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辽宁省首株柯萨奇病毒B组5型全基因组序列分析
被引量：
1
1
作者
雷露
于伟
+3 位作者
张倩
王博
孙英伟
毛玲玲
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2023年第6期97-103,共7页
研究引起辽宁地区手足口病的柯萨奇病毒B组5型(coxsackievirus B5,CV-B5)基因组特征。对2018年从辽宁省688份肠道病毒核酸阳性的标本中分离到的1株CV-B5进行高通量测序,并对其全基因组进行遗传进化分析。结果表明,CV-B5辽宁分离株与国...
研究引起辽宁地区手足口病的柯萨奇病毒B组5型(coxsackievirus B5,CV-B5)基因组特征。对2018年从辽宁省688份肠道病毒核酸阳性的标本中分离到的1株CV-B5进行高通量测序,并对其全基因组进行遗传进化分析。结果表明,CV-B5辽宁分离株与国内流行株的全基因组核苷酸序列同源性为78.5%~97%,氨基酸序列同源性为75.3%~96.7%。基于全基因组的进化分析将CV-B5流行株分为A~D四个基因型,辽宁分离株属于D基因型。通过重组分析发现其在P3区的3D区段发生重组。首次在辽宁地区手足口病患儿中分离出CV-B5,辽宁省分离株(LN2018-23-21/CHN/2018)可能为重组株。
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关键词
手足口病
柯萨奇病毒b组5型
(CV-
b
5
)
全基因
组
遗传进化分析
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职称材料
柯萨奇病毒B组5型VP1蛋白的外源表达及多克隆抗体的制备
被引量：
1
2
作者
金维维
陈伟
+2 位作者
庞冉
张同禹
井申荣
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第4期463-466,共4页
目的:原核表达柯萨奇病毒B组5型的VP1蛋白,并制备其多克隆抗体及检测。方法:提取在Vero细胞中柯萨奇病毒B组5型的RNA,通过逆转录PCR(RT-PCR)扩增获取VP1基因序列,构建原核表达载体,大量诱导表达重组VP1蛋白。用His Trap HP亲和层析柱纯...
目的:原核表达柯萨奇病毒B组5型的VP1蛋白,并制备其多克隆抗体及检测。方法:提取在Vero细胞中柯萨奇病毒B组5型的RNA,通过逆转录PCR(RT-PCR)扩增获取VP1基因序列,构建原核表达载体,大量诱导表达重组VP1蛋白。用His Trap HP亲和层析柱纯化重组蛋白,以纯化的目的蛋白为抗原,免疫雄性SD大鼠获得VP1蛋白多克隆抗体血清,ELISA测定该抗体的效价,微量中和实验测定抗体的中和活性,Western blot检测抗体的特异性,免疫组化检测抗体对组织中抗原的识别。结果:成功构建了VP1-pET-28a重组载体,并且在BL21细胞中成功诱导表达,亲和层析柱纯化后蛋白纯度大于90%。ELISA测得抗体的效价为1∶128 000,微量中和实验显示抗体没有中和活性,Western blot分析显示抗体能与CVA16和EV71交叉反应,免疫组化实验表明抗体能够识别组织中的CVB5抗原。结论:本研究成功制备了CVB5 VP1蛋白的高效价的多克隆抗体,为CVB5病毒疫苗和病毒诊断的研发提供了有效的工具。
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关键词
柯萨奇病毒b组5型
VP1蛋白
多克隆抗体
免疫
组
化
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职称材料
柯萨奇病毒B组5型非结构蛋白抑制NF-κB信号通路的作用机制研究
3
作者
张佳玉
滕培英
+2 位作者
吕维民
杨帆
陈伟
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2023年第6期1403-1410,共8页
目的 柯萨奇病毒B组5型(CVB5)是手足口病的重要病原体之一,可导致发热、皮疹或疱疹等临床症状,重症者出现神经系统疾病,甚至死亡。天然免疫应答是机体抗病毒入侵的第一道防线,其中核因子κB (NF-κB)是宿主天然免疫反应中的重要蛋白质,...
目的 柯萨奇病毒B组5型(CVB5)是手足口病的重要病原体之一,可导致发热、皮疹或疱疹等临床症状,重症者出现神经系统疾病,甚至死亡。天然免疫应答是机体抗病毒入侵的第一道防线,其中核因子κB (NF-κB)是宿主天然免疫反应中的重要蛋白质,然而关于CVB5感染后调控NF-κB介导信号通路的研究尚鲜有报道。方法 本研究通过检测启动子活性、促炎因子水平以及通路中关键蛋白表达等,阐明CVB5对NF-κB信号通路的调控作用机制。结果 CVB5感染可抑制促炎因子表达和p65的磷酸化。CVB5非结构蛋白(NSP)可抑制促炎因子表达以及重要蛋白p65和IκBα的磷酸化。经STRING11.1数据库预测表明,CVB5 3CD蛋白与宿主多聚胞嘧啶结合蛋白1 (PCBP1)具有相互作用,且PCBP1可促进IκBα和p65的磷酸化,抑制病毒复制。结论 CVB5 NSP可负调控NF-κB信号通路,且与3CD相互作用的PCBP1蛋白可通过调控NF-κB通路抑制CVB5复制。本研究探索病毒与宿主天然免疫应答的调控作用,从而为研制抗CVB5感染的药物提供作用靶点。
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关键词
柯萨奇病毒b组5型
(CV
b
5
)
核因子κ
b
(NF-κ
b
)
非结构蛋白(NSP)
3CD
多聚胞嘧啶结合蛋白(PC
b
P1)
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职称材料
题名
辽宁省首株柯萨奇病毒B组5型全基因组序列分析
被引量：
1
1
作者
雷露
于伟
张倩
王博
孙英伟
毛玲玲
机构
辽宁省疾病预防控制中心
出处
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2023年第6期97-103,共7页
基金
国家重大科技专项(2017ZX10103007-001,2017ZX10104001-005-003)。
文摘
研究引起辽宁地区手足口病的柯萨奇病毒B组5型(coxsackievirus B5,CV-B5)基因组特征。对2018年从辽宁省688份肠道病毒核酸阳性的标本中分离到的1株CV-B5进行高通量测序,并对其全基因组进行遗传进化分析。结果表明,CV-B5辽宁分离株与国内流行株的全基因组核苷酸序列同源性为78.5%~97%,氨基酸序列同源性为75.3%~96.7%。基于全基因组的进化分析将CV-B5流行株分为A~D四个基因型,辽宁分离株属于D基因型。通过重组分析发现其在P3区的3D区段发生重组。首次在辽宁地区手足口病患儿中分离出CV-B5,辽宁省分离株(LN2018-23-21/CHN/2018)可能为重组株。
关键词
手足口病
柯萨奇病毒b组5型
(CV-
b
5
)
全基因
组
遗传进化分析
Keywords
hand-foot-and-mouth disease(HFMD)
coxsackievirus
b
5
(CV-
b
5
)
whole genome
genetic evolutionary analysis
分类号
Q939.93 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
柯萨奇病毒B组5型VP1蛋白的外源表达及多克隆抗体的制备
被引量：
1
2
作者
金维维
陈伟
庞冉
张同禹
井申荣
机构
昆明理工大学医学院
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第4期463-466,共4页
基金
病毒学国家重点实验室开放研究基金资助项目(2018KF006)
昆明理工大学2018年学生课外学术科技创新基金课题(2018BA311)
文摘
目的:原核表达柯萨奇病毒B组5型的VP1蛋白,并制备其多克隆抗体及检测。方法:提取在Vero细胞中柯萨奇病毒B组5型的RNA,通过逆转录PCR(RT-PCR)扩增获取VP1基因序列,构建原核表达载体,大量诱导表达重组VP1蛋白。用His Trap HP亲和层析柱纯化重组蛋白,以纯化的目的蛋白为抗原,免疫雄性SD大鼠获得VP1蛋白多克隆抗体血清,ELISA测定该抗体的效价,微量中和实验测定抗体的中和活性,Western blot检测抗体的特异性,免疫组化检测抗体对组织中抗原的识别。结果:成功构建了VP1-pET-28a重组载体,并且在BL21细胞中成功诱导表达,亲和层析柱纯化后蛋白纯度大于90%。ELISA测得抗体的效价为1∶128 000,微量中和实验显示抗体没有中和活性,Western blot分析显示抗体能与CVA16和EV71交叉反应,免疫组化实验表明抗体能够识别组织中的CVB5抗原。结论:本研究成功制备了CVB5 VP1蛋白的高效价的多克隆抗体,为CVB5病毒疫苗和病毒诊断的研发提供了有效的工具。
关键词
柯萨奇病毒b组5型
VP1蛋白
多克隆抗体
免疫
组
化
Keywords
Coxsackievirus
b
5
VP1 protein
Polyclonal anti
b
ody
Immunohistochemistry
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
柯萨奇病毒B组5型非结构蛋白抑制NF-κB信号通路的作用机制研究
3
作者
张佳玉
滕培英
吕维民
杨帆
陈伟
机构
昆明理工大学医学院
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2023年第6期1403-1410,共8页
基金
国家自然科学基金(81860357)
云南省万人计划“青年拔尖人才”专项(YNWR-QNBJ-2019-178)
云南省科技厅(2019FB108)资助项目。
文摘
目的 柯萨奇病毒B组5型(CVB5)是手足口病的重要病原体之一,可导致发热、皮疹或疱疹等临床症状,重症者出现神经系统疾病,甚至死亡。天然免疫应答是机体抗病毒入侵的第一道防线,其中核因子κB (NF-κB)是宿主天然免疫反应中的重要蛋白质,然而关于CVB5感染后调控NF-κB介导信号通路的研究尚鲜有报道。方法 本研究通过检测启动子活性、促炎因子水平以及通路中关键蛋白表达等,阐明CVB5对NF-κB信号通路的调控作用机制。结果 CVB5感染可抑制促炎因子表达和p65的磷酸化。CVB5非结构蛋白(NSP)可抑制促炎因子表达以及重要蛋白p65和IκBα的磷酸化。经STRING11.1数据库预测表明,CVB5 3CD蛋白与宿主多聚胞嘧啶结合蛋白1 (PCBP1)具有相互作用,且PCBP1可促进IκBα和p65的磷酸化,抑制病毒复制。结论 CVB5 NSP可负调控NF-κB信号通路,且与3CD相互作用的PCBP1蛋白可通过调控NF-κB通路抑制CVB5复制。本研究探索病毒与宿主天然免疫应答的调控作用,从而为研制抗CVB5感染的药物提供作用靶点。
关键词
柯萨奇病毒b组5型
(CV
b
5
)
核因子κ
b
(NF-κ
b
)
非结构蛋白(NSP)
3CD
多聚胞嘧啶结合蛋白(PC
b
P1)
Keywords
coxsackie virus group
b
type
5
(CV
b
5
)
nuclear factor-κ
b
(NF-κ
b
)
non-structural protein(NSP)
3CD
polycytosine
b
inding protein(PC
b
P1)
分类号
R373.2 [医药卫生—病原生物学]
R183.4 [医药卫生—流行病学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
辽宁省首株柯萨奇病毒B组5型全基因组序列分析
雷露
于伟
张倩
王博
孙英伟
毛玲玲
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2023
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
柯萨奇病毒B组5型VP1蛋白的外源表达及多克隆抗体的制备
金维维
陈伟
庞冉
张同禹
井申荣
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
柯萨奇病毒B组5型非结构蛋白抑制NF-κB信号通路的作用机制研究
张佳玉
滕培英
吕维民
杨帆
陈伟
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
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