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肥皂草素类核糖核蛋白体失活蛋白的纯化及其性质研究 被引量:1
1
作者 沈倍奋 白炎 《生物化学杂志》 CSCD 1990年第4期301-305,共5页
利用强阳离子交换柱从Saponaria officinalis L种子中分离出一种肥皂草素(Saporin)成分。它在无细胞体系中显示了较强的抑制蛋白合成的活性,与抗体连接后能特异性杀伤靶细胞。
关键词 肥皂草素 核糖核蛋白 蛋白
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水稻核糖体失活蛋白家族基因OsRIP8的生物信息学与功能分析
2
作者 徐娅 黄佑岗 李树杏 《江苏农业科学》 北大核心 2024年第4期71-79,共9页
核糖体失活蛋白(RIPs)是一种能使真核细胞核糖体功能被抑制的毒蛋白。OsRIP8是属于该家族的一个功能未知基因。为研究该基因生物学功能,通过数据库对其进行生物信息学分析,利用qRT-PCR验证其表达模式,同时构建OsRIP8-RNAi干涉载体并利... 核糖体失活蛋白(RIPs)是一种能使真核细胞核糖体功能被抑制的毒蛋白。OsRIP8是属于该家族的一个功能未知基因。为研究该基因生物学功能,通过数据库对其进行生物信息学分析,利用qRT-PCR验证其表达模式,同时构建OsRIP8-RNAi干涉载体并利用农杆菌转化水稻,采用PCR技术鉴定出转基因阳性植株,分析阳性植株的表达和农艺性状,初步揭示该基因的功能。结果表明,水稻OsRIP8蛋白为不稳定亲水蛋白,不含信号肽及完整的跨膜结构域,蛋白结构以α螺旋为主;在OsRIP8基因启动子区域存在着与植物生长发育、生物与非生物胁迫以及植物激素响应有关的元件;OsRIP8基因的共表达基因富集到多种大分子的生物合成与蛋白代谢等途径;qRT-PCR分析结果表明,OsRIP8基因在发育的小穗及抽穗前1 d的花药中优先表达;RNAi干涉后OsRIP8基因的表达下调造成植株花粉育性和结实率显著降低。暗示该基因对水稻小穗的发育具有重要作用,可能参与调控花粉发育过程。 展开更多
关键词 水稻 核糖蛋白 生物信息学分析 功能分析 基因表达
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麻疯树核糖体失活蛋白的分离纯化和作用机制研究 被引量:52
3
作者 林娟 颜钫 +1 位作者 唐琳 陈放 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第11期36-40,共5页
从麻疯树种子中分离纯化出一种核糖体失活蛋白 ,用SDS PAGE测定其相对分子量为 2 8 2kD ,IEF PAGE计算其等点电为 8 5 4左右。体外抑制实验表明 ,麻疯树核糖体失活蛋白对兔网织红细胞裂解液的蛋白质生物合成有较强的抑制活性。当麻疯树... 从麻疯树种子中分离纯化出一种核糖体失活蛋白 ,用SDS PAGE测定其相对分子量为 2 8 2kD ,IEF PAGE计算其等点电为 8 5 4左右。体外抑制实验表明 ,麻疯树核糖体失活蛋白对兔网织红细胞裂解液的蛋白质生物合成有较强的抑制活性。当麻疯树核糖体失活蛋白作用于大鼠肝核糖体经苯胺处理后 ,在聚丙烯酰胺的尿素变性胶电泳图上能观察到 4 5 0bp左右的特征性核酸条带 ,证明麻疯树核糖体失活蛋白是一种RNAN 糖苷酶 ,从而首次阐明了麻疯树核糖体失活蛋白失活核糖体的分子机制。 展开更多
关键词 作用机制 麻疯树 核糖蛋白 分离纯化 RNA N-糖苷酶 相对分子量
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苦瓜籽核糖体失活蛋白的基本性质研究 被引量:8
4
作者 孟延发 孟雪琴 +6 位作者 张雪梅 杜毅峰 李春阳 阳燕 徐柳 刘波 魏旭文 《兰州大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期80-81,共2页
采用 Affi- Gel亲和层析和 Sephacryl S- 10 0分子筛层析等方法获得苦瓜籽核糖体失活蛋白 (RIP) ,经 SDS- PAGE,PAGE,IEF和 PAS方法分析均表明为单一蛋白着色带或单一糖蛋白着色带 .根据 SDS- PAGE测得表观分子量为 30 0 0 0 ,经 IEF- P... 采用 Affi- Gel亲和层析和 Sephacryl S- 10 0分子筛层析等方法获得苦瓜籽核糖体失活蛋白 (RIP) ,经 SDS- PAGE,PAGE,IEF和 PAS方法分析均表明为单一蛋白着色带或单一糖蛋白着色带 .根据 SDS- PAGE测得表观分子量为 30 0 0 0 ,经 IEF- PAGE结果计算其 PI为 9.0 ,对无细胞系统中蛋白质生物合成抑制活性明显 ,其 IC50 为 5.3× 10 -10 mol/ L左右 .体外生物活性试验结果表明其对人肝癌细胞 ,Vero,SP2 / 0 ,3T3,Kb,Navana,S- 180等肿瘤细胞株和麻疹病毒均表现有不同程度的抑制作用 ,而对完整人胚肺二倍体细胞却毒性极小 . 展开更多
关键词 核糖蛋白 苦瓜籽 植物毒素 生物制药
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栝楼籽核糖体失活蛋白的纯化、性质及晶体生长研究 被引量:7
5
作者 吴伸 陈毓荃 +2 位作者 吕志强 闫军 董贻诚 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第4期391-395,共5页
栝楼(Trichosantheskirilowi)籽经粉碎抽提、硫酸铵沉淀、阳离子交换及凝胶过滤柱层析等步骤,得到一种单链核糖体失活蛋白-Trichokirin(TCK).SDS-PAGE和IEF显示为单一条带,其分... 栝楼(Trichosantheskirilowi)籽经粉碎抽提、硫酸铵沉淀、阳离子交换及凝胶过滤柱层析等步骤,得到一种单链核糖体失活蛋白-Trichokirin(TCK).SDS-PAGE和IEF显示为单一条带,其分子量为29kD,pI≥9.3,含糖量约为1.75%.该蛋白对兔网织红细胞裂解液系统的蛋白质合成具较强的抑制活性,IC50为6.7×10-10mol/L.改进了纯化方法,提高了产率,并培养出晶体. 展开更多
关键词 栝楼籽 蛋白 核糖蛋白 纯化 生长
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苦瓜核糖体失活蛋白诱导HL-60细胞发生凋亡及其分子机制的研究 被引量:6
6
作者 郎海滨 糜漫天 +2 位作者 程天民 张乾勇 朱俊东 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第13期1157-1160,共4页
目的 探讨苦瓜核糖体失活蛋白 (Ribosomalinactivatingprotein ,RIP)诱导HL 60细胞凋亡的活性 ,以及对HL 60细胞Bcl 2、Bax、caspase 3表达变化的影响及其分子机制。方法 以一定浓度苦瓜RIP处理HL 60细胞 2 4~ 72h ,用TUNEL法检测细... 目的 探讨苦瓜核糖体失活蛋白 (Ribosomalinactivatingprotein ,RIP)诱导HL 60细胞凋亡的活性 ,以及对HL 60细胞Bcl 2、Bax、caspase 3表达变化的影响及其分子机制。方法 以一定浓度苦瓜RIP处理HL 60细胞 2 4~ 72h ,用TUNEL法检测细胞凋亡。运用RT PCR和Westernblot免疫印记法检测Bcl 2、Bax、caspase 3mRNA和蛋白表达的变化。结果 苦瓜RIP在一定作用浓度下可使HL 60细胞发生凋亡 ,且随着作用时间的延长凋亡细胞比例逐渐升高。在此过程中 ,HL 60细胞的caspase 3mRNA的表达及其胞内活性亚单位水平显著升高 (P <0 .0 5 ) ,Bcl 2mRNA表达变化虽不显著 ,但其蛋白水平明显降低 (P <0 .0 5 ) ,与此同时 ,BaxmRNA和蛋白表达均有所上调。结论 在苦瓜RIP诱导的HL 60细胞凋亡中 ,caspase 3发挥了极为重要的作用 ,而Bcl 2和Bax可能通过其表达量的变化。 展开更多
关键词 核糖蛋白 细胞凋亡 BCL-2 BAX CASPASE-3
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转几丁质酶和核糖体失活蛋白双价基因大豆的获得与抗病性鉴定 被引量:9
7
作者 郭玉双 张艳菊 +5 位作者 朱延明 李杰 柏锡 张淑珍 吴书音 李海燕 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1841-1847,共7页
以东北地区4个主栽大豆品种为试材,通过农杆菌介导法,将2个抗真菌病基因,即几丁质酶基因和核糖体失活蛋白基因构建在同一植物表达载体上,对受体材料进行遗传转化,获得了经Southern检测同时整合双价基因的T0代转基因大豆植株,转化频率为0... 以东北地区4个主栽大豆品种为试材,通过农杆菌介导法,将2个抗真菌病基因,即几丁质酶基因和核糖体失活蛋白基因构建在同一植物表达载体上,对受体材料进行遗传转化,获得了经Southern检测同时整合双价基因的T0代转基因大豆植株,转化频率为0.5%。将T0代转基因大豆植株扩繁至T2代,并进行了大豆疫霉根腐病和大豆灰斑病的抗性检测,4个株系的抗性均比对照有明显提高。分子生物学验证及RT-PCR检测表明,2个外源基因在4个株系中均进行了转录表达。 展开更多
关键词 转基因大豆 几丁质酶基因 核糖蛋白基因 大豆疫霉根腐病 大豆灰斑病
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阴阳离子交换色谱串联分离纯化苦瓜籽核糖体失活蛋白 被引量:11
8
作者 王宾香 时祥柱 +3 位作者 郭春腾 叶秀云 王中来 饶平凡 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期543-546,共4页
将阴阳离子交换色谱柱在灌注色谱工作站上串联,使苦瓜籽粗提液中未被阴离子色谱柱吸附的蛋白质直接在阳离子色谱柱上吸附,用盐线性梯度洗脱从阳离子色谱柱上分离出两个具有抗真菌活性的蛋白。两个抗真菌蛋白经鉴定都达到了电泳纯,相对... 将阴阳离子交换色谱柱在灌注色谱工作站上串联,使苦瓜籽粗提液中未被阴离子色谱柱吸附的蛋白质直接在阳离子色谱柱上吸附,用盐线性梯度洗脱从阳离子色谱柱上分离出两个具有抗真菌活性的蛋白。两个抗真菌蛋白经鉴定都达到了电泳纯,相对分子质量均为30000左右,N 端氨基酸序列分别为DVSFRLSGADPRSYGMFI与DVNFDLSTATAK,表明所得到的两种蛋白为苦瓜籽中的2个Ⅰ型核糖体失活蛋白α 苦瓜素(α MMC)和β 苦瓜素(β MMC)。抗菌实验表明,α MMC对香蕉枯萎菌和果腐霉菌均具有较强的抑制作用,β MMC对果腐霉菌有较强的抑制作用,而α MMC和β MMC对白绢菌的抑制活性均不明显。采用串联色谱,α MMC和β MMC的质量回收率分别为13 8%和8 0%。 展开更多
关键词 阴离子交换色谱 阳离子交换色谱 串联色谱 苦瓜籽 纯化 核糖蛋白
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八棱丝瓜籽核糖体失活蛋白的分离纯化及其生化性质 被引量:8
9
作者 林峻凯 陈明晃 +4 位作者 谢捷明 赵蓉 叶晓明 石小莉 王梓壬 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期609-613,共5页
通过盐溶液抽提、硫酸铵分级沉淀、CM 5 2纤维素阳离子交换层析、反相毛细管液相色谱 (re verse phasecapillaryliquidchromatography ,RP CLC)等步骤 ,从八棱丝瓜籽中分离到 2种单链核糖体失活蛋白luffaculin 1和luffaculin 2 .在SDS P... 通过盐溶液抽提、硫酸铵分级沉淀、CM 5 2纤维素阳离子交换层析、反相毛细管液相色谱 (re verse phasecapillaryliquidchromatography ,RP CLC)等步骤 ,从八棱丝瓜籽中分离到 2种单链核糖体失活蛋白luffaculin 1和luffaculin 2 .在SDS PAGE和IEF上均显示为单一条带 ,表观分子量均为 2 8kD ,其等电点分别为 8 86 (luffaculin 1)和 9 0 5 (luffaculin 2 ) .实验表明 ,它们具有RNAN 糖苷酶活性 .蛋白质合成抑制活性测试表明 ,它们对蛋白质合成具较强的抑制作用 .体外抑制肿瘤细胞生长活性检测表明 ,luffaculin 1和luffaculin 2对人白血病细胞株K5 6 2有较强的毒性 ,IC50 分别为 1 1×10 -6mol L和 2 0× 10 -7mol L . 展开更多
关键词 八棱丝瓜籽 核糖蛋白 分离纯化 生化性质
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苦瓜核糖体失活蛋白生物活性与功能研究进展 被引量:6
10
作者 杨谷良 李士明 王书珍 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第13期226-231,共6页
核糖体失活蛋白(ribosome-inactivating proteins,RIPs)是一类能够脱去真核细胞28S r RNA内SRL区域的A4342,从而破坏延伸因子与核糖体的结合,将蛋白质的生物合成抑制在延伸阶段的蛋白质家族。RIPs有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型,苦瓜中已发现的α-苦瓜... 核糖体失活蛋白(ribosome-inactivating proteins,RIPs)是一类能够脱去真核细胞28S r RNA内SRL区域的A4342,从而破坏延伸因子与核糖体的结合,将蛋白质的生物合成抑制在延伸阶段的蛋白质家族。RIPs有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型,苦瓜中已发现的α-苦瓜素、β-苦瓜素、γ-苦瓜素、δ-苦瓜素、ε-苦瓜素、MAP30等,均属于Ⅰ型RIPs。这些RIPs具有抗病毒、抗菌、抗虫害、抑制肿瘤细胞生长等生物学活性,受到了人们的广泛关注。本文从RIPs的分类、生物学活性、功能与应用等方面,对苦瓜中的RIPs进行了综述。 展开更多
关键词 苦瓜 核糖蛋白 分类 生物 功能
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单链核糖体失活蛋白的核糖核酸酶活性 被引量:5
11
作者 陈红 华陵 +4 位作者 王悦 颜茂恭 董贻诚 余明琨 姚启智 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第5期453-456,共4页
以芹菜4.5SRNA为底物,在pH5.0的条件下,5种纯核糖体失活蛋白:天花粉蛋白、苦瓜子蛋白、肥皂草蛋白、丝瓜素毒蛋白和多花白树毒蛋白均显示出核糖核酸酶活性,放射自显影图显示出它们对RNA分子中的各种碱基具有不同的... 以芹菜4.5SRNA为底物,在pH5.0的条件下,5种纯核糖体失活蛋白:天花粉蛋白、苦瓜子蛋白、肥皂草蛋白、丝瓜素毒蛋白和多花白树毒蛋白均显示出核糖核酸酶活性,放射自显影图显示出它们对RNA分子中的各种碱基具有不同的敏感性. 展开更多
关键词 核糖蛋白 核糖核酸酶
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丝瓜核糖体失活蛋白的分离与纯化 被引量:3
12
作者 吴伸 朱曰荣 +1 位作者 郭峰 刘朵花 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1995年第5期464-468,共5页
采用一种改进的方法,简便快速地从丝瓜(Luffacylindrica)籽中得到丝瓜蛋白α和β.它们在SDS-PAGE上均呈一区带,其分子量分别为28000和29000.等电聚焦测定等电点均为10.它们对无细胞体系蛋白... 采用一种改进的方法,简便快速地从丝瓜(Luffacylindrica)籽中得到丝瓜蛋白α和β.它们在SDS-PAGE上均呈一区带,其分子量分别为28000和29000.等电聚焦测定等电点均为10.它们对无细胞体系蛋白质合成都有强烈的抑制活性,其ID_(50)分别为10μg/L和50μg/L,是目前发现的单链核糖体失活蛋白中活性最高的. 展开更多
关键词 丝瓜 核糖蛋白 分离 提纯
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苦瓜核糖体失活蛋白MAP30的原核表达与抗体制备 被引量:4
13
作者 许君 乔帅 +2 位作者 常岚 朱海华 郑文明 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期552-556,共5页
苦瓜核糖体失活蛋白MAP30(Momordica charantiaantiviral protein 30)是苦瓜中一种具有抗病毒、抗肿瘤、抗菌等多种生物活性的蛋白质.将含有重组表达质粒pET-28(a)-MAP30的大肠杆菌BL21进行诱导表达获得了重组蛋白MAP30,对IPTG(异丙基-... 苦瓜核糖体失活蛋白MAP30(Momordica charantiaantiviral protein 30)是苦瓜中一种具有抗病毒、抗肿瘤、抗菌等多种生物活性的蛋白质.将含有重组表达质粒pET-28(a)-MAP30的大肠杆菌BL21进行诱导表达获得了重组蛋白MAP30,对IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导浓度、诱导时间表达条件的分析表明,工程菌经0.2mmol.L-1IPTG诱导6 h实现高效可溶性表达.利用镍离子鏊合亲和层析对重组蛋白纯化,当洗脱液中咪唑的浓度为100 mmol.L-1时,目的蛋白被洗脱的效果最好.将纯化后的重组蛋白免疫家兔,获得了特异性的多克隆抗血清. 展开更多
关键词 苦瓜 苦瓜核糖蛋白 原核表达 制备
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丝瓜和苦瓜核糖体失活蛋白的比较研究 被引量:3
14
作者 魏明卉 魏明旭 +1 位作者 刘征 罗艳蕊 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 2002年第1期115-118,共4页
从丝瓜和苦瓜种子中分离得到的丝瓜子和苦瓜子蛋白 ,均是含糖的单链核糖体失活蛋白 ,等电点在 9~ 10之间 ,在抑制蛋白质合成中丝瓜子蛋白的毒性高 ,而在抗生育活性中 ,苦瓜子蛋白较好 .
关键词 核糖蛋白 丝瓜子蛋白 苦瓜子蛋白 等电点 植物毒蛋白 抗生育
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侧柏籽核糖体失活蛋白的分离及作用机制研究 被引量:3
15
作者 斯越秀 刘望夷 钱凯先 《浙江大学学报(工学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第3期423-426,共4页
提出了从裸子植物侧柏中分离纯化核糖体失活蛋白的制备和检测方法.通过盐溶液抽提、硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析、阳离子交换层析等步骤制备了该蛋白.该蛋白的检测方法是把这种蛋白作用于大鼠 80S肝核糖体后, 不经过酸性苯胺处理,... 提出了从裸子植物侧柏中分离纯化核糖体失活蛋白的制备和检测方法.通过盐溶液抽提、硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析、阳离子交换层析等步骤制备了该蛋白.该蛋白的检测方法是把这种蛋白作用于大鼠 80S肝核糖体后, 不经过酸性苯胺处理,直接进行聚丙烯酰胺的尿素变性胶电泳.在电泳图上得到 400 bp左右的特征性核酸条带.分析结果表明,该蛋白为一种新的核糖酶型的核糖体失活蛋白,阐明了侧柏核糖体失活蛋白失活核糖体的分子机制. 展开更多
关键词 RNA水解酶 核糖蛋白 侧柏 分离 纯化
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繁缕核糖体失活蛋白基因克隆及序列分析 被引量:2
16
作者 郑玉红 赵海光 +2 位作者 单宇 周建建 何树兰 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期14-20,共7页
采用同源克隆结合RACE法,克隆了繁缕核糖体失活蛋白的全长cDNA,命名为q3(GenBank accession GQ870262)。序列分析结果表明,q3的开放阅读框(ORF)长780 bp,编码259个氨基酸。序列G+C含量为41.5%,与大部分Ⅰ型RIP基因相近。q3编码的蛋白质... 采用同源克隆结合RACE法,克隆了繁缕核糖体失活蛋白的全长cDNA,命名为q3(GenBank accession GQ870262)。序列分析结果表明,q3的开放阅读框(ORF)长780 bp,编码259个氨基酸。序列G+C含量为41.5%,与大部分Ⅰ型RIP基因相近。q3编码的蛋白质命名为Q3,理论分子量为28.16 kD,pI为9.44,均与Ⅰ型核糖体失活蛋白相近;包含由23个氨基酸组成的信号肽。功能结构域分析发现,该蛋白含有3个蛋白激酶磷酸化位点、4个络氨酸蛋白激酶磷酸化位点和7个N-肉豆蔻酰化位点。三级结构预测发现,有35.52%的氨基酸残基参与了α螺旋,24.32%的氨基酸残基组成延伸链,40.15%的氨基酸残基随机缠绕其中。基于繁缕及其近缘种核糖体失活蛋白的氨基酸序列构建的系统发育树显示,其结构与经典分类结果基本一致。 展开更多
关键词 繁缕 核糖蛋白 基因克隆 序列分析
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茶树Ⅱ型核糖体失活蛋白基因CsRIP1和CsRIP2的克隆与表达分析 被引量:2
17
作者 袁红雨 马宁 +3 位作者 杨会敏 庞秋芬 谢素霞 程琳 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第2期147-153,共7页
【目的】克隆茶树Ⅱ型核糖体失活蛋白基因CsRIP1和CsRIP2,探讨CsRIPs基因的组织表达特异性以及假眼小绿叶蝉和机械伤害处理对其表达的影响。【方法】Cs-Ev2(Gen Bank登录号:GH618807)为一受假眼小绿叶蝉取食诱导的茶树Ⅱ型核糖体失活蛋... 【目的】克隆茶树Ⅱ型核糖体失活蛋白基因CsRIP1和CsRIP2,探讨CsRIPs基因的组织表达特异性以及假眼小绿叶蝉和机械伤害处理对其表达的影响。【方法】Cs-Ev2(Gen Bank登录号:GH618807)为一受假眼小绿叶蝉取食诱导的茶树Ⅱ型核糖体失活蛋白基因的c DNA片段,利用RACE技术克隆该基因的全长c DNA,命名为CsRIP1(Gen Bank登录号:FJ648831)。利用RT-PCR技术从茶树子叶中分离出一个新的Ⅱ型核糖体失活蛋白基因的c DNA序列,命名为CsRIP2(Gen Bank登录号:GU951535)。利用PCR技术克隆CsRIPs的基因组序列。设计基因特异性引物,利用Real-time qRT-PCR技术检测CsRIPs的组织表达特异性,以及在叶片中假眼小绿叶蝉和机械伤害处理对其表达的影响。【结果】CsRIP1和CsRIP2的序列一致性为98%,都含有一个1 713 bp的开放阅读框,编码570个氨基酸残基,但是它们具有不同的3'非翻译区。CsRIP1和CsRIP2由信号肽序列、1个RIP结构域、链接肽和2个RBL结构域组成。CsRIPs与其他Ⅱ型RIPs具有较高的序列一致性,Ⅱ型RIPs保守的氨基酸残基,包括构成A链N-糖苷酶活性位点的氨基酸残基、B链中形成寡糖链结合位点的氨基酸残基、形成链间和链内二硫键的半胱氨酸残基以及RBL结构域中的Qx W基序,均出现在CsRIPs相应的位置上。系统进化树分析结果显示,同一物种的Ⅱ型RIPs首先聚类合并,2个CsRIP与樟的Ⅱ型RIPs聚为一支。比较CsRIPs的c DNA序列和基因组序列,发现它们的基因组序列不含内含子。CsRIPs基因的表达具有组织特异性,CsRIP1在叶片中的表达水平最高,在子叶中的表达水平最低,而CsRIP2在子叶中的表达水平最高,在叶片中的表达水平最低。在叶片中,CsRIP1和CsRIP2的表达均受假眼小绿叶蝉取食的强烈诱导,并且其表达水平随着取食时间的增加而逐渐增加,取食48 h后,它们的表达水平大约分别是对照的120和100倍。在叶片中,CsRIPs基因的表达也受机械伤害处理的诱导,CsRIP1的转录水平在处理后6 h达到最大值,CsRIP2在处理后6 h表达水平显著升高,12 h达到最大值。【结论】克隆茶树的2个Ⅱ型核糖体失活蛋白基因,它们可能参与茶树的防卫反应,且已发生亚功能化。进一步分析这2个基因的启动子,可以加深对CsRIPs基因转录调控以及RIPs的生物学功能的理解。 展开更多
关键词 茶树 假眼小绿叶蝉 Ⅱ型核糖蛋白 CsRIP1 CsRIP2
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C-末端缺失和完整的绞股蓝核糖体失活蛋白在大肠杆菌中的表达 被引量:2
18
作者 林毅 陈国强 +2 位作者 吴祖建 谢联辉 林奇英 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 2004年第4期593-595,共3页
将绞股蓝(Gynostemmapentaphyllum)核糖体失活蛋白(Ribosome-InactivatingProtein,RIP)DNA部分片段和cDNA序列(GenBank登录号分别为AY075115和AY279219)插入到表达载体pGEX-2T的BamHⅠ/EcoRⅠ位点处,构建了与谷胱甘肽S-转移酶(Glutathio... 将绞股蓝(Gynostemmapentaphyllum)核糖体失活蛋白(Ribosome-InactivatingProtein,RIP)DNA部分片段和cDNA序列(GenBank登录号分别为AY075115和AY279219)插入到表达载体pGEX-2T的BamHⅠ/EcoRⅠ位点处,构建了与谷胱甘肽S-转移酶(GlutathioneS-transferase,GST)融合表达的载体。诱导表达和序列测定验证读码框的结果表明,C-末端缺失和完整的绞股蓝RIP在大肠杆菌DH5α菌株中实现了融合表达。 展开更多
关键词 绞股蓝 核糖蛋白 大肠杆菌 融合表达
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核糖体单链失活蛋白在无细胞体系中的活性 被引量:8
19
作者 王润华 郑硕 +1 位作者 陈兴 沈倍奋 《生物化学杂志》 CSCD 1992年第4期395-399,共5页
核糖体单链失活蛋白是一类广泛分布于植物中的蛋白质,它能使真核细胞核糖体60S亚基失活。本文报道了一些核糖体单链失活蛋白的制备、纯化以及在兔网织红细胞裂解液中对蛋白质生物合成的抑制活性及它们对完整细胞的毒性。其中多数的核糖... 核糖体单链失活蛋白是一类广泛分布于植物中的蛋白质,它能使真核细胞核糖体60S亚基失活。本文报道了一些核糖体单链失活蛋白的制备、纯化以及在兔网织红细胞裂解液中对蛋白质生物合成的抑制活性及它们对完整细胞的毒性。其中多数的核糖体单链失活蛋白是首次被分离纯化并对其毒性进行研究的。 展开更多
关键词 无细胞 核糖 单链蛋白
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重组蓖麻毒素A链与几种天然单链核糖体失活蛋白的活性研究 被引量:3
20
作者 裴武红 王润华 +1 位作者 郑硕 沈倍奋 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第1期71-74,共4页
采用pExSecⅠ载体系统进行了蓖麻毒素A链的原核表达,经CM-Sepharose一步纯化后,获得了纯度约80%的重组蓖麻毒素A链.将其与几种天然单链核糖体失活蛋白进行了超螺旋DNA裂解研究和无细胞体系中蛋白合成抑制... 采用pExSecⅠ载体系统进行了蓖麻毒素A链的原核表达,经CM-Sepharose一步纯化后,获得了纯度约80%的重组蓖麻毒素A链.将其与几种天然单链核糖体失活蛋白进行了超螺旋DNA裂解研究和无细胞体系中蛋白合成抑制试验,结果表明,重组蓖麻毒素A链具有类似于天然单链核糖体失活蛋白的活性。 展开更多
关键词 蓖麻毒素A链 核糖蛋白 无细胞
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