微流控法制备载卵母细胞水凝胶微球及其玻璃化保存 被引量：3

1

作者 张慧 张宇琪 +1 位作者 胡剑麟 周新丽 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第4期969-980,共12页

目的通过微流控法制备载卵母细胞海藻酸钠微球,在低浓度保护剂下实现卵母细胞玻璃化保存。方法采用流动聚焦型微流控芯片,通过调整芯片结构、海藻酸钠溶液浓度和流速比,制备大小均匀、空包率低、低温耐受的载卵母细胞海藻酸钠水凝胶微... 目的通过微流控法制备载卵母细胞海藻酸钠微球,在低浓度保护剂下实现卵母细胞玻璃化保存。方法采用流动聚焦型微流控芯片,通过调整芯片结构、海藻酸钠溶液浓度和流速比,制备大小均匀、空包率低、低温耐受的载卵母细胞海藻酸钠水凝胶微球。在低浓度低温保护剂下将微球玻璃化保存,复温后检测存活率,采用细胞松弛素B和氯化锶孤雌激活卵母细胞,与Cryotop玻璃化法对比卵母细胞存活率和卵裂率、囊胚率。结果制备的海藻酸钠微球在冷冻复温前后的体积稳定且结构完整,在将卵母细胞包封在海藻酸钠水凝胶中后,空包率低,存活率、卵裂率和囊胚率与新鲜组相比无显著差异。在低浓度低温保护剂10%DMSO+10%乙二醇(EG)+0.5 mol/L海藻糖中玻璃化冻存后卵母细胞的存活率达到92.48%,卵裂率70.80%,囊胚率20.42%,与高浓度保护剂15%DMSO+15%EG+0.5 mol/L海藻糖中Cryotop玻璃化法相比无显著性差异。结论本文设计制作了三通道内部交联芯片并用于卵母细胞玻璃化保存的微流控系统,可生成大小均匀、空包率低、低温耐受的载卵母细胞海藻酸钠水凝胶微球,在低浓度保护剂下实现玻璃化保存,为卵母细胞玻璃化保存方法提供新思路。 展开更多

关键词 微流控 卵母细胞 微囊化 玻璃化保存 低温保护剂

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玻璃化保存草莓多酚氧化酶和过氧化物酶活性变化的实验研究 被引量：26

2

作者 晏绍庆 华泽钊 +1 位作者 刘宝林 周培根 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第1期58-62,共5页

低温部分玻璃化保存是食品的最佳保存方法之一。本文通过对草莓在冻结过程、玻璃化（－７５℃）和非玻璃化（－２５℃）保藏两个月中生特征的实验研究，发现冻结及贮藏过程均会引起草莓中可溶性多酚氧化酶（ＰＰＯ）过氧化物酶（ＰＯＤ... 低温部分玻璃化保存是食品的最佳保存方法之一。本文通过对草莓在冻结过程、玻璃化（－７５℃）和非玻璃化（－２５℃）保藏两个月中生特征的实验研究，发现冻结及贮藏过程均会引起草莓中可溶性多酚氧化酶（ＰＰＯ）过氧化物酶（ＰＯＤ）的酶活性较大幅度变化，并对其机理和食品保存质量的影响进行了分析，认为选择适宜的冻结和贮藏条件是确保低温部分玻璃化保存食品质量的两个不可分割的环节。 展开更多

关键词 草莓 部分玻璃化保存 酶活 冻藏 PPO POD 实验

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草莓冻结玻璃化保存的实验研究 被引量：7

3

作者 刘宝林 华泽钊 +2 位作者 许建俊 缪松 冯志哲 《上海理工大学学报》 CAS 1999年第2期180-183,190,共5页

以草莓为样品进行了食品冻结玻璃化保存的实验研究。结果表明，贮藏于玻璃态 （－７５℃ ）的草莓质量明显优于贮藏在一般商用温度（－２９℃，－１８℃ ）下的草莓质量。

关键词 结晶 玻璃化保存 草莓 实验研究 冻结

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成纤维细胞玻璃化保存的初步实验研究 被引量：4

4

作者 程启康 王欣 +6 位作者 杨鹏飞 华泽钊 邓辰亮 杨光辉 崔磊 刘伟 曹谊林 《低温工程》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期23-26,44,共5页

成纤维细胞是构建组织工程化真皮的种子细胞 ,实现成纤维细胞的低温保存对成功保存组织工程化真皮有着重要的意义。采用不同组成及浓度的玻璃化溶液对成纤维细胞进行玻璃化低温保存实验 ,并考虑了离心次数对细胞存活率的影响。实验结果... 成纤维细胞是构建组织工程化真皮的种子细胞 ,实现成纤维细胞的低温保存对成功保存组织工程化真皮有着重要的意义。采用不同组成及浓度的玻璃化溶液对成纤维细胞进行玻璃化低温保存实验 ,并考虑了离心次数对细胞存活率的影响。实验结果表明 :玻璃化溶液的组成、浓度及复温后的离心次数等因素对细胞的存活率均有明显的影响。在实验条件下 ,采用组分配比为 5 4mol/LEG+1 4mol/LDMSO的玻璃化溶液对成纤维细胞进行玻璃化保存 ,复温后以 10 0 0r/min的转速离心 1次(5min)后 ,再以 80 0r/min的转速离心 4次 (每次 4min) ,可获得较高的细胞存活率 ,其值为87 1%。 展开更多

关键词 成纤维细胞 组织工程化真皮 玻璃化保存 低温保存技术

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二甲基亚砜和乙二醇对玻璃化保存大鼠坐骨神经的协同保护作用 被引量：3

5

作者 肖龙 黄英如 +2 位作者 李沿江 吴珍元 邓熊 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期940-946,共7页

目的探讨冷冻保护剂二甲基亚砜(DMSO)、乙二醇(EG)单独及联合应用对周围神经玻璃化保存的影响。方法取30只3月龄雄性SD大鼠双侧坐骨神经,制成长约15 mm神经段,在含不同冷冻保护剂的玻璃化溶液中-80℃保存4周:空白组(不含冷冻保护剂)、10... 目的探讨冷冻保护剂二甲基亚砜(DMSO)、乙二醇(EG)单独及联合应用对周围神经玻璃化保存的影响。方法取30只3月龄雄性SD大鼠双侧坐骨神经,制成长约15 mm神经段,在含不同冷冻保护剂的玻璃化溶液中-80℃保存4周:空白组(不含冷冻保护剂)、10%DMSO组、20%EG组、10%DMSO+20%EG组(每组n=15)。透射电镜观察神经组织超微结构,Calcein-AM和PI双染色激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测神经组织生物活性,Western blotting检测神经组织Caspase-3、Caspase-8表达。取玻璃化保存4周后的各组坐骨神经,于37℃、5%CO2DMEM(含l0%胎牛血清)中培养7 d,RT-PCR、Western blotting检测培养神经表达的神经生长因子(NGF)和胶质源性神经营养因子(GDNF)。结果坐骨神经玻璃化保存4周,透射电镜显示:空白组神经纤维脱髓鞘变和轴质萎缩严重,而10%DMSO组、20%EG组、10%DMSO+20%EG组神经纤维脱髓鞘变和轴质萎缩均较轻(以10%DMSO+20%EG组最轻)。LSCM检测显示:空白组神经纤维绿色荧光较弱,而红色荧光较强、分布较广;10%DMSO组、20%EG组神经纤维绿色荧光较强、红色荧光较弱;而10%DMSO+20%EG组神经纤维绿色荧光最强、红色荧光最弱。Western blotting检测显示:玻璃化保存后坐骨神经Caspase-3、Caspase-8的表达,空白组与10%DMSO组、20%EG组、10%DMSO+20%EG组比较,10%DMSO+20%EG组与10%DMSO组、20%EG组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05);但10%DMSO组与20%EG组间差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR、Western blotting检测显示:培养神经NGF、GDNF的表达,空白组与10%DMSO组、20%EG组、10%DMSO+20%EG组比较,10%DMSO+20%EG组与10%DMSO组、20%EG组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05);但10%DMSO组与20%EG组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 10%DMSO、20%EG对-80℃玻璃化保存的坐骨神经具有保护作用,能提高玻璃化保存后神经组织的生物活性,且二者联合应用具有协同作用。 展开更多

关键词 坐骨神经 玻璃化保存 冷冻保护剂 协同作用

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低温玻璃化保存理论在水产品贮藏中的应用 被引量：2

6

作者 晏绍庆 华泽钊 +1 位作者 刘宝林 彭海柱 《海洋渔业》 CSCD 北大核心 1999年第4期188-190,共3页

一、引言 低温保存是食品的最佳保存方法之一,但食品原料在冷加工、贮藏和运输过程中质量的下降仍无法避免。早在本世纪40年代起,食品科学家和工程师们就如何提高冻结食品的质量进行了不懈的努力,做过大量的研究,其中最有代表性的成果是... 一、引言 低温保存是食品的最佳保存方法之一,但食品原料在冷加工、贮藏和运输过程中质量的下降仍无法避免。早在本世纪40年代起,食品科学家和工程师们就如何提高冻结食品的质量进行了不懈的努力,做过大量的研究,其中最有代表性的成果是T.T.T.概念的提出。80年代初,随着食品聚合物理论的提出,食品的低温保存研究进入了一个新纪元,到90年代就有1000多篇相关论文发表,而国内这方面的研究刚刚起步。 展开更多

关键词 低温玻璃化保存 水产品贮藏 应用

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震荡热管应用于玻璃化保存中的数值模拟 被引量：1

7

作者 戎森杰 刘宝林 +1 位作者 郝保同 闫静文 《低温工程》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期41-45,共5页

介绍了震荡热管应用于玻璃化保存的新方案,建立了生物组织在玻璃化保存过程中的数学模型,通过ANSYS分析软件,对样品在降温过程中的温度场进行了计算分析和数值模拟。得出了生物组织的瞬时温度分布,并通过模拟结果,计算出了生物组织在降... 介绍了震荡热管应用于玻璃化保存的新方案,建立了生物组织在玻璃化保存过程中的数学模型,通过ANSYS分析软件,对样品在降温过程中的温度场进行了计算分析和数值模拟。得出了生物组织的瞬时温度分布,并通过模拟结果,计算出了生物组织在降温过程中的降温速率可达2×104℃/s。研究结果表明:极快速的降温速率可使细胞或组织快速通过0℃—-60℃的危险温度区域,从而抑制冰晶的生成和长大,减轻胞内冰造成的细胞损伤。 展开更多

关键词 震荡热管 玻璃化保存 生物组织 温度场 降温速率

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玻璃化保存对家兔颈总动脉松弛行为的影响 被引量：1

8

作者 郑宇轩 赵刚 《中国科学技术大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期926-930,共5页

实验测定了玻璃化保存前后家兔颈总动脉的松弛曲线G(t),利用数学方法将连续松弛谱函数简化,并结合经验公式对实验数据进行非线性拟合,得到了动脉的3个材料参数(C,1τ和2τ).通过比较玻璃化保存前后动脉松弛行为特征参数的差异,得到了玻... 实验测定了玻璃化保存前后家兔颈总动脉的松弛曲线G(t),利用数学方法将连续松弛谱函数简化,并结合经验公式对实验数据进行非线性拟合,得到了动脉的3个材料参数(C,1τ和2τ).通过比较玻璃化保存前后动脉松弛行为特征参数的差异,得到了玻璃化保存对动脉力学行为的影响.结果表明:①经过约600 s的松弛过程后,新鲜动脉约可保持初始应力的70%,而玻璃化保存动脉则仅可保持初始应力的约60%;②玻璃化保存动脉的短期松弛时间常数1τ相对新鲜对照组而言显著较小,约降低60%,长期松弛时间常数2τ约降低15%,而C几乎不变. 展开更多

关键词 动脉 玻璃化保存 粘弹性 连续松弛谱

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浅析猪胚胎玻璃化保存

9

作者 张美俊 刘文忠 张桂贤 《中国畜牧兽医》 CAS 2005年第6期39-41,共3页

随着生物技术发展,猪胚胎保存的重要性越来越大。但由于猪胚胎对低温特别敏感,因而其研究进展受到了极大限制。如何提高猪胚胎保存效率成为急待解决的重大问题。作者通过对国内外胚胎玻璃化保存研究进展进行分析,就胚胎的高脂含量以及... 随着生物技术发展,猪胚胎保存的重要性越来越大。但由于猪胚胎对低温特别敏感,因而其研究进展受到了极大限制。如何提高猪胚胎保存效率成为急待解决的重大问题。作者通过对国内外胚胎玻璃化保存研究进展进行分析,就胚胎的高脂含量以及保存时胚胎细胞骨架受损做出分析提出见解。 展开更多

关键词 猪胚胎 玻璃化保存 玻璃化溶液

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磁热复温对玻璃化保存脐动脉力学特性的影响 被引量：2

10

作者 董一霖 胥义 +1 位作者 臧传宝 刘峰 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第1期22-29,共8页

目的探究磁热复温对玻璃化保存的脐动脉组织形态以及生物力学特性的影响。方法采用磁热方式对玻璃化保存的脐动脉进行复温,与传统水浴复温方式进行对比,分析溶液体系内的温度分布及热应力,并通过对脐动脉进行组织染色及力学测试评价复... 目的探究磁热复温对玻璃化保存的脐动脉组织形态以及生物力学特性的影响。方法采用磁热方式对玻璃化保存的脐动脉进行复温,与传统水浴复温方式进行对比,分析溶液体系内的温度分布及热应力,并通过对脐动脉进行组织染色及力学测试评价复温效果。结果与水浴复温相比,通过磁热复温产生的温度梯度和热应力较小,可以有效减小复温阶段热应力损伤,实现快速均匀的复温;磁热复温可以有效避免脐动脉出现断裂和微裂纹现象,并且复温后脐动脉细胞外基质、胶原纤维、弹性纤维以及肌纤维等结构分布均匀,可以较好地保存脐动脉的宏观和微观结构;采用水浴和磁热复温后的脐动脉均出现不同程度的硬化,其中后者弹性模量和极限应力与新鲜脐动脉无显著差异,具有相似的单向拉伸特性,表现出良好的弹性与韧性。结论相比水浴复温,磁热复温方式可以有效减小复温阶段的损伤,保证脐动脉具有较好的宏观、微观结构和生物力学特性。研究结果为脐动脉等较大组织或器官的玻璃化保存提供重要依据。 展开更多

关键词 脐动脉 玻璃化保存 磁热复温 力学特性 热应力

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用于卵母细胞玻璃化保存的微流控系统 被引量：2

11

作者 张宇琪 喻梓瑄 周新丽 《制冷学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期160-166,共7页

卵母细胞玻璃化保存的需求日益增加,目前人工或自动化保存装置分步加载和去除低温保护剂易造成卵母细胞的渗透损伤和丢失。本研究采用低成本易制作的PMMA微流控芯片,结合石英毛细管搭建微流控混合系统,既实现了保护剂的连续加载/去除,... 卵母细胞玻璃化保存的需求日益增加,目前人工或自动化保存装置分步加载和去除低温保护剂易造成卵母细胞的渗透损伤和丢失。本研究采用低成本易制作的PMMA微流控芯片,结合石英毛细管搭建微流控混合系统,既实现了保护剂的连续加载/去除,又为后续浸入液氮实现自动玻璃化保存做准备。通过采用手动多步法和微流控法对小鼠MⅡ期卵母细胞加载/去除低温保护剂,对比卵母细胞的体积响应、存活率和后续发育率。结果表明:微流控法注射时间8 min组的卵母细胞存活率、卵裂率和囊胚率,分别达到93.25%、77.12%、53.00%,显著高于手动多步法,与对照组无显著性差异(P<0.05)。使用PMMA芯片结合石英毛细管的微流控系统,显著减小了卵母细胞的渗透损伤和细胞丢失率,简化了操作步骤,为基于微流控技术的卵母细胞与胚胎的自动玻璃化保存装置的开发提供关键技术支撑。 展开更多

关键词 玻璃化保存 微流控 卵母细胞 石英毛细管 PMMA芯片

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玻璃化保存对家兔跟腱松弛行为的影响

12

作者 于前锋 赵刚 《中国科学技术大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期207-212,218,共7页

玻璃化保存方法操作方便、保存效果良好,近年来已被广泛用于血管、肌腱等生物软组织的深低温保存.基于QLV理论,采用新的参数拟合方法得到QLV模型特征参数,通过比较玻璃化保存前后QLV模型中特征参数的差异,研究玻璃化保存对跟腱松弛行为... 玻璃化保存方法操作方便、保存效果良好,近年来已被广泛用于血管、肌腱等生物软组织的深低温保存.基于QLV理论,采用新的参数拟合方法得到QLV模型特征参数,通过比较玻璃化保存前后QLV模型中特征参数的差异,研究玻璃化保存对跟腱松弛行为的影响,以期建立和完善玻璃化保存跟腱的粘弹性力学评价指标.本研究对玻璃化保存前后的肌腱做应变水平为2%的松弛实验,并成功地应用QLV模型分别描述了跟腱标准松弛实验的线性加载段和应力松弛段应力随时间的变化.结果表明:①经过1 200s的松弛,玻璃化保存前后跟腱的最终应力松弛水平相差不大(约4%);②针对QLV模型,充分考虑标准松弛实验中线性加载段的影响,建立了一种松弛全过程数据拟合方法,用模型很好地描述了整个松弛过程应力随时间的变化;③通过对比玻璃化保存前后QLV模型中各特征参数的变化,发现跟腱经过玻璃化保存后其刚性变强、弹性响应能力增加,而其粘性响应有差异;④用Wilcoxon符号秩检验法对玻璃化保存前后跟腱的松弛行特征参数进行统计学分析,结果表明保存前后其特征参数没有显著性差异(p>0.05),说明所设计的玻璃化保存方案能够很好地保留跟腱的粘弹性力学性能. 展开更多

关键词 跟腱 玻璃化保存 粘弹性 准线性粘弹性 松弛

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大鼠肝细胞的玻璃化保存

13

作者 杨晶 刘作斌 邢凤有 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期335-336,239,共3页

玻璃化方法保存生物材料是近年来低温生物医学领域较为热门的话题,应用这种方法可以使生物材料在保存过程中免于冰晶效应和溶液效应的损伤,提高存活率。目前认为用玻璃化方法保存生物材料是最理想的深低温保存方法。本实验选用大鼠肝细... 玻璃化方法保存生物材料是近年来低温生物医学领域较为热门的话题,应用这种方法可以使生物材料在保存过程中免于冰晶效应和溶液效应的损伤,提高存活率。目前认为用玻璃化方法保存生物材料是最理想的深低温保存方法。本实验选用大鼠肝细胞作为样品,进行玻璃化保存的尝试,旨在验证玻璃化保存肝细胞的可行性,并提供一种肝细胞的保存方法。 展开更多

关键词 肝细胞保存 玻璃化保存

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硅质微通道玻璃化保存芯片的结构热应力分析

14

作者 王洋 于亚婷 +1 位作者 王吉 陈春 《机械设计与制造》 北大核心 2018年第A02期141-144,共4页

玻璃化保存是指以超高速降温促使生物材料发生玻璃化转变后低温存贮,能有效避免传统低温保存过程中冰晶生长等因素造成的低温损伤,是细胞、组织等生物材料的理想长期保存方法。基于微通道换热原理的玻璃化保存芯片技术能够满足玻璃化保... 玻璃化保存是指以超高速降温促使生物材料发生玻璃化转变后低温存贮,能有效避免传统低温保存过程中冰晶生长等因素造成的低温损伤,是细胞、组织等生物材料的理想长期保存方法。基于微通道换热原理的玻璃化保存芯片技术能够满足玻璃化保存的超高速降温需求,但降温过程中的快速温度变化将产生较大的热应力,对芯片结构可靠性产生重要影响。特别当芯片采用硅这种生物相容性好但强度较差的材料时,热应力影响更为突出。建立微通道玻璃化保存芯片的三维CFD模型,对降温过程中的流动沸腾换热过程和热应力作用进行整场求解,预测不同条件下芯片降温性能及结构中的应力场,并采用正交试验方法设计算例,分析微通道深度、宽度、壁厚和长度等结构参数对芯片内热应力的影响规律。结果表明,各参数对硅质微通道芯片结构热应力的影响程度从大到小依次为:通道深度,通道壁厚,通道宽度,通道长度;通过正交试验所得出的最优参数组合能在满足玻璃化保存所需降温速率的同时保证芯片的结构强度。所提出的仿真方法和结果将为微通道玻璃化保存芯片技术的进一步发展和应用提供重要支持。 展开更多

关键词 玻璃化保存 硅微通道 热应力 正交试验

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玻璃化超低温保存对独占春原球茎生理生化特性影响 被引量：2

15

作者 韩豫 崔雨童 +2 位作者 陈彧 饶丹丹 吴二焕 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期8-12,共5页

为探明兰花稀缺品种独占春(Cymbidium eburneum Lindl.)玻璃化超低温保存技术中成活率较低的问题,以独占春原球茎为研究对象,研究了玻璃化超低温保存技术对其生理生化特性的影响,并分析了各生理指标之间的相互关系。结果表明:逆境胁迫中... 为探明兰花稀缺品种独占春(Cymbidium eburneum Lindl.)玻璃化超低温保存技术中成活率较低的问题,以独占春原球茎为研究对象,研究了玻璃化超低温保存技术对其生理生化特性的影响,并分析了各生理指标之间的相互关系。结果表明:逆境胁迫中,含水量随玻璃化超低温保存进程缓慢降低,卸载处理迅速降低,其含水量是对照处理的79.06%;相对电导率逐渐升高,卸载处理达到最高(86.36%);氧化损伤指标中的丙二醛(MDA)质量摩尔浓度显著升高,玻璃化处理达到最大;蛋白质羰基(PCO)质量摩尔浓度则是先升高后降低再升高,玻璃化处理质量摩尔浓度最低;氧化物质指标中的过氧化氢酶(CAT)活性和抗坏血酸(ASA)质量摩尔浓度变化趋势一致,均先升高后降低,且预培养处理达最大值;超氧化物歧化酶(SOD)活性先降低后升高,呈现双峰变化趋势;活性氧成分中H_(2)O_(2)和·OH质量摩尔浓度在玻璃化处理均达到最大值,且H_(2)O_(2)质量摩尔浓度变化趋势和CAT活性变化趋势在玻璃化超低温保存进程中表现为相互抑制。通过相关性分析,CAT活性和超氧自由基(O·-2)质量摩尔浓度呈极显著正相关,和H_(2)O_(2)质量摩尔浓度呈显著负相关,表明氧化酶物质对活性氧成分具有清除作用。 展开更多

关键词 独占春 原球茎 玻璃化超低温保存 生理生化特性

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‘红香芋’茎尖玻璃化法保存条件的筛选 被引量：1

16

作者 臧玉文 蒋芳玲 +3 位作者 刘敏 程雅琪 孔祥宇 吴震 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期116-118,共3页

羊〔Colocasia esculenta（Linn.）Schott〕通常用球茎繁殖,其种质保存方式主要为建立种质圃,但具有占用空间大、投入较高、易遭受胁迫等问题.超低温保存技术具有稳定、经济、有效等优点,适合无性繁殖和非正常性种子繁殖植物的种质保存... 羊〔Colocasia esculenta（Linn.）Schott〕通常用球茎繁殖,其种质保存方式主要为建立种质圃,但具有占用空间大、投入较高、易遭受胁迫等问题.超低温保存技术具有稳定、经济、有效等优点,适合无性繁殖和非正常性种子繁殖植物的种质保存,而玻璃化法作为-种更优的保存技术已成功应用于多种植物的种质保存. 展开更多

关键词 红香芋 茎尖 玻璃化保存 存活率

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不同品系小鼠胚胎玻璃化冷冻保存的比较研究 被引量：14

17

作者 刘丽均 顾建忠 +4 位作者 朱东琴 符杰 施美莲 张瑞忠 徐平 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2002年第2期77-80,F003,共5页

目的　研究甘油作为冷冻保护剂、不同基因型小鼠对胚胎玻璃化冷冻的影响。方法　采用 6 5mol L的甘油作为冷冻保护剂 ,采用二步法对CBA、NOD、C57BL 6J、ICR及CD1小鼠 3 5d的胚胎进行玻璃化冷冻 ,并比较了不同品系小鼠胚胎的复苏率及... 目的　研究甘油作为冷冻保护剂、不同基因型小鼠对胚胎玻璃化冷冻的影响。方法　采用 6 5mol L的甘油作为冷冻保护剂 ,采用二步法对CBA、NOD、C57BL 6J、ICR及CD1小鼠 3 5d的胚胎进行玻璃化冷冻 ,并比较了不同品系小鼠胚胎的复苏率及移植受孕率。结果和结论　CBA、NOD、C57BL 6J,ICR及CD1的复苏率分别为 5 7 6 %、4 8%、31 3%、86 5 %及 88% ,移植受孕率为 2 1%、2 3 5 %、11%、38%和 35 5 % ,封闭群小鼠的胚胎复苏率、移植受孕率均显著高于近交系小鼠。这提示胚胎的复苏率及移植受孕率可能与小鼠的不同基因型有关。五个品系中 ,桑椹胚及早期囊胚的体外复苏率均显著高于扩张囊胚。 展开更多

关键词 品系 小鼠 胚胎玻璃化冷冻保存 比较研究 复苏率 移植受孕率

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小鼠早期胚胎的EFS20/40、EFS40、DAP213和GP25玻璃化法冷冻保存 被引量：3

18

作者 梁洋 杜文敬 +2 位作者 王春生 朴善花 安铁洙 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1248-1252,共5页

为了筛选适合用于小鼠不同发育时期胚胎的玻璃化冷冻方法,采用EFS20/40、EFS40、DAP213和GP25法分别冷冻保存不同发育期的小鼠胚胎。结果表明,采用EFS20/40法冷冻的2细胞期胚经解冻后发育至扩张囊胚的比率(93%)显著高于EFS40、DAP213和G... 为了筛选适合用于小鼠不同发育时期胚胎的玻璃化冷冻方法,采用EFS20/40、EFS40、DAP213和GP25法分别冷冻保存不同发育期的小鼠胚胎。结果表明,采用EFS20/40法冷冻的2细胞期胚经解冻后发育至扩张囊胚的比率(93%)显著高于EFS40、DAP213和GP25法(分别为70.9%、39.1%和11.1%)(P<0.01);采用EFS20/40法冷冻保存小鼠4～8细胞期胚时,与EFS40相比,解冻后发育至扩张囊胚的比率差异不显著(分别为86.2%和90.0%),但与DAP213(64.5%,P<0.05)和GP25法(47.8%,P<0.01)相比其扩张囊胚率显著增高。此外,虽然EFS40法与EFS20/40法冷冻保存小鼠桑椹胚解冻后的扩张囊胚率差异不显著(分别为68.9%和70.8%),但均显著高于DAP213(38.9%)和GP25法(37.5%)(P<0.01)。结果表明,EFS20/40法适合用于小鼠的2细胞期冷冻保存,而EFS20/40和EFS40法均适合用于4～8细胞期胚和桑椹胚的冷冻。 展开更多

关键词 小鼠 早期胚胎 玻璃化冷冻保存 体外培养

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小鼠囊胚玻璃化冷冻保存研究 被引量：6

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作者 孙艳香 姜国诚 雷俊英 《广西师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2002年第3期73-75,共3页

在 2 0°C室温下 ,用玻璃化冷冻液 (体积分数为 0 .4的乙二醇 ,质量浓度为 0 .1 8kg/L的葡聚糖和 0 .3mol/L海藻糖 )对昆明小白鼠囊胚进行一步法和二步法玻璃化冷冻保存 .一步法的 1 min平衡组和二步法的0 .5 min平衡组胚胎解冻后 ... 在 2 0°C室温下 ,用玻璃化冷冻液 (体积分数为 0 .4的乙二醇 ,质量浓度为 0 .1 8kg/L的葡聚糖和 0 .3mol/L海藻糖 )对昆明小白鼠囊胚进行一步法和二步法玻璃化冷冻保存 .一步法的 1 min平衡组和二步法的0 .5 min平衡组胚胎解冻后 ,体外培养 2 4h后的发育率较高 ,都为 91 % ,与对照组 (98% )相比无显著差异 (P>0 .0 5 ) ;体外培养 48h后的囊胚孵化率较好 ,分别为 48%和 5 1 % ,但与对照组 (90 % )相比 ,均有极显著差异(P<0 .0 1 ) .将此两组冷冻囊胚植入假孕 3 d的受体鼠子宫内 ,其产仔率分别为 43 %和 5 0 % ,与对照组 (5 5 % )相比 ,均无显著差异 (P>0 .0 5 ) . 展开更多

关键词 小鼠 囊胚 玻璃化冷冻保存 一步法 二步法 胚胎冷冻 体外发育率

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卵母细胞玻璃化冷冻保存的研究进展 被引量：7

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作者 李林凤 关伟军 +2 位作者 马月辉 史文清 韩俊文 《中国畜牧兽医》 CAS 2006年第5期28-30,共3页

随着许多哺乳动物卵母细胞冷冻的成功,哺乳动物卵母细胞玻璃化冷冻保存技术取得了不断发展。作者列举比较了开口式拉长细管法、电镜铜网法、固体表面法和尼龙环法等多种卵母细胞的玻璃化冷冻保存方法,并对影响卵母细胞玻璃化冷冻保存的... 随着许多哺乳动物卵母细胞冷冻的成功,哺乳动物卵母细胞玻璃化冷冻保存技术取得了不断发展。作者列举比较了开口式拉长细管法、电镜铜网法、固体表面法和尼龙环法等多种卵母细胞的玻璃化冷冻保存方法,并对影响卵母细胞玻璃化冷冻保存的细胞骨架等因素进行了阐述。讨论后提出自己的建议。 展开更多

关键词 卵母细胞 玻璃化冷冻保存 细胞骨架

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