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番鸭细小病毒VP3蛋白的生物信息学分析
1
作者 许泽军 刘宽辉 +1 位作者 张海燕 朱广双 《山东畜牧兽医》 2025年第5期7-10,15,共5页
番鸭细小病毒病是由番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)引起雏番鸭的一种急性、败血性传染病。为分析MDPVVP3蛋白的生物信息学特征,本研究利用ExPASY等在线分析网站对MDPVVP3蛋白进行相关的生物信息学预测分析,结果显示MDPVVP... 番鸭细小病毒病是由番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)引起雏番鸭的一种急性、败血性传染病。为分析MDPVVP3蛋白的生物信息学特征,本研究利用ExPASY等在线分析网站对MDPVVP3蛋白进行相关的生物信息学预测分析,结果显示MDPVVP3蛋白由534个氨基酸组成,包含20种氨基酸,相对分子质量(Mr)为60 035.82,无潜在的信号肽序列以及跨膜区,具有亲水性,并预测为稳定性蛋白;MDPVVP3具有4个潜在N-糖基化修饰位点、8个潜在O-糖基化修饰位点,以及56个潜在磷酸化修饰位点;同时具有18个潜在抗原决定簇以及11个连续氨基酸数量超过10位的B细胞抗原表位。本研究通过生物信息学分析手段,对MDPVVP3蛋白进行了全面预测解析,为MDPV VP3蛋白的功能研究以及MDPV新型疫苗的研发提供了一定的研究基础。 展开更多
关键词 番鸭细小病毒 VP3蛋白 生物信息学 b细胞抗原表位
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柯萨奇病毒B3(CVB3)通过激活NADK2促进小鼠巨噬细胞NLRP3的活化
2
作者 桑瑞 魏金环 +3 位作者 潘静莹 杨日云 毛立明 包璟崟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期34-40,共7页
目的研究在柯萨奇病毒B3(CVB3)刺激下,小鼠巨噬细胞中含pyrin结构域NOD样受体家族蛋白3(NLRP3)表达的变化及机制。方法CVB3刺激RAW264.7细胞、小鼠原代(骨髓来源或腹腔)巨噬细胞以及感染NLRP3短发夹RNA(shRNA-NLRP3)慢病毒的RAW264.7细... 目的研究在柯萨奇病毒B3(CVB3)刺激下,小鼠巨噬细胞中含pyrin结构域NOD样受体家族蛋白3(NLRP3)表达的变化及机制。方法CVB3刺激RAW264.7细胞、小鼠原代(骨髓来源或腹腔)巨噬细胞以及感染NLRP3短发夹RNA(shRNA-NLRP3)慢病毒的RAW264.7细胞,实时荧光定量PCR检测NLRP3和白细胞介素1β(IL-1β)表达水平;ELISA检测细胞上清中IL-1β的含量;Western blot法检测NLRP3蛋白的变化,免疫共沉淀(Co-IP)法检测NLRP3相互作用蛋白的表达。结果CVB3刺激RAW264.7细胞、骨髓来源或腹腔巨噬细胞后,NLRP3和IL-1β表达明显升高;下调NLRP3后,IL-1β分泌明显减少;NLRP3抗体Co-IP所得复合物银染,组间差异蛋白经质谱分析鉴定为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸激酶2(NADK2),证明CVB3诱导NADK2与NLRP3相互作用。结论CVB3通过激活NADK2促进巨噬细胞NLRP3活化,增加炎症因子IL-1β表达和释放。 展开更多
关键词 含pyrin结构域NOD样受体家族蛋白3(NLRP3) 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸激酶2(NADK2) 柯萨奇病毒b3(cvb3) 巨噬细胞
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槐果碱体外抗柯萨奇病毒B3m的作用 被引量：20
3
作者 张星宇 陈曙霞 +1 位作者 刘晶星 钱富荣 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期892-894,共3页
目的 以HeLa细胞为模型，观察从苦参中提取的槐果碱在体外抗柯萨奇病毒B3m（CVB3m）的作用。方法 ①用微量细胞培养法观察槐果碱对HeLa细胞的毒性。②用细胞病变效应（CPE）抑制法观察槐果碱体外抗CVB3m作用。③用MTT法和结晶紫染色法... 目的 以HeLa细胞为模型，观察从苦参中提取的槐果碱在体外抗柯萨奇病毒B3m（CVB3m）的作用。方法 ①用微量细胞培养法观察槐果碱对HeLa细胞的毒性。②用细胞病变效应（CPE）抑制法观察槐果碱体外抗CVB3m作用。③用MTT法和结晶紫染色法观察槐果碱对CVB3m感染的HeLa细胞的保护作用：在96孔板上种植HeLa细胞并予CVB3m吸附1h，加入不同浓度的槐果碱，并设立病毒、细胞、槐果碱对照，培养15h后以MTT法和结晶紫染色法测定比较各组细胞能量代谢率和细胞存活数。结果 ①槐果碱稀释到〈391μg／mL，对HeLa细胞无毒性；≥783μg／mL引起HeLa细胞CPE。②槐果碱6．25～50μs／mL有直接抗病毒作用，减轻CPE；〉100μg／mL反而会加重、加快CPE。③槐果碱1．56～25μg／mL对感染CVB3m的HeLa细胞有保护作用，用MTT法和结晶紫染色法测得细胞能量合成代谢、细胞存活数较病毒对照组增加（P〈0．05）；槐果碱在50、100μg／mL时反而加重病毒对细胞的抑制，使细胞存活数、细胞代谢率较病毒对照组下降（P〈0．05）。结论 一定浓度的槐果碱在体外有抗CVB3m作用，对感染CVB3m的HeLa细胞有保护作用。 展开更多
关键词 槐果碱 柯萨奇病毒b3 HELA细胞
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柯萨奇B3病毒VP1基因在原核中的表达及其临床意义 被引量：4
4
作者 毕胜利 曲萌 +1 位作者 陈廷友 宋玉国 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期847-850,856,共5页
目的:研究柯萨奇B3病毒(CVB3)VP1基因在大肠杆菌中的表达及其临床意义。方法:将柯萨奇B3病毒中国分离株VP1基因克隆入PQE-30载体,转导入大肠杆菌(Ml5)中,使CVB3的VP1基因在大肠杆菌中得到稳定的表达,采用NAT亲和方法纯化,间接ELISA方法... 目的:研究柯萨奇B3病毒(CVB3)VP1基因在大肠杆菌中的表达及其临床意义。方法:将柯萨奇B3病毒中国分离株VP1基因克隆入PQE-30载体,转导入大肠杆菌(Ml5)中,使CVB3的VP1基因在大肠杆菌中得到稳定的表达,采用NAT亲和方法纯化,间接ELISA方法做免疫学活性鉴定。结果:表达的VP1产物与抗柯萨奇B3病毒的兔抗CVB3(多克隆抗体)血清产生较强的免疫反应,与天然的CVB3蛋白抗原(病毒组织培养抗原)的抗原性近似。应用无关兔抗体对照呈阴性反应。应用表达的VP1产物作为抗原,对临床急性病毒性心肌炎患者血清进行了特异性IgM酶联免疫吸附试验检测,其结果与组织培养的CVB3制备的细胞蛋白抗原对上述患者血清的特异性IgM检测结果基本一致。结论:采用基因工程方法制备出的CVB3-VP1蛋白抗原产量高,纯化后免疫反应原性基本没有变化。试用表达CVB3的VP1基因工程抗原代替目前实验用有感染危险的病毒培养抗原的方法,快速、特异地检出CVB3的感染,为急性心肌炎的早期诊断和及时的临床治疗提供可靠的实验室诊断指标。 展开更多
关键词 柯萨奇b3病毒(cvb3) VP1基因 基因表达
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紫球藻胞外多糖抗柯萨奇B_3病毒活性 被引量：7
5
作者 刘石生 魏东 +2 位作者 朱桂芳 王一飞 李琳 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第2期82-85,90,共5页
采用离子交换凝胶QSepharoseFastFlow,以NaCl梯度洗脱,将紫球藻胞外多糖 (ESPS)分离成3个组分ESPS0、ESPS1.0和ESPS1.6,分别占粗多糖总量的44.2%(以质量 计,下同),20.3%和16.4%.ESPS0中未测出蛋白,ESPS1.0和ESPS1.6的蛋白含量... 采用离子交换凝胶QSepharoseFastFlow,以NaCl梯度洗脱,将紫球藻胞外多糖 (ESPS)分离成3个组分ESPS0、ESPS1.0和ESPS1.6,分别占粗多糖总量的44.2%(以质量 计,下同),20.3%和16.4%.ESPS0中未测出蛋白,ESPS1.0和ESPS1.6的蛋白含量分别为 7.8%和7.6%;ESPS0、ESPS1.0和ESPS1.6的硫酸基含量分别为16.3%,11.6%和8.3%.利 用体外模型测试了3个组分的抗CVB3病毒的活性.发现ESPS0,ESPS1.0和ESPS1.6抑制 CVB3病毒的半数抑制质量浓度分别为2.03,0.51和0.53mg/L,治疗指数IT值分别为 61.6,245.1和235.8;在相同条件下,阳性对照药物病毒唑的半数抑制质量浓度和IT值 分别为31.25mg/L和16.0.结果表明,3种组分抗CVB3活性均高于病毒唑. 展开更多
关键词 紫球藻 多糖 柯萨奇b3病毒 抗病毒活性
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Balb/c小鼠CVB_3病毒性扩张型心肌病并心力衰竭模型的建立 被引量：11
6
作者 李双杰 张召才 +3 位作者 陈瑞珍 杨英珍 陈灏珠 葛均波 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期559-561,F005,共4页
目的　建立慢性病毒性心肌炎、扩张型心肌病并心力衰竭的实验模型。方法　用CVB3 反复感染Balb/c小鼠 ,分别于感染后第 1、3、6、9个月不同时点 ,采用超声心动图观察小鼠左心室收缩期及舒张末期内径及射血分数。取心肌经HE染色观察其病... 目的　建立慢性病毒性心肌炎、扩张型心肌病并心力衰竭的实验模型。方法　用CVB3 反复感染Balb/c小鼠 ,分别于感染后第 1、3、6、9个月不同时点 ,采用超声心动图观察小鼠左心室收缩期及舒张末期内径及射血分数。取心肌经HE染色观察其病理形态特征 ,VG染色观察心肌纤维化 ,及原位末端标记法观察细胞凋亡。结果　B超发现 ,感染病毒后小鼠左心室收缩末期及舒张末期内径增大 ,左心室射血分数 (EF)下降 ,与正常小鼠相比P <0 .0 5。反复感染病毒 3个月内组织病理学特征与慢性心肌炎类似 ,而 3个月后则呈现出典型的扩张型心肌病理特征。在慢性期主要是病变部位的炎症细胞及心肌细胞凋亡 ,而扩张型心肌病期出现心肌细胞散在性凋亡。结论　Balb/c小鼠反复感染病毒可能是慢性心肌炎演变为扩张型心肌病并心力衰竭的良好的实验模型 ; 展开更多
关键词 扩张型心肌病 心力衰竭 观察 bALb/C小鼠 心肌炎 cvb3 反复感染 正常小鼠 感染病 病毒
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雷帕霉素对柯萨奇病毒B3诱导的大鼠心肌细胞mTOR和eIF-4E表达的调控作用 被引量：10
7
作者 陈淳媛 孙跃女 +2 位作者 杨作成 蔡姿丽 杨敏 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期612-617,共6页
目的:研究雷帕霉素对柯萨奇病毒B3(coxsackievirus B3,CVB3)诱导的心肌细胞哺乳类雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)和真核起始因子4E(eukaryotic initiation factor-4E,eIF-4E)表达的调控,探讨mTOR/eIF-4E信号传导... 目的:研究雷帕霉素对柯萨奇病毒B3(coxsackievirus B3,CVB3)诱导的心肌细胞哺乳类雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)和真核起始因子4E(eukaryotic initiation factor-4E,eIF-4E)表达的调控,探讨mTOR/eIF-4E信号传导在病毒性心肌炎(viral myocarditis,VM)的作用。方法:CVB3感染原代培养的SD大鼠心肌细胞建立病毒性心肌炎的细胞模型。根据细胞毒力实验筛选10 nmol/L的雷帕霉素干预CVB3感染的心肌细胞,采用RT-PCR和Western免疫印迹方法检测mTOR和eIF-4E mRNA表达及蛋白质水平。结果:CVB3诱导心肌细胞变性,雷帕霉素可减轻其变性;CVB3使大鼠心肌细胞的mTOR和eIF-4E mRNA和蛋白表达上调,与对照组比较,有统计学差异(P<0.05),雷帕霉素可使CVB3感染的心肌细胞mTOR和eIF-4E mRNA和蛋白表达明显下调,与CVB3组比较,有统计学差异(P<0.05)。结论:雷帕霉素能明显抑制CVB3感染的大鼠心肌细胞mTOR和eIF-4E表达,提示mTOR/eIF-4E信号传导在病毒性心肌炎中可能起重要作用。 展开更多
关键词 哺乳类雷帕霉素靶蛋白 真核起始因子4E 柯萨奇病毒b3 心肌细胞
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柯萨奇病毒B3的VP1 DNA疫苗与蛋白或重组腺病毒疫苗不同组合免疫方式的免疫效果观察 被引量：3
8
作者 蓝佳明 高志云 +5 位作者 金玉怀 李剑 刘贵霞 羡鲜 张永红 王永祥 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期41-45,50,共6页
目的观察柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)衣壳蛋白VP1DNA疫苗初免后VP1蛋白或重组腺病毒rAd/VP1加强的prime-boost策略的免疫效果。方法用CVB3VP1的真核表达质粒pcDNA3/VP1初次免疫小鼠后,分别用VP1蛋白或重组腺病毒rAd/VP1加强免... 目的观察柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)衣壳蛋白VP1DNA疫苗初免后VP1蛋白或重组腺病毒rAd/VP1加强的prime-boost策略的免疫效果。方法用CVB3VP1的真核表达质粒pcDNA3/VP1初次免疫小鼠后,分别用VP1蛋白或重组腺病毒rAd/VP1加强免疫2次。检测免疫小鼠血清特异性IgG抗体、中和抗体滴度以及脾脏细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic lymphocytes,CTLs)杀伤活性;致死量CVB3攻击后,检测小鼠血中病毒滴度并观察动物的存活情况。结果 pcDNA3/VP1+VP1蛋白组小鼠血清IgG抗体、中和抗体滴度以及动物生存率明显高于pcDNA3/VP1+rAd/VP1组和pcDNA3/VP1质粒组(P<0.05);pcDNA3/VP1+rAd/VP1组和pcDNA3/VP1+VP1蛋白组小鼠脾脏CTLs杀伤活性明显高于pcDNA3/VP1质粒组(P<0.05)。结论质粒pcDNA3/VP1初次免疫后,VP1蛋白或重组腺病毒rAd/VP1加强的prime-boost策略有较好的免疫效果,两者比较pcDNA3/VP1+VP1蛋白prime-boost免疫策略的效果更为明显。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒b3 PRIME-bOOST DNA 蛋白 重组腺病毒
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CVB3腺病毒载体疫苗Ad/MDC-VP1的构建及免疫效果研究 被引量：4
9
作者 闫立景 高志云 +5 位作者 蓝佳明 揣侠 李剑 金玉怀 谢立新 王永祥 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期835-838,共4页
目的:构建巨噬细胞源趋化因子(Macrophage-derived chemokine,MDC)与柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)VP1融合基因腺病毒载体疫苗Ad/MDC-VP1,并观察对小鼠的免疫效果。方法:利用AdEasy-1系统构建重组腺病毒Ad/MDC-VP1及腺病毒Ad,... 目的:构建巨噬细胞源趋化因子(Macrophage-derived chemokine,MDC)与柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)VP1融合基因腺病毒载体疫苗Ad/MDC-VP1,并观察对小鼠的免疫效果。方法:利用AdEasy-1系统构建重组腺病毒Ad/MDC-VP1及腺病毒Ad,并检测融合蛋白MDC-VP1的表达。BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,每组18只,分别肌肉注射Ad/MDC-VP1和Ad,免疫2次,间隔2周。分别用ELISA法和微量中和试验法检测血清CVB3VP1特异性IgG抗体和中和抗体;末次免疫后3周,CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖活性和特异性CTL杀伤活性;用致死量CVB3攻击后检测小鼠血中病毒滴度并观察保护率。结果:Ad/MDC-VP1和Ad构建成功,并检测到MDC-VP1融合蛋白的表达。Ad/MDC-VP1组血清CVB3特异性VP1IgG、中和抗体水平、特异性CTL活性较对照组明显增强(P<0.01);病毒攻击后实验组血中病毒滴度明显降低,生存率明显高于对照组(P<0.01)。结论:Ad/MDC-VP1能提高小鼠细胞和体液免疫水平,增加病毒攻击后的保护率。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒b3 腺病毒载体疫苗 免疫应答 小鼠
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益心康对柯萨奇B_(3m)病毒性心肌炎小鼠作用的实验研究 被引量：12
10
作者 王鹏 陈苏宁 +1 位作者 张玉芳 杨积武 《辽宁中医杂志》 CAS 2002年第11期695-696,共2页
目的 :实验观察中药复方益心康 ,对实验性病毒性心肌炎小鼠心肌细胞保护作用和对心肌细胞内病毒复制的抑制作用。方法 :诱导Balb/c小鼠形成病毒性心肌炎模型 ,分别予益心康、病毒唑稀释液、生理盐水灌胃。测每个小鼠血清磷酸肌酸激酶 (... 目的 :实验观察中药复方益心康 ,对实验性病毒性心肌炎小鼠心肌细胞保护作用和对心肌细胞内病毒复制的抑制作用。方法 :诱导Balb/c小鼠形成病毒性心肌炎模型 ,分别予益心康、病毒唑稀释液、生理盐水灌胃。测每个小鼠血清磷酸肌酸激酶 (CK)及其同功酶MB(CK -MB) ,测心肌细胞感染CVB3mRNA量。结果 :中药治疗组小鼠的血清CK和CK -MB明显低于其它两个治疗组。中药治疗组小鼠的心肌细胞含有的病毒RNA量明显少于其它两个治疗组。结论 :益心康对柯萨奇B3m病毒性心肌炎小鼠有保护作用 ,并抑制柯萨奇病毒B3m在心肌细胞中的复制。 展开更多
关键词 益心康 柯萨奇b3M病毒 心肌炎 小鼠 实验研究
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27种南药有效部位体外抗柯萨奇病毒B3活性测定 被引量：5
11
作者 王亚峰 张美英 +5 位作者 王小燕 郝静 任哲 王一飞 张颖君 杨崇仁 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2008年第6期1234-1236,共3页
目的:探讨27种南药有效部位体外抗柯萨奇病毒B3(CVB3)的作用。方法:采用观察细胞病变效应法(CPE法)检测10种南药(岗梅根、溪黄草、南板蓝根、叶下珠、叶下珠(广西)、两面针、广藿香、土牛膝、沙姜和青天葵)的27个有效部位在HeLa细胞中的... 目的:探讨27种南药有效部位体外抗柯萨奇病毒B3(CVB3)的作用。方法:采用观察细胞病变效应法(CPE法)检测10种南药(岗梅根、溪黄草、南板蓝根、叶下珠、叶下珠(广西)、两面针、广藿香、土牛膝、沙姜和青天葵)的27个有效部位在HeLa细胞中的抗CVB3活性,从中筛选出有抗CVB3活性的有效部位。结果:从27种有效部位中筛选出土牛膝的醋酸乙酯提取物和青天葵的甲醇提取物2种有抗CVB3活性的有效部位,其半数抑制浓度(IC50)分别为12.06 mg/L和77.67 mg/L。结论:27种南药有效部位中有2种具有抗CVB3活性。 展开更多
关键词 南药 有效部位 柯萨奇病毒b3
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柯萨奇病毒B3通过caspase依赖途径诱导HeLa细胞凋亡 被引量：3
12
作者 袁建平 王洪涛 +4 位作者 赵蔚 吴凯宇 李涛 郭晓奎 童善庆 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期424-425,436,共3页
目的评价柯萨奇病毒B3CVB3致HeLa细胞死亡的方式及分子机制。方法用CVB3作用于HeLa细胞,在不同时间收集细胞,通过相差显微镜、电子显微镜、流式细胞仪以及分子生物学手段,检测HeLa细胞的病变及caspase-3基因mRNA和蛋白质的表达。结果CVB... 目的评价柯萨奇病毒B3CVB3致HeLa细胞死亡的方式及分子机制。方法用CVB3作用于HeLa细胞,在不同时间收集细胞,通过相差显微镜、电子显微镜、流式细胞仪以及分子生物学手段,检测HeLa细胞的病变及caspase-3基因mRNA和蛋白质的表达。结果CVB3作用于HeLa细胞后,细胞很快发生变性和坏死,24h后较多细胞凋亡;caspase基因在病毒作用早期即被活化,表现在caspase-3mRNA在病毒作用后6h内,迅速增高达峰值。在24h内,又降至接近病毒作用前的水平。caspase-3蛋白表达在42h内逐渐增高。结论CVB3可诱导HeLa细胞发生坏死和凋亡两种反应,坏死早于凋亡,细胞凋亡与caspase-3的表达密切相关。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒 b3 细胞凋亡 CASPASE-3
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柯萨奇病毒B3感染HeLa细胞后Bax和Bim的表达 被引量：4
13
作者 杨丽 李欣 +3 位作者 田朗 黄利华 李卓颖 杨作成 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期524-528,共5页
目的:观察HeLa细胞感染柯萨奇病毒B3(CVB3)后Bax和Bim mRNA和蛋白的表达。方法:将HeLa细胞分为未予以CVB3感染的对照组和予以CVB3感染的病毒组,取3 h、6 h、9 h、12 h和24 h的细胞,采用RT-PCR和Western blotting分别检测Bax和Bim mRNA... 目的:观察HeLa细胞感染柯萨奇病毒B3(CVB3)后Bax和Bim mRNA和蛋白的表达。方法:将HeLa细胞分为未予以CVB3感染的对照组和予以CVB3感染的病毒组,取3 h、6 h、9 h、12 h和24 h的细胞,采用RT-PCR和Western blotting分别检测Bax和Bim mRNA和蛋白的表达。结果:Bax和Bim mRNA在对照组和病毒组HeLa细胞中均有表达,在病毒组和对照组中Bax和Bim mRNA的表达在各自组内均无显著差异(P>0.05),但在24 h Bax和Bim在病毒组mRNA的表达低于对照组(P<0.05)。Bax和Bim蛋白表达在对照组中各时点均有表达,但无显著差异(P>0.05)。病毒组Bax蛋白在24 h表达下降,差异有统计学意义(P<0.05),且病毒组表达明显低于对照组(P<0.05);Bim蛋白的表达随感染时间延长而下降(P<0.05),9 h、12 h和24 h表达病毒组低于对照组(P<0.05)。结论:Bax和Bim在CVB3感染诱导的HeLa细胞凋亡早期发挥作用。 展开更多
关键词 HELA细胞 柯萨奇病毒b3 细胞凋亡 bAX蛋白 bIM蛋白
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牛磺酸对柯萨奇B3病毒感染新生大鼠心肌细胞外向钾电流的影响 被引量：10
14
作者 鲍伟胜 杨英珍 +3 位作者 顾全保 赵剑星 虞勇 郭棋 《上海医科大学学报》 CSCD 1999年第1期8-10,共3页
观察牛磺酸对柯萨奇Ｂ３病毒（ＣｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓＢ３，ＣＶＢ３）感染新生大鼠心肌细胞外向钾电流（ｏｕｔｗａｒｄｃｕｒｒｅｎｔ，Ｉｏｕｔ）的影响。方法运用全细胞膜片钳技术记录了分离的大鼠心肌细胞外向钾电流，并... 观察牛磺酸对柯萨奇Ｂ３病毒（ＣｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓＢ３，ＣＶＢ３）感染新生大鼠心肌细胞外向钾电流（ｏｕｔｗａｒｄｃｕｒｒｅｎｔ，Ｉｏｕｔ）的影响。方法运用全细胞膜片钳技术记录了分离的大鼠心肌细胞外向钾电流，并观察牛磺酸的作用。结果ＣＶＢ３感染可使正常大鼠心肌细胞Ｉｏｕｔ明显增加，牛磺酸对正常大鼠心肌细胞Ｉｏｕｔ无明显影响，但可使ＣＶＢ３感染的Ｉｏｕｔ趋于正常。结论牛磺酸对ＣＶＢ３感染心肌细胞Ｋ＋通道电流的作用可能是其发挥抗心肌损伤作用的机制之一。 展开更多
关键词 牛磺酸 外向钾电流 心肌细胞 柯萨奇b3病毒
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螺旋藻多糖抗柯萨奇B_3病毒的体外实验研究 被引量：8
15
作者 于红 吕锐 张文卿 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2006年第5期756-759,共4页
在体外进行了钝顶螺旋藻多糖(polysaccharides fromSpirulina platensis,PSP)抗柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)活性的研究。以不同剂量的PSP作用于病毒复制周期的各个环节,以病毒半数感染量(TCID50),细胞病变效应(CPE),蚀斑形成... 在体外进行了钝顶螺旋藻多糖(polysaccharides fromSpirulina platensis,PSP)抗柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)活性的研究。以不同剂量的PSP作用于病毒复制周期的各个环节,以病毒半数感染量(TCID50),细胞病变效应(CPE),蚀斑形成单位(PFU),MTT染色细胞保护率(MTT法)作为评价指标,判断PSP的抗病毒效果。结果表明PSP对Vero细胞毒性极低(TC50为1750μg/mL),对CVB3无直接灭活作用,PSP可干扰病毒向宿主细胞的吸附,其抗病毒生物合成的活性最高(IC50为5.26,TI为237.6),是阳性对照药病毒唑的3.95倍,但不影响病毒的释放。提示PSP抗病毒靶位可能在于抑制病毒吸附和感染细胞内病毒的生物合成。 展开更多
关键词 螺旋藻多糖 螺旋藻 柯萨奇病毒b3 抗病毒作用
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柯萨奇病毒B3诱导的病毒性心肌炎C57BL/6J小鼠模型的建立 被引量：7
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作者 赵小建 张洁钰 +4 位作者 杨帆 王丽 张真真 唐琳 赵洛沙 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2016年第2期212-217,共6页
目的：建立由柯萨奇病毒B3（CVB3）Nancy株诱导的病毒性心肌炎（VMC）C57BL/6J小鼠模型。方法：4周龄、6周龄C57BL/6J小鼠各50只,每个年龄组随机选取15只作为对照（腹腔注射PBS）,剩余35只腹腔接种含CVB3 Nancy株的病毒悬液（1×10^... 目的：建立由柯萨奇病毒B3（CVB3）Nancy株诱导的病毒性心肌炎（VMC）C57BL/6J小鼠模型。方法：4周龄、6周龄C57BL/6J小鼠各50只,每个年龄组随机选取15只作为对照（腹腔注射PBS）,剩余35只腹腔接种含CVB3 Nancy株的病毒悬液（1×10^5PFU/只）,于感染后第14天取心脏,行HE染色和CD3、CD45免疫组化染色,进行病理学评价,检测血清白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,并做心肌组织中病毒滴度检测,采用Western blot法检测磷酸化AKT、Ik Bα、GSK3β的表达。结果：4周龄小鼠造模过程中有19只（54.3%）死亡;与对照小鼠比较,模型小鼠心肌呈现弥漫性炎性细胞浸润和片状心肌细胞变性坏死,CD3、CD45阳性细胞弥漫浸润于心肌间质,血清IL-1β、TNF-α水平明显升高（P〈0.05）,心肌组织中磷酸化AKT、Ik Bα、GSK3β表达增高（P〈0.05）。6周龄小鼠造模过程中有3只（8.6%）死亡,模型小鼠心肌组织中炎症反应轻于4周龄模型小鼠（P〈0.05）。结论：成功建立了VMC的C57BL/6J小鼠模型,4周龄C57BL/6J小鼠更适用于模型的建立。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒b3 病毒性心肌炎 C57bL/6J小鼠 动物模型
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小鼠β防御素2与柯萨奇病毒B3 VP1融合基因疫苗的构建和免疫效果研究 被引量：3
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作者 刘贵霞 金玉怀 +7 位作者 殷长甫 高志云 揣侠 蓝佳明 张永红 李嘉 李伟 王永祥 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期647-650,共4页
目的:构建小鼠β-防御素2(Mouse beta-defensin-2,mBD2)与柯萨奇病毒B组3型(Coxsackievirus B3,CVB3)VP1融合基因疫苗,并观察其对小鼠的免疫效果。方法:克隆mBD2基因,构建重组质粒pcDNA3/mBD2和pcDNA3/mBD2-L-VP1。将4～6周龄BALB/c雄... 目的:构建小鼠β-防御素2(Mouse beta-defensin-2,mBD2)与柯萨奇病毒B组3型(Coxsackievirus B3,CVB3)VP1融合基因疫苗,并观察其对小鼠的免疫效果。方法:克隆mBD2基因,构建重组质粒pcDNA3/mBD2和pcDNA3/mBD2-L-VP1。将4～6周龄BALB/c雄性小鼠随机分为5组,分别于股四头肌注射PBS(A组)、pcDNA3(B组)、pcDNA3/mBD2(C组)、pcDNA3/VP1(D组)、pcDNA3/mBD2-L-VP1(E组),每次接种剂量100μg/只,3周免疫1次,共3次。每次免疫后第14天眼眶静脉取血,用微量中和试验滴定血清中和抗体效价。第三次免疫后第21天,每组随机取3只小鼠,制备脾淋巴细胞悬液,用CCK-8细胞计数法检测特异性CTL的杀伤活性;每组取3只小鼠以3LD50CVB3病毒攻击,第7天取血处死,检测血清病毒滴度。结果:成功克隆了mBD2基因,构建了pcDNA3/mBD2和pcDNA3/mBD2-L-VP1两种重组质粒;D组和E组血清中和抗体滴度随免疫次数增加而提高(P<0.01);E组血清中和抗体滴度和脾细胞特异性CTL杀伤活性显著高于其他组(P<0.01),血中CVB3病毒滴度显著低于其他组(P<0.01)。结论:pcDNA3/mBD2-L-VP1能诱导小鼠对CVB3产生较强的体液免疫和细胞免疫,能有效抑制病毒在体内增殖。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒b3 Β-防御素2 小鼠 DNA疫苗
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紫球藻胞外多糖抗柯萨奇B_3病毒活性研究I 被引量：4
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作者 刘石生 魏东 +2 位作者 王一飞 朱桂芳 李琳 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2005年第1期16-20,共5页
要 :采用MTT法研究了紫球藻胞外磺酸化多糖 (ESPS)的细胞毒性 ,在高浓度 (2 5 0 μg/mL)下尚未发现对HEp 2细胞有明显毒性。CPE抑制法发现ESPS能明显抑制细胞的CPE ,在综合、预防、治疗和直接作用四种给药方式下都具有抑制CVB3 的作用... 要 :采用MTT法研究了紫球藻胞外磺酸化多糖 (ESPS)的细胞毒性 ,在高浓度 (2 5 0 μg/mL)下尚未发现对HEp 2细胞有明显毒性。CPE抑制法发现ESPS能明显抑制细胞的CPE ,在综合、预防、治疗和直接作用四种给药方式下都具有抑制CVB3 的作用。直接作用法的活性最高 ,TI值高达 192 0 6 ,是阳性对照药病毒唑的 31倍。ES PS组分中分子量越大 ,抗病毒活性越高 ,其中分子量大于 30 0k的组分 ,IC50 可低至 0 .75 4 μg/mL ,TI值高达331. 6 ,是病毒唑的 5倍多。结果表明ESPS有强烈的抗CVB3 病毒活性 ,作用机制可能是干扰病毒在细胞表面的吸附及侵染过程。 展开更多
关键词 中分子 病毒唑 柯萨奇b3病毒 治疗 抗C 细胞表面 给药方式 组分 磺酸 紫球藻
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柯萨奇病毒B组3型亚单位疫苗与基因靶向疫苗免疫小鼠的效果比较 被引量：3
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作者 高志云 蓝佳明 +5 位作者 金玉怀 李剑 刘贵霞 羡仙 张永红 王永祥 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期882-885,899,共5页
目的:观察柯萨奇病毒VP1基因靶向核酸疫苗pcDNA3/C3d3-sVP1、重组腺病毒rAd/C3d3-sVP1和亚单位疫苗VP1蛋白的免疫效果。方法:雄性BALB/c小鼠随机分为4组,每组18只,分别肌肉注射PBS、pcDNA3/C3d3-sVP1、rAd/C3d3-sVP1和VP1蛋白,除重组腺... 目的:观察柯萨奇病毒VP1基因靶向核酸疫苗pcDNA3/C3d3-sVP1、重组腺病毒rAd/C3d3-sVP1和亚单位疫苗VP1蛋白的免疫效果。方法:雄性BALB/c小鼠随机分为4组,每组18只,分别肌肉注射PBS、pcDNA3/C3d3-sVP1、rAd/C3d3-sVP1和VP1蛋白,除重组腺病毒rAd/C3d3-sVP1组免疫2次,间隔2周外,其余3组均免疫3次,间隔3周。质粒每次每只接种100μg/100μl,腺病毒每次每只接种1.2×107pfu/100μl,蛋白每次每只接种50μg。分别用ELISA法和微量中和试验法检测血清CVB3 VP1特异性IgG抗体和中和抗体;CCK-8法检测脾淋巴细胞特异性CTL杀伤活性;以致死量的CVB3病毒液感染已免疫小鼠,检测小鼠血中病毒滴度,观察存活情况以评价各种疫苗的免疫保护作用。结果:各实验组小鼠的特异性IgG抗体和中和抗体滴度随免疫次数增加而提高,末次免疫后,VP1蛋白组的特异性IgG抗体和中和抗体滴度均明显高于pcDNA3/C3d3-sVP1组和rAd/C3d3-sVP1组(P<0.05),但rAd/C3d3-sVP1组CTL杀伤活性高于pcDNA3/C3d3-sVP1组和VP1蛋白组;经致死量CVB3感染后,VP1蛋白组血中病毒滴度低于其他实验组,而生存率明显高于其他各组。结论:VP1蛋白疫苗诱导小鼠产生较强的特异性免疫应答,提高了小鼠的生存率,免疫效果优于靶向基因疫苗pcDNA3/C3d3-sVP1和rAd/C3d3-sVP1。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒b3 靶向基因疫苗 亚单位疫苗
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IL-18对感染柯萨奇B3病毒乳鼠心肌细胞的保护作用 被引量：3
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作者 李玲 刘亚黎 +3 位作者 彭华 林雯 陈立敏 蒙冰 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期238-240,共3页
目的研究IL-18抗柯萨奇B3病毒(Coxsackie B3 virus,CVB3)的作用.方法将心肌细胞分为4组.感染组:用CVB3感染心肌细胞;干预组:心肌细胞感染病毒后加入IL-18(4～30 ng/ml);IL-18组:正常心肌细胞加入IL-18(8 ng/ml);对照组:正常心肌细胞.观... 目的研究IL-18抗柯萨奇B3病毒(Coxsackie B3 virus,CVB3)的作用.方法将心肌细胞分为4组.感染组:用CVB3感染心肌细胞;干预组:心肌细胞感染病毒后加入IL-18(4～30 ng/ml);IL-18组:正常心肌细胞加入IL-18(8 ng/ml);对照组:正常心肌细胞.观察培养心肌细胞病变(CPE)及心肌酶谱乳酸脱氢酶(LDH)和磷酸肌酸激酶(CK)的变化.并进行IL-18最大无毒剂量实验.结果感染组感染病毒后第2、5天心肌细胞病变程度较其余3组明显,LDH和CK浓度明显升高,与其余3组比较差异有极显著性意义(P<0.01).IL-18浓度≥40 ng/ml对正常心肌细胞有毒性作用;在4～20 ng/ml范围内对感染心肌细胞具有保护作用.结论 IL-18可以抑制CVB3对心肌细胞的损伤,对CVB3感染的心肌细胞有保护作用. 展开更多
关键词 心肌炎 柯萨奇病毒b3组 白细胞介素18 心肌酶谱 乳酸脱氢酶 磷酸肌酸激酶
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