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一种利用Cre/loxP系统进行标记基因删除与靶基因置换的细胞模型研究(英文) 被引量：2: 1; 作者崔文涛任立明 +3 位作者侯健张颖陈永福安晓荣《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第6期650-660,共11页; Cre/lox系统可以介导DNA的定点插入和定点删除,可利用其实现转基因动物中'友好位点'的重复利用及标记基因的有效删除.为直观地评估该系统介导的以上两种重组反应的效果,通过标记基因并利用大鼠乳腺癌细胞系SHZ-88进行了模型研究... 展开更多; 关键词 lox2272 LOXP CRE 标记基因删除靶基因置换; 在线阅读下载PDF 职称材料

应用Cre/loxP系统在转化细胞水平上高效删除转基因水稻的标记基因被引量：5: 2; 作者赵艳张晓丽 +1 位作者郭龙彪钱前《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期580-586,共7页; 研究了Cre/loxP系统在转化细胞水平上删除转基因水稻中抗性标记基因的可行性和效率。采用农杆菌介导法将Cre/loxP标记基因剪切系统载体pNCG导入水稻细胞,用G418筛选法获得水稻抗性愈伤组织后,在组织培养不同阶段的培养基中添加25μmol/... 展开更多; 关键词水稻雌激素诱导 Cre/loxP重组酶系统转化细胞标记基因删除; 在线阅读下载PDF 职称材料

高效删除标记基因的Bhlea2植物表达载体的构建被引量：1: 3; 作者邹璐琳魏建华 +1 位作者王宏芝张少斌《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期79-82,共4页; 为培育去除选择标记基因的耐旱转基因植物,同时利用Cre/Lox和FLP/frt系统,构建一个能够高效删除标记基因的Bhlea2基因植物表达载体。拟南芥rd29A启动子是在低温、干旱、高盐胁迫下的快速应答启动子,玉米ubiquitin启动子可有效驱动外源... 展开更多; 关键词位点特异性重组系统标记基因删除转基因植物; 在线阅读下载PDF 职称材料

质体基因工程中选择标记基因研究进展被引量：2: 4; 作者何勇罗岸 +4 位作者母连胜陈强张艳叶开温田志宏《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期810-827,共18页; 与细胞核基因工程相比,质体基因工程能更安全、精确和高效地对外源基因进行表达,作为下一代转基因技术已广泛用于基础研究和生物技术应用领域。与细胞核基因工程一样,质体基因工程中也需要合适的选择标记基因用于转化子的筛选和同质化,... 展开更多; 关键词质体基因工程叶绿体基因工程质体遗传转化叶绿体遗传转化选择标记基因标记基因删除; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一种利用Cre/loxP系统进行标记基因删除与靶基因置换的细胞模型研究(英文) 被引量：2: 1; 作者崔文涛任立明侯健张颖陈永福安晓荣; 机构中国农业大学中国农业科学院北京畜牧兽医研究所; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第6期650-660,共11页; 基金国家高技术研究发展计划资助项目(863)(2002AA206311和2006AA02Z148).~~; 文摘 Cre/lox系统可以介导DNA的定点插入和定点删除,可利用其实现转基因动物中'友好位点'的重复利用及标记基因的有效删除.为直观地评估该系统介导的以上两种重组反应的效果,通过标记基因并利用大鼠乳腺癌细胞系SHZ-88进行了模型研究.首先构建了两个载体:a.整合载体pTE-lox2272-DsRed-loxP-GFP-loxP,含有红色荧光标记基因DsRed和绿色荧光标记基因GFP;b.置换载体pT-lox2272-neo-loxP,含有筛选标记基因neo,用以置换DsRed基因.然后,用整合载体转染SHZ-88细胞,并随机挑取了3个同时表达DsRed和GFP的稳定整合细胞克隆.随后用置换载体和Cre表达载体PBS185对以上每个克隆分别进行了3次共转染,通过G418筛选并扩增培养后,总共获得1070个克隆.通过分析标记基因DsRed和GFP在这些克隆中的表达情况:Cre介导的删除效率为91.1%,定点置换效率为29.3%.最后对部分克隆进行了PCR和DNA印迹鉴定,分子鉴定结果与发光的表型状况一致.这一方法为Cre/lox系统在转基因家畜生产中的进一步应用提供了实验依据.; 关键词 lox2272 LOXP CRE 标记基因删除靶基因置换; Keywords lox2272,loxP, Cre, marker gene deletion, target gene replacement; 分类号 Q5 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名应用Cre/loxP系统在转化细胞水平上高效删除转基因水稻的标记基因被引量：5: 2; 作者赵艳张晓丽郭龙彪钱前; 机构中国水稻研究所水稻生物学国家重点实验室浙江工商大学食品与生物工程学院; 出处《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期580-586,共7页; 基金国家自然科学基金资助项目(30871511 30771317) +3 种基金 2009ZX08001-022B) 中国博士后基金资助项目(20090450477); 文摘研究了Cre/loxP系统在转化细胞水平上删除转基因水稻中抗性标记基因的可行性和效率。采用农杆菌介导法将Cre/loxP标记基因剪切系统载体pNCG导入水稻细胞,用G418筛选法获得水稻抗性愈伤组织后,在组织培养不同阶段的培养基中添加25μmol/L雌激素进行Cre基因的诱导表达和标记基因的剪切,PCR检测T0植株中标记基因nptⅡ、重组酶基因Cre和目标基因gusA的整合情况。将扩增结果为gusA(+)/nptⅡ(-)/Cre(-)的转基因植株统计为标记基因剪切成功的植株。结果表明,在抗性愈伤组织培养的预分化前、预分化和分化阶段添加雌激素诱导表达重组酶Cre均能成功切除标记基因序列,标记基因剪切成功率为6.82%～46.43%。在预分化前采用液体培养基添加雌激素诱导处理愈伤组织3d,T0植株中标记基因的剪切效率高达173.33%,主要原因是雌激素处理提高了愈伤组织绿苗分化率。直接在分化培养基中添加雌激素诱导处理,T0植株中标记基因剪切成功率达46.43%,剪切效率(144.44%)也较高。表明雌激素诱导的Cre/loxP系统能在水稻抗性愈伤组织水平上实现对标记基因序列高效快速删除。; 关键词水稻雌激素诱导 Cre/loxP重组酶系统转化细胞标记基因删除; Keywords rice estrogen-induction Cre/loxP system transformed cell marker gene excision; 分类号 S511 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名高效删除标记基因的Bhlea2植物表达载体的构建被引量：1: 3; 作者邹璐琳魏建华王宏芝张少斌; 机构沈阳农业大学生物科学技术学院北京农业生物技术研究中心; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期79-82,共4页; 基金创新能力建设专项(KJCX201102003) 转基因重大专项(2009ZX08009-060B) +2 种基金辽宁省教育厅高等学校科学技术研究项目(2008663); 文摘为培育去除选择标记基因的耐旱转基因植物,同时利用Cre/Lox和FLP/frt系统,构建一个能够高效删除标记基因的Bhlea2基因植物表达载体。拟南芥rd29A启动子是在低温、干旱、高盐胁迫下的快速应答启动子,玉米ubiquitin启动子可有效驱动外源基因的转录,拟南芥pAB5启动子是花粉及胚胎等发育早期特异表达的启动子,利用上述启动子构建了表达Bhlea2基因并能够删除标记基因的植物表达载体。该表达载体包括重组酶表达元件pAB5-FLP、Bhlea2抗旱基因表达元件rd29A-Bhlea2和bar标记基因表达元件ubiquitin-bar。; 关键词位点特异性重组系统标记基因删除转基因植物; Keywords Site-specific recombination system Deletion marker gene Transgenic plants; 分类号 Q943.2 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名质体基因工程中选择标记基因研究进展被引量：2: 4; 作者何勇罗岸母连胜陈强张艳叶开温田志宏; 机构长江大学主要粮食作物产业化湖北省协同创新中心长江大学生命科学学院长江大学农学院; 出处《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期810-827,共18页; 基金主要粮食作物产业化湖北省协同创新中心开放基金项目(编号:2015MS006)资助~~; 文摘与细胞核基因工程相比,质体基因工程能更安全、精确和高效地对外源基因进行表达,作为下一代转基因技术已广泛用于基础研究和生物技术应用领域。与细胞核基因工程一样,质体基因工程中也需要合适的选择标记基因用于转化子的筛选和同质化,但基于质体基因组的多拷贝性和母系遗传特点,转化子的同质化需要一个长期的筛选过程,这就决定了质体基因工程中选择标记基因的选择标准将不同于细胞核基因工程中广泛使用的现行标准。目前,质体基因工程的遗传转化操作中使用较多的是抗生素选择标记基因,出于安全性考虑,需要找到可替换、安全的选择标记基因或有效的标记基因删除方法。本文在对质体基因工程研究的相关文献分析基础之上,对主要使用的选择标记基因及其删除体系进行了综述,并对比了其优缺点,同时探讨了质体基因工程中所使用的报告基因,以期为现有选择标记基因及其删除体系的改进和开发提供一定参考,进一步推动质体基因工程,尤其是单子叶植物质体基因工程的发展。; 关键词质体基因工程叶绿体基因工程质体遗传转化叶绿体遗传转化选择标记基因标记基因删除; Keywords plastid genetic engineering chloroplast genetic engineering plastid transformation chloroplast transformation selectable marker genes marker gene elimination; 分类号 Q943.2 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	一种利用Cre/loxP系统进行标记基因删除与靶基因置换的细胞模型研究(英文)	崔文涛任立明侯健张颖陈永福安晓荣	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2008	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	应用Cre/loxP系统在转化细胞水平上高效删除转基因水稻的标记基因	赵艳张晓丽郭龙彪钱前	《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心	2011	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	高效删除标记基因的Bhlea2植物表达载体的构建	邹璐琳魏建华王宏芝张少斌	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	质体基因工程中选择标记基因研究进展	何勇罗岸母连胜陈强张艳叶开温田志宏	《遗传》 CAS CSCD 北大核心	2017	2	在线阅读下载PDF 职称材料