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大黄素调节HMGB1/TLR4信号通路对脂多糖诱导的人牙髓成纤维细胞焦亡的影响
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作者 付广丽 宋利娟 涂玲 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期631-637,共7页
目的:探讨大黄素调节高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的人牙髓成纤维细胞(HDPFs)焦亡的影响。方法:分离培养HDPFs,筛选大黄素最佳浓度,随机将HDPFs分成control组(正常培养)、LPS组、大黄素低、中... 目的:探讨大黄素调节高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的人牙髓成纤维细胞(HDPFs)焦亡的影响。方法:分离培养HDPFs,筛选大黄素最佳浓度,随机将HDPFs分成control组(正常培养)、LPS组、大黄素低、中、高剂量组、pcDNA组(转染pcDNA3.1)和pcDNA-HMGB1组(转染pcDNA3.1-HMGB1),qRT-PCR检测细胞中HMGB1 mRNA表达水平,MTT法、平板克隆实验、流式细胞仪分别检测细胞增殖和焦亡;ELISA检测细胞上清中IL-18、IL-1β、TNF-α水平;Western blot检测细胞中焦亡蛋白Nod样受体蛋白3(NLRP3)、剪切的半胱天冬氨酸蛋白酶-1(cleaved Caspase-1)、消皮素D(GSDMD)及HMGB1、TLR4蛋白表达。结果:与control组比较,LPS组细胞HMGB1 mRNA水平、焦亡率、IL-18、IL-1β、TNF-α水平、NLRP3、cleaved Caspase-1、GSDMD、HMGB1、TLR4蛋白水平显著升高,A 490值、集落形成数显著降低(P<0.05);与LPS组比较,大黄素低、中、高剂量组细胞中以上各项指标水平显著降低,A 490值、集落形成数显著升高,其中大黄素高剂量组变化更显著(P<0.05);过表达HMGB1减弱了大黄素对LPS诱导的HDPFs细胞焦亡和炎症的抑制作用,及对细胞增殖的促进作用(P<0.05)。结论:大黄素通过抑制HMGB1/TLR4通路,抑制NLRP3炎症体活化,从而减轻LPS诱导的HDPFs细胞焦亡。 展开更多
关键词 大黄素 HMGB1/TLR4通路 脂多糖 牙髓纤维细胞 焦亡
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自酸蚀牙本质粘接剂对人牙髓成纤维细胞的毒性作用 被引量:9
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作者 张明 冯岩 +3 位作者 黄晓晶 雷丽珊 郑碧琼 卢友光 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期94-97,共4页
目的比较和评价自酸蚀粘接剂XenoⅢ(XO)和Adper Promp(tAP)以及全酸蚀粘接剂Single bond2(SB)三者的细胞毒性大小。方法将3种牙本质粘接剂XO、AP和SB涂布于直径为5.0mm、厚度为0.5mm的牙本质圆片的两面,置于DMEM培养液中获得材料的浸提... 目的比较和评价自酸蚀粘接剂XenoⅢ(XO)和Adper Promp(tAP)以及全酸蚀粘接剂Single bond2(SB)三者的细胞毒性大小。方法将3种牙本质粘接剂XO、AP和SB涂布于直径为5.0mm、厚度为0.5mm的牙本质圆片的两面,置于DMEM培养液中获得材料的浸提液,然后将培养液稀释成100.0%、50.0%、25.0%和12.5%四种体积分数。选用组织块法体外原代培养人牙髓成纤维细胞,并将不同体积分数的材料浸提液与第5代人牙髓成纤维细胞共同培养,通过MTT法评价材料24、72、120h的细胞毒性。结果牙本质粘接系统XO、AP和SB在体外对人牙髓成纤维细胞均有一定程度的细胞毒性,两种自酸蚀粘接剂XO和AP的细胞毒性明显低于全酸蚀粘接剂SB,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论自酸蚀牙本质粘接剂XO和AP的细胞毒性小于全酸蚀牙本质粘接剂SB。 展开更多
关键词 自酸蚀粘接系统 牙髓纤维细胞 细胞毒性
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dNCPs、TGF-β1及联合应用对人牙髓成纤维细胞增殖、ALP及矿化的影响 被引量:7
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作者 聂鑫 金岩 +3 位作者 张勇杰 赵守亮 Smith AJ 秦瑞峰 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期178-181,共4页
目的 :观察牙本质非胶原蛋白 (dentinnon collageproteins ;dNCPs)、转化生长因子 (transforminggrowthfactor ;TGF β1)及联合应用对人牙髓成纤维细胞生物学特性的影响。 方法 :利用混合酶消化法成功培养了人牙髓成纤维细胞 ,角蛋白及... 目的 :观察牙本质非胶原蛋白 (dentinnon collageproteins ;dNCPs)、转化生长因子 (transforminggrowthfactor ;TGF β1)及联合应用对人牙髓成纤维细胞生物学特性的影响。 方法 :利用混合酶消化法成功培养了人牙髓成纤维细胞 ,角蛋白及波形丝蛋白鉴定其来源。在细胞中分别加入牙本质粉、dNCPs、TGF β1及其复合物 ,通过MTT、ALPase和Von Kossa染色检测其作用。 结果 :dNCPs和TGF β1可显著增加细胞的增殖及ALPase分泌 ,细胞可聚集成团形成矿化结节。 结论 :dNCPs和TGF β1可改变人牙髓成纤维细胞的生物学活性 ,但两者间无相互促进作用。 展开更多
关键词 dNCPs TG-β1 联合应用 牙髓纤维细胞增殖 ALP 矿化 牙本质非胶原蛋白 转化生长因子
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MMP-3诱导人牙髓成纤维细胞CCN2mRNA的表达及意义 被引量:4
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作者 王贺 张娟 +4 位作者 尹硕 李雯 王晓龙 唐宇欣 张颖丽 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2014年第5期399-402,共4页
目的:通过观察基质金属蛋白酶-3(MMP-3)对体外培养人牙髓成纤维细胞中结缔组织生长因子(CTGF/CCN2)mRNA的影响,揭示MMP-3促进牙髓损伤愈合的机制。方法:选取年轻患者因正畸或阻生拔除的健康第三磨牙,取出牙髓以常规体外酶消化培养法获... 目的:通过观察基质金属蛋白酶-3(MMP-3)对体外培养人牙髓成纤维细胞中结缔组织生长因子(CTGF/CCN2)mRNA的影响,揭示MMP-3促进牙髓损伤愈合的机制。方法:选取年轻患者因正畸或阻生拔除的健康第三磨牙,取出牙髓以常规体外酶消化培养法获得人牙髓成纤维细胞,利用RT-PCR方法检测经MMP-3诱导30min后人牙髓成纤维细胞中CCN2mRNA的表达。结果:正常组和实验组人牙髓成纤维细胞均有CCN2mRNA表达,但是经MMP-3诱导后的人牙髓成纤维细胞CCN2mRNA的表达更强。结论:MMP-3通过诱导CCN2mRNA的合成,从而促进牙髓损伤的愈合。 展开更多
关键词 牙髓纤维细胞 基质金属蛋白酶-3 结缔组织生长因子
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牙龈卟啉单胞菌对牙髓成纤维细胞胞内感染的研究 被引量:2
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作者 卢煜 罗世高 黄定明 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期87-89,93,共4页
目的研究牙龈卟啉单胞菌活菌细胞内感染牙髓成纤维细胞的体外模型。方法将牙龈卟啉单胞菌和牙髓细胞以100∶1比例共同孵育0.5、1.0、2.0h,倒置显微镜观察牙髓细胞形态。加入双抗和甲硝唑杀死胞外细菌,牙髓细胞用蒸馏水裂解后厌氧培养细... 目的研究牙龈卟啉单胞菌活菌细胞内感染牙髓成纤维细胞的体外模型。方法将牙龈卟啉单胞菌和牙髓细胞以100∶1比例共同孵育0.5、1.0、2.0h,倒置显微镜观察牙髓细胞形态。加入双抗和甲硝唑杀死胞外细菌,牙髓细胞用蒸馏水裂解后厌氧培养细胞裂解液,观察活细菌是否进入牙髓细胞胞内。将牙龈卟啉单胞菌和牙髓细胞以多重感染比(MOI)100、50共同孵育1.0h,采用MTT法检测感染牙龈卟啉单胞菌后牙髓细胞存活率。结果倒置显微镜下显示,被胞内感染的牙髓细胞培养2.0h未见胞膜破裂,形态完整。采用双抗能彻底杀灭胞外培养基中的细菌而对胞内细菌无影响,共同孵育1.0h和2.0h活细菌能进入牙髓细胞。MTT法显示细菌感染后牙髓细胞仍有一定存活率,其存活率分别是MOI100组74.43%、MOI50组99.07%。结论成功建立了牙龈卟啉单胞菌对牙髓成纤维细胞胞内感染的模型。 展开更多
关键词 牙龈卟啉单胞菌 牙髓纤维细胞: 胞内感染
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牙髓成纤维细胞内质网应激在牙髓炎中的作用 被引量:4
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作者 李丹 张旗 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1064-1070,共7页
目的:探究内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)在牙髓炎症进程中的发生和作用,以及对人牙髓成纤维细胞(human dental pulp fibroblasts,hDPFs)炎症因子的影响。方法:构建大鼠牙髓炎模型,0、6、12、24、48 h取材。苏木素-伊红... 目的:探究内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)在牙髓炎症进程中的发生和作用,以及对人牙髓成纤维细胞(human dental pulp fibroblasts,hDPFs)炎症因子的影响。方法:构建大鼠牙髓炎模型,0、6、12、24、48 h取材。苏木素-伊红染色观察炎症浸润;RT-qPCR检测ERS及炎症因子相关mRNA表达水平。体外培养hDPFs,分对照组、4-苯基丁酸(4-phenylbutyric acid,4-PBA)组、LPS组、LPS+4-PBA组,1 d收样,透射电镜观察内质网形态;免疫荧光检测ERS标志蛋白表达;RT-qPCR检测ERS标志物及炎症因子mRNA表达。体内髓腔应用4-PBA进行“挽救”,1、3、7 d收样。结果:随暴露时间延长,牙髓组织炎症浸润增加,TNF-α、IL-1β、IL-6和GRP78、CHOP、XBP1 mRNA表达升高(P<0.05)。体外,LPS组内质网形态发生肿胀、扩张,GRP78、CHOP蛋白表达增加,TNF-α、IL-1β、IL-6和GRP78、CHOP、XBP1 mRNA表达升高,4-PBA改善内质网损伤,GRP78、CHOP表达降低,促炎因子mRNA表达降低(P<0.05)。体内“挽救”表明4-PBA减轻炎症浸润,抑制TNF-α、IL-1β、GRP78、CHOP表达(P<0.05)。结论:牙髓炎症进程中,伴随ERS发生和炎症因子分泌增加,4-PBA抑制ERS,减轻炎症反应。 展开更多
关键词 牙髓 牙髓纤维细胞 内质网应激
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体外培养人牙髓细胞的生物学特征 被引量:2
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作者 张海燕 李卫红 +3 位作者 李玉晶 刘晓勇 葛丽华 刘俊 《首都医科大学学报》 CAS 2001年第2期100-103,共4页
为研究牙髓细胞的生物学特性 ,采用组织块原代培养方法体外培养人牙髓组织。原代培养组织块在接种后 7~ 1 0d开始长出细胞 ,培养约 30d ,细胞形成单层汇合后进行传代培养。传代至第 5代测定细胞生物学特征及来源。结果 :培养人牙髓细... 为研究牙髓细胞的生物学特性 ,采用组织块原代培养方法体外培养人牙髓组织。原代培养组织块在接种后 7~ 1 0d开始长出细胞 ,培养约 30d ,细胞形成单层汇合后进行传代培养。传代至第 5代测定细胞生物学特征及来源。结果 :培养人牙髓细胞呈成纤维样 ,抗波形丝蛋白染色阳性 ;细胞内碱性磷酸酶 (ALP)阳性 ,细胞内ALP总活性随培养天数的增加逐渐增高 ;细胞Ⅰ型胶原、FN染色阳性 ;第 5代细胞培养至第 1 1天发现细胞生长成结节状 ,分泌网形胶原样物质 ,在其表面出现结晶样钙化小点 ,经VonKossa染色 ,呈阳性。实验证明 ,体外培养的人牙髓细胞为来源中胚层的成纤维样细胞 ,可分泌ALP、Ⅰ型胶原及FN ,在体外可发生矿化 。 展开更多
关键词 牙髓纤维细胞 碱性磷酸酶 Ⅰ型胶原 体外培养 钙化
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核苷酸结合寡聚化结构域蛋白及其在牙髓中的表达
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作者 姜澜 宋智 林正梅 《国际口腔医学杂志》 CAS 2013年第5期678-682,共5页
核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)蛋白是自然免疫系统细胞质型模式识别受体中的重要家族成员之一,在机体自然免疫应答中发挥着独特的功能。NOD蛋白和细菌的某些病原体相关分子模式的相互识别和作用与多种临床疾病有关。本文就NOD蛋白的生物... 核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)蛋白是自然免疫系统细胞质型模式识别受体中的重要家族成员之一,在机体自然免疫应答中发挥着独特的功能。NOD蛋白和细菌的某些病原体相关分子模式的相互识别和作用与多种临床疾病有关。本文就NOD蛋白的生物学特性、成牙本质细胞和牙髓成纤维细胞的免疫作用、NOD蛋白在牙髓细胞中的表达等研究进展作一综述,以期为了解牙髓炎的病理机制,预防和治疗牙髓病提供新的思路。 展开更多
关键词 苷酸结合寡聚化结构域蛋白 牙本质细胞 牙髓纤维细胞 自然免疫
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