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植物富含半胱氨酸的类受体激酶的研究进展 被引量:10
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作者 郑超 李登高 白薇 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期10-17,共8页
类受体激酶(receptor-like kinase,RLK)是植物体内普遍存在的一类蛋白激酶,是许多信号识别传递途径中的关键组分,作为识别信号的质膜受体,能够感受外界刺激,通过磷酸化作用参与胞内信号传递。富含半胱氨酸的类受体激酶(cysteine-rich re... 类受体激酶(receptor-like kinase,RLK)是植物体内普遍存在的一类蛋白激酶,是许多信号识别传递途径中的关键组分,作为识别信号的质膜受体,能够感受外界刺激,通过磷酸化作用参与胞内信号传递。富含半胱氨酸的类受体激酶(cysteine-rich receptor-like kinase,CRK)又被称为DUF26(domain of unknown function 26)类受体激酶,是RLK中的一大类。近几年,越来越多的研究发现CRK参与了植物的抗病防御反应。综述了植物CRK蛋白的结构特征,总结了目前已发现的CRK在生物胁迫、非生物胁迫及生长发育中的功能,并对CRK未来的研究进行了展望,旨为后续阐明CRK的功能和分子机制提供参考。 展开更多
关键词 富含受体蛋白激酶 非生物胁迫 生物胁迫 生物功能
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植物富含半胱氨酸类受体激酶家族研究进展 被引量:4
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作者 耿艳飞 吕明芳 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第12期2303-2312,共10页
在植物生长发育过程中,富含半胱氨酸类受体激酶(cysteine-rich receptor-like kinases,CRKs)作为上游信号分子,在感知胁迫信号和诱发免疫应答中起着重要作用。CRK主要由信号肽、DUF26(PF01657)、跨膜结构域和胞内激酶结构域组成,其中DU... 在植物生长发育过程中,富含半胱氨酸类受体激酶(cysteine-rich receptor-like kinases,CRKs)作为上游信号分子,在感知胁迫信号和诱发免疫应答中起着重要作用。CRK主要由信号肽、DUF26(PF01657)、跨膜结构域和胞内激酶结构域组成,其中DUF26和激酶结构域在不同植物中高度保守。生物信息学分析发现,在单子叶和双子叶植物中含有37~170个CRK成员,它们在植物生长发育和胁迫应答中发挥不同的功能。文章综述了近年来国内外植物CRK基因结构及其在生长发育、胁迫应答中的功能研究进展,对于提高农作物抗逆境能力具有重要意义。 展开更多
关键词 富含受体激酶 植物 逆境 生长发育
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富含半胱氨酸肠蛋白的研究进展 被引量:3
3
作者 陈燕 孙晨 《海洋科学》 CAS 北大核心 2020年第6期148-151,共4页
富含半胱氨酸肠蛋白是一种含双锌指结构的小分子蛋白,其在锌离子转运、个体发育、免疫防御以及肿瘤发生等多种生理过程中发挥重要作用。作者主要对富含半胱氨酸肠蛋白的结构特点及其在发育和免疫方面的研究进展进行系统概述,并指出其相... 富含半胱氨酸肠蛋白是一种含双锌指结构的小分子蛋白,其在锌离子转运、个体发育、免疫防御以及肿瘤发生等多种生理过程中发挥重要作用。作者主要对富含半胱氨酸肠蛋白的结构特点及其在发育和免疫方面的研究进展进行系统概述,并指出其相关作用机制尚待深入研究。 展开更多
关键词 富含肠蛋白 LIM结构域 机体发育 免疫防御
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核苷酸结合寡聚化结构域样受体热蛋白结构域亚家族成员3炎症小体的活化调节与牙周疾病的关系 被引量:4
4
作者 吴冷 王骏 +1 位作者 赵蕾 吴亚菲 《国际口腔医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第6期710-714,共5页
核苷酸结合寡聚化结构域样受体热蛋白结构域亚家族成员(NLRP)3炎症小体是一种位于细胞质内的多蛋白质复合体,由其核心成分感知病原体和宿主危险信号后组装而成,通过激活半胱氨酸天冬酰胺特异蛋白酶-1致促炎因子白细胞介素(IL)-1β成熟... 核苷酸结合寡聚化结构域样受体热蛋白结构域亚家族成员(NLRP)3炎症小体是一种位于细胞质内的多蛋白质复合体,由其核心成分感知病原体和宿主危险信号后组装而成,通过激活半胱氨酸天冬酰胺特异蛋白酶-1致促炎因子白细胞介素(IL)-1β成熟与分泌参与免疫炎症反应。牙周病是由宿主和微生物因素相互作用导致的局部炎症反应,而IL-1β又是牙周炎发病的关键因素之一。IL-1β的成熟和分泌与NLRP3炎症小体密切相关,且牙周致病菌可调节该炎症小体的表达及活化,因此NLRP3炎症小体对牙周疾病的发生发展和治疗具有重要意义。本文就NLRP3炎症小体的生物学功能、活化机制及其在牙周病学领域的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 炎症小体 核苷结合寡聚化结构域受体热蛋白结构域亚家族成员3 天冬酰胺特异蛋白 酶-1 白细胞介素 牙周疾病 免疫炎症反应
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血管性血友病因子裂解酶CysR结构域生物学功能的研究 被引量:9
5
作者 吴昊 李华 +3 位作者 苏畅 李鸿雁 崔日花 金圣宇 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期893-900,共8页
目的:研究血管性血友病因子裂解酶(ADAMTS13)富含半胱氨酸(CysR)结构域在血管性血友病因子(vWF)裂解中的生物学功能,为探明血栓性血小板减少性紫癜(TTP)的发病机制提供实验证据。方法:利用点突变技术对ADAMTS13 CysR结构域中的EDGTLS氨... 目的:研究血管性血友病因子裂解酶(ADAMTS13)富含半胱氨酸(CysR)结构域在血管性血友病因子(vWF)裂解中的生物学功能,为探明血栓性血小板减少性紫癜(TTP)的发病机制提供实验证据。方法:利用点突变技术对ADAMTS13 CysR结构域中的EDGTLS氨基酸残基进行基因突变,制备质粒,表达并提纯蛋白。1%Sea Kem HGT琼脂糖凝胶分离后用Western blot方法观察野生型和突变型ADAMTS13在变性条件或剪切应力作用下对底物v WF的裂解活性。结果:成功构建了ADAMTS13突变体质粒(M1:Glu515Ala;M2:Asp516Ala;M3:Gly517Ala;M4:Thr518Ala;M5:Leu519Ala;M6:Ser520Al)。野生型和突变型ADAMTS13质粒在HEK293细胞中稳定表达,并提纯蛋白。在变性条件下,野生型ADAMTS13基本完全裂解了v WF多聚体,而突变体M1裂解v WF多聚体的活性显著降低(P <0.01)。在体外剪切应力作用下,与野生型ADAMTS13相比,突变体M1对v WF多聚体的裂解能力显著降低(P <0.01)。突变体M1对FRETS-vWF73的剪切能力与野生型ADAMTS13相比显著降低。与野生型ADAMTS13相比,突变体M1与v WF之间的结合力未见明显降低。结论:在变性条件和剪切应力作用下,ADAMTS13 CysR结构域在酶切v WF多聚体的过程中起着重要作用,其中Glu515可能是底物识别的重要作用位点。 展开更多
关键词 血管性血友病因子裂解酶 富含结构域 血管性血友病因子 血栓性血小板减少性紫癜
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沙棘熊果酸调控NLRP3/caspase-1轴在抗结核药物致人肝细胞损伤中的作用 被引量:5
6
作者 窦增花 于国英 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1319-1323,共5页
目的探究沙棘熊果酸调控NLRP3/caspase-1轴在抗结核药物致人肝细胞损伤中的作用。方法正常肝细胞株HL-7702分正常组、模型组及沙棘熊果酸低、中、高浓度组。除正常组外,其余各组120μg/mL异烟肼和240μg/mL利福平联合处理构建抗结核药... 目的探究沙棘熊果酸调控NLRP3/caspase-1轴在抗结核药物致人肝细胞损伤中的作用。方法正常肝细胞株HL-7702分正常组、模型组及沙棘熊果酸低、中、高浓度组。除正常组外,其余各组120μg/mL异烟肼和240μg/mL利福平联合处理构建抗结核药物致人肝细胞损伤模型,沙棘熊果酸低、中、高浓度组同时添加0.018、0.18、1.8μmol/L沙棘熊果酸共培养。CCK-8法检测细胞增殖能力;ELISA检测上清液中TNF-α、白IL-1β水平;SOD活性检测试剂盒、MDA检测试剂盒检测上清液中SOD、MDA水平;流式细胞术检测细胞凋亡能力;蛋白免疫印迹检测细胞中NLRP3、pro-caspase-1、caspase-1(p10)蛋白水平。结果与正常组比较,模型组(12、24、36 h)细胞存活率、上清液中SOD水平降低(P<0.05);上清液中TNF-α、IL-1β、MDA水平,细胞凋亡率,细胞中NLRP3、pro-caspase-1、caspase-1(p10)蛋白水平升高(P<0.05)。与模型组比较,沙棘熊果酸低、中浓度组(24、36 h)、沙棘熊果酸高浓度组(12、24、36 h)细胞存活率,沙棘熊果酸低、中、高浓度组上清液中SOD水平升高(P<0.05);沙棘熊果酸低、中、高浓度组上清液中TNF-α、IL-1β、凋亡率、细胞中NLRP3蛋白水平,沙棘熊果酸中、高浓度组上清液中MDA,细胞中pro-caspase-1、caspase-1(p10)蛋白水平降低(P<0.05)。随着沙棘熊果酸浓度的升高,(12、24、36 h)细胞存活率、上清液中SOD水平逐渐升高(P<0.05);上清液中TNF-α、IL-1β、MDA、凋亡率,细胞中NLRP3、pro-caspase-1、caspase-1(p10)蛋白水平逐渐降低(P<0.05),呈浓度依赖效应。结论沙棘熊果酸在抗结核药物致人肝细胞中抑制NLRP3/caspase-1通路从而抑制炎症和氧化应激,抑制细胞病变发生,从而促进细胞增殖、抑制细胞凋亡,实现对肝细胞的保护。 展开更多
关键词 沙棘熊果 肝细胞损伤 抗结核药物 核苷结合寡聚化结构域受体蛋白3/天冬蛋白酶-1
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益心方抑制NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤 被引量:1
7
作者 杨燕玲 董莉 +1 位作者 郑钰凡 戎靖枫 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2024年第9期2483-2491,共9页
目的探讨益心方对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌保护作用的可能机制。方法将65只Wistar大鼠随机分为假手术组10只、造模组55只;造模组采取结扎冠状动脉左前降支方法构建大鼠MIRI模型,假手术组只穿线不结扎。造模组造模后随机分为模型组、... 目的探讨益心方对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌保护作用的可能机制。方法将65只Wistar大鼠随机分为假手术组10只、造模组55只;造模组采取结扎冠状动脉左前降支方法构建大鼠MIRI模型,假手术组只穿线不结扎。造模组造模后随机分为模型组、益心方低、中、高剂量组和曲美他嗪组。益心方低、中、高剂量组分别于造模后予以益心方6.84 g·kg^(-1)、13.68 g·kg^(-1)、27.36 g·kg^(-1)灌胃,曲美他嗪组予以曲美他嗪5.4 mg·kg^(-1)灌胃,假手术组与模型组予等体积的生理盐水灌胃,各组灌胃7天。超声心电图检测大鼠心功能情况;生化法检测血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(AST)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织病理变化;Masson染色观察心肌纤维化程度;TUNEL染色检测心肌细胞焦亡指数;Western blot检测心肌组织NLRP3、pro-Caspase-1、GSDMD-FL、GSDMD-N蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠左室射血分数(LVEF),左室短轴缩短率(FS)显著降低(P<0.001),心肌损伤标志物CK、AST、LDH显著升高(P<0.001),病理结果显示心肌结构受损,间质水肿伴炎性细胞浸润,心肌纤维排列紊乱,心肌细胞横截面积变大(P<0.001),心肌纤维化明显(P<0.001),心肌细胞焦亡指数显著增加(P<0.001),心肌组织中NLRP3、pro-Caspase-1、GSDMD-FL、GSDMD-N蛋白表达明显升高(P<0.001)。与模型组比较,益心方各剂量组和曲美他嗪组LVEF、FS显著升高(P<0.05,P<0.001),心肌损伤标志物CK、AST、LDH显著降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001),心肌细胞横截面积减小(P<0.05,P<0.001),心肌纤维化程度减轻(P<0.001),心肌细胞焦亡指数下降(P<0.05,P<0.001),心肌组织中NLRP3、pro-Caspase-1、GSDMD-FL、GSDMD-N蛋白表达降低(P<0.001)。结论益心方能够减轻大鼠MIRI后心肌损伤和心肌纤维化程度,从而改善大鼠心功能情况,其机制可能与抑制NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路介导的心肌细胞焦亡相关。 展开更多
关键词 心肌缺血再灌注损伤 益心方 核苷结合寡聚化结构域受体蛋白3(NLRP3) 蛋白酶1(Caspase-1) GSDMD 细胞焦亡
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陆地棉CRK基因家族抗黄萎病功能分析
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作者 裴洪伟 索佳慧 +3 位作者 武海娜 孙正文 张艳 杨君 《北方农业学报》 2024年第6期1-12,共12页
【目的】鉴定分析陆地棉(Gossypium hirsutum)富含半胱氨酸类受体激酶(CRK)基因家族成员,为棉花抗黄萎病育种提供基因资源和理论依据。【方法】根据全基因组测序结果,利用生物信息学技术在陆地棉农大棉8号基因组中鉴定GhCRK基因家族,并... 【目的】鉴定分析陆地棉(Gossypium hirsutum)富含半胱氨酸类受体激酶(CRK)基因家族成员,为棉花抗黄萎病育种提供基因资源和理论依据。【方法】根据全基因组测序结果,利用生物信息学技术在陆地棉农大棉8号基因组中鉴定GhCRK基因家族,并进行蛋白理化性质、染色体定位和遗传进化分析。基于基因表达数据挖掘潜在的黄萎病抗性基因,并通过病毒诱导的基因沉默(virus induced gene silencing,VIGS)技术对候选基因进行抗病功能鉴定。【结果】在陆地棉农大棉8号基因组中共鉴定到50个GhCRKs,分布在14条染色体上,编码蛋白长度为390~1 774个氨基酸残基,分子量为43.15~196.66 kDa,平均等电点为6.94,大多定位在细胞质膜。蛋白结构域分析显示,90%的GhCRKs(45个)含有2个Stress-antifung结构域。在GhCRKs启动子区鉴定到植物激素顺式响应元件茉莉酸甲酯、脱落酸、水杨酸等7类。筛选出14个受大丽轮枝菌诱导发生显著上调表达的GhCRKs,且GhCRK08和GhCRK33沉默后,陆地棉黄萎病症状更严重、病情指数显著增高。【结论】陆地棉农大棉8号基因组中存在大量的CRKs,其中14个为潜在重要的黄萎病抗性候选基因,进一步明确了GhCRK08和GhCRK33的抗病功能。 展开更多
关键词 陆地棉 富含受体激酶(CRK)基因家族 黄萎病 生物信息学 基因功能 基因表达
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参白颗粒干预细胞焦亡降低人胃黏膜上皮细胞炎症的机制研究
9
作者 李亚可 张忠绵 +4 位作者 张希颜 张丽菊 陶婧娜 王岚 李志红 《世界中医药》 北大核心 2024年第21期3311-3317,共7页
目的:探究参白颗粒(SBKL)干预细胞焦亡通路降低人胃黏膜上皮细胞(GES-1)炎症的机制。方法:通过脂多糖(LPS)诱导GES-1建立炎症模型。1)设置不同浓度梯度的LPS干预GES-1后,通过蛋白质印迹法(WB)检测各组NOD样受体热蛋白结构域蛋白3(NLRP3... 目的:探究参白颗粒(SBKL)干预细胞焦亡通路降低人胃黏膜上皮细胞(GES-1)炎症的机制。方法:通过脂多糖(LPS)诱导GES-1建立炎症模型。1)设置不同浓度梯度的LPS干预GES-1后,通过蛋白质印迹法(WB)检测各组NOD样受体热蛋白结构域蛋白3(NLRP3)的表达,确定LPS造模的相对最佳浓度;2)设置不同浓度SBKL干预GES-1,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)验证SBKL对GES-1毒性并筛选最佳干预浓度;3)实验分为空白组、模型组和SBKL组,除空白组外,其余2组以LPS构建炎症模型,干预24 h后通过WB检测NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、剪切的半胱氨酸蛋白酶-1(Cleaved Caspase-1)、消皮素D(GSDMD)、剪切的消皮素D(Cleaved GSDMD)的表达;流式细胞术检测活性氧(ROS)、细胞焦亡率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中白细胞介素18(IL-18),白细胞介素1β(IL-1β),肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。结果:1)LPS造模的相对最佳浓度为0.5μg/mL;2)CCK-8检测发现SBKL对于GES-1无毒性作用;3)与空白组比较,模型组NLRP3、Caspase-1、Cleaved Caspase-1、GSDMD、Cleaved GSDMD、ROS和焦亡率表达升高;与模型组比较,SBKL组上述指标表达明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:SBKL能够抑制细胞焦亡通路降低LPS诱导的GES-1炎症反应及氧化应激,减轻细胞焦亡。 展开更多
关键词 参白颗粒 慢性萎缩性胃炎 细胞焦亡 NOD样受体热蛋白结构域蛋白3 炎症反应 蛋白酶-1 消皮素D 人胃黏膜上皮细胞
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HIV-1抑制蛋白N-SRCR单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:3
10
作者 聂超 刘忠 +1 位作者 贺欣 吴稚伟 《医学研究生学报》 CAS 2010年第1期9-12,共4页
目的唾液凝集素(salivary agglutinin,SAG)的主要结构域蛋白N-SRCR能够抑制HIV-1感染细胞。为了对N-SRCR和HIV-1病毒的作用机制进行系统研究,文中诱导制备并分离了抗N-SRCR蛋白的单克隆抗体(mAb)。方法以CHO细胞表达的纯化蛋白N-SRCR免... 目的唾液凝集素(salivary agglutinin,SAG)的主要结构域蛋白N-SRCR能够抑制HIV-1感染细胞。为了对N-SRCR和HIV-1病毒的作用机制进行系统研究,文中诱导制备并分离了抗N-SRCR蛋白的单克隆抗体(mAb)。方法以CHO细胞表达的纯化蛋白N-SRCR免疫4周龄BALB/c小鼠,末次加强免疫后取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0-Ag-14融合,应用间接ELISA筛选分泌N-SRCR抗体的阳性杂交瘤细胞。用HiTrap Protein G柱纯化IgG抗体,SDS-PAGE检测纯化效果,间接ELISA确定效价,Western blot鉴定抗体特异性。结果获得1株稳定分泌抗N-SRCR蛋白的杂交瘤细胞株,命名为1D6。SDS-PAGE结果显示IgG抗体纯度较高,ELISA测定1D6抗体效价大于100×25。结论成功制备了抗N-SRCR的单克隆抗体,为进一步研究N-SRCR的生物学功能以及SRCR结构域与HIV-1囊膜蛋白gp120的相互作用提供了实验材料。 展开更多
关键词 清道夫受体富含半胱氨酸结构域 单克隆抗体 人免疫缺陷病毒
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利用酵母双杂交法检测甘蓝SCR与SRK之间的相互作用 被引量:6
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作者 罗兵 薛丽琰 +7 位作者 朱利泉 张贺翠 彭一波 陈松 杨红 杨昆 李成琼 王小佳 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期579-586,共8页
为深入研究甘蓝S位点受体激酶(SRK)和S位点富含半胱氨酸蛋白(SCR)间相互识别的分子机理,以具有典型自交不亲和性的甘蓝D3为材料,利用巢式PCR分别扩增SRK胞外域(eSRK)和SCR,通过酵母双杂交检测二者之间的相互作用,并利用同源重组技术将e... 为深入研究甘蓝S位点受体激酶(SRK)和S位点富含半胱氨酸蛋白(SCR)间相互识别的分子机理,以具有典型自交不亲和性的甘蓝D3为材料,利用巢式PCR分别扩增SRK胞外域(eSRK)和SCR,通过酵母双杂交检测二者之间的相互作用,并利用同源重组技术将eSRK与GAL4报告基因DNA活化域融合(pGADT7eSRK)以及SCR与GAL4报告基因DNA结合域融合(pGBKT7SCR)。两种重组质粒分别转化酵母Y187和Y2HGold后未出现自激活现象。融合的二倍体酵母(pGADT7eSRK×pGBKT7SCR)能在选择性固体培养基(SD/–Ade/–His/–Leu/–Trp/X-a-Gal/AbA)上生长,并且菌落呈蓝色。结果表明,eSRK与SCR蛋白能够相互结合,为深入研究二者作用位点成功建立了一个技术平台。 展开更多
关键词 甘蓝 S位点受体激酶(SRK) S位点富含蛋白(SCR) 酵母双杂交
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金银花提取液通过调控NLRP3/ASC/caspase-1信号通路对溃疡性结肠炎大鼠肠道黏膜的影响 被引量:16
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作者 葛柳青 周峰 +1 位作者 王晓兵 聂家艳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第22期2723-2728,共6页
目的:探讨金银花提取液通过调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族吡啉结构域蛋白3(NLRP3)/含CARD结构域的凋亡相关颗粒样蛋白(ASC)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)信号通路对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠道黏膜的影响。方法:随机选取1... 目的:探讨金银花提取液通过调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族吡啉结构域蛋白3(NLRP3)/含CARD结构域的凋亡相关颗粒样蛋白(ASC)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)信号通路对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠道黏膜的影响。方法:随机选取10只大鼠为对照组,另取55只大鼠在肛门约8 cm结肠处注射含5%TNBS和50%乙醇的混合液(4 ml/kg)构建大鼠UC模型,将造模成功的50只大鼠分为UC组、金银花低、中、高剂量组和金银花+NSS(NLRP3激活剂)组,每组10只。金银花低、中、高剂量组分别灌胃给予40、80、120 mg/(kg·d)金银花提取液,金银花+NSS组灌胃给予120 mg/(kg·d)金银花提取液和4 mg/(kg·d)NSS,对照组、UC组灌胃给予等体积生理盐水。观察大鼠一般情况,末次给药24 h后腹主动脉取血,处死大鼠,收集结肠组织,量取结肠长度。试剂盒检测大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、TNF-α、IL-6水平;HE染色检测大鼠结肠黏膜病理学变化;RT-PCR和Western blot检测大鼠肠道黏膜NLRP3/ASC/caspase-1通路mRNA和蛋白表达。结果:与对照组比较,UC组大鼠疾病活动指数(DAI)、结肠黏膜损伤程度、血清LDH、MDA、TNF-α、IL-6水平及结肠黏膜组织NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β mRNA和蛋白表达显著升高,结肠长度、血清SOD水平显著降低(P<0.05);与UC组比较,金银花低、中、高剂量组DAI、结肠黏膜损伤程度、LDH、MDA、TNF-α、IL-6水平及NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β mRNA和蛋白表达显著降低,结肠长度、血清SOD水平显著升高(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05);与金银花高剂量组比较,金银花+NSS组DAI、结肠黏膜损伤程度、LDH、MDA、TNF-α、IL-6水平及NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β mRNA和蛋白表达显著升高,结肠长度、SOD水平显著降低(P<0.05)。结论:金银花提取液可能通过抑制NLRP3/ASC/caspase-1信号通路激活缓解UC大鼠肠道黏膜损伤。 展开更多
关键词 金银花 核苷结合寡聚化结构域受体家族吡啉结构域蛋白3 含CARD结构域的凋亡相关颗粒样蛋白 天冬蛋白酶1 溃疡性结肠炎 肠道黏膜
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羽衣甘蓝自交不亲和系的选育及S_(13b)单倍型的鉴定 被引量:5
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作者 蓝兴国 解莉楠 +1 位作者 于晓敏 李玉花 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第S2期31-39,共9页
该文采用亲和指数法(种子数/自交授粉花朵数)分别在羽衣甘蓝‘赤兔’和‘白波’栽培品种的自交后代中,经过3年的自交选育获得1个自交不亲和系4·1·1和一个自交亲和系3·2·3·由于在芸苔属植物F1代杂交种的生产和... 该文采用亲和指数法(种子数/自交授粉花朵数)分别在羽衣甘蓝‘赤兔’和‘白波’栽培品种的自交后代中,经过3年的自交选育获得1个自交不亲和系4·1·1和一个自交亲和系3·2·3·由于在芸苔属植物F1代杂交种的生产和自交不亲和分子机制的研究方面S单倍型鉴定是必要的,因此在该文中我们采用了PCR方法利用引物PK1和PK4获得了BoSRKx的基因组序列,此序列的大小为919bp.经过数据库检索比对后发现BoSRKx的序列与BoSRK13b的序列完全一致.通过反转录PCR的方法获得了BoSRKx的cDNA序列,结果发现BoSRKx和BoSRK13b的序列在转录水平上也是完全一致的;另一方面,我们采用SCR保守信号肽编码区和NotⅠ-oligo(dT)设计的引物获得了BoSCRx的cDNA序列,经过数据库的检索比对后发现BoSCRx的序列比BoSCR13的序列只多出3个连续的碱基.根据上述结果我们推断出Sx单倍型就是S13b单倍型;最后,通过遗传分析结合PCR-RFLP方法和DNAblot方法对自交不亲和系进行了S13b纯合体的鉴定. 展开更多
关键词 羽衣甘蓝 自交不亲和 S位点受体蛋白激酶 S位点富含蛋白 S13b单倍型
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白杨素通过抑制NLRP3炎性小体信号通路对围绝经期抑郁症模型大鼠产生保护作用 被引量:11
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作者 杨琴 任昊阳 +2 位作者 朱寒雨 李正姐 梁枫 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1006-1011,共6页
目的探讨白杨素(chrysin,CHR)对围绝经期抑郁症(perimenopausal depression disorder,PDD)大鼠的保护作用。方法将成功摘除双侧卵巢的大鼠随机分为空白对照组、模型组、CHR组(20、40、80 mg·kg^-1)。除假手术组外,其余各组大鼠进... 目的探讨白杨素(chrysin,CHR)对围绝经期抑郁症(perimenopausal depression disorder,PDD)大鼠的保护作用。方法将成功摘除双侧卵巢的大鼠随机分为空白对照组、模型组、CHR组(20、40、80 mg·kg^-1)。除假手术组外,其余各组大鼠进行每天随机接受慢性不可预见性应激刺激方式造模,持续5周。造模结束后,各组大鼠分别进行旷场实验、强迫游泳实验和糖水偏好实验,观察大鼠的行为学变化。采用HE染色观察大鼠海马神经元的变化,并采用Western blot法检测大鼠海马中caspase-1、NLRP3、ASC以及炎症因子的表达情况。结果与对照组相比,模型组大鼠单位时间内穿越格子数和站立次数均有所减少、糖水偏嗜度降低、强迫游泳不动时间延长;此外,海马神经元产生明显损伤,海马中caspase-1、NLRP3、ASC蛋白表达水平明显升高,炎症因子IL-1β、IL-18、IL-6达水平明显升高。与模型组相比,CHR药物治疗后大鼠单位时间内穿越格子数和站立次数均有所增加、糖水偏嗜度升高、强迫游泳不动时间缩短;此外,海马神经元产生损伤减少,海马中caspase-1、NLRP3、ASC蛋白表达水平降低,炎症因子IL-1β、IL-18、IL-6的表达水平明显降低。结论 CHR对PDD模型大鼠具有保护作用。 展开更多
关键词 围绝经期抑郁症 白杨素 慢性不可预见性应激 天冬蛋白酶-1 核苷结合寡聚化结构域受体蛋白-3 凋亡相关斑点样蛋白
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牙髓炎模型大鼠血清褪黑素水平及其对牙髓炎症反应的抑制作用 被引量:7
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作者 韩耀伦 王璐 马欣 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1334-1339,I0019,共7页
目的:探讨牙髓炎大鼠血清褪黑素水平对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3/含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(NLRP3/caspase-1)信号通路的影响,阐明褪黑素对牙髓炎的作用机制。方法:将130只大鼠随机分为对照组(n=40)、牙髓炎组(n=60)和... 目的:探讨牙髓炎大鼠血清褪黑素水平对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3/含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(NLRP3/caspase-1)信号通路的影响,阐明褪黑素对牙髓炎的作用机制。方法:将130只大鼠随机分为对照组(n=40)、牙髓炎组(n=60)和牙髓炎+褪黑素组(n=30),其中30只牙髓炎大鼠随机分为牙髓炎1 d组、牙髓炎3 d组和牙髓炎5 d组,采用开髓暴露法建立牙髓炎大鼠模型,牙髓炎+褪黑素组大鼠开髓术后腹腔注射褪黑素。HE染色确定各组大鼠牙髓炎建模情况,ELISA法检测各组大鼠血清白细胞介素1β(IL-1β)和褪黑素水平以及牙髓组织中IL-1β水平,RT-PCR法检测各组大鼠牙髓组织中NLRP3和caspase-1 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组大鼠牙髓组织中NLRP3和caspase-1蛋白表达水平。结果:HE染色,对照组大鼠牙髓组织正常,牙髓炎组大鼠牙髓有脓腔形成,可见大量炎性细胞聚集。牙髓炎1 d和3 d组大鼠血清IL-1β水平明显高于对照组(P<0.05),褪黑素水平明显低于对照组(P<0.05);牙髓炎3 d组大鼠血清IL-1β水平明显低于牙髓炎1 d组(P<0.05),褪黑素水平明显高于牙髓炎1 d组(P<0.05);牙髓炎组和牙髓炎+褪黑素组大鼠牙髓组织中IL-1β水平明显高于对照组(P<0.05),且牙髓炎+褪黑素组大鼠牙髓组织中IL-1β水平明显低于牙髓炎组(P<0.05);牙髓炎组和牙髓炎+褪黑素组大鼠牙髓组织中NLRP3和caspase-1 mRNA和蛋白表达水平均明显高于对照组(P<0.05),且牙髓炎+褪黑素组大鼠牙髓组织中NLRP3和caspase-1 mRNA和蛋白水平明显低于牙髓炎组(P<0.05)。结论:牙髓炎大鼠血清褪黑素水平降低,褪黑素可通过抑制NLRP3/caspase-1信号通路降低牙髓炎大鼠牙髓组织的炎症反应。 展开更多
关键词 牙髓炎 褪黑素 核苷结合寡聚化结构域受体蛋白3 的天冬蛋白水解酶1 白细胞介素1Β
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白血病患者骨髓CYR61、CTGF、VEGF-C、VEGFR-2 mRNA的表达及其临床意义 被引量:4
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作者 徐宁 贺其图 +10 位作者 卢燕 韩轩茂 马宏杰 张冬霞 刘学文 袁晓俊 贾国荣 李静 李喆 李志芹 韩海燕 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第6期1368-1373,共6页
本研究检测白血病患者骨髓中CYR61、CTGF、VEGF-C、VEGFR-2 mRNA的表达水平,探讨白血病发生、发展、浸润、转移中CYR61、CTGF、VEGF-C、VEGFR-2蛋白的相互作用及其临床意义,寻找新的肿瘤标记物,为白血病的诊治提供新的思路。白血病74例,... 本研究检测白血病患者骨髓中CYR61、CTGF、VEGF-C、VEGFR-2 mRNA的表达水平,探讨白血病发生、发展、浸润、转移中CYR61、CTGF、VEGF-C、VEGFR-2蛋白的相互作用及其临床意义,寻找新的肿瘤标记物,为白血病的诊治提供新的思路。白血病74例,男38例,女36例,年龄6-77岁,中位年龄45岁。对照组12例,男7例,女5例。年龄16-78岁,中位年龄46岁。采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定CYR61、CTGF、VEGF-C、VEGFR-2 mRNA的水平。结果表明,各组初发急性和慢性白血病患者骨髓中CYR61、CTGF、VEGF-C、VEGFR-2 mRNA的表达与对照组相比均显著升高(p<0.05)。急性白血病缓解后CYR61和CTGF mRNA的表达高于对照组(p=0.039,0.025)。CTGF mRNA的表达在B-ALL组表达最高,高于AML、CML、CLL、T-ALL组(p=0.002,0.034,0.002,0.010)。AML组CYR61与CTGF、CYR61与VEGF-C、CTGF与VEGFR-2 mRNA的表达均呈正相关(r=0.452,0.466,0.464;p=0.045,0.038,0.039),CML组CYR61与VEGF-C mRNA的表达呈正相关(r=0.882,p=0.000)。急性白血病伴有髓外浸润者VEGF-C和VEGFR-2 mRNA的表达高于不伴有髓外浸润者(p=0.028,0.047)。AML组VEGF-C mRNA的表达与原始细胞数呈正相关(r=0.418,p=0.034)。结论:CYR61、CTGF及VEGF-C、VEGFR-2在白血病发病中相互作用,促进白血病发展、转移及浸润;且这些因子在不同类型白血病及髓外浸润中的作用存在差异。它们可能成为检测白血病的肿瘤标记物;阻断上述因子有可能阻断肿瘤的生长和转移。 展开更多
关键词 白血病 富含蛋白61 结缔组织生长因子 血管内皮生长因子-C 血管内皮生长因子受体-2
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芸薹属植物自交不亲和性研究进展 被引量:3
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作者 王春雷 赵宪坤 +2 位作者 高季平 叶蕴灵 赵贝贝 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第6期1442-1447,共6页
芸薹属包含多种重要农业和园艺作物,并且部分芸薹属作物表现为自交不亲和性。目前已经鉴定出芸薹属自交不亲和性雌蕊决定因子和花粉决定因子,明确了不亲和性花粉萌发抑制主要通过MLPK-ARC1-Exo70A1级联反应实现,并且花粉萌发抑制还涉及... 芸薹属包含多种重要农业和园艺作物,并且部分芸薹属作物表现为自交不亲和性。目前已经鉴定出芸薹属自交不亲和性雌蕊决定因子和花粉决定因子,明确了不亲和性花粉萌发抑制主要通过MLPK-ARC1-Exo70A1级联反应实现,并且花粉萌发抑制还涉及细胞水平上的相关变化,但是该级联反应在同属十字花科的拟南芥属植物中却没有被验证。本文详细综述了这些因子发现过程,以及相关结构特点;并根据以上研究结果指出今后研究的重点。 展开更多
关键词 芸薹属 自交不亲和性 S位点糖蛋白 S受体激酶 S位点富含蛋白 拟南芥
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甘蓝SCR、THL与SRK交替相互作用的酵母双杂交检测 被引量:2
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作者 杨永军 张贺翠 +3 位作者 杨昆 薛丽琰 常登龙 朱利泉 《中国蔬菜》 北大核心 2012年第12X期14-26,共13页
eSRK(S位点受体激酶胞外域)、SCR/SP11(S位点富含半胱氨酸蛋白-S位点蛋白11)和THL1(类硫氧还蛋白)是甘蓝自交不亲和性信号传导过程重要的3个元件。利用PCR技术获得两种甘蓝SCR2(class-Ⅱ)、eSRK2(class-Ⅱ)、THL1、SRKJ(class-Ⅰ,SRK6... eSRK(S位点受体激酶胞外域)、SCR/SP11(S位点富含半胱氨酸蛋白-S位点蛋白11)和THL1(类硫氧还蛋白)是甘蓝自交不亲和性信号传导过程重要的3个元件。利用PCR技术获得两种甘蓝SCR2(class-Ⅱ)、eSRK2(class-Ⅱ)、THL1、SRKJ(class-Ⅰ,SRK6激酶域)和eSRK28(class-Ⅰ)的编码序列,并分别构建以pGBKT7为载体的SCR2、THL1的重组诱饵质粒和以pGADT7为载体的eSRK2、eSRK28、SRKJ的重组猎物质粒。利用酵母双杂交系统验证eSRK2-SCR2、eSRK28-SCR2、SRKJ-THL1的相互作用。重组质粒在宿主细胞中未产生毒性及自激活作用,表明重组表达载体构建成功;组合Y2HGold〔pGBKT7-SCR2〕×Y187〔pGADT7-eSRK2〕在三缺平板(SD/-Trp-Leu-His/x-α-gal/AbA,TDO/x/A)上生长出蓝色克隆,激活了报告基因AUR1-C、MEL1、HIS3;组合Y2HGold〔pGBKT7-SCR2〕×Y187〔pGADT7-eSRK28〕能够在二缺平板(SD/-Trp-Leu)上生长,但在三缺平板上不生长,表明不同单倍型SRK-SCR可能不发生相互作用;组合Y187〔pGADT7-SRKJ〕×Y2HGold〔pGBKT7-THL1〕能够在四缺平板上生长,激活了4种报告基因(AUR1-C、MEL1、HIS3、ADE2)。相同的单倍型SRK与SCR之间能够相互作用,不同的单倍型之间不会发生相互作用;酵母中报告基因表达的数目和类型的差异反映了class-Ⅱ型内部的SCR-SRK和class-Ⅰ的SCR-SRK互作强度,Ⅰ型高于Ⅱ型;THL与SRK之间存在较高的互作强度。这为Ⅰ型和Ⅱ型不同的自交不亲和性表型所依赖的3个起始信号传导元件之间的识别程度差异提供了直接证据和新内容。 展开更多
关键词 甘蓝 S位点受体激酶(SRK) S位点富含蛋白(SCR) 类硫氧还蛋白(THL) 蛋白质互作 酵母双杂交
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外周血单核细胞NLRP3炎性小体对脓毒症急性肺损伤患者病情严重程度的诊断价值 被引量:29
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作者 欧海燕 段娅娟 陈兰 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第3期380-384,共5页
目的探讨外周血单核细胞中NLRP3炎性小体对脓毒症急性肺损伤患者病情严重程度的诊断价值。方法采用qRT⁃PCR、Western⁃Blot检测脓毒症急性肺损伤患者外周血单核细胞中NLRP3、Caspase⁃1的mRNA及蛋白表达;酶联免疫吸附法检测相关细胞因子(I... 目的探讨外周血单核细胞中NLRP3炎性小体对脓毒症急性肺损伤患者病情严重程度的诊断价值。方法采用qRT⁃PCR、Western⁃Blot检测脓毒症急性肺损伤患者外周血单核细胞中NLRP3、Caspase⁃1的mRNA及蛋白表达;酶联免疫吸附法检测相关细胞因子(IL⁃1β、IL⁃18)水平并比较不同严重程度及预后组间的差异,评价NLRP3水平对患者病情严重程度的预测价值。结果不同严重程度APACHEⅡ和LIPS评分、外周血单核细胞NLRP3、Caspase⁃1表达水平及外周血IL⁃1β及IL⁃18水平比较,高危组上述指标水平最高,中危组次之,低危组最低,(P<0.05)。死亡组患者NLRP3和Caspase⁃1 mRNA表达水平和外周血IL⁃1β和IL⁃18水平明显高于存活组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,NLRP3 mRNA水平曲线下面积为0.877(95%CI:0.808~0.946),其最佳工作点为2.68,此时预测脓毒症急性肺损伤患者病情严重程度的敏感性和特异性分别为82.05%和78.87%,均显著优于LIPS评分和APACHEⅡ评分指标。结论NLRP3炎性小体参与了脓毒症急性肺损伤患者的炎症级联放大,对于脓毒症急性肺损伤患者病情严重程度的预测,具有一定的应用价值。 展开更多
关键词 核苷结合寡聚化结构域受体蛋白3 脓毒症 急性肺损伤 蛋白酶1
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基于NLRP3/caspase-1研究电针刺激对脑卒中大鼠小胶质细胞形态转换及神经元凋亡的影响 被引量:16
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作者 邓寒冰 李春琴 +1 位作者 张粲 金祖敏 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第2期51-57,共7页
目的探究不同电针刺激方法对脑卒中大鼠小胶质细胞形态、神经元凋亡的影响。方法Longa线栓法改良建立脑卒中模型,将建模成功的48只大鼠随机分为4组:模型组、阳陵泉+配穴组、关元组、照海+申脉组,每组12只;另12只设置假手术组。阳陵泉+... 目的探究不同电针刺激方法对脑卒中大鼠小胶质细胞形态、神经元凋亡的影响。方法Longa线栓法改良建立脑卒中模型,将建模成功的48只大鼠随机分为4组:模型组、阳陵泉+配穴组、关元组、照海+申脉组,每组12只;另12只设置假手术组。阳陵泉+配穴组、关元组、照海+申脉组分别于相应穴位处针灸取穴电针刺激,7 d为一个疗程,电针刺激两个疗程。观察不同电针刺激对脑卒中大鼠行为学,小胶质细胞、神经元形态,神经元凋亡及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1(caspase-1)、pro-caspase-1蛋白的影响。结果形态学变化:模型组小胶质细胞突起明显,激活数量增多;神经元形状不规则、染色较浅。阳陵泉+配穴组、关元组、照海+申脉组小胶质细胞形态恢复,激活状态减少;神经元形态有所改善。与假手术组相比,模型组Longa评分、Iba1/ED-1、Tunel阳性细胞数、脑组织中NLRP3、caspase-1、pro-caspase-1蛋白水平升高(P<0.05);尼氏小体数量减少(P<0.05)。与模型组相比,阳陵泉+配穴组、关元组、照海+申脉组Longa评分、Iba1/ED-1、Tunel阳性细胞数、脑组织中NLRP3、caspase-1、pro-caspase-1蛋白水平降低(P<0.05);尼氏小体数量升高(P<0.05)。结论电针分别刺激阳陵泉+配穴、关元、照海+申脉穴位处,均可使脑卒中大鼠小胶质细胞突起减少、凋亡神经元数量降低,且可能是通过抑制NLRP3/caspase-1通路实现的。 展开更多
关键词 电针 脑卒中大鼠 小胶质细胞 神经元 核苷结合寡聚化结构域受体蛋白3/天冬
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