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脂肪和滑膜来源间充质干细胞成软骨分化能力的比较 被引量：3
1
作者 王洋 宋卓悦 +3 位作者 连晓磊 李江南 丁康 李广恒 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2019年第3期394-398,共5页
目的:比较人膝关节脂肪来源间充质干细胞(ADSCs)和滑膜来源间充质干细胞(SDSCs)的成软骨分化能力,寻找更为合适的种子细胞来治疗骨性关节炎软骨病损。方法:取20例骨性关节炎患者的髌下脂肪垫、滑膜组织和剥离的软骨,分离、培养ADSCs、SD... 目的:比较人膝关节脂肪来源间充质干细胞(ADSCs)和滑膜来源间充质干细胞(SDSCs)的成软骨分化能力,寻找更为合适的种子细胞来治疗骨性关节炎软骨病损。方法:取20例骨性关节炎患者的髌下脂肪垫、滑膜组织和剥离的软骨,分离、培养ADSCs、SDSCs和炎性软骨细胞(ICs),观察增殖和分化情况。收集体外3D培养7、14、21 d的3种细胞培养液上清,应用ELISA检测IL-1、IL-6和IL-10的分泌情况。取3D培养21 d获得的细胞团块,测量其直径并经番红O、阿尔新蓝及Ⅱ型胶原免疫组化染色分析细胞成软骨分化情况。结果:3种细胞均呈现类成纤维细胞形态,其中ICs多为短梭形多分支,而ADSCs和SDSCs多为长梭形。不同时间点ICs分泌的IL-1和IL-6高于SDSCs和ADSCs,ADSCs分泌的IL-10高于SDSCs及ICs(P <0. 05)。3D培养21 d后,SDSCs细胞团块直径大于ICs和ADSCs(P <0. 05)。阿尔新蓝和番红O染色结果发现,SDSCs和ICs的阳性区域面积大于ADSCs(P <0. 05);Ⅱ型胶原免疫组化染色结果发现ICs和SDSCs阳性区域面积均大于ADSCs(P <0. 05)。结论:SDSCs成软骨分化能力较强,ADSCs的抗炎作用较强。 展开更多
关键词 脂肪来源间充质干细胞 滑膜来源间充质干细胞 成软骨分化 骨性关节炎 种子细胞
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基于miR-146a-IRAK轴探讨脂肪来源间充质干细胞修复瘘管型克罗恩病模型大鼠瘘管创面的作用
2
作者 倪健 朱晓文 于海涛 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第2期320-327,共8页
目的:探讨脂肪来源间充质干细胞(ADSC)对瘘管型克罗恩病(CD)模型大鼠瘘管创面的修复作用以及其对miR-146a/白细胞介素-1受体相关激酶(IRAK)信号轴的调节机制。方法:RT-PCR检测80例瘘管治疗的瘘管型CD患者术后血清中miR-146a和IRAK的mRN... 目的:探讨脂肪来源间充质干细胞(ADSC)对瘘管型克罗恩病(CD)模型大鼠瘘管创面的修复作用以及其对miR-146a/白细胞介素-1受体相关激酶(IRAK)信号轴的调节机制。方法:RT-PCR检测80例瘘管治疗的瘘管型CD患者术后血清中miR-146a和IRAK的mRNA表达。双荧光素酶基因报告分析miR-146a和IRAK的关系。将成功制备的CD瘘管病变模型大鼠分为对照组(Con)、ADSC干预组(ADSC)、ADSC+miR-146a-antagomir干预组(ADSC+antagomir)、ADSC+miR-146a-antagomir+siRNA-IRAK干预组(ADSC+antagomir+si),每组10只;造模成功后1 h,ADSC组大鼠以2×10^(6)个/ml ADSC悬液注入瘘口周围区域,并皮下注射2μg/kg miR-146a-antagomir-NC;ADSC+antagomir组大鼠以2×10^(6)个/ml ADSC悬液注入瘘口周围区域,并皮下注射2μg/kg miR-146a-antagomir;ADSC+antagomir+si组大鼠以2×10^(6)个/ml ADSC悬液注入瘘口周围区域,并皮下注射2μg/kg miR-146a-antagomir+siRNA-IRAK,Con组大鼠以等剂量的生理盐水注入瘘口周围区域,并皮下注射2μg/kg miR-146aantagomir-NC;每组每日定时处理2次,连续处理14 d。流式细胞术检测大鼠瘘管创面组织细胞凋亡;试剂盒检测大鼠血清中TNF-α和IL-6水平;免疫组化检测各组大鼠瘘管创面组织中的血管新生;Western blot检测瘘管创面组织中IRAK、凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)、血管内皮生长因子(VEGF)表达。结果:miR-146a表达在CD瘘管病变患者术后的血清中明显降低,IRAK的mRNA表达明显升高,差异均具有统计学意义(均P<0.05);双荧光素酶结果显示miR-146a能靶向调控IRAK表达;与Con组相比,ADSC组、ADSC+antagomir组、ADSC+antagomir+si组大鼠瘘管创面组织的细胞凋亡率、血清中TNF-α和IL-6含量、瘘管组织中IRAK、Bax表达明显降低,瘘管组织中新生血管的数量以及Bcl-2、VEGF表达明显升高;与ADSC组相比,ADSC+antagomir组、ADSC+antagomir+si组大鼠瘘管创面组织细胞凋亡率、血清中TNF-α和IL-6含量、瘘管组织中IRAK、Bax表达明显升高,瘘管组织中新生血管的数量以及Bcl-2、VEGF的表达明显降低;与ADSC+antagomir组相比,ADSC+antagomir+si组大鼠瘘管创面组织中细胞凋亡率、血清中TNF-α和IL-6含量、瘘管组织中IRAK、Bax表达明显降低,瘘管组织中新生血管数量以及Bcl-2、VEGF表达明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:ADSC促进CD模型大鼠瘘管病变术后的瘘管愈合,这可能与调控miR-146a/IRAK的表达,抑制细胞凋亡,促进创面血管新生有关。 展开更多
关键词 脂肪来源间充质干细胞 克罗恩病 瘘管病变 创面愈合 miR-146a/白细胞介素-1受体相关激酶信号轴
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骨髓来源的间充质干细胞移植通过ROS/Nrf2信号对血管性痴呆大鼠线粒体自噬的影响及其机制
3
作者 孙烈乾 顾梦宇 +8 位作者 杨杰 王凯漪 郭高帅 张宏博 张思怡 王堂龙 杨志伟 贺延妮 杨超 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第3期610-620,共11页
目的:探讨骨髓来源的间充质干细胞(BMSCs)移植通过活性氧(ROS)/核因子E2相关因子2 (Nrf2)信号对血管性痴呆(VaD)大鼠线粒体自噬的影响,并阐明其作用机制。方法:将45只SD雄性成年大鼠随机分为假手术组、模型组、空载组、BMSCs组和BMSCs+M... 目的:探讨骨髓来源的间充质干细胞(BMSCs)移植通过活性氧(ROS)/核因子E2相关因子2 (Nrf2)信号对血管性痴呆(VaD)大鼠线粒体自噬的影响,并阐明其作用机制。方法:将45只SD雄性成年大鼠随机分为假手术组、模型组、空载组、BMSCs组和BMSCs+ML385 (Nrf2抑制剂)组(联合组),每组9只。各组大鼠腹腔注射麻醉后,除假手术组外,其余各组大鼠制备VaD模型。采用Morris水迷宫实验检测各组大鼠的学习记忆能力,HE染色观察各组大鼠脑组织病理形态表现,尼氏染色观察各组大鼠脑组织海马区尼氏体变化情况,透射电镜观察各组大鼠脑组织海马区超微结构,荧光探针法检测各组大鼠脑组织海马区神经元中ROS水平,Western blotting法检测各组大鼠脑组织中Nrf2、血红素加氧酶1 (HO-1)、磷酸酶与张力蛋白同源物诱导激酶1 (PINK1)、E3泛素蛋白连接酶parkin (Parkin)、苄氯素1 (Beclin-1)和泛素结合蛋白P62 (P62)蛋白表达水平及微管相关蛋白1A/1B轻链3 (LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ)比值。结果:Morris水迷宫实验,与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.01),穿越原平台次数和停留时间均明显减少(P<0.01);与模型组比较,BMSCs组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),穿越原平台次数和停留时间均明显增加(P<0.01);与BMSCs组比较,联合组大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.01),穿越原平台次数和停留时间均明显减少(P<0.01)。HE染色观察,假手术组大鼠脑组织海马区神经元数量和形态正常,染色均匀,结构清晰,未见明显病变;与假手术组比较,模型组大鼠脑组织海马区组织稀疏,结构紊乱,神经元数量减少且形态不一,染色不均匀,核固缩,可见部分坏死的神经元;与模型组比较,空载组大鼠脑组织海马区可见组织结构紊乱、神经元减少和染色不均等损伤表现,BMSCs组大鼠海马区神经元损伤减轻,形态恢复正常,排列较为整齐,神经元丢失情况明显改善;与BMSCs组比较,联合组大鼠海马区神经元形态不规则,组织结构紊乱,细胞边界不清,染色不均匀,核固缩。尼氏染色观察,假手术组大鼠脑组织海马区神经元排列整齐紧密,形态规则完整,核仁明显,尼氏小体着色深且数量多;与假手术组比较,模型组大鼠脑组织海马区神经元固缩,呈空泡状,尼氏小体着色少且数量稀少;与模型组比较,空载组大鼠脑组织海马区可见尼氏小体着色少且数量稀少等损伤表现,BMSCs组大鼠脑组织海马区神经元固缩减少,细胞形态相对完整,尼氏小体数量相对增多;与BMSCs组比较,联合组大鼠脑组织神经元固缩,形态完整性丧失,尼氏小体破碎且数量减少。透射电镜观察,假手术组大鼠脑组织海马区神经元线粒体呈椭圆形,双层膜结构清晰可见,内部嵴完整;与假手术组比较,模型组大鼠脑组织海马区神经元线粒体肿胀变形,双层膜结构破坏,内部嵴断裂消失,结构模糊,胞质中可见大量自噬小体;与模型组比较,空载组大鼠脑组织海马区线粒体损伤表现仍较明显,胞质中自噬小体数量较多,BMSCs组大鼠脑组织海马区神经元线粒体膜和内部结构有明显改善,损伤程度减轻,胞质中可见少量自噬小体;与BMSCs组比较,联合组大鼠脑组织海马区神经元线粒体肿胀,双层膜结构破坏,内部嵴断裂消失,胞质中可见自噬小体。荧光探针法,与假手术组比较,模型组大鼠脑组织海马区神经元中ROS水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,BMSCs组大鼠脑组织海马区神经元中ROS水平明显降低(P<0.01);与BMSCs组比较,联合组大鼠脑组织海马区神经元中ROS水平明显升高(P<0.01)。Westernblotting法,与假手术组比较,模型组大鼠脑组织中Nrf2和HO-1蛋白表达水平均明显降低(P<0.01);与模型组比较,BMSCs组大鼠脑组织中Nrf2和HO-1蛋白表达水平均明显升高(P<0.01);与BMSCs组比较,联合组大鼠脑组织中Nrf2和HO-1蛋白表达水平均明显降低(P<0.01)。与假手术组比较,模型组大鼠脑组织中Parkin、PINK1和Beclin-1蛋白表达水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均明显升高(P<0.01),P62蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与模型组比较,BMSCs组大鼠脑组织中Parkin、PINK1和Beclin-1蛋白表达水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均明显降低(P<0.01), P62蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与BMSCs组比较,联合组大鼠脑组织中Parkin、PINK1和Beclin-1蛋白表达水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均明显升高(P<0.01),P62蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:BMSCs可以减轻大鼠脑组织海马区神经元病理改变,改善VaD大鼠的认知功能,其作用机制可能与调控ROS/Nrf2信号通路抑制线粒体自噬有关。 展开更多
关键词 血管性痴呆 骨髓来源的间充质干细胞 核因子E2相关因子2 活性氧 线粒体自噬
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基于Wnt/β-catenin信号通路探讨子宫内膜来源间充质干细胞抑制子宫内膜纤维化的机制 被引量：1
4
作者 靳涛 颜望碧 殷琦 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第4期640-646,共7页
目的探讨Wnt/β-catenin信号通路介导间质上皮转化(EMT)在子宫内膜来源间充质干细胞(eMSCs)抑制子宫内膜纤维化中的作用机制。方法将18只雌性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、模型(Model)组和eMSCs组,每组6只。Sham组的大鼠在剖腹手术后... 目的探讨Wnt/β-catenin信号通路介导间质上皮转化(EMT)在子宫内膜来源间充质干细胞(eMSCs)抑制子宫内膜纤维化中的作用机制。方法将18只雌性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、模型(Model)组和eMSCs组,每组6只。Sham组的大鼠在剖腹手术后不接受任何形式的子宫介入手术。Model组和eMSCs组建立子宫内粘连大鼠模型。eMSCs组在模型损伤后立即移植eMSCs细胞悬液进行治疗,总量为每子宫0.05 ml(2×107细胞/ml)。3周后收集单侧损伤子宫进行苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色。通过蛋白质印迹分析子宫内膜纤维化、EMT、Wnt/β-catenin通路蛋白表达。结果Model组大鼠宫腔结构破坏,腺体数量明显减少并积聚大量蓝色胶原纤维,但在eMSCs治疗后子宫内膜腺体数量显著增加,并且纤维化面积显著降低。与Sham组相比,Model组中I型胶原和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白的表达水平显著增加(P<0.05),但在eMSCs组中均显著减少(P<0.05)。在Model组中,N-cadherin、Vimentin和ZEB1的表达显著增加,而E-cadherin的表达减少。然而,在eMSCs组中,上述分子蛋白质的变化完全相反。与Sham组相比,Model组β-连环蛋白(β-catenin)和C-myc表达增加(P<0.05)。与Model组相比,eMSCs组中周期蛋白E(CyclinE)、β-catenin和C-myc表达增加(P<0.05)。结论eMSCs可以通过抑制EMT和子宫内膜纤维化来促进子宫内粘连大鼠子宫内膜修复,这种作用部分是通过激活Wnt/β-catenin信号通路来实现。 展开更多
关键词 WNT/Β-CATENIN信号通路 间质上皮转化 子宫内膜来源间充质干细胞 子宫内膜纤维化 大鼠 子宫内粘连模型
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不同年龄小鼠骨来源间充质干细胞衰老相关特性与成骨分化能力的比较研究 被引量：1
5
作者 李媛 钟海英 +7 位作者 董世访 黄璐 刘潇淇 廖雨滋 易勤 赵丽 杨珂 李娅莎 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第13期1512-1522,共11页
目的探索不同年龄组小鼠骨来源的间充质干细胞(bone derived mesenchymal stem cells,BMSCs)衰老相关的生物学特性及骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)诱导成骨分化能力的改变。方法将8只C57BL/6J小鼠分为青年组(4周... 目的探索不同年龄组小鼠骨来源的间充质干细胞(bone derived mesenchymal stem cells,BMSCs)衰老相关的生物学特性及骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)诱导成骨分化能力的改变。方法将8只C57BL/6J小鼠分为青年组(4周龄,体质量约为10~15 g,n=4)和老年组(12月龄,体质量约为20 g~25 g,n=4),每组雌雄各半。分别从2组小鼠的整骨中提取间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),通过流式细胞术鉴定2组BMSCs的表面标志物,通过β-半乳糖苷酶染色比较2组BMSCs的衰老程度,通过MTT和EdU掺入实验比较2组BMSCs的增殖及自我更新能力。通过Western blot分析2组BMSCs中周期蛋白CyclinD1、P21的表达情况。采用ALP染色和茜素红S染色及RT-qPCR评估2组BMSCs的体外成骨分化能力,使用RNA-seq分析比较2组BMSCs经BMP2诱导后的差异基因表达,并用流式分析验证测序结果。结果流式细胞术分析结果显示,分离培养的小鼠BMSCs符合间充质干细胞判定标准。β-半乳糖苷酶染色结果显示,老年组BMSCs的衰老水平显著高于青年组(P<0.05)。而MTT和EdU掺入实验结果表明,老年组BMSCs的细胞活力和增殖能力显著低于青年组(P<0.05)。Western blot结果显示,与青年组比较,老年组BMSCs的细胞周期蛋白CyclinD1表达水平较低,而细胞周期阻抑因子P21蛋白表达水平显著增高(P<0.05)。ALP染色和茜素红S染色及RT-qPCR检测结果显示,BMP2诱导后青年组BMSCs的成骨分化能力显著高于老年组(P<0.05)。RNA-seq结果显示,BMP2诱导后,整合素αV重组蛋白(cluster of differentiation 51,CD51)在青年组和老年组中的表达趋势相反。而流式细胞术分析结果显示,青年组CD51^(+)细胞在CD45^(-)细胞中占比明显高于老年组(P<0.01)。结论老年组BMSCs中CD51^(+)细胞在CD45^(-)细胞中占比下降与CD51^(+)细胞对BMP2的成骨诱导响应性下降密切相关。 展开更多
关键词 骨来源间充质干细胞 骨形态发生蛋白2 成骨分化 衰老 整合素αV重组蛋白
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颞下颌关节滑膜间充质干细胞成骨潜能的实验研究 被引量：8
6
作者 李健 龙星 +1 位作者 朱帆 杨雪超 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期145-147,151,共4页
目的研究滑膜间充质干细胞的成骨潜能。方法用2g/L的Ⅰ型胶原酶消化获得滑膜细胞,待细胞汇合后用有限稀释法进行单细胞克隆,筛选出滑膜间充质干细胞(SMSC)。取第3代SMSC进行成骨诱导培养,每天观察细胞形态,并于培养7d后检测ALP活性和骨... 目的研究滑膜间充质干细胞的成骨潜能。方法用2g/L的Ⅰ型胶原酶消化获得滑膜细胞,待细胞汇合后用有限稀释法进行单细胞克隆,筛选出滑膜间充质干细胞(SMSC)。取第3代SMSC进行成骨诱导培养,每天观察细胞形态,并于培养7d后检测ALP活性和骨桥蛋白的表达,RT_PCR检测核心结合因子al(cbfal)mRNA的转录;培养30d后作VonKossa′s染色,检测成骨化程度。结果SMSC在体外培养形成葵花样细胞集落,胞浆突起明显,相互连接成网状;成骨化诱导剂可诱导SMSC定向分化为多形性成骨细胞,细胞ALP染色阳性,骨桥蛋白强阳性,电泳显示有cbfal的特异性条带,矿化区经VonKossa′s染色呈阳性反应。结论经体外纯化的SMSC可定向诱导分化为成骨细胞,符合成骨细胞的生物学特征。 展开更多
关键词 滑膜 间充质干细胞 成骨细胞
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长链非编码RNA DANCR促滑膜间充质干细胞向软骨细胞分化作用的研究进展 被引量：6
7
作者 杨超 张雷 +1 位作者 周利武 赵建宁 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第8期892-896,共5页
长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类转录本长度大于200 nt,不具有翻译成蛋白质能力的RNA。lncRNA DANCR是一种近年来在肝细胞癌中发现的特异性高表达的长链非编码RNA,具有高度调控细胞分化的作用。最新研究表明,lncRNA DA... 长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类转录本长度大于200 nt,不具有翻译成蛋白质能力的RNA。lncRNA DANCR是一种近年来在肝细胞癌中发现的特异性高表达的长链非编码RNA,具有高度调控细胞分化的作用。最新研究表明,lncRNA DANCR在关节软骨损伤修复中也起着重要的调控作用,并有望成为促进滑膜间充质干细胞(synovium-derived mesenchymal stem cells,SMSCs)向软骨细胞增殖和分化的关键调控位点。文中就近年来DANCR促进SMSCs向软骨细胞增殖和分化过程中的作用及未来可能的研究热点进行综述。 展开更多
关键词 长链非编码RNA DANCR 滑膜间充质干细胞
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滑膜间充质干细胞与软骨细胞接触式共培养构建软骨的初步研究 被引量：2
8
作者 邵博 胡露露 +10 位作者 龚忠诚 杨萌 宁晓婷 王玥 胡鑫 刘慧 克热木.阿巴斯 凌彬 尹小朋 高芸竹 林兆全 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期554-558,共5页
目的:探讨大鼠软骨细胞与滑膜间充质干细胞以1∶1比例接触式共培养,评价软骨细胞诱导干细胞在体外成软骨方向分化。方法:相同培养基体外培养大鼠滑膜间充质干细胞与软骨细胞,扩增至第3代滑膜间充质干细胞与第1代软骨细胞按1∶1比例混匀,... 目的:探讨大鼠软骨细胞与滑膜间充质干细胞以1∶1比例接触式共培养,评价软骨细胞诱导干细胞在体外成软骨方向分化。方法:相同培养基体外培养大鼠滑膜间充质干细胞与软骨细胞,扩增至第3代滑膜间充质干细胞与第1代软骨细胞按1∶1比例混匀,以1×106/mL为终浓度的微团体外培养作为实验组,以相同终浓度细胞数的软骨细胞和滑膜间充质干细胞作为对照组,每组各接种6组。各组标本于体外培养21d后,通过形态学观察,组织学染色,RT-PCR检测产物等方法对其新生软骨进行评价。结果:实验组及对照组体外培养21d后,形成微团似软骨样组织,质地较韧,乳白色。免疫组化法进行Ⅱ型胶原鉴定,基质能被Ⅱ型胶原染色。RT-PCR结果显示诱导后的微团表达软骨特异性基因Ⅱ型胶原和蛋白聚糖。结论:滑膜间充质干细胞与软骨细胞通过接触式共培养形成较成熟的软骨。 展开更多
关键词 滑膜间充质干细胞 软骨细胞 共培养 组织工程
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软骨上清液与转化生长因子诱导滑膜间充质干细胞向软骨细胞分化的对比研究 被引量：2
9
作者 邵博 贺多敏 +3 位作者 龚忠诚 王玥 杨萌 林兆全 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2017年第4期353-357,共5页
目的:对比使用软骨上清液和转化生长因子两种方法诱导滑膜间充质干细胞向软骨细胞分化。方法:分别采用消化法获取SD大鼠滑膜间充质干细胞和软骨细胞。体外扩增。实验组一:通过软骨细胞上清液诱导滑膜间充质干细胞向软骨方向分化。实验组... 目的:对比使用软骨上清液和转化生长因子两种方法诱导滑膜间充质干细胞向软骨细胞分化。方法:分别采用消化法获取SD大鼠滑膜间充质干细胞和软骨细胞。体外扩增。实验组一:通过软骨细胞上清液诱导滑膜间充质干细胞向软骨方向分化。实验组二:通过软骨诱导液(TGF-β1,ITS+Premix,2-磷酸抗坏血酸等)诱导滑膜间充质干细胞向软骨方向分化。培养21d后通过形态学、免疫组织化学法检测其生物学特性,RT-PCR检测诱导后产物Ⅱ型胶原RNA含量。结果:2种诱导方法均能诱导滑膜间充质干细胞成软骨细胞方向分化。在形态学可见2组诱导后产物成软骨样结构,呈乳白色,质地韧。免疫组织化学鉴定基质能被Ⅱ型胶原染色,细胞染色呈现棕黄色。RT-PCR结果显示诱导后的微团表达软骨特异性基因Ⅱ型胶原和蛋白聚糖。结论:两组实验组均能诱导滑膜间充质干细胞向软骨方向分化。对比两种实验方法,使用上清液诱导滑膜间充质干细胞向软骨方向分化能力更强。 展开更多
关键词 上清液 滑膜间充质干细胞 软骨细胞 转化生长因子 细胞微环境 组织工程
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白膜层细胞来源的富血小板血浆的制备及其对间充质干细胞增殖特性的影响 被引量：1
10
作者 王克涛 李众利 +7 位作者 朱恒 秦园园 杨以萌 李冀 吕汝举 刘元林 毛宁 张毅 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期164-170,共7页
目的:从成分血分离过程中废弃的白膜层细胞中分离富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP),为实验研究和临床应用提供大量获得PRP的途径。方法:比较白膜层细胞来源的PRP与全血来源的PRP的制备步骤,电镜观察不同PRP的形态特点,采用血细... 目的:从成分血分离过程中废弃的白膜层细胞中分离富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP),为实验研究和临床应用提供大量获得PRP的途径。方法:比较白膜层细胞来源的PRP与全血来源的PRP的制备步骤,电镜观察不同PRP的形态特点,采用血细胞分析仪比较其成分构成,流式细胞术检测PRP中血小板特异标记CD41a和CD42b的表达情况,CCK-8法检测PRP对间充质干细胞增殖的影响。结果:白膜层细胞来源的PRP与全血来源的PRP具有相似的形态,接近的成份构成,表达较高水平的CD41a和CD42b;更为重要的是白膜层细胞来源的PRP能够显著促进间充质干细胞增殖。结论:白膜层细胞可以用来制备PRP,其具有和全血来源PRP相似的生物学特性,且收获量更多。本研究探索了一种可以大量获取PRP的可能途径,这为PRP相关的实验研究提供有利的支持。 展开更多
关键词 富血小板血浆 白膜层 间充质干细胞 细胞增殖
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经血来源间充质干细胞对大鼠薄型子宫内膜的治疗效果 被引量：5
11
作者 王红燕 颜贝 +2 位作者 裴承斌 徐焱焱 张欣宗 《中国医学前沿杂志（电子版）》 2019年第11期41-45,共5页
目的探究经血来源间充质干细胞(menstrual blood-derived stem cells,MenSCs)对大鼠薄型子宫内膜的治疗效果。方法将20只无特殊病原体(specific pathogen free,SPF)雌性大鼠随机分为对照组、模型组、MenSCs组和雌激素组。模型组、MenSC... 目的探究经血来源间充质干细胞(menstrual blood-derived stem cells,MenSCs)对大鼠薄型子宫内膜的治疗效果。方法将20只无特殊病原体(specific pathogen free,SPF)雌性大鼠随机分为对照组、模型组、MenSCs组和雌激素组。模型组、MenSCs组、雌激素组大鼠采用子宫注射无水乙醇的方法构建薄型子宫大鼠模型,MenSCs组大鼠尾静脉注射MenSCs,雌激素组大鼠尾静脉注射雌激素。于3个动情周期后处死大鼠,取其子宫内膜标本制作切片,比较四组大鼠子宫内膜厚度和角蛋白、波形蛋白、整合素β3的表达情况。结果分离培养的MenSCs表现出明显的间充质干细胞特征,高表达CD44、CD73、CD90、CD105和OCT-4、C-kit、波形蛋白,不表达HLA-DR。成骨、成脂、成软骨分化均为阳性。模型组、MenSCs组、雌激素组大鼠子宫内膜厚度均显著小于对照组(均P<0.001),其中模型组大鼠子宫内膜厚度最小,MenSCs组大鼠子宫内膜厚度显著大于雌激素组(P=0.047)。模型组、MenSCs组、雌激素组大鼠子宫内膜组织角蛋白、波形蛋白、整合素β3表达水平均显著低于对照组(均P<0.05),MenSCs组大鼠上述蛋白表达水平均显著高于模型组和雌激素组(均P<0.05)。结论MenSCs可改善大鼠薄型子宫内膜的容受性和功能,其治疗效果优于雌激素治疗。 展开更多
关键词 经血来源间充质干细胞 薄型子宫内膜 移植 干细胞治疗
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基底膜基质胶携带人脂肪组织来源间充质干细胞移植改善心肌梗死大鼠心脏功能 被引量：1
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作者 杨玥 刘秀珍 +2 位作者 杨军厚 刘乃国 单长民 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1532-1536,共5页
目的:应用基底膜基质胶(matrigel)携带人脂肪组织来源间充质干细胞(ADMSCs)在大鼠的心肌梗死部位注射,观察其对细胞存活的影响及改善心梗模型大鼠心脏功能的能力。方法:分离、培养、扩增人ADM-SCs,左冠状动脉前降支结扎法建立大鼠急性... 目的:应用基底膜基质胶(matrigel)携带人脂肪组织来源间充质干细胞(ADMSCs)在大鼠的心肌梗死部位注射,观察其对细胞存活的影响及改善心梗模型大鼠心脏功能的能力。方法:分离、培养、扩增人ADM-SCs,左冠状动脉前降支结扎法建立大鼠急性心肌梗死模型。将大鼠急性心肌梗死模型随机分为4组,对照组(PBS组)、matrigel组、PBS+ADMSCs组、matrigel+ADMSCs组,对移植4周后细胞的存活及心梗局部新生血管的密度进行测量,并利用心脏超声检测大鼠心脏功能。结果:与其它各组相比,matrigel+ADMSCs组的细胞4周存活细胞数量以及心肌梗死区域新生血管密度均显著提高,心脏超声结果也表明该组大鼠的心脏功能改善最为显著。结论:基底膜基质胶能够提高人脂肪组织来源间充质干细胞在大鼠心肌梗死部位的存活,有助于提高心肌梗死部位微血管生成并改善心肌梗死大鼠的心脏功能。 展开更多
关键词 心肌梗死 脂肪组织来源间充质干细胞 基质胶
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大鼠滑膜间充质干细胞的鉴定及定向分化 被引量：2
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作者 王兆飞 王炳 +4 位作者 周渊 宋登新 何小文 曹云 王健 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期375-380,共6页
目的体外分离培养及扩增SD大鼠滑膜间充质干细胞,鉴定其多向分化潜能。方法制作SD大鼠创伤性骨关节炎模型,无菌条件下获取炎性的滑膜组织,Ⅰ型胶原酶消化法分离滑膜间充质干细胞,有限稀释单克隆培养法纯化。体外扩增培养至第3代后,进行... 目的体外分离培养及扩增SD大鼠滑膜间充质干细胞,鉴定其多向分化潜能。方法制作SD大鼠创伤性骨关节炎模型,无菌条件下获取炎性的滑膜组织,Ⅰ型胶原酶消化法分离滑膜间充质干细胞,有限稀释单克隆培养法纯化。体外扩增培养至第3代后,进行生长曲线测定、成脂诱导、成骨诱导和成软骨诱导,Real-time qPCR和Western Blot检测成软骨分化后蛋白聚糖和Ⅱ型胶原的表达含量。结果分离纯化培养大鼠滑膜来源的间充质干细胞,在体外传代后表现出均匀的成纤维细胞样的纺锤形形态。将滑膜间充质干细胞进行成脂诱导、成骨诱导和成软骨诱导并加以鉴定。在炎性因子的作用下,用Real-time qPCR和Western Blot检测成软骨诱导分化后细胞中Ⅱ型胶原和蛋白聚糖mRNA呈阳性表达。结论在炎性环境中大鼠来源的滑膜间充质干细胞具有良好的成软骨能力。 展开更多
关键词 滑膜间充质干细胞 成软骨分化潜能 骨关节炎 炎症因子
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绿色荧光蛋白滑膜间充质干细胞抑制大鼠骨关节炎的实验研究
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作者 唐涛 张继虹 +7 位作者 孙先润 李治 王波 刘颖 李亚国 肖壮 李连娥 李晓云 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期913-917,共5页
目的探讨关节腔内注射绿色荧光蛋白(GFP)滑膜间充质干细胞防治骨关节炎的有效性。方法增殖培养GFP滑膜间充质干细胞至第3代,收集并调整细胞浓度至1.0×108/m L后行关节腔内细胞移植。15只SD大鼠经改良Hulth手术造骨关节炎模型,同一... 目的探讨关节腔内注射绿色荧光蛋白(GFP)滑膜间充质干细胞防治骨关节炎的有效性。方法增殖培养GFP滑膜间充质干细胞至第3代,收集并调整细胞浓度至1.0×108/m L后行关节腔内细胞移植。15只SD大鼠经改良Hulth手术造骨关节炎模型,同一大鼠左腿为对照组,右腿为治疗组。于1周、2周时麻醉状态下CT扫描后处死大鼠,取全膝关节置于4%多聚甲醛液固定、制片,番红-O染色后进行病理图像系统分析,经Mankin′s评分,分析评价骨关节炎中2组关节软骨破坏进展。结果 CT显示治疗组较对照组骨赘和软骨下硬化减少,关节软骨破坏轻。第2周时胫骨关节软骨Mankin′s评分对照组为10.07±0.63,治疗组为3.56±0.21,2组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论关节腔内注射GFP滑膜间充质干细胞能有效抑制关节软骨的破坏进展。 展开更多
关键词 骨关节炎 关节软骨 绿色荧光蛋白滑膜间充质干细胞移植
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人脐带、胎盘绒毛膜来源间充质干细胞的生物学特性比较研究 被引量：10
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作者 韩之波 杨舟鑫 +6 位作者 池颖 王有为 王涛 及月茹 杨萍 孟磊 韩忠朝 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期692-696,共5页
由于组织来源和增殖能力的优势,与骨髓间充质干细胞(MSC)相比,脐带和胎盘来源的MSC更具有临床应用前景,但脐带和胎盘来源MSC的生物学特性是否有差异值得进一步研究。本研究比较人脐带、胎盘绒毛膜来源MSC的生物学特性。将胎盘、脐带冲... 由于组织来源和增殖能力的优势,与骨髓间充质干细胞(MSC)相比,脐带和胎盘来源的MSC更具有临床应用前景,但脐带和胎盘来源MSC的生物学特性是否有差异值得进一步研究。本研究比较人脐带、胎盘绒毛膜来源MSC的生物学特性。将胎盘、脐带冲洗干净后,通过酶消化法分离脐带、胎盘来源的MSC。通过短串联重复序列分析(STR)检测细胞是否均来源于胎儿组织,用MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术分析细胞表型,使用不同的诱导分化培养液检测其多向分化的能力。将MSC与植物血凝素刺激的外周血单个核细胞共培养,用酶联免疫吸附试验检测上清γ-干扰素的水平。结果表明,STR分析证实所得到的细胞均来源于胎儿组织,这两种细胞生长呈典型的成纤维细胞形态;细胞表达常见的MSC表面标记CD90、CD73、CD105、CD44,不表达CD45,CD11b和CD34;在不同的条件培养液培养下,细胞均可向成骨、成脂方向分化,但在成脂分化方面,绒毛膜来源MSC能形成更大的脂滴。结论:所得到的细胞均为MSC,均能抑制植物血凝素刺激的人外周血单个核细胞分泌γ-干扰素,且绒毛膜来源的MSC具有更强的抑制能力。这使得绒毛膜来源的MSC在治疗自身免疫系统疾病方面可能具有更大的优势。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 绒毛膜间充质干细胞 生物学特性 免疫调节
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骨髓间充质干细胞来源的膜微囊对谷氨酸损伤PC12细胞的保护作用 被引量：2
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作者 林珊珊 朱波 +1 位作者 郭子宽 黄国志 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期1078-1083,共6页
本研究目的在于探讨骨髓间充质干细胞(BMMSC)来源的膜微囊(microvesicle,MV)对神经细胞的保护作用,以了解MSC对神经修复作用的机制。采用密度梯度离心联合贴壁法分离BMMSC,采用低温高速离心法提取BMMSC-MV。采用流式细胞术鉴定BMMSC,并... 本研究目的在于探讨骨髓间充质干细胞(BMMSC)来源的膜微囊(microvesicle,MV)对神经细胞的保护作用,以了解MSC对神经修复作用的机制。采用密度梯度离心联合贴壁法分离BMMSC,采用低温高速离心法提取BMMSC-MV。采用流式细胞术鉴定BMMSC,并在透射电子显微镜下观察MV形态。建立谷氨酸致PC12细胞损伤模型,实验分为对照组、谷氨酸损伤组以及BMMSC-MV共培养组。用MTT法检测MV对PC12细胞活性的影响;流式细胞术、Hoechst荧光标记法检测细胞凋亡率的变化。结果表明:分离提取的BMMSC高表达CD29和CD44,不表达或低表达CD31,CD34,CD45。在电子显微镜下MV呈典型的圆形囊泡状。与对照组相比,损伤组细胞活性显著下降,凋亡率增加;BMMSC-MV共培养显著提高了谷氨酸损伤的PC12细胞活性、降低了凋亡率。结论:BMMSC来源的MV对谷氨酸兴奋性损伤的细胞具有明显的保护作用,为MV应用于神经兴奋性损伤性疾病提供了初步的实验和理论依据。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 膜微囊 PC12细胞 兴奋性损伤
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关节软骨细胞与CD105阳性滑膜间充质干细胞共培养并促进其成软骨分化 被引量：3
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作者 张松 王鹏程 胡海清 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期408-413,共6页
目的使用Transwell小室将大鼠关节软骨细胞(ACC)和CD105阳性滑膜间充质干细胞(CD105+SMSC)进行间接共培养,研究共培养体系下CD105+SMSC成软骨分化的能力和伴随的炎症反应情况。方法在体外分离培养大鼠SMSC,通过形态学观察和成骨、成脂... 目的使用Transwell小室将大鼠关节软骨细胞(ACC)和CD105阳性滑膜间充质干细胞(CD105+SMSC)进行间接共培养,研究共培养体系下CD105+SMSC成软骨分化的能力和伴随的炎症反应情况。方法在体外分离培养大鼠SMSC,通过形态学观察和成骨、成脂、成软骨三系分化鉴定。使用磁珠分选方法(MACS)筛选出表面标记为CD105阳性的细胞,并用免疫荧光和流式细胞学方法鉴定。体外分离培养大鼠ACC,用形态学观察及甲苯胺蓝染色鉴定。ACC按一定比例(4∶1,2∶1,1∶1,1∶2,1∶4)与CD105+SMSC在Transwell小室中间接共培养,另设单独培养的CD105+SMSC作阴性对照,CD105+SMSC+成软骨诱导培养液(chondrogenic culture medium,CCM)作阳性对照。在培养的第14天提取各组CD105+SMSC总RNA,使用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测二型胶原(Col2A1),蛋白聚糖(aggrecan)、性别决定区Y框蛋白9(SOX-9)、转化生长因子-β3(TGF-β3)等相应的成软骨指标表达,检测聚蛋白多糖酶-5(ADAMTS-5)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、Runt相关转录因子-2(RUNX-2)等炎症指标的表达。结果分离培养后的SMSC可进行成骨、成脂、成软骨三系分化。MACS分选后可见免疫荧光和流式细胞学鉴定均提示CD105阳性。与软骨细胞间接共培养14 d后,Real-time PCR检测结果示,与阴性对照组相比,2∶1和1∶1实验组的各成软骨指标较阴性对照组上升,ADAMTS-5和RUNX-2炎症指标无明显改变,MMP-3和MMP-13指标显著下降。结论与ACC间接共培养可以促进CD105+SMSC向成软骨方向分化,并能够在一定程度上降低其分化过程中的炎症反应。 展开更多
关键词 滑膜间充质干细胞 磁珠分选 成软骨分化 间接共培养
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滑膜间充质干细胞外泌体源性miR-376b-3p靶向MYC抑制骨关节炎进展 被引量：1
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作者 牛学刚 刘朝旭 刘一帆 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第24期2945-2950,共6页
目的:探讨滑膜间充质干细胞(SMSCs)外泌体(exo)通过携带高水平的miR-376b-3p调控MYC对骨关节炎(OA)的作用。方法:IL-1β处理HC-A细胞建立OA损伤模型,分析miR-376b-3p、MYC水平变化。滑膜组织中分离SMSCs及exo,干预miR-376b-3p与MYC表达,... 目的:探讨滑膜间充质干细胞(SMSCs)外泌体(exo)通过携带高水平的miR-376b-3p调控MYC对骨关节炎(OA)的作用。方法:IL-1β处理HC-A细胞建立OA损伤模型,分析miR-376b-3p、MYC水平变化。滑膜组织中分离SMSCs及exo,干预miR-376b-3p与MYC表达,CCK-8、流式细胞术和ELISA检测HC-A细胞增殖、凋亡、炎症因子IL-6、TNF-α分泌。结果:与对照组相比,OA组织与细胞中miR-376b-3p表达均下调(均P<0.05)。SMSCs源性exo能够促进软骨细胞增殖,抑制其凋亡,下调IL-6、TNF-α水平,该作用能被miR-376b-3p抑制剂部分抵消(均P<0.05)。MYC被证实是miR-376b-3p的靶基因且能促进OA软骨细胞损伤,对OA损伤的促进作用能被SMSCs源性exo部分抵消(均P<0.05)。结论:SMSCs源性exo携带的miR-376b-3p通过抑制MYC促进软骨细胞增殖,抑制其凋亡和炎症反应,从而抑制OA进展。 展开更多
关键词 滑膜间充质干细胞 外泌体 骨关节炎 miR-376b-3p
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高糖对滑膜间充质干细胞衰老的影响 被引量：4
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作者 谭淑仪 刘宇薇 高海 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第14期1773-1777,共5页
目的探究高糖对大鼠滑膜间充质干细胞(synovial mesenchymal stem cells,SMSCs)衰老的影响,为SMSCs应用于糖尿病患者骨关节炎的治疗提供风险评估依据。方法葡萄糖生理浓度(5.5 mmol/L)作为对照组,高糖(25 mmol/L)作为高糖组,检测大鼠SM... 目的探究高糖对大鼠滑膜间充质干细胞(synovial mesenchymal stem cells,SMSCs)衰老的影响,为SMSCs应用于糖尿病患者骨关节炎的治疗提供风险评估依据。方法葡萄糖生理浓度(5.5 mmol/L)作为对照组,高糖(25 mmol/L)作为高糖组,检测大鼠SMSCs在高糖刺激下的衰老情况,包括细胞增殖活性,β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)表达,衰老相关表型(SASP)IL6、MMP13、TNFα、CXCL1、IFNβ的mRNA表达,细胞内线粒体裂解情况,p21蛋白表达,以及透明质酸的分泌。结果本实验条件下,高糖刺激不影响大鼠SMSCs增殖(P=0.675),SA-β-gal染色阳性细胞增加,SMSCs胞内线粒体裂解增加,线粒体呈碎片化,衰老相关表型SASP的mRNA表达增加,MMP13(P=0.011),TNF、IL-6、INFβ(P=0.000),CXCL1(P=0.003),p21蛋白表达下降(P=0.00),透明质酸释放降低(P=0.002)。结论高糖使大鼠SMSCs进入衰老状态,损害其生物学功能,采用SMCSs治疗糖尿病患者骨关节炎其临床效果有待商榷。 展开更多
关键词 滑膜间充质干细胞 高糖 衰老 糖尿病 骨关节炎
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间充质干细胞表面标记在颞下颌关节疾病患者滑膜间充质细胞表达的比较 被引量：2
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作者 路红艳 李健 龙星 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2018年第11期1249-1252,共4页
目的:检测间充质干细胞表面标记(CD73、CD90、CD105、CD271和CD34)在人颞下颌关节滑膜间充质细胞(synovial mesenchymal cells,SMCs)上的表达;同时比较这些标记在髁突肥大滑膜无病变和颞下颌关节骨关节病伴关节盘穿孔患者SMCs上表达水... 目的:检测间充质干细胞表面标记(CD73、CD90、CD105、CD271和CD34)在人颞下颌关节滑膜间充质细胞(synovial mesenchymal cells,SMCs)上的表达;同时比较这些标记在髁突肥大滑膜无病变和颞下颌关节骨关节病伴关节盘穿孔患者SMCs上表达水平的差异。方法:分别采用多次贴壁培养和组织块法分离得到髂骨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)和颞下颌关节原代SMCs并传至3代,应用流式细胞仪检测CD34、CD73、CD90、CD105、CD271的表达水平。结果:髂骨MSCs及颞下颌关节SMCs表面CD73、CD90、CD105表达量均>90%,CD271表达量<1%,CD34表达量较低为0.47%～30.00%。结论:髂骨MSCs和颞下颌关节SMCs高表达CD73、CD90、CD105,CD271和CD34表达量较低;CD34在人颞下颌关节骨关节病患者SMCs上的表达量较髁突肥大滑膜无病变患者高。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 颞下颌关节滑膜间充质细胞 间充质干细胞表面标记 颞下颌关节骨关节病
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