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抗欧亚活血丹凝集素特异性多克隆抗体的制备(英文)
1
作者
王卫芳
VAN DAMME Els
何朝族
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2006年第11期1113-1119,共7页
欧亚活血丹外源凝集素(Gleheda)是分离自欧亚活血丹 (Glechoma hederacea) 叶片中的一种糖基化植物新蛋白. 如同其他糖基化蛋白,通过免疫学方法探测 Gleheda 的过程中通常受到一些不相干糖蛋白的妨碍,为此制定了抗 Gleheda 特异性多克...
欧亚活血丹外源凝集素(Gleheda)是分离自欧亚活血丹 (Glechoma hederacea) 叶片中的一种糖基化植物新蛋白. 如同其他糖基化蛋白,通过免疫学方法探测 Gleheda 的过程中通常受到一些不相干糖蛋白的妨碍,为此制定了抗 Gleheda 特异性多克隆抗体的纯化方案. 免疫血清蛋白经硫酸铵选择性沉淀后,分别以 Gleheda 和刺槐外源凝集蛋白 (RPA) 结合在 Sepharose 4B作为亲和配体,采用亲和层析法连续纯化 2 次,然后进一步采用离子交换层析 Q Fast Flow 提纯. 经每一步骤提纯得到的抗体组分对 Gleheda 的特异性,均同时采用双向免疫扩散检验和 Western blot 分析. 结果表明,以 Gleheda 为配体,亲和纯化制备得到的抗体组分对叶片粗提物中的许多植物 (糖) 蛋白仍然表现交叉反应. 为除去由植物糖蛋白中的聚糖所引起这些非特异性交叉反应抗体,接着以 RPA 为配体再次进行亲和纯化,Western blot 分析显示,抗体的特异性得到提高但并非除去了所有非特异性交叉反应的抗体. 最后进一步采用离子交换层析制备得到仅抗 Gleheda 蛋白的特异性抗体组分,此抗体组分适用于免疫探测研究. 该抗体纯化制备程序简易而高效,而且不需要昂贵的设备.
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关键词
特异性多克隆抗体
抗体
制备
欧亚活血丹外源凝集素(Gleheda)
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职称材料
小鼠抗人BART多克隆抗体的制备和鉴定
被引量：
1
2
作者
虞志华
陆佩华
黄立东
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期460-462,共3页
目的制备小鼠抗人源性BART的抗体。方法采用原核系统表达人全长BART,经纯化后免疫小鼠制备抗BART的抗体,以Western blot、免疫组化染色法检测抗体的效价和特异性。结果获得高效价的小鼠抗BART的抗体,该抗体能够识别大鼠脊髓组织中的BAR...
目的制备小鼠抗人源性BART的抗体。方法采用原核系统表达人全长BART,经纯化后免疫小鼠制备抗BART的抗体,以Western blot、免疫组化染色法检测抗体的效价和特异性。结果获得高效价的小鼠抗BART的抗体,该抗体能够识别大鼠脊髓组织中的BART分子。海马神经元和星形胶质细胞的免疫组化染色结果显示,BART分子在海马神经元、星形胶质细胞中广泛表达;在海马神经元中,BART与钙离子通道存在共定位现象。结论制备出能特异性识别天然BART分子的抗体,为检测BART分子并进一步研究其功能奠定了基础。
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关键词
多克隆
抗体
特
异性
BART
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职称材料
题名
抗欧亚活血丹凝集素特异性多克隆抗体的制备(英文)
1
作者
王卫芳
VAN DAMME Els
何朝族
机构
清华大学深圳研究生院生命学部
Department of Molecular Biotechnology
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2006年第11期1113-1119,共7页
基金
比利时Flanders科学研究资助项目(G.0113.01)
广东省自然科学基资助项目(04010899)
+3 种基金
教育部留学归国人员科学基金资助项目(2004-6)
韶关市科技计划资助项目(2004-02)
中山大学生物防治国家重点实验室资助项目(2004-2006)
中国博士后科学基金资助项目(2005-2006).~~
文摘
欧亚活血丹外源凝集素(Gleheda)是分离自欧亚活血丹 (Glechoma hederacea) 叶片中的一种糖基化植物新蛋白. 如同其他糖基化蛋白,通过免疫学方法探测 Gleheda 的过程中通常受到一些不相干糖蛋白的妨碍,为此制定了抗 Gleheda 特异性多克隆抗体的纯化方案. 免疫血清蛋白经硫酸铵选择性沉淀后,分别以 Gleheda 和刺槐外源凝集蛋白 (RPA) 结合在 Sepharose 4B作为亲和配体,采用亲和层析法连续纯化 2 次,然后进一步采用离子交换层析 Q Fast Flow 提纯. 经每一步骤提纯得到的抗体组分对 Gleheda 的特异性,均同时采用双向免疫扩散检验和 Western blot 分析. 结果表明,以 Gleheda 为配体,亲和纯化制备得到的抗体组分对叶片粗提物中的许多植物 (糖) 蛋白仍然表现交叉反应. 为除去由植物糖蛋白中的聚糖所引起这些非特异性交叉反应抗体,接着以 RPA 为配体再次进行亲和纯化,Western blot 分析显示,抗体的特异性得到提高但并非除去了所有非特异性交叉反应的抗体. 最后进一步采用离子交换层析制备得到仅抗 Gleheda 蛋白的特异性抗体组分,此抗体组分适用于免疫探测研究. 该抗体纯化制备程序简易而高效,而且不需要昂贵的设备.
关键词
特异性多克隆抗体
抗体
制备
欧亚活血丹外源凝集素(Gleheda)
Keywords
monospecific polyclonal antibodies, antibody purification, Glechoma hederacea agglutinin （Gleheda）
分类号
Q5-3 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
小鼠抗人BART多克隆抗体的制备和鉴定
被引量：
1
2
作者
虞志华
陆佩华
黄立东
机构
上海交通大学医学院神经生物学实验室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期460-462,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(30370492)
文摘
目的制备小鼠抗人源性BART的抗体。方法采用原核系统表达人全长BART,经纯化后免疫小鼠制备抗BART的抗体,以Western blot、免疫组化染色法检测抗体的效价和特异性。结果获得高效价的小鼠抗BART的抗体,该抗体能够识别大鼠脊髓组织中的BART分子。海马神经元和星形胶质细胞的免疫组化染色结果显示,BART分子在海马神经元、星形胶质细胞中广泛表达;在海马神经元中,BART与钙离子通道存在共定位现象。结论制备出能特异性识别天然BART分子的抗体,为检测BART分子并进一步研究其功能奠定了基础。
关键词
多克隆
抗体
特
异性
BART
Keywords
polyclonal antibody
specificity
BART
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗欧亚活血丹凝集素特异性多克隆抗体的制备(英文)
王卫芳
VAN DAMME Els
何朝族
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2006
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
小鼠抗人BART多克隆抗体的制备和鉴定
虞志华
陆佩华
黄立东
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
1
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