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根癌农杆菌介导的GFP在洋葱表皮细胞定位研究 被引量:18
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作者 刘肖飞 梁卫红 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期123-125,150,共4页
采用根癌农杆菌介导的方法,以受控于CaMV35S启动子的携带有GFP报告基因的双元植物表达载体pCAMBIA1300-35S-GFP转化洋葱表皮细胞.荧光显微镜下观察结果显示,GFP基因在经浸染和共培养后的洋葱表皮细胞中得到了表达,绿色荧光分布在细胞核... 采用根癌农杆菌介导的方法,以受控于CaMV35S启动子的携带有GFP报告基因的双元植物表达载体pCAMBIA1300-35S-GFP转化洋葱表皮细胞.荧光显微镜下观察结果显示,GFP基因在经浸染和共培养后的洋葱表皮细胞中得到了表达,绿色荧光分布在细胞核和细胞质中,为进一步研究新基因的亚细胞定位和瞬时表达奠定了基础. 展开更多
关键词 根癌农杆菌 洋葱表皮细胞 双元表达载体GFP基因
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钙离子、铝离子及过氧化氢处理对洋葱内表皮细胞骨架影响的初步研究 被引量:2
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作者 冯振月 刘德福 崔玉东 《黑龙江八一农垦大学学报》 2017年第6期24-27,共4页
为了解植物细胞骨架在离子应激及氧化损伤时细胞骨架变化情况,以洋葱为实验材料,使用0.05、0.1、0.15 mol·L-1Ca Cl2处理洋葱内表皮细胞2 h;0.01、0.025、0.05 mol·L-1 Al Cl3处理10 min;0.01、0.025、0.05 mol·L-1 H2O... 为了解植物细胞骨架在离子应激及氧化损伤时细胞骨架变化情况,以洋葱为实验材料,使用0.05、0.1、0.15 mol·L-1Ca Cl2处理洋葱内表皮细胞2 h;0.01、0.025、0.05 mol·L-1 Al Cl3处理10 min;0.01、0.025、0.05 mol·L-1 H2O2处理2 h,观察这三种因素处理后洋葱细胞骨架变化情况。结果表明:随着钙离子浓度的升高,洋葱内表皮细胞的细胞质骨架解聚,细胞核消失;铝离子浓度越高,细胞质骨架越少,受损越严重,并出现边极化现象;随过氧化氢浓度升高,细胞骨架解聚,低浓度的过氧化氢即可造成细胞骨架破坏。 展开更多
关键词 钙离子 铝离子 过氧化氢 洋葱表皮细胞 细胞骨架
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EpCSP基因生物信息学分析及亚细胞定位
3
作者 钟迎兰 张富龙 +3 位作者 李欣雨 杜锦 黄海东 吴疆 《天津农学院学报》 2025年第4期18-25,共8页
EpCSP基因是从微小杆菌(Exiguobacterium profundum)中克隆得到的一个冷激蛋白基因。生物信息学分析表明,该基因编码的蛋白可能定位于细胞核或细胞质基质。为进一步研究该基因功能,用PCR技术扩增EpCSP基因的CDS区,并将其克隆至表达载体p... EpCSP基因是从微小杆菌(Exiguobacterium profundum)中克隆得到的一个冷激蛋白基因。生物信息学分析表明,该基因编码的蛋白可能定位于细胞核或细胞质基质。为进一步研究该基因功能,用PCR技术扩增EpCSP基因的CDS区,并将其克隆至表达载体pCAMBIA1300-EGFP-MCS上,构建用于瞬时表达EpCSP蛋白的重组质粒。经PCR鉴定后,重组质粒通过热激转化法转入农杆菌LBA4404,并用农杆菌介导法转化洋葱表皮细胞,用荧光显微镜观察确定其亚细胞定位。荧光显微镜观察结果显示,插入片段与预期序列完全一致,与载体构成了一个完整的基因表达系统,亚细胞定位结果表明EpCSP蛋白可能分布在细胞质基质。 展开更多
关键词 EpCSP基因 生物信息学 洋葱表皮细胞 细胞定位
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甘露糖外切酶的细胞生物学定位研究 被引量:1
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作者 莫蓓莘 《深圳大学学报(理工版)》 EI CAS 北大核心 2006年第4期358-361,共4页
用不同试剂从西红柿种子提取甘露聚糖外切酶,结果表明甘露聚糖外切酶只能被含高盐的缓冲液(0.1mol/LHepes+500mmol/LNaCl,pH7.0)提取出来,单独的低盐缓冲液(0.1mol/LHepes,pH7.0)或用非盐洗涤剂代替高盐则不能提取该酶.通过基因枪将甘... 用不同试剂从西红柿种子提取甘露聚糖外切酶,结果表明甘露聚糖外切酶只能被含高盐的缓冲液(0.1mol/LHepes+500mmol/LNaCl,pH7.0)提取出来,单独的低盐缓冲液(0.1mol/LHepes,pH7.0)或用非盐洗涤剂代替高盐则不能提取该酶.通过基因枪将甘露聚糖外切酶和GFP融合蛋白转化洋葱表皮细胞,发现转化了甘露聚糖外切酶和GFP融合蛋白的洋葱表皮细胞壁上有荧光,表明甘露聚糖外切酶可能定位在细胞壁上. 展开更多
关键词 基因枪 GFP 洋葱表皮细胞 甘露聚糖外切酶 细胞
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稀土Eu掺杂纳米TiO_2的荧光特性研究及其应用 被引量:2
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作者 张诺 丁卉 付德刚 《功能材料》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第A03期530-532,共3页
以Eu2O3试剂为荧光前驱体,与钛酸正丁酯在酸-水溶液中发生溶胶-凝胶反应,制备了一种可作为荧光标记分子的Eu3+/TiO2荧光性纳米微粒,并对样品的形貌、组成及结构进行了表征。结果表明,纳米粒子的平均粒径5nm。用468nm激发光源激发样品,... 以Eu2O3试剂为荧光前驱体,与钛酸正丁酯在酸-水溶液中发生溶胶-凝胶反应,制备了一种可作为荧光标记分子的Eu3+/TiO2荧光性纳米微粒,并对样品的形貌、组成及结构进行了表征。结果表明,纳米粒子的平均粒径5nm。用468nm激发光源激发样品,荧光强度随着Eu3+的掺杂含量0、0.5%、1%、2%、3%、4%先升高后降低,当掺杂含量为2%时,荧光强度最强。采用倒置荧光显微镜观察了Eu3+/TiO2纳米荧光探针在洋葱表皮细胞膜上聚集受激发射荧光行为。 展开更多
关键词 EU掺杂 TIO2 溶胶-凝胶法 荧光 洋葱表皮细胞
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马铃薯Y病毒辅助成分蛋白酶与加工番茄OPA3-like蛋白结合及其定位研究 被引量:2
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作者 张丽丽 崔百明 +2 位作者 郑银英 黄先忠 向本春 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2014年第4期403-408,共6页
为了研究加工番茄OPA3-like蛋白与马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)的辅助成分蛋白酶(helper component proteinase,HC-Pro)的相互作用,进行了2种蛋白的结合及其定位研究。通过PCR的方法从加工番茄中克隆OPA3-like基因,同时利用Blast方... 为了研究加工番茄OPA3-like蛋白与马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)的辅助成分蛋白酶(helper component proteinase,HC-Pro)的相互作用,进行了2种蛋白的结合及其定位研究。通过PCR的方法从加工番茄中克隆OPA3-like基因,同时利用Blast方法对其分析,进行了OPA3-like蛋白基因氨基酸序列同源性分析。通过构建双分子荧光互补载体pSPYCE-35S-OPA3-like和pSPYNE-35S-HC-Pro,利用农杆菌介导法共侵染洋葱表皮细胞60 h后,在共聚焦显微镜下观察洋葱表皮细胞中的黄色荧光。结果显示:加工番茄OPA3-like基因ORF长510 bp,编码169个氨基酸,编码蛋白属OPA3蛋白家族。激光共聚焦显微镜下可观察到沿细胞膜呈小泡状分布黄色荧光,说明PVY的HC-Pro蛋白与加工番茄OPA3-like蛋白结合并且共定位在细胞膜附近。这为进一步研究PVY的HC-Pro蛋白与加工番茄OPA3-like蛋白的相互作用机制奠定了一定的基础。 展开更多
关键词 HC-Pro蛋白 OPA3-like蛋白 相互作用 双分子荧光互补 洋葱表皮细胞
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拟南芥中ELO家族同源基因的克隆与表达 被引量:1
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作者 连金番 王倩 +1 位作者 张东武 赵惠贤 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期2389-2393,共5页
采用RT-PCR方法,克隆了拟南芥中可能参与超长链脂肪酸合成的ELO家族同源基因At1g75000、At4g36830和At3g06470的全长cDNA,构建其与eGFP基因融合的植物表达载体At1g75000∷eGFP∷NOS/pPZP211、At4g36830∷eGFP∷NOS/pPZP211和At1g06470∷... 采用RT-PCR方法,克隆了拟南芥中可能参与超长链脂肪酸合成的ELO家族同源基因At1g75000、At4g36830和At3g06470的全长cDNA,构建其与eGFP基因融合的植物表达载体At1g75000∷eGFP∷NOS/pPZP211、At4g36830∷eGFP∷NOS/pPZP211和At1g06470∷eGFP∷NOS/pPZP211,并利用基因枪介导法将构建的植物表达载体转入洋葱表皮细胞,并在荧光显微镜下检测到了绿色荧光信号。为进一步研究拟南芥中AtELO家族同源基因的功能奠定基础。 展开更多
关键词 拟南芥 ELO家族同源基因 超长链脂肪酸 洋葱表皮细胞
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2011年上海市普通高中学业水平考试生命科学试卷
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《生物学教学》 北大核心 2011年第10期43-48,共6页
关键词 高中学业水平考试 质壁分离 上海市 洋葱表皮细胞 生物学教学 生命科学
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2008年普通高等学校招生全国统一考试广东生物学试卷
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作者 王玉龙 《生物学教学》 北大核心 2008年第10期75-80,共6页
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关键词 生物学教学 中学生物学 淀粉酶基因 普通高等学校招生全国统一考试 普通野生稻 细胞质基质 选做题 洋葱表皮细胞 色素带
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