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炭疽毒素受体胞外区在毕赤酵母中分泌表达、纯化与活性鉴定 被引量:3
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作者 赵剑 徐俊杰 +4 位作者 缪静 李冰 杨秀旭 宋小红 陈薇 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第7期657-661,共5页
使用分泌型表达载体,实现了重组炭疽毒素受体胞外区(rATR(CMG2)-EXCELL)在毕赤酵母KM71H培养物上清中的分泌表达.表达量约占培养物上清总蛋白质的20%.经过螯合柱初步纯化,每升诱导培养物可获得约1mg电泳纯的rATR(CMG2)-EXCELL.体外与配... 使用分泌型表达载体,实现了重组炭疽毒素受体胞外区(rATR(CMG2)-EXCELL)在毕赤酵母KM71H培养物上清中的分泌表达.表达量约占培养物上清总蛋白质的20%.经过螯合柱初步纯化,每升诱导培养物可获得约1mg电泳纯的rATR(CMG2)-EXCELL.体外与配基PA结合试验和细胞保护试验显示,rATR(CMG2)-EXCELL具有很好的生物活性.rATR(CMG2)-EXCELL的成功表达为今后研究炭疽毒素受体的作用机理、发展新型炭疽治疗药物打下基础. 展开更多
关键词 炭疽杆菌 炭疽毒素受体 蛋白质表达 毕赤酵母
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炭疽毒素受体及其与炭疽毒素的相互作用研究进展 被引量:2
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作者 屈野 徐俊杰 陈薇 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期825-828,共4页
关键词 炭疽毒素受体 相互作用 细菌感染性疾病 炭疽杆菌芽胞 生物恐怖袭击 革兰氏阳性 杆菌感染 炭疽芽胞
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炭疽毒素受体2表达受miR-145-5p调控在胰腺癌的作用机制研究 被引量:3
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作者 马林 邓大炜 +4 位作者 兰川 刘胜 唐豪佑 黄孝彬 李建水 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期261-268,共8页
目的:探讨炭疽毒素受体2(anthrax toxin receptor 2,ANTXR2)在胰腺癌组织和细胞中的表达、临床意义和细胞功能,验证miR-145-5p在胰腺癌细胞中调控ANTXR2的作用机制。方法:分析GEO和TCGA数据库中胰腺癌的转录数据和临床数据。通过CCK-8... 目的:探讨炭疽毒素受体2(anthrax toxin receptor 2,ANTXR2)在胰腺癌组织和细胞中的表达、临床意义和细胞功能,验证miR-145-5p在胰腺癌细胞中调控ANTXR2的作用机制。方法:分析GEO和TCGA数据库中胰腺癌的转录数据和临床数据。通过CCK-8实验、流式细胞术、划痕实验和Transwell实验进行细胞功能验证。采用miRNA靶点预测数据库反向预测可能通过ceRNA机制抑制ANTXR2表达的miRNA,并使用双荧光素酶报告实验进行验证。结果:ANTXR2在胰腺癌组织和细胞中的表达均上调(均P<0.05),ANTXR2上调预示着原发肿瘤等级(P<0.05)、肿瘤细胞分化等级(P<0.05)和总体生存期(P<0.05,HR=1.72)均较差。ANTXR2可以促进胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭(均P<0.05)。ANTXR2是miR-145-5p下游的靶标(P<0.01),miR-145-5p可以通过抑制ANTXR2的表达抑制胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。结论:ANTXR2在胰腺癌组织和细胞中过表达,促进胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,且与患者预后有关。miR-145-5p通过调控ANTXR2的表达抑制其促癌作用。 展开更多
关键词 炭疽毒素受体2 miR-145-5p 增殖 迁移和侵袭 胰腺癌
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炭疽毒素受体蛋白作为新型力学敏感分子在关节软骨再生修复中的作用研究
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作者 张旻 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第S01期96-96,共1页
目的本课题组先前采用SILAC技术,发现了1个与整合素(Integrin)β1结构相似的力学敏感分子炭疽毒素受体蛋白(ANTXR)1。从体内外实验两方面探讨ANTXR1在关节软骨再生修复中的作用。方法采用自主研制的多功能细胞正负压加载系统对BMSCs细... 目的本课题组先前采用SILAC技术,发现了1个与整合素(Integrin)β1结构相似的力学敏感分子炭疽毒素受体蛋白(ANTXR)1。从体内外实验两方面探讨ANTXR1在关节软骨再生修复中的作用。方法采用自主研制的多功能细胞正负压加载系统对BMSCs细胞膜片进行压力加载,免疫共沉淀、免疫荧光共定位及正逆向追踪阻断等技术检测细胞中ANTXR1与Integrinβ1之间相互关系并初步探索ANTXR1下游信号转导分子;构建兔髁突软骨缺损模型。 展开更多
关键词 体内外实验 多功能细胞 细胞膜片 炭疽毒素受体 信号转导分子 免疫荧光 免疫共沉淀 加载系统
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编码ATR的胞外区基因cDNA的克隆、测序及表达
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作者 刘建玲 孔庆波 +2 位作者 申烨华 崔延棠 张彦明 《西北大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期424-426,431,共4页
目的克隆并在大肠杆菌中表达编码炭疽毒素受体(anthrax toxin receptor,简称ATR)的胞外区基因。方法收集CHO-K1细胞,提取其总RNA,经反转录成单链cDNA,以此为模板PCR扩增出编码ATR胞外区基因,将该基因克隆入载体pUC19中,测序正确后,亚克... 目的克隆并在大肠杆菌中表达编码炭疽毒素受体(anthrax toxin receptor,简称ATR)的胞外区基因。方法收集CHO-K1细胞,提取其总RNA,经反转录成单链cDNA,以此为模板PCR扩增出编码ATR胞外区基因,将该基因克隆入载体pUC19中,测序正确后,亚克隆入表达载体pMal-c2x中进行表达。结果利用所设计的引物扩增出完整的编码ATR胞外区基因。以大肠杆菌为宿主在IPTG的诱导下获得表达,激光薄层扫描显示表达蛋白占总蛋白的39%。结论获得了编码ATR胞外区基因cDNA及其原核表达产物,为进一步研究炭疽毒素致病机理和炭疽病的防治奠定了基础。 展开更多
关键词 炭疽毒素受体 胞外区基因 RT—PCR 克隆 测序 表达
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新型力学敏感分子ANTXR1在颞下颌关节髁突软骨缺损修复中的作用
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作者 程百祥 赵萤 +2 位作者 丰帆 陈永进 张旻 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第S01期430-430,共1页
目的软骨组织工程技术的出现为修复颞下颌关节髁突软骨缺损这一临床难题带来了希望,有学者发现压力刺激能够促使骨髓间充质干细胞(BMSCs)向软骨细胞分化,但其具体机制尚不明确。本课题组在前期实验中发现,120 kPa加压1 h的压力刺激一方... 目的软骨组织工程技术的出现为修复颞下颌关节髁突软骨缺损这一临床难题带来了希望,有学者发现压力刺激能够促使骨髓间充质干细胞(BMSCs)向软骨细胞分化,但其具体机制尚不明确。本课题组在前期实验中发现,120 kPa加压1 h的压力刺激一方面能够上调BMSCs细胞膜片中炭疽毒素受体蛋白1(ANTXR1)的表达,同时还能促进其向软骨细胞分化。 展开更多
关键词 颞下颌关节 软骨细胞分化 细胞膜片 临床难题 压力刺激 炭疽毒素受体 软骨组织工程 前期实验
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ANTXR1在压力促BMSCs细胞膜片成软骨响应中作用的研究
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作者 程百祥 张旻 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第A01期51-51,共1页
目的寻找修复关节软骨的方法一直是临床难题,近年来软骨组织工程研究成为一个新的突破口,大量研究表明适宜的力学刺激可以促进BMSCs向成软骨方向分化,为了研究其中的力学信号转导机制,本实验将探究与整合素有很多相似性的Ⅰ型跨膜蛋白AN... 目的寻找修复关节软骨的方法一直是临床难题,近年来软骨组织工程研究成为一个新的突破口,大量研究表明适宜的力学刺激可以促进BMSCs向成软骨方向分化,为了研究其中的力学信号转导机制,本实验将探究与整合素有很多相似性的Ⅰ型跨膜蛋白ANTXR1在压力促BMSCs细胞膜片成软骨分化中所发挥的作用。方法首先对BMSCs细胞膜片加以压力刺激,检测ANTXR1、Integrinβ1以及成软骨指标Sox9、Aggrecan和Col-Ⅱ的基因和蛋白表达量。之后用慢病毒构建出下调ANTXR1的BMSCs细胞膜片,采用免疫共沉淀、免疫荧光共定位等技术检测细胞中ANTXR1与Integrinβ1之间相互关系并初步探索ANTXR1下游信号转导分子。结果 120 kPa、1 h的压力刺激能同时上调BMSCs细胞膜片中ANTXR1基因和蛋白表达量的同时促进其成软骨指标的基因和蛋白表达量升高。ANTXR1可与LRP5/6直接结合并产生相互关系,而Integrinβ1的信号通路启动完全不通过LRP5/6。ANTXR1与Integrinβ1具有一定相互联系但是二者并不影响对方在压力刺激下的表达上调。F-actin和其结合蛋白Fscn1可与ANTXR1直接结合而通过构型变化及应力纤维重组参与经ANTXR1的力学信号转导过程。Smad2、Smad4、GSK3β及3-catenin也是ANTXR1的下游信号分子,而这4种信号分子并不与ANTXR1发生直接结合的相互关系,也并不参与基于Integrinβ1的力学信号转导过程。结论 ANTXR1是一种全新的细胞膜力学信号感受分子其在压力促BMSCs细胞膜片成软骨响应中的起到重要作用,而且其在压力下激活并调控压力促BMSCs成软骨分化的功能独立于经典力学信号分子Integrinβ1。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 压力 炭疽毒素受体蛋白1 成软骨
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