捕食性益蝽毒腺转录组学分析

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作者 李金梦 苏奇 +5 位作者 李文红 汪汉成 田旭 王清 张兴红 董祥立 《昆虫学报》 北大核心 2025年第7期887-897,共11页

【目的】益蝽Picromerus lewisi为中国、朝鲜和日本等多个亚洲国家分布的重要捕食性天敌昆虫,主要应用于防治鳞翅目(Lepidoptera)害虫。在捕食猎物时,毒液会导致猎物快速麻痹和死亡,起到了至关重要的作用。本研究旨在了解益蝽毒腺转录... 【目的】益蝽Picromerus lewisi为中国、朝鲜和日本等多个亚洲国家分布的重要捕食性天敌昆虫,主要应用于防治鳞翅目(Lepidoptera)害虫。在捕食猎物时,毒液会导致猎物快速麻痹和死亡,起到了至关重要的作用。本研究旨在了解益蝽毒腺转录组特征,探究益蝽毒素多样性,为进一步研究益蝽毒液的成分与功能奠定基础。【方法】通过高通量测序平台Illumina Novaseq 6000对采自贵州省黔西南州的益蝽成虫和5龄若虫毒腺进行转录组测序,利用NR,NT,Pfam,KOG/COG,Swiss-Prot,KEGG和GO数据库进行注释;通过FPKM方法评估益蝽毒腺样品中的基因表达情况,采用DESeq进行成虫和5龄若虫毒腺转录组间差异表达分析。将|log 2(Fold change)|>1且P<0.05作为标准筛选成虫和5龄若虫毒腺转录组间差异表达基因,对差异表达基因进行GO功能和KEGG通路富集分析;将益蝽成虫和5龄若虫毒腺转录组测序得到的33215条转录本在UniProt数据库中进行BLAST比对。【结果】益蝽成虫和5龄若虫毒腺转录组测序组装到22242条unigenes,平均长949 bp。有15364条unigenes注释至NR,NT,Pfam,Swiss-Prot,GO,KOG/COG和KEGG数据库,这些unigenes经注释共比对到10个近缘物种,其中包含3种蝽和2种蜘蛛。成虫和5龄若虫毒腺转录组间筛选到344个差异表达基因,218个基因上调,126个基因下调,共鉴定到33类443条编码毒素蛋白相关序列。【结论】本研究测序获得了益蝽5龄若虫和成虫的毒腺转录组数据,筛选获得了成虫和5龄若虫毒腺转录组间的差异蛋白,并鉴定了毒素蛋白相关序列,为益蝽毒液组分的鉴定和生物学功能的研究奠定了一定的理论基础。 展开更多

关键词 益蝽 毒腺 转录组 高通量测序 生物信息学

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平颏海蛇毒腺cDNA表达文库的构建 被引量：13

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作者 钟肖芬 卫剑文 +2 位作者 赵贵军 吴文言 徐安龙 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期66-69,共4页

以真核表达载体质粒pcDNA3为载体 ,成功构建了一个高质量的平颏海蛇毒腺cDNA表达文库 ,这是国内首个海蛇cDNA文库 .通过对亚文库克隆的大规模序列测定和分析 ,发现了 38个海蛇新基因序列 ,其中包括神经毒素基因、磷酸脂酶A2 基因和半胱... 以真核表达载体质粒pcDNA3为载体 ,成功构建了一个高质量的平颏海蛇毒腺cDNA表达文库 ,这是国内首个海蛇cDNA文库 .通过对亚文库克隆的大规模序列测定和分析 ,发现了 38个海蛇新基因序列 ,其中包括神经毒素基因、磷酸脂酶A2 基因和半胱氨酸丰富毒蛋白基因共 10个编码海蛇毒素蛋白的新基因 . 展开更多

关键词 平颏海蛇 毒腺 CDNA表达文库

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金钱鱼毒腺cDNA表达文库的构建及EST序列分析 被引量：9

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作者 陈慧萍 姜孝玉 +4 位作者 涂洪斌 杜晶春 卫剑文 杨文利 徐安龙 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期166-170,共5页

以金钱鱼 (Scatophagusargus)毒腺为出发材料 ,构建以真核表达载体pcDNA3 0为基础的金钱鱼毒腺cDNA表达文库 .应用SMARTTM cDNALibraryConstruction技术和生物信息学分析等方法 ,通过对文库克隆的序列测定和初步生物信息学分析 ,获得了 ... 以金钱鱼 (Scatophagusargus)毒腺为出发材料 ,构建以真核表达载体pcDNA3 0为基础的金钱鱼毒腺cDNA表达文库 .应用SMARTTM cDNALibraryConstruction技术和生物信息学分析等方法 ,通过对文库克隆的序列测定和初步生物信息学分析 ,获得了 2 0 1个金钱鱼新表达序列标签 (ESTs) ,其中已确定全长cDNA的克隆有 2 7个 ,包括多个核糖体大小亚基蛋白 (ribosomalprotein)、细胞凋亡相关蛋白 (programmedcelldeath 10 ) ,G蛋白信号调控子 (Gproteinsignalingregulator)、胸腺素(thymosinbeta 4 )、延伸因子 (translationelongationfactor 1 alpha)和泛素 (ubiquitin)等 .金钱鱼毒腺cDNA表达文库的成功构建 ,为研究金钱鱼毒腺的活性组分及其作用机制奠定了基础 。 展开更多

关键词 金钱鱼 毒腺 CDNA 表达文库 EST 序列分析 功能基因

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日本鬼鲉毒腺cDNA表达文库的构建和初步分析 被引量：8

4

作者 姜孝玉 涂洪斌 +4 位作者 陈慧萍 卫剑文 杨文利 吴文言 徐安龙 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第3期424-428,共5页

以海洋生物日本鬼鲉毒腺为材料 ,应用SMARTTM cDNALibraryConstruction技术 ,构建以真核表达载体pcDNA3 0为基础的日本鬼鲉毒腺cDNA表达文库 .通过对文库克隆的序列测定和初步生物信息学分析 ,获得 94个日本鬼鲉毒腺新表达序列标签 (EST... 以海洋生物日本鬼鲉毒腺为材料 ,应用SMARTTM cDNALibraryConstruction技术 ,构建以真核表达载体pcDNA3 0为基础的日本鬼鲉毒腺cDNA表达文库 .通过对文库克隆的序列测定和初步生物信息学分析 ,获得 94个日本鬼鲉毒腺新表达序列标签 (ESTs) ,其中已确定全长cDNA的克隆有 35个 ,包括溶细胞素基因、类短链神经毒素蛋白、C型凝集素、巨噬细胞迁移抑制因子、致病相关基因等 ,这些基因在日本鬼鲉中绝大多数为首次发现 .日本鬼鲉毒腺cDNA表达文库的成功构建 ,为深入研究日本鬼鲉毒腺的组分及其分子作用机理奠定了基础 . 展开更多

关键词 日本鬼Yuo 毒腺 CDNA表达文库 刺毒鱼类

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松树蜂毒腺转录组分析 被引量：5

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作者 高成龙 敖特根 +3 位作者 任利利 王立祥 王明 石娟 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1038-1047,共10页

【目的】构建入侵种松树蜂Sirex noctilio毒腺转录组数据库,筛选并分析松树蜂毒腺基因数据。【方法】采用新一代高通量测序平台Illumina HiSeqTM 4000对松树蜂雌成虫毒腺进行转录组测序、数据组装和生物信息学分析。【结果】共获得12.7... 【目的】构建入侵种松树蜂Sirex noctilio毒腺转录组数据库,筛选并分析松树蜂毒腺基因数据。【方法】采用新一代高通量测序平台Illumina HiSeqTM 4000对松树蜂雌成虫毒腺进行转录组测序、数据组装和生物信息学分析。【结果】共获得12.7 Gb松树蜂雌成虫毒腺有效转录组数据,并组装到37 098条unigenes,平均长度968 bp,N50长度为2 364 bp。将所得的unigenes数据使用BlastX与各大数据库比对,共注释到13 515条unigenes,并且在NR数据库中注释的unigenes最多,共11 108条(占总数的29.94%),其中相似基因占比最高的物种为丽蝇蛹集金小蜂Nasonia vitripennis,达815条(占总数的7.29%)。在GO数据库中注释到5 726条unigenes,根据功能被分为生物学进程、细胞组分和分子功能3大类63个亚类。KEGG代谢通路分析表明,7 602条unigenes注释到357个代谢通路。根据基因注释信息进一步筛选到43条嗅觉相关基因,包括嗅觉受体(odorant receptor, Or)基因25条、化学感受蛋白(chemosensory protein, CSP)基因10条、离子型受体(ionotropic receptor, IR)基因5条和气味结合蛋白(odorant binding protein, OBP)基因3条。此外,还筛选出11条漆酶基因,包括漆酶1(laccase1, LAC1)基因5条、漆酶2(laccase2, LAC2)基因4条、漆酶4(laccase4, LAC4)基因1条和漆酶9(laccase9, LAC9)基因1条,且其中1条LAC2基因在所有被注释的基因中表达量最高(FPKM值=21 126)。【结论】本研究获得的松树蜂毒腺转录组数据为松树蜂毒液组分的鉴定和生物学功能的研究奠定了一定的理论基础。 展开更多

关键词 松树蜂 毒腺 转录组 数据库 嗅觉相关基因 漆酶

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中国沿海常见棘毒鱼类的毒性研究──日本鬼鮋背鳍棘中的毒腺结构 被引量：6

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作者 刘晓萍 于业军 张克凌 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期597-603,共7页

于1996年6月—1997年6月，在山东青岛、日照沿海采集日本鬼，采用光学显微镜和电子显微镜技术观察其背鳍棘中毒腺的形态结构，研究其致毒机理。结果表明，日本鬼背鳍的毒腺呈梭形，位于背鳍棘背外侧的两纵沟内，有结缔组织包绕。在毒腺... 于1996年6月—1997年6月，在山东青岛、日照沿海采集日本鬼，采用光学显微镜和电子显微镜技术观察其背鳍棘中毒腺的形态结构，研究其致毒机理。结果表明，日本鬼背鳍的毒腺呈梭形，位于背鳍棘背外侧的两纵沟内，有结缔组织包绕。在毒腺内发现两种类型的细胞：Ⅰ型细胞的胞质为均质状，单核；Ⅱ型细胞胞质内充满颗粒，未见细胞核。两种毒腺细胞均呈多边棱柱体，呈辐射状排列。Ⅰ型细胞胞质电子密度中等，有均匀分布的细小颗粒，细胞内仅见少而散在分布的线粒体和线头状结构；Ⅱ型细胞颗粒为许多囊泡及电子密度不同的颗粒状物质。腺体内下方的组织内有一种小细胞，其胞质内含有溶酶体样结构，其内涵物与Ⅰ型细胞胞质类似。提示该毒腺的细胞不同于哺乳动物的分泌细胞。 展开更多

关键词 日本鬼You 毒腺 结构 背鳍棘 棘毒鱼类 毒性

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蝮蛇(短尾亚种)毒腺的形态学观察

7

作者 瞿国伟 黄美华 《浙江医科大学学报》 CSCD 1991年第2期64-67,共4页

本文以蝮蛇短尾亚种毒腺组织为材料,运用光学显微镜和透射电镜技术,观察了主腺的微细结构.毒腺上皮组织由三种细胞组成:分泌细胞、水平细胞、线粒体丰富细胞.观察到分泌细胞有三种分泌毒液的方式,并讨论了各类细胞的结构特点和功能意义.

关键词 蝮蛇 毒腺 形态学 蛇

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中国和美国红火蚁毒腺生物碱组分的比较分析 被引量：5

8

作者 官迪 廖晓兰 陈立 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期365-371,共7页

【目的】比较两个入侵地红火蚁Solenopsis invicta毒腺生物碱成分及相对含量的地区间差异。【方法】以在中国广东省惠州、广州、深圳、东莞、珠海和美国阿拉巴马州采集的红火蚁工蚁为材料,用正己烷溶剂浸提48h获得浸提液,将浸提液进行... 【目的】比较两个入侵地红火蚁Solenopsis invicta毒腺生物碱成分及相对含量的地区间差异。【方法】以在中国广东省惠州、广州、深圳、东莞、珠海和美国阿拉巴马州采集的红火蚁工蚁为材料,用正己烷溶剂浸提48h获得浸提液,将浸提液进行硅胶柱层析分离,用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)分析其所含的生物碱成分及其相对含量。【结果】红火蚁毒腺生物碱含顺式生物碱组分和反式生物碱组分。通过总离子图对比,得到了7种顺式生物碱、8种四氢吡啶和7种反式生物碱,并计算得到这些组分的相对百分含量。【结论】中国广东省5个地区红火蚁生物碱组成无差别,相对含量略有差异,惠州种群和深圳种群差别最大,其他地区间没有差别。中美两国入侵地的红火蚁种群生物碱成分种类无差别,其各个组分之间相对含量略有差异,美国阿拉巴马州种群与中国深圳种群各组分相对含量差别最大,与中国广州种群差别最小。另外,在检测的中国广东样品中,只确认了红火蚁的存在,提示杂合蚁与黑火蚁还未传入中国。 展开更多

关键词 火蚁 红火蚁 毒腺 生物碱 哌啶 气相色谱-质谱分析

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怎样防治毒蛇的毒腺萎缩症

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作者 顾学玲 金永来 《农村实用科技信息》 2004年第9期36-36,共1页

蛇类是原始的野生动物,有些疾病在大自然中不会发生,但在人工饲养的条件下却出现了。如毒腺莓缩症就是最为明显的例子。尽管人工饲养场地的环境与野生环境相差无几,可有的蛇类仍不能完全适应。刚从野外捕捉回来的毒蛇。

关键词 人工饲养 毒腺 野生动物 蛇类 毒液 环境 萎缩症 采集 捕捉 疾病

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基于主成分分析和聚类分析的红火蚁毒腺生物碱的比较研究 被引量：2

10

作者 张文倩 胡林 +1 位作者 陈立 曾任森 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期76-81,共6页

【目的】分析中国和美国2个入侵地红火蚁Solenopsis invicta毒腺生物碱的主要化学成分及其聚类特征.【方法】以中国广州、惠州、深圳、珠海和东莞以及美国阿拉巴马州采样地共24巢红火蚁为样本,提取各个蚁巢毒腺的生物碱流分,分别以红火... 【目的】分析中国和美国2个入侵地红火蚁Solenopsis invicta毒腺生物碱的主要化学成分及其聚类特征.【方法】以中国广州、惠州、深圳、珠海和东莞以及美国阿拉巴马州采样地共24巢红火蚁为样本,提取各个蚁巢毒腺的生物碱流分,分别以红火蚁顺式生物碱流分中的15种生物碱和反式生物碱流分中的7种生物碱相对含量作为变量,建立2个数据矩阵,进行主成分分析和聚类分析.【结果和结论】主成分分析结果表明,将红火蚁顺式生物碱流分中的15种生物碱综合成为2个主成分因子,主要是顺式-2-甲基-6-(4'-十三烯)哌啶、2-甲基-6-(6'-十五烯)-Δ1,6-哌啶、2-甲基-6-十五烷基-Δ1,6-哌啶和顺式-2-甲基-6-十一烷基哌啶;反式生物碱流分中的7种生物碱综合成1个主成分因子,主要是反式-2-甲基-6-(4'-十三烯)哌啶和反式-2-甲基-6-(6'-十五烯)哌啶.顺式生物碱流分的聚类分析可以将美国种群与中国种群区分开来,而反式生物碱流分不能. 展开更多

关键词 红火蚁 毒腺 生物碱 主成分分析 聚类分析

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尖吻蝮蛇毒腺的缓激肽2型受体结合多肽的筛选与验证 被引量：1

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作者 蒋安娜 刘杨 +2 位作者 刘桂娜 唐业忠 陆方 《四川动物》 北大核心 2024年第4期361-372,共12页

蛇毒已被证明具有抗炎活性,其中包含许多免疫原性弱、活性强的短肽小分子。蛇毒腺是分泌毒液的器官,含有毒素成分及调控其分泌过程的大量生物活性成分。缓激肽2型受体(B2R)参与重要的细胞内信号通路,作为炎症的调节因子成为潜在的抗炎... 蛇毒已被证明具有抗炎活性,其中包含许多免疫原性弱、活性强的短肽小分子。蛇毒腺是分泌毒液的器官,含有毒素成分及调控其分泌过程的大量生物活性成分。缓激肽2型受体(B2R)参与重要的细胞内信号通路,作为炎症的调节因子成为潜在的抗炎药物开发的靶点。为了获得特异性的B2R结合肽,利用尖吻蝮蛇Deinagkistro-don acutus毒腺T7噬菌体文库对靶点B2R进行3轮生物淘选,测序获得了多个具有潜在结合能力的序列。通过序列长度、溶解性预测、稳定性预测和分子对接等一系列生物信息学分析,最终确定1个含25个氨基酸的肽段,命名为DAvp-4。合成该肽段,通过表面等离子体共振技术验证了DAvp-4和B2R的结合能力,在脂多糖诱导的巨噬细胞模型及糖尿病视网膜病变小鼠模型中肯定了其抗炎作用。此研究不但获得了一个具有成药潜力的毒腺多肽,还显示了噬菌体展示技术在筛选天然产物成分研究中的有效性。 展开更多

关键词 噬菌体展示 毒腺 表面等离子体共振 缓激肽2型受体

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红火蚁及其他两种蚂蚁毒腺细菌鉴定与多样性分析

12

作者 杨帆 余金咏 +3 位作者 陈思琪 宁冬冬 Babar HASSAN 许益镌 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1061-1069,共9页

【目的】本研究旨在分析红火蚁Solenopsis invicta毒腺细菌群落多样性,并与热带火蚁Solenopsis geminata和聚纹双刺猛蚁Diacamma rugosum比较毒腺细菌群落差异。【方法】采用Illumine Hiseq 2500测序平台对红火蚁(工蚁、有翅蚁和蚁后)... 【目的】本研究旨在分析红火蚁Solenopsis invicta毒腺细菌群落多样性,并与热带火蚁Solenopsis geminata和聚纹双刺猛蚁Diacamma rugosum比较毒腺细菌群落差异。【方法】采用Illumine Hiseq 2500测序平台对红火蚁(工蚁、有翅蚁和蚁后)、热带火蚁(工蚁)及聚纹双刺猛蚁(工蚁)毒腺细菌群落16S rRNA基因V3-V4区测序,基于测序数据进行生物信息学分析。【结果】变形菌门(Proteobacteria)在红火蚁工蚁、有翅蚁和蚁后以及热带火蚁工蚁毒腺中占优势,而厚壁菌门(Firmicutes)在聚纹双刺猛蚁工蚁毒腺中占优势。与红火蚁工蚁和有翅蚁相比,柔壁菌门(Tenericutes)在红火蚁蚁后毒腺中更丰富。广州红火蚁蚁后毒腺中假单胞杆菌Pseudomonas相对丰度显著高于其在有翅蚁及工蚁中的。螺原体Spiroplasma相对丰度在热带火蚁毒腺中显著高于在聚纹双刺猛蚁工蚁毒腺中的。毒腺中细菌多样性分析发现,芽孢杆菌属Bacillus和乳酸杆菌属Lactobacillus在广西红火蚁工蚁中的相对丰度显著高于在广州红火蚁工蚁中的。然而,乳酸杆菌属细菌在聚纹双刺猛蚁工蚁毒腺中的相对丰度显著高于广西的热带火蚁工蚁毒腺中的。【结论】毒腺细菌组成和多样性在3种不同种类蚂蚁工蚁和红火蚁不同品级中存在差异。 展开更多

关键词 红火蚁 热带火蚁 聚纹双刺猛蚁 物种多样性 丰度 微生物 毒腺

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家福捕鸟蛛毒腺cDNA文库构建及其毒素-16序列和活性分析 被引量：2

13

作者 卓城洁 袁萌 +4 位作者 伍文攀 邓娟华 喻振国 向小亮 胡朝暾 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第1期11-19,共9页

家福捕鸟蛛(Selenocosmia jiafu)是一种生活在广西、云南等地的蜘蛛新种。为了阐明其毒素的分子多样性和筛选河豚毒素不敏感型(Tetrodotoxin-resistant,TTX-R)钠通道抑制剂,利用SMART法构建了毒腺全长cDNA文库,并进行DNA测序和表达序列... 家福捕鸟蛛(Selenocosmia jiafu)是一种生活在广西、云南等地的蜘蛛新种。为了阐明其毒素的分子多样性和筛选河豚毒素不敏感型(Tetrodotoxin-resistant,TTX-R)钠通道抑制剂,利用SMART法构建了毒腺全长cDNA文库,并进行DNA测序和表达序列标签(Expressed sequence tags,ESTs)聚类分析。结果表明家福捕鸟蛛毒腺双链cDNA条带分布在300~3 000 bp。经测序得到752个高质量的EST序列,去冗余后得到257个唯一序列,其中毒素序列438条。家福捕鸟蛛毒素-16(Jiafu toxin-16,JF-16)是从家福捕鸟蛛粗毒中分离得到的1种分子量为3 954.616的哺乳类神经毒素,其全序列为H_2N-ECTKLLGGCTKSSECCPHLGCRRKWPYHCGWDGTF-COOH。研究结果揭示JF-16的全长cDNA为518 bp,编码87个氨基酸。全细胞膜片钳试验结果表明JF-16对大鼠背根神经节(Rat dorsal root ganglion,DRG)细胞TTX-R钠通道具有抑制作用。说明JF-16是一种潜在的具有镇痛活性的蜘蛛毒素。本研究有利于开展家福捕鸟蛛毒腺转录组研究和JF-16潜在镇痛活性分析。 展开更多

关键词 家福捕鸟蛛 蜘蛛毒腺 CDNA文库 家福捕鸟蛛毒素-16

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人工去除毒腺对舟山眼镜蛇生长的影响

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作者 朱开明 傅祺 +1 位作者 胡明行 张斌 《湖南林业科技》 2022年第6期48-52,共5页

为探讨人工去除舟山眼镜蛇毒腺对其生长的影响,将30条舟山眼镜蛇幼蛇采用随机抽样法分成去毒腺组和未去毒腺组,每组15条。其中去毒腺组幼蛇于出壳30 d左右实施去除毒腺手术。两组的饲养环境温度保持在27~30℃,相对湿度控制在50%~70%,并... 为探讨人工去除舟山眼镜蛇毒腺对其生长的影响,将30条舟山眼镜蛇幼蛇采用随机抽样法分成去毒腺组和未去毒腺组,每组15条。其中去毒腺组幼蛇于出壳30 d左右实施去除毒腺手术。两组的饲养环境温度保持在27~30℃,相对湿度控制在50%~70%,并提供正常的食物和水源,去毒腺后饲养12个月;采用相同的方法,在相同的时间测量每组体重、体长,并对测量数据进行统计分析。结果表明:去毒腺对舟山眼镜蛇幼蛇的生长没有显著影响,在饲养31~150 d期间,去毒腺组的平均体重增长率和平均体长增长率分别比未去毒腺组的小107.18%和3.08%;在饲养211~390 d期间,去毒腺组的平均体重增长率和平均体长增长率分别比未去毒腺组的大8.66%和6.58%。本试验结果可为降低毒蛇人工养殖的风险和眼镜蛇分类养殖提供良好的经验。 展开更多

关键词 舟山眼镜蛇 去毒腺 人工饲养 生长

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东亚钳蝎氯毒素BmKCT的表达和功能鉴定(英文) 被引量：10

15

作者 杨锐 彭方 +4 位作者 刘辉 曹志贱 李文鑫 毛歆 蒋达和 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期19-23,共5页

从中国东亚钳蝎ButhusmartensiiKarsch的毒腺cDNA文库中分离得到了一个编码毒素蛋白多肽 (命名为BmKCT)前体的全长cDNA序列 .该毒素多肽与已报道的氯毒素 (chlorotoxin)高度同源 ,其蛋白质一级序列有 6 8%的同源性 .为了鉴定BmKCT的生... 从中国东亚钳蝎ButhusmartensiiKarsch的毒腺cDNA文库中分离得到了一个编码毒素蛋白多肽 (命名为BmKCT)前体的全长cDNA序列 .该毒素多肽与已报道的氯毒素 (chlorotoxin)高度同源 ,其蛋白质一级序列有 6 8%的同源性 .为了鉴定BmKCT的生物学功能 ,通过pGEX系统成功地表达了BmKCT ,并用GST亲和层析和凝胶过滤的方法获得了纯化的重组BmKCT毒素蛋白 (rBmKCT) .通过膜片钳实验 ,记录了rBmKCT对人脑星型胶质瘤细胞 (gliomascell)表面的氯离子通道电流的作用 .结果显示 ,BmKCT可以显著抑制人脑星型胶质瘤细胞表面的氯离子通道电流 ,并且这种抑制作用在一定程度上是可逆的 .实验证明 ,在细胞水平上 ,BmKCT是一种新的短链氯离子通道抑制剂 . 展开更多

关键词 胶质瘤细胞 氯离子通道 表达 人脑 膜片钳 GST 抑制作用 东亚钳蝎 毒腺 功能鉴定

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乌苏里蝮蛇丝氨酸蛋白酶基因克隆和序列分析 被引量：4

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作者 孙德军 刘珊珊 +3 位作者 杨春伟 赵轶卓 常淑芳 颜炜群 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期325-329,共5页

目的:构建乌苏里蝮蛇(Gloydius ussuriensis)毒腺c DNA文库,克隆、分析丝氨酸蛋白酶基因,为进一步基因研究和操作奠定基础。方法:采用链转化法和长距离PCR技术,构建乌苏里蝮蛇毒腺c DNA文库。用TRIzol试剂盒从乌苏里蝮蛇毒腺提取总RNA,... 目的:构建乌苏里蝮蛇(Gloydius ussuriensis)毒腺c DNA文库,克隆、分析丝氨酸蛋白酶基因,为进一步基因研究和操作奠定基础。方法:采用链转化法和长距离PCR技术,构建乌苏里蝮蛇毒腺c DNA文库。用TRIzol试剂盒从乌苏里蝮蛇毒腺提取总RNA,再用Oligo(d T) -生物素-链菌素-磁珠法从总RNA中分离m RNA ,反转录合成c DNA第一链,长距离PCR合成第二链c DNA。回收c DNA,用限制性内切酶消化产生粘性末端,层析去除小于5 0 0 bp片段,纯化的c DNA插入载体p Bluescript- sk,电转化E.coli DH 5α,得到乌苏里蝮蛇毒腺c DNA文库,测定丝氨酸蛋白酶上游氨基酸序列,并推导其基因序列,合成引物。从该c DNA文库克隆丝氨酸蛋白酶基因,并进行序列测定和分析。结果:该文库库容为2 .3×10 6 ,该c DNA文库为筛选新的目的基因和进一步基因操作提供了有效平台。序列测定和分析显示丝氨酸蛋白酶基因开框读码序列全长70 2个核苷酸,编码2 34个氨基酸,活性中心His4 1 、Asp86 、Ser1 80 和6对二硫键进化上高度保守。结论:该文库库容大于通用的10 5标准,符合规定可作为进一步基因操作平台,克隆的丝氨酸蛋白酶基因与Gene Bank中其他蛇毒丝氨酸蛋白酶氨基酸序列同源性在85 %以上。 展开更多

关键词 蝮蛇属 毒腺 CDNA文库 安克洛酶 序列分析 蛋白质

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银环蛇心脏毒素类似物cDNA的克隆 被引量：6

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作者 汪芳 王义权 童宗中 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期672-676,共5页

采用SMART技术和RT PCR方法,从同一个银环蛇毒腺中克隆到了5种尚未报道过的心脏毒素类似物全长cDNA序列(MNCTL1 a、MNCTL1 b、MNCTL1 c、MNCTL1 d和MNCTL2)。5种序列中,MNCTL1 b、MNCTL1 c、MNCTL1 d和MNCTL2的长度均为505bp,包括5′非... 采用SMART技术和RT PCR方法,从同一个银环蛇毒腺中克隆到了5种尚未报道过的心脏毒素类似物全长cDNA序列(MNCTL1 a、MNCTL1 b、MNCTL1 c、MNCTL1 d和MNCTL2)。5种序列中,MNCTL1 b、MNCTL1 c、MNCTL1 d和MNCTL2的长度均为505bp,包括5′非翻译区32bp,3′非翻译区212bp和其余261bp组成的一个完整开放阅读框;MNCTL1 a由于3′非翻译区24bp的缺失,全长cDNA仅为481bp。所得序列编码区部分与已报道的银环蛇心脏毒素类似物(cardiotoxin likeprotein)编码区cDNA序列的同源性达95.8%以上。我们克隆到的序列编码85个氨基酸组成的心脏毒素类似物前体,包括20个氨基酸的信号肽和65个氨基酸的成熟肽,与已知的心脏毒素类似物氨基酸组成有很高的同源性。运用AntheportV4.5软件分析,发现编码的蛋白质与眼镜蛇毒中心脏毒素有相似的结构和性质,推测它们可能有类似心脏毒素的功能。本研究首次报道了从同一个体的银环蛇毒腺中克隆到多个心脏毒素类似物全长cDNA序列,提示银环蛇心脏毒素类似物基因在该种蛇基因组中有多个拷贝,并在毒腺细胞中同时转录。 展开更多

关键词 心脏毒素类似物 银环蛇 全长CDNA 蛋白质 毒腺细胞

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赤鱼工毒性的研究 被引量：2

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作者 孙衍增 刘晓萍 +1 位作者 张克凌 于业军 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2000年第9期13-15,共3页

关键词 赤hong 蜇伤 毒性 毒腺

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两种小菜蛾寄生蜂毒液器官超微结构的比较 被引量：13

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作者 潘健 陈学新 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期298-303,共6页

应用超薄切片和电镜技术 ,观察比较了两种小菜蛾的内寄生蜂———小菜蛾盘绒茧蜂和半闭弯尾姬蜂毒液器官的形态结构。两种蜂的毒液器官均由一个毒囊和两条毒腺组成 ,但毒腺与毒囊的连接位点不同 ,毒腺分别接于毒囊的基部和顶端。它们的... 应用超薄切片和电镜技术 ,观察比较了两种小菜蛾的内寄生蜂———小菜蛾盘绒茧蜂和半闭弯尾姬蜂毒液器官的形态结构。两种蜂的毒液器官均由一个毒囊和两条毒腺组成 ,但毒腺与毒囊的连接位点不同 ,毒腺分别接于毒囊的基部和顶端。它们的毒腺均由分泌细胞、退化的外胚层细胞和环腔的内膜三层结构构成 ,分泌细胞内含司分泌毒液的囊状细胞器及大量的内质网、线粒体、高尔基体、溶酶体和液泡。半闭弯尾姬蜂的分泌细胞内有分支的细胞核。小菜蛾盘绒茧蜂的毒囊由肌肉鞘和扁平细胞层构成 ,内膜呈波浪状内突并沿囊腔有几丁质增厚 ;半闭弯尾姬蜂的毒囊由肌肉鞘、分泌细胞和扁平细胞三层构成 ,分泌细胞基部内陷成一系列大的突起 ,这些结构与雌蜂的分泌和排出毒液的行为密切相关。在衰老的小菜蛾盘绒茧蜂的腺细胞中还存在大量的髓样体。本文就两种寄生蜂毒液器官的生物学、细胞生理学及相关的分类进化的意义进行了讨论。 展开更多

关键词 小菜蛾 小菜蛾盘绒茧蜂 半闭弯尾姬蜂 毒液器官 超微结构 毒腺 毒囊 环腔 外胚层细胞

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切叶蚁亚科蚂蚁的防御性生物碱 被引量：2

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作者 白茹 陈立 王文凯 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期875-886,共12页

蚂蚁(蚁科)有显著的群居特性,个体间分工明确,并具有复杂的合作策略,以保护巢穴不受捕食者、病原微生物、蚂蚁竞争者的侵害,以及捕食猎物等。切叶蚁亚科是蚁科的最大类群,共有147个现生属,主要通过喷洒富含生物碱的毒液分泌物进行防御... 蚂蚁(蚁科)有显著的群居特性,个体间分工明确,并具有复杂的合作策略,以保护巢穴不受捕食者、病原微生物、蚂蚁竞争者的侵害,以及捕食猎物等。切叶蚁亚科是蚁科的最大类群,共有147个现生属,主要通过喷洒富含生物碱的毒液分泌物进行防御和捕猎。本文综述了该亚科防御性生物碱的组分及属种分布特征,其结构类型包括哌啶、吡啶、吡咯、吲哚里西啶、吡咯里西啶和脂肪胺等,并对其功能及应用进行了概述和展望。哌啶类生物碱是火蚁属Solenopsis毒液的典型特征,而吡咯烷、吡咯啉和吡咯里西啶类生物碱是小家蚁属Monomorium毒液的主要成分。吲哚里西啶类生物碱是脊红蚁属Myrmicaria蚂蚁和火蚁属贼蚁毒液的主要成分。除此之外,脂肪胺也是小家蚁属蚂蚁的毒液成分。这些毒液生物碱成分具有显著的生物活性,在农药和生物医药领域具有重要的应用前景。 展开更多

关键词 蚂蚁 切叶蚁亚科 化学防御 毒腺 生物碱 毒液

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