激活素受体样激酶1促进人脐静脉内皮细胞增殖和迁徙

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作者 李斌 唐仕波 +1 位作者 林少芬 孟晶 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期904-907,共4页

目的:研究激活素受体样激酶1(ALK1)对人脐静脉内皮细胞的作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),RT-PCR分析ALK1和ALK5在HUVEC激活状态下表达的变化。脂质体转染pcDNA3.1+ALK1到HUVECs,流式细胞仪检测HUVECs增殖的改变,boyden小... 目的:研究激活素受体样激酶1(ALK1)对人脐静脉内皮细胞的作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),RT-PCR分析ALK1和ALK5在HUVEC激活状态下表达的变化。脂质体转染pcDNA3.1+ALK1到HUVECs,流式细胞仪检测HUVECs增殖的改变,boyden小室检测ALK1对HUVECs迁徙的影响。结果:ALK1在HU-VEC安静状态高表达,ALK1能促进HUVECs的增殖和迁徙。结论:ALK1通过促进内皮细胞的增殖和迁徙在血管重塑中发挥作用。 展开更多

关键词 激活素受体Ⅰ 激活素受体Ⅴ 脐静脉内皮细胞 细胞增殖 细胞运动

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抗激活素受体相互作用蛋白1抗体的制备及应用 被引量：3

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作者 方琳 刘海岩 +2 位作者 崔雪玲 葛敬岩 柳忠辉 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期11-13,F0002,共4页

目的:制备抗激活素受体相互作用蛋白1(ARIP1)抗体并探讨其应用。方法:在大肠杆菌BL21中表达GST-ARIP1融合蛋白,以该蛋白作为抗原免疫新西兰家兔,制备抗ARIP1的多克隆抗体。应用该抗体进行免疫组织化学染色,分析ARIP1在小鼠脑组织的分布... 目的:制备抗激活素受体相互作用蛋白1(ARIP1)抗体并探讨其应用。方法:在大肠杆菌BL21中表达GST-ARIP1融合蛋白,以该蛋白作为抗原免疫新西兰家兔,制备抗ARIP1的多克隆抗体。应用该抗体进行免疫组织化学染色,分析ARIP1在小鼠脑组织的分布。结果:制备的兔抗ARIP1多克隆抗体可以特异识别ARIP1,而与ARIP2无交叉反应。初步应用制备的抗体进行免疫组织化学染色,ARIP1在小鼠大脑组织主要表达在下丘脑及海马。结论:成功地制备了抗ARIP1多克隆抗体,该抗体可用于ARIP1成熟蛋白表达的免疫组织化学染色分析。 展开更多

关键词 抗激活素受体相互作用蛋白1 融合蛋白 抗体

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激活素受体样激酶4,5和7抑制剂体外高通量筛选模型的构建 被引量：2

3

作者 龙隆 李菲菲 +1 位作者 刘洪英 王莉莉 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期581-589,共9页

目的构建适于高通量筛选的激活素受体样激酶4(ALK4),ALK5和ALK7抑制剂的筛选模型。方法利用Bac to Bac昆虫杆状病毒表达系统,构建ALK4激酶结构域(ALK4kd),ALK5kd和ALK7kd及Smad2和Smad3蛋白的病毒表达系统,转染Sf9昆虫细胞,表达目的蛋白... 目的构建适于高通量筛选的激活素受体样激酶4(ALK4),ALK5和ALK7抑制剂的筛选模型。方法利用Bac to Bac昆虫杆状病毒表达系统,构建ALK4激酶结构域(ALK4kd),ALK5kd和ALK7kd及Smad2和Smad3蛋白的病毒表达系统,转染Sf9昆虫细胞,表达目的蛋白;通过谷胱甘肽S-转移酶(GST)亲和柱纯化,获得纯化的目的蛋白;分别以纯化的ALK4,ALK5,ALK7激酶片段与纯化的Smad3和ATP构建ALK4,ALK5,ALK7激酶活性测定体系,优化各反应底物浓度及反应条件,建立适于通量化分析的筛选模型;以已知ALK激酶抑制剂SB431542为工具分子,检测其对激酶的抑制活性,确证筛选模型的可靠性。结果经酶切和PCR鉴定,所得重组Bacmid均正确。转染Sf9昆虫细胞后纯化获得相应目的蛋白。经条件优化,反应体系中激酶和底物蛋白Smad3最佳浓度均为10 mg·L^(-1),ATP最佳初始浓度为10 nmol·L^(-1)。所得ALK4,ALK5和ALK7激酶抑制剂筛选体系的Z′因子分别为0.71,0.51和0.74,符合高通量筛选要求。已知SB431542在所建模型上对ALK4kd,ALK5kd和ALK7kd的抑制活性IC50值分别为22,188和91 nmol·L^(-1)。结论成功构建了ALK4,ALK5和ALK7激酶抑制剂的体外筛选模型。 展开更多

关键词 激活素受体样激酶 BAC to Bac昆虫杆状病毒表达系统 高通量筛选分析 SMAD3蛋白

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激活素受体样激酶2及其在颅面部生长发育中的作用

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作者 张雪 徐召南 +2 位作者 刘麒麟 李超 孙宏晨 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期235-238,共4页

人类的ALK2基因位于染色体2q23~24,其内含子大都在0.5~6.5 kb,其3’非编码区对ALK2基因表达起着重要的调节作用。ALK2蛋白由胞外区、跨膜区和富含丝氨酸-苏氨酸序列的胞内区组成,在组成上高度保守。ALK2是骨形态发生蛋白(BMP)家族受体... 人类的ALK2基因位于染色体2q23~24,其内含子大都在0.5~6.5 kb,其3’非编码区对ALK2基因表达起着重要的调节作用。ALK2蛋白由胞外区、跨膜区和富含丝氨酸-苏氨酸序列的胞内区组成,在组成上高度保守。ALK2是骨形态发生蛋白(BMP)家族受体中的一员并转导BMP信号。ALK2信号转导通路分为经典的Smad信号转导通路和非Smad信号转导通路,前者在促进骨、软骨和牙发生方面发挥着重要的作用。ALK2蛋白广泛表达于机体的不同组织,如骨、软骨、牙体和心脏等。ALK2在颅骨发生发育早期促进成骨,在成熟期抑制成骨;ALK2基因突变增强可导致异位骨化,体现了ALK2独特于其他BMP受体的重要生理病理学意义。 展开更多

关键词 激活素受体样激酶 骨 基因敲除

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激活素受体样激酶2调控骨重塑的研究进展

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作者 赵欢 史册 +5 位作者 张雪 李媛 刘杰 李杏 胡月 孙宏晨 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1278-1281,共4页

激活素受体样激酶2(ALK2)是Ⅰ型骨形成蛋白(BMP)受体之一,在胚胎期和出生后骨量的调节中有明显作用,编码ALK2的基因特定位点的获得性突变还可引起人类进行性肌肉骨化症(FOP)。ALK2所介导的BMP信号通路可以负性调节骨量。以ALK2或其下游... 激活素受体样激酶2(ALK2)是Ⅰ型骨形成蛋白(BMP)受体之一,在胚胎期和出生后骨量的调节中有明显作用,编码ALK2的基因特定位点的获得性突变还可引起人类进行性肌肉骨化症(FOP)。ALK2所介导的BMP信号通路可以负性调节骨量。以ALK2或其下游信号分子为靶点治疗骨缺损等疾病具有重要的实际意义和应用前景。本文阐述了骨重塑和BMP信号通路的基本过程,总结了ALK2对骨重塑不同阶段调控作用的研究现状,并概括了ALK2的病理性作用及其机制。 展开更多

关键词 激活素受体样激酶2 骨重塑 骨形成蛋白 信号通路 间充质干细胞 成骨细胞 破骨细胞

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激活素A及其ⅡA型受体在小鼠肝损伤模型肝组织中的表达 被引量：6

6

作者 张红军 柳忠辉 +2 位作者 马迪 陈芳芳 台桂香 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期393-396,共4页

目的:探讨激活素A及其ⅡA型受体在Con A诱导的小鼠肝损伤模型肝组织中的表达形式及其可能的作用。方法:小鼠尾静脉注射Con A(10 mg.kg-1),每周1次,连续4周,建立小鼠肝损伤模型(n=24),另设正常对照组(n=24),于末次注射后的24、72、120及1... 目的:探讨激活素A及其ⅡA型受体在Con A诱导的小鼠肝损伤模型肝组织中的表达形式及其可能的作用。方法:小鼠尾静脉注射Con A(10 mg.kg-1),每周1次,连续4周,建立小鼠肝损伤模型(n=24),另设正常对照组(n=24),于末次注射后的24、72、120及168 h,各组(n=6)分批检测小鼠血清酶变化及肝脏组织病理损伤程度,同时采用荧光定量RT-PCR法检测激活素A及其ⅡA型受体的表达水平。结果:在末次注射后72 h肝组织病理损伤最为严重,肝小叶结构紊乱,肝细胞索消失,细胞肿胀,呈气球样变,以后逐渐恢复;激活素A蛋白水平及其mRNA表达与其ⅡA型受体mRNA表达呈平行状态,于注射后72 h达高峰,与对照组比较差异具有显著性(P<0.05)。结论:激活素A与其ⅡA受体变化与肝组织病理损伤呈平行状态,提示激活素A可能参与了Con A诱导肝损伤模型小鼠的肝损伤。 展开更多

关键词 激活素类 激活素受体 Ⅱ型 伴刀豆球蛋白A 免疫性肝损伤

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激活素、抑制素及其受体与动物生殖作用的研究进展 被引量：9

7

作者 张超 罗艳梅 +2 位作者 张家骅 赵中权 谢畅 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第2期115-119,共5页

激活素和抑制素均属于转化生长因子β(TGF-β)超家族成员的多功能生长和分化因子,具有多种生物学功能及广泛的生物学活性,其生理功能是通过受体与靶器官结合而实现的。作者主要就抑制素、激活素的结构特征、生理功能和对生殖的作用及其... 激活素和抑制素均属于转化生长因子β(TGF-β)超家族成员的多功能生长和分化因子,具有多种生物学功能及广泛的生物学活性,其生理功能是通过受体与靶器官结合而实现的。作者主要就抑制素、激活素的结构特征、生理功能和对生殖的作用及其与受体的作用方式进行综述。 展开更多

关键词 激活素 抑制素 激活素受体 抑制素受体

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激活素A对小鼠中性粒细胞活性的调控作用 被引量：1

8

作者 齐妍 崔雪玲 +3 位作者 闫青 吴倩 柳忠辉 葛敬岩 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期22-25,共4页

目的:通过检测中性粒细胞激活素受体表达以及细胞活性,阐述激活素A调控中性粒细胞的作用。方法:分离小鼠腹腔中性粒细胞;通过免疫荧光细胞化学染色及流式细胞术检测中性粒细胞激活素ⅡA型受体(ActRⅡA)表达;激活素A刺激后,Western blot... 目的:通过检测中性粒细胞激活素受体表达以及细胞活性,阐述激活素A调控中性粒细胞的作用。方法:分离小鼠腹腔中性粒细胞;通过免疫荧光细胞化学染色及流式细胞术检测中性粒细胞激活素ⅡA型受体(ActRⅡA)表达;激活素A刺激后,Western blot检测中性粒细胞Smad3表达;检测呼吸爆发、NO分泌及吞噬能力的变化以确定中性粒细胞活性。结果:分离的小鼠腹腔中性粒细胞纯度大于90%;免疫荧光细胞化学染色显示中性粒细胞可以表达ActRⅡA,流式细胞术检测结果显示Gr-1与ActRⅡA双阳性细胞约41.1%;激活素A刺激后,中性粒细胞p-Smad3表达上调,ROS及O2-产生升高(P<0.05),NO分泌增加(P<0.01),流式细胞术检测结果显示激活素A还可以明显促进中性粒细胞对荧光微球的吞噬(P<0.01)。结论:中性粒细胞可以表达激活素受体及其信号传导蛋白,激活素A对中性粒细胞活化及功能具有重要的调节作用。 展开更多

关键词 激活素A 激活素受体 中性粒细胞 呼吸爆发

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刺山柑总生物碱对系统性硬皮病转化生长因子-β_1/Smad4通路的调控作用 被引量：3

9

作者 康小龙 田红林 +1 位作者 何承辉 卢军 《医药导报》 CAS 北大核心 2018年第11期1307-1310,共4页

目的研究刺山柑总生物碱对系统性硬皮病(SSc)转化生长因子-β_1(TGF-β_1) Smad4通路的调控作用。方法将90只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、青霉胺组(125 mg·kg^(-1))及刺山柑总生物碱小(225 mg·kg^(-1))、中(45... 目的研究刺山柑总生物碱对系统性硬皮病(SSc)转化生长因子-β_1(TGF-β_1) Smad4通路的调控作用。方法将90只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、青霉胺组(125 mg·kg^(-1))及刺山柑总生物碱小(225 mg·kg^(-1))、中(450 mg·kg^(-1))、大(900 mg·kg^(-1))剂量组。除正常对照组外,其余5组小鼠背部注射盐酸博莱霉素建立SSc模型,成模后受试药组小鼠背部外敷刺山柑总生物碱乳膏,青霉胺组给予青霉胺灌胃,正常对照组、模型对照组背部外敷不含药基质,每天1次,连续60 d。末次给药后,Western blotting检测皮肤TGF-β_1表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠皮肤组织激活素受体样激酶1(ALK1)、Smad4及核因子-κB (NF-κB)水平。结果与模型对照组比较,刺山柑总生物碱各剂量组TGF-β_1及刺山柑总生物碱大剂量组ALK1和Smad4表达明显降低(P<0.05或P<0.01),皮肤NF-κB含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论刺山柑总生物碱能下调SSc小鼠TGF-β_1、ALK1与Smad4异常表达,对SSc小鼠TGF-β_1/Smad4通路有一定抑制作用。 展开更多

关键词 刺山柑总生物碱 系统性硬皮病 转化生长因子-β1 激活素受体样激酶1 SMAD4 核因子-ΚB

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基于全外显子组测序对头皮皮脂腺癌的基因分析 被引量：1

10

作者 郑奔容 王一娜 +3 位作者 江博雄 梁亚乐 蔡胜军 张娜娜 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期712-717,共6页

【目的】在全外显子组水平对比头皮皮脂腺癌(SC)和头皮皮脂腺瘤(SA)的相关致病性基因突变的差异。【方法】对经过病理诊断的头皮SC和SA样本各1例,利用Illumina HiSeq 2500平台进行全外显子组测序(WES)。筛选可疑的单核苷酸变异位点,进... 【目的】在全外显子组水平对比头皮皮脂腺癌(SC)和头皮皮脂腺瘤(SA)的相关致病性基因突变的差异。【方法】对经过病理诊断的头皮SC和SA样本各1例,利用Illumina HiSeq 2500平台进行全外显子组测序(WES)。筛选可疑的单核苷酸变异位点,进行突变的保守性和功能分析。利用SciClone软件来追踪亚克隆进化可以得到每例肿瘤样本的克隆性图谱信息。通过MutSigCV软件筛选得到高频显著基因,将体细胞变异与已知驱动基因进行比较,筛选出该肿瘤样本中的已知驱动基因。【结果】经过对比发现,与头皮SA相比,SC存在两个驱动基因ACVR1B和TFDP1的基因突变。【结论】头皮SC驱动基因ACVR1B和TFDP1的基因突变如果能在更大的病例队列中得到证实,对其发生的可能机制以及治疗靶点有重要的意义。 展开更多

关键词 头皮皮脂腺癌 全外显子组测序 驱动基因 激活素受体1B 转录因子Dp1 突变

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ALK2对小鼠髁突软骨细胞增殖分化的影响

11

作者 张琦 张雪 +4 位作者 赵亮 胡月 史册 孙宏晨 黄洋 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2017年第1期6-9,共4页

目的:探讨ALK2对小鼠髁突软骨细胞增殖及成软骨分化的作用。方法:采用酶消化法提取小鼠髁突软骨细胞并鉴定。体外采用siRNA沉默小鼠髁突软骨细胞中Alk2基因的表达,通过MTT法检测细胞增殖。通过实时定量RT-PCR方法检测软骨细胞标志基因... 目的:探讨ALK2对小鼠髁突软骨细胞增殖及成软骨分化的作用。方法:采用酶消化法提取小鼠髁突软骨细胞并鉴定。体外采用siRNA沉默小鼠髁突软骨细胞中Alk2基因的表达,通过MTT法检测细胞增殖。通过实时定量RT-PCR方法检测软骨细胞标志基因的表达。结果:倒置显微镜观察体外培养的小鼠髁突软骨细胞形态。免疫组化染色显示COLⅠ强阳性,AGGRECAN弱阳性,COLⅡ弱阳性。Pellet培养后实时定量RT-PCR检测发现ColⅡ,ColⅩ和ColⅠ表达上调。证实所分离的细胞是髁突软骨细胞。MTT结果显示Alk2沉默后细胞数量增加,实时定量RT-PCR结果显示Alk2沉默后软骨细胞基因表达下调,并有显著统计学意义。结论:ALK2抑制小鼠髁突软骨细胞的增殖,促进小鼠髁突软骨细胞的成软骨分化。 展开更多

关键词 髁突软骨细胞 激活素受体样激酶2(ALK2) 增殖 分化

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ActRⅡA介导阿托伐他汀对动脉粥样硬化的治疗作用 被引量：4

12

作者 张敏 宁亚媛 +1 位作者 张晶 陈丽娟 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期54-57,I0002,共5页

目的:探讨激活素ⅡA型受体(ActRⅡA)在动脉粥样硬化(AS)斑块组织中的表达及其与阿托伐他汀干预治疗的关系,阐明阿托伐他汀对AS的治疗作用及可能的信号转导机制。方法:24只载脂蛋白E基因敲除(apoE-/-)小鼠随机分为空白对照组、高脂饮食... 目的:探讨激活素ⅡA型受体(ActRⅡA)在动脉粥样硬化(AS)斑块组织中的表达及其与阿托伐他汀干预治疗的关系,阐明阿托伐他汀对AS的治疗作用及可能的信号转导机制。方法:24只载脂蛋白E基因敲除(apoE-/-)小鼠随机分为空白对照组、高脂饮食组和高脂他汀组(每组8只),分别给予普通小鼠颗粒饮食、高脂饲料、高脂饲料+阿托伐他汀,饲养8周后,检测小鼠血清甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)水平,HE染色观察主动脉弓病理学变化,免疫组化染色观察并检测斑块内ActRⅡA的表达。结果:①高脂饮食组和高脂他汀组小鼠血清TG和TC水平及激活素ⅡA型受体(ActRⅡA)相对灰度值明显高于空白对照组(P<0.05),高脂他汀组小鼠血清TG和TC水平及ActRⅡA相对灰度值明显低于高脂饮食组(P<0.05)。②与空白对照组比较,高脂饮食组及高脂他汀组小鼠主动脉弓均可见明显AS斑块,但高脂他汀组AS斑块的内膜增厚,泡沫细胞含量极少且纤维帽较厚,斑块较稳定。③免疫组织化学染色,空白对照组小鼠主动脉弓标本ActRⅡA基本无表达,高脂饮食组小鼠AS斑块处可见密集的棕色及棕黄色颗粒,ActRⅡA呈强阳性表达。高脂他汀组小鼠AS斑块处可见分散的棕色及棕黄色颗粒,ActRⅡA表达明显低于高脂饮食组。结论:AS斑块内可检测到ActRⅡA表达,激活素可能通过ActRⅡA途径参与AS形成过程;他汀类药物能够显著降低TG和TC水平、降低斑块内ActRⅡA表达、稳定AS斑块,提示他汀类药物可能通过作用于ActRⅡA相关激活素信号转导途径而发挥抗炎及治疗AS作用。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 激活素A 激活素ⅡA型受体 阿托伐他汀

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针对ALK4基因的TALEN质粒构建与活性鉴定

13

作者 曾凡才 顾洪 +1 位作者 王轲 周红 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期210-216,共7页

旨在利用类转录激活因子效应物核酸酶(Transcription activator-like effector nuclease,TALEN)技术构建具有活性的敲除类激活素激酶受体4(Activin receptor-like kinase 4,ALK4)的TALEN质粒。利用TALEN在线设计工具,根据TALEN设计原则... 旨在利用类转录激活因子效应物核酸酶(Transcription activator-like effector nuclease,TALEN)技术构建具有活性的敲除类激活素激酶受体4(Activin receptor-like kinase 4,ALK4)的TALEN质粒。利用TALEN在线设计工具,根据TALEN设计原则和ALK4剪接异构体的共同序列确定基因敲除的靶位点、TALEN识别序列和用于活性验证的限制性酶切位点。利用质粒文库试剂盒快速构建TALEN质粒,并通过酶切、测序和BLAST比对加以验证。应用脂质体转染法将构建质粒导入HEK293T细胞,通过共转染的pEGFP-N1质粒判断转染效率。利用嘌呤霉素进行阳性筛选后提取基因组DNA,PCR扩增靶序列,HhaⅠ酶切纯化后的PCR产物。结果显示,来自转染TALEN质粒细胞基因组的PCR产物的酶切效率明显下降,提示部分细胞的ALK4基因发生了突变。首次成功构建了在HEK293T细胞中有活性的TALEN质粒。 展开更多

关键词 类激活素激酶受体4 类转录激活因子效应物核酸酶 基因敲除 HEK293T细胞 质粒构建

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