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狂犬病毒糖蛋白研究进展
被引量:
22
1
作者
徐兰
郭增柱
+2 位作者
张永振
熊成龙
Zhen F.Fu
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第9期876-879,共4页
关键词
狂犬病毒糖蛋白
人兽共患传染病
负链RNA
病毒
保护性抗原
基因编码
急性传染病
病毒
基因
结构基因
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职称材料
狂犬病毒糖蛋白衍生物作为靶脑载体初探
被引量:
3
2
作者
王逸麟
付爱玲
《科学技术与工程》
2011年第36期8974-8977,共4页
血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)阻碍了具有治疗潜力的大分子化合物从外周组织进入脑内。为了寻找一种高效、快速通过BBB的靶向性载体,实验通过罗丹明B标记的狂犬病毒糖蛋白衍生肽(RDP)注射入昆明小鼠体内,并于15 min、5 h取大脑、...
血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)阻碍了具有治疗潜力的大分子化合物从外周组织进入脑内。为了寻找一种高效、快速通过BBB的靶向性载体,实验通过罗丹明B标记的狂犬病毒糖蛋白衍生肽(RDP)注射入昆明小鼠体内,并于15 min、5 h取大脑、脊髓及肝、肾等外周组织,冷冻切片观察其在体内的分布,并通过构建pET28a-RDP-luciferase重组质粒,结果发现融合蛋白能快速地穿过血脑屏障分布于中枢神经系统,为治疗中枢神经系统的药物开发提供新的思路。
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关键词
狂犬病毒糖蛋白
衍生物
血脑屏障
靶脑转运
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职称材料
基于核糖体展示技术进行抗狂犬病毒人源抗体的制备
3
作者
赵小玲
陈伟强
+5 位作者
冯红
沈成凤
纪艳
李静梅
张素娟
杨志华
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2011年第10期945-952,共8页
构建了核糖体展示人源抗狂犬病毒单链抗体(scFv)库,筛选制备特异抗狂犬病毒糖蛋白(RVGp)的稳定性人源抗体.应用核糖体抗体库技术,从经狂犬病毒Vero疫苗免疫的志愿者外周血淋巴细胞中分离、构建核糖体展示scFv基因库.体外转录翻译后,以R...
构建了核糖体展示人源抗狂犬病毒单链抗体(scFv)库,筛选制备特异抗狂犬病毒糖蛋白(RVGp)的稳定性人源抗体.应用核糖体抗体库技术,从经狂犬病毒Vero疫苗免疫的志愿者外周血淋巴细胞中分离、构建核糖体展示scFv基因库.体外转录翻译后,以RVGp重组蛋白作筛选抗原,采用亲和富集法淘选RVGp特异性scFv抗体基因.在原核系统pET22b(+)/BL21(DE3)中实现scFv抗体片段的可溶性表达,ELISA鉴定阳性克隆.然后对筛选的scFv进行稳定性改构,构建VH-Lc-VK稳定性抗体,并对其生物学活性进行初步研究.成功构建了库容量约为6.2×1012的核糖体展示scFv抗体基因库.在180个筛选克隆中,克隆RB24、RB71、RB109和RB156显示出较高的ELISA值,其基因序列分析结果显示,它们是全新的人源抗RVGp抗体.改构后的抗RVGp VH-Lc-VK抗体的稳定性明显改进,可特异识别RVGp并有效中和狂犬病毒,抑制狂犬病毒对靶细胞的感染.以上结果表明,人源抗RVGp特异性抗体的获得,为狂犬病的有效预防、诊断和治疗提供了新的途径,而且将为其他人源抗体的制备提供理论依据和技术基础.
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关键词
核糖体展示
人源抗体
稳定性
狂犬病毒糖蛋白
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职称材料
3种细胞穿透肽对体外转录mRNA的递送效果
4
作者
王军华
罗画叶
+1 位作者
张翠玲
李军伟
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2022年第4期35-39,44,共6页
为了开发合适的mRNA递送载体,本试验采用体外转录、加帽、加尾修饰及氯化锂(LiCl)纯化的方法获得具有生物活性的绿色荧光蛋白mRNA(mRNA-EGFP),然后用合成的3种细胞穿透肽(RVG、RVG9dR、RVG11dR)进行递送。先通过凝胶阻滞试验确定mRNA与...
为了开发合适的mRNA递送载体,本试验采用体外转录、加帽、加尾修饰及氯化锂(LiCl)纯化的方法获得具有生物活性的绿色荧光蛋白mRNA(mRNA-EGFP),然后用合成的3种细胞穿透肽(RVG、RVG9dR、RVG11dR)进行递送。先通过凝胶阻滞试验确定mRNA与3种细胞穿透肽的最佳包被质量比例;再在293T细胞水平上测试3种细胞穿透肽的细胞毒性、包被mRNA后对RNase A的耐受性,并通过凝胶阻滞试验和细胞荧光试验来测试3种细胞穿透肽对mRNA的包被和递送效力。细胞毒性试验结果显示,3种细胞穿透肽的半抑制浓度(IC_(50))分别是95、90μmol/L和81μmol/L;RNase A保护试验结果显示,3种细胞穿透肽均可保护mRNA不被RNase A降解;凝胶阻滞试验和细胞荧光试验结果显示,3种细胞穿透肽均可成功包被mRNA-EGFP,并把mRNA递送到细胞内进行表达,其中RVG11dR对mRNA的递送效果最好。结果表明,在细胞穿透肽RVG的末端添加一定数量的精氨酸可提高其对mRNA的递送效力。
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关键词
细胞穿透肽
狂犬病毒糖蛋白
MRNA
体外转录
递送效果
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职称材料
题名
狂犬病毒糖蛋白研究进展
被引量:
22
1
作者
徐兰
郭增柱
张永振
熊成龙
Zhen F.Fu
机构
中国疾病预防控制中心传染病预防控制所
北京热带医学研究所
Department
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第9期876-879,共4页
基金
国家十五攻关项目(2003BA712A08-02)
关键词
狂犬病毒糖蛋白
人兽共患传染病
负链RNA
病毒
保护性抗原
基因编码
急性传染病
病毒
基因
结构基因
分类号
R373.9 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
狂犬病毒糖蛋白衍生物作为靶脑载体初探
被引量:
3
2
作者
王逸麟
付爱玲
机构
西南大学药学院
出处
《科学技术与工程》
2011年第36期8974-8977,共4页
文摘
血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)阻碍了具有治疗潜力的大分子化合物从外周组织进入脑内。为了寻找一种高效、快速通过BBB的靶向性载体,实验通过罗丹明B标记的狂犬病毒糖蛋白衍生肽(RDP)注射入昆明小鼠体内,并于15 min、5 h取大脑、脊髓及肝、肾等外周组织,冷冻切片观察其在体内的分布,并通过构建pET28a-RDP-luciferase重组质粒,结果发现融合蛋白能快速地穿过血脑屏障分布于中枢神经系统,为治疗中枢神经系统的药物开发提供新的思路。
关键词
狂犬病毒糖蛋白
衍生物
血脑屏障
靶脑转运
Keywords
rabies virus glycoprotein-derived peptide blood-brain barrier brain-targeted carrier
分类号
R962 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
基于核糖体展示技术进行抗狂犬病毒人源抗体的制备
3
作者
赵小玲
陈伟强
冯红
沈成凤
纪艳
李静梅
张素娟
杨志华
机构
军事医学科学院卫生学环境医学研究所
天津体育学院
天津市疾病预防控制中心
中国人民解放军二五四医院
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2011年第10期945-952,共8页
基金
国家自然科学基金资助项目(30700748
31070823)~~
文摘
构建了核糖体展示人源抗狂犬病毒单链抗体(scFv)库,筛选制备特异抗狂犬病毒糖蛋白(RVGp)的稳定性人源抗体.应用核糖体抗体库技术,从经狂犬病毒Vero疫苗免疫的志愿者外周血淋巴细胞中分离、构建核糖体展示scFv基因库.体外转录翻译后,以RVGp重组蛋白作筛选抗原,采用亲和富集法淘选RVGp特异性scFv抗体基因.在原核系统pET22b(+)/BL21(DE3)中实现scFv抗体片段的可溶性表达,ELISA鉴定阳性克隆.然后对筛选的scFv进行稳定性改构,构建VH-Lc-VK稳定性抗体,并对其生物学活性进行初步研究.成功构建了库容量约为6.2×1012的核糖体展示scFv抗体基因库.在180个筛选克隆中,克隆RB24、RB71、RB109和RB156显示出较高的ELISA值,其基因序列分析结果显示,它们是全新的人源抗RVGp抗体.改构后的抗RVGp VH-Lc-VK抗体的稳定性明显改进,可特异识别RVGp并有效中和狂犬病毒,抑制狂犬病毒对靶细胞的感染.以上结果表明,人源抗RVGp特异性抗体的获得,为狂犬病的有效预防、诊断和治疗提供了新的途径,而且将为其他人源抗体的制备提供理论依据和技术基础.
关键词
核糖体展示
人源抗体
稳定性
狂犬病毒糖蛋白
Keywords
ribosome display, human antibody, stability, RVGp
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
3种细胞穿透肽对体外转录mRNA的递送效果
4
作者
王军华
罗画叶
张翠玲
李军伟
机构
青岛农业大学动物医学院
出处
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2022年第4期35-39,44,共6页
基金
青岛农业大学创新训练项目(201910435019)。
文摘
为了开发合适的mRNA递送载体,本试验采用体外转录、加帽、加尾修饰及氯化锂(LiCl)纯化的方法获得具有生物活性的绿色荧光蛋白mRNA(mRNA-EGFP),然后用合成的3种细胞穿透肽(RVG、RVG9dR、RVG11dR)进行递送。先通过凝胶阻滞试验确定mRNA与3种细胞穿透肽的最佳包被质量比例;再在293T细胞水平上测试3种细胞穿透肽的细胞毒性、包被mRNA后对RNase A的耐受性,并通过凝胶阻滞试验和细胞荧光试验来测试3种细胞穿透肽对mRNA的包被和递送效力。细胞毒性试验结果显示,3种细胞穿透肽的半抑制浓度(IC_(50))分别是95、90μmol/L和81μmol/L;RNase A保护试验结果显示,3种细胞穿透肽均可保护mRNA不被RNase A降解;凝胶阻滞试验和细胞荧光试验结果显示,3种细胞穿透肽均可成功包被mRNA-EGFP,并把mRNA递送到细胞内进行表达,其中RVG11dR对mRNA的递送效果最好。结果表明,在细胞穿透肽RVG的末端添加一定数量的精氨酸可提高其对mRNA的递送效力。
关键词
细胞穿透肽
狂犬病毒糖蛋白
MRNA
体外转录
递送效果
Keywords
cell-penetrating peptide
rabies virus glycoprotein
mRNA
in vitro transcription
delivery efficiency
分类号
S852 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
狂犬病毒糖蛋白研究进展
徐兰
郭增柱
张永振
熊成龙
Zhen F.Fu
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
22
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
狂犬病毒糖蛋白衍生物作为靶脑载体初探
王逸麟
付爱玲
《科学技术与工程》
2011
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
基于核糖体展示技术进行抗狂犬病毒人源抗体的制备
赵小玲
陈伟强
冯红
沈成凤
纪艳
李静梅
张素娟
杨志华
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
3种细胞穿透肽对体外转录mRNA的递送效果
王军华
罗画叶
张翠玲
李军伟
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2022
0
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