高效毛细管凝胶电泳（HPCGE）中超载进样对蛋白质分离的影响

1

作者 唐晋滨 黄骏雄 《高技术通讯》 CAS CSCD 1994年第10期29-32,共4页

报导了高效毛细管凝胶电泳在超载情况下样品负荷量与其电泳行为的关系，研究了牛血清白蛋白、伴清蛋白及溶菌酶三种蛋白质的进样量与它们电泳峰形（包括对称性、相对迁移时间和分离度）变化的关系，证实了在样品用量不同时，它们的电泳... 报导了高效毛细管凝胶电泳在超载情况下样品负荷量与其电泳行为的关系，研究了牛血清白蛋白、伴清蛋白及溶菌酶三种蛋白质的进样量与它们电泳峰形（包括对称性、相对迁移时间和分离度）变化的关系，证实了在样品用量不同时，它们的电泳行为有很大的不同。 展开更多

关键词 蛋白质 分离 毛细管凝胶电泳

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任意多阶梯度场强毛细管凝胶电泳中谱带的迁移和展宽 被引量：8

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作者 林炳承 许旭 罗国安 《分析测试学报》 CAS CSCD 1997年第1期58-63,共6页

在自行制备的毛细管凝胶电泳柱上，通过实验考察毛细管凝胶电泳（ＣＧＥ）中场强（Ｅ）和组分迁移率（μ）的关系，发现在一般ＣＧＥ使用的场强范围内，μ随Ｅ增大而成近似线性的增加。并讨论了产生这种现象的原因。以此为基础提供了任... 在自行制备的毛细管凝胶电泳柱上，通过实验考察毛细管凝胶电泳（ＣＧＥ）中场强（Ｅ）和组分迁移率（μ）的关系，发现在一般ＣＧＥ使用的场强范围内，μ随Ｅ增大而成近似线性的增加。并讨论了产生这种现象的原因。以此为基础提供了任意多阶梯度场强毛细管凝胶电泳中组分的迁移时间和距离的计算公式，用于编制计算机程序。 展开更多

关键词 毛细管凝胶电泳 场强 迁移率 计算机程序 cge

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毛细管凝胶电泳法测定硫代寡核苷酸药物癌泰得的含量 被引量：10

3

作者 杨秉呼 孙偶君 +1 位作者 张敏丽 王升启 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期202-205,共4页

癌泰得为20碱基的抑制端粒酶催化亚基hTERT的硫代反义寡核苷酸,体内、体外抗肿瘤活性评价显示其有较好的抗肿瘤活性。采用固相合成仪分别制备了癌泰得及与其碱基百分组成基本相同的硫代寡核苷酸内标,并使用制备型阴离子交换色谱和反相... 癌泰得为20碱基的抑制端粒酶催化亚基hTERT的硫代反义寡核苷酸,体内、体外抗肿瘤活性评价显示其有较好的抗肿瘤活性。采用固相合成仪分别制备了癌泰得及与其碱基百分组成基本相同的硫代寡核苷酸内标,并使用制备型阴离子交换色谱和反相高效液相色谱进行纯化。采用毛细管凝胶电泳仪和单链DNA分离试剂盒测定了癌泰得的含量。所用毛细管规格为内径100μm,总长31cm,有效长度20cm;电动进样,进样电压-10kV,进样时间1s;分离电压-12 4kV;柱体温度40℃;样品储存温度为30℃;缓冲溶液为pH8 5的Tris 硼酸盐 7mol/L尿素缓冲液;紫外检测,波长为254nm。结果表明,在12 5～800mg/L时呈现良好的线性关系(r=0 99997);最低检测限为0 220mg/L;日内、日间的相对标准偏差(RSD)分别为0 449%～1 89%和1 01%～1 48%;低、中、高3种浓度的平均回收率为96 95%,RSD为6.88%。说明毛细管凝胶电泳内标法用于反义硫代寡核苷酸的含量测定结果准确、可靠。 展开更多

关键词 毛细管凝胶电泳 癌泰得 反义硫代寡核苷酸 药物

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毛细管凝胶电泳法测定血浆中的癌泰得 被引量：9

4

作者 张嵬 杨秉呼 +3 位作者 梁乾德 鲁丹丹 林汝仙 王升启 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期374-377,共4页

为了进行硫代反义寡核苷酸药物癌泰得的药代动力学研究,建立了毛细管凝胶电泳测定血浆中癌泰得含量的方法.样品经强阴离子交换柱除去血浆中的蛋白和油脂,通过反相C18柱脱盐,再通过渗滤膜除去残留盐分后,以长度为24个碱基的寡核苷酸作为... 为了进行硫代反义寡核苷酸药物癌泰得的药代动力学研究,建立了毛细管凝胶电泳测定血浆中癌泰得含量的方法.样品经强阴离子交换柱除去血浆中的蛋白和油脂,通过反相C18柱脱盐,再通过渗滤膜除去残留盐分后,以长度为24个碱基的寡核苷酸作为内标,采用毛细管凝胶电泳测定血浆中癌泰得的含量.结果表明,毛细管凝胶电泳测定血浆中癌泰得含量的线性范围为12.5～400 mg/L(r=0.999 8),日内、日间的相对标准偏差分别为0.398% ～2.46% 、2.75% ～6.07% ,回收率为99.53% ～102.1% .毛细管凝胶电泳法用于血浆中反义硫代寡核苷酸的含量测定具有良好的准确性、稳定性和重现性. 展开更多

关键词 毛细管凝胶电泳 反义寡核苷酸 癌泰得 药代动力学

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基于QIAxcel毛细管凝胶电泳分析系统的7种猪病毒检测方法的建立与初步应用 被引量：6

5

作者 邬旭龙 肖璐 +5 位作者 林华 杨泽晓 姚学萍 王印 张鹏飞 姜睿姣 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期824-829,共6页

为建立同时检测7种常见猪病毒的毛细管凝胶电泳方法,本研究针对猪伪狂犬病病毒、猪乙型脑炎病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒及非洲猪瘟病毒保守基因,设计7对特异引物,并在引物的5’端加入一段非同... 为建立同时检测7种常见猪病毒的毛细管凝胶电泳方法,本研究针对猪伪狂犬病病毒、猪乙型脑炎病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒及非洲猪瘟病毒保守基因,设计7对特异引物,并在引物的5’端加入一段非同源性标签序列,再设计一对可识别标签序列的通用引物。经反应条件优化,建立了一种基于QIAxcel毛细管凝胶电泳分析系统的7种猪常见病毒多重PCR检测方法。该方法与O型猪口蹄疫病毒(FMDV-O)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等均无交叉反应,特异性强;所建立方法对7种病毒质粒标准品的检测下限分别为4.56×10^3拷贝/μL、6.35×10^3拷贝/μL、1.98×10^3拷贝/μL、1.32×10^4拷贝/μL、3.21×10^3拷贝/μL、4.51×10^3拷贝/μL、3.37×10^3拷贝/μL,敏感性较高;重复性试验结果显示各靶条带数值间的变异系数均小于1%,该方法稳定,重复性高。该方法对65份临床样本检测结果与国标或行标单一PCR检测方法相比,二者对单一病原和混合病原检测的一致性分别为94.3%(33/35)、77.7%(14/18)。本研究建立的方法为毛细管凝胶电泳技术在动物疾病病原检测中的应用提供一定的参考。 展开更多

关键词 多重PCR QIAxcel毛细管凝胶电泳(QIAxcel cge) 猪伪狂犬病病毒 猪乙型脑炎病毒 猪瘟病毒 猪圆环病毒2型 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪细小病毒 非洲猪瘟病毒

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采用毛细管凝胶电泳技术检测常见乳源成分 被引量：4

6

作者 刘鸣畅 王洪越 +3 位作者 方舒正 李唯熙 杨艳歌 吴亚君 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2020年第12期43-48,共6页

常见乳源真伪检测方法的开发对于特色乳品产业开发以及保障消费者安全与权益都有着重要的作用。本研究采用毛细管凝胶电泳技术,对牛乳及水牛乳、牦牛乳、驴乳、马乳、羊乳、骆驼乳等特色乳品进行测试。通过计算各乳品蛋白峰与内标蛋白... 常见乳源真伪检测方法的开发对于特色乳品产业开发以及保障消费者安全与权益都有着重要的作用。本研究采用毛细管凝胶电泳技术,对牛乳及水牛乳、牦牛乳、驴乳、马乳、羊乳、骆驼乳等特色乳品进行测试。通过计算各乳品蛋白峰与内标蛋白相对迁移时间,以及差异蛋白峰面积比值,构建聚类分析模型,筛选不同乳品靶标蛋白峰以及判定标准。通过对方法稳定性、重复性、检出限等参数的研究,构建常见乳源成分评价体系。此外,对市售样品进行检测,证明本方法可以实现对靶标乳源蛋白的快速筛查。 展开更多

关键词 特色乳 毛细管凝胶电泳 蛋白

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毛细管凝胶电泳在临床分子生物学研究中的应用 被引量：2

7

作者 廖杰 赵玉兰 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期159-162,共4页

毛细管电泳作为迅速发展的分离技术，已得到广泛应用。本文简要介绍了毛细管凝胶电泳技术的发展，近年来在临床分子生物学领域的应用情况，其中包括病原体、遗传病和肿瘤的基因诊断、ＤＮＡ序列分析、反义治疗的监测等。由于毛细管凝胶... 毛细管电泳作为迅速发展的分离技术，已得到广泛应用。本文简要介绍了毛细管凝胶电泳技术的发展，近年来在临床分子生物学领域的应用情况，其中包括病原体、遗传病和肿瘤的基因诊断、ＤＮＡ序列分析、反义治疗的监测等。由于毛细管凝胶电泳在核酸分析中显示了巨大的优越性，随着技术和仪器设备的不断发展和完善，在临床分析中必将得到更广泛的应用。 展开更多

关键词 毛细管凝胶电泳 临床分子生物学 诊断 治疗

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基于毛细管凝胶电泳的寡核苷酸纯度分析方法 被引量：1

8

作者 王乐乐 张晓霞 刘刚 《计量学报》 CSCD 北大核心 2023年第3期410-414,共5页

在寡核苷酸的化学合成过程中,会产生与全长序列相差一个(n-1)和两个核苷酸(n-2)的杂质,因为分子质量及电荷性质与主成分差异小,难以准确定量检测。毛细管凝胶电泳具有样品用量少、速度快、灵敏度高、分离效果好、自动化程度高等优势,而... 在寡核苷酸的化学合成过程中,会产生与全长序列相差一个(n-1)和两个核苷酸(n-2)的杂质,因为分子质量及电荷性质与主成分差异小,难以准确定量检测。毛细管凝胶电泳具有样品用量少、速度快、灵敏度高、分离效果好、自动化程度高等优势,而普遍应用于核酸的分离和分析。采用毛细管凝胶电泳对寡核苷酸纯度进行分析,能有效分离寡核苷酸全长序列与n-1的杂质,在0.03~1.00 mg/L浓度范围内线性良好(R^(2)=0.998 8),检出限约为0.01 mg/L(信噪比S/N>3),该方法的建立将为寡核苷酸的纯度分析与质量控制提供有力的技术支撑。 展开更多

关键词 计量学 毛细管凝胶电泳 寡核苷酸 纯度分析 单核苷酸 分辨率

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基于毛细管凝胶电泳与DNA条形码技术鉴别可食用动物内脏掺假方法的研究

9

作者 励炯 吴琼 +3 位作者 江海 扈明洁 金朦娜 闫金花 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第15期329-336,共8页

建立并优化了使用基于DNA条形码技术对可食用内脏制品中包括猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅、兔7种常见动物源成分进行掺假鉴别的方法。用生理盐水清洗和真空冷冻干燥预处理后的内脏样品,经DNA提取扩增后,扩增产物经毛细管凝胶电泳分析系统进... 建立并优化了使用基于DNA条形码技术对可食用内脏制品中包括猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅、兔7种常见动物源成分进行掺假鉴别的方法。用生理盐水清洗和真空冷冻干燥预处理后的内脏样品,经DNA提取扩增后,扩增产物经毛细管凝胶电泳分析系统进行确认,克隆测序结果提交本地数据库Viscera进行比对,同时筛选出适合7种动物源内脏DNA扩增的通用引物COI-A,优化DNA模板量和退火温度,验证考察了19个可食用内脏掺假模型的最低掺假比例。7种动物的5类内脏的PCR扩增效率均为100%,最佳的DNA模板量和退火温度为2μL和53℃,掺假成分的最低检出比例为5%。本方法灵敏度高,可靠性好,可作为常见可食用动物内脏掺假的有效检测方法。 展开更多

关键词 毛细管凝胶电泳 DNA条形码 内脏 细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ 掺假

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毛细管凝胶电泳 被引量：4

10

作者 祁世泽 朱涛 孙亦梁 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期98-102,共5页

毛细管凝胶电泳祁世泽，朱涛，孙亦梁（北京大学化学系北京１００８７１）１概述１．１基本原理毛细管电泳（ｃａｐｉｌｌａｒｙｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，ＣＥ）技术是近年来发展起来的一种分析技术，它的基本原理是：缓冲溶液... 毛细管凝胶电泳祁世泽，朱涛，孙亦梁（北京大学化学系北京１００８７１）１概述１．１基本原理毛细管电泳（ｃａｐｉｌｌａｒｙｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，ＣＥ）技术是近年来发展起来的一种分析技术，它的基本原理是：缓冲溶液中的不同的带电离子，在电场的作用下... 展开更多

关键词 毛细管 凝胶电泳

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乳及乳制品中乳铁蛋白的全自动高通量毛细管凝胶电泳检测方法研究 被引量：10

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作者 孙娜娜 刘金虎 +2 位作者 杨孟迪 徐丹 徐秦峰 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2021年第9期52-56,共5页

全自动毛细管凝胶电泳是一种简单、快速的DNA片段定性定量分析方法。本研究利用乳铁蛋白和DNA序列的特异性结合,建立了一种操作简便、分析时间短、高通量的全自动毛细管凝胶电泳检测乳铁蛋白的方法。实验中根据全自动毛细管凝胶电泳后游... 全自动毛细管凝胶电泳是一种简单、快速的DNA片段定性定量分析方法。本研究利用乳铁蛋白和DNA序列的特异性结合,建立了一种操作简便、分析时间短、高通量的全自动毛细管凝胶电泳检测乳铁蛋白的方法。实验中根据全自动毛细管凝胶电泳后游离DNA序列的峰面积是否减少以及减少程度实现乳铁蛋白的定性定量检测。结果表明:该方法特异性、准确性良好。采用预制胶卡夹,解决了人工制胶的繁琐步骤和毛细管区带电泳检测乳铁蛋白需要涂层抑制非特异性吸附的问题,自动化程度高,适用于乳及其制品中乳铁蛋白的快速准确定量检测。 展开更多

关键词 全自动毛细管凝胶电泳 高通量 乳铁蛋白检测

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不同来源乳中乳铁蛋白含量的高通量毛细管凝胶电泳检测 被引量：5

12

作者 路梦凡 孙娜娜 +3 位作者 李香云 李汉芳 徐丹 徐秦峰 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2023年第2期54-57,共4页

本研究在前期建立的毛细管凝胶电泳检测牛源乳铁蛋白的基础上,通过筛选分别能够与人源乳铁蛋白、羊源乳铁蛋白特异性结合的DNA序列,实现了母乳及羊奶粉中人源乳铁蛋白、羊源乳铁蛋白的快速准确定性定量检测。该方法采用非标记DNA探针替... 本研究在前期建立的毛细管凝胶电泳检测牛源乳铁蛋白的基础上,通过筛选分别能够与人源乳铁蛋白、羊源乳铁蛋白特异性结合的DNA序列,实现了母乳及羊奶粉中人源乳铁蛋白、羊源乳铁蛋白的快速准确定性定量检测。该方法采用非标记DNA探针替代荧光标记的DNA,进一步降低了检测成本,不需要复杂的样品前处理操作,仅需2 min即可完成一个样品的检测,对人源、羊源乳铁蛋白的检出限分别为11.74μg/m L、3.53μg/m L,可作为适用于其他特色生鲜乳(牦牛乳、骆驼乳、驴乳等)中乳铁蛋白含量的一种通用性检测方法。 展开更多

关键词 不同来源乳 毛细管凝胶电泳 高通量 乳铁蛋白检测

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毛细管电泳技术在蛋白质生物制品分析中的应用研究进展 被引量：6

13

作者 曹卫荣 张世光 +2 位作者 王晓婧 周青青 邹卫 《化学与生物工程》 CAS 2012年第6期20-23,共4页

毛细管电泳技术作为一种快速的分离分析技术,具有分析速度快、分辨率高、重现性好、定量分析准确、分离模式多样等特点,在蛋白质生物制品的定性定量分析中发挥着重大作用。就毛细管电泳技术的演变、分类及其在蛋白质生物制品分析中的应... 毛细管电泳技术作为一种快速的分离分析技术,具有分析速度快、分辨率高、重现性好、定量分析准确、分离模式多样等特点,在蛋白质生物制品的定性定量分析中发挥着重大作用。就毛细管电泳技术的演变、分类及其在蛋白质生物制品分析中的应用研究进展进行了综述。 展开更多

关键词 毛细管电泳 蛋白质生物制品 毛细管凝胶电泳 毛细管区带电泳 微芯片毛细管电泳

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毛细管电泳在基因研究中的应用 被引量：3

14

作者 方梅 胡波 +1 位作者 侯媛媛 肖丹 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第2期60-66,共7页

讨论用于基因研究的各种方法,并指出毛细管电泳技术的优点。评述毛细管电泳(CE)用于基因分析的原理,详细介绍毛细管电泳在基因研究中的应用新进展。展望CE及其在基因研究的应用前景。

关键词 毛细管凝胶电泳 基因分析 毛细管电泳阵列 芯片毛细管电泳

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毛细管电泳研究最新亮点 被引量：2

15

作者 屈锋 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期821-822,共2页

关键词 毛细管电泳 多聚磷酸盐 凝胶电泳分析 阴离子交换色谱 电导检测 生命有机体 单细胞生物 聚合形成

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毛细管电泳法检测胃癌APC基因第十一外显子的杂合缺失

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作者 谢希晖 王荣 +4 位作者 谢华 贾正平 张爱梅 孟宪栋 马骏 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期498-502,共5页

采用聚合酶链反应(PCR)扩增了胃癌及癌旁正常组织中APC基因易发生杂合缺失的第十一外显子的部分碱基序列,扩增样品分别经96℃变性和RsaⅠ酶切处理,以毛细管电泳(CE)-单链构象多态性(SS-CP)、CE-限制性片段长度多态性(RFLP)、聚丙烯酰胺... 采用聚合酶链反应(PCR)扩增了胃癌及癌旁正常组织中APC基因易发生杂合缺失的第十一外显子的部分碱基序列,扩增样品分别经96℃变性和RsaⅠ酶切处理,以毛细管电泳(CE)-单链构象多态性(SS-CP)、CE-限制性片段长度多态性(RFLP)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)-SSCP对其杂合缺失情况进行检测。PAGE凝胶浓度为15%。CE检测条件:以3.0%聚环氧乙烷(PEO)为筛分介质,1×TBE(pH 8.2)为电泳缓冲液,分离电压15 kV,温度15℃,结合激光诱导荧光(λex=488 nm,λem=520 nm)检测。不同方法的检出率由高到低分别为:CE-SSCP(30%)>PAGE-SSCP(25%)>CE-RFLP(20%)。并证实了APC基因易发生杂合缺失在胃癌组织中的突变率高于10%,且CE-SSCP方法较PAGE-SSCP和CE-RFLP的检出率高。CE-SSCP检测方法具有快速、灵敏度高等优点,可为建立简便可靠的胃癌临床早期诊断方法奠定基础。 展开更多

关键词 胃癌 杂合缺失 毛细管电泳 聚丙烯酰胺凝胶电泳 单链构象多态性 限制性片段长度多态性

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毛细管电泳技术在单克隆抗体药物分析中的应用 被引量：13

17

作者 陈泓序 屈锋 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期195-208,共14页

单克隆抗体药物在生物制药行业占有重要地位,是生物医药领域发展的主要方向。因此,单克隆抗体药物的质量控制已成为全球生物制药企业及法规机构关注的热点,对单克隆抗体药物精确表征的需求日益增加。毛细管电泳技术具有分离效率高、分... 单克隆抗体药物在生物制药行业占有重要地位,是生物医药领域发展的主要方向。因此,单克隆抗体药物的质量控制已成为全球生物制药企业及法规机构关注的热点,对单克隆抗体药物精确表征的需求日益增加。毛细管电泳技术具有分离效率高、分析速度快、分离模式多、样品用量少等特点,已成为单克隆抗体药物分析和质量控制的重要手段。该文对毛细管凝胶电泳、毛细管等电聚焦、毛细管区带电泳等模式在单克隆抗体药物的纯度分析、等电点测定、电荷异质性分析和N-寡糖分析的应用进行综述,以期为国内单克隆抗体研究开发和生产的企事业单位提供技术参考。 展开更多

关键词 毛细管电泳 毛细管凝胶电泳 毛细管区带电泳 毛细管等电聚焦 单克隆抗体药物 纯度 电荷异质性 N-寡糖 综述

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SSR分子标记两种电泳方法在水稻品种上应用的比较

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作者 刘奇燕 《农业灾害研究》 2024年第5期19-21,共3页

为了研究聚丙烯酰胺电泳和毛细管电泳在水稻分子检测中的应用,以水稻品种为材料,分别使用聚丙烯酰胺凝胶电泳银染检测和毛细管电泳检测,并对2种电泳进行比较分析。结果表明,聚丙烯酰胺凝胶电泳对少量样本检测和引物筛选时更经济适用,毛... 为了研究聚丙烯酰胺电泳和毛细管电泳在水稻分子检测中的应用,以水稻品种为材料,分别使用聚丙烯酰胺凝胶电泳银染检测和毛细管电泳检测,并对2种电泳进行比较分析。结果表明,聚丙烯酰胺凝胶电泳对少量样本检测和引物筛选时更经济适用,毛细管电泳检测结果适用于指纹图谱和高通量材料的检测分析,试验中可以根据不同要求选择不同的电泳方法。 展开更多

关键词 水稻 SSR分子标记 聚丙烯酰胺凝胶电泳 毛细管电泳

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毛细管电泳在点突变筛选中的应用

19

作者 KeithR.Mitchelson 籍越 孙治强 《麦类文摘》 1998年第5期1-6,共6页

DNA 突变检测在许多领域(分子生物学、生态学、系统发育学和药物学)中十分重要,并已成为致病基因的特性鉴定和人类遗传疾病诊断的中心工作。已有几篇很好的综述性文章对点突变检测方法进行了详细的描述(Prosser,P.,1993;Hayashi,K.,1992... DNA 突变检测在许多领域(分子生物学、生态学、系统发育学和药物学)中十分重要,并已成为致病基因的特性鉴定和人类遗传疾病诊断的中心工作。已有几篇很好的综述性文章对点突变检测方法进行了详细的描述(Prosser,P.,1993;Hayashi,K.,1992;Smooker,P M.等,1993;Mitchelson,K.R.等,1995)。这些方法可大致分为两类:(1)检测已知突变的方法;(2)检测未知突变的方法。检测已知突变的方法(Hayashi.K.,1992)包括:等位基因特异的寡聚核苷酸杂交、等位基因特异扩增(ASA)。 展开更多

关键词 毛细管电泳 分辨率 突变筛选 突变检测方法 点突变 快速分析 琼脂糖凝胶电泳 等位基因特异 片段 突变分析

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基于CGE技术的甘蔗SSR-PCR反应体系优化 被引量：2

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作者 桂意云 陈忠良 +4 位作者 秦翠鲜 汪淼 刘丽敏 李杨瑞 黄东亮 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1463-1469,共7页

【目的】优化基于毛细管凝胶电泳（CGE）技术的甘蔗SSR-PCR反应体系,为甘蔗遗传多样性和亲缘关系研究、分子辅助育种及遗传图谱构建提供技术支持。【方法】基于CGE技术,采用正交试验设计,选择dNTPs浓度、DNA聚合酶量、引物浓度和DNA模... 【目的】优化基于毛细管凝胶电泳（CGE）技术的甘蔗SSR-PCR反应体系,为甘蔗遗传多样性和亲缘关系研究、分子辅助育种及遗传图谱构建提供技术支持。【方法】基于CGE技术,采用正交试验设计,选择dNTPs浓度、DNA聚合酶量、引物浓度和DNA模板量为考察因素进行优化,确定最佳SSR-PCR反应体系,并用于8个甘蔗种质资源材料的遗传多样性分析。【结果】最佳SSR-PCR反应体系（20μL）：dNTPs浓度0.15 mmol/L,DNA聚合酶1.5U,引物浓度0.50μmol/L,DNA模板量25 ng。利用该体系对8份来自不同国家地域的甘蔗种质材料进行遗传多样性分析,发现8对SSR引物共扩增出101个片段,其中多态性片段为93个,多态性比率为92.1%。聚类分析结果表明,参试材料间的遗传相似性系数为0.521-0.871,在相似性系数为0.614处,所有参试材料可分为两大类,3份国外种质材料PINDAR、CP72-1210、CP84-1198与ROC20、GT69-156聚为一类;而ROC26、GT02-237和GT97-69聚为另一类。【结论】基于CGE技术的SSR-PCR反应体系检测结果稳定,重复性好,适用于甘蔗的遗传分析及遗传作图。 展开更多

关键词 甘蔗 SSR分子标记 毛细管凝胶电泳(cge) 反应体系 遗传分析

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