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猪T细胞受体α链基因的克隆、序列分析及其结构预测 被引量:3
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作者 冯海燕 莫斯科 +1 位作者 房永祥 景志忠 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第1期23-29,共7页
旨在为研究猪T细胞受体分子结构与功能,并首次在国内克隆了猪T细胞受体α链基因。以GenBank上登载的猪T细胞受体(Tcell receptor,TCR)α链(AB087988)为参考序列,从甘肃合作猪外周血液淋巴细胞中用RT-PCR的方法克隆了TCR-α链基因(p... 旨在为研究猪T细胞受体分子结构与功能,并首次在国内克隆了猪T细胞受体α链基因。以GenBank上登载的猪T细胞受体(Tcell receptor,TCR)α链(AB087988)为参考序列,从甘肃合作猪外周血液淋巴细胞中用RT-PCR的方法克隆了TCR-α链基因(pTCR-α)。结果表明:克隆的TCR-α基因具有完整的ORF,全长819 bp,编码272个氨基酸,预测蛋白分子量为30 kDa,含18个强碱性氨基酸,23个强酸性氨基酸,87个疏水性氨基酸和103个极性氨基酸,含有一段20个氨基酸的信号肽序列;与GenBank上登载的TCR-α参考序列(AB087988)的同源性为94.6%,与其他具有完整ORF的猪TCR-α相比,同源性为54.4%-80.3%。推测可能是一新的TCR-α基因转录本。同时,应用生物信息学技术分析了其基因序列及编码蛋白的结构特征,这为猪T细胞受体分子结构与功能的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪t细胞受体α链基因 基因克隆 序列分析 生物信息学
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猪T细胞受体β链转录组与基因组分子结构研究进展
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作者 姚文娟 房永祥 +2 位作者 刘泰安 王春燕 景志忠 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1000-1003,共4页
T细胞受体(TCR)是T细胞的表面标志,作为T细胞识别和结合内/外源性抗原的表面分子,TCR在免疫应答和免疫调节中发挥着重要的作用。但由于其基因的遗传多样性和结构复杂性,对猪αβT细胞特别是病原感染或免疫特异的克隆性增殖规律研究在国... T细胞受体(TCR)是T细胞的表面标志,作为T细胞识别和结合内/外源性抗原的表面分子,TCR在免疫应答和免疫调节中发挥着重要的作用。但由于其基因的遗传多样性和结构复杂性,对猪αβT细胞特别是病原感染或免疫特异的克隆性增殖规律研究在国内尚属空白。随着对猪免疫系统的研究深入,对其TCR的研究也取得了很大进展,本文综述了猪TCRβ链不同组成区域的分类、转录组的多样性及复杂性、基因组的结构特征等方面的研究进展,以加深对猪TCR结构复杂性的认识和理解,为特异性TCR的筛选奠定理论基础。 展开更多
关键词 t细胞受体 分类 基因 转录组 综述
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一种高效扩增人T细胞受体β链可变区基因的方法建立 被引量:2
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作者 叶海燕 王琳 +4 位作者 范振平 钟彦伟 苏何玲 刘永明 徐东平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期644-647,共4页
目的:建立一种高效扩增人T细胞受体(TCR)β链可变区(Vβ)基因的方法。方法:根据TCRVβ26个亚家族基因序列特点设计扩增Vβ基因的上游内引物34条、上游外引物37条,并将内、外上游引物各分为8个简并组。在恒定区(C区)设计下游内、外和测... 目的:建立一种高效扩增人T细胞受体(TCR)β链可变区(Vβ)基因的方法。方法:根据TCRVβ26个亚家族基因序列特点设计扩增Vβ基因的上游内引物34条、上游外引物37条,并将内、外上游引物各分为8个简并组。在恒定区(C区)设计下游内、外和测序引物各1条以及扩增Cβ基因的上游引物1条。提取细胞RNA,用PolyA介导反转录后,采用巢式PCR扩增正常人CD8T细胞TCRVβ26个亚家族基因,并用JurkatT淋巴瘤细胞作为对照。用T-easy载体克隆RT-PCR产物,对克隆基因进行测序。结果:从正常人的CD8T细胞中扩增到所有TCRVβ亚家族基因,克隆后测序与相应的参考序列同源。从Jurkat细胞扩增出TCRVβ8基因,经测序验证与文献报道一致,且最少可从10个细胞提取的RNA模板中扩增成功。结论:建立的巢式RT-PCR方法可以高效、广谱地扩增人TCRVβ基因,为进一步进行抗原特异性细胞毒T淋巴细胞的TCR克隆和功能研究打下了良好基础。 展开更多
关键词 CD8 t细胞 t细胞受体(tCR) 反转录PCR 基因克隆
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寻常型天疱疮患者外周血T细胞受体β链可变区CDR3基因克隆谱型分析 被引量:1
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作者 王茜 曾抗 +2 位作者 周浩 孙乐栋 周再高 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期291-294,共4页
目的:探讨寻常型天疱疮(PV)患者外周血T细胞受体(TCR)互补决定区(CDR3)基因谱型变化,了解克隆扩增的T细胞与自身免疫性疾病的相互关系。方法:采用免疫扫描谱型分析技术,分析6例正常人外周血单个核细胞TCRβ链可变区(BV)CDR3谱型分布特... 目的:探讨寻常型天疱疮(PV)患者外周血T细胞受体(TCR)互补决定区(CDR3)基因谱型变化,了解克隆扩增的T细胞与自身免疫性疾病的相互关系。方法:采用免疫扫描谱型分析技术,分析6例正常人外周血单个核细胞TCRβ链可变区(BV)CDR3谱型分布特征以及6例PV患者CDR3谱型变化情况。结果:6例正常人TCRBVCDR3谱型均符合正态分布,6例PV患者TCRBVCDR3谱型均出现多态性降低,BV亚家族单/寡克隆增生。结论:PV患者外周血TCR可变区β链CDR3谱型异常可能与PV发病有关。 展开更多
关键词 寻常型天疱疮 t淋巴细胞受体 互补决定K 3 基因多态性
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免疫球蛋白重链和T细胞受体γ基因重排在非霍奇金淋巴瘤中检测的临床意义 被引量:1
5
作者 佟红艳 金洁 楼基余 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2001年第1期5-8,共4页
目的 :探讨免疫球蛋白重链 ( Ig H)和 T细胞受体 γ( TCRγ)基因重排在非霍奇金淋巴瘤( NHL )中的检测意义。方法 :用 PCR方法检测 2 5例 NHL和 1例反应性淋巴结炎患者 ,及 2 0例正常人骨髓、周围血和 /或淋巴结单个核细胞 ( MNCs)中克... 目的 :探讨免疫球蛋白重链 ( Ig H)和 T细胞受体 γ( TCRγ)基因重排在非霍奇金淋巴瘤( NHL )中的检测意义。方法 :用 PCR方法检测 2 5例 NHL和 1例反应性淋巴结炎患者 ,及 2 0例正常人骨髓、周围血和 /或淋巴结单个核细胞 ( MNCs)中克隆性 Ig H、TCRγ基因重排。结果 :克隆性Ig H和 /或 TCRγ基因重排在 2 5例 NHL 中检出为 84.0 % ( 2 1 / 2 5 ) ;克隆性 Ig H基因重排在 B-NHL和 T-NHL中检出分别为 86.7% ( 1 3 / 1 5 )和 2 0 .0 % ( 2 / 1 0 ) ,克隆性 TCRγ基因重排分别为5 3 .3 % ( 8/ 1 5 )和 80 .0 % ( 8/ 1 0 )。 1例反应性淋巴结炎和 2 0例正常人均未检测到 Ig H和 TCRγ基因重排。结论 :Ig H、TCRγ基因重排检测有助于 NHL 的诊断和鉴别诊断 ,及发现 NHL 展开更多
关键词 免疫球蛋白类 基因重排 t细胞抗原受体γ 非霍奇金淋巴瘤
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γ,δ链T细胞抗原受体的基因结构及其生物学作用 被引量:1
6
作者 吴敏 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1990年第2期92-95,共4页
TCR有αβ或γδ两种异二聚体形式,使T细胞可分为TCR1(γδ)和TCR2(αβ)两种类型。TCR1T细胞特异识别MHC-I类抗原,在监视上皮细胞以及TCR2T细胞的分化过程中有重要作用。
关键词 t细胞抗原 受体 基因结构 功能
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基因熔解曲线谱型图技术分析肺结核患者CD4^+T细胞受体β链可变区基因多态性
7
作者 张冬梅 孙晓雷 +5 位作者 段义农 汤伟 周鸣鸣 李正欣 张菊 张洁 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1317-1322,共6页
目的利用荧光定量PCR结合基因熔解曲线谱型图(gene melting curve spectratyping,GMCS)技术分析肺结核病患者外周血CD4+T细胞中T细胞受体(TCR)β链可变区(BV)基因多态性。方法提取15例健康人和30例肺结核患者外周血单个核细胞(periphera... 目的利用荧光定量PCR结合基因熔解曲线谱型图(gene melting curve spectratyping,GMCS)技术分析肺结核病患者外周血CD4+T细胞中T细胞受体(TCR)β链可变区(BV)基因多态性。方法提取15例健康人和30例肺结核患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中的总RNA,反转录成cDNA,以26个人TCRBV基因家族设计上游引物,共同的TCRβ链恒定区(BC)基因设计下游引物,荧光定量PCR扩增26个TCRBV基因家族谱系,样品谱系用荧光定量PCR中的DNA熔解曲线进行分析。结果在15例健康人外周血T细胞TCRβ链中,同一BV位点PCR产物的熔解曲线谱型相同。但是与健康人相比,30例肺结核患者的外周血TCRβ链26个BV位点熔解曲线谱型存在差异,差异比率为6.7%~33.3%,差异具有显著性(P<0.05,P<0.01)。此外,26个位点中有13个位点熔解曲线谱型差异比率≥20%。结论荧光定量PCR结合GMCS技术分析TCRBV基因家族谱系情况,方法稳定、简便,能较好地监测肺结核患者外周血T细胞TCR的β链谱型。 展开更多
关键词 CD4阳性t淋巴细胞 t细胞受体β基因 遗传多态现象 肺结核
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T细胞受体γ基因和免疫球蛋白重链基因在急性淋巴细胞白血病细胞的重排及其在分型中的意义
8
作者 张东华 刘文励 +2 位作者 唐锦治 沈关心 曾凡斌 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1995年第3期296-302,共7页
用PCR扩增检测27例急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)和1例T细胞淋巴瘤(T lymphocytic lymphoma,T-LL)的T细胞受体(Tcell receptor,TCR)γ基因和免疫球蛋白重链(immunoglobulin heavy chain,IgH)基因重排。TCRγ基因... 用PCR扩增检测27例急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)和1例T细胞淋巴瘤(T lymphocytic lymphoma,T-LL)的T细胞受体(Tcell receptor,TCR)γ基因和免疫球蛋白重链(immunoglobulin heavy chain,IgH)基因重排。TCRγ基因在9例T-ALL及2例未分型白血病病例中全部重排;在6例B-ALL中有1例重排;在10例C-ALL中有1例重排,而IgH基因在24例ALL病例中重排,其中7例为T-ALL,1例为未分型白血病。TCRγ和IgH基因在1例T-LL中均无重排,在T-ALL、B-ALL和C-ALL中均有交叉重排现象。我们探讨了这些结果在分型中的意义,同时还注意到,在28例中的10例病人存在IgH和TCRγ基因双重重排,如作为特异的双标记检测其微小残留白血病细胞,无疑会提高准确率。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 免疫球蛋白重 t细胞受体 基因重排 白血病分型
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急性白血病细胞免疫球蛋白重链和T细胞受体r基因重排及意义
9
作者 张东华 李守新 +1 位作者 刘文励 沈关心 《同济医科大学学报》 CSCD 1997年第5期414-415,共2页
关键词 急性 白血病 ALL t细胞受体r 基因重排 IGH
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单细胞测序分析病毒性肺炎患者T细胞受体基因差异
10
作者 马恩泽 宁可 朱晓 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期796-801,共6页
目的:采用单细胞测序分析病毒性肺炎患者外周血T细胞受体(TCR)基因差异,探讨可能发病机制。方法:利用NCBI数据库获得数据,设置病例组和对照组进行实验。使用RStudio软件R语言分析单细胞测序数据,绘制表格和图片,得出结论。结果:病例组... 目的:采用单细胞测序分析病毒性肺炎患者外周血T细胞受体(TCR)基因差异,探讨可能发病机制。方法:利用NCBI数据库获得数据,设置病例组和对照组进行实验。使用RStudio软件R语言分析单细胞测序数据,绘制表格和图片,得出结论。结果:病例组和对照组TCR有显著差异。对TCRα链和β链V、J基因片段使用频率进行分析,其中病例组TRAV1-2、TRAV29/DV5、TRAJ33、TRAJ48、TRBV20-1、TRBV2、TRBJ2-3、TRBJ1-1等基因使用频率明显高于对照组(P<0.05)。进一步V-J基因组合分析显示,病例组α链V-J对使用频率最高的是TRAV1-2-J33,β链V-J使用频率最高的是TRBV20-1-J2-1,αβ双链V-J使用频率最高的是TRAV30-J24-TRBV3-1-J2-7。结论:病毒性肺炎患者外周血TCR基因发生了明显改变,可能与病毒免疫发病机制有关。 展开更多
关键词 细胞测序 病毒性肺炎 t细胞受体 基因
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CAR-T细胞治疗的临床关键问题和对策 被引量:2
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作者 陈新峰 刘莎莎 张毅 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第1期9-13,共5页
自2017年以来,已有12款嵌合抗原受体基因修饰T淋巴细胞(CAR-T细胞)产品相继被批准用于血液系统恶性肿瘤的治疗,包括复发性/难治性急性B淋巴细胞白血病、特定亚型B细胞淋巴瘤和多发性骨髓瘤。然而,CAR-T细胞疗法在应用过程中面临诸多挑战... 自2017年以来,已有12款嵌合抗原受体基因修饰T淋巴细胞(CAR-T细胞)产品相继被批准用于血液系统恶性肿瘤的治疗,包括复发性/难治性急性B淋巴细胞白血病、特定亚型B细胞淋巴瘤和多发性骨髓瘤。然而,CAR-T细胞疗法在应用过程中面临诸多挑战,如在治疗血液系统肿瘤中的抵抗、生产周期长、个体化/价格昂贵,在实体瘤中的肿瘤异质性强/抗原逃逸、浸润能力不足、免疫抑制微环境和反应性差等问题。随着肿瘤免疫学研究的深入和基因工程技术的发展,尝试了众多新策略来提升CAR-T细胞疗法的疗效和普适性。作者根据自身对该领域研究的认知,针对CAR-T细胞疗法的临床关键问题及其应对解决策略进行述评,为未来CAR-T细胞疗法的基础研究和临床转化提供重要思路。 展开更多
关键词 免疫治疗 嵌合抗原受体基因修饰t淋巴细胞 肿瘤微环境 实体瘤
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异基因造血干细胞移植受者T细胞受体β链CDR3谱型表达与巨细胞病毒激活 被引量:1
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作者 吴志华 荆敏 +5 位作者 梁韩英 杨镕 黄雅萍 陈晓明 胡建华 范骏 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期515-521,共7页
目的:探讨T细胞受体(TCR)β链可变区域(BV)的互补决定区(CDR3)谱型表达与异基因造血干细胞移植(HSCT)受者CMV激活的关系。方法:采用荧光定量PCR熔解曲线技术,扩增测序7例HSCT受者和3名健康对照者外周血单个核细胞的TCRBV家族... 目的:探讨T细胞受体(TCR)β链可变区域(BV)的互补决定区(CDR3)谱型表达与异基因造血干细胞移植(HSCT)受者CMV激活的关系。方法:采用荧光定量PCR熔解曲线技术,扩增测序7例HSCT受者和3名健康对照者外周血单个核细胞的TCRBV家族CDR3谱型;采用免疫组织化学法检测外周血白细胞中的CMV—pp65抗原;应用ELISA法检测HSCT受者血清中的CMV—IgM。分析TCRBV家族CDR3表达与CMV激活的相关性。结果:3名健康对照者24个TCRBV家族均表达。7例HSCT受者术后TCRBV家族CDR3测序结果显示为BV9、BV11、BV17、BV20等BV家族序列;TCRBV9含“QVRGGTDTQ”,TCRBV11含“VATDEQ”和“LGDEQ”,TCRBV17含“IGQGNTEA”,TCRBV20含“VGLAANEQ”等共有氨基酸序列。抗原检测结果显示:术后3个月7例受者中有5例受者抗原血症阳性,CMV—pp65阳性细胞数为(2—15)个/5×10^4白细胞。抗体检测结果显示:术后3个月7例受者中3例受者CMV-IgM阳性。TCRBV家族CDR3的表达在CMV抗原血症阳性受者与抗原血症阴性受者之间差异无统计学意义(均P〉0.05);但TCRBV11家族的表达在CMV-IgM阳性受者与CMV-IgM阴性受者之间差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:HSCT受者在T细胞免疫应答中有特定的TCRBV家族CDR3谱型,其中TCRBV11的表达可能与CMV激活有关。 展开更多
关键词 造血干细胞移植 基因 t细胞受体β/免疫学 互补决定区/免疫学 基因表达谱 细胞病毒 聚合酶反应
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人T细胞受体ζ链基因在昆虫细胞中的表达
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作者 韩扬 周春霞 +2 位作者 马文波 王冬梅 张叔人 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2003年第2期115-118,共4页
目的 :克隆人T细胞受体 (TCR) ζ链基因 ,运用昆虫杆状病毒系统表达该蛋白。方法 :用RT PCR从人外周血单个核细胞 (PBMC)中克隆TCRζ链cDNA ,构建到昆虫杆状病毒系统专用的Transfer载体中 ,并与杆状病毒共转染昆虫sf9细胞。用SDS PAGE... 目的 :克隆人T细胞受体 (TCR) ζ链基因 ,运用昆虫杆状病毒系统表达该蛋白。方法 :用RT PCR从人外周血单个核细胞 (PBMC)中克隆TCRζ链cDNA ,构建到昆虫杆状病毒系统专用的Transfer载体中 ,并与杆状病毒共转染昆虫sf9细胞。用SDS PAGE电泳和用小鼠抗人ζ链蛋白的单抗在流式细胞仪中鉴定重组蛋白的表达。 结果 :克隆的人TCRζ链cD NA插入昆虫杆状病毒载体 ,并在昆虫sf9细胞中特异地表达了蛋白。表达量约为细胞裂解上清液总蛋白的 11%。经SDS PAGE分析 ,其分子量大小与预期的重组ζ链蛋白一致。用胞内标记流式细胞仪检测证实 ,转染重组杆状病毒的昆虫细胞含有人的 ζ链蛋白。 结论 :从人PBMC中成功克隆了T细胞受体 ζ链的基因 ,并在昆虫细胞中获得高效表达。用生物工程技术获得TCRζ链蛋白有利于深入研究其生物学功能。 展开更多
关键词 t细胞受体 ζ基因 昆虫细胞 表达 杆状病毒
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鸡T细胞受体γ链基因位点重新测序和组装
14
作者 马俊平 杨犀 +3 位作者 律娜 刘飞 陈燕 朱宝利 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期568-574,共7页
动物T细胞受体(T cell receptor,TCR)基因由多个不同的高度同源的基因家族组成,通过全基因组测序很难获得准确的基因序列和排列位置。文章通过在NCBI中发布的鸡TCR的γ链(TCRγ或TRG)基因片段序列定位了鸡TRG基因所在区域,并确定了与鸡... 动物T细胞受体(T cell receptor,TCR)基因由多个不同的高度同源的基因家族组成,通过全基因组测序很难获得准确的基因序列和排列位置。文章通过在NCBI中发布的鸡TCR的γ链(TCRγ或TRG)基因片段序列定位了鸡TRG基因所在区域,并确定了与鸡TRG基因位点对应的细菌人工染色体(BAC)克隆(CH261-174P24)。对该克隆进行高通量的重新测序和组装后,得到含有10个scaffolds的基因组草图,较完整地覆盖了鸡TRG基因位点及两侧区域。通过PCR扩增和测序证明了scaffold内部结构的正确性,校正了鸡参考基因组TRG基因位点一个可变基因和一个缺口序列(gap)附近各一处错误序列,以及可变基因区多处序列错误。文章通过校正鸡参考基因组TRG基因位点的序列,为鸡TRA/D和TRB基因位点的基因组序列分析提供了新方法。 展开更多
关键词 t细胞受体(tCR) 伽马(tCRγ或tRG)基因位点 测序 组装
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原发性皮肤间变性大细胞淋巴瘤T细胞γ受体、IgH基因重排 被引量:6
15
作者 孔蕴毅 王坚 +4 位作者 束木娟 孙孟红 施达仁 许越香 孔今城 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期3-6,共4页
目的:探讨原发性皮肤间变性大细胞淋巴瘤(C-ALCL)临床病理特点和基因诊断方法。方法:对6例C-ALCL的临床表现、病理形态学和免疫组化染色进行观察,并用PCR方法对石蜡标本进行T细胞γ受体(TCRγ)和重链免疫球蛋白(IgH)基因重排检测。结果... 目的:探讨原发性皮肤间变性大细胞淋巴瘤(C-ALCL)临床病理特点和基因诊断方法。方法:对6例C-ALCL的临床表现、病理形态学和免疫组化染色进行观察,并用PCR方法对石蜡标本进行T细胞γ受体(TCRγ)和重链免疫球蛋白(IgH)基因重排检测。结果:临床起病以孤立性结节多见,病情进展缓慢,个别可自行消退。5例患者经治疗病情稳定,1例死于淋巴结及肝脏转移。镜下以75%以上CD30+间变性大细胞弥漫浸润真皮及皮下脂肪组织为特点,多数瘤细胞表达T细胞免疫表型。5例标本TCRγ基因重排阳性。结论:C-ALCL是少见的原发皮肤的低度恶性T细胞性淋巴瘤,预后较好。综合临床表现、组织病理改变、免疫组化及基因重排检测有助于本病的正确诊断。 展开更多
关键词 淋巴瘤 t细胞 皮肤 基因重排 t细胞γ受体 免疫球蛋白
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WT1多肽特异性T细胞受体基因转导正常T细胞的抗肺癌效应 被引量:2
16
作者 安军 蔡松旺 +1 位作者 李昀 张军航 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1319-1323,共5页
目的通过基因转导技术获得WT1多肽特异性TCR基因转导的正常外周CD8+T细胞,检测其对肺癌细胞的杀伤活性,探讨TCR基因转导用于过继性细胞治疗肺癌的可行性及安全性。方法通过克隆HLA-A*2402限制性WT1特异性细胞毒性T细胞(CTL)之TCR基因,... 目的通过基因转导技术获得WT1多肽特异性TCR基因转导的正常外周CD8+T细胞,检测其对肺癌细胞的杀伤活性,探讨TCR基因转导用于过继性细胞治疗肺癌的可行性及安全性。方法通过克隆HLA-A*2402限制性WT1特异性细胞毒性T细胞(CTL)之TCR基因,经构建逆转录病毒载体后转导WT1-TCR基因至正常外周CD8+T细胞;所获得的CD8+T细胞对靶细胞的杀伤效应经标准51Cr释放试验测定。结果 WT1-TCR基因转导后的正常外周CD8+T细胞显示出对WT1多肽负载的HLAA*2402+LCL细胞的特异性杀伤作用,同时TCR基因改造后的CD8+T细胞可特异性杀伤HLA-A*2402及WT1表达阳性的肺癌细胞株而不对HLA-A*2402表达阳性的正常细胞产生杀伤作用。结论这些数据论证了WT1-TCR基因转导正常外周T细胞具有与亲代CTL一致的特异性杀伤特性,提示该方法用于过继性细胞免疫疗法治疗肺癌具有可行性。 展开更多
关键词 细胞免疫治疗 t细胞受体 基因转导 细胞毒性t细胞 肺癌
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银屑病患者维生素D受体基因多态性与外周血NK细胞、T淋巴细胞亚群分析 被引量:3
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作者 朱慧琴 吴瑞勤 +2 位作者 陈玲娣 谢匡成 朱光斗 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期382-384,共3页
目的:探讨银屑病患者的维生素D受体(VDR)基因多态性与外周血自然杀伤(NK)细胞、T淋巴细胞亚群的关系。方法:采用聚合酶链反应(PCR)、限制性内切酶酶切技术(RFLP),以及流式细胞仪对112例无血缘关系的银屑病患者和108名无血缘关系的健康人... 目的:探讨银屑病患者的维生素D受体(VDR)基因多态性与外周血自然杀伤(NK)细胞、T淋巴细胞亚群的关系。方法:采用聚合酶链反应(PCR)、限制性内切酶酶切技术(RFLP),以及流式细胞仪对112例无血缘关系的银屑病患者和108名无血缘关系的健康人VDR基因型进行分析,并对其外周血NK、CD3、CD4、CD8细胞进行测定。结果:银屑病患者与健康人的VDR基因型的分布情况有明显不同,纯合子AA﹑杂合子Bb基因型在银屑病患者中出现的频率明显高于健康人。银屑病患者CD4、CD8细胞均显著高于健康人,而Bb基因型患者的NK细胞显著高于健康人,CD3细胞明显低于健康人。结论:纯合子AA基因型或杂合子Bb基因型的出现可能增加汉族人患银屑病的危险性。Bb基因型患者可能存在免疫缺陷。 展开更多
关键词 银屑病 维生素D受体 基因多态性 t淋巴细胞亚群 自然杀伤细胞
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鸡MHCⅠα和β2m链基因真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达 被引量:4
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作者 戴银 胡晓苗 +5 位作者 赵瑞宏 侯宏艳 沈学怀 潘孝成 周学利 张丹俊 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第8期1938-1943,共6页
为进一步研究主要组织相容性复合体Ⅰ类(major histocompatibility complex,MHCⅠ)分子在免疫应答中的作用机制,试验经PCR克隆获得MHCⅠα和β_2m链基因,随后插入带有荧光标签蛋白的真核表达载体,成功构建了重组质粒pEGFP-MHCⅠα和pmCh... 为进一步研究主要组织相容性复合体Ⅰ类(major histocompatibility complex,MHCⅠ)分子在免疫应答中的作用机制,试验经PCR克隆获得MHCⅠα和β_2m链基因,随后插入带有荧光标签蛋白的真核表达载体,成功构建了重组质粒pEGFP-MHCⅠα和pmCherry-MHCⅠβ_2m,并通过脂质体法转染293T真核表达细胞。荧光显微镜观察可见,MHCⅠα和β_2m分子主要分布于真核细胞的内膜系统,改变了与之融合的荧光蛋白在细胞内的定位。此外,Western blotting检测可见大小约68.3和41.3ku的目的蛋白反应带,表明重组质粒能够在293T细胞中顺利表达,且表达蛋白与鸡MHCⅠ类分子的相应抗体可发生特异性结合反应,具有良好的免疫学活性。 展开更多
关键词 鸡MHCⅠα基因 鸡MHCⅠβ2m基因 真核表达载体 293t细胞
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牙鲆T细胞抗原受体(TCR)β链同源cDNA的克隆 被引量:1
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作者 乌日琴 张培军 +2 位作者 李军 徐芃 徐永立 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第4期85-91,共7页
从牙鲆外周血淋巴细胞cDNA文库中克隆TCRβ1319bp同源cDNA序列并对其基因结构进行生物信息学分析。RT-PCR其编码区为942bp,编码314个氨基酸,编码区包括V、D、J和C区4个基因片段。TCRVβ片段主要包括从21~115位氨基酸残基的95个氨基酸序... 从牙鲆外周血淋巴细胞cDNA文库中克隆TCRβ1319bp同源cDNA序列并对其基因结构进行生物信息学分析。RT-PCR其编码区为942bp,编码314个氨基酸,编码区包括V、D、J和C区4个基因片段。TCRVβ片段主要包括从21~115位氨基酸残基的95个氨基酸序列,Jβ区与哺乳动物的Jβ区高度保守,在位于Vβ和Jβ之间的Dβ区中没有发现8碱基保守序列(GGACAGGG),CDR3β氨基酸序列为GTRILYE。牙鲆TCRCβ片段共有179个氨基酸残基,缺失位于Cβ细胞外区和临近区域的2个5~9氨基酸弹性区域。牙鲆TCRCβ片段的铰链区有6个氨基酸残基,缺少半胱氨酸位点,含Lys271保守位点。经RT-PCR检测,在脾、外周血和前肾中都发现TCRβ的表达,肌肉和肝中均未克隆到目的片段。 展开更多
关键词 牙鲆 t细胞抗原受体β tCR-β基因 cDNA末端快速扩增方法 t细胞受体 克隆 鱼类免疫学 疾病治疗
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磷脂抗体阳性红斑狼疮患者周围血T细胞受体基因表达初探 被引量:1
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作者 王元 沈南 +2 位作者 薛峰 裴军 陈顺乐 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第10期477-479,共3页
目的:初步探讨SLE 患者周围血T细胞受体Vβ基因是否存在偏移。方法:应用荧光PCR 定量方法对HLADRB1* 0803/DQA1 * 0103 的抗磷脂抗体阳性SLE患者4 例,病人对照干燥综合征(SS)1 例,正常对... 目的:初步探讨SLE 患者周围血T细胞受体Vβ基因是否存在偏移。方法:应用荧光PCR 定量方法对HLADRB1* 0803/DQA1 * 0103 的抗磷脂抗体阳性SLE患者4 例,病人对照干燥综合征(SS)1 例,正常对照3 例进行周围血TCRVβ的分析。结果:健康者和病人对照的TCR仅少数Vβ( <5 个Vβ基因) 有轻微增高表达。1 例非活动性SLE患者与对照组相仿,但3 例活动性SLE的TCRVβ基因谱呈多克隆激活,其中2 例有15 ~17 个Vβ基因呈中度以至高度表达,甚至Vβ/Cα高达1005%(Vβ4/Cα) 和2088 % (Vβ2/Cα) 。3 例活动性SLE的Vβ7、Vβ12、Vβ22 都呈现异常增高表达,与正常对照有显著差异( P < 005 ~001)。结论:选择性的TCRVβ基因的优势表达可能对SLE的发病和活动起极大的作用。 展开更多
关键词 磷脂 抗体 系统性红斑狼疮 t细胞 受体 基因表达
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