毒蕈碱样乙酰胆碱受体及其信号转导 被引量：8

1

作者 王昊 郭政东 李智 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期230-234,共5页

毒蕈碱样乙酰胆碱受体 (MAChRs)是G蛋白偶联受体 (GPCRs)超家族中的一员 ,具有该家族特征性的结构和信号转导方式。GTP结合蛋白 (G proteins)是一类具有GTP酶活性的蛋白质 ,由α、β、γ三个亚基构成。其中α亚基结合GDP或GTP ,分别代表... 毒蕈碱样乙酰胆碱受体 (MAChRs)是G蛋白偶联受体 (GPCRs)超家族中的一员 ,具有该家族特征性的结构和信号转导方式。GTP结合蛋白 (G proteins)是一类具有GTP酶活性的蛋白质 ,由α、β、γ三个亚基构成。其中α亚基结合GDP或GTP ,分别代表G蛋白的非活化和活化状态。M受体与Gi/Go或Gq/ 11间的作用机制仍在探讨中 ,但基本过程与Gs介导的信号转导模式相似。激动剂持续作用后 。 展开更多

关键词 M受体 GTP结合蛋白 蛋白质三级结构 毒蕈碱样乙酰胆碱受体 信号转导

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毒蕈碱样乙酰胆碱受体功能的分子基础 被引量：8

2

作者 高占国 刘传缋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期292-294,共3页

毒蕈碱样乙酰胆碱受体功能的分子基础高占国刘传缋（军事医学科学院毒物药物研究所，北京１００８５０）中国图书分类号Ｒ９６６毒蕈碱样乙酰胆碱受体（Ｍ受体）属于与Ｇ蛋白相偶联的受体超大家族，它参与呼吸、循环、运动、体温调节和... 毒蕈碱样乙酰胆碱受体功能的分子基础高占国刘传缋（军事医学科学院毒物药物研究所，北京１００８５０）中国图书分类号Ｒ９６６毒蕈碱样乙酰胆碱受体（Ｍ受体）属于与Ｇ蛋白相偶联的受体超大家族，它参与呼吸、循环、运动、体温调节和学习记忆等重要生理功能。受体药理学... 展开更多

关键词 毒蕈碱样 乙酰胆碱受体 结构 功能

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激活毒蕈碱乙酰胆碱受体调控下颌下腺分泌的机制研究 被引量：3

3

作者 丛馨 闵赛南 +2 位作者 吴立玲 蔡志刚 俞光岩 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期390-396,共7页

下颌下腺作为三大唾液腺之一,其所分泌的唾液占静止性唾液的60%~65%,对维持摄食、味觉、抑制或杀灭病菌、保护口腔软组织及牙齿等起重要作用。全身性疾病如舍格伦综合征[又称干燥综合征(Sj gren’s syndrome, SS)]、IgG4相关性疾病等,... 下颌下腺作为三大唾液腺之一,其所分泌的唾液占静止性唾液的60%~65%,对维持摄食、味觉、抑制或杀灭病菌、保护口腔软组织及牙齿等起重要作用。全身性疾病如舍格伦综合征[又称干燥综合征(Sj gren’s syndrome, SS)]、IgG4相关性疾病等,以及局部疾病如慢性下颌下腺炎、下颌下腺放射性损伤等,可引起腺体的分泌功能低下,严重者不仅有明显的口腔黏膜干燥,还可继发猖獗龋和念珠菌感染等。2018年一项流行病学研究显示,唾液低分泌与日本社区老年男性10年死亡率呈正相关,可作为一个潜在的健康预测指标[1]。全面、深入地认识下颌下腺分泌的调控机制对探索有效的干预措施和防治唾液腺分泌功能低下具有重要的意义。 展开更多

关键词 毒蕈碱乙酰胆碱受体 下颌下腺 分泌 水通道蛋白 紧密连接

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毒蕈碱乙酰胆碱受体新成员:孤儿受体m_5 被引量：2

4

作者 王昊 陆阳 陈红专 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期156-158,共3页

m5受体是M受体家族一个新成员 ,与其它亚型相比 ,由于缺乏高选择性配体和标记条件以及富含m5受体的组织来源 ,目前对其分子结构、结合特性、组织分布、生理功能等知之甚少。随着免疫沉淀、原位杂交和药理学标记方法的发展 ,现已证实m5... m5受体是M受体家族一个新成员 ,与其它亚型相比 ,由于缺乏高选择性配体和标记条件以及富含m5受体的组织来源 ,目前对其分子结构、结合特性、组织分布、生理功能等知之甚少。随着免疫沉淀、原位杂交和药理学标记方法的发展 ,现已证实m5受体主要分布于大脑皮质最外层 ,海马齿状回、CA1、CA2区 ,嗅结节 ,横核以及外周血淋巴细胞、单核细胞、睫状肌等部位 ,提示m5受体在调节大脑和外周组织胆碱能神经活动方面具有独特而重要的作用 ,有可能成为治疗帕金森病、阿尔采末病、局灶性脑缺血等疾病新的药物靶点。 展开更多

关键词 毒蕈碱乙酰胆碱受体 孤儿受体m5 G蛋白偶联受体 M受体

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昆虫毒蕈碱型乙酰胆碱受体的分子进化、功能及药理学研究 被引量：1

5

作者 姜鸣 张雅林 吕淑敏 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2014年第5期814-819,共6页

毒蕈碱型乙酰胆碱受体(muscarinic acetylcholine receptor,mAchR)是昆虫神经系统中一种十分重要的神经递质受体,属于G蛋白偶联受体超家族,与配体结合后激活G蛋白并通过胞内第二信使产生生物学效应,参与昆虫多种神经生理功能,是农药开... 毒蕈碱型乙酰胆碱受体(muscarinic acetylcholine receptor,mAchR)是昆虫神经系统中一种十分重要的神经递质受体,属于G蛋白偶联受体超家族,与配体结合后激活G蛋白并通过胞内第二信使产生生物学效应,参与昆虫多种神经生理功能,是农药开发的一个潜在靶标。昆虫毒蕈碱型乙酰胆碱受体的研究,有助于提高昆虫神经生理及行为调节机制等方面的认识,并为以此为靶标的新型杀虫剂研制提供新思路。本文综述了国内外对昆虫毒蕈碱型乙酰胆碱受体的研究概况,并对GenBank中已上传的昆虫mAchR序列进行了分子进化分析,最后对昆虫mAchR研究中存在的问题及前景进行了分析和展望。 展开更多

关键词 昆虫 毒蕈碱型乙酰胆碱受体 分子生物学 药理学

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昆虫毒蕈碱型乙酰胆碱受体的研究进展 被引量：4

6

作者 李建芳 成杨 +1 位作者 陆永跃 齐易香 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2021年第1期66-78,共13页

毒蕈碱型乙酰胆碱受体(Muscarinic Acetylcholine Receptors,mAChRs)是昆虫神经系统中一类重要的G蛋白偶联受体。昆虫mAChRs可以分为A、B、C型三大类,它们通过偶联不同的G蛋白激活不同的第二信使,完成信号转导过程,从而发挥其功能。mAC... 毒蕈碱型乙酰胆碱受体(Muscarinic Acetylcholine Receptors,mAChRs)是昆虫神经系统中一类重要的G蛋白偶联受体。昆虫mAChRs可以分为A、B、C型三大类,它们通过偶联不同的G蛋白激活不同的第二信使,完成信号转导过程,从而发挥其功能。mAChRs参与调控昆虫多种生理反应和行为过程,如生长发育、运动、鸣声、嗅觉以及学习记忆等,是潜在的杀虫剂靶标,对昆虫mAChRs的全面研究有助于开发新型杀虫剂。本文较为全面地综述了近年来国内外昆虫mAChRs的组织分布、信号转导、药理学特性以及生理功能等方面的研究新进展,为今后研究该类受体提供参考。 展开更多

关键词 昆虫 毒蕈碱乙酰胆碱受体 药理学 生理功能

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血清毒蕈碱乙酰胆碱受体m3自身抗体水平对甲胎蛋白阴性肝细胞癌的诊断价值 被引量：4

7

作者 亚库甫·托合提 张凯楠 +4 位作者 赵辉 吾布里塔里甫·达吾提 张蕊 林仁勇 吕国栋 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2022年第17期2110-2114,共5页

背景肝细胞癌(HCC)是一种恶性程度较高的癌症。甲胎蛋白(AFP)是临床常用的HCC诊断标志物,但其灵敏度仅为41%~65%,漏诊率较高,因此亟须寻找新的诊断标志物和诊断方法以提升AFP阴性患者等的HCC检出率。目的评估毒蕈碱乙酰胆碱受体m3自身抗... 背景肝细胞癌(HCC)是一种恶性程度较高的癌症。甲胎蛋白(AFP)是临床常用的HCC诊断标志物,但其灵敏度仅为41%~65%,漏诊率较高,因此亟须寻找新的诊断标志物和诊断方法以提升AFP阴性患者等的HCC检出率。目的评估毒蕈碱乙酰胆碱受体m3自身抗体(m3AchR-Ab)对AFP阴性HCC患者的诊断效能,并探索m3AchR-Ab对HCC患者的诊断价值。方法选取2011年11月至2015年9月入库于新疆医科大学第一附属医院标本库的257例患者血清样本,其中90例已确诊为HCC患者的血清样本为HCC组,89例已确诊为良性肝病(肝硬化及肝血管瘤等肝病)患者的血清样本为良性肝病组,78例健康受试者的血清样本为对照组。使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测并比较3组血清m3AchR-Ab水平,分析血清m3AchR-Ab水平与HCC患者性别、年龄、HCC肿瘤大小(最大直径)和数量、TNM分期、淋巴结转移、远处转移、乙肝表面抗原(HBsAg)的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清m3AchR-Ab水平对AFP阴性HCC的诊断价值。结果HCC组血清m3AchR-Ab水平高于良性肝病组和对照组血清(P<0.05)。m3AchR-Ab水平与HCC肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移和HBsAg相关(P<0.05)。血清m3AchR-Ab水平诊断AFP阴性HCC的ROC曲线下面积为0.69〔95%CI(0.54,0.83)〕,最佳截断值为74.00 ng/ml,灵敏度为64.00%,特异度为91.02%。血清m3AchR-Ab联合AFP水平诊断HCC的ROC曲线下面积为0.90〔95%CI(0.85,0.95)〕,灵敏度为90.00%,特异度为88.02%。结论血清m3AchR-Ab水平对AFP阴性HCC具有一定的诊断价值,且使用m3AchR-Ab和AFP联合诊断可提高HCC诊断效能,这可为未来研究新型HCC诊断标志物提供更多参考。 展开更多

关键词 肝肿瘤 甲胎蛋白类 毒蕈碱乙酰胆碱受体m3自身抗体 生物标志物 灵敏度 特异度 影响因素分析 诊断

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毒蕈碱型乙酰胆碱受体的鼻黏膜效应

8

作者 徐江 韩笑 +1 位作者 Nancy E.Rawson 张立克 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期261-263,共3页

副交感神经参与鼻黏膜腺体和血管的功能调节。当各种异物、细菌、病毒或真菌侵入机体时,鼻黏膜微环境发生改变,这种变化刺激副交感神经释放乙酰胆碱。后者与调节鼻腺体和血管的毒蕈碱型乙酰胆碱受体(M-ChR)结合,导致鼻炎流涕和鼻塞。这... 副交感神经参与鼻黏膜腺体和血管的功能调节。当各种异物、细菌、病毒或真菌侵入机体时,鼻黏膜微环境发生改变,这种变化刺激副交感神经释放乙酰胆碱。后者与调节鼻腺体和血管的毒蕈碱型乙酰胆碱受体(M-ChR)结合,导致鼻炎流涕和鼻塞。这种整体调节反射对下呼吸道起重要的防御性保护作用。目前发现五种M-ChR亚型(M1-至M5-ChR),鼻黏膜有M1-至M3-ChR亚型。高密度的M1-和M3-ChR共存于黏膜下腺黏液和浆液细胞,M3-ChR主要分布于血管。M-ChR对鼻腺体和血管的直接调节作用是通过细胞内腺苷酸环化酶和磷酯酶C激活。 展开更多

关键词 鼻黏膜 毒蕈碱 乙酰胆碱受体

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烟碱样乙酰胆碱受体及其有关杀虫药剂 被引量：7

9

作者 吴青君 张文吉 张友军 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期39-41,共3页

对烟碱基本结构作适当调整 ,出现新一代烟碱类似物 ,其杀虫活性和稳定性明显高于烟碱 ,它们的作用靶点因此受到人们的重视。本文重点阐述了烟碱样乙酰胆碱受体的分子结构和药理特性 ,并简要介绍其有关的杀虫药剂。

关键词 烟碱样乙酰胆碱受体 分子结构 药理性质 杀虫剂

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创伤性脑损伤与毒蕈碱型胆碱受体的相关研究进展 被引量：2

10

作者 李坪 于建云 +3 位作者 郭泽云 许冰莹 李娟娟 赵旭东 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期99-102,共4页

关键词 创伤性脑损伤 胆碱能系统 胆碱能受体 毒蕈碱 学习记忆能力 急救医学 乙酰胆碱 国民经济

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α7烟碱型乙酰胆碱受体在阿尔茨海默病中的作用 被引量：1

11

作者 丁道波 牟文君 +3 位作者 李鑫 陈欢 侯宏卫 胡清源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第11期2897-2904,共8页

随着全球人口老龄化的加剧,阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)发病率持续上升,目前已成为最常见的神经退行性疾病之一。尽管研究人员对AD的病理特征有深入的了解,如淀粉样斑块、Tau蛋白异常磷酸化形成神经元纤维缠结等,但其确切的... 随着全球人口老龄化的加剧,阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)发病率持续上升,目前已成为最常见的神经退行性疾病之一。尽管研究人员对AD的病理特征有深入的了解,如淀粉样斑块、Tau蛋白异常磷酸化形成神经元纤维缠结等,但其确切的病因和发病机制仍不完全清楚。α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)是中枢神经系统中重要的乙酰胆碱受体亚型,广泛分布于大脑的多个区域,尤其是与学习和记忆相关的海马和皮质区域,在神经递质释放、神经可塑性、细胞信号转导以及炎症反应中发挥重要功能。近年来,α7nAChR在AD中的作用受到广泛关注。研究表明,α7nAChR参与β淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)代谢、Tau蛋白磷酸化、神经炎症反应、氧化应激等AD发病进程中的多个重要环节,提示α7nAChR在AD的发病机制中扮演着重要角色,有望作为AD潜在治疗靶点。本综述旨在总结α7nAChR与AD发病的关联及其研究进展,为未来的疾病治疗提供可能的研究方向。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 Α7烟碱型乙酰胆碱受体 Β淀粉样蛋白 TAU蛋白 神经炎症

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肝络通对门静脉高压症大鼠肝组织α7-烟碱样乙酰胆碱受体的影响 被引量：3

12

作者 姜俊杰 杜庆红 +2 位作者 韩琳 Arezou Mashoufi 李澎涛 《世界科学技术-中医药现代化》 2010年第3期383-386,共4页

目的:分析肝络通对门静脉高压症大鼠肝组织中α7-烟碱样乙酰胆碱受体表达的影响特征,探讨肝络通治疗门静脉高压症的可能机制。方法:取体重240～260g的清洁级雄性SD大鼠40只,根据体重随机分为假手术组、2周模型组、2周肝络通组、4周模型... 目的:分析肝络通对门静脉高压症大鼠肝组织中α7-烟碱样乙酰胆碱受体表达的影响特征,探讨肝络通治疗门静脉高压症的可能机制。方法:取体重240～260g的清洁级雄性SD大鼠40只,根据体重随机分为假手术组、2周模型组、2周肝络通组、4周模型组、4周肝络通组。模型组及给药组采用胆总管结扎术(CBDL)对大鼠进行造模,分别于造模2周、4周测量门静脉压力,并用免疫印迹法检测α7-烟碱样乙酰胆碱受体(nAchRα7)在肝组织中的表达。结果:胆总管结扎后2周和4周门静脉压力均显著升高,模型组nAchRα7的表达较假手术组明显增多,门静脉压力和nAchRα7的表达具有随术后时间延长而加重的一致性趋势。肝络通组门静脉压力显著低于模型组,术后4周作用最为显著;2周肝络通组nAchRα7的表达与2周模型组比较无显著差异,4周肝络通组较4周模型组显著减少。结论:肝组织nAchRα7的表达变化与门静脉压力变化具有一致性趋势,肝络通降低门静脉压力的作用可能与调节肝组织内nAchRα7的表达有关。 展开更多

关键词 肝络通 α7-烟碱样乙酰胆碱受体 门静脉高压症 肝组织

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α7烟碱样乙酰胆碱受体在重症肌无力患者外周血单个核细胞中的表达及对T细胞活化的影响 被引量：4

13

作者 黄朋伟 庞天宝 +3 位作者 陈嘉捷 刘萍萍 崔新征 张清勇 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2020年第4期463-467,共5页

目的:探讨α7烟碱样乙酰胆碱受体(α7 nAChR)在重症肌无力(MG)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及其对T细胞活化的影响。方法:采用qRT-PCR、Western blot法检测健康对照组(n=20)及MG患者组(n=20)PBMC中α7 nAChR的表达情况,用ELISA... 目的:探讨α7烟碱样乙酰胆碱受体(α7 nAChR)在重症肌无力(MG)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及其对T细胞活化的影响。方法:采用qRT-PCR、Western blot法检测健康对照组(n=20)及MG患者组(n=20)PBMC中α7 nAChR的表达情况,用ELISA检测血清IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-6、IL-10和IL-12水平。收集MG患者的PBMC,诱导T细胞活化,将活化的T细胞分为空白对照组、α7 nAChR拮抗剂组、α7 nAChR激动剂组,培养72 h后采用流式细胞术检测T细胞亚群的增殖情况,并用ELISA检测培养液上清中IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-6、IL-10和IL-12水平。结果:与健康对照组相比,MG患者组α7 nAChR mRNA及蛋白表达水平降低,血清IFN-γ、TNF-α、IL-6、IL-12水平升高(P均<0.001)。与空白对照组相比,α7 nAChR拮抗剂组T细胞亚群增殖增强,IFN-γ、TNF-α、IL-6水平升高(P均<0.05),而α7 nAChR激动剂组T细胞亚群增殖受抑,IFN-γ、TNF-α、IL-6水平降低(P均<0.05)。结论:α7 nAChR在MG患者PBMC中的表达降低,α7 nAChR可能参与调控MG的发生。 展开更多

关键词 α7烟碱样乙酰胆碱受体 重症肌无力 T细胞 细胞因子

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海马神经元α7型烟碱样乙酰胆碱受体的失敏特征

14

作者 沈磊 崔文玉 +1 位作者 陈汝筑 汪海 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1756-1761,共6页

目的研究大鼠海马神经元α7型烟碱样乙酰胆碱受体(α7-nAChR)的失敏特征。方法在培养大鼠海马神经元上,以胆碱作为工具药,采用膜片钳全细胞记录方式研究胆碱诱发α7型烟碱样乙酰胆碱受体失敏的电生理学特征。结果在培养大鼠海马神经元上... 目的研究大鼠海马神经元α7型烟碱样乙酰胆碱受体(α7-nAChR)的失敏特征。方法在培养大鼠海马神经元上,以胆碱作为工具药,采用膜片钳全细胞记录方式研究胆碱诱发α7型烟碱样乙酰胆碱受体失敏的电生理学特征。结果在培养大鼠海马神经元上,喷射胆碱可诱发出一内向电流,能被α7-nAChR选择性拮抗剂methyllycaconitine(10 nmol.L-1)和α-bungarotoxin(100 nmol.L-1)明显阻断;延长高浓度胆碱(10 mmol.L-1)的给药时间不影响α7-nAChR的失敏和失敏态的恢复,但可以延长其处于完全失敏态的时间;灌流低浓度胆碱(50、100μmol.L-1)可以使α7-nAChR缓慢失敏,失敏程度与胆碱浓度有关。结论高浓度胆碱诱发α7-nAChR的快速失敏及恢复与给药时间无关,低浓度胆碱诱发受体的缓慢失敏及恢复与浓度有关。 展开更多

关键词 α7型烟碱样乙酰胆碱受体 失敏 海马神经元 胆碱 膜片钳 浓度依赖性

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烟碱样乙酰胆碱受体的离子通道特性

15

作者 赵锁安 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1989年第2期154-157,共4页

烟碱样乙酰胆碱受体(AChR)是一种配基门控性离子通道,由5个亚单位(α_2βγα)构成。利用非洲蟾蜍卵母细胞的表达系统可以研究AChR的通道特性和各亚单位所起的作用。电鳗电器官AChR和小牛肌AChR之间门控特性的差别,主要是由δ亚单位决定... 烟碱样乙酰胆碱受体(AChR)是一种配基门控性离子通道,由5个亚单位(α_2βγα)构成。利用非洲蟾蜍卵母细胞的表达系统可以研究AChR的通道特性和各亚单位所起的作用。电鳗电器官AChR和小牛肌AChR之间门控特性的差别,主要是由δ亚单位决定的;而小牛肌成年型AChR与胚胎型AChR之间的差别,则由ε亚单位决定。 展开更多

关键词 烟碱样 乙酰胆碱 受体 离子通道

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毒蕈碱受体亚型对人食管下括约肌的调节作用 被引量：2

16

作者 温士旺 刘俊峰 +4 位作者 高立平 李保庆 王福顺 王其彰 田子强 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期889-893,共5页

目的探讨毒蕈碱受体亚型对人食管下括约肌套索纤维和钩状纤维胆碱能收缩的调节作用。方法选取高位食管中段癌行食管大部切除术患者32例，取食管、胃接合部标本分离套索纤维和钩状纤维，做M1～M4受体选择性拮抗剂哌仑西平、美索曲明、4-D... 目的探讨毒蕈碱受体亚型对人食管下括约肌套索纤维和钩状纤维胆碱能收缩的调节作用。方法选取高位食管中段癌行食管大部切除术患者32例，取食管、胃接合部标本分离套索纤维和钩状纤维，做M1～M4受体选择性拮抗剂哌仑西平、美索曲明、4-DAMP、托品酰胺的Schild曲线，并由此计算pA2。结果①M1～M4受体选择性拮抗剂均使ACh诱导套索纤维和钩状纤维的浓度—效应曲线发生右移，每条拮抗曲线形状类似。②4-DAMP在两肌纤维的pA2分别是8．18±0．76和8．05±1. 11，较其它3种拮抗剂大（F=47，4，P=0．00），而同一拮抗剂在两肌纤维的pA2无差异（F=1．36，P=0．24）。结论ACh诱导两种肌纤维的收缩主要由M3受体介导；2种肌纤维间没有毒蕈碱受体亚型功能的差异。 展开更多

关键词 食管下括约肌 毒蕈碱受体 乙酰胆碱 拮抗剂

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不同配体对m_5乙酰胆碱受体-G蛋白亚单位G_(11)融合蛋白表达和功能的影响 被引量：2

17

作者 郭政东 王海波 +3 位作者 李智 刘洪瑞 郭政礼 赵立斌 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期11-16,共6页

目的　制备毒蕈碱乙酰胆碱受体m5亚型与G 蛋白亚单位G1 1 (m5AChR G1 1 )融合蛋白 ,探索m5AChR与G1 1 之间的耦联功能、相互作用及其影响因素。方法　两步PCR法建立m5AChR与G1 1 融合cDNAs,并在Sf9细胞内表达。 [3 H]QNB和 [3 5S]GTPγ... 目的　制备毒蕈碱乙酰胆碱受体m5亚型与G 蛋白亚单位G1 1 (m5AChR G1 1 )融合蛋白 ,探索m5AChR与G1 1 之间的耦联功能、相互作用及其影响因素。方法　两步PCR法建立m5AChR与G1 1 融合cDNAs,并在Sf9细胞内表达。 [3 H]QNB和 [3 5S]GTPγS结合实验检测m5AChR与G1 1 融合蛋白的功能。结果m5AChR G1 1 融合蛋白的表达水平为 (60 .4± 2 .0 )nmol·g-1 膜蛋白。不同配体存在使融合蛋白中G1 1 与GDP的亲和力发生变化。乙酰胆碱(ACh)、卡巴胆碱、毛果芸香碱、异丙铵、异丙嗪及阿托品存在时 ,GDP的IC50值分别为 1 35,63 ,1 82 ,4.1 ,8.9和 5.9μmol·L-1 ,无配体存在时 ,GDP的IC50 值为 2 3.4μmol·L-1 。结论　杆状病毒Sf9细胞系统表达的m5AChR G1 1 融合蛋白具备m受体配体结合特性和组分间耦联的功能。m5AChR G1 1 融合蛋白对GDP亲和力取决于m受体配体的性质 。 展开更多

关键词 配体 毒蕈碱 G蛋白类 融合蛋白 胆碱能激动剂 胆碱能拮抗剂 乙酰胆碱受体

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在Sf9昆虫细胞-杆状病毒系统中表达毒蕈碱型M_2及M_5受体重组突变体 被引量：1

18

作者 牟男 孙洪良 +1 位作者 郑建全 王丽韫 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期320-326,共7页

目的为乙酰胆碱毒蕈碱(M)受体亚型特异性的变构调节剂及基因工程的研究提供实验平台。方法用PCR及搭桥PCR法对乙酰胆碱M2及M5受体作以下突变:①将N-糖基化位点Asp突变为Asn;②删除对蛋白酶敏感的M受体的第三个细胞内环;③在C端添加凝血... 目的为乙酰胆碱毒蕈碱(M)受体亚型特异性的变构调节剂及基因工程的研究提供实验平台。方法用PCR及搭桥PCR法对乙酰胆碱M2及M5受体作以下突变:①将N-糖基化位点Asp突变为Asn;②删除对蛋白酶敏感的M受体的第三个细胞内环;③在C端添加凝血酶识别位点(CMV)和6-His标记。将PCR扩增出重组嵌合蛋白基因亚克隆到杆状病毒转移载体,制备重组杆状病毒并感染昆虫细胞表达M2/M5受体蛋白。Western印迹及放射性配体受体结合实验验证受体的正确表达及功能。结果通过搭桥PCR,成功扩增出1018 bp的重组M2受体和1041 bp重组M5受体核酸序列;使用pUC/M13的扩增引物成功构建M2/M5重组转移载体。将重组载体质粒与线性化病毒DNA共转染昆虫细胞Sf9,制备重组杆状病毒并感染昆虫细胞,见细胞空泡样病变。Western印迹分析确定重组杆状病毒感染昆虫细胞M2/M5蛋白表达,放射性配体受体饱和实验结果表明,表达的重组受体蛋白与[3H]N-甲基-东莨菪碱具有特异性结合能力。结论 Sf9昆虫细胞能够表达M2及M5重组受体蛋白,M2及M5重组受体蛋白的病毒样颗粒可用于M受体的新药研究。 展开更多

关键词 乙酰胆碱 毒蕈碱受体 昆虫细胞 杆状病毒 基因克隆 基因表达

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N-乙酰胆碱受体动力学研究

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作者 张守兰 林福生 +1 位作者 余琳 刘敏 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 1999年第4期286-291,共6页

目的 开展N-乙酰胆碱受体(N-AChR)的动力学研究.方法 (1)选择a-BuTX作为主要工具药,进行^(125)I-a-BuTX与电鳐电器官的N-AChR饱和结合实验,用Scatfit程序拟合。125I-a-BuTX与电鳐电器官的N-AChR结合的解离动力学实验,当结合达到饱合后,... 目的 开展N-乙酰胆碱受体(N-AChR)的动力学研究.方法 (1)选择a-BuTX作为主要工具药,进行^(125)I-a-BuTX与电鳐电器官的N-AChR饱和结合实验,用Scatfit程序拟合。125I-a-BuTX与电鳐电器官的N-AChR结合的解离动力学实验,当结合达到饱合后,向两个反应体系分别加入1000倍以上的a-BuTX或烟碱.不同时间取样、分离后,γ-计数仪计数。(2) 13日龄的鸡胚骨骼肌N-AChR及20日龄的鸡视叶的N-AChR与^(125)-I-a-BuTX饱和结合实验,用Scaifit程序拟合。另外以烟碱对125I-a-BuTX与电鳐电器官、鸡视叶、鸡胚骨骼肌N-AChR结合的竞争实验,用Logit程序计算IC_(50)值。结果(1)1251-a-BuTX与电鳐电器官的N-AChR饱和结合实验得到一条双曲线的Scatchard图,符合一配基两受体结合模型,求得高、低两个结合位点和两个B_(max)(最大结合值),两个体系的解离动力学均为二次解离曲线,分别求得两个解离常数和两个半衰期.(2)两种实验结果,均符合一配基一受体结合模型,分别求得一个结合位点和一个B_(max).烟碱对^(125)-I-a-BuTX电鳐电器官的N-AChR结合的竞争作用IG_(50)值分别为3.86×10^(-5)和1.65×10^(-6)mol.对鸡视叶的N-AChR竞争作用.IC_(50)值为6.02×10^(-7)mol,对骨骼肌竞争作用IG_(50)值为4.60×10^(-6)。结论 (1) 展开更多

关键词 动力学 N-乙酰胆碱受体 α-银环蛇毒(α-BuTX) 饱和结合实验 毒蕈碱

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豚鼠胃平滑肌上不同亲和力的毒蕈碱受体 被引量：1

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作者 阮英 李智 +2 位作者 丛华 张克义 赫梅生 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1989年第2期89-92,共4页

采用离体功能实验,测定豚鼠胃底、体、窦部纵、环平滑肌由乙酰胆碱和阿托品引起的PD_2及PA_2。胃底、体部纵、环肌间的PD_2和PA_2差异非常显著,而窦部数值相近。结果提示:胃底、体部纵、环肌上可能存在高、低两种不同亲和性的毒草碱受体... 采用离体功能实验,测定豚鼠胃底、体、窦部纵、环平滑肌由乙酰胆碱和阿托品引起的PD_2及PA_2。胃底、体部纵、环肌间的PD_2和PA_2差异非常显著,而窦部数值相近。结果提示:胃底、体部纵、环肌上可能存在高、低两种不同亲和性的毒草碱受体,胃窦部则以低亲和性毒蕈碱受体为主。 展开更多

关键词 胃平滑肌 毒蕈碱受体 乙酰胆碱 鼠

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