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ZnFe_(2)O_(4)纳米颗粒影响烟碱型乙酰胆碱受体突变型黑腹果蝇的寿命和发育 被引量:1
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作者 闫汶浩 唐雯聪 +4 位作者 喻琪 白珠君 牛津 杨进军 孙永彦 《昆虫学报》 北大核心 2025年第6期797-806,共10页
【目的】本研究旨在考察ZnFe_(2)O_(4)纳米颗粒对烟碱型乙酰胆碱受体突变型(Rye)黑腹果蝇Drosophila melanogaster寿命和发育的影响。【方法】针对Rye黑腹果蝇设置了3组ZnFe_(2)O_(4)纳米颗粒暴露处理(分别含200,400和600μg/mL ZnFe_(2... 【目的】本研究旨在考察ZnFe_(2)O_(4)纳米颗粒对烟碱型乙酰胆碱受体突变型(Rye)黑腹果蝇Drosophila melanogaster寿命和发育的影响。【方法】针对Rye黑腹果蝇设置了3组ZnFe_(2)O_(4)纳米颗粒暴露处理(分别含200,400和600μg/mL ZnFe_(2)O_(4)),并监测其成虫寿命,同时收集产生的F_(1)代记录其发育情况,检测亲代Rye果蝇成虫的氧化应激水平。【结果】ZnFe_(2)O_(4)纳米颗粒暴露后黑腹果蝇亲代成虫寿命缩短,F_(1)代化蛹进程加快、羽化的成虫数减少、雌雄比例上升。与无ZnFe_(2)O_(4)的对照组相比,400和600μg/mL ZnFe_(2)O_(4)纳米颗粒暴露下,雌成虫寿命分别缩短了9%和24%,雄成虫寿命分别缩短了7%和31%;F_(1)代在暴露于200-600μg/mL ZnFe_(2)O_(4)纳米颗粒时前3 d化蛹率提升了34%~109%;暴露于400和600μg/mL ZnFe_(2)O_(4)纳米颗粒后羽化的雌成虫数分别减少了33%和53%,羽化的雄成虫数分别减少了21%和59%,雌雄性别比分别上升40%和71%。对亲代Rye黑腹果蝇的氧化应激水平分析结果显示,200-600μg/mL ZnFe_(2)O_(4)纳米颗粒暴露引起氧化损伤,显著提高雌雄成虫体内抗氧化酶包括过氧化氢酶(catalase,CAT)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,引起雌雄成虫体内总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)显著增强,并造成雄成虫体内活性氧(reactive oxygen species,ROS)显著积累。【结论】200-600μg/mL ZnFe_(2)O_(4)纳米颗粒暴露可引发Rye黑腹果蝇产生氧化应激响应,缩短成虫寿命,减少后代数量,造成氧化损伤,同时发现ZnFe_(2)O_(4)纳米颗粒暴露对Rye黑腹果蝇雄成虫的影响更为显著。本研究丰富了对昆虫响应锌铁氧体纳米材料暴露的机制的认识,为合理评估锌铁氧体纳米材料对昆虫的影响提供了参考。 展开更多
关键词 黑腹果蝇 烟碱乙酰胆碱受体突变 纳米颗粒 ZnFe_(2)O_(4) 发育 氧化应激
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烟碱型乙酰胆碱受体竞争性调节剂类农药对昆虫的毒性研究进展
2
作者 郭睿 王芷以 +5 位作者 徐艳丽 何小乔 张轶岭 唐旭东 沈中元 王强 《中国蚕业》 2025年第3期35-39,共5页
乙酰胆碱是昆虫神经系统的重要神经递质,其主要受体包括烟碱型乙酰胆碱受体和毒蕈碱型乙酰胆碱受体。作为重要的杀虫剂靶标,乙酰胆碱受体的竞争性调节剂类杀虫剂在农业害虫防控中广泛应用。综述了该类杀虫剂的结构特征、作用机制及毒性... 乙酰胆碱是昆虫神经系统的重要神经递质,其主要受体包括烟碱型乙酰胆碱受体和毒蕈碱型乙酰胆碱受体。作为重要的杀虫剂靶标,乙酰胆碱受体的竞争性调节剂类杀虫剂在农业害虫防控中广泛应用。综述了该类杀虫剂的结构特征、作用机制及毒性效应研究进展,介绍了其主要类别的代表性化合物的杀虫效果。同时,针对近年来农药应用中产生的环境残留、昆虫抗性发展及对非靶标生物的影响,分析了其潜在的生态风险及抗性产生机制,并探讨了合理的抗性管理策略。展望了新型分子设计、环境友好型制剂研发及综合害虫管理策略在未来农药应用中的前景,以期为实现农药的高效、低风险和可持续使用提供理论依据与实践指导。 展开更多
关键词 烟碱乙酰胆碱受体 竞争性调节剂 毒性机制 抗性机制
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健康促进生活方式和烟碱型乙酰胆碱受体亚单位a5基因多态与肺癌发病风险的病例对照研究 被引量:3
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作者 闫继东 董洪超 +2 位作者 吕铮 任淑华 刘学军 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第5期752-755,共4页
目的:研究健康促进生活方式和烟碱型乙酰胆碱受体亚单位a5(CHRNA5)-rs 17486278位点基因多态与肺癌发病风险的关系。方法:以2014年12月至2015年12月唐山市工人医院确诊的216肺癌例患者为病例组,按照年龄、性别、居住地等配对条件选取63... 目的:研究健康促进生活方式和烟碱型乙酰胆碱受体亚单位a5(CHRNA5)-rs 17486278位点基因多态与肺癌发病风险的关系。方法:以2014年12月至2015年12月唐山市工人医院确诊的216肺癌例患者为病例组,按照年龄、性别、居住地等配对条件选取639例健康体检人群为对照组。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)检测CHRNA5-rs 17486278位点基因多态,结合两组人群的健康资料,分析健康促进生活方式和遗传因素与肺癌发病风险的关系。结果:Logistic回归显示健康促进生活方式六个维度中的压力管理与肺癌发生有关,OR值为1.770(95%CI:1.262~2.483,P=0.001);病例组和对照组间CHRNA5-rs 17486278等位基因分布频率之间比较,差异有统计学意义(X^2=10.067,P=0.002);压力管理与吸烟指数、吸烟指数与CHRNA5-rs 17486278位点基因型对肺癌发生的交互作用,差异有统计学意义(X^2交互作用=4.86,P交互作用=0.034;X^2交互作用=8.62,P交互作用=0.003)。结论:健康促进生活方式和CHRNA5-rs 17486278位点基因多态存在协同作用,增加肺癌发生的风险。 展开更多
关键词 肺肿瘤 烟碱乙酰胆碱受体 健康促进生活方式 吸烟
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意大利蜜蜂α1亚型烟碱型乙酰胆碱受体功能表达和分析
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作者 耿俊杰 王昱权 +1 位作者 张坤 吴少英 《热带生物学报》 2024年第5期623-631,共9页
尽管作用于昆虫烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors,nAChRs)的新烟碱类杀虫剂是农作物害虫防治的常用工具,但它们对意大利蜜蜂等传粉昆虫产生严重的负面影响。本研究克隆意大利蜜蜂nAChRα1亚基基因,对其进行系统发... 尽管作用于昆虫烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors,nAChRs)的新烟碱类杀虫剂是农作物害虫防治的常用工具,但它们对意大利蜜蜂等传粉昆虫产生严重的负面影响。本研究克隆意大利蜜蜂nAChRα1亚基基因,对其进行系统发育分析,并利用双电极电压钳技术研究α1亚型nAChR与新烟碱类杀虫剂(吡虫啉、噻虫胺和呋虫胺)的相互作用机制。序列比对和系统进化树分析显示,意大利蜜蜂nAChRα1亚基具有典型的nAChRs亚基家族基因结构域特征,与半翅目昆虫的α1亚基关系最远,与同属膜翅目蜜蜂的α1亚基关系最近。将意大利蜜蜂nAChRα1亚基与大鼠nAChRβ2亚基在非洲爪蟾卵母细胞中共表达,电生理结果显示吡虫啉对Amα1/rβ2 nAChR的激动效率最高,噻虫胺最低,而Amα1/rβ2 nAChR对呋虫胺的激动亲和力最高,对吡虫啉最低。这表明意大利蜜蜂nAChRα1亚基是新烟碱类杀虫剂的作用靶标之一,并且Amα1/rβ2 nAChR对不同新烟碱类杀虫剂敏感性存在差异。本研究结果对于开发作用于害虫的新型高选择性杀虫剂具有重要理论指导意义。 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 烟碱乙酰胆碱受体 α1 功能表达
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神经型烟碱乙酰胆碱受体α7亚单位基因和儿茶酚-O-甲基转移酶基因多态性与精神分裂症的关联研究
5
作者 刘霞 孔凡芝 +4 位作者 彭志珍 万晓娜 王常青 程璐 洪晓虹 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期48-53,共6页
目的探讨CHRNA7、COMT基因多态性与精神分裂症的相关关系。方法采用聚合酶链反应及聚丙烯酰胺凝胶芯片技术,检测粤东地区精神分裂症患者(140例)与正常对照者(100例)CHRNA7基因3个单核苷酸多态性位点(rs2337980、rs1909884、rs883473)和C... 目的探讨CHRNA7、COMT基因多态性与精神分裂症的相关关系。方法采用聚合酶链反应及聚丙烯酰胺凝胶芯片技术,检测粤东地区精神分裂症患者(140例)与正常对照者(100例)CHRNA7基因3个单核苷酸多态性位点(rs2337980、rs1909884、rs883473)和COMT基因3个单核苷酸多态性位点(rs4680、rs737865、rs165599),并对分型结果进行测序鉴定。结果所有位点的单核苷多态性与精神分裂症发病风险无关联(均P>0.05)。结论在中国粤东地区CHRNA7基因3个位点(rs2337980、rs1909884、rs883473)和COMT基因3个位点(rs4680、rs737865、rs165599)的基因多态性可能与精神分裂症无关,但此结论尚需要进一步扩大样本量进行验证。 展开更多
关键词 精神分裂症儿 茶酚-O-甲基转移酶基因 神经烟碱乙酰胆碱受体α7单位基因
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α7烟碱型乙酰胆碱受体在阿尔茨海默病中的作用 被引量:1
6
作者 丁道波 牟文君 +3 位作者 李鑫 陈欢 侯宏卫 胡清源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第11期2897-2904,共8页
随着全球人口老龄化的加剧,阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)发病率持续上升,目前已成为最常见的神经退行性疾病之一。尽管研究人员对AD的病理特征有深入的了解,如淀粉样斑块、Tau蛋白异常磷酸化形成神经元纤维缠结等,但其确切的... 随着全球人口老龄化的加剧,阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)发病率持续上升,目前已成为最常见的神经退行性疾病之一。尽管研究人员对AD的病理特征有深入的了解,如淀粉样斑块、Tau蛋白异常磷酸化形成神经元纤维缠结等,但其确切的病因和发病机制仍不完全清楚。α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)是中枢神经系统中重要的乙酰胆碱受体亚型,广泛分布于大脑的多个区域,尤其是与学习和记忆相关的海马和皮质区域,在神经递质释放、神经可塑性、细胞信号转导以及炎症反应中发挥重要功能。近年来,α7nAChR在AD中的作用受到广泛关注。研究表明,α7nAChR参与β淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)代谢、Tau蛋白磷酸化、神经炎症反应、氧化应激等AD发病进程中的多个重要环节,提示α7nAChR在AD的发病机制中扮演着重要角色,有望作为AD潜在治疗靶点。本综述旨在总结α7nAChR与AD发病的关联及其研究进展,为未来的疾病治疗提供可能的研究方向。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 Α7烟碱乙酰胆碱受体 Β淀粉样蛋白 TAU蛋白 神经炎症
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α7烟碱型乙酰胆碱受体对围手术期神经认知功能的影响研究进展 被引量:2
7
作者 司尚坤 徐迎雪 +2 位作者 张维亮 季加富 张栋斌 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期343-348,共6页
α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)在中枢神经系统和免疫系统中广泛表达,发挥神经-免疫调节作用。一方面,α7nAChR参与神经递质的传递、兴奋性信号的传导和突触可塑性的维持,对于保持神经认知功能的正常与稳定具有重要意义;另一方面,α7n... α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)在中枢神经系统和免疫系统中广泛表达,发挥神经-免疫调节作用。一方面,α7nAChR参与神经递质的传递、兴奋性信号的传导和突触可塑性的维持,对于保持神经认知功能的正常与稳定具有重要意义;另一方面,α7nAChR作为胆碱能抗炎通路的重要组成部分,参与调节中枢系统炎症反应、氧化应激、细胞凋亡和自噬等生理、病理过程,发挥免疫调节和神经保护作用,是改善围手术期神经认知功能的潜在靶点。本文对α7nAChR的生物学特征及其对围手术期神经认知功能的影响进行综述,以期为临床改善手术患者的围手术期神经认知功能提供新的思路和方法。 展开更多
关键词 Α7烟碱乙酰胆碱受体 围手术期 神经认知功能 胆碱能抗炎通路 中枢神经系统疾病
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小菜蛾烟碱型乙酰胆碱受体α亚基cDNA片段的克隆和序列分析 被引量:8
8
作者 韩招久 韩召军 +2 位作者 李凤良 李忠英 陈之浩 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期29-32,共4页
利用简并引物 ,采用PCR等分子生物学技术 ,对小菜蛾烟碱型乙酰胆碱受体 (nAChR)α亚基的cDNA片段进行克隆 ,并对序列进行分析。测序结果显示 ,扩增的目的基因片段包含了nAChRα亚基的 3种亚型 (分别命名为Pxαl、Pxα2、Pxα3) ,都具有... 利用简并引物 ,采用PCR等分子生物学技术 ,对小菜蛾烟碱型乙酰胆碱受体 (nAChR)α亚基的cDNA片段进行克隆 ,并对序列进行分析。测序结果显示 ,扩增的目的基因片段包含了nAChRα亚基的 3种亚型 (分别命名为Pxαl、Pxα2、Pxα3) ,都具有典型的α亚基的结构 :2个相邻的半胱氨酸 ,由 2个半胱氨酸之间二硫键形成包含 15个氨基酸的胞外环 ,与烟碱和α银环蛇毒素结合有关的氨基酸残基。克隆的基因片段在氨基酸序列上和其他昆虫nAChRα亚基基因之间有高达 6 5 %~ 99%的同源性 ,表明克隆的cDNA片段是小菜蛾nAChRα亚基基因的部分序列。 展开更多
关键词 小菜蛾 烟碱 乙酰胆碱受体 Α CDNA片段 克隆 序列分析
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小菜蛾烟碱型乙酰胆碱受体α亚基cDNA的克隆、序列分析与不同发育阶段表达分析 被引量:7
9
作者 赵宇 杨亦桦 +1 位作者 武淑文 吴益东 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期17-26,共10页
烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)介导昆虫中枢神经系统中胆碱能突触兴奋性神经递质的快速传递,也是新烟碱类杀虫剂和多杀菌素的作用靶标。本研究利用RT-PCR和RACE技术,克隆了小菜蛾Plutella xylostella nAChRα亚基的一个新基因(Pxx8)... 烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)介导昆虫中枢神经系统中胆碱能突触兴奋性神经递质的快速传递,也是新烟碱类杀虫剂和多杀菌素的作用靶标。本研究利用RT-PCR和RACE技术,克隆了小菜蛾Plutella xylostella nAChRα亚基的一个新基因(Pxx8)的全长cDNA(GenBank登录号为EU914853)。Pxα8的cDNA序列全长1744bp,开放阅读框为1602bp,编码534个氨基酸,具有nAChRd亚基的典型特征,与其他昆虫nAChRα8亚基具有77%~96%的相似性,与果蝇nAChR132亚基具有76%的相似性。既胡的开放阅读框存在单核苷酸多态性位点,导致多个位点氨基酸的替换。雌性4龄幼虫的多态性位点多于雄性4龄幼虫,而且雌、雄4龄幼虫的多态性位点均不相同。半定量RT—PCR研究结果表明,Pxcα8mRNA在成虫期表达量高于蛹期和4龄幼虫期。本研究结果为进一步研究小菜蛾nAChR亚基的多样性和对多杀菌素的靶标抗性机制提供重要基础。 展开更多
关键词 小菜蛾 烟碱乙酰胆碱受体 Α CDNA克隆 半定量RT-PCR
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马铃薯甲虫3个烟碱型乙酰胆碱受体α亚基基因的克隆及表达分析 被引量:6
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作者 李晨歌 琚阳 +1 位作者 韩召军 姜卫华 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期65-71,共7页
通过克隆马铃薯甲虫(Leptinotarsa decemlineata)烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)基因的全长序列并分析其时空表达量差异,为马铃薯甲虫nAChR亚基功能以及对新烟碱类药剂靶标抗性机制的研究提供重要基础。根据马铃薯甲虫转录组数据,采用RACE... 通过克隆马铃薯甲虫(Leptinotarsa decemlineata)烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)基因的全长序列并分析其时空表达量差异,为马铃薯甲虫nAChR亚基功能以及对新烟碱类药剂靶标抗性机制的研究提供重要基础。根据马铃薯甲虫转录组数据,采用RACE克隆技术获得3个马铃薯甲虫nAChRα基因的cDNA全长序列;通过相似性和进化树分析验证这3个基因的亲缘关系;利用实时荧光定量PCR技术分析这些基因在马铃薯甲虫不同发育阶段和成虫不同部位的表达情况。本试验验证并获得3条nAChRα亚基片段序列,经BLAST比对得出其分别属于nAChRα4、nAChRα7和nAChRα9亚基,进一步克隆得到这些基因的全长序列,分别命名为Ldα4、Ldα7和Ldα9。3个亚基基因编码的氨基酸序列与已知的昆虫同源序列有较高的相似性。其中Ldα4、Ldα7和Ldα9与赤拟谷盗的相似性最高,分别为87%、89%和47%;Ldα4、Ldα7和Ldα9亚基基因在马铃薯甲虫成虫中主要集中于头部和胸部,在蛹期、幼虫和成虫中均有表达,但表达量有明显差异,Ldα4、Ldα7和Ldα9分别在成虫、3龄幼虫和蛹期阶段的表达量最高。克隆获得的3个基因Ldα4、Ldα7和Ldα9具备nAChRα基因的典型结构特征,且与赤拟谷盗的相应基因位于同一分支,进一步验证了同为鞘翅目昆虫的亲缘关系。Ldα4、Ldα7和Ldα9亚基基因在马铃薯甲虫不同生长阶段的表达量有差异,推测这些亚基基因在马铃薯甲虫的不同生长发育中发挥特定作用。 展开更多
关键词 马铃薯甲虫 烟碱乙酰胆碱受体 基因克隆 序列分析 实时荧光定量PCR
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烟碱型乙酰胆碱受体亚型的表达调控及其生理意义 被引量:3
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作者 张盈帆 江华 林子豪 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期44-47,共4页
位于哺乳动物神经肌肉接头突触后膜上的烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)直接参与神经肌肉之间兴奋传递,对肌肉完成正常收缩功能具有十分重要的意义。nAChR是一种杂合五聚体蛋白,按亚单位组成的不同分为成熟型受体εAChR(α2βεδ)和胚胎型... 位于哺乳动物神经肌肉接头突触后膜上的烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)直接参与神经肌肉之间兴奋传递,对肌肉完成正常收缩功能具有十分重要的意义。nAChR是一种杂合五聚体蛋白,按亚单位组成的不同分为成熟型受体εAChR(α2βεδ)和胚胎型受体γAChR (α2βγδ)。本文主要对两者在表达时期、分布范围、调控机制和生理意义方面的差异进行综述。 展开更多
关键词 烟碱乙酰胆碱受体 基因表达和调控
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α3β2与α3β4烟碱型乙酰胆碱受体α和β亚基不同配比的药理活性研究 被引量:2
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作者 朱晓鹏 于津鹏 +3 位作者 黄艺 雷宇苗 长孙东亭 罗素兰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期961-967,共7页
目的:比较α和β亚基不同配比形成α3β2和α3β4烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)敏感性的差异。方法:体外转录获得α和β亚基的cRNA,采用显微注射将3种不同配比(α∶β分别为1∶10、1∶1和10∶1)的cRNA注入非洲爪蟾卵母细胞,利用双电极电压... 目的:比较α和β亚基不同配比形成α3β2和α3β4烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)敏感性的差异。方法:体外转录获得α和β亚基的cRNA,采用显微注射将3种不同配比(α∶β分别为1∶10、1∶1和10∶1)的cRNA注入非洲爪蟾卵母细胞,利用双电极电压钳检测受体表达情况。利用激动剂乙酰胆碱(ACh)和拮抗剂α-芋螺毒素Reg IIA(α-CTx Reg IIA)检测在3种配比条件下形成受体药理活性的差异。结果:对于α3β2 nAChR亚型,在3种配比情况下,ACh的半数有效浓度(EC50)分别为91.2μmol/L、104.4μmol/L和130.6μmol/L,α-CTx Reg IIA的半数抑制浓度(IC50)分别为40.2 nmol/L、36.4 nmol/L和42.3 nmol/L。对于α3β4 nAChR亚型,在3种配比情况下,ACh的EC50分别为44.0μmol/L、110.0μmol/L和230.0μmol/L,α-CTx Reg IIA的IC50分别为226.8 nmol/L、71.5 nmol/L和49.4 nmol/L。结论:α3和β4亚基比例的改变会导致α3β4 nAChR结构和药理活性的改变。α3和β2亚基比例的改变对α3β2 nAChR结构和活性没有影响。 展开更多
关键词 烟碱乙酰胆碱受体 基配比 药理活性 双电极电压钳
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烟粉虱烟碱型乙酰胆碱受体α亚基Btα4基因的克隆和序列分析 被引量:2
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作者 姚明德 杨亦桦 +1 位作者 武淑文 吴益东 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期61-66,共6页
利用RT-PCR和RACE技术,对烟粉虱烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)α亚基的1个基因进行了克隆和序列分析。获得的烟粉虱nAChRα亚基基因的全长cDNA序列含有2 090 bp,其开放阅读框编码564个氨基酸。根据该基因编码的氨基酸序列与其他昆虫乙酰胆... 利用RT-PCR和RACE技术,对烟粉虱烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)α亚基的1个基因进行了克隆和序列分析。获得的烟粉虱nAChRα亚基基因的全长cDNA序列含有2 090 bp,其开放阅读框编码564个氨基酸。根据该基因编码的氨基酸序列与其他昆虫乙酰胆碱受体α亚基氨基酸序列之间的相似性,将该基因命名为Btα4(GenBank注册号为EF590120)。Btα4编码的α亚基含有2个结构域:N端的胞外结构域和C端的跨膜结构域,N端的胞外结构域含有2个相邻的半胱氨酸(α亚基特征序列)、15个氨基酸构成的半胱氨酸环和乙酰胆碱结合区。研究结果对于揭示烟粉虱潜在的对新烟碱类杀虫剂靶标抗性的分子机制具有重要意义。 展开更多
关键词 烟粉虱 烟碱乙酰胆碱受体 Α Bta4 烟碱类杀虫剂
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甜菜夜蛾烟碱型乙酰胆碱受体β1亚基基因的克隆与序列分析(英文) 被引量:1
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作者 尚庆利 梁沛 高希武 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期197-202,共6页
烟碱型乙酰胆碱受体是昆虫体内重要的神经受体,同时也是杀虫剂作用靶标。从甜菜夜蛾Spodoptera exigua3龄幼虫体内提取总的RNA,经过反转录,利用RT-PCR获得了烟碱型乙酰胆碱受体6个α和1个β亚基基因的cD-NA序列片段,并利用cDNA末端快速... 烟碱型乙酰胆碱受体是昆虫体内重要的神经受体,同时也是杀虫剂作用靶标。从甜菜夜蛾Spodoptera exigua3龄幼虫体内提取总的RNA,经过反转录,利用RT-PCR获得了烟碱型乙酰胆碱受体6个α和1个β亚基基因的cD-NA序列片段,并利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)获得了β亚基基因的cDNA序列全长。该基因命名为SenAChRβ1,其长度为2231个碱基,含有一个1575个碱基的开放读码框,开放读码框编码524个氨基酸残基,预测的分子量为60 kDa。推导得到的氨基酸序列与其它昆虫特别是鳞翅目昆虫的烟碱型乙酰胆碱受体β亚基具有高度的同源性,并具有典型的烟碱型乙酰胆碱受体β亚基特征化位点。 展开更多
关键词 甜菜夜蛾 烟碱乙酰胆碱受体 基因克隆 序列分析
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聚集蛋白对脓毒症大鼠骨骼肌烟碱型乙酰胆碱受体亚型异化表达的影响 被引量:1
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作者 吕碧霄 闵苏 杨俊 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1125-1130,1135,共7页
目的探讨聚集蛋白(agrin)对脓毒症大鼠骨骼肌烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptor, nAChR)亚型异化表达的作用。方法采用盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)建立脓毒症大鼠模型。48只2月龄健康雄性SD大鼠... 目的探讨聚集蛋白(agrin)对脓毒症大鼠骨骼肌烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptor, nAChR)亚型异化表达的作用。方法采用盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)建立脓毒症大鼠模型。48只2月龄健康雄性SD大鼠采用随机数字表法分为假手术组(Sham组)、假手术+agrin组(ShamA组)、脓毒症组(CLP组)和脓毒症+agrin组(CLPA组),每组12只。假手术组仅暴露腹腔不进行盲肠结扎穿孔手术,ShamA组和CLPA组在建模后胫前肌内注射100μg/mL agrin溶液0.1 mL。建模后第48小时取大鼠血液样品,检测血浆中炎症因子IL-6水平。行复合肌动作电位(compound muscle action potential, CMAP)检测其振幅、时程、潜伏期及神经传导速度。Western blot和免疫荧光检测大鼠胫前肌组织γ-nAChR和α7-nAChR蛋白表达。结果 Sham组和ShamA组血浆IL-6水平明显低于CLP组和CLPA组(P<0.05)。与Sham组和ShamA组比较,CLP组与CLPA组CMAP时程、潜伏期延长(P<0.05),γ-nAChR和α7-nAChR蛋白表达升高(P<0.05),而CMAP振幅及传导速度降低(P<0.05)。与CLP组比较,CLPA组的CMAP时程、潜伏期缩短(P<0.05),γ-nAChR和α7-nAChR蛋白表达降低(P<0.05),而CMAP振幅及传导速度升高(P<0.05)。结论 Agrin可以减轻脓毒症导致的神经肌肉功能障碍并减少异质化烟碱型乙酰胆碱受体的表达。 展开更多
关键词 聚集蛋白 脓毒症 烟碱乙酰胆碱受体 骨骼肌
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草地贪夜蛾烟碱型乙酰胆碱受体α6和α7亚基基因克隆及其对乙基多杀菌素胁迫的响应 被引量:1
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作者 高祖鹏 静大鹏 +1 位作者 黄晓丹 王振营 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1098-1105,共8页
【目的】烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors,nAchRs)作为昆虫中枢神经系统中重要的神经递质受体,是乙基多杀菌素的重要靶标。本研究旨在克隆草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda nAchR基因,并探析其对乙基多杀菌素胁... 【目的】烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors,nAchRs)作为昆虫中枢神经系统中重要的神经递质受体,是乙基多杀菌素的重要靶标。本研究旨在克隆草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda nAchR基因,并探析其对乙基多杀菌素胁迫的响应。【方法】基于前期草地贪夜蛾转录组数据,采用RT-PCR和RACE分别克隆草地贪夜蛾nAchRα6和α7亚基基因;乙基多杀菌素(0.400 mg/L)处理草地贪夜蛾3龄幼虫48 h后,采用RT-qPCR技术检测nAchRα6和α7亚基基因的表达量的变化。【结果】nAchRα6亚基基因(GenBank登录号:MT951400)开放阅读框长1506 bp,编码502个氨基酸,并具有跨膜区与信号肽;nAchRsα7亚基基因(GenBank登录号:MW557608)开放阅读框长1524 bp,编码508个氨基酸,并具有跨膜区与信号肽。根据氨基酸多序列比对分析,草地贪夜蛾nAchR亚基α6和α7具有烟碱性乙酰胆碱受体α家族典型特征。0.400 mg/L乙基多杀菌素胁迫48 h后,草地贪夜蛾3龄幼虫nAchRα6亚基基因表达量显著增加,而nAchRα7亚基基因表达量无显著性变化。【结论】乙基多杀菌素可能作用于草地贪夜蛾的nAchRα6亚基。本研究为深入研究草地贪夜蛾对乙基多杀菌素的靶标抗性机制奠定了初步基础。 展开更多
关键词 草地贪夜蛾 烟碱乙酰胆碱受体 乙基多杀菌素 基因克隆 表达分析
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α6/α3β4烟碱型乙酰胆碱受体β4亚基双点突变体的制备及其功能研究 被引量:1
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作者 李旭扬 陈舒苗 +2 位作者 于津鹏 罗素兰 长孙东亭 《热带生物学报》 2021年第4期403-411,共9页
在烟碱型乙酰胆碱受体家族中,含α6亚型的受体是比较特殊的一类。研究发现α6β4^(*)亚型(^(*)表示含其他亚基)在神经系统方面具有一定的调节作用,与神经性疼痛、成瘾等多种疾病的发病机制密切相关,可作为潜在的治疗靶点。比对大鼠与人... 在烟碱型乙酰胆碱受体家族中,含α6亚型的受体是比较特殊的一类。研究发现α6β4^(*)亚型(^(*)表示含其他亚基)在神经系统方面具有一定的调节作用,与神经性疼痛、成瘾等多种疾病的发病机制密切相关,可作为潜在的治疗靶点。比对大鼠与人类α6和β4亚基的序列,以野生型基因为模板,采用基因定点突变的方式,成功得到3种相邻位点突变的α6/α3β4受体突变型基因。通过体外转录、显微注射等手段,构建α6/α3β4受体野生型和突变型在非洲爪蟾卵母细胞上的表达模型,并使用双电极电压钳检测受体的表达情况。结果表明,与野生型受体相比,突变体α6/α3β4[S52N, I53V]对ACh的敏感性有所提升,EC_(50)为59.58μmol·L^(-1),是野生型的1/2,而其他两种突变体的敏感性与野生型相同。 展开更多
关键词 α6/α3β4烟碱乙酰胆碱受体 相邻位点突变 体外表达 双电极电压钳
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马铃薯甲虫烟碱型乙酰胆碱受体α5亚基基因的克隆及其表达模式分析 被引量:3
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作者 解林杰 李莎 姜卫华 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期293-301,共9页
[目的]烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)在昆虫中枢神经系统兴奋性神经递质突触传导过程中起重要作用,也是新烟碱类杀虫剂的作用靶标。马铃薯甲虫(Leptinotarsa decemlineata)是重要的检疫性马铃薯食叶害虫。根据报道已鉴定得到该虫10个nAChR... [目的]烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)在昆虫中枢神经系统兴奋性神经递质突触传导过程中起重要作用,也是新烟碱类杀虫剂的作用靶标。马铃薯甲虫(Leptinotarsa decemlineata)是重要的检疫性马铃薯食叶害虫。根据报道已鉴定得到该虫10个nAChR亚基,本研究的目的是进一步完善该虫nAChR亚基的组成和其表达模式。[方法]依据马铃薯甲虫基因组数据,利用PCR和RACE技术对马铃薯甲虫的nAChR亚基基因进行克隆,通过相似性和系统发育树分析验证该基因的亲缘关系。利用实时定量PCR技术检测该基因在马铃薯甲虫各个发育阶段及成虫头、胸、腹和吡虫啉及噻虫嗪处理的4龄幼虫和成虫的表达水平。[结果]克隆获得了该虫又1个nAChRα亚基基因的全长cDNA,将其命名为Ldα5(GenBank登录号为MF197919)。实时定量PCR结果表明:Ldα5在马铃薯甲虫各个发育阶段及成虫头、胸、腹中都有不同程度的表达量,其中在1龄幼虫和成虫头部的表达量最高;吡虫啉和噻虫嗪处理对Ldα5的表达量有不同影响,在幼虫中,吡虫啉导致Ldα5明显下调,而噻虫嗪无明显影响,在成虫中2种药剂的处理都可明显提高Ldα5的表达量。[结论]本研究结果为明确马铃薯甲虫nAChR亚基的生理功能及该虫对新烟碱类杀虫剂的抗性机制等研究奠定了基础。 展开更多
关键词 马铃薯甲虫 烟碱乙酰胆碱受体 基因克隆 序列分析 实时定量PCR
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α4亚基Arg-188和Pro-198突变促进α4β2烟碱型乙酰胆碱受体开放
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作者 俞柳彤 王柳珺 +2 位作者 长孙东亭 吴勇 罗素兰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期673-679,共7页
目的:探讨乙酰胆碱、尼古丁、伐尼克兰和金雀花碱4种激动剂与α4β2烟碱型乙酰胆碱受体(nAChRs)及其突变体相互作用的活性关键位点。方法:体外转录法制备野生型(wt)与突变型α4亚基cRNAs,注射入非洲爪蟾卵母细胞,应用电生理方法,测定4... 目的:探讨乙酰胆碱、尼古丁、伐尼克兰和金雀花碱4种激动剂与α4β2烟碱型乙酰胆碱受体(nAChRs)及其突变体相互作用的活性关键位点。方法:体外转录法制备野生型(wt)与突变型α4亚基cRNAs,注射入非洲爪蟾卵母细胞,应用电生理方法,测定4种激动剂对α4β2 nAChRs及其突变体的门控活性。结果:乙酰胆碱对wtα4β2、α4(R188I)β2、α4(P198Q)β2和α4(R188I,P198Q)β2 nAChRs的半数有效浓度(EC50)分别为67.15、63.83、22.43和1.37μmol/L,尼古丁对wtα4β2、α4(R188I)β2、α4(P198Q)β2和α4(R188I,P198Q)β2 nAChRs的EC50分别为1.43、0.63、1.05和0.27μmol/L。与乙酰胆碱(10 mmol/L)诱导的峰值电流幅度相比,金雀花碱对wtα4β2和α4(R188I,P198Q)β2 nAChRs的最大激动效率(E_(max))从37.62%提升至95.14%,伐尼克兰对wtα4β2和α4(R188I,P198Q)β2 nAChRs的E_(max)也从67.94%提升至94.69%。结论:α4亚基第188位精氨酸(argi⁃nine,Arg,R)和第198位脯氨酸(proline,Pro,P)分别突变成异亮氨酸(isoleucine,Ile,I)和谷氨酰胺(glutamine,Gln,Q)后,增强了α4β2 nAChRs对乙酰胆碱和尼古丁的敏感性,并提高了α4β2 nAChRs对金雀花碱与伐尼克兰的通道开放效率。 展开更多
关键词 α4β2烟碱乙酰胆碱受体 α4基突变 双电极电压钳
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朱砂叶螨烟碱型乙酰胆碱受体α4亚基基因的克隆与序列特征分析
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作者 高品 王帅 +2 位作者 管学琼 卜春亚 师光禄 《北京农学院学报》 2015年第4期1-8,共8页
烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)是一种对神经递质乙酰胆碱起快速反应的激动剂门控离子通道,也是新烟碱类杀虫剂的作用靶标。此研究利用同源克隆结合RACE技术,从朱砂叶螨敏感品系中克隆了一条nAChR基因,全长为2 023bp,开放阅读框长1 635bp,编... 烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)是一种对神经递质乙酰胆碱起快速反应的激动剂门控离子通道,也是新烟碱类杀虫剂的作用靶标。此研究利用同源克隆结合RACE技术,从朱砂叶螨敏感品系中克隆了一条nAChR基因,全长为2 023bp,开放阅读框长1 635bp,编码544个氨基酸。预测分子量(Mr)为62.20kDa,等电点(pI)为5.00。根据同源性及系统发育分析,将其命名为Tcα4,提交至NCBI数据库,获得GenBank登陆号为KP694228。Tcα4具有nAChRα亚基典型结构特征:N端胞外结构域和C端跨膜结构域。Tcα4与二斑叶螨nAChRα4亚基基因序列同源性高达98.71%,与二斑叶螨其他nAChR亚基基因同源性仅在20.07%~43.16%之间,与其他昆虫nAChRα4亚基基因同源性在45.96%~56.07%之间。系统发育分析结果表明朱砂叶螨与二斑叶螨和肩突硬蜱nAChRα4亚基基因在同一分支,与其他昆虫nAChRα4亚基基因则较远。朱砂叶螨nAChRα4亚基基因的克隆为朱砂叶螨其他nAChR亚基基因的研究及以nAChR为作用靶标的新型杀螨剂的研究提供了一种新途径,奠定了基础。 展开更多
关键词 朱砂叶螨 烟碱乙酰胆碱受体 α4 基因克隆 序列分析
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