基于蛋白质沉淀的药物靶点筛选方法的研究进展

1

作者 刘彤 秦伟捷 杨洪军 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期613-622,共10页

药物靶点是体内与药物分子结合的生物大分子。因此药物靶点的系统鉴定对于充分认识药物作用机制、疗效以及可能的副作用至关重要;同时全面的靶点识别可以加速药物发现及候选药物筛选的进程。生物质谱具有采集速度快、分辨率和灵敏度高... 药物靶点是体内与药物分子结合的生物大分子。因此药物靶点的系统鉴定对于充分认识药物作用机制、疗效以及可能的副作用至关重要;同时全面的靶点识别可以加速药物发现及候选药物筛选的进程。生物质谱具有采集速度快、分辨率和灵敏度高等特点,是蛋白质组深度鉴定和准确定量的关键工具;基于质谱的蛋白质组学技术有助于系统性鉴定与小分子药物结合的蛋白质,阐述蛋白质-药物相互作用,在药物靶点筛选领域大显身手。常用的先进行标记再结合亲和富集的药物靶点表征方法需要对药物分子化学衍生,这既耗时也可能会改变药物的亲和力,同时衍生基团产生的空间效应可能会阻断药物和靶点相互作用,加大了靶点鉴定的难度。因此,无需衍生的药物靶点鉴定方法受到广泛关注。蛋白质受到温度、pH、变性剂以及机械力等条件的影响会发生变性、展开和沉淀。小分子药物与蛋白质结合可能改变蛋白质折叠平衡,稳定靶蛋白的构象,与游离蛋白相比,更能抵抗不同条件诱导的蛋白质沉淀。基于以上原理,联合蛋白质组学和生物质谱技术,目前已经发展了多种基于蛋白质沉淀的药物靶点规模化鉴定方法,包括热蛋白质组分析方法、溶剂诱导蛋白质沉淀方法、机械应力诱导蛋白质沉淀方法、pH依赖性蛋白质沉淀方法等,用于蛋白质组范围内的药物靶点筛选。本综述介绍了该领域近十年报道的药物靶点发现和药物-蛋白质相互作用研究方法,总结了这些方法的特点及其在药物疗效评价、药物发现等方面的发展前景。 展开更多

关键词 生物质谱 药靶鉴定 蛋白质沉淀 蛋白质组学

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黄酒蛋白质沉淀 被引量：12

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作者 林峰 白少勇 +2 位作者 邹慧君 谢广发 周建弟 《酿酒科技》 北大核心 2005年第9期69-72,共4页

高分子蛋白质是引起黄酒沉淀的主要因素,其与单宁聚合物引起黄酒冷浑浊、沉淀。绍兴黄酒蛋白质的含量为0.80%;酒脚中的蛋白质含量为50.20%。黄酒蛋白质的沉淀机理主要是由蛋白质的变性团聚,产生分子量大于10000的蛋白质分子,分子量在10... 高分子蛋白质是引起黄酒沉淀的主要因素,其与单宁聚合物引起黄酒冷浑浊、沉淀。绍兴黄酒蛋白质的含量为0.80%;酒脚中的蛋白质含量为50.20%。黄酒蛋白质的沉淀机理主要是由蛋白质的变性团聚,产生分子量大于10000的蛋白质分子,分子量在10000～5000的蛋白质分子易使黄酒形成沉淀;酒体中的多酚(单宁)、金属离子(如铁)、乙醇也会引起蛋白质沉淀。(孙悟) 展开更多

关键词 黄酒 蛋白质沉淀 机理

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蛋白质沉淀剂用量对亚硝酸盐含量测定的影响 被引量：6

3

作者 周秀清 黄明华 《盐业与化工》 CAS 2013年第4期9-11,共3页

根据食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定方法(GB 5009.33-2010)中第二法,通过改变蛋白质沉淀剂的使用量对亚硝酸盐含量测定进行研究。研究表明:蛋白质沉淀剂的使用量对亚硝酸盐测定有一定的影响,蛋白质澄清剂加入量少于GB 5009.33—2010方法... 根据食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定方法(GB 5009.33-2010)中第二法,通过改变蛋白质沉淀剂的使用量对亚硝酸盐含量测定进行研究。研究表明:蛋白质沉淀剂的使用量对亚硝酸盐测定有一定的影响,蛋白质澄清剂加入量少于GB 5009.33—2010方法中加入量时,回收率随着加入量的增加而提高;当加入量为1倍时,回收率为98.4%,达到最大值;当蛋白质澄清剂加入量超过1倍时,回收率明显下降。 展开更多

关键词 蛋白质沉淀剂 亚硝酸盐 回收率

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黄酒中蛋白质沉淀的研究进展 被引量：7

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作者 詹汉林 肖招燕 +1 位作者 韩珍 郭庆东 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2014年第12期130-134,共5页

引起黄酒非生物浑浊的因素众多,着重阐述了影响黄酒蛋白质沉淀的因素,同时介绍了解决黄酒非生物浑浊的方法,旨在为黄酒的生产和研究提供一定的参考。

关键词 黄酒 蛋白质沉淀 因素 解决方法

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啤酒多酚-蛋白质沉淀及低温酒精冷混浊预测啤酒保质期 被引量：10

5

作者 王娟 郝俊光 顾国贤 《酿酒》 CAS 北大核心 2003年第4期51-53,共3页

啤酒的混浊问题比较复杂 ,但通常是由多酚 -蛋白的复合物引起的非生物混浊 ;低温酒精冷混浊试验可以快速地预测啤酒保质期 ,该法简捷 ,测定结果预见性强 。

关键词 多酚—蛋白质沉淀 预测 啤酒保质期 低温酒精冷混浊试验

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黄酒蛋白质的测定及其沉淀原因探讨 被引量：10

6

作者 谢广发 孟中法 周建弟 《酿酒科技》 2002年第3期64-64,68,共2页

蛋白质是造成黄酒沉淀的主要因素。蛋白质的测定方法有凯氏法和隆丁法。瓶装黄酒酒脚中粗蛋白含量达50.56 % ,其中高分子蛋白质占72.62 %。

关键词 黄酒 蛋白质 蛋白质沉淀 沉淀原因 测定

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蛋白质沉淀法快速检测牛奶中黄曲霉毒素M_1的技术探讨 被引量：1

7

作者 姜学涯 钟彩丽 +1 位作者 许尔昉 梁景文 《中国食品添加剂》 CAS 2018年第7期188-193,共6页

将蛋白质沉淀法应用于牛奶中黄曲霉毒素M_1检测的前处理,建立牛奶中黄曲霉毒素M_1检测的快速前处理方法,并与国标法(GB 5009.24-2016/第一法同位素稀释液相色谱-串联质谱法)比较。在样液中加入乙腈,振荡后再加入乙酸锌及亚铁氰化钾溶液... 将蛋白质沉淀法应用于牛奶中黄曲霉毒素M_1检测的前处理,建立牛奶中黄曲霉毒素M_1检测的快速前处理方法,并与国标法(GB 5009.24-2016/第一法同位素稀释液相色谱-串联质谱法)比较。在样液中加入乙腈,振荡后再加入乙酸锌及亚铁氰化钾溶液,混合均匀并离心,取上清液过滤膜后注入高效液相色谱串联质谱仪检测。采用Inersil ODS-3(2.1 mm×150 mm,3μm)色谱柱,以0.1%甲酸+10 mmol甲酸铵溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速:0.25 mL/min,采用电喷雾离子源行正离子模式监测,多反应监测模式(MRM)定量分析。在最优的条件下,方法定量线性范围为0.2~10 ng/mL,方法回收率为72.0%~94.8%,精密度为2.1%~5.8%。与国标相比,本方法操作简便,效率高,且精密度高,回收率好,可应用于牛奶中黄曲霉毒素M_1的日常检测。 展开更多

关键词 蛋白质沉淀剂 牛奶 黄曲霉毒素M1 液相色谱仪串联质谱仪

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酸豆奶生产中防止蛋白质沉淀技术 被引量：4

8

作者 陈朝晖 《大豆通报》 2001年第3期24-24,共1页

本文介绍了一整套酸性豆奶生产中蛋白质沉淀问题的解决技术 ,并对相应的稳定剂进行了筛选 ,提高了酸豆奶的质量和保质期。

关键词 酸豆奶 蛋白质沉淀 稳定剂

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浅析蛋白质沉淀剂对乳制品中环己基氨基磺酸钠含量的测定影响

9

作者 高元元 《现代食品》 2023年第14期170-172,共3页

本研究采用气象色谱法新国家标准,对高蛋白质食品中的环己基氨基磺酸钠(甜蜜素)进行测定,分析蛋白质沉淀剂对检测结果的影响。研究结果表明,蛋白质沉淀剂对样品回收率有明显的提高作用,同时,该方法灵敏度、准确性好,操作简便,可有效检... 本研究采用气象色谱法新国家标准,对高蛋白质食品中的环己基氨基磺酸钠(甜蜜素)进行测定,分析蛋白质沉淀剂对检测结果的影响。研究结果表明,蛋白质沉淀剂对样品回收率有明显的提高作用,同时,该方法灵敏度、准确性好,操作简便,可有效检测出乳制品中甜蜜素的含量。 展开更多

关键词 气相色谱法 环己基氨基磺酸钠 蛋白质沉淀剂

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基于蛋白沉淀光谱分析的核桃涩味评价技术研究

10

作者 彭佳佳 姚佩 +4 位作者 史单华 杨晋豫 郑雄 张小军 刘群龙 《果树资源学报》 2024年第3期18-23,共6页

【目的】建立核桃内种皮涩味综合评价体系,为鲜食核桃品种选育提供理论依据。【方法】选用涩味差异明显的6个核桃品种(系),通过感官评价、内种皮水浸法和蛋白质化学沉淀法相结合的评价方式,初步建立核桃内种皮涩味综合评价技术体系。【... 【目的】建立核桃内种皮涩味综合评价体系,为鲜食核桃品种选育提供理论依据。【方法】选用涩味差异明显的6个核桃品种(系),通过感官评价、内种皮水浸法和蛋白质化学沉淀法相结合的评价方式,初步建立核桃内种皮涩味综合评价技术体系。【结果】6个品种(系)的直接口感涩味值为5.83~9.27,分为差异显著的3类。水浸出物浓度为10 mg/mL时,依据水浸出物涩味值‘汾核4号’和‘ND-2’为一类,其余4个品种(系)各为一类。内种皮提取液浓度为20μl/mL时,蛋白沉淀在222 nm波长下吸光值差异最大,可将6个品种(系)分为差异显著的4类。内种皮化学沉淀吸光值与直接口感涩味值的相关系数为0.96,内种皮化学沉淀吸光值与10 mg/mL内种皮水浸出物涩味值相关系数为0.97,均呈极显著正相关。【结论】核桃内种皮提取液浓度为20μl/mL,222 nm波长条件下,通过蛋白质沉淀全光谱扫描,结合感官评价,可对核桃内种皮涩味进行有效评价。 展开更多

关键词 核桃 涩味 感官评价 蛋白质沉淀法

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β-酪蛋白淀粉样纤维沉淀的形成及影响因素 被引量：1

11

作者 刘继华 John A.Carver David C.Thorn 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2014年第5期976-980,共5页

利用硫磺素T（ ThT）荧光分析法和透射电子显微镜检测β-酪蛋白形成淀粉样纤维沉淀（ Fibril）的动力学过程,研究了磷脂和硫酸肝素对其 Fibril 形成的影响.实验结果表明,β-酪蛋白在65℃下, pH 值为5.4~9.0的范围内,加热252 h以上,并未... 利用硫磺素T（ ThT）荧光分析法和透射电子显微镜检测β-酪蛋白形成淀粉样纤维沉淀（ Fibril）的动力学过程,研究了磷脂和硫酸肝素对其 Fibril 形成的影响.实验结果表明,β-酪蛋白在65℃下, pH 值为5.4~9.0的范围内,加热252 h以上,并未形成Fibril,说明β-酪蛋白是一种很好的分子伴侣,在高温、弱酸和弱碱条件下均不形成淀粉样纤维沉淀.甘油磷酸胆碱D6PC和D9PC可以显著地促进β-酪蛋白的Fibril的形成,说明一定条件下蛋白质可能与细胞膜之间存在相互作用而导致其二级构象的转变.硫酸肝素对β-酪蛋白形成Fibril具有促进作用,在炎症组织中,硫酸肝素表达量的增加有可能促进β-酪蛋白形成Fibril,说明乳腺炎与乳腺中的Corpora Amylacea的形成存在一定的联系. 展开更多

关键词 Β-酪蛋白 蛋白质淀粉样纤维沉淀 磷脂 硫酸肝素 ThT荧光分析法

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评价接触镜除蛋白护理液去蛋白的试验方法 被引量：1

12

作者 文燕 贾晓航 何涛 《中国医疗器械杂志》 CAS 2006年第2期131-133,共3页

利用人工泪液浸泡镜片．模拟蛋白吸附．采用紫外分光光度计在波长280 nm处测试经护理液洗脱的蛋白质的吸光度, 计算蛋白质含量。测试除蛋白护理液对软性角膜接触镜上的蛋白质沉淀的洗脱效果。结果除蛋白含量的测试结果具有重复性。该试... 利用人工泪液浸泡镜片．模拟蛋白吸附．采用紫外分光光度计在波长280 nm处测试经护理液洗脱的蛋白质的吸光度, 计算蛋白质含量。测试除蛋白护理液对软性角膜接触镜上的蛋白质沉淀的洗脱效果。结果除蛋白含量的测试结果具有重复性。该试验方法可以对除蛋白护理液的洗脱率效果进行评价,但尚需完善． 展开更多

关键词 护理液 蛋白质沉淀洗脱率 紫外分光光度计 接触镜

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凯氏定氮全定量、半定量法以及杜马斯燃烧法测定米糠粗蛋白优劣势比较 被引量：5

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作者 李小丹 朱丽琼 +4 位作者 曾彩虹 刘鑫 吴家乾 李丹青 潘传荣 《粮食加工》 2022年第5期122-126,共5页

通过对凯氏定氮法的全定量和半定量法及杜马斯燃烧法测定蛋白质实验的科学比较,分析三种方法的优劣势。作为蛋白质测定的国家标准方法,三种方法检测结果并没有显着性差异,所以测定米糠中粗蛋白含量时采用三种方法均是优良可行的。凯氏... 通过对凯氏定氮法的全定量和半定量法及杜马斯燃烧法测定蛋白质实验的科学比较,分析三种方法的优劣势。作为蛋白质测定的国家标准方法,三种方法检测结果并没有显着性差异,所以测定米糠中粗蛋白含量时采用三种方法均是优良可行的。凯氏定氮法所需设备价格低、成本低廉、已经有着广泛的应用,但是操作时间长,有一定的危险性,产生有毒有害气体,危害人体健康,结果受人为影响;杜马斯燃烧法操作过程简便快捷,时间只需几分钟,不需人看管,不产生有毒有害物质,但是仪器昂贵,检测成本高。 展开更多

关键词 蛋白质沉淀 杜马斯燃烧法 全定量凯氏定氮法 半定量凯氏定氮法

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蛋白酶处理枸杞汁对枸杞酒质量的影响研究 被引量：5

14

作者 赵智慧 《酿酒》 CAS 2017年第2期102-105,共4页

蛋白质不稳定一直是困扰果酒生产的一个难题,最常用的是下胶处理去除蛋白质,但会引起香气的损失和酒损率的升高。尝试在发酵前用多种酶制剂处理枸杞汁,解决蛋白沉淀、酵母氮源供给不足、蛋白变化对杂醇油的影响以及枸杞营养释放不完全... 蛋白质不稳定一直是困扰果酒生产的一个难题,最常用的是下胶处理去除蛋白质,但会引起香气的损失和酒损率的升高。尝试在发酵前用多种酶制剂处理枸杞汁,解决蛋白沉淀、酵母氮源供给不足、蛋白变化对杂醇油的影响以及枸杞营养释放不完全等问题。 展开更多

关键词 酶 蛋白质沉淀 氮源 杂醇油 枸杞酒品质

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原子吸收光谱法测定生物检材中镉的检材处理方法研究

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作者 宋庆芳 《黑龙江科技信息》 2009年第20期14-14,共1页

镉盐是工业金属类毒物,是剧毒物品。利用原子吸收光谱法测定生物检材中微量镉是常用方法之一。建立了用聚四氟乙烯罐破坏有机质与沉淀蛋白质(非破坏有机质)法处理检材,(MIBK)以甲基异丁基酮萃取被测镉离子,用原子吸收光谱法直接测定有... 镉盐是工业金属类毒物,是剧毒物品。利用原子吸收光谱法测定生物检材中微量镉是常用方法之一。建立了用聚四氟乙烯罐破坏有机质与沉淀蛋白质(非破坏有机质)法处理检材,(MIBK)以甲基异丁基酮萃取被测镉离子,用原子吸收光谱法直接测定有机相中微量镉的方法。方法准确可靠,操作简便,适合作为镉中毒生物检材的分析方法。 展开更多

关键词 原子吸收光谱 镉 萃取 破坏有机质 沉淀蛋白质

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红葡萄酒中单宁分析方法与感官收敛性的关系 被引量：8

16

作者 李皓 李运 +1 位作者 李莲梅 孟宁 《酿酒》 CAS 2008年第3期68-70,共3页

研究目的是使用多种分析方法评价红葡萄酒收敛性与单宁浓度之间的相互关系。选择40个红葡萄酒样品,使用不同的分析方法测定单宁含量,包括在280nm处的吸光度、4-二甲基氨基肉桂醛、蛋白质沉淀、间苯三酚反应以及凝胶渗透色谱法,结果显示... 研究目的是使用多种分析方法评价红葡萄酒收敛性与单宁浓度之间的相互关系。选择40个红葡萄酒样品,使用不同的分析方法测定单宁含量,包括在280nm处的吸光度、4-二甲基氨基肉桂醛、蛋白质沉淀、间苯三酚反应以及凝胶渗透色谱法,结果显示:红葡萄酒中单宁测定方法与感官收敛性之间存在明显差异。感官收敛性与蛋白质沉淀方法的相关性最大(r2=0.82),其次为间苯三酚法(r2=0.73)和凝胶渗透色谱法(r2=0.74),表明蛋白质沉淀法是感官收敛性最有用的分析方法。 展开更多

关键词 单宁 红葡萄酒 收敛性 蛋白质沉淀

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肉制品中亚硝酸盐国标检测法的改进研究 被引量：9

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作者 项锦欣 胡凌宇 +3 位作者 张晓姝 张晓凤 付钰洁 马练琼 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第4期254-256,共3页

针对GB/T5009.33—2003食品中硝酸盐与亚硝酸盐检测方法的样品预处理过程复杂、耗时长等问题,改用天然高分子絮凝剂W-3取代原有蛋白质沉淀剂——亚铁氰化钾和乙酸锌,不但节省试剂,且显著缩短处理时间。用改进后的方法测定肉制品中亚硝... 针对GB/T5009.33—2003食品中硝酸盐与亚硝酸盐检测方法的样品预处理过程复杂、耗时长等问题,改用天然高分子絮凝剂W-3取代原有蛋白质沉淀剂——亚铁氰化钾和乙酸锌,不但节省试剂,且显著缩短处理时间。用改进后的方法测定肉制品中亚硝酸盐含量,检出限较低,回收率高,与国标法对比,相对误差低于3%。 展开更多

关键词 亚硝酸盐 预处理 天然高分子絮凝剂W-3 蛋白质沉淀剂

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谷氨酰胺转氨酶菌株的筛选及其产酶条件研究 被引量：1

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作者 宋小平 王雅洁 +2 位作者 王迎新 沈书文 李光伟 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2015年第1期114-117,共4页

利用蛋白质交联-絮凝沉淀性能测定方法,从土壤中分离得到1株高产谷氨酰胺转氨酶(microbial transglutaminase,MTG)的菌株,命名为HF-82,初步确定为链霉菌属。单因素试验确定最适产酶氮源和碳源分别是蛋白胨和葡萄糖,正交试验确定最适发... 利用蛋白质交联-絮凝沉淀性能测定方法,从土壤中分离得到1株高产谷氨酰胺转氨酶(microbial transglutaminase,MTG)的菌株,命名为HF-82,初步确定为链霉菌属。单因素试验确定最适产酶氮源和碳源分别是蛋白胨和葡萄糖,正交试验确定最适发酵培养基为(g/L):葡萄糖25.0,蛋白胨20.0,酵母提取物5.0,Mg SO4·7 H2O 2.0,K2HPO4·3 H2O 2.0,Na H2PO42.0,Ca CO33.0,p H7.0。此发酵工艺条件下,MTG的酶活可达到0.53 U/m L。 展开更多

关键词 蛋白质交联-絮凝沉淀法 谷氨酰胺转氨酶 菌种选育 产酶条件

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高脂血症大鼠血清中硒化合物的形态分析

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作者 赵旻 张会平 +3 位作者 刘佳佳 赵春杰 刘洪涛 王淼 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1021-1028,共9页

目的通过检测高脂血症(HLP)大鼠用药前后血浆中硒代甲硫氨酸(SeMet)、硒代半胱氨酸(SeCys)、亚硒酸盐(Se(IV))、硒酸盐(Se(VI))和甲基硒代半胱氨酸(SeMe Cys)不同形态的硒化合物,确定高脂血症与不同形态硒化合物的相关性。方法通过蛋白... 目的通过检测高脂血症(HLP)大鼠用药前后血浆中硒代甲硫氨酸(SeMet)、硒代半胱氨酸(SeCys)、亚硒酸盐(Se(IV))、硒酸盐(Se(VI))和甲基硒代半胱氨酸(SeMe Cys)不同形态的硒化合物,确定高脂血症与不同形态硒化合物的相关性。方法通过蛋白质沉淀和酶水解方法分别从血清样品中提取分析物。采用HPLC-ICP/MS方法,同时测定大鼠血浆样品中的硒化合物,包括硒代甲硫氨酸(SeMet)、硒代半胱氨酸(SeCys)、四价亚硒酸盐(Se (IV))、六价亚硒酸盐(Se(VI))和甲基硒代半胱氨酸(SeMe Cys)。结果采用沉淀蛋白法处理样品,可以检测到Se(IV),采用酶水解法可以检测到SeCys。高脂血症组与正常对照组相比,大鼠血清中Se(IV)与SeCys含量有明显降低,高脂血症组大鼠用西药阿托伐他汀钙片以及中药绞股蓝总苷治疗四周后,血脂水平降低,Se(IV)与SeCys均有不同程度的恢复。结论该方法证明了HLP大鼠血清中硒化合物的变化,Se(IV)与SeCys可以作为临床监测高脂血症的重要的指标化合物。 展开更多

关键词 电感耦合等离子质谱法 高脂血症 硒化合物 蛋白质沉淀法 酶水解法

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葡萄和葡萄酒中聚合色素的测定 被引量：7

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作者 盛慧 彭军 李运 《酿酒科技》 北大核心 2005年第3期83-86,共4页

采用蛋白质沉淀和传统二氧化硫脱色分析方法测定聚合色素中单分子花色素。葡萄和葡萄酒中两种聚合色素:小分子色素(SPP)与蛋白质不产生沉淀,而大分子色素(LPP)则产生沉淀。分析成熟期和采摘期赤霞珠、西拉葡萄浆果内的聚合物色素成分,... 采用蛋白质沉淀和传统二氧化硫脱色分析方法测定聚合色素中单分子花色素。葡萄和葡萄酒中两种聚合色素:小分子色素(SPP)与蛋白质不产生沉淀,而大分子色素(LPP)则产生沉淀。分析成熟期和采摘期赤霞珠、西拉葡萄浆果内的聚合物色素成分,其果粒中含有的聚合色素比相应的葡萄酒少。在葡萄酒中找到的多数大分子聚合色素是在葡萄酒酿造过程中产生的。通过对照,葡萄酒和其果粒中小分子色素含量相比较是不稳定的、变化的,西拉中SPP降低,赤霞珠SPP增加,黑比诺SPP变化很小。蛋白质沉淀和二氧化硫漂白分析研究得出,葡萄汁和葡萄酒中的单宁酸和聚合色素有相同的结论。 展开更多

关键词 葡萄酒 聚合色素 花青素 单宁酸 原花青素 蛋白质沉淀

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