这个问题很大,发生的时间也很长。在这期先说说从20世纪80年代到21世纪初北京发生的番茄病毒病的一些情况。 展开更多

关键词 番茄病毒病 黄瓜花叶病毒 蔬菜病害 番茄花叶病毒 真菌病害 20世纪80年代 来龙去脉

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4%新奥霉素水剂防治番茄花叶病毒病的田间药效 被引量：3

14

作者 李芳功 杨芳 +1 位作者 冯振群 卢清 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第8期86-88,共3页

新奥霉素是一种新型生物杀菌剂,为明确其对番茄花叶病毒病的防治效果和使用剂量,2012年在济源市对该药进行了田间药效试验。结果表明,4%新奥霉素水剂对番茄花叶病毒病有较好的防治效果,第3次施药后7d,900mL/hm2、1 200mL/hm2和1 500mL/h... 新奥霉素是一种新型生物杀菌剂,为明确其对番茄花叶病毒病的防治效果和使用剂量,2012年在济源市对该药进行了田间药效试验。结果表明,4%新奥霉素水剂对番茄花叶病毒病有较好的防治效果,第3次施药后7d,900mL/hm2、1 200mL/hm2和1 500mL/hm2 3个处理防效分别为65.13%、70.96%、74.62%,极显著优于对照药剂20%吗啉胍.乙酸铜水剂处理,且对番茄生长安全,是防治番茄花叶病毒病的理想药剂。 展开更多

关键词 生物杀菌剂 新奥霉素 番茄花叶病毒病 防效

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不同植物提取物对番茄花叶病毒病的防治效果研究 被引量：3

15

作者 庞梓辰 穆淑媛 张灿刚 《中国果菜》 2018年第5期19-21,24,共4页

鱼腥草、马齿苋、商陆是我国传统的中草药,富含多种抗病毒天然活性物质。本试验以鱼腥草、马齿苋、商陆为原材料,进行了活性物质的超声波提取,得到了粗提物和萃取物,并进行了提取物对番茄花叶病毒病防治效果的田间对比试验。结果表明,... 鱼腥草、马齿苋、商陆是我国传统的中草药,富含多种抗病毒天然活性物质。本试验以鱼腥草、马齿苋、商陆为原材料,进行了活性物质的超声波提取,得到了粗提物和萃取物,并进行了提取物对番茄花叶病毒病防治效果的田间对比试验。结果表明,超声波提取液使用浓度50μg/m L对番茄花叶病毒病具有较好的预防效果,平均预防效果为87.01%,高于对照(常用抗病毒化学药剂)20%病毒A(72.50%)的预防效果;超声波提取液对番茄花叶病毒病具有较好的治疗效果,相对防效为74.36%,显著高于相对防效为50.32%的连续回流提取物,相对防效为43.03%的煎煮法提取物及相对防效为50.36%的对照20%病毒A治疗效果。 展开更多

关键词 鱼腥草 马齿苋 商陆 提取物 防治 番茄花叶病毒病

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通过大规模突变体筛选鉴定到番茄花叶病毒易感因子SlOSCA4.1助力抗病毒作物育种

16

《蔬菜》 2023年第8期68-68,共1页

2023年7月13日,国际著名杂志《Plant Biotechnology Journal》在线发表了题为“The tomato calciumpermeable channel 4.1(SlOSCA4.1)is a susceptibility factor for pepino mosaic virus”的研究论文,研究通过筛选了一系列番茄突变体... 2023年7月13日,国际著名杂志《Plant Biotechnology Journal》在线发表了题为“The tomato calciumpermeable channel 4.1(SlOSCA4.1)is a susceptibility factor for pepino mosaic virus”的研究论文,研究通过筛选了一系列番茄突变体鉴定到与Pep MV易感性降低相关的关键突变,并成功定位到一个新的易感因子SlOSCA4.1,这一研究不仅有助于培育抗PepMV的番茄品种,而且有助于更好地理解病毒生物学和病毒—宿主分子相互作用。 展开更多

关键词 番茄花叶病毒 作物育种 突变体筛选 病毒生物学

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宁夏银川地区复合侵染番茄5种病毒的分子鉴定

17

作者 王涵 高艳明 +1 位作者 李建设 郜雅欣 《甘肃农业大学学报》 北大核心 2025年第2期172-178,共7页

【目的】检测与鉴定宁夏地区侵害番茄的病毒病种类。【方法】在宁夏银川地区采集叶子表现为整体变脆、卷曲、畸形、变黄、出现明显叶脉等症状的番茄叶片共121份,用已报道的8对引物进行RT-PCR/PCR扩增,并对产物测序结合分析。【结果】宁... 【目的】检测与鉴定宁夏地区侵害番茄的病毒病种类。【方法】在宁夏银川地区采集叶子表现为整体变脆、卷曲、畸形、变黄、出现明显叶脉等症状的番茄叶片共121份,用已报道的8对引物进行RT-PCR/PCR扩增,并对产物测序结合分析。【结果】宁夏银川地区番茄植株存在多种病毒复合侵染情况,复合侵染样品占总样品数量的94.21%,占阳性样品的95.80%,其中3种病毒复合侵染的样本数量最多,ToCV+ToMV+TSWV复合侵染病毒为当地优势毒源;在宁夏地区首次检出单一样品复合侵染5种番茄病毒,分别为番茄花叶病毒(tomato mosaic virus,ToMV)、南方番茄病毒(southern tomato virus,STV)、番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt virus,TSWV)、番茄斑驳花叶病毒(tomato mottle mosaic virus,ToMMV)和番茄褪绿病毒(tomato chlorosis virus,ToCV),根据以上病毒的部分基因序列构建进化树,分析结果表明他们的分离物序列分别与已报道的核苷酸序列的一致性均在99%以上。故宁夏银川地区番茄受ToMV、STV、TSWV、ToMMV和ToCV 5种病毒复合侵染,其中ToMMV为首次在宁夏银川地区检出。【结论】宁夏地区番茄病毒病复合侵染现象在田间普遍发生且爆发严重,本研究为宁夏地区番茄病毒病的诊断、预警与综合防控提供科学依据。 展开更多

关键词 番茄病毒病 番茄花叶病毒 南方番茄病毒 番茄斑萎病毒 番茄斑驳花叶病毒 番茄褪绿病毒 复合侵染

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番茄抗花叶病毒基因类似序列扩增研究

18

作者 李敏 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第12期6975-6976,7013,共3页

[目的]研究番茄抗花叶病毒基因类似序列扩增。[方法]以选育和生产上广泛使用的20个番茄品种为试材,对其进行了田间和实验室抗花叶病毒病(ToMV)筛选、基因类似序列扩增、RAPD聚类分析及特异引物PCR扩增。[结果]美味樱桃番茄、中杂9号、... [目的]研究番茄抗花叶病毒基因类似序列扩增。[方法]以选育和生产上广泛使用的20个番茄品种为试材,对其进行了田间和实验室抗花叶病毒病(ToMV)筛选、基因类似序列扩增、RAPD聚类分析及特异引物PCR扩增。[结果]美味樱桃番茄、中杂9号、早红宝、W262-4、OH-2-2-11、黄圣果和美国番茄对ToMV具有较强的抗性;根据聚类分析,受试品种可分为3类,从中选出9个抗性和非抗性品种进行抗ToMV基因类似序列分析,其中非抗性和购买无抗性番茄品种未扩增出任何谱带,而抗性品种扩增出约300 bp的谱带,初步认为该谱带为抗ToMV类似序列基因。[结论]为培育抗花叶病毒病的番茄品种提供了理论依据。 展开更多

关键词 番茄 番茄花叶病毒病 类似序列扩增

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番茄斑驳花叶病毒在广东省的首次报道 被引量：3

19

作者 汤亚飞 李正刚 +4 位作者 佘小漫 于琳 蓝国兵 李战彪 何自福 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期219-225,共7页

番茄斑驳花叶病毒(tomato mottle mosaic virus, ToMMV)是2013年发现的烟草花叶病毒属一个新种,目前在多国(地区)有发生。本文采用小RNA深度测序及RT-PCR检测方法在广东省广州市南沙区辣椒疑似病样中检测到ToMMV,命名为番茄斑驳花叶病... 番茄斑驳花叶病毒(tomato mottle mosaic virus, ToMMV)是2013年发现的烟草花叶病毒属一个新种,目前在多国(地区)有发生。本文采用小RNA深度测序及RT-PCR检测方法在广东省广州市南沙区辣椒疑似病样中检测到ToMMV,命名为番茄斑驳花叶病毒广东分离物(ToMMV-GD-2020)。采用RT-PCR分段扩增获得了ToMMV-GD-2020的基因组全序列,该分离物基因组全长6 399 nt,包含4个开放阅读框,分别编码4个蛋白。序列相似性分析表明,ToMMV-GD-2020与已登录GenBank的14个ToMMV分离物基因组序列相似性分别为99.0%~99.7%,其中与中国辽宁分离物ToMMV-LN(GenBank登录号:MN853592)的相似性最高(99.7%),与危害我国番茄、同属烟草花叶病毒属的番茄花叶病毒(tomato mosaic virus, ToMV)、番茄褐色皱果病毒(tomato brown rugose fruit virus, ToBRFV)代表分离物的相似性分别为84.6%和81.0%。系统进化分析表明,ToMMV-GD-2020与该病毒各分离物亲缘关系均较近,与中国辽宁分离物亲缘关系最近。利用ToMMV的PCR特异引物对广东其他6个市采集的67份辣椒疑似病毒病样品进行检测,结果均为阴性,这说明ToMMV目前还是局部危害广东省辣椒。本文是首次报道在广东发现ToMMV,对监测ToMMV在我国的扩散具有重要意义。 展开更多

关键词 番茄斑驳花叶病毒 辣椒 分子鉴定 病毒基因组序列

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辽宁省番茄上番茄斑驳花叶病毒的分子鉴定 被引量：6

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作者 涂丽琴 吴淑华 +6 位作者 高丹娜 吉颖 程兆榜 周益军 朱月林 刘勇 季英华 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第5期1126-1132,共7页

为明确2015年在辽宁省调查番茄病毒病时发现的病毒类型,对田间采集的番茄病样进行了分子检测。结果显示,在用烟草花叶病毒属通用检测引物进行RT-PCR扩增时22份样品中有6份扩增到800 bp左右的目的片段,扩增产物测序后BLAST分析结果表明... 为明确2015年在辽宁省调查番茄病毒病时发现的病毒类型,对田间采集的番茄病样进行了分子检测。结果显示,在用烟草花叶病毒属通用检测引物进行RT-PCR扩增时22份样品中有6份扩增到800 bp左右的目的片段,扩增产物测序后BLAST分析结果表明它与已报道的番茄斑驳花叶病毒(Tomato mottle mosaic virus,ToMMV)(KF477193)同源性最高,为99.2%。为进一步确认,针对ToMMV编码的外壳蛋白(CP)设计了一对特异性引物,对样品进行RT-PCR检测,结果显示6份阳性样品都能扩增到目的条带,对其克隆测序后发现CP基因序列全长480 bp,编码1个相对分子质量约1.77×104的蛋白质,系统进化树表明该病毒与ToMMV的同源性最高,共同聚类于一个分支。这些结果表明在辽宁省番茄病株上检测到的病毒为ToMMV的1个分离物,这是在辽宁省番茄上发现番茄斑驳花叶病毒的首次报道。 展开更多

关键词 番茄斑驳花叶病毒 分子鉴定 番茄

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