期刊文献+
共找到1,076篇文章
< 1 2 54 >
每页显示 20 50 100
藏猪猪细小病毒(XZ-PPV株)生物信息学分析
1
作者 叶霄霞 罗侣 +7 位作者 聂浩洋 刘福洲 李海洋 廉帅 纪菁蕊 韦明邦 商鹏 强巴央宗 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第8期53-61,共9页
为阐述藏猪猪细小病毒(PPV)非结构蛋白1(NS1)和结构蛋白2(VP2)的生物信息学特征,本试验对疑似患病西藏本土藏猪血液样本进行聚合酶链式反应(PCR)和全基因组测序鉴定,阳性样本进行病毒分离并观察细胞病变效应(CPE),绘制PPV分离株遗传进... 为阐述藏猪猪细小病毒(PPV)非结构蛋白1(NS1)和结构蛋白2(VP2)的生物信息学特征,本试验对疑似患病西藏本土藏猪血液样本进行聚合酶链式反应(PCR)和全基因组测序鉴定,阳性样本进行病毒分离并观察细胞病变效应(CPE),绘制PPV分离株遗传进化树进行亲缘性分析;运用在线网站和软件对PPV分离株的NS1和VP2蛋白氨基酸进行生物信息学分析,获取2种蛋白的理化性质和空间结构。结果显示,经PCR和全基因组测序鉴定,分离获得1株西藏本土PPV,其基因组序列的大小为4336 bp,根据地域特点命名为PPV/China/XZ(XZ-PPV);进化树分析结果显示,XZ-PPV与国内参考株KX233726TJ、KJ201927和德国参考株JN4005167a、JN4005178a等PPV参考株处于同一分支,亲缘关系最近;生物信息学分析结果显示,XZ-PPV的NS1和VP2蛋白都属于亲水性稳定蛋白,二者均无信号肽序列和跨膜结构域,在二级结构中均以无规则卷曲为主要空间结构,且这2种蛋白的空间构象均相对稳定。综上所述,本试验发现XZ-PPV与目前已知PPV毒株的氨基酸亲水性位点和蛋白空间结构存在差异,如NS1和VP2蛋白存在亲水区域的氨基酸位点以及二级结构(α螺旋和β转角等)所占比例存有异同,可为后续PPV的诊断和相关疫苗研发提供数据支撑,也可为其防控和治疗提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 细小病毒(ppv) 生物信息学分析 二级结构 NS1蛋白 VP2蛋白
在线阅读 下载PDF
猪细小病毒NS1蛋白单链抗体库的构建及筛选
2
作者 张丽萌 李闰婷 +6 位作者 宋月 聂晓宁 孔莉 单靖微 许盈盈 王林青 陈龙欣 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第7期3276-3285,共10页
【目的】筛选特异性抗猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)非结构蛋白NS1的单链抗体(scFv),为后续研究PPV奠定基础。【方法】通过原核表达系统诱导表达并纯化PPV NS1蛋白,利用重组NS1蛋白进行动物免疫,检测血清效价水平后,采集小鼠脾脏... 【目的】筛选特异性抗猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)非结构蛋白NS1的单链抗体(scFv),为后续研究PPV奠定基础。【方法】通过原核表达系统诱导表达并纯化PPV NS1蛋白,利用重组NS1蛋白进行动物免疫,检测血清效价水平后,采集小鼠脾脏提取总RNA并逆转录成cDNA,以其为模板扩增抗体重链可变区(variable domain of heavy chains,VH)和轻链可变区(variable domain of light chains,VL)序列;通过重叠延伸PCR扩增获得scFv基因,将其与酶切的pSEXRTL2噬菌体载体连接并电转化大肠杆菌XLⅠ-Blue感受态细胞,构建鼠源性抗PPV NS1的scFv抗体文库,并测定文库质量及库容量;利用噬菌体展示技术筛选对NS1蛋白具有特异性的scFv,通过ELISA和Western blotting检测抗原与阳性噬菌体克隆的亲和力。【结果】本试验成功表达纯化获得可溶性PPV NS1重组蛋白;构建的鼠源抗NS1 scFv文库的库容量为2.7×10^(7) CFU/mL,文库阳性率为87.5%;通过4轮“吸附-洗脱-富集”噬菌体筛选,最终获得2株与PPV NS1蛋白特异性结合的亲和力较高的scFv。【结论】本研究通过原核表达纯化重组蛋白NS1,成功构建鼠源抗PPV NS1蛋白的scFv噬菌体文库,利用噬菌体展示技术筛选获得了可与NS1重组蛋白特异性结合的scFv。试验结果为进一步研发抗PPV药物及诊断试剂提供依据。 展开更多
关键词 细小病毒(ppv) 单链抗体(scFv) NS1蛋白 噬菌体文库
在线阅读 下载PDF
猪细小病毒感染及复制影响因素的研究进展
3
作者 胡雯雯 汤德元 +6 位作者 曾智勇 王彬 黄涛 周敏 毛茵茗 周飘 何松 《动物医学进展》 北大核心 2025年第5期112-117,共6页
猪细小病毒感染(PPI)是一种由猪细小病毒(PPV)引起的猪繁殖障碍的病毒性传染病,呈季节性流行,以春、夏产仔季多发;PPV对各个年龄段的猪群都易感,特别是母猪与仔猪,能与猪圆环病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等混合感染;还存在病毒变异,毒... 猪细小病毒感染(PPI)是一种由猪细小病毒(PPV)引起的猪繁殖障碍的病毒性传染病,呈季节性流行,以春、夏产仔季多发;PPV对各个年龄段的猪群都易感,特别是母猪与仔猪,能与猪圆环病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等混合感染;还存在病毒变异,毒株致病力增强的风险,对全世界的养猪业构成巨大威胁,造成巨大经济损失。随着我国养猪业集约化、规模化发展,PPI的发病率呈现上升趋势,给我国PPV防控与净化工作带来严峻挑战。目前,PPI尚无特效治疗方法,临床上主要通过接种疫苗预防感染,但预防效果并不理想,影响了养猪业的健康发展。基于此,论文对调控猪细小病毒感染及复制的各类因素进行综述,以期为开发高效的新型药物或疫苗提供参考。 展开更多
关键词 细小病毒 感染 复制
在线阅读 下载PDF
猪细小病毒病的治疗与预防措施
4
作者 郭力伟 孙新阁 +1 位作者 王柳杰 乔利军 《特种经济动植物》 2025年第5期80-82,共3页
猪细小病毒病是一种由猪细小病毒引起的母猪繁殖障碍性疾病,其临床特征主要表现为妊娠母猪发生流产、死胎或木乃伊胎等情况,对规模化养猪场影响显著。成年猪和新生仔猪感染病毒后通常不表现出明显的临床症状,但可成为病毒携带者,传播病... 猪细小病毒病是一种由猪细小病毒引起的母猪繁殖障碍性疾病,其临床特征主要表现为妊娠母猪发生流产、死胎或木乃伊胎等情况,对规模化养猪场影响显著。成年猪和新生仔猪感染病毒后通常不表现出明显的临床症状,但可成为病毒携带者,传播病毒并维持其循环,对猪群健康构成持续威胁。因此,对该病的流行病学、临床症状、诊断方法和防治措施进行系统研究,是制定科学防控策略并实现疾病有效控制的关键。 展开更多
关键词 细小病毒 流行病学 诊断 防治措施
在线阅读 下载PDF
养殖场中猪细小病毒检测与分析
5
作者 高清波 《中国畜牧业》 2025年第7期119-120,共2页
近年来,随着我国畜牧业经济的快速发展,山东省作为养殖业大省,生猪养殖数量呈逐年上升趋势,已成为山东地区主要的畜牧产业之一。相关统计数据显示,在生猪养殖过程中,死胎、流产等疾病频繁发生,严重影响养殖业的健康发展。研究表明,引起... 近年来,随着我国畜牧业经济的快速发展,山东省作为养殖业大省,生猪养殖数量呈逐年上升趋势,已成为山东地区主要的畜牧产业之一。相关统计数据显示,在生猪养殖过程中,死胎、流产等疾病频繁发生,严重影响养殖业的健康发展。研究表明,引起母猪流产的因素较多,包括病毒性感染、细菌性感染、衣原体感染、钩端螺旋体感染及黄曲霉毒素中毒等。 展开更多
关键词 细小病毒 病毒性感染 养殖 分析 检测 流产
在线阅读 下载PDF
猪细小病毒病的诊断与科学防控
6
作者 温延珍 张庆辉 《吉林畜牧兽医》 2025年第4期16-18,共3页
猪细小病毒病是一种由猪细小病毒引起的急性传染病,主要感染妊娠母猪并严重影响养猪业的健康发展。病原体具有高传染性和致病性,可通过直接接触和间接接触传播,也可以通过胎盘垂直传播,但当前尚无特效治疗药物。因此,科学的诊断与防控... 猪细小病毒病是一种由猪细小病毒引起的急性传染病,主要感染妊娠母猪并严重影响养猪业的健康发展。病原体具有高传染性和致病性,可通过直接接触和间接接触传播,也可以通过胎盘垂直传播,但当前尚无特效治疗药物。因此,科学的诊断与防控措施至关重要。病原体检测和流行病学调查是基础,及时、快速的诊断能及时发现疾病,通过科学免疫接种,加强疫情监测和卫生管理、控制交通流通、严格隔离和消毒等措施,能够有效防控本病的发生率。本文将探讨猪细小病毒病的诊断与防控措施,为养猪业提供科学依据和指导,保障猪群健康与养殖业发展。 展开更多
关键词 细小病毒 流行特点 临床症状 诊断 科学防控
在线阅读 下载PDF
猪细小病毒病诊断与防控技术分析
7
作者 游欢欢 《中国畜牧业》 2025年第8期101-102,共2页
现阶段,我国猪养殖业对畜牧经济的发展具有极为关键的影响,重视并积极推动猪养殖业的发展十分重要。在生猪养殖过程中,受养殖环境、卫生消毒状况、疫苗接种情况及营养水平等多种因素影响,大大增加了生猪感染细小病毒病(PPV)的风险。患... 现阶段,我国猪养殖业对畜牧经济的发展具有极为关键的影响,重视并积极推动猪养殖业的发展十分重要。在生猪养殖过程中,受养殖环境、卫生消毒状况、疫苗接种情况及营养水平等多种因素影响,大大增加了生猪感染细小病毒病(PPV)的风险。患病个体会出现明显的繁殖障碍,如公猪不育、母猪流产和死胎等,给畜牧业经济带来较大负面影响。因此,重视并积极开展细小病毒病的诊断与防控工作尤为关键。 展开更多
关键词 细小病毒 养殖 繁殖障碍 防控技术
在线阅读 下载PDF
猪细小病毒病的诊断及防治
8
作者 慈强 《畜禽业》 2025年第4期73-75,共3页
通过探讨猪细小病毒病的诊断及防治方法以降低其对养猪业带来的经济损失。从病原学入手,阐述了猪细小病毒病的流行病学特征、临床症状和病理变化,并在此基础上分析了该病的诊断方法,提出包括加强饲养管理、严格引种检疫以及合理应用疫... 通过探讨猪细小病毒病的诊断及防治方法以降低其对养猪业带来的经济损失。从病原学入手,阐述了猪细小病毒病的流行病学特征、临床症状和病理变化,并在此基础上分析了该病的诊断方法,提出包括加强饲养管理、严格引种检疫以及合理应用疫苗进行免疫接种等综合防控措施和科学治疗方法。以提高猪群的健康水平和养殖效益,为养猪业防控猪细小病毒病提供理论依据和实践指导。 展开更多
关键词 细小病毒 病原学 流行病学 诊断方法 防治措施
在线阅读 下载PDF
猪细小病毒病研究进展 被引量:8
9
作者 刘运超 陈玉梅 +3 位作者 杨苏珍 魏蔷 郝慧芳 柴书军 《动物医学进展》 北大核心 2024年第3期107-110,共4页
猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)是一种无囊膜DNA病毒,主要引起母猪繁殖障碍。该病毒在全世界广泛流行,我国猪场PPV感染率高达90%以上,给养猪业带来巨大经济损失。PPV经口、鼻传播,主要侵染猪的生殖器官,引起母猪的死胎、木乃伊胎... 猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)是一种无囊膜DNA病毒,主要引起母猪繁殖障碍。该病毒在全世界广泛流行,我国猪场PPV感染率高达90%以上,给养猪业带来巨大经济损失。PPV经口、鼻传播,主要侵染猪的生殖器官,引起母猪的死胎、木乃伊胎和公猪的精液质量下降。临床采用接种疫苗的方式进行防控,起到了一定的效果。论文对病毒的基因组和蛋白特征、流行病学和疫苗研究进行综述,以期为PPV的基础研究和疫苗开发提供参考。 展开更多
关键词 细小病毒 VLP组装 病毒抗原表位 VP2蛋白
在线阅读 下载PDF
猪细小病毒1~7型全基因组遗传变异 被引量:2
10
作者 华涛 常晨 +2 位作者 李倩文 张道华 唐波 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第10期2193-2203,共11页
猪细小病毒1型(porcine parvovirus type 1,PPV1)是母猪繁殖失败的主要病原体,即通常所称的猪细小病毒。2001—2016年,在猪体相继鉴定出了6种新型猪细小病毒,分别被命名为猪细小病毒2~7型(PPV2~PPV7型)。为确定中国江苏地区PPV1~PPV7型... 猪细小病毒1型(porcine parvovirus type 1,PPV1)是母猪繁殖失败的主要病原体,即通常所称的猪细小病毒。2001—2016年,在猪体相继鉴定出了6种新型猪细小病毒,分别被命名为猪细小病毒2~7型(PPV2~PPV7型)。为确定中国江苏地区PPV1~PPV7型感染情况和遗传变异特征,采用PPV1~PPV7型常规PCR检测方法,从江苏地区猪场收集到2株PPV1、2株PPV2,以及PPV3、PPV4、PPV5、PPV6、PPV7各1株阳性组织病料,对这9株阳性组织病料进行全基因组测序,采用生物信息分析软件与GenBank中PPV1~PPV7型参考毒株进行比较,系统分析全基因组和衣壳蛋白2(VP2)的遗传进化分子特征。结果表明,PPV1~PPV7型测序毒株与GenBank中同型毒株全基因组同源性均高于97%,而不同型基因组间同源性均小于60.40%。PPV1~PPV7型测序毒株的VP2氨基酸序列与同型毒株同源性均高于97%,但不同型毒株之间差异巨大,PPV4与PPV5有55%同源性,其他毒株之间同源性更低,仅为9%~17%。毒力分析结果表明,2株PPV1流行株与PPV1强毒株Kresse存在相似的毒力位点,且存在5处特有的突变,可能为高毒力毒株。研究结果有助于更好地了解中国猪群中PPV1~PPV7型分子流行病学并制定科学的防治措施。 展开更多
关键词 细小病毒 PCR检测 基因组 衣壳蛋白2 遗传变异 毒力分析
在线阅读 下载PDF
2021-2022年河南省猪细小病毒1~7型检测与分析 被引量:2
11
作者 郭全海 许夕雅 +4 位作者 石蒙蒙 杨寒 高冬生 王永生 陈陆 《动物医学进展》 北大核心 2024年第6期123-129,共7页
旨在了解猪细小病毒1~7型(PPV1~PPV7)在河南省的流行情况。利用PCR检测了2021-2022年河南省猪场送检的748份样品,并对检测数据进行了分析。结果表明,PPV1/2/3/5/6/7在河南省各地区一年四季广泛流行,而秋、冬季节是感染高峰期,PPV2(16.0... 旨在了解猪细小病毒1~7型(PPV1~PPV7)在河南省的流行情况。利用PCR检测了2021-2022年河南省猪场送检的748份样品,并对检测数据进行了分析。结果表明,PPV1/2/3/5/6/7在河南省各地区一年四季广泛流行,而秋、冬季节是感染高峰期,PPV2(16.04%)的感染率最高,PPV7(15.11%)次之。产房仔猪未检出PPV1/3/5,PPV2/6/7在各生长阶段猪群中均有检出,患呼吸系统疾病的保育和育肥猪中PPV各型检出率均较高,尤以PPV2常见。PPV2和PPV7在口腔液、血样、肺脾淋巴结中检出率均较高,血样中较低,PPV3常存在于血清和组织中,PPV5多见于口腔液,PPV6多见于血样。研究证实,除PPV4未检出外,其他6种PPV在河南均存在,并且多与其他病原混合感染,PPV2、PPV7可与多种病原混合感染,PPV7与PCV2混合感染最常见。 展开更多
关键词 细小病毒1~7型 检测 分析
在线阅读 下载PDF
猪细小病毒血凝抑制试验抗原、阳性血清与阴性血清的制备与鉴定 被引量:1
12
作者 李琰 李佳昕 +5 位作者 李芳韬 李琪 吴睿智 朱元源 徐璐 刘业兵 《中国兽药杂志》 2024年第4期14-19,共6页
猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)血凝抑制试验抗原、阳性血清和阴性血清在猪细小病毒制品的效力检验中不可或缺,对猪细小病毒相关生物制品的质量控制至关重要。试验采用PPV 7909株病毒同步接种PK-15细胞制备血凝抑制试验抗原,用制... 猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)血凝抑制试验抗原、阳性血清和阴性血清在猪细小病毒制品的效力检验中不可或缺,对猪细小病毒相关生物制品的质量控制至关重要。试验采用PPV 7909株病毒同步接种PK-15细胞制备血凝抑制试验抗原,用制备的抗原乳化后免疫豚鼠制备阳性血清,同时用未免疫的阴性豚鼠制备阴性血清。对抗原、阳性血清和阴性血清进行鉴定,结果表明,制备的PPV血凝抑制试验抗原HA效价达1∶512;阳性血清HI效价达1∶1024;阴性血清HI效价小于1∶8,且特异性均良好。用制备的HI试验抗原与不同PPV疫苗株的阳性血清进行HI试验,同时,用制备的阳性血清、阴性血清与不同PPV疫苗株的灭活抗原进行HI试验。结果表明,制备的抗原与阳性血清具备良好的血清学交叉反应性,制备的阴性血清与不同疫苗株抗原均呈阴性反应,可用于PPV制品的统一评价。 展开更多
关键词 细小病毒 血凝抑制试验抗原 阳性血清 生物制品 检验
在线阅读 下载PDF
用ELISA检测猪细小病毒(PPV)血清抗体 被引量:10
13
作者 刘俊辉 郭福生 +7 位作者 龚振华 王娟 李葳 郑增忍 蒋正军 王玉东 孙淑芳 张衍海 《中国动物检疫》 CAS 2004年第2期26-27,共2页
采用差速离心、透析、聚乙二醇 (PEG)浓缩方法纯化猪细小病毒 (PPVDK7113)制备抗原。用纯化的PPV抗原包被聚苯乙烯微量反应板 ,建立了检测PPV血清抗体的间接ELISA。抗原最佳包被浓度为6.3μg/ml,被检血清最佳稀释度为1∶200。用建立的EL... 采用差速离心、透析、聚乙二醇 (PEG)浓缩方法纯化猪细小病毒 (PPVDK7113)制备抗原。用纯化的PPV抗原包被聚苯乙烯微量反应板 ,建立了检测PPV血清抗体的间接ELISA。抗原最佳包被浓度为6.3μg/ml,被检血清最佳稀释度为1∶200。用建立的ELISA检测山东、东北、广东等地的426份血清 ,结果阳性率为36.2%。与华中农大病毒室提供的猪细小病毒乳胶凝集试验试剂盒相比 ,其结果符合率为98.6 %。通过阻断试验、交叉试验 ,说明本方法在特异性上达到了较为满意的结果 ,且易于操作 ,适用于血清学定性诊断。 展开更多
关键词 ELISA检测 细小病毒 ppv 血清抗体 阳性血清
在线阅读 下载PDF
猪细小病毒PPV-SD1株VP2全基因原核表达及间接ELISA检测方法的建立 被引量:5
14
作者 王金良 沈志强 +5 位作者 唐娜 曲光刚 魏凤 任艳玲 肖跃强 管宇 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2008年第7期22-24,共3页
关键词 间接ELISA 细小病毒 VP2蛋白 ELISA检测方法 原核表达 ppv 全基因 繁殖障碍
在线阅读 下载PDF
猪细小病毒弱毒株(PPV_(s-1)A)及其疫苗的免疫效力 被引量:10
15
作者 叶向阳 张婉华 +4 位作者 潘雪珠 徐平 曹伟明 徐亚芬 严贞秀 《上海农业学报》 CSCD 1996年第1期9-13,共5页
以PPVs-1A株弱毒肌肉接种后备母猪2头,每头注射1mL。接种后第8天的HI价为128~256。以后抗体上升,攻毒前HI价平均为1280。对照母猪2头HI抗体均为阴性。4头母猪配种后,怀孕至38~40d时攻毒,结果... 以PPVs-1A株弱毒肌肉接种后备母猪2头,每头注射1mL。接种后第8天的HI价为128~256。以后抗体上升,攻毒前HI价平均为1280。对照母猪2头HI抗体均为阴性。4头母猪配种后,怀孕至38~40d时攻毒,结果从接种母猪的血浆中没有分离到病毒,而对照母猪的血浆中则分离到病毒。攻毒40d后宰杀,接种母猪共怀25头胎猪,从它们的脏器中均没有分离到病毒,而对照母猪共怀23头胎猪,其中有10头的脏器分离到病毒。4批弱毒苗免疫11头5.5月龄阴性猪,1周内全部产生抗体反应,1个月时平均HI价为599,免疫后1~7个月攻毒,结果免疫猪的血浆和内脏均未分离到病毒,相反,8头对照猪在攻毒前HI价保持阴性,攻毒后1周HI1024~4096,从血浆和内脏都分离到病毒。试验证明,弱毒苗免疫持续期至少为7个月;保存期11个月。 展开更多
关键词 细小病毒 弱毒株 疫苗 免疫性
在线阅读 下载PDF
猪细小病毒(PPV)SC1株非结构蛋白NS_1基因的克隆和序列分析 被引量:7
16
作者 殷华平 郭万柱 +1 位作者 徐志文 罗燕 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期504-508,共5页
本文根据GenBank中PPV NADL-2株病毒基因组序列用Oligo6.0设计了一对引物,以抽提的PPV-SC1 RF-DNA为模板,通过PCR扩增出长约2.2kb的片段,将其插入克隆载体质粒pMD 18-T的EcoRV酶切位点处,构建了重组质粒pPNS1并测序.密码子偏向性分析结... 本文根据GenBank中PPV NADL-2株病毒基因组序列用Oligo6.0设计了一对引物,以抽提的PPV-SC1 RF-DNA为模板,通过PCR扩增出长约2.2kb的片段,将其插入克隆载体质粒pMD 18-T的EcoRV酶切位点处,构建了重组质粒pPNS1并测序.密码子偏向性分析结果表明PPV-SC1 NS1基因在同一氨基酸的不同密码子的选择上存在一定的偏向性,主要是以A结尾的密码子;用Bioedit和swiss TMPRED软件预测PPV-SC1 NS1的跨膜区,并没有得到有显著意义的跨膜区的存在;根据基于motif数据库的结构域预测,PPV-SC1 NS1的第393~415位氨基酸残基存在潜在的ATP/GTP结合位点,该蛋白还存在16个蛋白激酶磷酸化位点,21个酪蛋白激酶2磷酸化位点,3个cAMP-/cGMP依赖蛋白激酶磷酸化位点,PPV-SC1 NS1蛋白与POX-D5(痘病毒D5蛋白)具有一致的保守结构域,推测NS1可能与POX-D5有类似的功能. 展开更多
关键词 细小病毒 非结构蛋白 NS1基因 生物信息学
在线阅读 下载PDF
家蚕中猪细小病毒病毒样颗粒的制备 被引量:1
17
作者 吕慧芳 王雅诗 +7 位作者 张刘涛 赵丽 彭志锋 陈忠杰 宋幸辉 王瑞宁 卢婷婷 董望 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期20-25,共6页
为了防控猪细小病毒(PPV)感染,本试验利用家蚕杆状病毒表达系统制备PPV病毒样颗粒(VLPs)。首先扩增PPV结构蛋白VP2基因,克隆至pFastBacⅠ载体中,构建转移载体pFastBacⅠ-VP2,将转移载体pFastBacⅠ-VP2转化大肠杆菌制备重组杆粒(Bacmid)... 为了防控猪细小病毒(PPV)感染,本试验利用家蚕杆状病毒表达系统制备PPV病毒样颗粒(VLPs)。首先扩增PPV结构蛋白VP2基因,克隆至pFastBacⅠ载体中,构建转移载体pFastBacⅠ-VP2,将转移载体pFastBacⅠ-VP2转化大肠杆菌制备重组杆粒(Bacmid)。将Bacmid转染家蚕卵巢(BmN)细胞,制备重组杆状病毒。利用Western blot鉴定VP2蛋白的表达,采用透射电子显微镜观察PPV VLPs形态,血凝试验检测PPV VLPs的效价。将含有PPV VP2基因的重组杆状病毒注射家蚕幼虫制备PPV VLPs,并对家蚕中PPV VLPs进行鉴定。结果显示:BmN细胞样品和家蚕幼虫样品的Western blot检测,均可见64 kDa处存在VP2目的条带;在透射电子显微镜下可观察到约23 nm的PPV VLPs。BmN细胞中制备的PPV VLPs的血凝效价为1∶2~6,家蚕中制备的PPV VLPs的血凝效价为1∶2~9,其效价高于BmN细胞中制备的PPV VLPs效价。结果表明,本试验在家蚕中成功制备PPV VLPs,且具有良好的生物学活性,为PPV VLPs疫苗的研发提供了数据支持。 展开更多
关键词 细小病毒 病毒样颗粒 VP2 家蚕
在线阅读 下载PDF
猪细小病毒(PPV)SD1株NS1基因的克隆与原核表达 被引量:5
18
作者 谢金文 沈志强 +3 位作者 王金良 任艳玲 管宇 苗立中 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第7期2679-2681,共3页
[目的]为建立猪细小病毒的快速诊断方法提供理论依据。[方法]根据GenBank上猪细小病毒基因组序列和原核表达质粒pET30a(+)多克隆位点序列设计1对引物,应用PCR技术扩增出猪细小病毒SD1株NS1基因全序列,对阳性重组质粒进行测序和同源... [目的]为建立猪细小病毒的快速诊断方法提供理论依据。[方法]根据GenBank上猪细小病毒基因组序列和原核表达质粒pET30a(+)多克隆位点序列设计1对引物,应用PCR技术扩增出猪细小病毒SD1株NS1基因全序列,对阳性重组质粒进行测序和同源性比较。构建原核表达重组质粒pET 30a/NS1,并在大肠杆菌中进行诱导表达。[结果]通过PCR扩增获得2 208 bp目的片段。所克隆NS1基因与已报道的PPV相应基因的核苷酸同源性为97.3%-99.4%,表明NS1基因具有高度保守性,但在偏3′端连续缺失12个碱基。所克隆的PPVNS1基因在原核细胞中成功表达,其表达产物主要以包涵体形式存在。[结论]SDS-PAGE检测结果表明PPVNS1蛋白的分子量为86 kD。 展开更多
关键词 细小病毒 NS1基因 克隆 原核表达
在线阅读 下载PDF
猪细小病毒PPV-SD1株VP2基因重组腺病毒表达载体的构建 被引量:3
19
作者 王金良 沈志强 +2 位作者 管宇 曲光刚 唐娜 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2008年第8期100-103,共4页
通过细菌内同源重组的方法成功构建了含有猪细小病毒(PPV)VP2基因的重组腺病毒表达载体。将VP2基因亚克隆连接到腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV上,并将重组质粒pShuttle-CMV/VP2用Pme I线性化后转化至携带有腺病毒骨架载体pAdEasy-1的大肠... 通过细菌内同源重组的方法成功构建了含有猪细小病毒(PPV)VP2基因的重组腺病毒表达载体。将VP2基因亚克隆连接到腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV上,并将重组质粒pShuttle-CMV/VP2用Pme I线性化后转化至携带有腺病毒骨架载体pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞,经细菌内同源重组产生重组腺病毒质粒pAdEasy-VP2,为进一步研究PPV腺病毒活载体疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 细小病毒 VP2基因 重组腺病毒
在线阅读 下载PDF
猪细小病毒的研究 Ⅲ.对流免疫电泳检测PPV抗原和抗体 被引量:4
20
作者 王川庆 臧为民 +5 位作者 冯杰 郭清贵 杨付见 宋永军 鲁闪电 刘凤梅 《中国畜禽传染病》 CSCD 1996年第5期39-41,共3页
利用对流免疫电泳技术检测猪细小病毒(PPV)抗原和抗体的结果初步表明,该法具有较强的特异性和可重复性,在pH8.6、离子浓度0.1mol、电流强度4mA的条件下,于琼脂凝胶中1~1.5小时、于琼脂糖凝胶中1.5~2小时,抗原和抗体孔间可出现了3条清... 利用对流免疫电泳技术检测猪细小病毒(PPV)抗原和抗体的结果初步表明,该法具有较强的特异性和可重复性,在pH8.6、离子浓度0.1mol、电流强度4mA的条件下,于琼脂凝胶中1~1.5小时、于琼脂糖凝胶中1.5~2小时,抗原和抗体孔间可出现了3条清晰沉淀线。中间一条沉淀线粗而致密。琼脂凝胶优于琼脂糖凝胶检测效果。与现有方法相比,对流免疫电泳的突出特点是简便、快速、稳定、省力,抗原和血清不需作任何处理,因此可望代替现有的常规检测方法即血凝(HA)和血凝抑制(HI)法而应用于生产实际。对一些有关问题进行了讨论。 展开更多
关键词 细小病毒 对流免疫电泳 ppv 抗原 抗体
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 54 下一页 到第
使用帮助 返回顶部