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等温核酸扩增技术:病原体现场快速检测的前沿进展
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作者 万佳欣 徐杏 +6 位作者 谢传奇 周昕 王星博 朱寅初 李彩燕 吴越 周卫东 《中国生物医学工程学报》 北大核心 2025年第3期356-370,共15页
在全球公共卫生安全面临日益严峻挑战的背景下,开发兼具快速响应、高灵敏度、准确诊断以及易于操作的病原体检测技术成为当务之急。等温核酸扩增(IANA)技术以其独特的恒温反应优势、显著的成本效益比以及高效简便的检测能力,成为该领域... 在全球公共卫生安全面临日益严峻挑战的背景下,开发兼具快速响应、高灵敏度、准确诊断以及易于操作的病原体检测技术成为当务之急。等温核酸扩增(IANA)技术以其独特的恒温反应优势、显著的成本效益比以及高效简便的检测能力,成为该领域的研究热点。梳理了IANA技术及其在病原体现场快速检测(POCT)中的创新应用;解析了酶介导和无酶介导两类技术体系的核心机制;阐述了IANA技术的原理;探讨了其在病毒和细菌等病原体检测中的应用;分析了基于IANA技术的POCT装置及其在病原体检测中的应用。最后,总结了基于IANA的病原体检测技术面临的关键挑战和未来发展,并展望了高效集成化、快速自动化和智能平台化检测技术的变化趋势,旨在为新一代病原体检测技术的研发提供系统性理论支撑与实践指导。 展开更多
关键词 等温核酸扩增技术 病原体检测 现场快速检测
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一步核酸扩增技术在乳腺癌前哨淋巴结活检中的应用研究进展
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作者 杨鑫 孙晓(综述) 王永胜(审校) 《中国肿瘤临床》 北大核心 2025年第5期259-263,共5页
一步核酸扩增(one-step nucleic acid amplification,OSNA)技术是一种分子诊断技术,通过检测前哨淋巴结(sentinel lymph node,SLN)中细胞角蛋白19mRNA的表达水平来评估淋巴结的转移状态。其具有快速、准确、半定量、可重复性高的特点,... 一步核酸扩增(one-step nucleic acid amplification,OSNA)技术是一种分子诊断技术,通过检测前哨淋巴结(sentinel lymph node,SLN)中细胞角蛋白19mRNA的表达水平来评估淋巴结的转移状态。其具有快速、准确、半定量、可重复性高的特点,为临床医生提供全面的淋巴结诊断信息。对于避免二次腋窝淋巴结清扫术(axillary lymph node dissection,ALND)或过度ALND具有重要意义。乳腺癌降阶梯处理模式是当前外科医生追求的治疗策略,前哨淋巴结活检(SLN biopsy,SLNB)可以帮助患者获得更精准、更为个性化的治疗,从而在保证治疗效果的同时减少不必要的治疗强度和副作用。本文就OSNA检测在SLNB中的应用进行综述。 展开更多
关键词 乳腺癌 一步核酸扩增技术 前哨淋巴结活检 淋巴结转移诊断 新辅助治疗
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基于重组酶介导等温核酸扩增技术快速检测食品中骆驼源性成分的方法建立及评价
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作者 周臣清 张娟 +3 位作者 綦艳 赵玲 黄宝莹 杨纯佳 《中国乳品工业》 北大核心 2025年第2期75-80,共6页
文章开发一种基于重组酶介导等温核酸扩增技术(Recombinase Aided Amplification,RAA)的方法,实现对食品中骆驼源性成分快速检测。针对骆驼细胞色素B(Cytochrome b,Cyt b)基因设计特异性引物,对建立的RAA体系优化其反应扩增条件,评估其... 文章开发一种基于重组酶介导等温核酸扩增技术(Recombinase Aided Amplification,RAA)的方法,实现对食品中骆驼源性成分快速检测。针对骆驼细胞色素B(Cytochrome b,Cyt b)基因设计特异性引物,对建立的RAA体系优化其反应扩增条件,评估其特异性和灵敏度,并用建立的RAA法与GB/T 38164标准方法分别对24份市售骆驼制品进行检测并比对结果。结果表明,本研究建立的RAA法特异性强,乳及乳制品检出限为1.0%,肉及肉制品检出限为0.1%,且2种方法对24份骆驼乳肉及其制品检测结果一致。因此,本研究开发的RAA方法具有快速、特异性强、灵敏度高、操作简单等优点,市场应用前景广阔。 展开更多
关键词 重组酶介导等温核酸扩增技术 骆驼源性成分 细胞色素B基因 快速检测
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利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术检测痰标本中结核分枝杆菌及其耐药性的研究 被引量:97
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作者 张治国 欧喜超 +3 位作者 孙倩 杜春英 高铁杰 赵雁林 《中国防痨杂志》 CAS 2013年第1期13-16,共4页
目的评估利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert Mtb/RIF)对结核病及利福平耐药性的检测效能。方法选取588例初诊患者痰标本,分别进行涂片镜检、固体培养、传统比例法药敏试验和XpertMtb/RIF检测,分析Xpert Mtb/RIF方法检测痰... 目的评估利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert Mtb/RIF)对结核病及利福平耐药性的检测效能。方法选取588例初诊患者痰标本,分别进行涂片镜检、固体培养、传统比例法药敏试验和XpertMtb/RIF检测,分析Xpert Mtb/RIF方法检测痰标本中Mtb及其耐药性的敏感度和特异度。结果以固体培养试验结果作为金标准,Xpert Mtb/RIF方法检测痰标本Mtb的敏感度和特异度为95.0%(345/363)和89.6%(147/164),以传统比例法药敏试验结果为金标准,Xpert Mtb/RIF方法检测利福平耐药的敏感度和特异度分别为89.1%(41/46)和96.3%(289/300)。结论Xpert Mtb/RIF检测敏感度和特异度较高,在Mtb及其利福平耐药快速检测方面具有比较好的应用前景。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 利福平 抗药性 细菌 核酸扩增技术 敏感性与特异性
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核酸扩增技术在人腺病毒诊断检测的研究进展 被引量:5
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作者 李文贵 俞乃胜 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第1期78-81,共4页
关键词 人腺病毒 诊断 检测 核酸扩增技术
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核酸扩增技术在动物源性食品掺假中的研究进展 被引量:5
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作者 孟晓帅 胡和智 +2 位作者 闫婷婷 李慧 李姗姗 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期298-305,共8页
核酸扩增技术是一种在体外快速扩增特定DNA片段的分子生物学技术,目前已广泛应用于传染病检测、生物勘测、食品安全检测、临床诊断和公共卫生监测等研究领域。其中,食品安全领域的问题日渐成为人们关注的焦点,尤其是动物源性食品掺假的... 核酸扩增技术是一种在体外快速扩增特定DNA片段的分子生物学技术,目前已广泛应用于传染病检测、生物勘测、食品安全检测、临床诊断和公共卫生监测等研究领域。其中,食品安全领域的问题日渐成为人们关注的焦点,尤其是动物源性食品掺假的现象屡禁不止。在过去的科学研究中,动物源性食品掺假的核酸扩增技术发展迅速,取得了很大进展。该文就核酸扩增技术中的凝胶电泳PCR、实时荧光定量PCR、数字液滴PCR、环介导等温扩增、交叉引物扩增、滚环扩增、重组酶聚合酶扩增等技术的原理及在动物源性食品掺假检测中的应用进行综述。讨论了各类核酸扩增技术的关键优势和局限性,简要介绍了现有的挑战和进一步的研究进展,旨在为动物源性食品掺假核酸扩增技术的发展指明方向。 展开更多
关键词 核酸扩增技术 动物源性食品 掺假鉴别 聚合酶链式反应 恒温技术
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浅谈环介导等温核酸扩增技术在食品检测中的应用
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作者 张展 王建发 《现代畜牧兽医》 2011年第1期59-62,共4页
近年来,由食品安全引发的恶性事件不断发生,食品安全问题受到越来越多的重视。为了保证食品的安全性,维护广大消费者的权益与身体健康,应加大力度预防食源性疾病,而大部分食源性疾病是由微生物引起,因此,
关键词 食品检测 核酸扩增技术 食品安全问题 食源性疾病 应用 等温 介导 身体健康
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等温核酸扩增技术在禾本科作物病毒检测中的应用
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作者 孙萌 董荟慧 于莹 《农村科学实验》 2025年第17期78-80,共3页
等温核酸扩增技术因快速、简便和高灵敏度的特点,在禾本科作物病毒检测中展现出明显优势。该文总结了环介导等温扩增技术、重组酶聚合酶扩增技术、滚环扩增技术等主要等温扩增技术的原理与特点,重点分析了其在小麦、玉米、水稻病毒检测... 等温核酸扩增技术因快速、简便和高灵敏度的特点,在禾本科作物病毒检测中展现出明显优势。该文总结了环介导等温扩增技术、重组酶聚合酶扩增技术、滚环扩增技术等主要等温扩增技术的原理与特点,重点分析了其在小麦、玉米、水稻病毒检测中的具体应用与成效,评估了其检测效果与性能,并指出当前技术仍面临引物设计复杂度高、抑制物质干扰及标准化程度不足等挑战。最后,该文对该技术未来发展方向进行了展望,以期为禾本科作物病毒快速检测技术的选择与应用提供参考。 展开更多
关键词 等温核酸扩增技术 禾本科作物 病毒检测
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利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术的诊断效果对比研究 被引量:34
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作者 李辉 谭耀驹 +4 位作者 李洪敏 马晓光 邢进 郝宝林 赵雁林 《中国防痨杂志》 CAS 2014年第6期472-476,共5页
目的 评价利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(GeneXpert Mtb/RIF)检测临床标本诊断结核病和耐利福平结核病的效能.方法 2011年1-5月从解放军第三○九医院、广州市胸科医院和河南省疾病预防控制中心3家单位,连续收集门诊就诊的1... 目的 评价利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(GeneXpert Mtb/RIF)检测临床标本诊断结核病和耐利福平结核病的效能.方法 2011年1-5月从解放军第三○九医院、广州市胸科医院和河南省疾病预防控制中心3家单位,连续收集门诊就诊的1971例疑似结核病患者的痰标本,进行涂片、金标准培养和金标准比例法传统药敏试验和GeneXpert Mtb/RIF检测.应用SPSS 11.5统计软件对GeneXpert Mtb/RIF与不同检测方法进行敏感度和特异度分析,以P<0.05为差异有统计学意义.结果 与涂片及培养比较,GeneXpert Mtb/RIF检测1968例(1971例中有3例污染排除)痰标本诊断结核病的敏感度和特异度分别为93.27%(748/802)、91.93%(797/867)和91.60%(1068/1166)、95.55%(1052/1101);与临床诊断比较,GeneXpert Mtb/RIF检测1945例(1971例中有26例无法定诊)痰标本诊断结核病的敏感度和特异度分别为78.66%(822/1045)、98.67%(888/900);与金标准传统药敏试验比较,GeneXpert Mtb/RIF检测797例标本诊断耐利福平结核病的敏感度和特异度分别为97.92%(188/192)、100.00%(595/595).结论 GeneXpert Mtb/RIF是一种检测痰标本诊断结核病及耐利福平结核病的快速简便、自动化、敏感度和特异度较高的分子生物学方法,适用于结核病和耐利福平结核病的临床诊断. 展开更多
关键词 结核/诊断 利福平 抗药性 细菌 核酸扩增技术 对比研究
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交叉引物核酸恒温扩增技术在基层实验室诊断肺结核的应用价值 被引量:20
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作者 朱岩昆 王宇 +6 位作者 靳晓伟 马晓光 石洁 欧喜超 邢进 赵雁林 李辉 《中国防痨杂志》 CAS 2016年第10期813-817,共5页
目的评价交叉引物核酸恒温扩增技术(cross—priming amplification,CPA)在基层实验室诊断肺结核的应用价值。方法选取河南省新密市县级结核病门诊于2012年3月1日至7月31日和2014年10月1日至2015年8月31日分别连续纳入就诊的673例(A... 目的评价交叉引物核酸恒温扩增技术(cross—priming amplification,CPA)在基层实验室诊断肺结核的应用价值。方法选取河南省新密市县级结核病门诊于2012年3月1日至7月31日和2014年10月1日至2015年8月31日分别连续纳入就诊的673例(A组)和916例(B组)初诊肺结核可疑患者作为研究对象。收集其痰标本分别进行痰涂片镜检、痰培养、CPA检测和多色荧光巢式PCR(Genexpert MTB/RIF,GeneXpert)检测(仅2014年10月1日至2015年8月31日纳入就诊患者进行此项检测),比较4种检测方法的检测效能。结果A组673例患者中诊断为肺结核者273例(40.56%),诊断为非结核病者400例(59.44%);B组916例患者中诊断为肺结核者252例(27.51%),诊断为非结核病者664例(72.49%)。A组患者中,培养阳性者86例(阳性率为12.78%),CPA检测阳性78例(11.59%),以培养结果为标准,CPA检测的敏感度、特异度、一致率分别为83.72%、98。98%、97.03%(Kappa=0.86);共采集患者痰标本2019份,其中有1346份痰标本进行培养和CPA检测,培养阳性154份(11.44%),CPA检测阳性145份(10.77%),以培养结果为标准,CPA检测的敏感度、特异度分别为85.71%、98.91%。B组患者培养阳性80例(阳性率为8.73%);涂片阴性培养阳性22例;CPA检测阳性96例(10.48%),以培养结果为标准,CPA检测敏感度、特异度、一致率分别为87.50%、96.89%、96.07%(Kappa=0.77)。B组患者,GeneXpert检测阳性104例(11.04%),CPA与GeneXpert检测的一致率为98.25%(Kappa=0.91);针对涂片阴性培养阳性的22例标本,CPA与GeneXpert检测均有17例阳性,敏感度均为77.27%。结论CPA作为简单、快速、稳定的分子方法,临床检测痰标本中的结核分枝杆菌有较高的敏感度和特异度,且与GeneXpert具有相同的检测能力,适于基层实验室对肺结核患者的诊断。 展开更多
关键词 结核 诊断 核酸扩增技术
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快速核酸提取环介导等温扩增检测技术在肺结核诊断中的应用评价 被引量:15
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作者 欧喜超 夏辉 +5 位作者 李强 逄宇 赵冰 张治英 李俊晨 赵雁林 《中国防痨杂志》 CAS 2016年第5期393-397,共5页
目的评估快速核酸提取环介导等温扩增检测(PURE-LAMP)技术在肺结核临床诊断中的应用价值。方法选取2012年4月至2013年1月在河南省新乡市结核病防治所和获嘉县疾病预防控制中心就诊的初诊肺结核可疑症状者作为研究对象,共1378例。每... 目的评估快速核酸提取环介导等温扩增检测(PURE-LAMP)技术在肺结核临床诊断中的应用价值。方法选取2012年4月至2013年1月在河南省新乡市结核病防治所和获嘉县疾病预防控制中心就诊的初诊肺结核可疑症状者作为研究对象,共1378例。每例患者留取3份痰标本,分别进行痰涂片镜检、固体培养和PURE-LAMP检测。以临床诊断结果为标准,比较痰涂片镜检、固体培养和PUREI.AMP法检测MTB的效能;以固体培养试验结果为标准,评估PURKLAMP检测MTB的效能。结果以临床诊断结果为标准,痰涂片镜检、固体培养和PURE-LAMP检测MTB的敏感度分别为23.40%(168/718)、58.91%(423/718)和49.44%(355/718)。PURE-LAMP检测敏感度高于痰涂片镜检(X2=185.02,P=0.000),但低于固体培养试验(X2=46.24,P=0.000)。以固体培养试验结果为标准。PURE-I。AMP检测MTB的敏感度和特异度分别为90.24%(333/369)和96.86%(924/954),涂阴患者中检测敏感度和特异度分别为82.52%(170/206)和97.06%(924/952)。结论PUREIrAMP检测操作简单,敏感度和特异度较高,在我国县(区)级结核病防治机构具有一定的应用前景。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 核酸扩增技术 诊断
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环介导核酸等温扩增技术对疑似结核病患者的筛查效果 被引量:7
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作者 孙娇 王悦 +3 位作者 孙秀华 彭娇 邢黎莉 孙炳奇 《中国防痨杂志》 CAS 2017年第8期833-839,共7页
目的评价环介导核酸等温扩增(100p-mediated isothermal amplification,LAMP)技术对疑似结核病患者的筛查效果。方法选取沈阳市第十人民医院2015年5月至2016年6月收治的疑似结核病患者604例,收集标本604份,其中痰标本503份,胸腔... 目的评价环介导核酸等温扩增(100p-mediated isothermal amplification,LAMP)技术对疑似结核病患者的筛查效果。方法选取沈阳市第十人民医院2015年5月至2016年6月收治的疑似结核病患者604例,收集标本604份,其中痰标本503份,胸腔积液抽取液98份,支气管肺泡灌洗液3份,分别行涂片抗酸染色镜检(简称“涂片镜检”)、改良罗氏固体培养(简称“固体培养”)、MGIT960液体培养(简称“液体培养”)和LAMP检测,以临床诊断结果为标准,评价4种检测技术对结核病患者的检测效能,采用x^2检验比较结核分枝杆菌的阳性检出率,以P(0.05为差异有统计学意义。结果以临床诊断结果为参照,LAMP检测、涂片镜检、液体培养、固体培养的敏感度分别为72.78%(262/360)、51.67%(186/360)、66.67%(240/360)和59.17%(213/360);特异度分别为88.11%(215/244)、99.59%(243/244)、99.59%(243/244)和99.59%(243/244),并且具有良好的一致性(Kappa值依次为0.58、0.46、0.61和0.54)。LAMP检测对病程〈1年患者的阳性检出率[45.76%(189/413)]明显高于涂片镜检E27.12%(112/413)1、液体培养[-37.05%(153/413)]和固体培养[-31.48%(130/413)(x^2=62.41、16.62、40.95,P值均=0.000)。当患者出现的临床症状45个时,LAMP的阳性检出率(44.37%,268/604)明显高于涂片镜检(28.15%,170/604)、液体培养法(36.75%,222/604)和固体培养法(32.12%,194/604)(x^值分别为76.22、21.59和47.21,P值均=0.000)。LAMP检测对涂片镜检阴性,液体培养及固体培养阴性标本具有较高的阳性检出率[分别为28.78%(120/417),(21.49%(78/363)和25.90%(101/390)]。结论LAMP技术检测结核分枝杆菌较涂片镜检、液体培养和固体培养检测效能高,适用于病程短、临床症状较轻(1~5个症状)、涂阴和培阴的疑似结核病患者的筛查。 展开更多
关键词 核酸扩增技术 结核 多相筛查 对比研究
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实时荧光核酸恒温扩增检测技术辅助诊断肺外结核的临床价值 被引量:6
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作者 聂晓平 李桓 +12 位作者 杨洪英 罗明 杨国强 周刊 黄正谷 王鹏森 廖传玉 张汇征 周刚 陈玉 陈耀凯 石涛 李同心 《中国防痨杂志》 CAS 2018年第10期1066-1070,共5页
目的探讨实时荧光核酸恒温扩增检测技术(simultaneous amplification and testing,SAT)辅助诊断肺外结核的价值。方法收集2016年1月至2017年12月期间重庆市公共卫生医疗救治中心结核科、普通外科与骨科收治的482例患者肺外样本(主... 目的探讨实时荧光核酸恒温扩增检测技术(simultaneous amplification and testing,SAT)辅助诊断肺外结核的价值。方法收集2016年1月至2017年12月期间重庆市公共卫生医疗救治中心结核科、普通外科与骨科收治的482例患者肺外样本(主要为病变部位的脓液或手术取出物),根据患者病历记录的临床诊断分为肺外结核(试验组,433例)和排除结核病的其他疾病(对照组,49例)。所有标本同步采用培养法(联合罗氏培养法和BACTECMGIT960液体培养法两种方法,只要其中一种培养阳性就视为“培养法”结果为阳性)和SAT检测结核分枝杆菌,并对培养法阳性、SAT检测结果阴性的标本进行菌种鉴定。分别与培养法、患者临床诊断比较,并分析SAT检测的敏感度、特异度和临床辅助诊断肺外结核的价值。采用SPSS13.0软件进行分析,计数资料采用χ2检验,以P〈0.05为差异有统计学意义。结果试验组127例培养法阳性的标本中TB-SAT检测阳性107例,阴性20例;306例培养法阴性的患者中Tt-SAT检测阳性73例,阴性233例。对照组1例标本培养法阳性、TB-SAT检测阴性,其余48例标本培养法与TB-SAT检测均为阴性。以培养法为标准,SAT检测MTB的敏感度、特异度分别是83.6%(107/128)、79.4%(281/354)。与患者临床诊断相比,则培养法的敏感度、特异度分别为29.3%(127/433)、98.0%(48/49);SAT检测MTB的敏感度、特异度分别为41.6%(180/433)、100.0%(49/49)。培养法检测阳性率为29.3%(127/433),SAT法检测阳性率为41.6%(180/433),两者检测阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=14.17,P〈0.05)。结论SAT检测技术辅助诊断肺外结核具有方便快速、检出率高、敏感度和特异度高等优势,具有较高的临床价值。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 核酸扩增技术 实验室技术和方法 对比研究 肺外结核
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实时荧光核酸恒温扩增检测技术在结核病诊断中的临床应用 被引量:14
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作者 蔡杏珊 马品云 +1 位作者 张院良 谭耀驹 《中国防痨杂志》 CAS 2014年第6期458-461,共4页
目的 评估实时荧光核酸恒温扩增检测技术(simultaneous amplification and testing,SAT)在结核病患者的痰液、体液及病灶组织等标本中检测结核分枝杆菌的价值.方法 收集在广州市胸科医院就诊的疑似结核病患者的痰液734份、体液标本94... 目的 评估实时荧光核酸恒温扩增检测技术(simultaneous amplification and testing,SAT)在结核病患者的痰液、体液及病灶组织等标本中检测结核分枝杆菌的价值.方法 收集在广州市胸科医院就诊的疑似结核病患者的痰液734份、体液标本94份(包括68份胸腔积液、21份脑脊液、5份关节积液,以下统称“体液”)及病灶组织标本76份,共计904份标本.同时采用SAT法、改良罗氏培养法进行检测,培养阳性者进行基因芯片菌种鉴定.SAT法与改良罗氏培养法结果不相符的标本,用结核分枝杆菌聚合酶链(polymerase chain reaction technology for Mycobacterium tuberculosis,PCR-TB)荧光诊断试剂盒进行检测.采用x2检验比较SAT法与改良罗氏培养法对结核病患者的阳性检出率.结果 以改良罗氏培养结果为金标准,则SAT法在痰液、体液、病灶组织标本的敏感度、特异度、符合率分别为90.20%(230/255)、92.48%(443/479)、91.69%(673/734);94.74%(18/19)、81.33%(61/75)、84.04%(79/94);100.00%(14/14)、77.42%(48/62)、81.58%(62/76).以扩大金标准(培养+PCR法)比对,则SAT法在痰液、体液、病灶组织标本的敏感度、特异度、符合率分别为96.30%(260/270)、99.35%(461/464)、98.23%(721/734);96.97%(32/33)、100.00%(61/61)、98.94%(93/94);100.00%(27/27)、97.96%(48/49)、98.68%(75/76).改良罗氏培养法和SAT法在痰液、体液、病灶组织标本的阳性检出率分别为34.74%(255/734)和36.24%(266/734)、20.21%(19/94)和34.04%(32/94)、18.42%(14/76)和36.84%(28/76);痰标本两者的阳性率比较,差异没有统计学意义(x2=0.36,P>0.05).体液与病灶组织标本中,SAT法较改良罗氏培养法的阳性率高出13.83%和18.42%,差异有统计学意义(x2值分别为4.55、6.44,P值均<0.05).结论 SAT法检测痰液、体液及病灶组织标本中的结核分枝杆菌,具有快速、敏感度和特异度较高的优点,可提高结核分枝杆菌的检出率. 展开更多
关键词 结核/诊断 核酸扩增技术 敏感性与特异性
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实时荧光核酸恒温扩增检测技术在疑似肺结核早期诊断中的临床意义 被引量:5
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作者 江万航 卫安娜 +1 位作者 庞慧敏 谭守勇 《中国防痨杂志》 CAS 2017年第12期1309-1312,共4页
目的探讨实时荧光核酸恒温扩增检测技术(simultaneous amplification and testing,SAT)用于疑似肺结核早期诊断的临床意义。方法分析2015年7-12月广州市胸科医院收治的呼吸道疾病患者338例,其中疑似肺结核患者242例(疑似肺结核组... 目的探讨实时荧光核酸恒温扩增检测技术(simultaneous amplification and testing,SAT)用于疑似肺结核早期诊断的临床意义。方法分析2015年7-12月广州市胸科医院收治的呼吸道疾病患者338例,其中疑似肺结核患者242例(疑似肺结核组),临床已排除肺结核的肺部其他疾病患者96例(对照组)。所有患者同时进行了痰SAT检测、抗酸杆菌涂片、分枝杆菌培养和菌种鉴定等检查;统计疑似肺结核患者菌种鉴定结果,对SAT检测与结核分枝杆菌(MTB)培养及菌种鉴定结果的符合率、SAT检测诊断疑似肺结核的敏感度和特异度进行分析。结果疑似肺结核组242例患者中痰培养阳性233例,菌种鉴定为MTB感染者222例,非结核分枝杆菌(NTM)感染者11例;痰培养结果为阴性的患者9例。对照组患者痰培养结果均为阴性。菌种鉴定为MTB感染者SAT检测阳性192例,SAT检测与菌种鉴定符合率为86.5%(192/222);菌种鉴定为NTM感染者SAT检测阳性0例(0/11),与菌种鉴定符合率为100.0%(11/11);对照组SAT检测阳性者2例(2.1%,2/96),与分枝杆菌培养符合率为97.9%(94/96)。SAT在疑似肺结核患者诊断中的敏感度为86.5%(192/222),特异度为97.9%(94/96)。结论在疑似肺结核患者中开展SAT检测对肺结核早期诊断具有重要临床意义。 展开更多
关键词 结核 核酸扩增技术 早期诊断 分枝杆菌感染 非典型性 呼吸道疾病
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世界卫生组织《关于更新使用结核分枝杆菌及其耐药性核酸扩增检测技术的建议》的启示 被引量:6
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作者 夏辉 赵雁林 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2021年第8期761-765,共5页
快速并准确诊断结核病及耐药结核病对于结核病防治至关重要。世界卫生组织于2021年2月18日发布了《关于更新使用结核分枝杆菌及其耐药性核酸扩增检测技术的建议》。笔者对其更新的技术及技术指标进行描述和分析,并就此背景下对中国结核... 快速并准确诊断结核病及耐药结核病对于结核病防治至关重要。世界卫生组织于2021年2月18日发布了《关于更新使用结核分枝杆菌及其耐药性核酸扩增检测技术的建议》。笔者对其更新的技术及技术指标进行描述和分析,并就此背景下对中国结核病防治规划实施中相关领域可汲取的经验、潜在影响及实施层面的问题和启示进行阐述。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 核酸扩增技术 抗药性 细菌
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基于nuc基因的环介导等温核酸扩增可视化技术检测食源性金黄色葡萄球菌 被引量:1
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作者 邹作成 王西 +9 位作者 刘雪兰 胡仲皓 田祥强 何晓花 杜晓莉 王佳玲 李柯 刘浩洋 嵇辛勤 胡青海 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第5期108-113,共6页
金黄色葡萄球菌食物中毒主要是由食用被金黄色葡萄球菌及其所产生的肠毒素污染的奶、肉、蛋、糕点、剩饭等蛋白或淀粉含量丰富的食品引起,快速精准的金黄色葡萄球菌检测技术对于保障人们的健康和食品安全具有重要意义。本研究以nuc基因... 金黄色葡萄球菌食物中毒主要是由食用被金黄色葡萄球菌及其所产生的肠毒素污染的奶、肉、蛋、糕点、剩饭等蛋白或淀粉含量丰富的食品引起,快速精准的金黄色葡萄球菌检测技术对于保障人们的健康和食品安全具有重要意义。本研究以nuc基因作为检测靶基因,建立了一种检测金黄色葡萄球菌的环介导等温核酸扩增(LAMP)技术。该方法检测金黄色葡萄球菌基因组DNA样品为阳性,而对单细胞增生李斯特菌、鼠伤寒沙门菌、肠出血性大肠杆菌、空肠弯曲菌、小肠结肠炎耶尔森菌和产气荚膜梭菌等食源性致病菌和猪链球菌、胸膜肺炎放线杆菌和多杀性巴氏杆菌等猪源细菌基因组DNA检测结果均为阴性,表明建立的LAMP方15法具有较好的特异性。灵敏度的检测结果表明,LAMP的检测限可达5.6×10^(1) CFU/mL,而常规PCR的检测限为5.6×10^(5) CFU/mL,即LAMP的检测灵敏度比常规PCR高出10000倍。临床样品的检测结果表明,50份猪肉样品中有4份检出金黄色葡萄球菌。本研究为食源性金黄色葡萄球菌提供了一种快速、可视化、特异性好、灵敏度高、成本低的LAMP检测方法。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 nuc基因 环介导等温核酸扩增技术 可视化
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核酸等温扩增技术检测动物源食品研究进展 被引量:4
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作者 肖付刚 张尧轩 +2 位作者 谷蒙林 王德国 张国治 《粮食与油脂》 北大核心 2023年第12期22-28,共7页
综述了依赖核酸序列的扩增(NASBA)、链替代扩增(SDA)、滚环扩增(RCA)、环介导等温扩增(LAMP)、赖解旋酶恒温基因扩增(HDA)、重组酶聚合酶扩增(RPA)、梯型熔解温度等温扩增(LMTIA)几种主要核酸等温扩增检测技术的发展及其基本原理、特点... 综述了依赖核酸序列的扩增(NASBA)、链替代扩增(SDA)、滚环扩增(RCA)、环介导等温扩增(LAMP)、赖解旋酶恒温基因扩增(HDA)、重组酶聚合酶扩增(RPA)、梯型熔解温度等温扩增(LMTIA)几种主要核酸等温扩增检测技术的发展及其基本原理、特点和在动物源食品检测中的应用,并对几种主要核酸等温扩增检测技术的特点及应用进行比较。 展开更多
关键词 核酸等温技术 检测 动物源食品 梯型熔解温度等温技术
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核酸恒温扩增技术的原理及其应用 被引量:12
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作者 陈云芳 詹国辉 高渊 《西南林学院学报》 2010年第B06期30-32,40,共4页
介绍基于核酸恒温扩增技术原理的赖解旋酶恒温基因扩增技术、实时荧光核酸恒温扩增检测技术、环介导等温扩增技术和切口酶核酸恒温扩增技术的原理和特点;以及核酸恒温扩增技术在疾病诊断、流行病学监测、食品安全检测、动物病原物检测... 介绍基于核酸恒温扩增技术原理的赖解旋酶恒温基因扩增技术、实时荧光核酸恒温扩增检测技术、环介导等温扩增技术和切口酶核酸恒温扩增技术的原理和特点;以及核酸恒温扩增技术在疾病诊断、流行病学监测、食品安全检测、动物病原物检测等领域的应用情况,并对该技术在植物检疫领域的应用前景作出展望。 展开更多
关键词 核酸恒温技术 动植物检疫 原理
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基于核酸序列的扩增技术在异基因外周血干细胞移植后受者HCMV感染诊断的应用 被引量:2
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作者 徐鸿绪 刘雅峰 +1 位作者 谭恩勋 蔡建涛 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期1195-1199,共5页
本研究探讨基于核酸序列的扩增技术(nucleicacidsequencebasedamplification,NASBA)检测mRNA对异基因外周血干细胞移植受者术后人类巨细胞病毒(HCMV)感染的诊断价值,并评价该技术对抗病毒治疗的指导意义。以128例移植术后患者为研究对象... 本研究探讨基于核酸序列的扩增技术(nucleicacidsequencebasedamplification,NASBA)检测mRNA对异基因外周血干细胞移植受者术后人类巨细胞病毒(HCMV)感染的诊断价值,并评价该技术对抗病毒治疗的指导意义。以128例移植术后患者为研究对象,采集移植术后外周血352份;利用NASBA检测外周血中HCMV基质外壳蛋白PP67(UL65)mRNA,并与HCMVDNA的结果进行比较。结果表明352份血标本中,HCMVmRNA阳性105份(29.83%),HCMVDNA阳性183份(51.99%)。128例患者术后有45例发展为HCMV病,HCMVDNA和HCMVmRNA检测诊断HCMV病的敏感性和特异性分别为95.56%(43/45)、93.33%(42/45)和60.24%(50/83)、97.59%(81/83)。两者特异性的比较差异具有显著性(P<0.05)。结论HCMV-PP67的NASBA检测方法具有快速、敏感性高和特异性强等优点,可作为快速检测HCMV病的方法用于临床。该法检测结果与移植受者的临床症状相关,故也可用作监视异基因造血干细胞移植受者术后HCMV感染和指导抗病毒治疗的依据。 展开更多
关键词 异基因外周血干细胞移植 人类巨细胞病毒感染 基于核酸序列的技术
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