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白藜芦醇通过沉默信息调节因子/叉头转录因子通路对高糖诱导成骨细胞增殖、分化的影响 被引量：5
1
作者 唐晓悦 朱浩 曹灿 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2020年第1期79-84,共6页
目的:探究白藜芦醇(resveratrol,Res)对高糖诱导成骨细胞增殖、分化的影响及其对沉默信息调节因子(silence information regulator 1,sirt1)/叉头转录因子(forkhead transcription factor 1,FOXO1)通路的影响。方法:分离培养大鼠下颌骨... 目的:探究白藜芦醇(resveratrol,Res)对高糖诱导成骨细胞增殖、分化的影响及其对沉默信息调节因子(silence information regulator 1,sirt1)/叉头转录因子(forkhead transcription factor 1,FOXO1)通路的影响。方法:分离培养大鼠下颌骨细胞,分为control组、高糖组、高糖+低剂量Res组、高糖+中剂量Res组、高糖+高剂量Res组,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞增殖情况,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色测定ALP活性,Alizarin red S染色检测钙化结节形成,Western blot法检测Ⅰ型胶原(Collagen typeⅠ,CoI)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨钙素(osteocalcin,OCN)蛋白及sirt1/FOXO1通路蛋白表达情况。结果:与control组比较,高糖组成骨细胞增殖抑制率增加,高糖组ALP活性、钙结节沉积、CoI、RUNX2、OPN、OCN蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与高糖组比较,白藜芦醇添加组成骨细胞的A值、ALP活性、钙结节沉积、CoI、RUNX2、OPN、OCN蛋白表达水平显著增加(P<0.05),且随着浓度的增加而增加;与control组比较,高糖组成骨细胞sirt1、p27蛋白表达水平显著降低,FOXO1、Bim蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与高糖组比较,加入白藜芦醇后sirt1、p27蛋白表达水平明显升高,FOXO1、Bim蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:白藜芦醇可能通过调节sirt1/FOXO1通路,改善高糖对成骨细胞增殖、分化的抑制作用。 展开更多
关键词 白藜芦醇 沉默信息调节因子/叉头转录因子通路 成骨细胞 增殖 分化
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Slit引导配体2通过调控AMPK/SIRT1-FoxO1信号通路影响糖尿病小鼠视网膜血管损伤的机制研究
2
作者 李天航 顾朝辉 +5 位作者 张月玲 李洁 杜鹃 付燕 陈娜 陈佳菲 《长春中医药大学学报》 2024年第11期1214-1219,共6页
目的 探讨Slit引导配体2(SLIT2)是否通过调控腺苷单磷酸活化蛋白激酶(AMPK)/转录沉默信息调节因子1(SIRT1)-叉头盒蛋白O1(FoxO1)信号通路通过对糖尿病小鼠视网膜血管损伤的影响。方法 30只db/db小鼠随机分为DR组(db/db小鼠)、DR+阴性对... 目的 探讨Slit引导配体2(SLIT2)是否通过调控腺苷单磷酸活化蛋白激酶(AMPK)/转录沉默信息调节因子1(SIRT1)-叉头盒蛋白O1(FoxO1)信号通路通过对糖尿病小鼠视网膜血管损伤的影响。方法 30只db/db小鼠随机分为DR组(db/db小鼠)、DR+阴性对照载体组(DR+sh-NC组)和DR+sh-SLIT2组,每组10只。另选10只db/m小鼠为对照组。DR+sh-NC组和DR+sh-SLIT2组麻醉后分别在双眼玻璃体腔内注射sh-SLIT2的腺相关病毒(AAV)载体。眼底荧光血管造影(FFA)和苏木精伊红染色观察视网膜血管病变;酶联免疫吸附测定检测血清白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子α(TNF-α)和血管内皮生长因子(VEGF)的水平,荧光定量PCR检测SLIT2 mRNA表达;Western blot检测视网膜组织SLIT2、AMPK、SIRT1、FoxO1蛋白水平。结果 与对照组相比,DR组、DR+sh-NC组、DR+sh-SLIT2组血糖、每日饮水量、每日排尿量、食物摄入量及体质量均明显升高(P<0.05);与对照组相比,DR组视网膜存在血管病变及病理损伤,SLIT2 mRNA及蛋白表达、IL-6、TNF-α和VEGF水平,FoxO1蛋白水平均明显升高(P<0.05),AMPK、SIRT1蛋白水平均明显降低(P<0.05);与DR+sh-NC组相比,DR+sh-SLIT2组的视网膜血管病变及病理损伤明显减轻,SLIT2 mRNA及蛋白表达、IL-6、TNF-α和VEGF水平,FoxO1蛋白水平均明显降低(P<0.05),AMPK、SIRT1蛋白水平均明显升高(P<0.05)。结论 沉默SLIT2表达显著改善糖尿病小鼠视网膜血管损伤及炎症水平,这可能是通过调控AMPK/SIRT1-FoxO1信号通路发挥作用的。 展开更多
关键词 Slit引导配体2 腺苷单磷酸活化蛋白激酶 转录沉默信息调节因子1 叉头盒蛋白O1 糖尿病视网膜病变
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miR-22-3p靶向抑制SIRT1信号通路加重慢性阻塞性肺疾病
3
作者 白莉敏 吕行 +2 位作者 任引刚 祝松涛 杨璐 《山西医科大学学报》 CAS 2023年第7期944-951,共8页
目的探讨miR-22-3p是否通过沉默信息调节因子1(SIRT1)信号通路影响慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发生发展。方法将大鼠随机分为5组:对照组、模型组、antagomir-NC组、antagomir-miR-22-3p组和antagomir-miR-22-3p+EX527组,每组12只。对照组... 目的探讨miR-22-3p是否通过沉默信息调节因子1(SIRT1)信号通路影响慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发生发展。方法将大鼠随机分为5组:对照组、模型组、antagomir-NC组、antagomir-miR-22-3p组和antagomir-miR-22-3p+EX527组,每组12只。对照组大鼠正常饲养,其他组大鼠建立香烟烟雾(CS)和脂多糖(LPS)诱导的COPD大鼠模型。CS暴露当天开始,模型组、antagomir-NC组、antagomir-miR-22-3p组和antagomir-miR-22-3p+EX527组大鼠分别尾静脉注射生理盐水、antagomir-NC、antagomir-miR-22-3p和SIRT1抑制剂EX527,每2周注射1次,CS暴露90 d内共注射6次。CS暴露90 d后,使用肺功能分析系统测定肺功能指标:最大自主分钟通气量(MVV)、0.3 s用力呼气量(FEV0.3)、用力肺活量(FVC)和最大呼气峰流速(PEF)。按照ELISA试剂盒测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)水平。按照试剂盒说明对肺组织进行苏木素伊红(HE)染色。按照试剂盒说明检测肺组织氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)]。通过RT-PCR检测肺组织中miR-22-3p和SIRT1的mRNA水平。通过Western blot检测肺组织中SIRT1、核因子-κB(NF-κB)p65、p-NF-κB p65和叉头盒O3a(FoxO3a)蛋白表达。结果与模型组和antagomir-NC组比较,antagomir-miR-22-3p组大鼠中MVV、FEV0.3/FVC和PEF升高,BALF中IL-1β、TNF-α和MIP-2水平降低,肺组织病变减轻,肺组织中SOD和CAT水平升高,MDA水平降低,miR-22-3p水平降低,SIRT1 mRNA水平升高,SIRT1和FoxO3a蛋白水平升高,p-NF-κB p65蛋白水平降低(均P<0.05)。与antagomir-miR-22-3p组比较,antagomir-miR-22-3p+EX527组大鼠中MVV、FEV0.3/FVC和PEF降低,BALF中IL-1β、TNF-α和MIP-2水平升高,肺组织病变加重,肺组织中SOD和CAT水平降低,MDA水平升高,SIRT1 mRNA水平降低,SIRT1和FoxO3a蛋白水平降低,p-NF-κB p65蛋白水平升高(均P<0.05)。结论沉默miR-22-3p通过上调SIRT1的表达有效提高了COPD大鼠的肺功能并减轻了肺损伤。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 miR-22-3p 沉默信息调节因子1 核因子-ΚB 叉头盒O3a
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葛根素在高糖条件下对大鼠足细胞自噬相关蛋白表达的影响
4
作者 陈亚巍 排尔哈提·凯赛尔 王士磊 《临床误诊误治》 CAS 2024年第14期95-100,共6页
目的观察葛根素对高糖条件下大鼠足细胞沉默信息调控因子1(SIRT1)/叉头转录因子O3(FOXO3)自噬通路的影响。方法在高糖条件下,采用蛋白免疫印记、免疫荧光等方法检测足细胞自噬相关蛋白SIRT1、FOXO3a、p62和Beclin-1的表达。结果HG组足细... 目的观察葛根素对高糖条件下大鼠足细胞沉默信息调控因子1(SIRT1)/叉头转录因子O3(FOXO3)自噬通路的影响。方法在高糖条件下,采用蛋白免疫印记、免疫荧光等方法检测足细胞自噬相关蛋白SIRT1、FOXO3a、p62和Beclin-1的表达。结果HG组足细胞Beclin-1表达较NG组下调,足细胞p62的表达较NG组上调,SIRT1/FOXO3自噬通路受到抑制,而应用葛根素后可使Beclin-1表达上调,p62的表达下调,SIRT1/FOXO3自噬通路恢复,差异有统计学意义(P<0.05,P<001)。结论葛根素可逆转高糖条件下足细胞自噬的抑制作用,有望成为一种治疗糖尿病肾病的新型药物。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 足细胞 大鼠 葛根素 高糖 自噬 沉默信息调节因子-1 叉头转录因子O3
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电针对APP/PS1小鼠学习记忆及海马SIRT1、FOXO3A蛋白表达的影响 被引量：1
5
作者 刘奕志 王鑫 +3 位作者 孙润权 刘思远 王帅 李志刚 《环球中医药》 CAS 2022年第10期1767-1773,共7页
目的 观察电针对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠学习记忆能力、海马区神经元形态及沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)、叉头框转录因子O3A(forkhead box transcription factor O3A,FOXO3A)表达... 目的 观察电针对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠学习记忆能力、海马区神经元形态及沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)、叉头框转录因子O3A(forkhead box transcription factor O3A,FOXO3A)表达的影响,探讨电针治疗AD的作用机制。方法30只6月龄雄性淀粉样前体蛋白/早老蛋白1(amyloid precursor protein/presenilin-1,APP/PS1)双转基因小鼠随机分成模型组、电针组、电针+抑制剂组,每组10只。以同源背景C57BL/6野生鼠10只作为空白对照组。除电针+抑制剂组,其余三组在干预前30分钟腹腔注射磷酸盐缓冲液。空白对照组与模型组仅予以束缚,电针组在针刺“百会”“印堂”“水沟”穴的基础上加用脉冲电流,电针+抑制剂组在电针组基础上于干预前腹腔注射3-甲基腺嘌呤溶液。各组干预20分钟/次,每日一次,共15天。15天治疗结束后通过Morris水迷宫实验观察四组小鼠行为学改变;采用苏木素—伊红染色观察各组海马区细胞形态;分别采用免疫组化和蛋白免疫印迹法观察各组小鼠海马组织SIRT1、FOXO3A的表达情况。结果 (1) Morris水迷宫结果显示:电针组较模型组逃避潜伏期明显缩短、穿越站台次数及Ⅰ象限运动距离百分比明显增多(P <0.05,P <0.01);(2)苏木素—伊红染色结果显示:较之模型组,电针组、电针+抑制剂组可不同程度改善海马区神经元病理特征;(3)免疫组化结果显示:较之模型组,电针组SIRT1表达明显上调,总FOXO3A表达下降(P <0.01),电针+抑制剂组SIRT1表达增高(P <0.01);(4)蛋白免疫印迹结果显示:较之模型组,电针组SIRT1、胞核FOXO3A蛋白表达明显上调,胞质FOXO3A蛋白表达明显下调(P <0.01),电针+抑制剂组SIRT1、胞核FOXO3A蛋白表达稍增多(P <0.05),胞质FOXO3A蛋白表达减少(P <0.01)。结论“通督启神”法电针可提高AD小鼠空间学习记忆能力和改善海马区神经元形态结构,其机制可能与增强AD小鼠海马区SIRT1蛋白表达,提高FOXO3A的转录活性有关。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 通督启神 电针 沉默信息调节因子1 叉头框转录因子O3A 海马 神经元 小鼠
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SIRT1激动剂对大鼠急性心肌梗死后心脏功能、心肌细胞凋亡的影响及机制 被引量：2
6
作者 孙彬 曹清涛 +1 位作者 刘金伟 李雅妮 《山东医药》 CAS 2018年第22期16-19,共4页
目的观察沉默信息调节因子1(SIRT1)激动剂对大鼠急性心肌梗死(AMI)后心肌细胞凋亡的影响,探讨可能的机制。方法将40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、溶媒组和激动剂组,每组10只;后三组大鼠建立AMI模型后,激动剂组、溶媒组分别腹腔注... 目的观察沉默信息调节因子1(SIRT1)激动剂对大鼠急性心肌梗死(AMI)后心肌细胞凋亡的影响,探讨可能的机制。方法将40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、溶媒组和激动剂组,每组10只;后三组大鼠建立AMI模型后,激动剂组、溶媒组分别腹腔注射SIRT1激动剂SRT1720 20 mg/(kg·d)及等量的DMSO,假手术组、模型组均腹腔注射等量生理盐水,连续7 d。于末次给药后次日,检测各组心脏功能[左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室射血分数(LVEF)和短轴缩短率(FS)];处死各组大鼠后,检查梗死区组织形态学变化,TUNEL法检测心肌梗死组织中细胞凋亡情况,Western blotting法检测心肌梗死组织中的SIRT1、叉头转录因子1(Fox O1)、Bax、Bcl-2蛋白及Fox O1乙酰化水平。结果与假手术组比较,模型组和溶媒组大鼠LVEDD、LVESD均升高,LVEF、FS均降低,心肌细胞凋亡指数均升高,心肌梗死组织中SIRT1、Fox O1、Bcl-2蛋白相对表达量均降低,而Bax蛋白相对表达量和Fox O1乙酰化水平均升高(P均<0.05)。与模型组和溶媒组比较,激动剂组大鼠LVEDD、LVESD均降低,LVEF、FS均升高,心肌细胞凋亡指数降低,心肌梗死组织中SIRT1、Fox O1、Bcl-2蛋白相对表达量均升高,而Bax蛋白相对表达量、Fox O1乙酰化水平均降低(P均<0.05)。结论SIRT1激动剂可改善AMI大鼠心脏功能,减少心肌细胞凋亡;其机制可能与促进SIRT1表达,下调Fox O1乙酰化水平有关。 展开更多
关键词 心肌梗死 沉默信息调节因子1 SIRT1激动剂 心脏功能 细胞凋亡 叉头转录因子1
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丙泊酚对H_(2)O_(2)诱导的HT22细胞凋亡的保护作用
7
作者 李婕 王小波 李春梅 《中国实用医药》 2022年第22期189-194,共6页
目的探讨丙泊酚对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的HT22细胞凋亡的影响及其对沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)-叉头框蛋白O1(FoxO1)信号通路的影响。方法首先利用H_(2)O_(2)建立HT22细胞损伤模型,丙泊酚干预后,利用细胞计数试剂盒(CCK8)检... 目的探讨丙泊酚对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的HT22细胞凋亡的影响及其对沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)-叉头框蛋白O1(FoxO1)信号通路的影响。方法首先利用H_(2)O_(2)建立HT22细胞损伤模型,丙泊酚干预后,利用细胞计数试剂盒(CCK8)检测细胞存活率和筛选H_(2)O_(2)合适作用浓度,活性氧荧光探针(DCFH-DA)检测细胞内活性氧(ROS)水平,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)检测试剂盒检测细胞内NAD含量,Westernblot检测SIRT1、FoxO1及细胞凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase3、Bcl2关联X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、细胞色素C(Cyt C)的表达水平。结果与对照组比较,在一定浓度范围内,随着H_(2)O_(2)浓度增加,HT22细胞存活率逐渐下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。H_(2)O_(2)诱导细胞损伤的IC50为234.13μM。与对照组比较,100μM H_(2)O_(2)处理HT22细胞24 h后,HT22细胞存活率为75.62%。本研究通过实验摸索和调整结合参考文献最终确定100μM作为本次实验的处理浓度。H_(2)O_(2)组细胞内ROS及凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase3、Bax、Cyt C蛋白的表达水平显著高于对照组,丙泊酚组低于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。H_(2)O_(2)和丙泊酚联合处理组细胞内ROS及凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase3、Bax、Cyt C蛋白的表达水平低于H_(2)O_(2)组,高于丙泊酚组,差异具有统计学意义(P<0.05)。H_(2)O_(2)组细胞内SIRT1和FoxO1蛋白的表达水平、NAD水平明显低于对照组,丙泊酚组明显高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。H_(2)O_(2)和丙泊酚联合处理组细胞内SIRT1和FoxO1的表达水平、NAD水平高于H_(2)O_(2)组,低于丙泊酚组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论丙泊酚对H_(2)O_(2)诱导HT22细胞损伤具有的保护作用,其作用机制可能与激活SIRT1-FoxO1信号通路来减轻氧化应激水平,降低细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 丙泊酚 细胞凋亡 活性氧 沉默信息调节因子2相关酶1 叉头框蛋白O1
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