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杜氏盐藻核基质结合区结合蛋白的细胞定位 被引量:2
1
作者 王鹏举 王天云 +2 位作者 冯英才 刘红涛 薛乐勋 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期55-58,共4页
为研究核基质结合区结合蛋白的功能及调控机制,PCR扩增杜氏盐藻MBP的cDNA全长序列及N端和C端序列,与绿色荧光蛋白基因融合构建真核表达载体,脂质体转染CHO细胞,Western blotting和荧光显微镜检测基因表达情况和细胞定位。结果显示:MBP及... 为研究核基质结合区结合蛋白的功能及调控机制,PCR扩增杜氏盐藻MBP的cDNA全长序列及N端和C端序列,与绿色荧光蛋白基因融合构建真核表达载体,脂质体转染CHO细胞,Western blotting和荧光显微镜检测基因表达情况和细胞定位。结果显示:MBP及N端和C端融合蛋白成功在CHO细胞表达,MBP和C端部分定位于细胞核且聚集于核仁,N端部分分布整个细胞,说明MBP定位于细胞核且细胞定位信号位于C端,MBP可能与rRNA前体结合发挥作用。 展开更多
关键词 杜氏盐藻 附着 核基质结合区结合蛋白 表达载体 细胞定位
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口腔鳞癌转移与特异性核基质结合区结合蛋白质1(SATB1)表达的关系 被引量:1
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作者 巫家晓 罗婷婷 +1 位作者 于大海 卿海云 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2014年第5期438-441,共4页
目的:检测特异性核基质结合区结合蛋白质1在口腔鳞状细胞癌中的表达及其与浸润转移的关系。方法:采用免疫组织化学染色法及逆转录-聚合酶链反应检测SATB1在各组织中的表达。结果:52例口腔鳞癌原发灶中,SATB1蛋白在病理分级Ⅱ~Ⅲ级组... 目的:检测特异性核基质结合区结合蛋白质1在口腔鳞状细胞癌中的表达及其与浸润转移的关系。方法:采用免疫组织化学染色法及逆转录-聚合酶链反应检测SATB1在各组织中的表达。结果:52例口腔鳞癌原发灶中,SATB1蛋白在病理分级Ⅱ~Ⅲ级组(中~低分化鳞癌)表达明显高于Ⅰ级组(高分化鳞癌)(P〈0.05);在临床分期Ⅲ~Ⅳ期组高于Ⅰ~Ⅱ期组(P〈0.05)。SATB1蛋白和mRNA的表达在16例淋巴结转移组高于36例无淋巴结转移组(P〈0.05)。SATB1mRNA的表达量在6例淋巴结转移灶高于16例转移组原发灶(P〈0.05)。结论:SATB1蛋白及SATB1mRNA在口腔鳞癌中的表达上调与口腔鳞癌的恶性程度及转移相关;SATB1可能在口腔鳞癌的发展、转移过程中起到促进的作用。 展开更多
关键词 特异性核基质结合区结合蛋白1 口腔鳞状细胞癌 免疫组织化学 逆转录-聚合酶链反应 转移
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SATB1——核基质结合区结合蛋白质1的研究进展 被引量:3
3
作者 程锋 肖旭阳 +1 位作者 殷南昌 王晓东 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第22期4220-4222,共3页
在真核生物的细胞核中.存在一种由非组蛋白的纤维蛋白和大分子量的RNA组成的三维网架体系.这就是核基质。结合在核基质上的特异DNA序列称为核基质结合区(matrix attachment regions S/MAR以下统称MAR)。核基质结合区结合蛋白质1 (... 在真核生物的细胞核中.存在一种由非组蛋白的纤维蛋白和大分子量的RNA组成的三维网架体系.这就是核基质。结合在核基质上的特异DNA序列称为核基质结合区(matrix attachment regions S/MAR以下统称MAR)。核基质结合区结合蛋白质1 (special AT-rich sequence binding proteinl, SATB1 ) 是一种组织特异性表达的核基质附着区(matrix attachment region,MAR)结合蛋白。 展开更多
关键词 结合 结合蛋白 SATB1 组织特异性表达 DNA序列 三维网架 纤维蛋白 非组蛋白
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杜氏盐藻核基质附着区结合蛋白cDNA片段的克隆及序列分析 被引量:3
4
作者 王亚峰 王天云 +3 位作者 姬翔 刘红涛 王建民 薛乐勋 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2006年第3期436-439,共4页
目的:克隆杜氏盐藻核基质附着区(MAR)结合蛋白片段。方法:根据多种生物MAR结合蛋白氨基酸的高度保守序列EWYGWHF和KYGLIYQ,设计一对简并引物,以杜氏盐藻的cDNA为模板,进行PCR扩增,PCR产物与T载体相连,转化大肠杆菌JM109后,筛选鉴定,对... 目的:克隆杜氏盐藻核基质附着区(MAR)结合蛋白片段。方法:根据多种生物MAR结合蛋白氨基酸的高度保守序列EWYGWHF和KYGLIYQ,设计一对简并引物,以杜氏盐藻的cDNA为模板,进行PCR扩增,PCR产物与T载体相连,转化大肠杆菌JM109后,筛选鉴定,对阳性菌落进行测序分析。将测序结果推导成氨基酸序列,与GenBank上其他物种MAR结合蛋白序列进行同源性分析。结果:在杜氏盐藻中得到的cDNA片段,核苷酸长度为474bp,编码158个氨基酸(GenBank收录号为DQ124215)。推导的氨基酸序列与稻、莲、拟南芥、豌豆、烟草、酵母、果蝇和蟾的MAR结合蛋白相比较,同源性分别为74%、73%、73%、73%、71%、70%、68%和67%。结论:所克隆的序列可能为杜氏盐藻MAR结合蛋白片段。 展开更多
关键词 杜氏盐藻 附着结合蛋白 CDNA 简并引物
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杜氏盐藻核基质附着区结合蛋白基因的克隆及原核表达 被引量:1
5
作者 冯英才 王天云 +3 位作者 王鹏举 刘红涛 刘兰琦 薛乐勋 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2008年第6期1120-1123,共4页
目的:构建杜氏盐藻核基质附着区(MAR)结合蛋白的原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),表达并纯化融合蛋白。方法:根据GenBank上杜氏盐藻MAR结合蛋白的cDNA全长序列设计出含有特定酶切位点的引物,PCR法获得MAR结合蛋白基因序列全长,将其... 目的:构建杜氏盐藻核基质附着区(MAR)结合蛋白的原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),表达并纯化融合蛋白。方法:根据GenBank上杜氏盐藻MAR结合蛋白的cDNA全长序列设计出含有特定酶切位点的引物,PCR法获得MAR结合蛋白基因序列全长,将其克隆至载体pMD18-T中。酶切连接到pET-28a(+)上构建原核表达载体pET-MBP,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),异丙基硫代-β-半乳糖苷(IPTG)诱导其表达,Western blotting检验其表达结果。结果:重组质粒经酶切、PCR、测序鉴定,成功构建了原核表达载体pET-MBP,对表达的融合蛋白的Western blotting分析结果表明表达的蛋白质为目的蛋白。Ni2+亲和层析法纯化蛋白质,纯化后目的蛋白在总蛋白中的含量约为70%。结论:成功地克隆杜氏盐藻MAR结合蛋白基因的全长并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,且纯化了MAR结合蛋白的融合蛋白。 展开更多
关键词 杜氏盐藻 附着 附着结合蛋白 表达
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核骨架基质结合区(S/MAR)提高逆转录病毒载体介导egfp在NIH3T3细胞中的表达 被引量:10
6
作者 戴冰冰 梅文瀚 +2 位作者 王家敏 钱关祥 卢健 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期24-30,共7页
为减轻逆转录病毒介导的外源基因的沉默 ,进一步提高逆转录病毒MFG载体介导的转移基因的表达 ,将人 β INF基因上游 80 0bp的核骨架基质结合区 (S MAR)分别反向和正向克隆至MFG载体 3′LTR上游 ,以egfp为报告基因观察S MAR对egfp基因表... 为减轻逆转录病毒介导的外源基因的沉默 ,进一步提高逆转录病毒MFG载体介导的转移基因的表达 ,将人 β INF基因上游 80 0bp的核骨架基质结合区 (S MAR)分别反向和正向克隆至MFG载体 3′LTR上游 ,以egfp为报告基因观察S MAR对egfp基因表达水平以及对病毒滴度的影响 .结果显示 :反向和正向的S MAR在瞬时表达的情况都不能提高egfp的表达 ,但在稳定整合的情况下反向S MAR可明显提高egfp在NIH3T3细胞内的表达 ,而正向的S MAR作用不明显 ,另外反向S MAR可明显提高MFG逆转录病毒载体的滴度约 5倍 ;因此改造后的MFG逆转录病毒载体将能更好地用来介导外源治疗基因的表达 .同时还观察到 ,同一个载体骨架在稳定表达的情况下 ,磷酸钙介导较逆转录病毒载体介导的表达水平高 . 展开更多
关键词 骨架结合 逆转录病毒载体 因沉默
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核基质结合区提高报告基因在稳定转化的杜氏盐藻中的表达 被引量:6
7
作者 王天云 薛乐勋 +1 位作者 姬祥 王亚峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期692-695,共4页
前期的研究从杜氏盐藻(Dunaliella salina)中分离出一核基质结合区(matrix attachment region,MAR)片段---DSM1.实验证实,它在体外能与核基质结合且具有MAR的典型特征.为研究其在转基因盐藻中的作用,构建了RbcS启动子驱动、氯霉素乙酰... 前期的研究从杜氏盐藻(Dunaliella salina)中分离出一核基质结合区(matrix attachment region,MAR)片段---DSM1.实验证实,它在体外能与核基质结合且具有MAR的典型特征.为研究其在转基因盐藻中的作用,构建了RbcS启动子驱动、氯霉素乙酰转移酶(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)基因为报告基因及表达盒两侧含DSM1MAR的表达载体.电击法转化盐藻,随机挑选20株稳定转化的盐藻藻株,分析CAT酶活性.结果表明,在稳定转化的盐藻细胞中,MAR能使报告基因CAT的表达水平比对照藻株提高1.5倍,不同藻株之间个体表达的差异性也有所降低. 展开更多
关键词 结合 因沉默 CAT报告 杜氏盐藻
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核基质结合区在转基因烟草中提高报导基因的表达水平 被引量:5
8
作者 李旭刚 朱祯 +2 位作者 徐军望 徐鸿林 肖桂芳 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第9期9-13,共5页
从豌豆基因组中分离了位于质体蓝素 (Plastocyanin)基因下游的核基质结合区(Matrixattachmentregion ,MAR)。为进一步研究此段MAR序列在转基因植物中对外源基因表达水平的影响 ,将MAR序列构建在报导基因 β 葡糖醛酸酶 (β glucuronidas... 从豌豆基因组中分离了位于质体蓝素 (Plastocyanin)基因下游的核基质结合区(Matrixattachmentregion ,MAR)。为进一步研究此段MAR序列在转基因植物中对外源基因表达水平的影响 ,将MAR序列构建在报导基因 β 葡糖醛酸酶 (β glucuronidase ,GUS)基因和植物选择标记新霉素磷酸转移酶 (Neomycinphosphotransferase ,NPT II)基因的两侧形成T DNA结构。采用叶盘法 ,经农杆菌介导转化烟草。GUS定量检测表明 ,MAR的存在使GUS基因的平均表达水平提高了 2倍。 展开更多
关键词 结合 因植物 β-葡糖醛酸酶 外源因表达
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豌豆核基质结合区的功能研究 被引量:4
9
作者 李旭刚 吴茜 +1 位作者 朱祯 肖桂芳 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第10期4-8,共5页
将豌豆基因组中分离的核基质结合区 (Matrixattachmentregions ,MARs)构建在植物表达载体的T DNA结构域中 ,使得报导基因 β 葡糖醛酸酶 (β glucuronidase ,GUS)基因位于两段MARs序列之间。将此载体与不包含MARs序列的植物表达载体经... 将豌豆基因组中分离的核基质结合区 (Matrixattachmentregions ,MARs)构建在植物表达载体的T DNA结构域中 ,使得报导基因 β 葡糖醛酸酶 (β glucuronidase ,GUS)基因位于两段MARs序列之间。将此载体与不包含MARs序列的植物表达载体经农杆菌介导转化烟草。GUS活性检测表明 ,MARs可以提高GUS基因的表达水平 ,和不包含MARs的转基因植株相比 ,MARs序列使GUS基因的平均表达水平提高 2倍。但在瞬时表达中 ,MARs对GUS基因的表达没有影响。 展开更多
关键词 结合 β-葡糖醛酸酶 外源因表达 瞬时表达 豌豆
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核基质结合区的位置对转基因表达的影响 被引量:3
10
作者 张俊河 昝玉玺 王天云 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期839-843,共5页
为研究核基质结合区(MAR)序列不同插入位置对转基因表达作用的影响,PCR扩增人β-珠蛋白MAR分别插入到含氯霉素乙酰转移酶(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)报告基因真核表达载体pCATG表达盒两侧、5′端及3′端.酶切鉴定后,用阳... 为研究核基质结合区(MAR)序列不同插入位置对转基因表达作用的影响,PCR扩增人β-珠蛋白MAR分别插入到含氯霉素乙酰转移酶(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)报告基因真核表达载体pCATG表达盒两侧、5′端及3′端.酶切鉴定后,用阳离子聚合物转染CHO细胞,G418筛选出阳性细胞克隆,ELISA分析CAT基因的表达水平,半定量PCR分析CAT基因相对拷贝数.结果表明,表达盒两侧含MAR序列的载体能提高介导的转基因表达水平平均提高10.4倍,5′端含MAR序列的载体表达水平平均提高3.9倍,3′端含MAR序列的载体反而降低转基因表达水平.5′端含MAR序列的表达载体其转基因相对拷贝数高于其它两组载体的基因拷贝数,转基因表达量与基因拷贝数不成正比. 展开更多
关键词 结合 插入位置 因表达 报告
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核基质结合区与转基因植物的基因表达 被引量:2
11
作者 刘峰 许明 +2 位作者 赵伊英 郑回勇 郑金贵 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2003年第1期93-97,共5页
核基质结合区(matrixattachmentregions,MARs)是真核细胞染色质中能与核基质结合的一段DNA序列.当MARs位于外源基因两侧时,能够使转基因植株高效、稳定表达,说明MARs是消除植物转基因沉默的一条可行途径.本文综述了MARs的研究进展,认为M... 核基质结合区(matrixattachmentregions,MARs)是真核细胞染色质中能与核基质结合的一段DNA序列.当MARs位于外源基因两侧时,能够使转基因植株高效、稳定表达,说明MARs是消除植物转基因沉默的一条可行途径.本文综述了MARs的研究进展,认为MARs的研究与利用对获得高效、稳定的转基因禾谷类作物具有重要的意义. 展开更多
关键词 因植物 因表达 结合 因调控 因沉默 结构特征
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核基质结合区修饰的附着体载体介导的EGFP基因体外表达 被引量:1
12
作者 梅文瀚 吴兆平 +2 位作者 徐荣婷 钱关祥 卢健 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1233-1238,共6页
目的建立一个非病毒介导外源基因高效转移和稳定表达体系。方法采用EB病毒(EBV)来源的附着体质粒载体,并结合顺式作用元件IFN-MAR构建重组质粒pcDNA3-EGFP-EBVR和pcDNA3-EGFP-EBNA1-MAR。采用荧光显微镜观察并摄片,FACS及逆转录-聚合酶... 目的建立一个非病毒介导外源基因高效转移和稳定表达体系。方法采用EB病毒(EBV)来源的附着体质粒载体,并结合顺式作用元件IFN-MAR构建重组质粒pcDNA3-EGFP-EBVR和pcDNA3-EGFP-EBNA1-MAR。采用荧光显微镜观察并摄片,FACS及逆转录-聚合酶链反应检测EGFP表达阳性的COS-7细胞比例、荧光表达强度及EGFP基因的转录。通过Southern印迹和质粒还原实验分析质粒DNA在细胞中存在的形式。结果本实验构建的重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBVR和pcDNA3-EGFP-EBNA1-MAR在转染进入COS-7细胞后以染色体外附着体的形式存在。由于EBVR的存在,可以在体外获得EGFP较长时间的稳定表达。IFN-MAR替代O riP后,仍可在体外获得EGFP的稳定表达。结论MAR修饰的EBV附着体载体可以在体外获得外源基因高效稳定的表达。 展开更多
关键词 因治疗 EB病毒 复制子 附着体粒载体 结合
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一段烟草核基质结合区的分离及对转基因表达的效果 被引量:1
13
作者 张应华 许彬 +1 位作者 杨正安 王小佳 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 2007年第2期188-192,共5页
采用PCR方法,从烟草基因组中分离了一段核基质结合区(matrix attachment region,MAR),将其构建到β-葡糖醛酸酶(β-glucuronidase,GUS)基因(uidA)的两侧翼,形成MARs调控的植物表达载体,将此表达载体与不含MARs序列的植物表达载体通过农... 采用PCR方法,从烟草基因组中分离了一段核基质结合区(matrix attachment region,MAR),将其构建到β-葡糖醛酸酶(β-glucuronidase,GUS)基因(uidA)的两侧翼,形成MARs调控的植物表达载体,将此表达载体与不含MARs序列的植物表达载体通过农杆菌转化烟草。对转基因植株进行GUS活性定量测定,结果表明,MAR可以提高外源uidA基因的表达水平,与不含MAR的转化植株相比,外源基因的平均表达水平提高了1.5倍,最高达6倍,但MAR的引入不能降低转基因植株个体间表达水平的差异。 展开更多
关键词 结合 植物转化 因表达 烟草
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核基质结合蛋白SATB1在肿瘤侵袭转移中的研究进展 被引量:3
14
作者 张瑜 陈秀玮 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第19期3189-3192,共4页
正常细胞向肿瘤细胞的转化涉及到细胞内基因、蛋白水平的改变,及与微环境之间相互作用的改变。肿瘤细胞的转移是实体肿瘤发展的最后一步.同时也是导致患者死亡的初步原因。如果在肿瘤患者的早期阶段能够发现具有转移倾向的肿瘤细胞,... 正常细胞向肿瘤细胞的转化涉及到细胞内基因、蛋白水平的改变,及与微环境之间相互作用的改变。肿瘤细胞的转移是实体肿瘤发展的最后一步.同时也是导致患者死亡的初步原因。如果在肿瘤患者的早期阶段能够发现具有转移倾向的肿瘤细胞,并给予相应的治疗,就能延长肿瘤患者生存时间。 展开更多
关键词 肿瘤侵袭转移 SATB1 结合蛋白 肿瘤细胞 肿瘤患者 正常细胞 蛋白水平
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人基质蛋白酶2(MMP-2)血红素结合蛋白样结构域原核表达、复性及生物学活性验证
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作者 李彦杰 刘仁华 +2 位作者 杨俊年 王保莉 郭蔼光 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期204-207,共4页
用RT-PCR从人神经胶质瘤U87细胞扩增人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)血红素结合蛋白样结构域(PEX)基因,克隆到pMD18-T载体然后测序;将PEX定向克隆到PET-25b(+)中构建原核表达载体PET-PEX,转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达产生表达量近40%的包... 用RT-PCR从人神经胶质瘤U87细胞扩增人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)血红素结合蛋白样结构域(PEX)基因,克隆到pMD18-T载体然后测序;将PEX定向克隆到PET-25b(+)中构建原核表达载体PET-PEX,转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达产生表达量近40%的包涵体蛋白,表达蛋白分子量大小约28.0KD,与预期大小相符。包涵体经优化洗涤,8 mol/L尿素变性,采用透析法进行复性。鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)试验显示复性后的PEX蛋白能显著抑制鸡胚新生血管生成(P<0.05),并且其抑制作用表现出一定的剂量依赖性。 展开更多
关键词 金属蛋白酶-2 血红素结合蛋白样结构域 复性 血管生成
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核骨架/核基质结合区及其功能研究的进展 被引量:2
16
作者 李颖 卢健 《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第5期525-527,共3页
长期以来的研究只能用结合试验来证明核基质结合区(MARs)的存在,对其真正的功能了解甚少。直到最近,人们才发现了MARs的一些生物学活性,MARs参与襻环的形成和染色体的高级包装,在真核生物的转录调控和凋亡方面起到了重要作用。对MARs的... 长期以来的研究只能用结合试验来证明核基质结合区(MARs)的存在,对其真正的功能了解甚少。直到最近,人们才发现了MARs的一些生物学活性,MARs参与襻环的形成和染色体的高级包装,在真核生物的转录调控和凋亡方面起到了重要作用。对MARs的生物学功能仍在进一步的研究中,本文主要就MARs的结构、在转录调控中的作用及其它一些研究进展作一综述。 展开更多
关键词 结合 功能研究 骨架 MARS 转录调控 生物学活性 生物学功能 结合试验 生物 染色体
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DNA结合分化抑制蛋白1和基质金属蛋白酶9在结直肠癌中的表达及与微血管密度的相关性 被引量:5
17
作者 武雪亮 薛军 +6 位作者 王立坤 杨东东 屈明 郭飞 孙光源 韩磊 杨瑞敏 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期696-701,共6页
目的探讨结直肠癌组织中DNA结合分化抑制蛋白1(Id-1)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达及其与肿瘤微血管生成、临床病理指标的相关性。方法应用免疫组织化学染色法检测50例结直肠癌组织和50例癌旁正常组织中Id-1和MMP-9的表达,以及CD34标... 目的探讨结直肠癌组织中DNA结合分化抑制蛋白1(Id-1)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达及其与肿瘤微血管生成、临床病理指标的相关性。方法应用免疫组织化学染色法检测50例结直肠癌组织和50例癌旁正常组织中Id-1和MMP-9的表达,以及CD34标记的微血管密度(MVD)情况。结果 Id-1和MMP-9在结直肠癌组织中阳性表达为72.00%(36/50)、78.00%(39/50),显著高于癌旁正常组织的24.00%(12/50)、28.00%(14/50)(P=0.000);结直肠癌组织中MVD值为17.22±2.08,明显高于癌旁正常组织5.36±2.17(P=0.000);Id-1、MMP-9和MVD均与肿瘤浆膜浸润、TNM分期、癌胚抗原(+)、脉管浸润、淋巴结转移及肝转移相关(P均<0.05),而与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度无关(P均>0.05);癌组织中Id-1和MMP-9阳性表达组MVD值显著高于阴性组(P均=0.000);结直肠癌组织中Id-1与MMP-9呈明显正相关性(r=0.429,P=0.000);生存分析显示:Id-1与MMP-9表达与结直肠癌患者预后关系密切,二者高表达提示预后不良。结论 Id-1、MMP-9高表达与结直肠癌的发生演进高度相关,并与MVD呈正相关,二者可能共同参与了肿瘤微血管的生成、肿瘤的浸润及血行转移。 展开更多
关键词 结直肠癌 DNA结合分化抑制蛋白1 金属蛋白酶9 微血管密度 相关性
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基质结合区与转基因动物的基因表达 被引量:3
18
作者 卢一凡 邓继先 +1 位作者 肖成祖 马清钧 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第2期109-112,共4页
基质结合区 (MAR)在稳定转染的细胞系中的研究结果显示 ,能缓冲在其侧翼的染色质某些拮抗作用 .这为外源基因在染色体中随机整合的转基因动物研究提供了新的方向 .文章对其在转基因动物中的探索性研究及可能的机理进行综述 .指出在转基... 基质结合区 (MAR)在稳定转染的细胞系中的研究结果显示 ,能缓冲在其侧翼的染色质某些拮抗作用 .这为外源基因在染色体中随机整合的转基因动物研究提供了新的方向 .文章对其在转基因动物中的探索性研究及可能的机理进行综述 .指出在转基因动物中 ,MAR的应用能导致建立独立的基因活性结构域 .它对基因高效表达无疑具有重要作用 .MAR可能是一种新的顺式作用元件 ,与增强子。 展开更多
关键词 因动物 结合 因表达 因工程
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重组纤维连接蛋白羧基端细胞结合域对骨髓基质干细胞黏附力的影响 被引量:3
19
作者 徐瑞剑 黄盛东 +3 位作者 徐志云 龚德军 张宝仁 徐驯海 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期965-968,共4页
目的:研究增强骨髓基质干细胞黏附力的方法。方法:去细胞猪主动脉瓣叶分别用纤维连接蛋白(Fn)和重组纤维连接蛋白羧基端细胞结合域(FnCTD64)及牛血清白蛋白(BSA)浸泡预涂处理12 h,对照组未预涂蛋白。采用间隔24 h、3次种植的方法种植骨... 目的:研究增强骨髓基质干细胞黏附力的方法。方法:去细胞猪主动脉瓣叶分别用纤维连接蛋白(Fn)和重组纤维连接蛋白羧基端细胞结合域(FnCTD64)及牛血清白蛋白(BSA)浸泡预涂处理12 h,对照组未预涂蛋白。采用间隔24 h、3次种植的方法种植骨髓基质干细胞(BMSCs),于种植后第8天进行细胞计数及MTT法检测比较去细胞瓣叶上黏附、增殖的细胞数量,同时取瓣叶进行组织学检测观察瓣叶表面BMSCs覆盖情况。结果:采用预涂Fn和FnCTD64后的去细胞猪主动脉瓣叶,预涂Fn组的细胞计数为(9.085±0.622)×104,MTT的吸光值为0.537±0.022;预涂FnCTD64组的细胞计数为(9.111±0.607)×104,MTT的吸光值为0.540±0.025;预涂BSA组的细胞计数为(4.593±0.464)×104,MTT的吸光值为0.360±0.018;对照组的细胞计数为(4.460±0.441)×104,MTT的吸光值为0.353±0.019;前两组明显高于后两组(P<0.01)。预涂Fn组和FnCTD64组无显著性差异。瓣叶经H-E染色,可见预涂Fn和FnCTD64组细胞覆盖情况优于预涂BSA组和对照组。结论:Fn和FnCTD64能明显增加BMSCs在去细胞猪主动脉瓣叶表面的黏附和增殖。 展开更多
关键词 去细胞猪主动脉瓣叶 重组纤维连接蛋白端细胞结合 骨髓干细胞 细胞黏附
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热疗对人Tca8113细胞侵袭能力及基质金属蛋白酶-13和钙离子结合蛋白S100A4表达的抑制作用 被引量:2
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作者 何丽明 边莉 +1 位作者 唐睿珠 何永文 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期655-659,共5页
目的研究热疗对Tca8113细胞的侵袭能力及侵袭转移相关蛋白——基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及钙离子结合蛋白S100A4(S100A4)表达的影响。方法 Tca8113细胞分别经43℃加热0、40、80、120 min及37、41、43、45℃加热80 min,用体外侵袭实验... 目的研究热疗对Tca8113细胞的侵袭能力及侵袭转移相关蛋白——基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及钙离子结合蛋白S100A4(S100A4)表达的影响。方法 Tca8113细胞分别经43℃加热0、40、80、120 min及37、41、43、45℃加热80 min,用体外侵袭实验评价各组细胞的侵袭能力;Tca8113细胞爬片经43℃分别加热0、40、80、120 min,用免疫细胞化学染色法检测各组细胞MMP-13及S100A4的表达变化;Tca8113细胞分别经43℃加热0、40、80、120 min及37、41、43、45℃加热80 min,Western blot法检测各组细胞MMP-13及S100A4的表达变化。结果随加热时间延长或加热温度升高,Tca8113细胞侵袭率(即侵袭细胞数占全部细胞的百分比)依次递减,除43℃加热40、80 min组之间及41、43℃加热80 min组之间的差异无统计学意义(P>0.05)外,其余各组间的差异均有统计学意义(P<0.05);随着加热时间延长,Tca8113细胞的细胞浆内MMP-13及S100A4的表达强度呈现递减趋势;随着加热时间延长或加热温度升高,Tca8113细胞的MMP-13及S100A4含量逐渐降低,除43℃加热40、80 min组之间及41、43℃加热80 min组之间外,其余各组间的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论热疗能抑制Tca8113细胞的侵袭能力,其机制可能与热疗抑制了细胞内MMP-13及S100A4的表达有关。 展开更多
关键词 热疗 TCA8113细胞 侵袭 金属蛋白酶-13 钙离子结合蛋白S100A4
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