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枸杞液泡膜H^+-转运焦磷酸酶基因LbVP1克隆及表达分析
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作者 杨亚珺 石晶 +3 位作者 郑国宝 王丽娟 梁文裕 巩檑 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期444-450,共7页
液泡膜H^+-转运焦磷酸酶在调节植物生长发育和逆境胁迫应答中发挥重要作用。本研究在已构建的枸杞本地数据库中先进行VP基因电子克隆,然后结合RT-PCR方法克隆到一个枸杞液泡膜H^+-转运焦磷酸酶编码基因LbVP1,并对其序列结构、时空表达... 液泡膜H^+-转运焦磷酸酶在调节植物生长发育和逆境胁迫应答中发挥重要作用。本研究在已构建的枸杞本地数据库中先进行VP基因电子克隆,然后结合RT-PCR方法克隆到一个枸杞液泡膜H^+-转运焦磷酸酶编码基因LbVP1,并对其序列结构、时空表达模式进行了初步分析。LbVP1开放阅读框全长2301 bp,编码766氨基酸残基。多序列比对显示该基因与拟南芥AVP基因相似性达87.9%,序列结构生物信息学预测和亚细胞定位实验表明,该基因具有液泡膜H^+-转运焦磷酸酶的保守结构域和跨膜区,可能在液泡膜发挥作用。荧光定量PCR结果显示,LbVP1在花、叶和不同发育阶段果实中存在时空表达差异,干旱胁迫处理下叶片和果实中该基因表达量与对照存在(极)显著差异(P<0.01,P <0.05)。研究结果将为阐明该基因在枸杞抗旱分子调控机制中的作用提供基础理论依据。 展开更多
关键词 枸杞 液泡H+-转运焦磷酸 LbVP1 表达模式
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费尔干猪毛菜液泡膜氢离子焦磷酸酶基因SfVP的克隆、序列分析及表达 被引量:3
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作者 贺怡 钱雯婕 +4 位作者 袁磊 李榕 谭兰 谢全亮 李鸿彬 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2014年第3期319-324,共6页
植物液泡膜氢离子焦磷酸酶(Vacuolar H+-PPase,VP)能够酸化液泡并为液泡的次级转运系统提供能量,在植物耐盐性方面发挥着着重要作用。本研究采用RT-PCR结合RACE方法,从费尔干猪毛菜中(Salsola ferganica)克隆得到液泡膜质子焦磷酸酶基因... 植物液泡膜氢离子焦磷酸酶(Vacuolar H+-PPase,VP)能够酸化液泡并为液泡的次级转运系统提供能量,在植物耐盐性方面发挥着着重要作用。本研究采用RT-PCR结合RACE方法,从费尔干猪毛菜中(Salsola ferganica)克隆得到液泡膜质子焦磷酸酶基因SfVP,该基因的cDNA全长2738 bp,包含1个2301 bp的完整开放读码框(ORF),编码766个氨基酸的多肽。氨基酸序列分析表明其属于H+-转运无机焦磷酸酶超家族成员,具有典型的H+-PPase结构域,其疏水性较强,含有12个跨膜螺旋结构。SfVP序列比对显示具有H+-PPase的3个保守序列CS1、CS2和CS3,其中CS1中含有保守的底物催化位点,与烟草的NtVP氨基酸序列相似性为95.3%。半定量RT-PCR结果表明,SfVP的转录表达丰度随着600 mmol/L NaCl处理时间的增加而升高,处理12 h后显著增加并一直维持在较高水平。 展开更多
关键词 费尔干猪毛菜 液泡氢离子焦磷酸 RACE 盐响应表达
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灰绿藜液泡膜焦磷酸酶基因的克隆及表达分析 被引量:1
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作者 杨艺 徐莉 +1 位作者 张霞 张富春 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期438-443,共6页
采用同源克隆的方法,获得盐生植物灰绿藜的液泡膜焦磷酸酶基因(VP1)全长cDNA,命名为CgVP1。生物信息学预测分析表明,CgVP1基因包含一个2 292bp的开放阅读框,编码763个氨基酸。CgVP1不仅具有与植物液泡膜焦磷酸酶共有的氨基酸序列DVGADLV... 采用同源克隆的方法,获得盐生植物灰绿藜的液泡膜焦磷酸酶基因(VP1)全长cDNA,命名为CgVP1。生物信息学预测分析表明,CgVP1基因包含一个2 292bp的开放阅读框,编码763个氨基酸。CgVP1不仅具有与植物液泡膜焦磷酸酶共有的氨基酸序列DVGADLVGKVE,而且CgVP1与其它植物的VP1相似性达86%。跨膜结构域预测显示,CgVP1氨基酸序列含有12个跨膜螺旋区,可能定位于细胞膜系统上。RT-PCR检测表明,200mmol/L NaCl条件下萌发生长的灰绿藜,再进行800mmol/L NaCl胁迫处理24h后,CgVP1基因表达显著增强。不同浓度KCl、CaCl2、MgCl2分别处理24h,KCl和MgCl2浓度增高,CgVP1基因表达下降,CaCl2则不影响CgVP1基因表达。研究结果表明,灰绿藜CgVP1基因表达对不同种类盐胁迫响应不同,NaCl胁迫可以上调CgVP1基因表达。该研究结果有助于阐明盐胁迫对盐生植物灰绿藜CgVP1基因表达的调控作用。 展开更多
关键词 灰绿藜 液泡焦磷酸(VP1) 基因表达 盐处理
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冷胁迫对水稻幼苗根系液泡膜质子泵的伤害及钙的调节作用 被引量:9
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作者 赵利辉 刘友良 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期5-8,共4页
选用耐冷性不同的两个水稻品种 ,研究了在低温下幼苗根系活力、液泡膜质子泵活性的变化及外源钙的调节作用。结果表明 ,8℃低温处理的水稻幼苗根系活力降低 ,随着胁迫时间的延长 ,伤害进一步发展 ,抗冷性弱的汕优 6 3比抗冷性强的武育... 选用耐冷性不同的两个水稻品种 ,研究了在低温下幼苗根系活力、液泡膜质子泵活性的变化及外源钙的调节作用。结果表明 ,8℃低温处理的水稻幼苗根系活力降低 ,随着胁迫时间的延长 ,伤害进一步发展 ,抗冷性弱的汕优 6 3比抗冷性强的武育粳 3号伤害严重。 8℃处理 7d内 ,两品种根系V ATPase (液泡膜H+ ATP酶 )和汕优 6 3V PPase (液泡膜H+ 焦磷酸酶 )活性持续下降 ,而武育粳 3号V PPase在前 3d内活性上升 ,5d后才呈下降态势。根系在低温下维持较高的V PPase活性 ,可能是水稻耐冷的原因之一。 8℃低温处理外加 2 0~ 40mmol/LCa (NO3) 2 展开更多
关键词 水稻 冷害 液泡 H^(+)-ATP H^(+)-焦磷酸 Ca^(2+)
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空泡膜类型H^+-ATPase的研究进展 被引量:18
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作者 王延枝 许献忠 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1993年第1期19-23,共5页
真核细胞内空泡细胞器,如高尔基体、内质网、溶酶体等,膜上存在的质子泵ATPase 与线粒体类型的质子泵 ATPase 类似.近几年对该类型 H^+-ATPase 的结构、作用机制进行了深入的研究,证明这是一类新型质子泵,在进化的过程中与线粒体类型的 ... 真核细胞内空泡细胞器,如高尔基体、内质网、溶酶体等,膜上存在的质子泵ATPase 与线粒体类型的质子泵 ATPase 类似.近几年对该类型 H^+-ATPase 的结构、作用机制进行了深入的研究,证明这是一类新型质子泵,在进化的过程中与线粒体类型的 H^+-ATPase 有密切的亲缘关系. 展开更多
关键词 液泡 H^+-ATP V-ATP
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过量表达马蔺VP基因增强烟草抗旱耐盐性研究 被引量:2
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作者 李杉杉 郭静雅 +3 位作者 郭强 毛培春 田小霞 孟林 《草学》 2017年第2期21-27,32,共8页
干旱与土壤盐渍化已成为限制植物生长的重要影响因素。液泡膜H^+焦磷酸酶(V-H^+-PPase)具有质子泵功能,在植物抗旱耐盐中起重要作用。本研究将课题组得到的转马蔺IlVP(V-H^+-PPase)基因烟草植株(T3和T18)进行不同浓度NaCl处理和干旱胁迫... 干旱与土壤盐渍化已成为限制植物生长的重要影响因素。液泡膜H^+焦磷酸酶(V-H^+-PPase)具有质子泵功能,在植物抗旱耐盐中起重要作用。本研究将课题组得到的转马蔺IlVP(V-H^+-PPase)基因烟草植株(T3和T18)进行不同浓度NaCl处理和干旱胁迫,并以野生型烟草W38(WT)为对照,通过对其生长和生理指标的测定分析,结果显示,在NaCl或干旱处理下,转基因烟草T3和T18植株干重、叶面积、叶片相对含水量和水分利用效率均高于野生型WT植株,其中200mmol·L^(-1) NaCl处理下T18干重、叶面积、叶片相对含水量和水分利用效率分别是W38的2.46、1.69、1.08和3.84倍,干旱处理下T18的各项指标分别是野生型的1.52、1.17、1.07和1.41倍。转基因和野生型植株的叶片质膜透性均随NaCl浓度增加或干旱处理而有所升高,但转基因植株的增量明显低于野生型。转基因及野生型植株根、茎、叶中的Na^+含量均随NaCl浓度升高或干旱处理而增加,而K^+含量呈逐渐降低趋势,但转基因T3和T18烟草根、茎、叶中的Na^+和K^+含量均高于野生型WT。这说明NaCl和干旱胁迫下过量表达IlVP可增强烟草的液泡离子区域的能力,降低Na^+对细胞质的毒害,进而保护膜的完整性,提高烟草的抗旱性和耐盐性。 展开更多
关键词 马蔺 液泡H^+焦磷酸 抗旱性 耐盐性
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GmVP1基因克隆与转GmVP1/GmNHX1双价基因的大豆发状根耐盐性分析 被引量:3
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作者 赵甜甜 范会芬 +3 位作者 孙天杰 肖付明 张洁 王冬梅 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期19-25,33,共8页
将Na^+外排和区隔化作用的Na^+/H^+逆向转运蛋白(NHX)的基因和能够为其提供跨液泡膜H^+梯度驱动力的液泡膜H^+-焦磷酸酶(VP)的基因共转化能够提高植物耐盐性。本研究从抗盐大豆品种‘冀豆7号’中克隆得到液泡膜H^+-焦磷酸酶基因GmVP1,... 将Na^+外排和区隔化作用的Na^+/H^+逆向转运蛋白(NHX)的基因和能够为其提供跨液泡膜H^+梯度驱动力的液泡膜H^+-焦磷酸酶(VP)的基因共转化能够提高植物耐盐性。本研究从抗盐大豆品种‘冀豆7号’中克隆得到液泡膜H^+-焦磷酸酶基因GmVP1,构建了GmVP1单价以及GmVP1与GmNHX1双价转化载体,利用发根农杆菌介导的大豆子叶转化体系验证其功能。结果表明,GmVP1在转录水平响应盐胁迫,GmVP1基因在一定条件下可以提高转基因大豆发状根对NaCl的耐受性,GmVP1/GmNHX1双价基因过表达比GmVP1单基因过表达更能提高大豆发状根相对生长量及其耐盐性。 展开更多
关键词 大豆 耐盐性 液泡H^+-焦磷酸基因 GmNHX1 双价基因载体构建
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