黑色素瘤B16细胞热休克蛋白-抗原肽复合物的体内外抑瘤效应 被引量：1

1

作者 杨英 李秀娟 +2 位作者 孙祖玥 龚守良 李修义 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2000年第2期121-123,共3页

目的：黑色素瘤Ｂ１６细胞胞浆ＨＳＰ－抗原肽复合物（ＨＡＣ）的制备、免疫原性的诱导及其抑瘤作用的研究。方法：采用Ｔｒｉｓ－ＨＣＩ提取和Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ　Ｓ－２００凝胶过滤制备Ｂ１６细胞ＨＡＣ，通过Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠... 目的：黑色素瘤Ｂ１６细胞胞浆ＨＳＰ－抗原肽复合物（ＨＡＣ）的制备、免疫原性的诱导及其抑瘤作用的研究。方法：采用Ｔｒｉｓ－ＨＣＩ提取和Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ　Ｓ－２００凝胶过滤制备Ｂ１６细胞ＨＡＣ，通过Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠体内诱导特异性ＣＴＬ，再经体内、体外实验检测其抑癌作用。结果：凝胶过滤获得的含６０～９７ｋＤ蛋白的４１，４７和５３管的ＨＡＣ可以降低肿瘤发生率、延长肿瘤出现时间及降低小鼠死亡率。结论：Ｂ１６细胞胞浆中的６０～９７ｋＤ的ＨＡＣ具有免疫原性及抑瘤作用，为制备肿瘤疫苗提供了实验依据。 展开更多

关键词 热休克蛋白-抗原肽复合物 黑色素瘤 B16细胞 CTL

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肝癌热休克蛋白-抗原肽复合物的构建及诱导CTL反应的初步研究 被引量：9

2

作者 郭爱林 隋延仿 +3 位作者 张立红 曲萍 王小平 叶菁 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2001年第10期725-728,共4页

目的:研究体外构建热休克蛋白-抗原肽复合物的方法,观察其在体外的抗肿瘤作用。方法:用经43℃热处理1小时的人肝细胞悬液,经过裂解液裂解,60%～80%饱和硫酸铵沉淀,用SephadexG-100柱制备,取分子量为70KD组份,Westernblot进行性质鉴定。... 目的:研究体外构建热休克蛋白-抗原肽复合物的方法,观察其在体外的抗肿瘤作用。方法:用经43℃热处理1小时的人肝细胞悬液,经过裂解液裂解,60%～80%饱和硫酸铵沉淀,用SephadexG-100柱制备,取分子量为70KD组份,Westernblot进行性质鉴定。应用多肽解离液处理该组份,SephadexG-25柱过滤获得未结合多肽的蛋白分子,使其在体外与肝癌抗原肽SLIVHLNEV结合,构建成热休克蛋白-抗原肽复合物。应用此复合物刺激树突状细胞,激活同源外周血T淋巴细胞产生肿瘤特异性杀伤T淋巴细胞(CTL),应用MTT法检测其对T2细胞及肿瘤细胞的杀伤活性。结果:所得蛋白经电泳及Westernblot进行蛋白分子量及性质鉴定为热休克蛋白70。SephadexG-25柱双分离法证实应用上述方法成功构建了肝癌热休克蛋白70-抗原肽复合物,用该复合物负荷树突状细胞在体外可以诱导出较强的肝癌抗原肽特异性CTL,可以杀伤负荷有该肽的T2细胞及递呈该肽的肿瘤细胞系。结论:体外构建的热休克蛋白-抗原肽复合物可以增强抗原肽诱导CTL反应能力,热休克蛋白是良好的T细胞免疫佐剂,有可能在肿瘤疫苗治疗中发挥重要作用。 展开更多

关键词 热休克蛋白 肝癌 抗原肽 特异性杀伤性T淋巴细胞 树突状细胞

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热休克蛋白-多肽复合物诱导肿瘤特异性免疫的机理

3

作者 时永全 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1997年第A02期58-60,共3页

近年研究发现，肿瘤组织的热休克蛋白－多肽复合物具有肿瘤疫苗的免疫作用，可诱导动物产生特异性的抗肿瘤免疫应答。在诱导免疫应答中，巨噬细胞和Ｂ细胞作为抗原提呈细胞而发挥作用。

关键词 热休克蛋白 肿瘤疫苗 多肽复合物

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氟胞嘧啶/胞嘧啶脱氨酶自杀基因疗法结合热休克蛋白多肽复合物治疗小鼠胃癌 被引量：2

4

作者 陈平 陈志琳 +2 位作者 徐立春 孙振华 施诚仁 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2002年第1期31-34,共4页

目的 :研究氟胞嘧啶 /胞嘧啶脱氨酶 (5 FC/CD)基因疗法与热休克蛋白 多肽复合物 (HSP70 PC)免疫疗法联合抗肿瘤效果。方法 :将携带CD基因的重组腺病毒注射到小鼠MFC瘤体内 ,腹腔注射 5 FC ,同时皮下接种HSP70 PC。结果 :经联合治疗... 目的 :研究氟胞嘧啶 /胞嘧啶脱氨酶 (5 FC/CD)基因疗法与热休克蛋白 多肽复合物 (HSP70 PC)免疫疗法联合抗肿瘤效果。方法 :将携带CD基因的重组腺病毒注射到小鼠MFC瘤体内 ,腹腔注射 5 FC ,同时皮下接种HSP70 PC。结果 :经联合治疗后 ,70 %荷瘤小鼠肿瘤体积缩小 ,消退 ,小鼠存活期延长 ,细胞毒T淋巴细胞(CTL)杀伤活性增高 ,CD+ 4及CD+ 8T细胞浸润明显。结论 :5 FC/CD基因疗法结合HSP PC免疫疗法抗小鼠MFC瘤作用显著 ,具有临床应用前景。 展开更多

关键词 自杀基因 热休克蛋白-多肽复合物 MFC胃癌细胞 氟胞嘧啶/胸嘧啶脱氨酶 小鼠

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鱼胶原蛋白肽对α-乳白蛋白和表没食子儿茶素没食子酸酯聚集行为的影响及所形成三元复合物的热稳定性 被引量：2

5

作者 杨伟 陈如炎 +7 位作者 徐响 赵通 李根 郝一博 王文娟 焦梦婷 张浩 李波 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第14期55-60,共6页

为研究鱼胶原蛋白肽(CP)对α-乳白蛋白(α-La)和表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)聚集行为的影响及其形成的三元复合物的热稳定性,采用浊度法、动态光散射、荧光光谱和圆二色谱四种光谱学手段。结果表明,α-La、EGCG和CP的添加顺序直接... 为研究鱼胶原蛋白肽(CP)对α-乳白蛋白(α-La)和表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)聚集行为的影响及其形成的三元复合物的热稳定性,采用浊度法、动态光散射、荧光光谱和圆二色谱四种光谱学手段。结果表明,α-La、EGCG和CP的添加顺序直接影响所形成的三元复合物的结构特性。在温度为25℃条件下,低浓度的CP促进α-LaEGCG复合物的聚集,聚集体粒径增大,粒径分布不均一,溶液浊度增加;而较高浓度的CP则抑制α-La和EGCG的聚集行为,聚集体粒径较小,粒径分布均一,溶液相对澄清。zeta电位(ζ-电位)结果表明,在澄清溶液中,溶液的ζ-电位接近于0,这可能与CP抑制α-La和EGCG聚集的机理有关。荧光结果表明,CP的加入使三元复合物中α-La的结构伸展,α-La分子中色氨酸的亲水性增强。圆二色谱分析表明,澄清溶液中,CP使三元复合物中α-La的α-螺旋结构增加,而β-折叠、β-转角和无规则卷曲结构减小。热处理能够进一步降低溶液的浊度,增加颗粒粒径,使三元复合物中的α-La结构更加伸展,但对溶液ζ-电位和α-La二级结构影响不大。 展开更多

关键词 鱼胶原蛋白肽 Α-乳白蛋白 表没食子儿茶素没食子酸酯 三元复合物 聚集 热稳定性

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接种卡介苗对热休克蛋白65-MUC1抗原肽融合蛋白抑瘤作用的影响

6

作者 任淑萍 万敏 +3 位作者 卫红飞 王莉 于永利 王丽颖 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期598-601,共4页

目的:探讨接种卡介苗对热休克蛋白65-MUC1抗原肽融合蛋白(HSP65-MUC1)所激发的抑瘤作用的影响。方法:给经卡介苗免疫后产生HSP65抗体的小鼠注射HSP65-MUC1融合蛋白3次,然后给小鼠接种MUC1阳性的B16肿瘤细胞,观察HSP65-MUC1融合蛋白对MUC... 目的:探讨接种卡介苗对热休克蛋白65-MUC1抗原肽融合蛋白(HSP65-MUC1)所激发的抑瘤作用的影响。方法:给经卡介苗免疫后产生HSP65抗体的小鼠注射HSP65-MUC1融合蛋白3次,然后给小鼠接种MUC1阳性的B16肿瘤细胞,观察HSP65-MUC1融合蛋白对MUC1阳性的B16肿瘤细胞在已产生HSP65抗体的小鼠体内生长的抑制作用。结果:HSP65-MUC1能够显著抑制MUC1阳性的B16肿瘤细胞在已产生HSP65抗体小鼠体内的生长,HSP65-MUC1组小鼠的肿瘤重量和体积显著地低于PBS组。结论:接种卡介苗并不影响HSP65-MUC1所激发的对MUC1阳性B16肿瘤细胞生长的抑制作用。 展开更多

关键词 卡介苗 热休克蛋白 融合蛋白 MUC1抗原肽 免疫复合物

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人脑星形细胞瘤中热休克蛋白70肽复合物的分离纯化

7

作者 方伯言 王大江 +2 位作者 方伟 许德顺 贾建平 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2005年第4期262-263,共2页

关键词 人脑星形细胞瘤 热休克蛋白70 肽复合物 分离纯化 神经系统疾病 肿瘤 蛋白提取

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热休克蛋白在递呈肿瘤抗原多肽中的作用 被引量：3

8

作者 吴厚生 俞文 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1996年第2期83-85,共3页

化学致癌剂诱发的肿瘤特异性移植抗原(TSTA)与热休克蛋白(HSP)相关联。HSP本身不是TSTA,而是作为抗原递呈分子或抗原递呈辅助分子把TSTA递呈给T杀伤细胞(CTL)。HSP能广泛地与胞浆内多肽结合并表达在瘤细胞表面,直接激活γ/δ^+CD8^+细胞... 化学致癌剂诱发的肿瘤特异性移植抗原(TSTA)与热休克蛋白(HSP)相关联。HSP本身不是TSTA,而是作为抗原递呈分子或抗原递呈辅助分子把TSTA递呈给T杀伤细胞(CTL)。HSP能广泛地与胞浆内多肽结合并表达在瘤细胞表面,直接激活γ/δ^+CD8^+细胞,也能把多肽转运给经典MHC I(MHC Ia)类分子和类似I类(MHC Ib)分子,后两者分别激活α/β和γ/δ^+CD8^+T细胞,并使这两种CTL细胞发挥抗肿瘤效应。由于HSP在结合和递呈抗原时,不受MHC分子的限定性,因此用HSP-肿瘤多肽复合物作瘤苗,要比HLA-多肽瘤苗有更大应用价值。 展开更多

关键词 热休克蛋白 递呈肿瘤抗原多肽 作用 肿瘤特异性移植抗原

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降钙素基因相关肽对大鼠心肌缺血损伤热休克蛋白70和核因子-κB的影响 被引量：7

9

作者 路海棠 赵凤琴 《中国全科医学》 CAS CSCD 2008年第21期1941-1943,共3页

目的观察降钙素基因相关肽(CGRP)对大鼠心肌缺血损伤热休克蛋白70(HSP70)和核因子-κB(NF-κB)的影响,探讨CGRP的抗心肌缺血损伤的作用及其机制。方法将24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(Ⅰ组)、缺血损伤组(Ⅱ组)和缺血损伤+CGRP组(Ⅲ... 目的观察降钙素基因相关肽(CGRP)对大鼠心肌缺血损伤热休克蛋白70(HSP70)和核因子-κB(NF-κB)的影响,探讨CGRP的抗心肌缺血损伤的作用及其机制。方法将24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(Ⅰ组)、缺血损伤组(Ⅱ组)和缺血损伤+CGRP组(Ⅲ组),应用异丙肾上腺素(ISO)建立大鼠心肌缺血损伤模型。观察3组大鼠心电图ST段(J点)的变化;测定血清磷酸肌酸激酶(CPK)、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;测定心肌髓过氧化物酶(MPO)活性;免疫组化法检测心肌NF-κB和HSP70的表达;观察心肌组织超微结构的改变。结果Ⅲ组大鼠的心电图ST段偏移程度和血清CK-MB、CPK、TNF-α水平、MPO活性以及心肌组织HSP70、NF-κB表达与Ⅱ组的比较,差异均有统计学意义(P<0.01),心肌组织结构损伤减轻。结论CGRP对大鼠心肌缺血损伤具有保护作用,可能与促进HSP70表达、抑制NF-κB表达有关。 展开更多

关键词 降钙素基因相关肽 心肌缺血 核因子ΚB 热休克蛋白70 肿瘤坏死因子-α

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Hsp70-H22肿瘤细胞肽复合物与树突状细胞成熟的关系 被引量：8

10

作者 黄波 冯作化 +1 位作者 张桂梅 李东 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期113-116,共4页

探讨热休克蛋白 70 (Hsp70 ) - H2 2肽复合物与小鼠骨髓来源的树突状细胞 (dendritic cell,DC)成熟之间的关系。采用 GM- CSF、IL- 4刺激培养小鼠骨髓细胞 ,增殖产生大量 DCs;从 H2 2肝癌细胞中获取肿瘤细胞肽 ,体外与Hsp70进行结合 ,... 探讨热休克蛋白 70 (Hsp70 ) - H2 2肽复合物与小鼠骨髓来源的树突状细胞 (dendritic cell,DC)成熟之间的关系。采用 GM- CSF、IL- 4刺激培养小鼠骨髓细胞 ,增殖产生大量 DCs;从 H2 2肝癌细胞中获取肿瘤细胞肽 ,体外与Hsp70进行结合 ,结合产物修饰 DC,通过细胞因子检测试剂盒和流式细胞仪对修饰的 DCs上清液和 DCs膜表面分子进行检测。发现 Hsp70 - H2 2肽复合物修饰的 DCs大量分泌 IL- 12、TNF- α、IL- 1β等细胞因子 ,并且高表达主要组织相容性 类抗原 (MHC 类 )、 CD80、 CD40等分子 ,而单独的 Hsp70或 H2 2肽则不具有此作用。结果提示 :Hsp70 - H2 2肽复合物可诱导 DC成熟 ,这种成熟的 展开更多

关键词 热休克蛋白70-H22肿瘤细胞肽复合物 树突状细胞 细胞成熟 肿瘤免疫

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肺癌gp96-多肽复合物/DC疫苗体外诱导CTL反应的实验研究 被引量：1

11

作者 沈晨阳 刘军 +5 位作者 王丹蕾 赵辉 张国良 蔡鹏 童春容 王俊 《中国肺癌杂志》 CAS 2002年第6期435-439,共5页

目的　研究热休克蛋白gp96 多肽复合物负载树突状细胞 (dendriticcell,DC)后 ,能否诱导出gp96 多肽复合物特异性的细胞毒性T细胞 (cytotoxicTlymphocyte ,CTL)反应。方法　从一例肺癌患者肿瘤组织中提取gp96 多肽复合物和自体肿瘤细胞... 目的　研究热休克蛋白gp96 多肽复合物负载树突状细胞 (dendriticcell,DC)后 ,能否诱导出gp96 多肽复合物特异性的细胞毒性T细胞 (cytotoxicTlymphocyte ,CTL)反应。方法　从一例肺癌患者肿瘤组织中提取gp96 多肽复合物和自体肿瘤细胞溶解物 ,分别负载从该患者骨髓血中培养的DC。以不同形式的抗原 /DC疫苗分别刺激由患者外周血中分离的淋巴细胞。采用ELISA法检测淋巴细胞所释放的IFN γ量作为CTL反应的指标 ;以Cr51 释放实验分析致敏后的淋巴细胞对不同靶细胞的裂解和杀伤作用。结果　所有肿瘤抗原致敏淋巴细胞后均可以诱导产生CTL反应 ,其中以gp96 多肽复合物 /DC疫苗诱导释放的IFN γ量最高。肿瘤抗原致敏淋巴细胞后对原代培养的肿瘤细胞的杀伤作用高于PG细胞和K5 62细胞。结论　自体肿瘤组织中提取的gp96 多肽复合物能诱导出肿瘤特异性CTL反应 ,而负载DC后能激发起更强的CTL。 展开更多

关键词 gp96-多肽复合物 CTL反应 实验研究 树突状细胞 特异性CTL 肿瘤疫苗 肺癌 热休克蛋白

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肾腺癌中T细胞亚群和HSP96肿瘤抗原肽复合物关系的探讨

12

作者 李建民 李慧中 +2 位作者 李黎明 孙光 畅继武 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期211-213,217,共4页

目的:探讨肾腺癌无出血坏死者和肾腺癌有出血坏死与行肾动脉栓塞术者T细胞亚群的分布及意义、两组肾腺癌患者肿瘤组织中热休克蛋白(HSP96)的分布有无差异及意义。通过提取出肾腺癌患者癌组织中的HSP96肽复合物找到肿瘤相关的抗原肽。方... 目的:探讨肾腺癌无出血坏死者和肾腺癌有出血坏死与行肾动脉栓塞术者T细胞亚群的分布及意义、两组肾腺癌患者肿瘤组织中热休克蛋白(HSP96)的分布有无差异及意义。通过提取出肾腺癌患者癌组织中的HSP96肽复合物找到肿瘤相关的抗原肽。方法:1)选取肾腺癌无出血坏死患者30例,肾腺癌有出血坏死者17例,行肾动脉栓塞术患者13例。应用两步法免疫组织化学染色观察其T亚群的分布及HSP96的含量和分布。2)通过经典的HSP96-抗原肽复合物提取方法提取出热休克蛋白肽复合物并进行质谱分析。结果:1)两组比较CD3^+T细胞、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞及CD4^+/CD8^+的比值有统计学差异(P<0.05)。2)两组比较肾腺癌中含有的HSP96没有统计学意义(P>0.05)。3)经LC-ESI-MS-MS测得其中两个主要肽段的序列分别为LVPLEGWGGNVM和PPVYYVPYVVL,其分子量分别为1 270.68和1 307.70。结论:术前行动脉栓塞术和肾腺癌有出血坏死者因为肿瘤细胞的坏死而使其细胞内具有抗原性的肽段释放出来,从而提高了效应T细胞在肿瘤局部的数量,对肿瘤组织的杀伤及抑制肿瘤细胞的扩散具有重要的意义。根据gp96结合肽的特点推测其可能为肿瘤抗原肽,有待进一步鉴定。 展开更多

关键词 肾腺癌 T细胞亚群 热休克蛋白96 肽复合物

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体外构建的HSP70-肝癌抗原肽诱导抗原肽特异性免疫反应 被引量：12

13

作者 郭爱林 隋延仿 +3 位作者 曲萍 张立红 叶菁 王小平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期584-586,592,共4页

目的 :研究体外构建的HSP70 肝癌抗原肽复合物诱导针对肝癌的特异性免疫反应能力 ,为该复合物的临床应用奠定基础。方法 :在体外构建HSP70 肝癌抗原肽复合物 ,联合应用粒 /巨细胞集落刺激因子 (GM CSF)及白介素 4 (IL 4 )直接从志愿... 目的 :研究体外构建的HSP70 肝癌抗原肽复合物诱导针对肝癌的特异性免疫反应能力 ,为该复合物的临床应用奠定基础。方法 :在体外构建HSP70 肝癌抗原肽复合物 ,联合应用粒 /巨细胞集落刺激因子 (GM CSF)及白介素 4 (IL 4 )直接从志愿者外周血中培养出DC ;以HSP70、HSP70 肝癌抗原肽、抗原肽分别刺激DC ,DC激活同源的T淋巴细胞产生细胞毒性T淋巴细胞 (CTL) ,检测其杀伤T2细胞和肝癌细胞系的能力。结果 :HSP70 抗原肽、抗原肽均可诱导CD8+的抗原肽特异性CTL ,而前者的诱导效果更强。结论 :体外构建的HSP70 抗原肽复合物具有免疫原性 ,HSP70可以增强抗原肽诱导特异性免疫反应的能力 ,HSP70 展开更多

关键词 热休克蛋白 肝癌 抗原肽 细胞毒性T淋巴细胞 HSP70 特异性免疫反应

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HSP70多肽复合物修饰DCs疫苗抗胰腺癌荷瘤小鼠的实验研究 被引量：12

14

作者 张晓娟 董坚 +2 位作者 吴振林 洪敏 邢海霞 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期792-796,共5页

目的:探讨负载热休克蛋白70多肽复合物(HSP70-PC)抗原的树突状细胞(DCs)疫苗对胰腺癌荷瘤小鼠的免疫治疗作用。方法:采用低渗裂解、ConA-Sepharose亲和层析及ADP-Agarose亲和层析法,从小鼠胰腺癌(MPC83)肿瘤组织中纯化HSP70-PC,修饰小... 目的:探讨负载热休克蛋白70多肽复合物(HSP70-PC)抗原的树突状细胞(DCs)疫苗对胰腺癌荷瘤小鼠的免疫治疗作用。方法:采用低渗裂解、ConA-Sepharose亲和层析及ADP-Agarose亲和层析法,从小鼠胰腺癌(MPC83)肿瘤组织中纯化HSP70-PC,修饰小鼠骨髓来源的树突状细胞(DCs),制备树突状细胞HSP70多肽肿瘤疫苗,用MTT法检测混合淋巴细胞反应(MLR)中HSP70-PC致敏DC对CTL的增殖及活化效果;建立MPC83荷瘤小鼠模型,观察树突状细胞HSP70多肽肿瘤疫苗对荷瘤小鼠治疗的效果和小鼠存活期。结果:经上述方法分离、纯化获得了较高纯度的HSP70-PC蛋白质;HSP70-PC在1.5～2.0μg/ml范围内可达到刺激树突状细胞最强效果,用HSP70-PC修饰的DCs能增强T细胞的增殖和活化能力;应用树突状细胞HSP70多肽肿瘤疫苗治疗荷瘤小鼠能显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,延长荷瘤小鼠存活期。结论:采用低压亲和层析柱可从胰腺癌瘤块中获得较高纯度HSP70多肽复合物,其修饰的DCs疫苗用于荷瘤小鼠免疫治疗有显著疗效,为临床胰腺癌生物免疫治疗奠定基础。 展开更多

关键词 胰腺癌 热休克蛋白70多肽复合物 树突状细胞 肿瘤免疫

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HSP70多肽复合物修饰树突细胞抗胰腺癌研究 被引量：4

15

作者 董坚 吴振林 +2 位作者 贾伟 张晓娟 陈明清 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期28-33,共6页

目的:研究肿瘤热休克蛋白70(HSP70)多肽复合物修饰树突状细胞激活淋巴细胞治疗胰腺癌的策略和方法。方法:采用低渗裂解,ConA-Sepharose亲和层析柱及ADP-Agarose亲和层析柱,从小鼠胰腺癌(MPC83)瘤块中纯化HSP70多肽复合物;纯化出的70KD... 目的:研究肿瘤热休克蛋白70(HSP70)多肽复合物修饰树突状细胞激活淋巴细胞治疗胰腺癌的策略和方法。方法:采用低渗裂解,ConA-Sepharose亲和层析柱及ADP-Agarose亲和层析柱,从小鼠胰腺癌(MPC83)瘤块中纯化HSP70多肽复合物;纯化出的70KD蛋白修饰小鼠骨髓来源诱导树突细胞(DC)并制备树突细胞HSP70多肽肿瘤疫苗,MTT法检测修饰后DC增殖活性;用修饰后DC激活小鼠脾淋巴细胞,MTT法检测激活淋巴细胞在不同效靶比下对MPC83的体外杀伤活性。结果:获得较高纯度分子量为70kD左右的蛋白质;50～100ngHSP70多肽复合物可修饰104树突细胞,每克瘤块能获取HSP70多肽复合物约100μg;来自MPC83细胞瘤块HSP70多肽复合物激活的淋巴细胞能特异性杀伤MPC83细胞。结论:采用低压亲和层析柱可从胰腺癌瘤块中获得较高纯度HSP70多肽复合物,HSP多肽复合物DC疫苗用于胰腺癌细胞免疫治疗能获得体外杀伤效果,为临床胰腺癌生物免疫治疗奠定基础。 展开更多

关键词 胰腺癌 热休克蛋白70多肽复合物 蛋白质纯化 树突状细胞

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gp96多肽复合物介导的细胞毒性T淋巴细胞对食管腺癌细胞的免疫杀伤作用 被引量：4

16

作者 马丽萍 潘秀英 +2 位作者 李娜 刘玉京 陈晓欣 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期525-528,共4页

目的 :研究肿瘤细胞来源的gp96多肽复合物介导的对同一类型肿瘤的免疫治疗作用。方法 :提取纯化食管腺癌细胞系SEG 1裸鼠成瘤组织的gp96蛋白多肽复合物 ,与外周血单个核细胞 (PBMNC)诱导培养的树突状细胞(DC)结合 ,制备gp96 DC疫苗 ;... 目的 :研究肿瘤细胞来源的gp96多肽复合物介导的对同一类型肿瘤的免疫治疗作用。方法 :提取纯化食管腺癌细胞系SEG 1裸鼠成瘤组织的gp96蛋白多肽复合物 ,与外周血单个核细胞 (PBMNC)诱导培养的树突状细胞(DC)结合 ,制备gp96 DC疫苗 ;台盼蓝拒染法测定淋巴细胞增殖率 ;ELISA方法检测细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)培养上清液的γ干扰素 (IFN γ)含量 ,MTT法检测CTL对靶细胞SEG 1的杀伤率。结果 :5 5g瘤组织提取纯化gp96蛋白12 0 μg ;单独DC、单独gp96及gp96 DC均能刺激淋巴细胞增殖 ,产生CTL ,释放IFN γ ,对靶细胞SEG 1均显示一定的杀伤作用 ,以gp96 DC的作用最明显 ,在效靶比 4 0∶1时 ,杀伤率为 6 8%。单独DC诱导的CTL对SEG 1、K5 6 2的杀伤作用与非抗原刺激的淋巴细胞比较 ,统计学差异无显著性。结论 :肿瘤来源的热休克蛋白gp96可使DC具有更强的刺激T淋巴细胞增殖的能力 ,所产生的CTL对靶肿瘤细胞有明显的特异杀伤作用。 展开更多

关键词 热休克蛋白GP96 杀伤作用 CTL 细胞毒性T淋巴细胞 DC 食管腺癌 介导 提取纯化 多肽 复合物

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热休克蛋白在口腔免疫中的研究进展 被引量：4

17

作者 于西佼 李纾 《国外医学（口腔医学分册）》 2006年第2期114-116,共3页

热休克蛋白是一类分布广泛的高保守蛋白,作为重要的分子伴侣,具有重要的生理功能,与口腔感染性疾病、口腔自身免疫性疾病、口腔癌症等研究领域联系密切。特别是口腔微生物热休克蛋白和肿瘤热休克蛋白多肽复合物疫苗的深入研究,将对口腔... 热休克蛋白是一类分布广泛的高保守蛋白,作为重要的分子伴侣,具有重要的生理功能,与口腔感染性疾病、口腔自身免疫性疾病、口腔癌症等研究领域联系密切。特别是口腔微生物热休克蛋白和肿瘤热休克蛋白多肽复合物疫苗的深入研究,将对口腔感染及肿瘤的治疗和预防有着开创性意义。 展开更多

关键词 热休克蛋白 分子伴侣 热休克蛋白多肽复合物 疫苗

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rhHSP70-HER2/neu抗原肽对小鼠乳腺癌的治疗作用研究

18

作者 马杰 焦平 +5 位作者 陈月 王毅 耿学军 宿晓云 周余来 颜炜群 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期224-227,共4页

目的:使用在毕赤酵母中重组表达的rhHSP70与合成的HER2/neu抗原肽在特定条件下形成复合物,探讨其用于肿瘤生物治疗的可行性。方法:在ADP存在的条件下,将rhHSP70与合成的HER2/neu抗原肽体外非共价结合形成复合物,并分次免疫BALB/c小鼠,... 目的:使用在毕赤酵母中重组表达的rhHSP70与合成的HER2/neu抗原肽在特定条件下形成复合物,探讨其用于肿瘤生物治疗的可行性。方法:在ADP存在的条件下,将rhHSP70与合成的HER2/neu抗原肽体外非共价结合形成复合物,并分次免疫BALB/c小鼠,检测该复合物诱导特异性CTL的能力和对小鼠乳腺癌的治疗作用。结果:rhHSP70-HER2/neu抗原肽复合物免疫小鼠后,可以诱导出肿瘤特异性CTL,并对小鼠的乳腺癌有明显的治疗作用。结论:在毕赤酵母中重组表达的rhHSP70可以在体外与一定的抗原肽非共价结合形成复合物,该复合物具有较强的诱导特异性CTL的能力。 展开更多

关键词 重组人热休克蛋白70 抗原肽 乳腺癌 免疫治疗

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利用HLA-DRβ1亚型同源多肽筛选类风湿关节炎相关抗原的研究

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作者 栗占国 肖利群 +1 位作者 韩蕾 Gary Pestano 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期152-154,共3页

目的 :筛选与类风湿关节炎易感基因HLA DRβ1亚型同源多肽结合的抗原性蛋白。方法 :利用HLA DRβ1亚型同源多肽亲和层析柱结合类风湿关节炎患者B细胞可溶性蛋白 ,并以pH梯度洗脱获取HLA DRβ1同源多肽结合蛋白。 结果 :类风湿关节炎易... 目的 :筛选与类风湿关节炎易感基因HLA DRβ1亚型同源多肽结合的抗原性蛋白。方法 :利用HLA DRβ1亚型同源多肽亲和层析柱结合类风湿关节炎患者B细胞可溶性蛋白 ,并以pH梯度洗脱获取HLA DRβ1同源多肽结合蛋白。 结果 :类风湿关节炎易感基因HLA DRβ1亚型同源多肽可高亲和力结合II型胶原、热休克蛋白 90和组蛋白等 5种抗原蛋白。 结论 :II型胶原及热休克蛋白 90可能通过与HLA DRβ1分子形成二聚体复合物参与类风湿关节炎的发病。 展开更多

关键词 类风湿关节炎 HLA-DRβ1 亚型结合抗原 同源多肽 PH梯度洗脱 Ⅱ型胶原 热休克蛋白

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HSP70-肿瘤肽的纯化及其抗肿瘤免疫效应 被引量：14

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作者 陈代雄 苏艳蓉 邵根泽 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期169-172,共4页

目的 :探索热休克蛋白 70 (HSP70 ) 肿瘤肽分离、纯化方法 ,并观察其抗肿瘤免疫保护效应。方法 :采用低渗匀浆、超速离心、ConA Sepharose亲和层析、ADP Agarose亲和层析和DEAE离子交换的亲和层析 ,从热处理的小鼠肝癌 (HCaF)细胞中分... 目的 :探索热休克蛋白 70 (HSP70 ) 肿瘤肽分离、纯化方法 ,并观察其抗肿瘤免疫保护效应。方法 :采用低渗匀浆、超速离心、ConA Sepharose亲和层析、ADP Agarose亲和层析和DEAE离子交换的亲和层析 ,从热处理的小鼠肝癌 (HCaF)细胞中分离、纯化HSP70 肿瘤肽 ,并通过主动免疫保护试验观察其抗肿瘤免疫效应。结果 :蛋白得率为每g湿重瘤细胞可纯化 5 0～ 10 0 μgHSP70 肿瘤肽 ;经SDS PAGE和Westernblot检测 ,纯化的HSP70 肿瘤肽具有很高的纯度和特异性 ;HSP70 肿瘤肽主动免疫的小鼠可抵抗HCaF细胞的攻击 ,存活率达 75 %。结论 :采用低压亲和层析可获得高纯度的HSP70 肿瘤肽 ,且可诱导明显的抗肿瘤免疫保护效应。 展开更多

关键词 热休克蛋白70-肿瘤肽 蛋白质纯化 主动免疫

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