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质粒电穿孔转染条件的选择被引量：9: 1; 作者杨薇王迪 +4 位作者陈克清于敏王桂华胡俊波王晶《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期858-860,共3页; 关键词电穿孔转染质粒; 在线阅读下载PDF 职称材料

电穿孔转染悬浮细胞条件的优化被引量：3: 2; 作者蔡磊李艳 +3 位作者窦科峰张巍丁睿赵青川《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期459-461,共3页; 目的以RNA依赖性腺嘌呤脱氨酶(ADAR1)为靶基因优化悬浮培养的小鼠原代淋巴细胞的电穿孔转染条件。方法通过控制电压、温度、细胞状态等转染条件,采用不同条件组合将靶向ADAR1的siRNA导入悬浮培养的小鼠原代淋巴细胞,用倒置显微镜观察、... 展开更多; 关键词电穿孔转染悬浮细胞基因转染优化; 在线阅读下载PDF 职称材料

电穿孔转染制备绵羊诱导多潜能干细胞条件的优化被引量：3: 3; 作者王聪慧赵帅 +6 位作者张译元王立民李炜杰赵兴旺丁新平张银国周平《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期9-15,共7页; 为优化获得绵羊诱导性多潜能干细胞(iPS cell)的诱导条件,通过4-D电转染仪,将含有人Oct4、Sox2及Klf4、c-Myc及lin28基因的3个质粒共转染绵羊成纤维细胞,从EH-100、EN-150、CZ-167、CA-137电转程序筛选出适合绵羊成纤维细胞的电转染程序... 展开更多; 关键词电穿孔转染绵羊成纤维细胞诱导性多潜能性干细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

DNA对电穿孔转染效率的影响被引量：1: 4; 作者卢柏松黄培堂《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1995年第3期256-260,共5页; 以外源红细胞生成素ｃＤＮＡ的表达产物为指标，研究了运载ＤＮＡ和重组表达质粒的构象对电穿孔转染ＣＨＯ细胞的效率的影响．结果２５０ｍｇ／Ｌ的运载ＤＮＡ可使外源基因表达水平提高３倍；线性化质粒ＤＮＡ比超螺旋ＤＮＡ更适合于用... 展开更多; 关键词电穿孔转染运载DNA DNA 构象细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

小鼠大脑皮质神经元电穿孔转染条件的优化被引量：4: 5; 作者詹从清黄静 +3 位作者魏燕燕陈晶李云庆武胜昔《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期253-257,共5页; 目的:以原代培养的小鼠大脑皮质神经元为研究工具,优化电穿孔转染条件。方法:通过设置不同的电压和脉冲时间组合等电转染条件,将表达绿色荧光蛋白(GFP)的shNC质粒导入小鼠大脑皮质神经元,24 h后观察并比较神经元的转染效率,确定最佳电... 展开更多; 关键词大脑皮质神经元电穿孔转染优化小鼠; 在线阅读下载PDF 职称材料

马鹿鹿茸原代前软骨与软骨细胞电穿孔法转染研究被引量：1: 6; 作者金庆梅索婧媛 +4 位作者韩青高仰杨帆吴玄烨郑冬《野生动物学报》北大核心 2025年第1期72-80,共9页; 电穿孔转染(电转染)是一种高效、低毒、操作方便的细胞转染技术,但在鹿茸原代细胞中还没有应用的先例。为探索电转染过程中影响鹿茸原代细胞电转染效率和细胞存活率的关键参数,以293T细胞系为平行实验组,将pCMV-C-EGFP质粒电转入马鹿(Ce... 展开更多; 关键词电穿孔转染鹿茸原代细胞质粒电转染效率细胞存活率; 在线阅读下载PDF 职称材料

3种介导猪NR2F2基因转染PK15细胞方法的比较研究被引量：5: 7; 作者张万锋黑伟 +8 位作者何志强刘敏孟珊高鹏飞蔡春波杨阳郭晓红曹果清李步高《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第5期1352-1359,共8页; 试验旨在研究3种转染方法对猪肾上皮细胞(PK15)的转染效率,为以PK15细胞为模型研究外源基因的功能提供参考。本研究以PK15细胞为研究对象,用脂质体、电穿孔、慢病毒3种转染方法转染后,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,采用实时荧... 展开更多; 关键词 PK15细胞 NR2F2基因脂质体转染电穿孔转染慢病毒转染; 在线阅读下载PDF 职称材料

利用电穿孔法对狂犬病病毒SRV9 Ψ区缺失株病毒的拯救及鉴定被引量：1: 8; 作者毛丽萍魏玉圆 +4 位作者王伟翟少华程瑶文兆海简子健《动物医学进展》北大核心 2017年第11期22-27,共6页; 探讨电穿孔转染法对SRV9Ψ区缺失株重组病毒的拯救及鉴定。利用电穿孔细胞转染法,将纯化的Ψ区缺失株pcDNA-NPMG-L全长质粒和pcDNA-N、pcDNA-P、pcDNA-M、pcDNA-G和pcDNA-L辅助表达质粒共转染至BHK-21细胞中,并进行盲传,借助RT-PCR、间... 展开更多; 关键词狂犬病病毒电穿孔转染法 SRV9Ψ区缺失株拯救; 在线阅读下载PDF 职称材料

C/EBPε增强U937细胞中PI3Kγ基因的表达: 9; 作者蔡蓉戴冰冰 +2 位作者梅文瀚李珂卢健《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第6期562-564,571,共4页; 目的研究过量表达转录因子CCAAT-增强子结合蛋白ε(CCAAT/enhancerbindingproteins,C/EBPε)对磷脂酰肌醇-3激酶γ(phosphoinositide3kinase,PI3Kγ)基因的影响。方法将C/EBPε基因的真核表达载体pcDNA3.1C/EBPε电穿孔转染U937细胞,G41... 展开更多; 关键词 C/EBPε U937细胞 PI3K Γ基因磷脂酰肌醇-3激酶增强子结合蛋白 Western PCDNA3 真核表达载体 RT-PCR 核内转录因子过量表达电穿孔转染细胞克隆稳定转染 blot 转染细胞转录调控水平; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名质粒电穿孔转染条件的选择被引量：9: 1; 作者杨薇王迪陈克清于敏王桂华胡俊波王晶; 机构华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系华中科技大学同济医学院附属同济医院分子医学中心; 出处《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期858-860,共3页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.30872472); 关键词电穿孔转染质粒; 分类号 R331 [医药卫生—人体生理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名电穿孔转染悬浮细胞条件的优化被引量：3: 2; 作者蔡磊李艳窦科峰张巍丁睿赵青川; 机构第四军医大学西京医院肝胆外科第四军医大学西京医院呼吸内科; 出处《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期459-461,共3页; 基金国家自然科学基金资助项目(30271281 30170923); 文摘目的以RNA依赖性腺嘌呤脱氨酶(ADAR1)为靶基因优化悬浮培养的小鼠原代淋巴细胞的电穿孔转染条件。方法通过控制电压、温度、细胞状态等转染条件,采用不同条件组合将靶向ADAR1的siRNA导入悬浮培养的小鼠原代淋巴细胞,用倒置显微镜观察、细胞计数、台盼蓝拒染试验来计算siRNA序列转染率和细胞存活率。结果小鼠原代淋巴细胞在400V,40μs条件下可获得最大转染率,约为30.6%;良好的细胞状态以及低温条件可获得更好的转染效果。结论电穿孔转染法是一种高效的基因转染方法,通过优化其转染条件,可以提高其对悬浮细胞的转染率。; 关键词电穿孔转染悬浮细胞基因转染优化; Keywords electroporation cell cultured in suspension gene transfection optimization; 分类号 R733.7 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名电穿孔转染制备绵羊诱导多潜能干细胞条件的优化被引量：3: 3; 作者王聪慧赵帅张译元王立民李炜杰赵兴旺丁新平张银国周平; 机构石河子大学动物科技学院新疆生产建设兵团绵羊繁育生物技术重点实验室石河子市石总场畜牧兽医服务中心新疆西部牧业股份有限公司紫泥泉种羊场; 出处《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期9-15,共7页; 基金兵团种质资源创新专项(2012BB042) 国家转基因重大专项(2014ZX08008-001) +1 种基金新疆农垦科学院引导计划(49YYD201209); 文摘为优化获得绵羊诱导性多潜能干细胞(iPS cell)的诱导条件,通过4-D电转染仪,将含有人Oct4、Sox2及Klf4、c-Myc及lin28基因的3个质粒共转染绵羊成纤维细胞,从EH-100、EN-150、CZ-167、CA-137电转程序筛选出适合绵羊成纤维细胞的电转染程序;探讨不同细胞密度、质粒质量浓度、质粒质量浓度比及维生素C对诱导性多潜能干细胞克隆形成的影响。结果表明,采用EH-100电转程序,在细胞密度为5×106 mL-1、质粒质量浓度比为1∶1∶1、质粒总质量浓度为0.1mg·L-1、培养液中添加维生素C的质量浓度为0.05mg·L-1时,AP染色阳性(AP+)克隆形成的效率可达到14.0%。说明,优化后的电转染方法和培养方案可有效提高绵羊诱导性多潜能干细胞的制备效率。; 关键词电穿孔转染绵羊成纤维细胞诱导性多潜能性干细胞; Keywords Electroporation Sheep fibroblasts Induced pluripotent stem cells; 分类号 S826 [农业科学—畜牧学] Q233 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名DNA对电穿孔转染效率的影响被引量：1: 4; 作者卢柏松黄培堂; 机构军事医学科学院生物工程研究所; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1995年第3期256-260,共5页; 文摘以外源红细胞生成素ｃＤＮＡ的表达产物为指标，研究了运载ＤＮＡ和重组表达质粒的构象对电穿孔转染ＣＨＯ细胞的效率的影响．结果２５０ｍｇ／Ｌ的运载ＤＮＡ可使外源基因表达水平提高３倍；线性化质粒ＤＮＡ比超螺旋ＤＮＡ更适合于用电穿孔方法获得永久表达．这一结果提示，运载ＤＮＡ的存在和质粒ＤＮＡ的线性化对提高电穿孔转染ＣＨＯ细胞的效率是必须的．; 关键词电穿孔转染运载DNA DNA 构象细胞; Keywords electroporation,carrier DNA,DNA conformation; 分类号 Q2－33 [生物学—细胞生物学] Q523 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠大脑皮质神经元电穿孔转染条件的优化被引量：4: 5; 作者詹从清黄静魏燕燕陈晶李云庆武胜昔; 机构第四军医大学基础部人体解剖与组织胚胎学教研室暨梁銶锯脑研究中心; 出处《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期253-257,共5页; 基金国家自然科学基金(30970946); 文摘目的:以原代培养的小鼠大脑皮质神经元为研究工具,优化电穿孔转染条件。方法:通过设置不同的电压和脉冲时间组合等电转染条件,将表达绿色荧光蛋白(GFP)的shNC质粒导入小鼠大脑皮质神经元,24 h后观察并比较神经元的转染效率,确定最佳电转染条件。结果:200 v电压,25 ms脉冲时间或250 v电压,15 ms脉冲时间的转染条件下,小鼠大脑皮质神经元可获得较好的转染效率,分别为(31.15±1.89)%和(29.10±1.93)%。结论:电穿孔转染是一种高效的基因转染方法,通过条件的优化,可以提高小鼠大脑皮质神经元的电转染效率。; 关键词大脑皮质神经元电穿孔转染优化小鼠; Keywords cerebral cortical neuron electroporation optimization mouse; 分类号 R741 [医药卫生—神经病学与精神病学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名马鹿鹿茸原代前软骨与软骨细胞电穿孔法转染研究被引量：1: 6; 作者金庆梅索婧媛韩青高仰杨帆吴玄烨郑冬; 机构东北林业大学野生动物与自然保护地学院; 出处《野生动物学报》北大核心 2025年第1期72-80,共9页; 基金国家自然科学基金面上项目(31671283)。; 文摘电穿孔转染(电转染)是一种高效、低毒、操作方便的细胞转染技术,但在鹿茸原代细胞中还没有应用的先例。为探索电转染过程中影响鹿茸原代细胞电转染效率和细胞存活率的关键参数,以293T细胞系为平行实验组,将pCMV-C-EGFP质粒电转入马鹿(Cervus elaphus)鹿茸前软骨和软骨原代细胞中。结果显示:(1)在方波条件下,鹿茸前软骨细胞电转染电压500~700 V,脉冲长度0.4~1.4 ms,脉冲次数优选1或2次;而软骨细胞电转染电压500 V,脉冲长度0.2~1.3 ms,脉冲次数1或2次,可以在上述参数基础上进行各原代细胞后续试验优化。(2)物种(鹿、人)、细胞类型(原代细胞、细胞系)以及细胞组织来源(软骨、肾)等要素对电转染效率和细胞存活率结果具有较大影响。(3)电转染效率和细胞存活率通常存在反比关系。(4)原代细胞电转染效率均低于细胞系。研究结果可为电转染技术在鹿茸再生机理研究中的应用提供基础数据。; 关键词电穿孔转染鹿茸原代细胞质粒电转染效率细胞存活率; Keywords Electroporation transfection Antler primary cells Plasmid Electrotransfection efficiency Cell viability; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名3种介导猪NR2F2基因转染PK15细胞方法的比较研究被引量：5: 7; 作者张万锋黑伟何志强刘敏孟珊高鹏飞蔡春波杨阳郭晓红曹果清李步高; 机构山西农业大学动物科技学院; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第5期1352-1359,共8页; 基金国家自然科学基金(31872336) 三晋学者支持计划专项经费(2016、2017) +1 种基金山西省“1331工程”(2017) 山西省农业重点研发项目(201803D221022-1)。; 文摘试验旨在研究3种转染方法对猪肾上皮细胞(PK15)的转染效率,为以PK15细胞为模型研究外源基因的功能提供参考。本研究以PK15细胞为研究对象,用脂质体、电穿孔、慢病毒3种转染方法转染后,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,采用实时荧光定量PCR检测EGFP和NR2F2基因的表达情况,采用CCK-8检测细胞存活率,进而比较3种方法的转染效果。结果显示,转染PK15细胞后,电穿孔和慢病毒方法转染效率极显著高于脂质体(P<0.01),但电穿孔方法和慢病毒方法之间差异不显著(P>0.05);EGFP和NR2F2基因的实时荧光定量PCR结果显示慢病毒方法效果最好,脂质体方法较差,与细胞转染效率基本一致;CCK-8结果显示,电穿孔转染后细胞存活率最低,极显著低于对照组(P<0.01),脂质体方法显著低于对照组(P<0.05),慢病毒方法与对照组间差异不显著(P>0.05)。综合考虑转染效率及细胞活性,本研究认为慢病毒转染方法最适合转染PK15细胞,为今后高效转染PK15细胞提供了理想的方法。; 关键词 PK15细胞 NR2F2基因脂质体转染电穿孔转染慢病毒转染; Keywords PK15 cells NR2F2 gene liposome transfection electroporated transfection lentiviral transfection; 分类号 S828 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名利用电穿孔法对狂犬病病毒SRV9 Ψ区缺失株病毒的拯救及鉴定被引量：1: 8; 作者毛丽萍魏玉圆王伟翟少华程瑶文兆海简子健; 机构新疆农业大学动物医学学院; 出处《动物医学进展》北大核心 2017年第11期22-27,共6页; 基金国家自然科学基金项目(31360623) 研究生科研创新项目(XJAUGRI2015017); 文摘探讨电穿孔转染法对SRV9Ψ区缺失株重组病毒的拯救及鉴定。利用电穿孔细胞转染法,将纯化的Ψ区缺失株pcDNA-NPMG-L全长质粒和pcDNA-N、pcDNA-P、pcDNA-M、pcDNA-G和pcDNA-L辅助表达质粒共转染至BHK-21细胞中,并进行盲传,借助RT-PCR、间接免疫荧光试验、Western-blot及透射电子显微镜对重组病毒进行鉴定。结果显示,重组病毒能够产生绿色荧光,透射电子显微镜观察可见典型的弹状病毒,对重组毒株与亲本毒株G蛋白进行Western-blot验证,可获得相应目的条带。结果表明,通过电穿孔细胞转染法,能成功拯救出重组病毒SRV9Ψ区缺失株,为病毒的拯救提供新的转染方法,并能有效提高转染效率,为研发新型狂犬病疫苗提供参考。; 关键词狂犬病病毒电穿孔转染法 SRV9Ψ区缺失株拯救; Keywords Rabies virus electroporation transfection SRV9 deleted pseudo gene Ψ region rescue; 分类号 S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名C/EBPε增强U937细胞中PI3Kγ基因的表达: 9; 作者蔡蓉戴冰冰梅文瀚李珂卢健; 机构上海第二医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室人类基因治疗中心; 出处《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第6期562-564,571,共4页; 基金国家自然科学基金(30300066) 上海市教委第四期重点学科(ZDXK2001)资助项目.; 文摘目的研究过量表达转录因子CCAAT-增强子结合蛋白ε(CCAAT/enhancerbindingproteins,C/EBPε)对磷脂酰肌醇-3激酶γ(phosphoinositide3kinase,PI3Kγ)基因的影响。方法将C/EBPε基因的真核表达载体pcDNA3.1C/EBPε电穿孔转染U937细胞,G418筛选出稳定转染的混合细胞克隆后,用RTPCR与Westernblot的方法,分别检测转染细胞与对照细胞中C/EBPε与PI3Kγ基因的表达水平。结果过量表达转录因子C/EBPε后,可以显著提高U937细胞中PI3Kγ基因的表达水平。结论核内转录因子C/EBPε可能参与了PI3Kγ基因的转录调控。; 关键词 C/EBPε U937细胞 PI3K Γ基因磷脂酰肌醇-3激酶增强子结合蛋白 Western PCDNA3 真核表达载体 RT-PCR 核内转录因子过量表达电穿孔转染细胞克隆稳定转染 blot 转染细胞转录调控水平; Keywords phosphoinositide 3-kinase γ CCAAT/enhancer binding proteins ε gene expression and regulation; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	质粒电穿孔转染条件的选择	杨薇王迪陈克清于敏王桂华胡俊波王晶	《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2009	9	在线阅读下载PDF 职称材料
2	电穿孔转染悬浮细胞条件的优化	蔡磊李艳窦科峰张巍丁睿赵青川	《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	电穿孔转染制备绵羊诱导多潜能干细胞条件的优化	王聪慧赵帅张译元王立民李炜杰赵兴旺丁新平张银国周平	《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心	2015	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	DNA对电穿孔转染效率的影响	卢柏松黄培堂	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	1995	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	小鼠大脑皮质神经元电穿孔转染条件的优化	詹从清黄静魏燕燕陈晶李云庆武胜昔	《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2011	4	在线阅读下载PDF 职称材料
6	马鹿鹿茸原代前软骨与软骨细胞电穿孔法转染研究	金庆梅索婧媛韩青高仰杨帆吴玄烨郑冬	《野生动物学报》北大核心	2025	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	3种介导猪NR2F2基因转染PK15细胞方法的比较研究	张万锋黑伟何志强刘敏孟珊高鹏飞蔡春波杨阳郭晓红曹果清李步高	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2020	5	在线阅读下载PDF 职称材料
8	利用电穿孔法对狂犬病病毒SRV9 Ψ区缺失株病毒的拯救及鉴定	毛丽萍魏玉圆王伟翟少华程瑶文兆海简子健	《动物医学进展》北大核心	2017	1	在线阅读下载PDF 职称材料
9	C/EBPε增强U937细胞中PI3Kγ基因的表达	蔡蓉戴冰冰梅文瀚李珂卢健	《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心	2005	0	在线阅读下载PDF 职称材料