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PNRC1核定位信号序列的鉴定被引量：2: 1; 作者王元忠李渝萍 +3 位作者陈敏陈彬陈健周度金《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期35-39,共5页; 为鉴定富含脯氨酸核受体辅调节蛋白1(PNRC1)分子的核定位信号序列(nuclear localization signal sequence ,NLS) ,在生物信息学方法预测的基础上,先构建野生型PNRC1及删除预测NLS的PNRC1突变体的绿色荧光蛋白(GFP)重组表达载体,转染细... 展开更多; 关键词富含脯氨酸核受体辅调节蛋白1 核定位信号序列辅活化子绿色荧光蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

野生型p27和核定位信号缺失型p27真核表达载体的构建及表达: 2; 作者焦鑫艳张英 +6 位作者盛秋张妙杨泽健高小倩赵谦王博刘培军《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期516-521,共6页; 目的构建人野生型p27(p27WT)和核定位信号缺失型p27(p27△NLS)的真核表达载体,并在HEK293T细胞中进行表达,为细胞中p27核浆定位的变化及其不同的生物学功能研究提供细胞基础。方法提取人乳腺癌细胞系MCF7总RNA,反转录cDNA后,分别进行p2... 展开更多; 关键词 P27 CDKN1B 核定位信号序列真核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

进入细胞核之门:核移位机制研究进展: 3; 作者罗湘建曹亚《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第9期834-837,共4页; 细胞中DNA复制和RNA生物形成发生在细胞核,而蛋白质的合成场所位于细胞质,这些生命活动的整合依赖于功能蛋白等在两个亚空间尺度的选择性穿梭.这是一个信号介导的过程,需要能量和可溶性因子如穿梭载体的参与.通过介绍功能蛋白受控核移... 展开更多; 关键词核孔复合物(NPC) GTP酶Ran 核定位信号序列(NLS) 核移位; 在线阅读下载PDF 职称材料

MAGE家族新成员Restin入核分子机制的初步探讨被引量：1: 4; 作者王颖于芳 +3 位作者付海燕杨国栋卢凡卢兹凡《科学技术与工程》 2006年第18期2817-2821,共5页; restin是该实验室于1999年从维甲酸诱导分化的白血病细胞HL-60中克隆得到的一种黑色素瘤相关抗原(MAGE)家族的新基因,初步验证其生物学功能为阻滞细胞周期进程。利用生物学软件预测该基因所编码蛋白的N端含有一非典型二分裂核定位信号序... 展开更多; 关键词 RESTIN 核定位信号序列 IMPORTIN α Ⅱ; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名PNRC1核定位信号序列的鉴定被引量：2: 1; 作者王元忠李渝萍陈敏陈彬陈健周度金; 机构第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期35-39,共5页; 基金国家自然基金资助项目(No30671056)~~; 文摘为鉴定富含脯氨酸核受体辅调节蛋白1(PNRC1)分子的核定位信号序列(nuclear localization signal sequence ,NLS) ,在生物信息学方法预测的基础上,先构建野生型PNRC1及删除预测NLS的PNRC1突变体的绿色荧光蛋白(GFP)重组表达载体,转染细胞后通过激光共聚焦显微镜观察PNRC1分子在删除预测NLS后细胞内的定位变化.然后,将预测的NLS编码序列直接连到GFP表达载体上,以及将预测的NLS加到胞浆蛋白上构建其GFP重组表达载体,转染细胞,观察预测的NLS能否把构建的重组体都带到细胞核内.结果显示,删除PNRC1中预测的NLS后,其定位从细胞核中变为主要定位在细胞浆中,而预测的NLS能把GFP或胞浆中的蛋白带到细胞核中.研究表明,预测的NLS为PNRC1分子真正的NLS.; 关键词富含脯氨酸核受体辅调节蛋白1 核定位信号序列辅活化子绿色荧光蛋白; Keywords PNRC1 nuclear localization signal sequence coactivator GFP; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名野生型p27和核定位信号缺失型p27真核表达载体的构建及表达: 2; 作者焦鑫艳张英盛秋张妙杨泽健高小倩赵谦王博刘培军; 机构西安交通大学第一附属医院转化医学中心陕西省肿瘤精准医学重点实验室西安交通大学第一附属医院消化内科西北工业大学医院西安交通大学第一附属医院耳鼻喉头颈外科; 出处《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期516-521,共6页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.81872272) 陕西省重点研发计划资助项目(No.2015SF015,2019SF-147) 西安交通大学第一附属医院基金资助项目(No.2019ZYTS-13)。; 文摘目的构建人野生型p27(p27WT)和核定位信号缺失型p27(p27△NLS)的真核表达载体,并在HEK293T细胞中进行表达,为细胞中p27核浆定位的变化及其不同的生物学功能研究提供细胞基础。方法提取人乳腺癌细胞系MCF7总RNA,反转录cDNA后,分别进行p27全长和非NLS区片段的PCR扩增,获得p27WT全长(CDKN1B,NM_004064.5)和p27△NLS编码区序列,分别将其克隆至真核表达载体pCMV-Blank,经菌液PCR、双酶切和测序鉴定。电穿孔法转染HEK293T细胞,48 h时分别提取胞核蛋白和胞质蛋白,Western blotting检测p27在细胞质和细胞核中的蛋白表达。结果测序结果显示,真核表达载体pCMV-Blank中插入的p27WT序列和p27△NLS序列均与NM_004064.5序列相一致。pCMV-p27WT转染HEK293T细胞后,细胞总p27蛋白表达显著增加,核浆分离检测发现其在细胞质和细胞核中均表达;而pCMV-p27△NLS转染HEK293T细胞的总p27蛋白表达也显著增加,核浆分离检测发现其主要在细胞质中表达。结论成功构建人p27WT和p27△NLS的真核表达载体,并在HEK293T细胞中成功表达,为p27蛋白在肿瘤细胞周期中的功能研究提供了细胞基础。; 关键词 P27 CDKN1B 核定位信号序列真核表达; Keywords p27 CDKN1B nuclear localization signal eukaryotic expression; 分类号 R393 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名进入细胞核之门:核移位机制研究进展: 3; 作者罗湘建曹亚; 机构中南大学湘雅医学院肿瘤研究所; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第9期834-837,共4页; 文摘细胞中DNA复制和RNA生物形成发生在细胞核,而蛋白质的合成场所位于细胞质,这些生命活动的整合依赖于功能蛋白等在两个亚空间尺度的选择性穿梭.这是一个信号介导的过程,需要能量和可溶性因子如穿梭载体的参与.通过介绍功能蛋白受控核移位机制研究进展,拓宽了其潜在的医学应用,该领域的深入研究,将有力推动抗病毒治疗和基因治疗载体的设计研究.; 关键词核孔复合物(NPC) GTP酶Ran 核定位信号序列(NLS) 核移位; Keywords nuclear pore complex （NPC）, GTPase, Ran, nuclear localization signal （NLS）, nuclear translocation; 分类号 Q291 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名MAGE家族新成员Restin入核分子机制的初步探讨被引量：1: 4; 作者王颖于芳付海燕杨国栋卢凡卢兹凡; 机构第四军医大学生物化学与分子生物学教研室; 出处《科学技术与工程》 2006年第18期2817-2821,共5页; 基金国家自然科学基金(30470874)资助; 文摘 restin是该实验室于1999年从维甲酸诱导分化的白血病细胞HL-60中克隆得到的一种黑色素瘤相关抗原(MAGE)家族的新基因,初步验证其生物学功能为阻滞细胞周期进程。利用生物学软件预测该基因所编码蛋白的N端含有一非典型二分裂核定位信号序列(nuclearlocalizationsignal,NLS),且预测结果显示Restin入核可能与核转运蛋白importinαII的作用密切相关。因此克隆并鉴定了针对NLS等结构域的一系列截短体以及pACT-impotinαII,利用细胞双杂交技术对其进行相互作用以及作用部位的检测。结果证明Restin的入核确实与核定位信号序列以及核转运蛋白的相互作用有关。; 关键词 RESTIN 核定位信号序列 IMPORTIN α Ⅱ; Keywords Restin nuclear localization signal（NLS） importin α Ⅱ; 分类号 Q75 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	PNRC1核定位信号序列的鉴定	王元忠李渝萍陈敏陈彬陈健周度金	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	野生型p27和核定位信号缺失型p27真核表达载体的构建及表达	焦鑫艳张英盛秋张妙杨泽健高小倩赵谦王博刘培军	《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2022	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	进入细胞核之门:核移位机制研究进展	罗湘建曹亚	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2006	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	MAGE家族新成员Restin入核分子机制的初步探讨	王颖于芳付海燕杨国栋卢凡卢兹凡	《科学技术与工程》	2006	1	在线阅读下载PDF 职称材料