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表达猪圆环病毒2d型Cap蛋白的重组猪伪狂犬病病毒的构建
1
作者 焦显芹 马晓 +3 位作者 田润博 刘颖 马世杰 陈红英 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第5期2278-2286,共9页
【目的】利用同源重组技术和CRISPR/Cas9基因编辑技术,获得表达猪圆环病毒2d型(PCV2d)Cap蛋白的重组猪伪狂犬病病毒(PRV),为开发预防和控制PCV2d和PRV感染的疫苗提供技术支持。【方法】基于PCV2d KF1株ORF 2基因序列设计1对特异引物,以P... 【目的】利用同源重组技术和CRISPR/Cas9基因编辑技术,获得表达猪圆环病毒2d型(PCV2d)Cap蛋白的重组猪伪狂犬病病毒(PRV),为开发预防和控制PCV2d和PRV感染的疫苗提供技术支持。【方法】基于PCV2d KF1株ORF 2基因序列设计1对特异引物,以PCV2d KF1株DNA为模板扩增ORF 2基因。经限制性内切酶Bam HⅠ酶切后将ORF 2基因引入到含有绿色荧光蛋白(EGFP)基因的PRV转移载体pG中,获得重组质粒pG-PCV2d-EGFP。运用转染试剂ZLip2000将质粒pG-PCV2d-EGFP和PRV三基因缺失毒株gE^(-)/gI^(-)/TK^(-)PRV NY DNA共转染至ST单层细胞中拯救重组病毒,并利用CRISPR/Cas9 EGFP基因双敲除质粒敲除重组病毒中EGFP基因。经EGFP基因测序、PCR和Western blotting对获得的重组病毒进行鉴定。【结果】经8轮绿色荧光蚀斑筛选,纯化得到重组病毒rPRV-PCV2d-EGFP。CRISPR/Cas9 EGFP基因双敲除质粒敲除EGFP基因后,经3轮筛选没有绿色荧光的蚀斑,获得重组病毒rPRV-PCV2d。EGFP基因测序结果表明,rPRV-PCV2d中EGFP基因被剪截了1251 bp,PCR和Western blotting结果显示,rPRV-PCV2d携带的ORF 2基因能在ST细胞中转录与表达。【结论】本研究成功构建表达PCV2d Cap蛋白的重组病毒rPRV-PCV2d,为进一步研制重组活载体疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 猪伪狂犬病病毒 重组病毒活载体疫苗
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猪伪狂犬病病毒gB抗体竞争酶联免疫检测方法的建立
2
作者 刘梅芬 马震原 +9 位作者 王淑娟 闫若潜 班付国 赵雪丽 谢彩华 王东方 柴茂 刘影 杨海波 王翠 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第1期141-147,共7页
为建立猪伪狂犬病病毒gB抗体竞争酶联免疫检测方法,以大肠杆菌表达并纯化的gB蛋白为包被抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗gB蛋白单克隆抗体为酶标抗体,经各反应条件的优化,成功建立了PRV gB抗体的竞争酶联免疫检测方法,并对该方法的... 为建立猪伪狂犬病病毒gB抗体竞争酶联免疫检测方法,以大肠杆菌表达并纯化的gB蛋白为包被抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗gB蛋白单克隆抗体为酶标抗体,经各反应条件的优化,成功建立了PRV gB抗体的竞争酶联免疫检测方法,并对该方法的特异性、敏感性、重复性进行了评估。PRV gB抗体竞争酶联免疫检测方法经优化后的最佳条件为:gB蛋白的最佳包被浓度为0.25μg/mL、包被量100μL/孔,酶标抗体的最佳稀释浓度为1∶1000,样品检测时间为30 min(抗原抗体反应)+15 min(底物显色);敏感性结果显示,PRV gB标准阳性血清(Z89)经1∶512稀释后经检测仍为阳性;特异性结果显示,猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、大肠杆菌抗体阳性血清的检测结果均为阴性;批内、批间重复试验结果显示,批内、批间变异系数分别为0.24%~9.45%、0.58%~11.61%,均小于12%。通过对采集的184份临床血清检测结果进行比较,该方法与商品化试剂盒的阳性符合率为96.23%,阴性符合率为96.95%,总符合率96.74%。本研究在国内首次建立PRV gB竞争酶联免疫检测方法,为PRV gB抗体快速检测提供了可靠的技术手段。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 gB蛋白 竞争酶联免疫
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猪瘟病毒E2基因部分表位区重组猪伪狂犬病病毒的构建及生物学特性研究
3
作者 王林青 张刘辉 +3 位作者 陈曦艋 马世杰 宋月 陈红英 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第4期1815-1824,共10页
【目的】猪瘟病毒(Classical swine fever virus, CSFV)和猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)是当前影响生猪产业发展的两种重要病原,目前无高效的药物治疗方法,主要依靠疫苗接种进行预防。本试验旨在构建含有CSFV E2基因部分表... 【目的】猪瘟病毒(Classical swine fever virus, CSFV)和猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)是当前影响生猪产业发展的两种重要病原,目前无高效的药物治疗方法,主要依靠疫苗接种进行预防。本试验旨在构建含有CSFV E2基因部分表位区的重组PRV毒株,并探究其生物学特性,为开发同时预防CSFV和PRV的二联疫苗提供参考。【方法】首先使用基因工程技术将包含CSFV E2蛋白B/C/D/A 4个表位区的一段基因插入pG-EGFP重组质粒的BamHⅠ位点,构建重组质粒pG-E2AD-EGFP;然后将质粒转染已接种PRV三基因缺失毒株rPRV NY-gE^(-)/gI^(-)/TK^(-)的ST细胞,在ST细胞内发生同源重组,利用蚀斑纯化法拯救出带绿色荧光蛋白的重组病毒rPRV-E2AD-EGFP。使用CRISPR/Cas9敲除载体敲除EGFP基因,经蚀斑纯化得到无荧光的重组病毒rPRV-E2AD。利用PCR扩增和Western blotting检测重组病毒rPRV-E2AD的E2基因A-D表位区表达情况。通过半数组织培养感染剂量(TCID50)法检测不同理化性质处理后病毒增殖情况,对重组病毒培养特性、理化特性进行评价。【结果】通过细胞内同源重组和病毒蚀斑纯化,得到了同时表达CSFV E2AD抗原和EGFP的重组病毒rPRV-E2AD-EGFP。通过CRISPR/Cas9技术敲除EGFP基因,得到了无EGFP基因表达的重组病毒rPRV-E2AD。Western blotting检测结果显示,该毒株表达蛋白大小约27 ku,与预期CSFV E2AD抗原大小一致。rPRV-E2AD毒株与亲本株在ST、IPEC-J2、PK-15、Vero细胞中生长特性基本一致,均在感染后12 h引起细胞融合,36 h出现细胞脱落。理化特性检测结果显示,重组毒株与亲本株在相同理化条件处理下,培养特性相似。【结论】本研究成功获得重组病毒rPRV-E2AD,且外源基因不影响亲本株的增殖特性,试验结果为研发重组CSFV E2基因活载体疫苗提供了候选毒株,也为PRV活载体疫苗的开发提供了研究基础。 展开更多
关键词 猪瘟病毒(CSFV) 伪狂犬病病毒(prv) 重组病毒 E2基因
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猪伪狂犬病病毒gE基因遗传变异及密码子使用偏好性分析
4
作者 陈志安 章蓓雯 +9 位作者 何敏嘉 陈美椿 翁成桢 黄欣欣 李鸿喜 曾仲文 陈宝良 邱龙新 陈洪博 李晓冰 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第7期3264-3275,共12页
【目的】了解国内猪伪狂犬病病毒(Porcine pseudorabies virus,PRV)的流行现状、流行毒株的遗传情况以及PRV gE基因的密码子使用偏好性和影响因素。【方法】本研究针对2019—2023年中国分离到的106条PRV gE基因序列,利用Mega 7.0软件构... 【目的】了解国内猪伪狂犬病病毒(Porcine pseudorabies virus,PRV)的流行现状、流行毒株的遗传情况以及PRV gE基因的密码子使用偏好性和影响因素。【方法】本研究针对2019—2023年中国分离到的106条PRV gE基因序列,利用Mega 7.0软件构建系统发育树,通过Launch DnaSP 6.0软件进行基因选择压力和基因流分析,采用CodonW 1.4.2和SPSS 27.0.1软件进行密码子分析。【结果】遗传进化分析结果表明,国内流行的PRV毒株为基因Ⅱ型,可进一步分为基因型2.1和基因型2.2。基因流分析显示,基因Ⅱ型中基因型2.1和2.2核苷酸多样性(Pi)分别为0.006和0.002;种群间遗传分化系数(Fst)为0.381,同义替换率(Ks)和基因流量化指标(Z)分别为1.353和6.637。基因选择压力分析显示,基因Ⅱ型中基因型2.1和2.2的非同义突变与同义突变比值(dN/dS)分别为1.808和1.362。密码子碱基分析结果表明,基因Ⅱ型的2个亚型中,GC3含量均>50%,基因型2.1和2.2的不同基因编码区有效密码子数(ENC)值分别为30.04和30.06。密码子使用偏好性分析显示,基因型2.1和2.2的相关系数分别为0.115和0.173。相对同义密码子使用度(RSCU)分析显示,基因型2.1和2.2中高表达的密码子第3位均为G/C碱基,低表达的密码子第3位主要为A/U碱基;共25个密码子的RSCU>1,为优先使用密码子,其中13个具有高GC含量,16个以碱基C结尾。【结论】国内PRV流行株以基因Ⅱ型为主,其具有独特的碱基组成,GC含量较高、AU含量相对较低,表现出较低的偏好性,密码子使用受突变压力与自然选择的双重作用,其中自然选择起主导性作用。研究结果为国内猪伪狂犬病的流行趋势研判及防控策略制定提供了科学依据与技术支撑。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒(prv) GE基因 遗传多样性 密码子 偏好性
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猪伪狂犬病毒在空置猪场的分布研究
5
作者 路浩 贺桂芬 +6 位作者 徐盟龙 李振坤 李阳 董芳婷 袁晋 张越 魏战勇 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第4期75-79,共5页
为了建立科学精准的针对伪狂犬病毒(PRV)的洗消体系,本试验于已空置6个月的规模化猪场采集了663份环境样品,利用荧光定量PCR方法对场内PRV分布情况进行了检测与分析。结果显示,该猪场洗消中心、猪舍和粪污处理区的PRV核酸检出率依次为25... 为了建立科学精准的针对伪狂犬病毒(PRV)的洗消体系,本试验于已空置6个月的规模化猪场采集了663份环境样品,利用荧光定量PCR方法对场内PRV分布情况进行了检测与分析。结果显示,该猪场洗消中心、猪舍和粪污处理区的PRV核酸检出率依次为25.00%(10/40)、42.11%(256/608)和0(0/15);其中,洗消中心的减速带的PRV核酸检出率最高,为100%(10/10);猪舍样品中配怀舍、育肥舍、分娩舍和保育舍的PRV核酸检出率分别为50.00%(76/152)、46.05%(70/152)、38.16%(58/152)和34.21%(52/152);猪舍中料桶、食槽、挡板、粪板上表面、粪板下表面和粪沟的PRV核酸检出率较高。总之,本试验初步明确了已空置6个月猪场的PRV核酸残留情况,并发现了若干日常洗消工作盲点和遗漏点,为猪场建立科学精准的洗消体系提供了数据支持。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒(prv) 空置猪场 分布
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猪伪狂犬病病毒分离鉴定及gE和gC基因遗传进化分析
6
作者 武月 石兴亚 +4 位作者 张帅 赵云环 郭立明 左玉柱 范京惠 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第5期2266-2277,共12页
【目的】探究伪狂犬病病毒(PRV)野毒株的变异情况及流行趋势,为PRV新型疫苗的研究提供数据参考。【方法】采集河北省保定市规模化养殖场经Bartha-K61疫苗免疫猪中疑似感染PRV的病料组织,通过PCR方式进行病原检测,将仅PRV阳性的组织滤液... 【目的】探究伪狂犬病病毒(PRV)野毒株的变异情况及流行趋势,为PRV新型疫苗的研究提供数据参考。【方法】采集河北省保定市规模化养殖场经Bartha-K61疫苗免疫猪中疑似感染PRV的病料组织,通过PCR方式进行病原检测,将仅PRV阳性的组织滤液接种PK-15细胞进行病毒分离与纯化,通过间接免疫荧光试验和电镜观察对分离到的病毒进行鉴定,测定分离毒株的病毒滴度并绘制生长曲线,对分离毒株进行血清中和试验、动物致病性研究及gE、gC基因序列分析。【结果】分离株在PK-15细胞中产生典型的拉丝、圆缩、聚集和脱落等病变。纯化后的病毒传代培养至F10代,经PCR隔代检测均能扩增出大小约为742 bp的目的条带,将分离株命名为BD-HB-2024。间接免疫荧光试验鉴定可见绿色荧光标记的细胞;透射电镜下观察到病毒颗粒直径约为150 nm,呈圆球状,符合PRV典型粒子特征。依照Reed-Muench法测定该毒株的半数组织培养感染剂量(TCID_(50))为105.55/0.1 mL。血清中和试验发现,抗Bartha-K61株的血清对该分离株的中和抗体效价为1∶11.22,而抗变异株血清的中和抗体效价为1∶89.13。该毒株对小鼠有一定的致病性,F10代病毒对小鼠的半数致死量(LD_(50))为10-2.5 TCID_(50)/0.1 mL。通过与国内PRV变异毒株gE、gC基因序列比对发现,核苷酸序列相似性分别为99.8%~99.9%和99.8%~100%。遗传进化树分析表明,该分离毒株与经典毒株SC、Italy2014和Kaplan等相似性较低,亲缘关系较远;与国内近几年分离到的变异株HNB、HLJ8、JM和SX1911等相似性较高,亲缘关系较近且位于同一进化分支,比对氨基酸序列后发现符合国内变异株的典型变化。【结论】本试验证实了该养殖场存在PRV的感染,并成功分离到1株PRV变异毒株,该研究为后续新型疫苗的研发和免疫防控方案的制备提供了参考依据。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒(prv) 变异株 分离鉴定 遗传进化
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高效液相体积排阻色谱法定量检测重组猪伪狂犬病毒gD蛋白
7
作者 陈晓洁 师小潇 +4 位作者 张承凤 黎明 师伟伟 杨延丽 贺笋 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2025年第1期25-32,共8页
本试验旨在建立高效液相体积排阻色谱(HPSEC)法进行重组猪伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gD的定量质控并评价其应用,进一步扩展该方法在兽用疫苗领域的应用范围。制备并鉴定gD蛋白标准品,检测其在保存过程中的稳定性;采用HPSEC法定量检测gD蛋白... 本试验旨在建立高效液相体积排阻色谱(HPSEC)法进行重组猪伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gD的定量质控并评价其应用,进一步扩展该方法在兽用疫苗领域的应用范围。制备并鉴定gD蛋白标准品,检测其在保存过程中的稳定性;采用HPSEC法定量检测gD蛋白并鉴定其色谱峰;建立HPSEC法检测gD蛋白标准品的标准曲线,并进行线性、检测限、准确度和精密度验证;考察HPSEC法定量检测细胞培养料液样品、纯化样品和乳化样品中gD蛋白浓度的适用性;对比HPSEC法和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法定量gD蛋白结果的相关性。结果显示,制备的gD蛋白标准品纯度>98%,可稳定存放12个月,浓度偏差为0.01%~2.80%。HPSEC法具有良好的线性(R^(2)=0.9999,n=8);检测限在5.0μg/mL以下;准确度较高,5个浓度的gD蛋白标准品检测准确度为93.2%~104.6%(n=6);精密度良好,5个浓度的gD蛋白标准品6次重复检测的相对标准偏差(RSD)为0.2%~1.6%(n=6);日间精密度良好,3批次细胞培养料液样品3 d各6次重复检测的RSD为1.1%~2.0%(n=6);可应用于细胞培养过程中gD蛋白在细胞培养料液样品中表达量的监测,纯化样品和乳化样品中gD蛋白的检测。分别采用HPSEC法和SDS-PAGE法定量12批细胞培养料液样品中gD蛋白浓度,2种方法结果高度正相关(Rs^(2)=0.9298,n=12),配对t检验无显著性差异(Ps=0.1457)。结果表明,HPSEC法定量检测猪伪狂犬病毒gD蛋白适用性好、重复性好、准确度高,能应用于抗原生产不同阶段样品的质量控制,指导疫苗工艺开发。 展开更多
关键词 高效液相体积排阻色谱(HPSEC) 猪伪狂犬病毒(prv) gD蛋白 疫苗 定量
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猪伪狂犬病病毒gE基因荧光定量PCR检测方法的建立与应用
8
作者 黄喜荣 曹佳佳 +5 位作者 邱飞铭 阮静学 江子墨 蒋桢 席梓恒 戴爱玲 《福建畜牧兽医》 2025年第1期18-23,共6页
为了能快速鉴别猪伪狂犬病病毒流行株,根据猪伪狂犬病病毒gE基因前半段95 bp~210 bp区域处设计一对特异性引物及探针,优化反应条件后,建立一种可鉴别猪伪狂犬病病毒gE缺失疫苗株与流行株的Taqman荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法对... 为了能快速鉴别猪伪狂犬病病毒流行株,根据猪伪狂犬病病毒gE基因前半段95 bp~210 bp区域处设计一对特异性引物及探针,优化反应条件后,建立一种可鉴别猪伪狂犬病病毒gE缺失疫苗株与流行株的Taqman荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法对pMD-PRV gE阳性标准质粒的最低检出下限为4.4×10^(1)拷贝/μL;该方法特异性强,对猪常见病毒性疾病(猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型等)均无交叉反应,将PRV流行株和疫苗株(Bartha-K61株、HB2000株、C株、Ea株)同时与某商品化试剂盒对比检测,特异性优于某商品化荧光定量PCR检测试剂盒;组内和组间重复性试验的变异系数均小于1.6%,重复性好。应用本研究建立的荧光定量PCR检测方法对165份临床样品进行检测,阳性率为2.42%(4/165),选取已知3份阳性的30份临床样品,与商品化检测试剂盒比对,符合率100%。因此,本研究建立的PRV gE基因荧光定量PCR检测方法可用于猪伪狂犬病病毒流行株的快速诊断和流行病学调查,为PR的控制与净化提供技术支持。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 荧光定量PCR 鉴别诊断
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1例疑似猪伪狂犬病病毒疫苗引起免疫耐受的病例分析
9
作者 徐国 魏明寅 +5 位作者 蒋泽修 杨薇 何连华 姜德荣 何江 陈娟 《养殖与饲料》 2025年第6期71-74,共4页
[目的]贵州省某生猪养殖场猪群经过多次伪狂犬病病毒疫苗免疫,但抗体阳性率为0,为确定导致该猪场猪群伪狂犬病病毒抗体水平急剧下降的关键因素。[方法]2023年,采集该养殖场猪群血液样本10份,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和聚合酶链反应(... [目的]贵州省某生猪养殖场猪群经过多次伪狂犬病病毒疫苗免疫,但抗体阳性率为0,为确定导致该猪场猪群伪狂犬病病毒抗体水平急剧下降的关键因素。[方法]2023年,采集该养殖场猪群血液样本10份,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和聚合酶链反应(PCR)扩增技术进行检测,并进行流行病学调查等。[结果]ELISA和病原学检测结果显示,PRV-gB和PRV-gE抗体为阴性,PRV-gD基因PCR检测为阳性,gE全基因检测呈阴性;现场调研发现疫苗质量标准、免疫剂量合理,饲养环境清洁,猪场兽药和饲养管理规范,猪群未表现出任何猪伪狂犬病的临床症状,但对伪狂犬病病毒疫苗进行高频率、高密度免疫;猪只外周血淋巴细胞的增殖活性较低,细胞因子如干扰素-γ、白细胞介素-2等的分泌量也显著减少,且该猪群其他疫苗免疫抗体水平正常。[结论]综合分析T细胞反应弱、调节性T细胞增多,但其他疫苗抗体水平正常等指标发现猪群PRV-gB和PRV-gE抗体水平低可能与猪场高密度免疫,引发猪群的伪狂犬病病毒免疫耐受有关。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 伪狂犬病病毒 ELISA 免疫耐受 流行病学调查 PCR扩增检测
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猪圆环病毒病与伪狂犬病混合感染防治措施
10
作者 曹红收 《中国畜牧业》 2025年第5期103-104,共2页
猪圆环病毒病和伪狂犬病是危害全球养猪业的两大重要传染病,分别由猪圆环病毒2型和伪狂犬病毒引起。近年来,两种病毒混合感染日益增多,显著加剧了对养猪业的危害。因此,笔者深入了解两种病毒混合感染的危害、致病机制和诊断方法,并制定... 猪圆环病毒病和伪狂犬病是危害全球养猪业的两大重要传染病,分别由猪圆环病毒2型和伪狂犬病毒引起。近年来,两种病毒混合感染日益增多,显著加剧了对养猪业的危害。因此,笔者深入了解两种病毒混合感染的危害、致病机制和诊断方法,并制定有效的综合防治措施,对防控该病、助力养猪业健康可持续发展至关重要。 展开更多
关键词 猪圆环病毒病 伪狂犬病 猪圆环病毒2型 重要传染病 病毒混合感染 养猪业 致病机制 防治措施
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猪场伪狂犬病毒疫苗免疫程序的优化
11
作者 陈秋锦 《广东饲料》 2025年第6期19-22,共4页
猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒(PRV)引起的一种可导致母猪发生繁殖障碍、仔猪呈现神经症状且致死率极高、育肥猪出现呼吸道问题的疾病。目前国内各规模化猪场广泛存在PRV,预防猪伪狂犬病主要是通过疫苗进免疫,以提高猪群的抗病能力。本研究... 猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒(PRV)引起的一种可导致母猪发生繁殖障碍、仔猪呈现神经症状且致死率极高、育肥猪出现呼吸道问题的疾病。目前国内各规模化猪场广泛存在PRV,预防猪伪狂犬病主要是通过疫苗进免疫,以提高猪群的抗病能力。本研究对猪伪狂犬疫苗免疫程序的临床差异,以及免疫后对猪体内抗体消长规律及猪只生长性能的影响进行了研究。结果显示,选取第1天滴鼻免疫1头份猪伪狂犬疫苗Ⅰ,第9和12周分别免疫1头份猪伪狂犬疫苗Ⅱ,第16周分别免疫1头份猪伪狂犬疫苗Ⅱ和1头份猪伪狂犬疫苗Ⅳ为最优的伪狂犬疫苗免疫程序。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒 免疫程序 生物安全 生产性能
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我国猪伪狂犬病病毒流行病学研究进展
12
作者 段雨晴 谭磊 《青海畜牧兽医杂志》 2025年第2期61-63,共3页
本文对PRV的易感动物、基因型和流行病学特征等进行综述,旨在为PRV的防控提供科学依据。
关键词 猪伪狂犬病病毒 病原学 易感动物 流行病学 研究进展
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某规模猪场突发猪伪狂犬病和猪圆环混合感染的诊断与防控 被引量：1
13
作者 石兴林 汪忠荣 +4 位作者 田珂 高潇祎 张人俊 王彬 潘靖 《畜禽业》 2025年第1期56-60,共5页
为摸清某猪场母猪流产、产弱仔数增加的原因,采集了空怀、产弱仔、流产母猪、断奶仔猪和种公猪的血清以及弱仔组织,应用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测、细菌分离培养和荧光PCR法检测,汇总分析检测结... 为摸清某猪场母猪流产、产弱仔数增加的原因,采集了空怀、产弱仔、流产母猪、断奶仔猪和种公猪的血清以及弱仔组织,应用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测、细菌分离培养和荧光PCR法检测,汇总分析检测结果。结果显示:猪伪狂犬病gE抗体阳性率生产母猪为83.96%、种公猪为33.33%、断奶仔猪为63.24%;非洲猪瘟、猪瘟和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸检测均为阴性,2头弱仔病猪和2头屡配不孕母猪均呈现猪圆环病2型核酸阳性;细菌分离培养未见病原菌。经过综合分析、流行病学调查和实验室检测综合诊断,引起母猪屡配不孕、弱仔数增加的原因是猪伪狂犬病野毒和猪圆环病毒2型混合感染。建议该猪场采取全群接种猪伪狂犬基因缺失疫苗和猪圆环病毒2型疫苗,对屡配不孕的母猪进行淘汰,在猪场分步实施伪狂犬病和猪圆环病2型净化,对全场进行合理消毒,健全生物安全管理措施。 展开更多
关键词 繁殖障碍 猪伪狂犬病 猪圆环病毒2型 检测 诊断
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猪伪狂犬病病毒gE蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
14
作者 王瑞宁 王勋 +4 位作者 李鸽 李青梅 李存法 杨苏珍 郭军庆 《河南农业科学》 北大核心 2024年第12期167-173,共7页
为了开发检测猪伪狂犬病病毒(PRV)的免疫诊断试剂,使用HEK293F细胞表达的gE重组蛋白免疫BALB/c小鼠。将免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)方法筛选阳性杂交瘤细胞株,以... 为了开发检测猪伪狂犬病病毒(PRV)的免疫诊断试剂,使用HEK293F细胞表达的gE重组蛋白免疫BALB/c小鼠。将免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)方法筛选阳性杂交瘤细胞株,以期获得对PRV反应性良好的抗gE重组蛋白单克隆抗体。结果显示,获得2株(2B5和8F7)稳定分泌抗PRV gE蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其腹水单克隆抗体的ELISA效价均为1∶1 000000;单克隆抗体亚型鉴定结果表明,2株单克隆抗体的重链均为IgG1亚型,轻链均为Kappa链。单克隆抗体特异性测定结果显示,2株单克隆抗体仅与PRV反应,不与其他常见病毒发生反应;SDS-PAGE结果显示,纯化后的单克隆抗体均在约50 ku和25 ku处有纯度较高的特异性条带;间接免疫荧光试验(IFA)结果表明,制备的2株单克隆抗体与转染gE质粒的293T细胞发生特异性反应。根据Western blot结果,筛选获得的2株单克隆抗体均在120 ku附近出现特异条带,表明这2株单克隆抗体均能特异性识别PRV。综上,成功制备了2株特异性强、效价高的抗gE蛋白单克隆抗体,为后期PRV诊断试剂盒的制备提供重要的生物材料。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 gE蛋白 单克隆抗体 间接免疫荧光试验
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眉县某猪场猪圆环病毒病与猪伪狂犬病免疫抗体检测与分析
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作者 闫红军 王勃森 《陕西农业科学》 2024年第11期85-88,共4页
为协助当地动物防疫站和动物卫生监督所对眉县某猪场猪圆环病毒病(PCVD)和猪伪狂犬病(PR)免疫效果评价与监督检查,采集了该场624份血清样品(其中:哺乳仔猪168份,保育猪169份,后备猪144份,种公猪13份,母猪130份),采用间接ELISA抗体检测... 为协助当地动物防疫站和动物卫生监督所对眉县某猪场猪圆环病毒病(PCVD)和猪伪狂犬病(PR)免疫效果评价与监督检查,采集了该场624份血清样品(其中:哺乳仔猪168份,保育猪169份,后备猪144份,种公猪13份,母猪130份),采用间接ELISA抗体检测。结果显示,猪圆环病毒2型疫苗免疫抗体阳性率在81.66%~95.24%之间,平均为86.70%;猪伪狂犬病基因缺失苗免疫抗体阳性率在94.64%~100.00%之间,平均为98.24%。说明该猪场猪圆环病毒病和猪伪狂犬病免疫抗体阳性合格率均达到了国家有关动物疫病免疫计划规定的要求,免疫整体效果较为理想,但仍应定期抽检疫苗质量,持续优化免疫程序。 展开更多
关键词 猪圆环病毒病 猪伪狂犬病 免疫抗体 检测 分析
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猪伪狂犬病病毒感染及复制影响因素的研究 被引量：7
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作者 何松 汤德元 +7 位作者 曾智勇 王彬 黄涛 毛茵茗 周飘 陈旭 廖正波 袁盛林 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期645-652,共8页
猪伪狂犬病(Porcinepseudorabies,PR)是由PR病毒(PRV)引起猪的病毒性传染病,对世界养猪业造成了重大经济损失。猪作为PRV唯一的自然宿主,可引起母猪产死胎、木乃伊胎和屡配不孕;公猪睾丸萎缩、精液质量下降,丧失种用功能;新生仔猪高热... 猪伪狂犬病(Porcinepseudorabies,PR)是由PR病毒(PRV)引起猪的病毒性传染病,对世界养猪业造成了重大经济损失。猪作为PRV唯一的自然宿主,可引起母猪产死胎、木乃伊胎和屡配不孕;公猪睾丸萎缩、精液质量下降,丧失种用功能;新生仔猪高热、出现神经症状且两周龄以内的仔猪病死率可达100%[1]。2011年之前,由于Bartha-K61株疫苗在我国的广泛使用,PR在我国得到了较好的控制。但自从2011年PRV出现变异之后,现有的PR商品化疫苗只能对动物机体提供部分的免疫保护作用并且尚无特效药物治疗[2]。基于此,本文对影响PRV感染与复制的各类因素的最新研究进展作综述,以期为开发高效抗PRV的新型药物或疫苗提供参考依据。 展开更多
关键词 病毒性传染病 重大经济损失 猪伪狂犬病病毒 屡配不孕 仔猪病死率 自然宿主 公猪睾丸 神经症状
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猪伪狂犬病免疫、非免疫净化措施分析
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作者 王明宇 《北方牧业》 2025年第8期35-35,共1页
猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)属双链DNA疱疹病毒,具有继发病多、持久散毒、致死率高、流行性广、抗生素无效的特点。猪是该病毒的唯一自然宿主,终生带毒,具有一定的潜伏性与应激性,给养殖业带来巨大经济损失。本文对猪伪狂... 猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)属双链DNA疱疹病毒,具有继发病多、持久散毒、致死率高、流行性广、抗生素无效的特点。猪是该病毒的唯一自然宿主,终生带毒,具有一定的潜伏性与应激性,给养殖业带来巨大经济损失。本文对猪伪狂犬病的防控与净化措施进行了简要分析,以期提高各猪场整体猪群免疫力,保障养猪业健康发展。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 Pseudorabies virus prv
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对猪伪狂犬病的再认识及防控技术
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作者 邵金龙 《福建畜牧兽医》 2025年第1期41-43,共3页
由伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是一种具有高度传染性的动物疫病。本文从伪狂犬病发生历史、诊断方法、流行情况及PR疫苗研究等方面进行综述,旨在进一步提高生猪养殖从业者对PR的重新认识。
关键词 伪狂犬病毒(prv) 诊断方法 流行情况 防控
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规模猪场猪伪狂犬病的防控
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作者 王会英 张燕 《湖南农业》 2025年第3期19-19,共1页
猪伪狂犬病,是由疱疹病毒科猪疱疹病毒I型伪狂犬病毒引起的一种急性传染病,可导致妊娠母猪流产,产死胎、木乃伊胎,出生仔猪具有明显神经症状的急性死亡。规模化猪场可采取多种防治措施,有效控制猪伪狂犬病。一、优化治疗方案1.对症治疗... 猪伪狂犬病,是由疱疹病毒科猪疱疹病毒I型伪狂犬病毒引起的一种急性传染病,可导致妊娠母猪流产,产死胎、木乃伊胎,出生仔猪具有明显神经症状的急性死亡。规模化猪场可采取多种防治措施,有效控制猪伪狂犬病。一、优化治疗方案1.对症治疗为了控制生猪因猪伪狂犬病导致免疫力降低而引起的继发感染,应及时对发病猪进行综合治疗。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 妊娠母猪流产 伪狂犬病毒 继发感染 神经症状 规模猪场 急性传染病 出生仔猪
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规模化猪场猪伪狂犬病的净化
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作者 王素华 《四川畜牧兽医》 2025年第4期51-52,55,共3页
猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒(PRV)引起的急性、传染性疾病。威宁地区的养殖场大多数为散养型和小规模家庭式,部分规模化猪场饲养密度过大。猪群密度是影响伪狂犬病传播的重要因素,在密闭的猪舍中,猪间接触频繁,病毒传播的机会增多。部分... 猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒(PRV)引起的急性、传染性疾病。威宁地区的养殖场大多数为散养型和小规模家庭式,部分规模化猪场饲养密度过大。猪群密度是影响伪狂犬病传播的重要因素,在密闭的猪舍中,猪间接触频繁,病毒传播的机会增多。部分猪场猪舍的通风系统不完善,舍内湿度较高,空气传播成为病毒的重要传播途径,尤其在冬季和春季,舍内空气流通差,病毒存活时间较长,容易导致伪狂犬病频发。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 伪狂犬病毒 规模化猪场
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