四色荧光标记抗体在白血病免疫分型中的应用及意义 被引量：43

1

作者 刘艳荣 于弘 +1 位作者 常艳 陈珊珊 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第5期423-427,共5页

为探讨多参数流式细胞术对白血病免疫分型的方法及意义 ,本研究自行设计了一系列 4种荧光标记的单克隆抗体组合 ,对 88例急性白血病患者骨髓或外周血进行流式细胞仪免疫表型分析。应用本组抗体组合可对T ALL和B ALL及AML M1 -M7患者做... 为探讨多参数流式细胞术对白血病免疫分型的方法及意义 ,本研究自行设计了一系列 4种荧光标记的单克隆抗体组合 ,对 88例急性白血病患者骨髓或外周血进行流式细胞仪免疫表型分析。应用本组抗体组合可对T ALL和B ALL及AML M1 -M7患者做出诊断 ,并可诊断形态学难以辨认的AML M0 ,及一般免疫分型法较难辨认的单核细胞白血病。应用 4组四色荧光标记的抗体组合 ,共含 1 3种抗体 ,既可将 90 %以上的白血病患者分为ALL或AML ,并可鉴别急性白血病的主要亚型 ,及反映血细胞的分化成熟度。结论 :四色荧光抗体组合可用较少的抗体 ,特异地对白血病细胞进行多参数免疫分型分析 。 展开更多

关键词 白血病 免疫分型 四色荧光标记抗体 多参数分析 多参数流式细胞术

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异硫氰酸荧光素标记抗体的固体基质室温磷光性质研究 被引量：6

2

作者 刘佳铭 付艳 +1 位作者 余冰宾 李隆弟 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第3期423-426,共4页

研究了异硫氰酸荧光素 (FITC)标记的羊抗人抗体 (GAHAb FITC)和兔抗羊抗体 (RAGAb FITC) ,及其以三种免疫方式与人免疫球蛋白 (IgG)反应所得免疫复合物在多种固体薄膜基质上发射室温磷光 (RTP)的适宜条件及其光谱、强度和寿命等性质。... 研究了异硫氰酸荧光素 (FITC)标记的羊抗人抗体 (GAHAb FITC)和兔抗羊抗体 (RAGAb FITC) ,及其以三种免疫方式与人免疫球蛋白 (IgG)反应所得免疫复合物在多种固体薄膜基质上发射室温磷光 (RTP)的适宜条件及其光谱、强度和寿命等性质。研究发现 ,标记抗体及其免疫复合物保留了FITC优良的固体基质室温磷光性质 ,λ(max)ex λ(max)em =5 2 5 6 5 0nm ,其RTP强度与其浓度线性相关 ,并有很高的灵敏度。更为重要的是 ,免疫反应及其RTP检测能结合于同一基质 ,方便地相继完成。在聚酰胺膜 (PM )上 ,以Pb(Ac) 2 为重原子微扰剂 ,稀释比为 1∶10 (φ)的GAHAb FITC ,RAGAb FITC及其与人IgG形成的免疫复合物均能发射较强的RTP信号并有较长的RTP寿命。本结果为建立相应的固体基质室温磷光免疫分析 (SS RTP IA)新方法奠定了相应的实验基础。 展开更多

关键词 异硫氰酸荧光素标记抗体 固体室温磷光 免疫分析 人IGG 羊抗人抗体 兔抗羊抗体

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抗狂犬病毒核蛋白荧光标记抗体的制备和初步鉴定 被引量：13

3

作者 严家新 祝玉桃 +2 位作者 李承平 徐葛林 朱家鸿 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第5期59-61,F003,共4页

目的　建立抗狂犬病毒 (RV)核蛋白 (NP)荧光标记抗体的制备方法并进行初步鉴定。方法　采用两种方法制备该试剂 :1 从RV感染的细胞中提纯RV核糖核蛋白 (RNP)作抗原 ,免疫动物然后制备荧光标记抗体 ;2 直接用本室原制备的 4株抗RV　NP... 目的　建立抗狂犬病毒 (RV)核蛋白 (NP)荧光标记抗体的制备方法并进行初步鉴定。方法　采用两种方法制备该试剂 :1 从RV感染的细胞中提纯RV核糖核蛋白 (RNP)作抗原 ,免疫动物然后制备荧光标记抗体 ;2 直接用本室原制备的 4株抗RV　NP的单克隆抗体混合进行标记。结果　制备的试剂有较高的敏感性和特异性 ,经与法国巴斯德诊断用品公司的相应产品进行比较 ,所得结果的符合率为 10 0 %。特别是用后一种方法制备的试剂优点更多。结论　该制品可替代进口产品 。 展开更多

关键词 狂犬病毒核蛋白 荧光标记抗体 单克隆抗体

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红细胞标记抗体的化学发光免疫分析 被引量：1

4

作者 张雯艳 魏景艳 +8 位作者 郭杰 陈桂秋 邢程 石立华 袁玮 钱莉娜 阙肖冬 高莉 刘梦虹 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1435-1438,共4页

用红细胞代替辣根过氧化物酶作为双抗体夹心免疫分析中第二抗体的标记物,建立了一种红细胞标记抗体的免疫化学发光测定乙型肝炎病毒表面抗原的新方法.在免疫反应完成后,结合了抗原-抗体免疫复合物的致敏红细胞在低渗溶液中溶血,释放出... 用红细胞代替辣根过氧化物酶作为双抗体夹心免疫分析中第二抗体的标记物,建立了一种红细胞标记抗体的免疫化学发光测定乙型肝炎病毒表面抗原的新方法.在免疫反应完成后,结合了抗原-抗体免疫复合物的致敏红细胞在低渗溶液中溶血,释放出血红蛋白.基于血红蛋白对鲁米诺-H_(2)O_(2)体系化学发光具有催化作用的原理,采用化学发光法测定血红蛋白含量.测得的血红蛋白发光强度与待测抗原浓度呈线性关系.采用这种方法可检测出0.5 ng/mL的乙型肝炎病毒表面抗原.将该方法与酶联免疫吸附分析(ELISA)结合起来对乙型肝炎患者血清乙肝病毒表面抗原(HBsAg)进行检测,两者符合率均为97%,表明本法具有良好的灵敏度和特异性,可用于临床标本测试. 展开更多

关键词 红细胞标记抗体 化学发光免疫分析 乙型肝炎病毒表面抗原

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铁蛋白标记抗体制备及其在免疫电镜中的应用 被引量：1

5

作者 周伟强 宋今丹 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期256-257,260,共3页

目的：应用铁蛋白标记技术对结肠癌细胞系 Ｃ Ｃ Ｌ２２９ 细胞膜表面抗原 Ｌ Ｅ Ａ 的分布进行电镜观察，研究其在免疫电镜中的应用。方法：利用铁蛋白二步法标记羊抗鼠 Ｉｇ Ｇ 抗体示踪 Ｃ Ｃ Ｌ２２９ 细胞表面 Ｌ Ｅ Ａ 抗原的分... 目的：应用铁蛋白标记技术对结肠癌细胞系 Ｃ Ｃ Ｌ２２９ 细胞膜表面抗原 Ｌ Ｅ Ａ 的分布进行电镜观察，研究其在免疫电镜中的应用。方法：利用铁蛋白二步法标记羊抗鼠 Ｉｇ Ｇ 抗体示踪 Ｃ Ｃ Ｌ２２９ 细胞表面 Ｌ Ｅ Ａ 抗原的分布。结果：在 Ｃ Ｃ Ｌ２２９ 细胞膜上有黑色铁蛋白颗粒存在，其颗粒大、反差强。结论：铁蛋白在膜表面抗原标记上有较广泛的应用，与其它电镜标记物相比具有很大的优越性。 展开更多

关键词 铁蛋白 标记抗体 免疫电镜 制备

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药物标记抗体体外导向治疗系统性红斑狼疮所致血小板减少

6

作者 姜振宇 于黎黎 +1 位作者 曹梦园 姚程 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期632-635,共4页

目的:探讨药物标记抗体导向治疗系统性红斑狼疮(SLE)所致血小板减少的可行性及效果。方法:将静脉注射用免疫球蛋白(IVIG)与免疫抑制剂MTX交联制备成直接和间接标记抗体,使之对单核-巨噬细胞产生特异的杀伤作用,用免疫荧光法检测Fc段结... 目的:探讨药物标记抗体导向治疗系统性红斑狼疮(SLE)所致血小板减少的可行性及效果。方法:将静脉注射用免疫球蛋白(IVIG)与免疫抑制剂MTX交联制备成直接和间接标记抗体,使之对单核-巨噬细胞产生特异的杀伤作用,用免疫荧光法检测Fc段结合活性,以Fc受体阳性的小鼠巨噬细胞和人单核细胞白血病U937为靶细胞,用MTT法检测标记前后MTX杀伤活性及标记抗体的特异性杀伤活性。结果:标记抗体的杀伤活性明显大于游离MTX,标记抗体对Fc受体阳性的U937细胞的杀伤活性明显大于Fc受体阴性细胞,标记抗体能抑制巨噬细胞的吞噬功能,间接标记抗体IVIG-HSA-MTX杀伤活性明显大于直接标记抗体IVIG-MTX。结论:标记抗体在体外对单核、巨噬细胞显示了相对特异的杀伤活性。 展开更多

关键词 标记抗体 受体 FC 免疫球蛋白 静脉内 红斑狼疮 系统性 血小板减少

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荧光免疫标记抗体法测定血痕ABO血型

7

作者 王瑞恒 闫立强 +2 位作者 于卫建 刘效巍 曲淑贤 《法医学杂志》 CAS CSCD 2007年第2期127-129,F0004,共4页

目的探讨采用荧光免疫标记抗体法测定血痕血型的可行性和优点。方法根据抗原抗体特异性结合的原理,首先对抗A、抗B单克隆抗体进行荧光标记,然后使荧光标记抗体与相应抗原(血痕)在最佳条件下结合,最后荧光显微镜镜检,判定血痕的血型。结... 目的探讨采用荧光免疫标记抗体法测定血痕血型的可行性和优点。方法根据抗原抗体特异性结合的原理,首先对抗A、抗B单克隆抗体进行荧光标记,然后使荧光标记抗体与相应抗原(血痕)在最佳条件下结合,最后荧光显微镜镜检,判定血痕的血型。结果采用该方法测定血痕的血型结果准确、灵敏度高、操作简单、检验时间短。结论该方法可以作为一种测定血痕血型的检验方法使用。 展开更多

关键词 荧光免疫标记抗体法 血痕 ABO血型 法医物证学

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标记抗体染色法检查布氏杆菌的研究

8

作者 项光华 文奋武 +3 位作者 刘磊 赵启祖 方远穆 赵纯墉 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 1990年第1期95-104,共10页

为了建立一种快速、简便、敏感、特异地检测动物病理材料中布氏杆菌的方法,选用四种标记抗体法,对5种共15个生物型的布氏杆菌,以及大量与流产有关或常常污染病理材料的对照细菌,分别进行了纯菌、感染实验动物及牦牛组织材料的染色检查,... 为了建立一种快速、简便、敏感、特异地检测动物病理材料中布氏杆菌的方法,选用四种标记抗体法,对5种共15个生物型的布氏杆菌,以及大量与流产有关或常常污染病理材料的对照细菌,分别进行了纯菌、感染实验动物及牦牛组织材料的染色检查,并与柯氏染色法及细菌分离培养法进行了比较。结果表明,四种方法对于各种材料中的布氏杆菌(粗糙型犬布氏菌除外)均呈阳性反应,而绝大多数对照菌均呈阴性反应。其中尤以SPA法染色背景更为清晰,非特异性反应更少。这些方法既简便、快速,检出率也较高。对于布氏杆菌病的诊断和疫情监测,是很有价值的。 展开更多

关键词 布氏杆菌 检疫 标记抗体 诊断

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氨甲喋呤标记抗体导向治疗自身免疫性血小板减少性紫癜的体外实验研究

9

作者 姜振宇 张志清 +3 位作者 王晓芳 陈维金 聂荣国 姚程 《白求恩医科大学学报》 CSCD 2000年第6期579-581,共3页

目的 :将静脉注射用免疫球蛋白 (IVIG)与免疫抑制剂交联制备成标记抗体 ,使之对单核 -巨噬细胞产生特异的杀伤作用 ,为其临床治疗自身免疫性血小板减少性紫癜 (ITP)奠定实验基础。方法 :用间接交联法将 IVIG与 MTX制备成标记抗体 ,用间... 目的 :将静脉注射用免疫球蛋白 (IVIG)与免疫抑制剂交联制备成标记抗体 ,使之对单核 -巨噬细胞产生特异的杀伤作用 ,为其临床治疗自身免疫性血小板减少性紫癜 (ITP)奠定实验基础。方法 :用间接交联法将 IVIG与 MTX制备成标记抗体 ,用间接免疫荧光法检测标记抗体的Fc段结合活性 ,以 Fc受体阳性的小鼠巨噬细胞和人单核细胞白血病细胞株 U937为靶细胞 ,用MTT法测定标记抗体的杀伤活性。结果 :标记抗体对巨噬细胞的杀伤作用明显大于游离 MTX;标记抗体对 Fc受体阳性细胞的杀伤作用明显大于 Fc受体阴性细胞。结论 :标记抗体在体外对单核 展开更多

关键词 标记抗体 氨甲喋呤 自身免疫性血小板减少性紫癜

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一种制备酶标记抗体的新技术及在血痕种属鉴定的应用 被引量：2

10

作者 周大鹏 吴文庆 周月琴 《法医学杂志》 CAS CSCD 1995年第2期55-56,共2页

本实验建立了一种过碘酸钠氧化法为基础、制备ＨＲＰ标记的免抗人ＩｇＧ抗体的新技术。首先以己二酰二肼作为肼化剂，在ＩｇＧ分子上接上肼基，然后以过碘酸钠作为氧化剂，使ＨＲＰ分子上的糖基氧化为醛基，进而使醛基与联结在ＩｇＧ分... 本实验建立了一种过碘酸钠氧化法为基础、制备ＨＲＰ标记的免抗人ＩｇＧ抗体的新技术。首先以己二酰二肼作为肼化剂，在ＩｇＧ分子上接上肼基，然后以过碘酸钠作为氧化剂，使ＨＲＰ分子上的糖基氧化为醛基，进而使醛基与联结在ＩｇＧ分子上的肼基形成Ｓｃｉｆｆ氏碱而达到酶与抗体的联接。在用斑点ＥＬＩＳＡ方法鉴别血痕种属的研究中，该法制各的酶标记抗体具有高效价，高敏感度，高特异性等优点。 展开更多

关键词 酶标记抗体 血痕种属 制备 抗人IgG抗体 ELISA方法 IgG分子 鉴定 过碘酸钠 高特异性 HRP 氧化法 氧化剂 高效价 敏感度 醛基

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GP_（125）酶标记抗体法测定细胞增殖活性

11

作者 太龙杰 李治平 +1 位作者 栾恒淳 张甲生 《东北师大学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1994年第2期71-73,共3页

利用与细胞增殖有关的抗原ＧＰ_（１２５）和Ｂ_３抗体结合，形成抗原抗体复合物，再同酶结合形成抗原－抗体－酶复合物。该复合物与ＡＢＴＳ－Ｈ_２Ｏ_２发生颜色反应，在一定波长下可测定细胞增殖。本法亦可测定细胞活化剂效应及抗癌... 利用与细胞增殖有关的抗原ＧＰ_（１２５）和Ｂ_３抗体结合，形成抗原抗体复合物，再同酶结合形成抗原－抗体－酶复合物。该复合物与ＡＢＴＳ－Ｈ_２Ｏ_２发生颜色反应，在一定波长下可测定细胞增殖。本法亦可测定细胞活化剂效应及抗癌药物的抑瘤效应，是一种测定细胞增殖活动性的非放射性方法。 展开更多

关键词 GP125 细胞增殖 酶标记抗体法

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胶体金标记抗体技术 被引量：9

12

作者 韩刚毅 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1989年第1期31-36,共6页

胶体金标记抗体技术是近十多年来免疫组织(或细胞)化学迅速发展起来的一项免疫标记技术。在国外许多研究领域中已经得到发展,并逐渐受到国内同行的重视。本文介绍了胶体金标记抗体技术的原理、方法及其发展概况。

关键词 胶体金 标记抗体技术

全文增补中

用酶标记抗体免疫定位检测马铃薯环腐病

13

作者 何云霞 李学湛 +1 位作者 吕典秋 白艳菊 《中国马铃薯》 1999年第4期228-230,共3页

关键词 马铃薯环腐病 定位检测 革兰氏染色 抗体免疫 免疫吸附试验 酶标记抗体 酶标抗体 棕黄色 革兰氏阳性细菌 酶免疫

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抗狂犬病毒单克隆抗体的纯化及标记 被引量：3

14

作者 刘文涛 于盼盼 李泽鸿 《中国兽药杂志》 2011年第4期5-8,共4页

对一株稳定、特异、高效的单克隆抗体(mAb)进行了纯化和荧光素(FITC)的标记,利用标记产物与已有的抗狂犬病毒核蛋白单克隆抗体标记物相比较,效果良好,二者可以结合(或单独)使用;应用标记好的荧光抗体与FITC-抗狂犬病毒免疫球蛋白比较进... 对一株稳定、特异、高效的单克隆抗体(mAb)进行了纯化和荧光素(FITC)的标记,利用标记产物与已有的抗狂犬病毒核蛋白单克隆抗体标记物相比较,效果良好,二者可以结合(或单独)使用;应用标记好的荧光抗体与FITC-抗狂犬病毒免疫球蛋白比较进行血清样品效价测定实验,来确定纯化、标记后的单克隆抗体的灵敏度,结果表明本实验制备的单克隆抗体与FITC-抗狂犬病毒免疫球蛋白具有相同的灵敏度,该单克隆抗体测得的血清样品效价结果与FITC-抗狂犬病毒免疫球蛋白测得的结果相同。因此,此荧光抗体可应用于狂犬病病毒检测(FAT)、病毒毒力测定(TCID50)、中和抗体实验(FAVN)等方面的检测实验,此荧光抗体可为狂犬病的相关研究提供有力的保障。 展开更多

关键词 狂犬病毒 单克隆抗体 荧光标记抗体

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钌红染色和单克隆抗体免疫标记植物叶片中的果胶

15

作者 李晓宝 孙振炳 +2 位作者 姚曜 汤正捷 李晓平 《林业工程学报》 CSCD 北大核心 2022年第3期100-106,共7页

果胶是植物组织中重要的化学组成成分之一,但目前关于植物叶片中果胶含量及表征的相关研究较少。为了更好地开发植物叶片的应用价值和发展潜力,利用草酸铵螯合法、钌红染色及单克隆抗体免疫标记法对6种植物叶片(杨树叶、云南松松针、刺... 果胶是植物组织中重要的化学组成成分之一,但目前关于植物叶片中果胶含量及表征的相关研究较少。为了更好地开发植物叶片的应用价值和发展潜力,利用草酸铵螯合法、钌红染色及单克隆抗体免疫标记法对6种植物叶片(杨树叶、云南松松针、刺槐叶、榆树叶、慈竹叶和大麻叶)中的果胶进行含量测定和表征。结果表明:大麻叶、杨树叶和榆树叶中的果胶含量(质量分数)较高,分别是12%~17%,10%~15%和10%~17%;刺槐叶和云南松松针次之,为5%~8%,1.5%~2.5%;竹叶最少,不足1%;确定了植物叶片中有大量的果胶存在。钌红染色和单克隆抗体免疫标记法均可有效表征果胶的分布,即植物叶片中的果胶部分可以被钌红染色,被单克隆抗体标记的果胶成分在紫外荧光照射下有亮光;比较着色程度和荧光亮度,可以看出果胶成分主要分布于叶片的叶肉细胞中。经过4种单克隆抗体标记之后,6种叶片中的荧光分布没有显著区别,即4种单克隆抗体能够标记的特定糖分在6种叶片中均有分布,果胶中的糖分是呈混合分布的状态,没有特定的富集区域。 展开更多

关键词 果胶 植物叶片 钌红染色 单克隆抗体免疫标记

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用直接荧光抗体法对鲤血液中淋巴细胞类型的初步鉴定 被引量：8

16

作者 陈昌福 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期154-158,共5页

用荧光素标记的兔抗鲤ＩｇＭ和胸腺淋巴细胞表面抗原（ＣＡＴＬＣ）抗体，对从鲤血液中分离的淋巴细胞类型进行了鉴定。结果表明，正常鲤血液淋巴细胞中Ｂ淋巴细胞样细胞约占（２５．３±７．２４）％，Ｔ淋巴细胞样细胞约占（３１... 用荧光素标记的兔抗鲤ＩｇＭ和胸腺淋巴细胞表面抗原（ＣＡＴＬＣ）抗体，对从鲤血液中分离的淋巴细胞类型进行了鉴定。结果表明，正常鲤血液淋巴细胞中Ｂ淋巴细胞样细胞约占（２５．３±７．２４）％，Ｔ淋巴细胞样细胞约占（３１．６±９．４８）％。 展开更多

关键词 荧光标记抗体 鲤 淋巴细胞

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动物蓝舌病直接荧光抗体的制备及其在诊断中的应用 被引量：1

17

作者 胡玉玲 李根 +1 位作者 李志华 张开礼 《云南畜牧兽医》 1989年第4期22-25,共4页

荧光标记抗体是一种用以检测感染组织中的病毒抗原,快速诊断病毒病的方法之一。自从Livngston和Moore(1962)首先使用异硫氰酸荧光素交联兔抗海猪球蛋白检查感染细胞培养物的蓝舌病毒抗原以来,Pini等(1966)应用荧光技术检查实验感染绵羊... 荧光标记抗体是一种用以检测感染组织中的病毒抗原,快速诊断病毒病的方法之一。自从Livngston和Moore(1962)首先使用异硫氰酸荧光素交联兔抗海猪球蛋白检查感染细胞培养物的蓝舌病毒抗原以来,Pini等(1966)应用荧光技术检查实验感染绵羊中蓝舌病毒的浓度和病毒鉴定,指出该方法具有群特异性。Bowne和Jochim((1967) 展开更多

关键词 蓝舌病毒 舌病 荧光标记抗体 细胞培养物 感染组织 实验感染 鸡胚 异硫氰酸荧光素 人工感染 高免血清

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酶标记SPA法检测肺炎患儿咽分泌物中的腺病毒和合胞病毒抗原

18

作者 鲁继荣 成焕吉 +3 位作者 付文永 郭慧君 冷丽 武玉梅 《白求恩医科大学学报》 CSCD 1989年第4期364-366,共3页

用酶标记SPA法检测了肺炎患儿咽脱落细胞中的腺病毒和合胞病毒抗原,证实此法具有明显的特异性。共检测了108例申的腺病毒抗原和238例中的合胞病毒抗原,与传统法的总符合率分别为87. 0%和87. 4%。经统计学处理,均与传统法有明显的一致性... 用酶标记SPA法检测了肺炎患儿咽脱落细胞中的腺病毒和合胞病毒抗原,证实此法具有明显的特异性。共检测了108例申的腺病毒抗原和238例中的合胞病毒抗原,与传统法的总符合率分别为87. 0%和87. 4%。经统计学处理,均与传统法有明显的一致性,说明可用于临床,作为小儿病毒性肺炎的快速诊断方法。 展开更多

关键词 酶标记抗体 腺病毒 合胞病毒 抗原

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乳铁蛋白酶标抗体的制备及其酶联免疫检测方法的建立 被引量：1

19

作者 李亚璞 《湖南农业科学》 2016年第12期12-14,共3页

采用过碘酸钠法对抗牛乳铁蛋白抗体进行了辣根过氧化物酶标记,建立了二步式的双抗体夹心ELISA法,并对市售奶粉样品进行了测定。结果表明:所制备的酶标记抗体效价达到了1.6×106,与乳中主要其他蛋白如酪蛋白、乳白蛋白和β-乳球蛋白... 采用过碘酸钠法对抗牛乳铁蛋白抗体进行了辣根过氧化物酶标记,建立了二步式的双抗体夹心ELISA法,并对市售奶粉样品进行了测定。结果表明:所制备的酶标记抗体效价达到了1.6×106,与乳中主要其他蛋白如酪蛋白、乳白蛋白和β-乳球蛋白基本没有交叉反应,特异性较好;将HRP-2B12稀释105倍,以1%OVA为封闭液、含3%BSA的PBST溶液为酶标抗体稀释液,在此条件下建立的ELISA方法实现了对奶粉样品的定性测定。 展开更多

关键词 牛乳铁蛋白 酶标记抗体 双抗体夹心 配方奶粉

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马铃薯A病毒重组CP多克隆抗体的制备及其在DAS-ELISA检测中的应用 被引量：5

20

作者 宋志成 费新敏 +4 位作者 杨煜 乔利仙 王晶珊 李广存 郭宝太 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2017年第1期41-46,共6页

利用重组CP作抗原制备出马铃薯A病毒的多克隆抗体,并将其用于DAS-ELISA检测。以p ET22b(+)为起始载体,构建了PVA-CP基因的原核表达载体p ET22b-ACP,重组菌BL21(p ET22b-ACP)经IPTG诱导表达出了分子量为30 k Da的特异性重组CP。利用高纯... 利用重组CP作抗原制备出马铃薯A病毒的多克隆抗体,并将其用于DAS-ELISA检测。以p ET22b(+)为起始载体,构建了PVA-CP基因的原核表达载体p ET22b-ACP,重组菌BL21(p ET22b-ACP)经IPTG诱导表达出了分子量为30 k Da的特异性重组CP。利用高纯度重组CP为抗原免疫家兔,制备出了效价为1∶512 k的抗血清。以PVA重组CP为抗原,用间接ELISA与直接ELISA分别测定重组CP纯化抗体(Ig G)及其碱性磷酸酶标记物(Ig G-AP)的活性,用DAS-ELISA测定2种抗体的活性,目测及OD值测定结果表明3种ELISA测定反应都呈阳性。以PVA病毒阳性标准物为抗原,在上述3种ELISA测定中也呈阳性反应,重组CP多克隆抗体及其酶标抗体与PVA有较强的反应信号。利用重组CP制备的多克隆抗体及其酶标抗体达到了马铃薯A病毒DAS-ELISA检测的要求。 展开更多

关键词 马铃薯A病毒 重组CP 多克隆抗体 酶标记抗体 DAS-ELISA检测

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